JPH1156390A - Monitoring device for enzyme reaction - Google Patents
Monitoring device for enzyme reactionInfo
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- JPH1156390A JPH1156390A JP23787397A JP23787397A JPH1156390A JP H1156390 A JPH1156390 A JP H1156390A JP 23787397 A JP23787397 A JP 23787397A JP 23787397 A JP23787397 A JP 23787397A JP H1156390 A JPH1156390 A JP H1156390A
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Abstract
Description
【0001】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、酵素反応のモニタ
リング装置に関し、特に攪拌子を有するリアクター中で
酵素反応を行なわせて、リアルタイムで酵素反応をモニ
タするように構成したものである。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to an apparatus for monitoring an enzyme reaction, and more particularly to an apparatus for monitoring an enzyme reaction in real time by causing an enzyme reaction in a reactor having a stirrer.
【0002】特に、酵素反応をリアルタイムでモニタす
ることによって、試料液(好ましくは医療用人工透析
液)中の酵素前駆体物質もしくは酵素反応活性化物質を
リアルタイムでモニタする装置に関するものである。In particular, the present invention relates to an apparatus for monitoring an enzyme precursor substance or an enzyme reaction activating substance in a sample solution (preferably a medical artificial dialysate) in real time by monitoring an enzyme reaction in real time.
【0003】[0003]
【従来の技術】エンドトキシン(Et)は、グラム陰性菌
の細胞壁外膜の主たる構成成分の一つでリピドAと呼ば
れる脂質と多糖鎖が2-ケト-3-デオキシオクトン酸を介
してつながったリポ多糖である。ごく微量でも高い発熱
性を示すほか、さまざまな生物活性を有し、敗血症やシ
ョックを引き起こす臨床上有害な物質である。2. Description of the Related Art Endotoxin (Et) is one of the main components of the outer membrane of the cell wall of Gram-negative bacteria, and a lipid called lipid A and a polysaccharide chain are linked via 2-keto-3-deoxyoctonic acid. It is a lipopolysaccharide. In addition to showing high pyrogenicity even in very small amounts, it has various biological activities and is a clinically harmful substance that causes sepsis and shock.
【0004】(1→3)-β-D-グルカンは、酵母、キノコ、
カビなどの真菌類、高等植物および藻類の細胞壁成分と
して、自然界に広く分布し、マクロファージからの各種
サイトカインの産生誘導等を含む網内系の活性化、補体
系の活性化、抗腫瘍作用等の多彩な生物活性を示す。E
tとは異なり、発熱作用はないが、アレルギー性呼吸器
疾患の原因物質の一つとして挙げられているほか、Et
の作用を増強するという報告もある。[0004] (1 → 3) -β-D-glucan is obtained from yeast, mushroom,
As a cell wall component of fungi such as molds, higher plants and algae, it is widely distributed in nature and activates the reticulum system, including the induction of production of various cytokines from macrophages, the activation of the complement system, the antitumor effect, etc. Shows various biological activities. E
Unlike t, it has no fever effect, but is listed as one of the causative substances of allergic respiratory diseases.
It has also been reported that it enhances the action of.
【0005】ペプチドグリカンは、細菌類の細胞壁の構
成成分でN-アセチルまたはN-グリコリルムラミン酸とD-
アミノ酸を含む糖ペプチドのポリマーで、発熱性、Et
の活性増大作用、アジュバンド活性等、多くの生物活性
を有している。[0005] Peptidoglycan is a component of the bacterial cell wall and is composed of N-acetyl or N-glycolylmuramic acid and D-
Glycopeptide polymer containing amino acids, exothermic, Et
Has many biological activities such as an activity increasing effect and an adjuvant activity.
【0006】以上により、これらの物質の量を医薬品や
血中等において調べることが重要であり、古くからさま
ざまな測定法が考案されている。As described above, it is important to examine the amounts of these substances in medicines, blood, and the like, and various measuring methods have been devised since ancient times.
【0007】特に、Etは、透析液中に混入すると微量
でも患者が発熱し、場合によっては重篤な敗血性ショッ
クを引き起こすことがある。これを防ぐために透析液の
調製過程でカットフィルタを使って除去をしているが、
汚れた空気に触れるだけでもEtが容易に混入してしま
うので、使用に際してはEt濃度を連続監視する必要が
ある。[0007] In particular, when Et is mixed in a dialysate, even a small amount of the patient generates heat, and in some cases, severe septic shock may be caused. To prevent this, we use a cut filter during the preparation of the dialysis fluid,
Et is easily mixed in just by touching the dirty air. Therefore, it is necessary to continuously monitor the Et concentration at the time of use.
【0008】従来より図3に示すような、Et特異的発
色合成基質法リムルス試薬「エンドスペシー」(生化学
工業、商品名)を用いた透析液中のEt濃度モニタリン
グ装置が知られている。Conventionally, as shown in FIG. 3, there has been known an apparatus for monitoring the Et concentration in a dialysate using the Limulus reagent "Endospecy" (trade name, manufactured by Seikagaku Corporation) using the Et-specific chromogenic synthetic substrate method.
【0009】図3は、従来のEtのモニタリング装置の
構成を示すブロック図である。従来のEtのモニタリン
グ装置は、人工透析器から透析中の試料液をサンプリン
グして反応部に送る送液部31と、パラニトロアニリン
(pNA)等の色素と結合した合成基質およびリムルス試
薬(LAL)溶液を分離して反応部に注射器等を用いて手
動で注入するための試薬注入部32と、所定の温度でリム
ルス反応を行なうための恒温水槽を備える反応部33と、
検出器を有する検出部34と、廃液を行なう廃液部35とか
ら構成されている。FIG. 3 is a block diagram showing a configuration of a conventional Et monitoring apparatus. A conventional Et monitoring apparatus includes a liquid sending section 31 which samples a dialyzed sample solution from an artificial dialyzer and sends it to a reaction section, a synthetic substrate combined with a dye such as paranitroaniline (pNA), and a Limulus reagent (LAL). A) a reagent injecting section 32 for manually injecting the solution into the reaction section using a syringe or the like, and a reaction section 33 having a constant temperature water tank for performing a Limulus reaction at a predetermined temperature,
It comprises a detecting section 34 having a detector and a waste liquid section 35 for discharging waste liquid.
【0010】次に従来のEtのモニタリング装置の動作
を説明する。送液部31は、透析中の試料液をサンプリン
グして例えばテフロンチューブを経由して試料液を反応
部33に送る。試薬注入部32は、合成基質およびLAL溶
液を互いに分離して反応部33に注入する。試薬として合
成基質とLAL溶液を混合して反応部33に注入する方法
もあるが、LAL溶液は通常不安定で時間が経過すると
その特性が劣化するのでその取り扱いには細心の注意が
必要である。Next, the operation of the conventional Et monitoring apparatus will be described. The liquid sending unit 31 samples the sample solution being dialyzed and sends the sample solution to the reaction unit 33 via, for example, a Teflon tube. The reagent injecting section 32 separates the synthetic substrate and the LAL solution from each other and injects them into the reaction section 33. There is also a method of mixing a synthetic substrate and a LAL solution as reagents and injecting the mixture into the reaction section 33. However, since the LAL solution is usually unstable and its properties deteriorate over time, careful handling is required. .
【0011】反応部33においては、送液部31からの試料
液と、合成基質およびLAL溶液とからなる試薬が摂氏
35度〜45度の恒温水槽内でコイル状に巻かれている上記
テフロンチューブ内を通過中に反応する。十分な反応に
は、45分以上の時間を要し、45分以上経過したら検出部
34にて、液の吸光度を検出する検出器により検出され
る。検出が終了したら廃液部35にて液が廃液される。L
AL溶液とEtが触れると連鎖的な酵素活性化反応がお
こり、基質が分解され、最終的に色素が生成する。生成
した色素の吸光度からEt濃度が算出される。In the reaction section 33, a reagent consisting of the sample liquid from the liquid sending section 31 and the synthetic substrate and the LAL solution is used.
It reacts while passing through the Teflon tube wound in a coil shape in a constant temperature water bath of 35 to 45 degrees. A sufficient reaction requires at least 45 minutes, and after 45 minutes, the detection unit
At 34, it is detected by a detector that detects the absorbance of the liquid. When the detection is completed, the liquid is discharged in the waste liquid section 35. L
When the AL solution comes into contact with Et, a chain enzyme activation reaction occurs, decomposing the substrate, and finally producing a dye. The Et concentration is calculated from the absorbance of the generated dye.
【0012】[0012]
【発明が解決しようとする課題】しかし、水槽の中のコ
イル状に巻かれた10mという長いテフロンチューブ内を
通過させて反応させるため、結果が得られるまでに長時
間を要し、かつ、各溶液の注入を手動で行なっていたの
で手数を要し、リアルタイムのモニタリングには不適当
であった。However, since the reaction is performed by passing through a long 10-meter Teflon tube wound in a coil in a water tank, it takes a long time to obtain a result, and Since the solution was manually injected, it was troublesome and was not suitable for real-time monitoring.
【0013】そこで本発明は、攪拌子を有するリアクタ
ー中で酵素反応を行なわせてリアルタイムで酵素反応を
モニタするようにした酵素反応のモニタリング装置を提
供することを目的とするものである。Accordingly, an object of the present invention is to provide an enzyme reaction monitoring device in which an enzyme reaction is performed in a reactor having a stirrer to monitor the enzyme reaction in real time.
【0014】[0014]
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明の酵素反応のモニタリング装置は、攪拌子を
有するリアクター中に、試料液と、酵素基質液および/
または酵素反応源液とを順次供給する切換器を具備し、
上記リアクター中で酵素反応を行なわせてリアルタイム
で酵素基質の変化をモニタするように構成したものであ
る。In order to achieve the above object, an apparatus for monitoring an enzyme reaction according to the present invention comprises a sample solution, an enzyme substrate solution and / or an enzyme substrate solution in a reactor having a stirrer.
Or a switch for sequentially supplying the enzyme reaction source solution,
It is configured to monitor the change of the enzyme substrate in real time by performing an enzyme reaction in the reactor.
【0015】特に、酵素基質の変化(酵素反応)をリア
ルタイムでモニタすることによって、試料液(好ましく
は医療用人工透析液)中の酵素前駆体物質もしくは酵素
反応活性化物質をリアルタイムでモニタするように構成
したものである。In particular, by monitoring the change of the enzyme substrate (enzyme reaction) in real time, the enzyme precursor substance or the enzyme reaction activating substance in the sample solution (preferably medical artificial dialysate) is monitored in real time. It is what was constituted.
【0016】[0016]
【発明の実施の形態】図1は、本発明の酵素反応のモニ
タリング装置の構成を示す原理図である。本発明のモニ
タリング装置は、人工透析器から透析中の試料液をサン
プリングして試薬等導入部12に送る送液部11と、ブラン
ク液(リムルス反応性物質、フェノール酸化酵素前駆体
カスケード反応性物質等を含まない注射用水)、標準
液、上記試料液、酵素基質、酵素前駆体溶液及び消毒液
をそれぞれ分離して反応部13に導入するための切換器を
含む試薬等導入部12と、攪拌子を有するリアクターを備
え、所定の温度範囲にて試薬等を含む溶液を反応させる
ための反応部13と、検出器を有する検出部14と、ポンプ
等により廃液処理を行なう廃液部15とから構成されてい
る。DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS FIG. 1 is a principle diagram showing a configuration of an apparatus for monitoring an enzyme reaction according to the present invention. The monitoring device according to the present invention includes a liquid sending unit 11 which samples a sample solution being dialyzed from an artificial dialyzer and sends the sample solution to a reagent etc. introduction unit 12 and a blank solution (a limulus reactive substance, a phenol oxidase precursor cascade reactive substance). Water for injection), a standard solution, the sample solution, the enzyme substrate, the enzyme precursor solution and the disinfecting solution. A reaction unit 13 for reacting a solution containing a reagent or the like in a predetermined temperature range, a detection unit 14 having a detector, and a waste liquid unit 15 for performing waste liquid treatment by a pump or the like. Have been.
【0017】試薬等導入部12は、切換器を備えており、
それぞれの入力弁には、洗浄液を兼ねるブランク液、
標準液、人工透析器からサンプリングされた透析中
の試料液、酵素基質、酵素前駆体溶液(酵素反応源
液として用いる。例えば、リムルス試薬溶液、好ましく
は特開平8-334514に開示されるような長時間安定性を保
持するリムルス試薬溶液、昆虫(例えば、カイコ)の体
液から調製されたフェノール酸化酵素前駆体カスケード
因子含有試薬(例えば、SLP試薬溶液)等及び洗浄
液を兼ねる消毒液が導入されるともに、各液はその出力
弁から反応部13に適宜導出される。切替器は、手動式で
も自動式でもよいが、自動式であることが好ましい。The reagent introduction section 12 has a switching device,
Each input valve has a blank liquid that also serves as a cleaning liquid,
Standard solution, sample solution during dialysis sampled from an artificial dialyzer, enzyme substrate, enzyme precursor solution (used as an enzyme reaction source solution. For example, a Limulus reagent solution, preferably as disclosed in JP-A-8-334514) A limulus reagent solution that retains stability for a long time, a phenol oxidase precursor cascade factor-containing reagent (for example, an SLP reagent solution) prepared from a body fluid of an insect (for example, silkworm), and a disinfectant that also serves as a washing solution are introduced. In both cases, each liquid is appropriately led out of the output valve to the reaction section 13. The switch may be a manual type or an automatic type, but is preferably an automatic type.
【0018】なお、実際にモニタリング装置を構成する
際には、試薬等導入部12および攪拌子を有するリアクタ
ーを備える反応部13を複数セット(例えば、3セット)
用意し、ブランク液、標準液、上記試料液、酵
素基質、酵素前駆体溶液及び消毒液はそれぞれ分岐
されて複数セット用意された上記試薬等導入部12に時間
的にずれた状態で導入されるようになっている。また、
複数セット用意された反応部13からは、十分反応が進ん
だ状態の反応部13から得られる反応液を検出部14へ導入
すれば良いので、検出器を備えた検出部14は上記複数セ
ット用意された試薬等導入部12および反応部13に対して
1つ備えれば十分である。When actually configuring the monitoring apparatus, a plurality of sets (for example, three sets) of a reaction section 13 having a reagent introduction section 12 and a reactor having a stirrer are provided.
The prepared blank solution, the standard solution, the sample solution, the enzyme substrate, the enzyme precursor solution and the disinfecting solution are each branched and introduced into the plurality of the prepared reagent etc. introduction sections 12 in a time-shifted state. It has become. Also,
From the reaction unit 13 prepared in a plurality of sets, the reaction solution obtained from the reaction unit 13 in which the reaction has sufficiently proceeded may be introduced into the detection unit 14, so that the detection unit 14 having a detector is prepared in the plurality of sets. It is sufficient to provide one for the introduced reagent and the like introduction section 12 and reaction section 13.
【0019】また、酵素前駆体溶液として、(A)エン
ドトキシンに特異的に反応するリムルス試薬溶液、(B)
(1→3)-β-D-グルカンに特異的に反応するリムルス試薬
溶液または昆虫(例えばカイコ)体液から調製されたフェ
ノール酸化酵素前駆体カスケード因子含有試薬溶液、
(C)ペプチドグリカンに特異的に反応する、昆虫(例え
ばカイコ)体液から調製されたフェノール酸化酵素前駆
体含有試薬溶液を適宜用いることによって、エンドトキ
シン、(1→3)-β-D-グルカンまたはペプチドグリカン等
の微生物由来の酵素反応活性化物質を特異的にモニター
することができる。こうすると、汚染の原因が速やかに
特定できるので、汚染に対して迅速に対処することがで
きる。As the enzyme precursor solution, (A) a Limulus reagent solution specifically reacting with endotoxin, (B)
Limulus reagent solution specifically reacting with (1 → 3) -β-D-glucan or a phenol oxidase precursor cascade factor-containing reagent solution prepared from an insect (e.g., silkworm) body fluid,
(C) endotoxin, (1 → 3) -β-D-glucan or peptidoglycan by appropriately using a phenol oxidase precursor-containing reagent solution prepared from an insect (eg silkworm) body fluid that specifically reacts with peptidoglycan The enzyme reaction activating substance derived from a microorganism such as the above can be specifically monitored. In this way, the cause of the contamination can be quickly identified, and the contamination can be dealt with promptly.
【0020】なお、検出部14に発音機および/または発
光機等を接続して、微生物由来の酵素反応活性化物質を
検出した時点で自動的に発音および/または発光せしめ
ることによって、監視者に異常を知らせることもでき
る。また、検出部14と人工透析器のポンプとを接続し
て、微生物由来の酵素反応活性化物質を検出した時点で
人工透析器のポンプを自動停止させ、人工透析を中断さ
せることもできる。It is to be noted that a sounding device and / or a light emitting device or the like is connected to the detecting section 14 so as to automatically sound and / or emit light when a microorganism-derived enzyme reaction activating substance is detected. Anomalies can also be reported. Alternatively, the detection unit 14 and the pump of the artificial dialysis machine may be connected to each other to automatically stop the pump of the artificial dialysis machine when the microorganism-derived enzyme reaction activating substance is detected, thereby interrupting the artificial dialysis.
【0021】なお、上述の(A)、(B)および(C)の酵素前
駆体溶液を独立にセットし、独立に反応させることによ
って、エンドトキシン、(1→3)-β-D-グルカンおよびペ
プチドグリカンを同時にモニターすることもできる。The endotoxin, (1 → 3) -β-D-glucan and (1 → 3) -β-D-glucan are prepared by independently setting the enzyme precursor solutions (A), (B) and (C) described above and reacting them independently. Peptidoglycan can be monitored simultaneously.
【0022】図2には、攪拌子を有するリアクターの概
略構成を示す横断面図が示されており、リアクターに
は、スターラー(加温型)21と、攪拌子(スターラーバ
ー)22と、容器23とが備えられている。スターラー(加
温型)21およびスターラーバー22を電磁誘導により作動
させると、容器23内に貯溜する溶液を速やかに攪拌する
ことができる。FIG. 2 is a cross-sectional view showing a schematic configuration of a reactor having a stirrer. The reactor includes a stirrer (heating type) 21, a stirrer (stirrer bar) 22, a vessel 23 are provided. When the stirrer (warming type) 21 and the stirrer bar 22 are operated by electromagnetic induction, the solution stored in the container 23 can be rapidly stirred.
【0023】なお、図2は、あくまで攪拌子を有するリ
アクターの概略構成を示したものに過ぎず、スターラー
バーによって容器内の溶液が攪拌されるという作用を有
する限りにおいて、容器23の形状、試薬等導入部12から
の溶液の導入位置、検出器14への溶液の導出位置、スタ
ーラーバー22の形状、スターラーバー22の個数、スター
ラーバーの位置およびスターラー(加温型)21の形状等
は限定されるものではなく、当業者が適宜設定できる事
項である。FIG. 2 shows only a schematic structure of a reactor having a stirrer, and the shape of the container 23 and the reagent are not limited as long as the solution in the container is stirred by the stirrer bar. The position where the solution is introduced from the isointroduction section 12, the position where the solution is led out to the detector 14, the shape of the stirrer bar 22, the number of stirrer bars 22, the position of the stirrer bar and the shape of the stirrer (heated type) 21 are limited. It is a matter that can be appropriately set by those skilled in the art.
【0024】なお、容器23には、合計で100〜500μLの
溶液等が貯溜されるが、その量を見込んで電磁誘導動作
を発生させるエネルギーを供給して攪拌させる。A total of 100 to 500 μL of a solution or the like is stored in the container 23, and in consideration of the amount, energy for generating an electromagnetic induction operation is supplied and agitated.
【0025】なお、攪拌の際に発生する熱によって容器
23内に貯溜する溶液の温度が上昇するのを防ぐため、攪
拌子を有するリアクターにサーモスタットを設けて、容
器23内に貯溜する溶液の温度を正確に一定に保持させる
こともできる。The heat generated at the time of stirring causes
In order to prevent the temperature of the solution stored in the container 23 from rising, a thermostat may be provided in a reactor having a stirrer to keep the temperature of the solution stored in the container 23 accurately and constant.
【0026】次に、本発明の酵素反応のモニタリング装
置の動作を反応手順を追って説明する。1検体ごとに以
下の反応手順を繰り返す。Next, the operation of the enzymatic reaction monitoring apparatus of the present invention will be described according to the reaction procedure. The following reaction procedure is repeated for each sample.
【0027】(a)ブランク液の測定 消毒液(洗浄液)の注入→ブランク液の注入による洗
浄→ブランク液の注入→酵素基質の注入→酵素前
駆体溶液の注入→反応液を検出部14に液相誘導して測
定、(A) Measurement of blank solution Injection of disinfectant solution (washing solution) → washing by injection of blank solution → injection of blank solution → injection of enzyme substrate → injection of enzyme precursor solution → Phase induction and measurement,
【0028】(b)標準液の測定 ブランク液の注入による洗浄→標準液の注入→酵
素基質の注入→酵素前駆体溶液の注入→反応液を検出
部14に液相誘導して測定、(B) Measurement of standard solution Washing by injecting blank solution → injection of standard solution → injection of enzyme substrate → injection of enzyme precursor solution → induction of the reaction solution to detector 14 for measurement
【0029】(c)試料液の測定 ブランク液の注入による洗浄→試料液の注入→酵
素基質の注入→酵素前駆体溶液の注入→反応液を検出
部14に液相誘導して測定→消毒液(洗浄液)の注入、(C) Measurement of sample solution Washing by injecting blank solution → Injection of sample solution → Injection of enzyme substrate → Injection of enzyme precursor solution → Induction of reaction solution to detector 14 for measurement → Disinfection solution (Washing liquid) injection,
【0030】この動作を以降も繰り返すことにより、至
適反応時間を短くできるのでリアルタイムのモニタリン
グを効率的に行なうことが可能となる。By repeating this operation thereafter, the optimum reaction time can be shortened, so that real-time monitoring can be performed efficiently.
【0031】以上で説明した実施の形態においては、モ
ニタリングを行なう酵素反応としてリムルス反応および
フェノール酸化酵素前駆体カスケード反応を例にあげて
説明したが、この発明のモニタリング装置は、血液凝固
・線溶系の酵素反応や補体系の酵素反応にも適用するこ
とができる。In the above-described embodiment, the Limulus reaction and the phenol oxidase precursor cascade reaction have been described as examples of the enzymatic reactions for monitoring. However, the monitoring apparatus of the present invention employs a blood coagulation / fibrinolysis system. And the enzyme reaction of the complement system.
【0032】[0032]
【発明の効果】上記実施の形態の説明から明らかなよう
に本発明は、攪拌子を有するリアクター中で酵素反応を
行なわせてモニタするようにしたので、反応時間を大幅
に短縮することが可能となり、また、高感度、高精度か
つ効率的にモニタリングを行なうことが可能である。As is clear from the description of the above embodiment, the present invention is designed to perform the enzymatic reaction in a reactor having a stirrer and to monitor the reaction, so that the reaction time can be greatly reduced. In addition, it is possible to perform monitoring with high sensitivity, high accuracy, and efficiently.
【0033】例えば、本発明は、人工透析液中のエンド
トキシン量をリアルタイム、高感度、高精度かつ効率的
にモニタすることができるので、医療現場において問題
となっている人工透析液中へのエンドトキシンの混入を
素早く検知することができ、エンドトキシン混入に対し
て迅速かつ的確な処置を行なうことができるので、極め
て有用性が高い。For example, according to the present invention, the amount of endotoxin in an artificial dialysate can be monitored in real time, with high sensitivity, high accuracy, and efficiently. Can be quickly detected and endotoxin contamination can be promptly and accurately treated, and therefore, is extremely useful.
【図1】本発明の酵素反応のモニタリング装置の構成を
示す原理図、FIG. 1 is a principle diagram showing a configuration of an enzyme reaction monitoring device of the present invention,
【図2】本発明の構成要素であるリアクターの概略構成
を示す横断面図、FIG. 2 is a cross-sectional view showing a schematic configuration of a reactor that is a component of the present invention;
【図3】従来のリムルス試薬を用いたエンドトキシンの
モニタリング装置の構成を示す図である。FIG. 3 is a diagram showing a configuration of a conventional endotoxin monitoring device using a Limulus reagent.
11、31 送液部 12 試薬等導入部 13 反応部(リアクター) 14、34 検出部 15、35 廃液部 21 スターラー(加温型) 22 スターラーバー 23 容器 32 試薬注入部 33 反応部(恒温水槽) 11, 31 Liquid sending part 12 Reagent introduction part 13 Reaction part (reactor) 14, 34 Detection part 15, 35 Waste liquid part 21 Stirrer (heated type) 22 Stirrer bar 23 Container 32 Reagent injecting part 33 Reaction part (constant temperature water tank)
Claims (6)
と、酵素基質および/または酵素反応源液とを順次供給
する切換器を具備し、上記リアクター中で酵素反応を行
なわせてリアルタイムで酵素基質の変化をモニタするよ
うに構成したことを特徴とする酵素反応のモニタリング
装置。1. A reactor having a stirrer is provided with a switch for sequentially supplying a sample solution and an enzyme substrate and / or an enzyme reaction source solution, and the enzyme reaction is carried out in the reactor so that the enzyme is reacted in real time. An apparatus for monitoring an enzyme reaction, wherein the apparatus is configured to monitor a change in a substrate.
から調製されたリムルス試薬を用いて、酵素基質の変化
をモニタすることによって、試料液中のリムルス反応性
物質をモニタすることを特徴とする請求項1に記載のモ
ニタリング装置。2. A limulus-reactive substance in a sample solution is monitored by monitoring a change in an enzyme substrate using a limulus reagent prepared from a horseshoe crab blood cell extract as an enzyme reaction source. Item 2. The monitoring device according to Item 1.
たは(1→3)-β-D-グルカンであることを特徴とする請求
項2に記載のモニタリング装置。3. The monitoring device according to claim 2, wherein the limulus-reactive substance is endotoxin or (1 → 3) -β-D-glucan.
れたフェノール酸化酵素前駆体カスケード因子含有試薬
を用いて、酵素基質の変化をモニタすることによって、
試料液中のフェノール酸化酵素前駆体カスケード反応性
物質をモニタすることを特徴とする請求項1に記載のモ
ニタリング装置。4. A method for monitoring a change in an enzyme substrate by using a phenol oxidase precursor cascade factor-containing reagent prepared from an insect body fluid as an enzyme reaction source,
The monitoring device according to claim 1, wherein the monitoring device monitors the phenol oxidase precursor cascade reactive substance in the sample solution.
応性物質がペプチドグリカンまたは(1→3)-β-D-グルカ
ンであることを特徴とする請求項4に記載のモニタリン
グ装置。5. The monitoring device according to claim 4, wherein the phenol oxidase precursor cascade reactive substance is peptidoglycan or (1 → 3) -β-D-glucan.
のいずれか1項に記載のモニタリング装置。6. The sample solution according to claim 1, wherein the sample solution is an artificial dialysate.
The monitoring device according to claim 1.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP23787397A JPH1156390A (en) | 1997-08-20 | 1997-08-20 | Monitoring device for enzyme reaction |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP23787397A JPH1156390A (en) | 1997-08-20 | 1997-08-20 | Monitoring device for enzyme reaction |
Publications (1)
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JPH1156390A true JPH1156390A (en) | 1999-03-02 |
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JP (1) | JPH1156390A (en) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008038329A1 (en) * | 2006-09-25 | 2008-04-03 | Kowa Kabushiki Kaisha | Apparatus for gelation measurement and sample cell |
WO2008139544A1 (en) * | 2007-05-01 | 2008-11-20 | Kowa Company, Ltd. | Apparatus for measuring gelation and sample cell |
-
1997
- 1997-08-20 JP JP23787397A patent/JPH1156390A/en active Pending
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR101285643B1 (en) * | 2006-09-25 | 2013-07-12 | 토루 오바타 | Apparatus for gelation measurement and sample cell |
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