JPH11511130A - ＣｏＡ−非依存性トランスアシラーゼの阻害およびアポトーシス - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、細胞増殖の阻害または低下を必要とするヒトまたは哺乳動物にて、細胞増殖を阻害または低下させるためのＣoＡ-ＩＴの阻害剤の使用であって、有効量のＣoＡ-非依存性トランスアシラーゼ（ＣoＡ-ＩＴ）阻害剤またはその医薬上許容される塩の使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 ＣｏＡ−非依存性トランスアシラーゼの阻害およびアポトーシス 発明の分野 本発明は動物における細胞増殖および癌の新規な治療法の知見に関する。 発明の背景 細胞増殖および癌に対するアルキル−リゾ−リン脂質の効果について膨大な量 の文献がある。他のアルキル−リゾ−リン脂質と共に、１-Ｏ-オクタデシル-２- Ｏ-メチル-ｓｎ-グリセロ-３-ホスホコリン（ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃）が白血病、癌 腫および肉腫細胞系の細胞増殖を減少させることが示されている(Ａndreesenら 、Ｂlood54：519−523(1979)；Ｍodolellら、Ｃan.Ｒes.39：4681−4686(1979) ；Ｂerdelら、1981；Ｈoffimanら、Ｂlood63：545−552(1984)；Ｍorris-Ｎatsc hkeら、Ｊ.Ｍed.Ｃhem.29：2114−2117(1986)；Ｂrachwitzら、Ｌipids ２２：8 97−903(1987)；Ｌuら、Ｃan.Ｒes.52：2806−2812(1992))。この増殖に対する 効果は、これらの化合物が、正常な骨髄細胞、好中球および皮膚線維芽細胞など の、非癌細胞の増殖を遮断しないことで選択的であることは明らかである(Ｈoff manら、Ｂlood63:545−552(1984)；Ｖedonckら、Ｃan.Ｒes.50：4020−4025(199 0)；Ｌangenら、Ａnticancer Ｒes.12：2109−2112(1992))。最近の研究は、Ｅ Ｔ-18-Ｏ-ＣＨ₃が特定の細胞型にてアポトーシスを誘発すると示唆している(Ｍo llinedoら、Ｂiochem．Ｂiophys．Ｒes．Ｃommun．192：603−609(1993))。しか し、アポトーシスに至る生化学的工程は明らかにされていない。 インビトロにおける癌細胞増殖の遮断に加えて、ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃および他の アルキル−リソ−リン脂質を用いての動物の治療が腫瘍の大きさを減少させると する証拠がある。Ｈilgardら、Ｅur.Ｊ.Ｃancer Ｃlin.Ｏncol.24：1457−1461( 1988)；Ｂergerら、Ｌipids 22：935−942(1987)；およびＳcherfら、Ｌipids22 ：927−929（1987）を参照のこと。加えて、ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃は、白血病および 癌種に罹患している患者の治療にて効能を示す(Ｂerdelら、Ｃancer 50：2011− 2015 (1982)；Ａndreesenら、Ｊ.Ｎatl.Ｃan.Ｉnst.70：623−627(1983)；Ａndreesen 、Ｐrog.Ｂiochem.Ｐharmacol.22：118−131(1988))。 これらの抗増殖性アルキル−リゾ−リン脂質の作用機構は理解できないままで ある。ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃の細胞性代謝はほとんど観察されないため、ＥＴ-18-Ｏ -ＣＨ₃による作用は親化合物それ自体によるものであると考えられる(Ｗilcoxら 、Ｌipids22：800−807(1987)；Ｌuら、Ｂiochem.Ｃell Ｂiol.71：122−126(19 93))。血小板活性化因子（ＰＡＦ）に構造上類似するが、血小板活性化因子のレ セプターの拮抗剤はアルキル−リゾ−リン脂質の抗増殖作用を遮断しないため、 これらの化合物が該レセプターを介して作用するかは明らかでない(Ｗorkmanら 、Ｂiochem.Ｐharmacol.41:319−322(1991))。アルキル−リゾ−リン脂質の抗増 殖作用について可能性のある他の機構が記載されている：イノシトール−リン酸 形成の減少を伴うホスファチジルイノシトール−ホスホリパーゼＣの阻害（ＩＣ₅₀ 〜４０μＭ）(Ｐowisら、Ｃancer and Ｍetastasis Ｒev．13：91−103(1994) )；タンパク質キナーゼＣおよびＮa、Ｋ−ＡＴＰaseなどの膜結合酵素の変化(Ｚ hengら、Ｃan.Ｒes.50：3025−3031(1990)；Ｈoffmanら、Ａcta ＬipidsＬipid Ｍetab.1127：74−80(1992))；アシル−ＣoＡアシルトランスフェラーゼ活性の 減少（ＩＣ₅₀〜８０μＭ）(Ｈerrmannら、Ｊ.Ｂiol.Ｃhem.17：7742−7747(1986 ))；およびリン脂質代謝の低下(Ｍodolellら、Ｃancer Ｒes.39：4681−4686(19 79)；Ｈerrmann,Ｄ.Ｊ.、Ｎatl．Ｃan．Ｉnst．75：423−430(1985))。しかし、 これらの予想機構はアルキル−リゾ−リン脂質のすべての作用を説明するのには 十分ではなく、前記した細胞事象を阻害するのに必要なアルキル−リゾ−リン脂 質の濃度はその抗増殖作用で要する濃度（３−１０μＭ）よりも高い。加えて、 これらの酵素を阻害する他の化合物は、その物が抗増殖剤ではない(Ｄanielら、 Ｌipids 22：851−855(1987))。最後に、リン脂質代謝の低下と増殖の遮断に対 する種々の細胞系の感受性の間に相関関係はないという報告がある(Ｌuら、Ｃan ．Ｒes．52：2813−2817(1992)；Ｌuら、Ｃan．Ｒes．52：2806−2812(1992))。 補酵素Ａ−非依存性トランスアシラーゼ（ＣoＡ-ＩＴ）はアラキドン酸が炎症 細胞 のリン脂質分子種の間を移動するのに関与する酵素である。ＣoＡ-IＴは１−ア シル−２−アラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（１ −アシル−２−アラキドノイル−ＧＰＣ）などの１−アシル含有のリン脂質のsn −２位からアラキドン酸を除去する。ついで、ＣoＡ-ＩＴは、そのアラキドン酸 を１−アルキル-２−リゾ−ＧＰＣおよび１−アルケニル−２−リソ−ｓｎ−グ リセロ−３−ホスホエタノールアミンなどの適当なリソ−リン脂質アクセプター に移す(Ｓugiuraら、Ｊ．Ｂiol．Ｃhem．262：1199−1205(1987)；Ｋramerおよ びＤeykin、Ｂiol.Ｃhem.258：13806−13811(1983)；Ｃhiltonら、Ｊ.Ｂiol.Ｃh em.258：7268−7271(1983))。この活性は炭素数２０の脂肪アシル基について選 択的であり、炎症細胞がその放出前にアラキドン酸を特異的リン脂質プールに移 動させる機構である(ＷinklerおよびＣhilton、Ｄrug Ｎews Ｐerspec.6：133− 138(1993)；Ｓuyderら、Ｊ.Ｌipid Ｍediat.10：25−31(1994))。 動物にて用いるための非毒性薬理学的および毒物学的特性を有する化学療法剤 を見出す必要性がある。これらの化合物は疾患細胞の細胞増殖を遮断し、白血病 などの癌および乾癬などの他の増殖性疾患および症状を治療する可能性を提供す るものである。 発明の要約 本発明は、酵素ＣoＡ-ＩＴを阻害することで、哺乳動物における細胞増殖を減 少、阻害または低下させ、哺乳動物、好ましくはヒトにてアポトーシスを誘発す る方法に関する。このＣoＡ-ＩＴの阻害により誘発される作用は構造上異なる化 合物により得ることができる。したがって、本発明は、細胞増殖の治療を必要と する、哺乳動物、好ましくはヒトにて、そのヒトに有効量のＣoＡ-ＩＴ阻害剤の 化合物またはその医薬上許容される塩を投与することによる、細胞増殖を治療す るためのＣoＡ-ＩＴ阻害剤を使用するものである。細胞増殖に付随する、本明細 書での治療に好ましい病状は、乾癬、慢性関節リウマチまたはアテローム性動脈 硬化症である。 本発明の別の態様は、癌細胞増殖の治療を必要とする哺乳動物、好ましくはヒ トにて該増殖を治療する方法であって、有効量のＣoＡ−非依存性トランスアシ ラーゼ（ＣoＡ-ＩＴ）阻害剤またはその医薬上許容される塩を該哺乳動物に投与 することからなる方法にある；ただし、その阻害剤は。１−Ｏ−オクタデシル− ２−Ｏ−メチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃）また はアルキルリゾリン脂質類似体以外の化合物である。また、ＣoＡ-ＩＴ阻害剤は 有効量のＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃またはアルキルリゾリン脂質類似体と共同して投与し てもよい。癌細胞増殖に伴う、本明細書での治療に好ましい病状は、白血病であ る。 本発明の別の態様は、アポトーシスの誘発を必要とする哺乳動物にてそれを誘 発する方法であって、有効量のＣoＡ−非依存性トランスアシラーゼ（ＣoＡ-Ｉ Ｔ）阻害剤またはその医薬上許容される塩をヒトまたは哺乳動物に投与すること からなる方法にある；ただし、その阻害剤は。１−Ｏ−オクタデシル−２−Ｏ− メチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃）またはアルキ ルリゾリン脂質類似体以外の化合物である。また、ＣoＡ-ＩＴ阻害剤は有効量の ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃またはアルキルリゾリン脂質類似体と共同して投与してもよい 。 図面の簡単な説明 図１はＣoＡ-ＩＴ活性に対するＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃の効果を示す。Ｕ937細胞か らのミクロソームを指示濃度のＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃と一緒に１０分間インキュベー トし、ついでＣoＡ-ＩＴ活性を本明細書の方法欄の記載に従って測定した。デー タは３回測定した平均±ＳＤであり、３回の試験の代表値である。 図２はＣoＡ-ＩＴ活性についてのＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃阻害の速度を示す。Ｕ937 ミクロソームを本明細書の方法欄に記載されているように指示濃度のＥＴ-18-Ｏ -ＣＨ₃および１−アルキル−２−リゾ−ＧＰＣと一緒にインキュベートした。そ の反応にて得られた生成物の量を測定した。１／速度対１／［生成物］の二重逆 数プロットを示す。 図３はＨＬ-60細胞増殖に対するＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃(Ａ)、７−（３，４，５− トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾール−１−イル）ヘプ タン−リン酸ジエチル（Ｂ、化合物III）および２−［２−［３−（４−クロロ −３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド］−４−トリフルオロメチルフェ ノキシ］−４，５−ジクロロベンゼンスルホン酸（Ｃ、化合物Ｉ）の作用を示す 。 ＨＬ-60細胞を時間０で指示濃度の化合物で処理し、２４時間および４８時間後 にトリパンブルー色素排除により生存細胞数を測定した。 図４はＨＬ-60細胞におけるＤＮＡ合成に対するＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃の作用を示 す。ＨＬ-60細胞を種々の濃度の化合物またはビヒクルで処理する。細胞を収穫 する２４時間前に、細胞に［³Ｈ］チミジンのパルスを照射した。指示時点で、 細胞を収穫し、洗浄し、溶菌させ、ＤＮＡに取り込まれた［³Ｈ］の量を、本明 細書の方法欄の記載に従って測定した。結果は３回測定した平均±ＳＤであり、 ３回の試験の代表値である。 図５はＨＬ−６０細胞におけるＤＮＡフラグメント化に対するＥＴ-18-Ｏ-Ｃ Ｈ₃、２−［２−［３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレ イド］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］−４，５−ジクロロベンゼンスル ホン酸（化合物Ｉ）および７−（３，４，５−トリフェニル−２−オキソ−２， ３−ジヒドロ−イミダゾール−１−イル）ヘプタン−リン酸ジエチル（化合物II I）の作用を示す。ＨＬ−６０細胞を指示濃度の化合物で処理し、２４時間後に 方法欄の記載に従ってＤＮＡフラグメント化を測定する。対照はビヒクル処理で あり、矢印は内部標準断片を示す。 図６はＨＬ-60細胞のホスファチジルエタノールアミン亜種におけるアラキド ン酸の含量に対するＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃、２−［２−［３−（４−クロロ−３−ト リフルオロメチルフェニル）ウレイド］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］ −４，５−ジクロロベンゼンスルホン酸（化合物Ｉ）および７−（３，４，５− トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾール−１−イル）ヘプ タン−リン酸ジエチル（化合物III）の作用を示す。ＨＬ-60細胞をＥＴ-18-Ｏ- ＣＨ₃(２５μＭ)、化合物Ｉ(５０μＭ)、化合物III（２５μＭ）またはビヒクル で４８時間処理し、ＡＡ含量を方法欄の記載に従って測定した。 図７は阻害剤と一緒に２０時間インキュベーションした後の慢性骨髄性白血病 細胞による［³Ｈ］チミジンの取込みを示す。 発明の詳細な説明 ＣoＡ-ＩＴが「ガン」細胞増殖の調節、特に、アポトーシスにおいて重大な事 象 を表していることが判明した。したがって、ＣoＡ-ＩＴの抑制は、増殖性疾患お よびその処置に対する重要な治療効果を有する。 １−［³Ｈ］アルキル−２−リゾ−ＧＰＣのアシル化による生成物［³Ｈ］１− アルキル−２−アラキドノイル−ＧＰＣの生成を測定することにより、ＥＴ−１ ８−Ｏ−ＣＨ₃のＵ９３７ミクロソームにおけるＣｏＡ−ＩＴ活性に対する影響 を試験した。その結果（図１）は、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃が、０．５μＭのＩ Ｃ₅₀を有するＣｏＡ−ＩＴ活性の強力な抑制剤であり、３μＭで完全抑制が観察 されたことを示している。ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃とＣｏＡ−ＩＴとの相互反応 をさらに調査するため、動力学的分析実験を行った。それらのデータ（図２）は 、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃が、競合競争モデルに最も適合する様式でＣｏＡ−Ｉ Ｔ活性を抑制することを示した。この物質の見掛けのＫ_mは、０．０１３＋０． ００５μＭで、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃のＫ_isは１．９±０．９μＭであった。 これらの結果は、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃がＣｏＡ−ＩＴ抑制剤で、特異的な、 予測できる様式でＣｏＡ−ＩＴと相互反応し、ＣｏＡ−ＩＴの抑制は、ミクロソ ーム膜上での洗剤作用のように非特異的効果ではなかったことを示している。 上記のごとく、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃は、ガン細胞の増殖を阻止することが 証明された。したがって、本発明の、もう１つ別の態様は、ＥＴ−１８−Ｏ−Ｃ Ｈ₃が、酵素ＣｏＡ−ＩＴの強力な抑制剤であり、それ故、治療の必要な哺乳動 物におけるＣｏＡ−ＩＴ介在疾患または疾病の処置に有用であるという知見であ る。この方法は、そのような哺乳動物に、ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤として、１−Ｏ− オクタデシル−２−Ｏ−メチル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＥＴ−１ ８−Ｏ−ＣＨ₃）の有効量を投与することからなり、ただし、疾患または疾病は 、細胞増殖の抑制またはアポトーシス以外のものである。 ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃がＣｏＡ−ＩＴの強力な抑制剤であるとの知見は、他 の構造的に異なるＣｏＡ−ＩＴ抑制剤がＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃に匹敵する様式 で増殖に影響するかという疑問を生じさせる。図３に、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃ と、２つの別々の群のＣｏＡ−ＩＴ抑制剤である化合物のＨＬ−６０細胞の増殖 に対する影響を示す。ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃は、用量および時間依存的に培養 物におけるＨＬ−６０細胞の下図を減少させた（図３）。また、２つの他の構造 の異なるＣｏＡ−ＩＴ抑制剤は、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃に匹敵する様式で細胞 数の増加を阻止した(図３)。３つの抑制剤全てが、２４〜４８時間の間に観察さ れる細胞生存率の減少を起こさせた。 ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤の抗増殖作用を確認するため、新しいＤＮＡの合成を［³ Ｈ］チミジン取り込みによってモニターした。図４に示す結果は、ＥＴ−１８− Ｏ−ＣＨ₃がＤＮＡ合成において時間および濃度依存性の減少を起こしたことを 示している。同様な結果は、２−［２−［３−（４−クロロ−３−トリフルオロ メチルフェニル）ウレイド］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］−４，５− ジクロロベンゼンスルホン酸および７−（３，４，５−トリフェニル−２−オキ ソ−２，３−ジヒドロイミダゾール−１−イル）ヘプタンホスホン酸ジエチルエ ステルでも見られた。同時に、これらのデータは、酵素ＣｏＡ−ＩＴを阻止する 能力を共有することに加え、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃、２−［２−［３−（４− クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド］−４−トリフルオロメチ ルフェノキシ］−４，５−ジクロロベンゼンスルホン酸および７−（３，４，５ −トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロイミダゾール−１−イル）ヘプ タンホスホン酸ジエチルエステルは、全て、ＨＬ−６０細胞の増殖および生存率 を減じることを示している。 細胞数の減少に示された主なメカニズムは、プログラムされた細胞死またはア ポトーシスの誘発である(Ｂergamaschi et al.,Ｈaematologica 79:86-93(1994) )。アポトーシスの誘発は、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃での処理後に見られるＨＬ− ６０細胞数の抑制に多いに関係していることが提唱されている(Ｍollinedo et a l.,Ｂiochem．Ｂiophys/Res．Commun．192: 603-609(1993))。他のＣｏＡ−ＩＴ 抑制剤もアポトーシスを起こさせ得るか、否かを決定するため、つぎの群の実験 を行った。これらの研究では、アポトーシスは、ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤での処理前 後のヌクレオソーム間のＤＮＡフラグメンテーション・パターンを検査すること により決定された。ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃(６μＭ)、７−（３，４，５−トリ フェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロイミダゾール−１−イル）ヘプタンホ スホン酸ジエチルエステル（５０μＭ）および２−［２−［３−（４−クロロ− ３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド］−４−トリフルオロメチルフェノ キシ］−４，５−ジクロロベンゼンスルホン酸（５０μＭ）で２４時間処理した ＨＬ−６０細胞は、全て、ＤＮＡ「はしご(ladder)」フラグメンテーションのパ ターンを示した(図５)。ＨＬ−６０細胞におけるＤＮＡはしご形成は、ＣｏＡ− ＩＴ抑制剤の用量に依存し、３時間以内に起こり、ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤での処理 後、２４時間で最大となった。 ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤での好中球の処理は、アラキドン酸の可動化およびエイコ サノイドの形成を間接的に阻止することができる。他の、より直接的なアラキド ン酸代謝の抑制剤がＨＬ−６０細胞でアポトーシスを誘発するか否かの１群の実 験を行った。２つのホスホリパーゼＡ₂イソタイプならびに５−リポキシゲナー ゼおよびシクロオキシゲナーゼの抑制剤を試験して、アポトーシスを、ＤＮＡ「 はしご」の存在で決定した。これらの実験の結果を表１に示す。表１において、 ＨＬ−６０細胞を、誘発濃度の化合物で２４時間処理し、本明細書の「方法」の セクションの記載に従ってＤＮＡフラグメンテーションを測定した。また、ジリ ュウトン(Ｚileuton)(Ｃarter et al.,Ｊ.Ｐharmacol.Ｅxp.Ｔher.256:929-937( 1991))；インドメタシン(Ｓhen,Ｔ.Ｙ,Ｋ.Ｄ.ＲainfordおよびＭ.Ｒ.Ｃ.Ｐath編 ，抗炎症および抗リウマチ薬，149-159頁，ＣＲＣ Ｐress,Ｉnc.,Ｂoca Ｒaton, ＦＬ(1985))；ＡＡ−ＣＦ₃−ケトン(Ｓtreet et al.,Ｂiochemistry 32:5935.59 40(1993))参照。 これらの実験から２つの重要な知見が誘導された。それらは、１）アポトーシ スが、５−リポキシゲナーゼ、シクロオキシゲナーゼ、１４ｋＤａホスホリパー ゼＡ₂または８５ｋＤａホスホリパーゼＡ₂の抑制剤によって起こらないこと、お よび２）広範に分岐構造を有するＣｏＡ−ＩＴ抑制剤（ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃ 、２−［２−［３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド ］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］−４，５−ジクロロベンゼンスルホン 酸、７−（３，４，５−トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロイミダゾ ール−１−イル）ヘプタンホスホン酸ジエチルエステルおよび７−（１，４，５ −トリフェニルイミダゾール−２ −イルオキシ）ヘプタンホスホン酸ジエチルエステル）がアポトーシスを誘発す ることである。 本発明の１つの態様は、ＣｏＡ−ＩＴの抑制がアポトーシスにおいて１つの役 割を有し、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃、２−［２−［３−（４−クロロ−３−トリ フルオロメチルフェニル）ウレイド］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］− ４，５−ジクロロベンゼンスルホン酸および７−（３，４，５−トリフェニル− ２−オキソ−２，３−ジヒドロイミダゾール−１−イル）ヘプタンホスホン酸ジ エチルエステルのようなＣｏＡ−ＩＴ抑制剤が、全て、ＨＬ−６０細胞のアポト ーシスを起こしたことを証明することである。２−［２−［３−（４−クロロ− ３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド］−４−トリフルオロメチルフェノ キシ］−４，５−ジクロロベンゼンスルホン酸および７−（３，４，５−トリフ ェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロイミダゾール−１−イル）ヘプタンホス ホン酸ジエチルエステルの、ＣｏＡ−ＩＴを抑制する能力以外の何らかの化学的 構造がアポトーシスを起こさせないことを確かめるため、近い構造を有するアナ ログ（ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤活性は有しない）を試験した。後者の化合物（化合物 ＩＩ、ＶおよびＶＩ；２−［２−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニ ル］ウレイド−４−トリフルオロメチルフェノキシ］−５−（１，１−ジメチル プロピル）ベンゼンスルホンアミド；５−（３，４，５−トリフェニル−２−オ キソ−２，３−ジヒドロイミダゾール−１−イル）吉草酸；および６−（１，４ ，５−トリフェニルイミダゾール−１−イルオキシ）ヘキサン酸エチル）は、ア ポトーシスを誘発せず、ＣｏＡ−ＩＴにより調節されるキイ過程の１つが、細胞 アポトーシスであることが示唆された。 アラキドネート改造自体がアポトーシスに影響しているようである。この推定 を確認するため、本発明者らは、ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤処理の２４および４８時間 後のホスファチジルエタノールアミンおよび１−エーテル結合ホスファチジルコ リンにおけるアラキドネートの量を測定した。酵素ＣｏＡ−ＩＴは、アラキドネ ートのこれらのリン脂質への移動を統合する(Ｃhilton et al.，Ｂiochemistry 34 :5403-5410(1995))。ホスファチジルエタノールアミンからアラキドネートの 時 間依存的ロスがあり、ＨＬ−６０細胞におけるアポトーシスと相関した(図６)。 ホスファチジルエタノールアミンからのロスに加えて、ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤もア ラキドネートの１−エーテル結合ホスファチジルコリンへの取り込みを阻止した 。 長い間、多くの「ガン」細胞が高レベルの１−エーテル結合リン脂質、特に、 １−アルケニルホスファチジルエタノールアミンを含有していると認識されてい る(Ｓnyder et al.，Ｃan．Ｒes．28：972-978(1968);およびＳnyder et al.， Ｃan.Ｒes.29：251-257(1969))。さらに、Ｃhabot et al.(Ｃancer Ｒes.49：44 41-4445(1989))は、ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃に対する感受性が白血病セルライン のエーテルリピド含量と相関することを証明した。これらの研究をヒト白血病患 者へ拡大することにより、彼らは、治療に対する応答と、白血病細胞における１ −エーテル結合リン脂質・プールのサイズとの間に相関があることを示した(Ｃha bot et al.,Ｃan．Ｒes．50：7174-7178(1990))。ＣｏＡ−ＩＴの阻害がＡＡの １−エーテル結合リン脂質・プールへの「充填(loading)」を予防している可能 性がある。ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤が１−エーテル結合ホスファチジルエタノールア ミンおよびホスファチジルコリンにおけるアラキドネート含量を劇的に減少させ ることを示す図６の証拠は、この主張を強力に指示している。 つぎの図は、これらの点を説明するものである。アラキドネートの１−エーテ ル結合リン脂質への取り込みの正常な経路は、アラキドネート−ＣｏＡへ変換さ れ、ついで１−アシル−２−アラキドネート−ホスホコリンのような１−アシル 結合リン脂質へ取り込まれるアラキドン酸に関するものである。ついで、酵素Ｃ ｏＡ−ＩＴは、アラキドネート部分を１−アシル結合リン脂質から１−エーテル 結合リン脂質へ移動させる。これらの１−エーテル結合リン脂質は、ガン細胞に おいて高い。ＣｏＡ−ＩＴ抑制剤は、アラキドネートの１−エーテル結合リン脂 質への移動を阻止し、ガン細胞から、それらが生存するためのキイ成分を奪い取 る。このように、ＣｏＡ−ＩＴの抑制は、ガン細胞にアポトーシスを誘発し、そ れらの生育および増殖に劇的に影響する。 総じて、このデータは、ここに記載する、ＣｏＡ−ＩＴ活性の抑制がアポトー シスの誘発における細胞の生育と増殖の減少をもたらし、増殖性、ガン性疾病の 治療に有用であるという知見を支持している。したがって、本発明は、増殖性、 ガン性疾病の治療のためのＣｏＡ−ＩＴ抑制方法を提供するものである。 ここで用いる「アルキルリゾリン脂質」(ＡＬＰ)、「アルキルリゾリン脂質・ アナログ」および「エーテル結合脂質およびそのアナログ」なる用語は、当業者 によく知られた用語であり、とくに定義を付加する必要はない。一般に、これら の用語は、グリセロール骨格のｓｎ−１位にアルキル鎖を有するエーテル結合リ ン脂質である化合物を包含する。これらの化合物は、１−Ｏ−アルキル−２−Ｏ −メチル−ｒａｃ−グリセロ−３−ホスホコリンの誘導体、１−Ｏ−ヘキサデシ ル−２−アセタール−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＡＦ）の誘導体、 エステル−２−リゾリン脂質（２−ＰＬＣ）の誘導体またはリソホスファチジル コリン（２−ＬＰＣ）の誘導体であってよい。エーテル−リゾリン脂質はまた、 アルキルリソＰＣまたはＡＬＰとも称され、アルキルホスホコリンはまたＡＰＣ とも称され、ヘキサデシルホスホコリンはＨＰＣと称される。この用語に包含さ れる適当な化合物には、限定するものではないが、Ｓchick et al.，Ｌipids，2 2(11)904-910(1987)、Ｍorris-Ｎatschke et al.，Ｊ．Ｍed．Ｃhem.，29(10)21 14-2117(1986)、Ｇoto et al.,Ａnticancer Ｒesearch，14: 357-362(1994)、Ｌ angen et al.，Ａnticancer Ｒesearch12：2109-2112(1992)、Ｖolger et al.， Ｌipids，28(6)511-516(1993)、Ｗorkman et al.，Ｂiochem.Ｐharm.，41(2)319 -322(1991)、Ｋohler et al.，Ｉnflammation，17(3)，245-261(1993)、Ｂrachw iz et al.，Ｌipids，22(11)897-903(1987)、Ｂerdel，Ｗ.，Ｌipids，22(11997 0-973(1987)、Ｄanhauser et al.，Ｌipids，22(11)911-915(1987)、Ｄanhauser -Ｒiedl et al.，Ｊ．Ｌipid Ｍetabolism，2，271-280(1990)、Ｌonmeyer et a l.，Ｂiochem．Ｐharm.，45(1)77086(1993)、Ｒies，et al.，Ｃhemistry and Ｐhysics of Ｌipids，61225-234(1992)に記載の化合物ならびにＧuivisdalsky et al.，Ｊ.Ｍed.Ｃhem.，33(9),2614-2621(1990)およびＰignol et al.，Ａnti -Ｃancer Ｄrugs，3，599-608(1992)に記載される硫黄および窒素結合を有する 誘導体が包含され、これらの記載を引用して、ここに組み込む。 本明細書の合成化学のセクションで挙げた化合物に加え、本発明に有用なＣｏ Ａ−ＩＴ抑制剤は、米国特許出願番号０８／２５２７１７、０８／２５２７１２ 、０８／２５２７１４、０８／２５２７１５、０８／２５２７１６、０８／２５ ２７１８、０８／２５２８５１、０８／１０２８７７、０８／２５４５６４およ びその発行されたＰＣＴ出願ＷＯ／９３／１６６７４に見られ、それらの記載も 引用して、ここに組み込む。 ａ：２−［２−［３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイ ド］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］−４，５−ジクロロベンゼンスルホ ン酸 ｂ：２−［２−［３，５−ビス（トリフルオロメチルフェニル）ウレイド］−４ −トリフルオロメチルフェノキシ］−５−（１，１−ジメチルプロピル）ベンゼ ンスルホンアミド ｃ：７−（３，４，５−トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロイミダゾ ール−１−イル）ヘプタンホスホン酸ジエチル ｄ：７−（１，４，５−トリフェニルイミダゾール−２−イルオキシ）ヘプタン ホスホン酸ジエチル ｅ：５−（３，４，５−トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロイミダゾ ール−１−イル）吉草酸 ｆ：６−（１，４，５−トリフェニルイミダゾール−１−イルオキシ）ヘキサン 酸エチル ｇ：２−［２−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニルスルホンアミド ール］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］安息香酸 材料および方法 材料 １−［³Ｈ］アルキル−２−リソ−ＧＰＣ（３０−６０Ｃｉ／ミリモル）をＮe w Ｅngland Ｎeuclear(Ｂoston、ＭＡ)より購入した。通常の実験化合物をＳigm a Ｃhemical Ｃo.（Ｓt.Ｌouis、ＭＯ）より購入した。１−アルキル−２−リソ −ＧＰＣをＢiomol（Ｐlymouth Ｍeeting、ＰＡ）より購入した。シリカゲルＧ プレートはＡnaltech Ｉnc.（Ｎewark、ＤＥ）からのものであった。特に脂肪酸 不含ウシ血清アルブミンをＣalbiochem（ＳanDiego、ＣＡ）より入手した。 化合物 ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃をＢiomolより入手し、ＣＨＣl₃中の１００ｍＭストックと して製造し、ついで細胞懸濁液に添加する前にＲＰＭＩ-1640（１：>１６０００ ）に希釈した。以下の化合物を本明細書に記載の合成操作に従って製造した：本 明細書の記載の、７−（３，４，５−トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒ ドロイミダゾール−１−イル）ヘプタンホスホン酸ジエチル；７−（１，４，５ −トリフェニルイミダゾール−２−イルオキシ）ヘプタンホスホン酸ジエチル、 ５−（３，４，５−トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロイミダゾール −１−イル）吉草酸、６−（１，４，５−トリフェニルイミダゾール−１−イル オキシ）ヘキサン酸エチル、２−［２−［３，５−ビス（トリフルオロメチルフ ェニ ル）ウレイド］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］−５−（１，１−ジメチ ルプロピル）ベンゼンスルホンアミド、２−［２−［３，５−ビス（トリフルオ ロメチル）フェニルスルホンアミドール］−４−トリフルオロメチルフェノキシ ］安息香酸ナトリウム塩およびジロイトン(Ｚileuton)。２−［２−［３−（４ −クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド］−４−トリフルオロメ チルフェノキシ］−４，５−ジクロロベンゼンスルホン酸をＢader Ｃhemical Ｃo.より入手した。インドメタシンをＳigma Ｃhemicalsより入手した。アラキ ドニルートリフルオロメチルケトンをＣayman Ｃhemicals（Ａnn Ａrbo、ＭＩ） より購入した。これらの化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中のストッ ク（５−１００ｍＭ）として製造、ＤＭＳＯ中に希釈し、ＤＭＳＯ濃度を用いて ０.１−１％の範囲にある最終濃度を得た。ＴＮＦ（Ｓigma）を蒸留水中のスト ックとして製造し、希釈して所望の濃度を得た。 細胞の調製 ＨＬ-60細胞をＡmerican Ｔype Ｃulture Ｃollectionより入手し、１０％胎 児ウシ血清を補足したＲＰＭＩ-1640中、３７℃、５％ＣＯ₂で増殖させた。細胞 を０.０３〜０.０８ｘ１０⁶細胞／ｍｌでＴ-フラスコに接種し、０.５〜０.６ｘ １０⁶細胞／ｍｌで実験に用いた。薬物を照射する時点での細胞濃度が重要なパ ラメーターであることがわかった（Ｆujiwaraら、1994）。 増殖およびアポトーシス 細胞の機能状態を３種類の方法で測定した。第１の細胞生存力を図３に示され るように細胞のトリパンブルー色素排除能により評価した。 第２のより感受的かつ定量的な方法は、合成の指標として、［³Ｈ］チミジン の新たに形成されたＤＮＡへの取り込みを用いてＤＮＡ合成を測定することであ った。これらのアッセイにおいて、ＨＬ-60細胞を種々の濃度の化合物またはビ ヒクルで処理し、異なる期間（１〜３日）、細胞培養中に保持した。ついで、細 胞に［³Ｈ］チミジン（１μＣi）のパルスを与え、24時間後に培養物より取り出 し、ＰＢＳで２回洗浄し、０.２Ｎ ＮaＯＨで30分間処理し、つづいて１５％ト リクロロ酢酸を２時間にわたって添加した。各細胞の全試料を、真空下でＧＦ／ Ｃ Ｗatmanガラスマイクロフィルターを介して濾過し、５％トリクロロ酢酸で３回 洗浄した。[³Ｈ]チミジンのフィルターに結合したＤＮＡへの取り込み量を液体 シンチレーション分光器を用いて定量した；本明細書の図４を参照のこと。 ＤＮＡフラグメント化を測定する最後の方法で、細胞死の量が測定されるだけ でなく、機構に対する理解が得られる。細胞が壊死ではなく、プログラムされた 細胞死またはアポトーシスを受けると、細胞性ＤＮＡはオリゴーヌクレオソーム フラグメントに分解され、それはゲル上で見分けることができる(Ｋerrら、Ｃan cer 73：2013−2026(1994))。細胞を異なる濃度の化合物またはビヒクルで種々 の時間（3−24時間）処理した。洗浄した細胞を２００μＬの冷滅菌性デタージ ェント緩衝液（１０ｍＭ Ｔris-ＨＣl、pＨ７.５、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０.２％Ｔ ritonＸ-100）に再び懸濁させることで該細胞を溶解させ、氷上で30分間インキ ュベーションした。細胞性タンパク質およびＲＮＡを７５μｇ／ｍＬ ＲＮＡse と３７℃で１時間、ついで２００μｇ／ｍＬプロテイナーゼＫおよび０.５％Ｓ ＤＳ（最終的）と３７℃で１時間インキュベーションすることにより酵素的に分 解させた。ＤＮＡの内標準を細胞溶解の間に加え、その回収率を細胞性ＤＮＡフ ラグメントの抽出の効率を確認するのに用いた。試料を等容量の冷緩衝液飽和フ ェノールで２回、フェノール／クロロホルム／イソアミルアルコール（２５：２ ４：１、ｖ／v）で１回、およびクロロホルムで１回洗浄した。ＮaＣl（３００ ｍＭ最終的）および冷エタノールを加え、その溶液を攪拌し、一夜放置した。エ タノールを除去し、その試料およびＤＮＡb p標体（Ｓigma）を臭化エチジウム を有するＴＢＥ緩衝液（４５ｍＭ Ｔris．pＨ８.０、４５ｍＭホウ酸、１ｍＭＥ ＤＴＡ）の１％アガロースゲル上に流した。ＤＮＡをＵＶ光（ＵＶＰ Ｇel Ｄoc umentationシステム）の下に可視化し、ＤＮＡフラグメントの大きさを分子量標 体と比較する；本明細書の図５を参照のこと。 ＣoＡ-ＩＴ活性 ＣoＡ-ＩＴ活性を、以前に記載されているように(Ｗinklerら、Ｂiophys.Ａct a Ｌipids Ｍetab.1081：339-346(1991))、１００μｌの全容量にて測定した。 １０００００ｘｇ、６０分の遠心分離に付した後のミクロソーム（５−２０μｇ タンパク質）(Ｗinklerら、前掲)を１ｍＭ ＥＤＴＡを含むＰＢＳ中に所望のタ ンパク質濃度にまで希釈した。０.２５ｍｇ／ｍｌの脂肪酸に乏しいウシ血清ア ルブミンを含むアッセイ緩衝液の１−［³Ｈ］アルキル−２−リソ−ＧＰＣ（０. １μＣi／試験管）および１μＭの最終濃度の冷１−アルキル−２−リソ−ＧＰ Ｃを添加することにより反応を開始させた。反応を３７℃で１０分間行った。反 応系を止め、脂質を抽出し(ＢhghおよびＤyer、Ｃan.Ｊ.Ｂiochem.Ｐhysiol.37:9 11−917(1959))、クロロホルム／メタノール／酢酸／水（５０：２５：８：４、 ｖ／ｖ）のＴＬＣでクロロホルム抽出物のアリコート由来の物質を分離し、放射 線走査（Ｂioscan）により可視化した。ついで、生成物の１−［³Ｈ］アルキル −２−アシル−ＧＰＣを削ぎ落とし、液体シンチレーション分光器により定量し た；本明細書の図１を参照のこと。 ＣoＡ-ＩＴ反応の動力学におけるＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃の作用を試験した。種々の 濃度のＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃（０−１５μＭ）を可変濃度の基質１−アルキル−２− リソ−ＧＰＣ（０.０１−３μＭ）と混合した。ＣoＡ-ＩＴ活性を有するＵ９３ ７ミクロソームを加え、反応を３７℃で３分間進行させた。形成された生成物の 量を前記のように測定し、いずれの濃度でも添加した基質の５％以下であった。 Ｃleland,Ｗ.、Ｍethods Ｅnzymol.63：103-138（1979）の方法を用いて、結果 分析を行った；本明細書の図２を参照のこと。 リン脂質種、亜種の分離およびアラキドン酸含量の測定 ＨＬ-60細胞を化合物またはビヒクルに暴露し、48時間インキュベーションし た。その時点で、抽出によりインキュベーションを終え(ＢlighおよびＤyer、Ｃa n.Ｊ.Ｂiochem.Ｐhysiol.37：911.917(1959))、有機相中のリン脂質種を分離し 、順相ＨＰＬＣ（Ｃhilton、Ｍethods Ｅnzymol.187：157-166(1990)）で収集し た。100ｍＭ Ｔris ＨＣl緩衝液（pＨ７.４）中の２０−８０単位のバシラス・ セレウス（Ｂacillus cereus）ホスホリパーゼＣ（Ｓigma Ｔype XIII）を２.５ −６時間添加することによりリン脂質をジラジルグリセロール（diradylglycero l）に変え、ついで無水酢酸およびピリジンと一緒にインキュベーションするこ とにより１，２−ジラジル−３−アセチルグリセロールに変えた(Ｃhilton、Ｍe thods Ｅnzymol. 187：157-166(1990))。そのリン脂質亜種をベンゼン／ヘキサン／エチルエーテ ル（５０：４５：４、ｖ／ｖ）のＴＬＣで分離した。アラキドン酸のリン脂質亜 種中含量を、７５％エタノール中２Ｍ水酸化カリウムを用いて行った塩基加水分 解（３０分、６０℃）後に測定した。等量の水を加えることで反応を止め、その 反応混合物をＨＣlでｐＨ３に調整した。遊離脂肪酸をエチルエーテルで抽出し 、溶媒を窒素下で除去し、遊離脂肪酸をペンタフルオロベンジルエステルに変え 、ＧＣ／ＭＳにより分析した(Ｈubbardら、Ｐrostaglandins 22：349−355(1986 ))。オクタ重水素アラキドン酸を内標準として用い、既知量のアラキドン酸を用 いて得られた標準曲線を用いてモル量を測定した；本明細書の図６を参照のこと 。 タンパク質分析 Ｂradford.Ｍ.、Ａnal.Ｂiochem.72：248−254(1976)の方法を用い、Ｂio-Ｒad （Ｈercules、ＣＡ）より購入した試薬を用いてタンパク質濃度を測定した。 ヒト白血病細胞系 問題として重要なことは、ヒト白血病細胞系ＨＬ-60のＣoＡ-ＩＴの阻害が実 際のヒト白血病細胞に移行していることがわかるかどうかである。本発明は、種 々の構造上関連しない化合物によるＣoＡ-ＩＴの阻害が、ヒト患者より直接取り 出した癌細胞にてアポトーシス応答を誘起しうることを明らかにしている。 方法： 骨髄性白血病の患者より血液を得た。これらの患者からの白血病細胞をＣoＡ- ＩＴの阻害剤で処理し、[³Ｈ]チミジンの新たに合成されたＤＮＡへの取り込み をモニターすることにより増殖を測定した。図７から明らかなように、慢性骨髄 性白血病細胞による［³Ｈ］チミジンの取り込みが、標記した阻害剤と20時間一 緒にインキュベーションした後に示されている。ヒト患者からの白血球細胞を、 指示濃度のビヒクル(ＤＭＳＯ)、７−（３，４，５−トリフェニル−２−オキソ −２，３−ジヒドロ−イミダゾール−１−イル）ヘプタン−リン酸ジエチル（化 合物III）または２−［２−［３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェ ニル）ウレイド］−４−トリフルオロメチルフェノキシ］−４，５−ジクロロベ ンゼンスルホン酸（化合物Ｉ）とインキュベーションした。20時間処理した後、 ［³Ｈ］チミジンのＤＮＡへの取り込みを本明細書の方法欄の記載に従って測定 した。 この増殖の阻害機構を定義するために、これら細胞の形態学試験を電子顕微鏡 を用いて行った。ヒト白血病細胞をビヒクル（ＤＭＳＯ）または７−（３，４， ５−トリフェニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾール−１−イル） ヘプタン−リン酸ジエチル（化合物III）（２５μＭ）で24時間処理させて、ヒ ト白血病細胞の電子顕微鏡分析を行った。この処理の後、標準法に従って電子顕 微鏡分析用に細胞を調製した。ビヒクル（ＤＭＳＯ）で処理した細胞は、細胞プ ロセス、代謝顆粒および多小裂片の非凝縮細胞核で表されるような活性な生存細 胞である。反対に、ＣoＡ-ＩＴ阻害剤で処理した細胞は、細胞核の凝縮、細胞プ ロセスの低下およびアポトーシス体の出現を含め、アポトーシスの典型的な形態 学的変化を示す。図７ないし１１を、以下にてさらに詳細に記載する： さらに、アポトーシス工程がＣoＡ-ＩＴ阻害剤での処理により開始することを 確認するために、アポトーシスの特徴である、ＤＮＡフラグメントの存在につい て細胞を試験した。この試験はＤＮＡの鎖破壊体をターミナルトランスフェラー ゼを用いてフルオレセインｄＴＵＰで標識することでなされた。ＤＮＡフラグメ ント化の蛍光分析を、ビヒクル（ＤＭＳＯ）または７−（３，４，５−トリフェ ニル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾール−１−イル）ヘプタン−リ ン酸ジエチル（化合物III）（２５μＭ）で24時間処理したヒト白血病細胞に対 して行った。Ｂoehringer Ｍannheimからのキット（カタログ番号１６８４７９ ５）を製造者の指示に従って用い、細胞をＤＮＡ鎖破壊体について染色した。ビ ヒクル（ＤＭＳＯ）で処理した細胞はほとんどないし全く蛍光染色作用がなされ ず、それに対してＣoＡ-ＩＴ阻害剤で処理した細胞はヒト癌細胞のＣoＡ-ＩＴ阻 害がこれら細胞にてアポトーシスを誘発したことを示す著しい染色作用があった 。 治療の方法 治療的に用いる場合、本発明の化合物は、一般に、意図する投与経路および標 準的な製薬慣習に基づいて選択された医薬担体と混合することにより得られる標 準的医薬組成物にて投与される。例えば、該医薬組成物は澱粉またはラクトース のような賦形剤を含有する錠剤形、または単独もしくは賦形剤と混合したカプセ ル、卵形物（ovule）またはロゼンジにて、あるいはフレーバー剤または着色剤 を含有するエリキシルまたは懸濁液の形態にて経口投与することができる。その 医薬組成物は、例えば、静脈内、筋肉内または皮下的に非経口注射することがで きる。非経口投与の場合、その組成物を、他の物質、例えば、血液と等張な溶液 を形成するのに十分な塩またはグルコースを含有していてもよい、滅菌水溶液の 形態で用いるのが最適である。選択される投与形ならびに有効量は、とりわけ、 治療される病状に応じて変化するであろう。投与方法および投与量の選択は当業 者の範囲内にある。 経口投与した場合に活性である本発明の化合物、特に本明細書に記載の化合物 またはその医薬上許容される塩は、液体、例えばシロップ、懸濁液またはエマル ジョン、錠剤、カプセルおよびロゼンジとして処方できる。 液体処方は、一般に、本発明の化合物または医薬上許容される塩の、適当な液 体担体（複数でも可）、例えば、エタノール、グリセリン、非水性溶媒、例えば ポリエチレングリコール、油、または沈殿防止剤、保存剤、フレーバー剤もしく は着色剤を含む水中懸濁液または溶液からなるであろう。 錠剤形の組成物は、固体処方を製造するのに慣用的に用いられているいずれか 適当な医薬担体（複数でも可）を用いて製造できる。そのような担体として、ス テアリン酸マグネシウム、澱粉、ラクトース、シュークロースおよびセルロース が挙げられる。 錠剤形の組成物は慣用的カプセル化操作を用いて製造することができる。例え ば、活性成分を含有するペレットを、標準担体を用いて製造し、ついでハードゼ ラチンカプセルに充填することができる；別法として、いずれか適当な医薬担体 （複数でも可）、例えば、水性ガム、セルロース、ケイ酸塩または油を用いて分 散液または懸濁液を調製し、ついでその分散液または懸濁液をソフトゼラチンカ プセルに充填することもできる。好ましくは、組成物は錠剤またはカプセルなど の単位投与形である。 典型的な非経口組成物は、化合物または医薬上許容される塩の滅菌水性担体ま たは非経口的に許容される油、例えば、ポリエチレングリコール、ポリビニルピ ロリドン、レクチン、落花生油またはゴマ油中溶液または懸濁液からなる。また 、該溶液を凍結乾燥し、ついで投与の直前に適当な溶媒で復元することもできる 。 適当な坐剤処方は、この経路で投与した場合に活性である化合物またはその医 薬上許容される塩と、ポリマー性グリコール、ゼラチンまたはカカオバターなど の結合および／または滑沢剤あるいは低融点植物または合成油脂とからなる。 本明細書に記載の化合物の場合、経口投与用の投与単位は、各々、約１ないし ２５０ｍｇ（非経口投与の場合、好ましくは０.１ないし２５ｍｇを含有する） の化合物、または遊離塩基として換算したその医薬上許容される塩を含有する。 本発明の医薬上許容される化合物は、正常には、一日の投与方法にて対象に投 与される。成人患者の場合、これは、例えば、１ｍｇと５００ｍｇの間、好まし くは１ｍｇと２５０ｍｇの間の経口用量、または０.１ｍｇと１００ｍｇの間、 好ましくは０.１ｍｇと２５ｍｇの間の静脈内、皮下または筋肉内用量の化合物 あるいは遊離塩基として換算したその医薬上許容される塩である；該化合物を一 日に１ないし４回投与する。 細胞増殖を阻害することで利益を受ける病状は、慢性リウマチ関節炎、乾癬、 アテローム性動脈硬化症および白血病または充実性腫瘍などの癌を包含するが、 これに限定されるものではない。 合成化学 さらに詳述せずに、当業者は、前記説明を用いて、本発明を最も充分に本発明 を利用することができると思われる。以下の実施例は、本発明化合物の合成をさ らに説明する。したがって、以下の実施例は、単に説明するものであり、如何な る場合も本発明を限定しようとするものではない。 温度は、特記しない限り、摂氏で示す。実施例１ ２−[２−[３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニルスルホンアミド]−４− トリフルオロメチルフェノキシ]安息香酸の製造 ａ）２−(２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)安息香酸メチル アルゴン下、サリチル酸メチル(１５.２g、０.１モル)、４−クロロ−３−ニ トロベンゾトリフルオリド(２２.６g、０.１モル)、および炭酸カリウム（８.３ g、０.０６モル）のジメチルホルムアミド（１００mＬ）中混合物を攪拌し、油 浴中で７０分間、１５０℃に加熱した。該反応混合物を酢酸エチル（３００mＬ ）で希釈し、濾過し、残留物を酢酸エチルで洗浄した。合わせた濾液を蒸発させ 、粗製生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／ヘキ サン）に付すことにより精製して、薄黄色固体として標記化合物を得た；融点６ ９−７０℃。 ｂ）２−(２−アミノ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)安息香酸メチル ２−(２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)安息香酸メチル（２６ g、０.０７６モル）および１０％パラジウム−炭（１g）の酢酸エチル（４００m Ｌ）中混合物をパーボトル中５５psi で２時間水素添加した。該反応混合物をア ルゴンでフラッシュし、セライト（Ｃelite(登録商標)）を介して濾過し、蒸発 させた。粗製生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル ／ヘキサン）に付すことにより精製して、白色固体として標記化合物を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨz,ＣＤＣl₃）ｄ７.９１(ｄｄ，１Ｈ)，７.４５−７.５ ３(ｍ，１Ｈ)，７.１７−７.２４(ｍ，１Ｈ)，６.８８−７.０３(ｍ，３Ｈ)，６ .７８(ｄ，１Ｈ)，４.２５(ｂｒ ｓ，２Ｈ)，３.８４(ｓ，３Ｈ)。 ｃ）２−(２−アミノ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)安息香酸 ２−(２−アミノ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)安息香酸メチル(１９. ２g、０.０６２モル)および２Ｎ水酸化ナトリウム（６５mＬ、０.１３モル）の テトラヒドロフラン（１００mＬ）中混合物をアルゴン下で３時間攪拌しつつ５ ０℃に加温した。テトラヒドロフランを蒸発させ、水溶液を希ＨＣlで酸性化し 、酢酸エチルで抽出し、無水ＭgＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗製生 成物をＥtＯＡc／ヘキサンから再結晶して、白色結晶固体として標記化合物を得 た。¹Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨz,ＣＤ₃ＯＤ）ｄ７.９１(ｄ，１Ｈ)，７.５０(ｄ ｄ，１Ｈ)，７.２２(ｄｄ，１Ｈ)，７.１１(ｄ，１Ｈ)，６.９７(ｄ，１Ｈ)， ６.８６(ｄ，１Ｈ)，６.７８(ｄ，１Ｈ)。 ｄ）２−(２−アミノ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)安息香酸ベンズヒ ドロール アルゴン下、５０℃で、２−(２−アミノ−４−トリフルオロメチルフェノキ シ)安息香酸（５g、０.０１７モル）のＥtＯＡc（５０mＬ）中混合物を攪拌した 。トルエン（５０mＬ）に溶解したジフェニルジアゾメタン（３.３g、０.０１７ モル）の溶液を滴下した。溶媒を蒸発させ、残留物をフラッシュクロマトグラフ ィー（シリカゲル、酢酸エチル／ヘキサン）に付すことにより精製して、粘性の ある油状物として標記化合物を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨz,ＣＤＣl₃）＿ ８.０２(ｄｄ，１Ｈ)，７.４５−７.５２(ｍ，１Ｈ)，７.２０−７.３３(ｍ，１ Ｈ)，７.０７(ｓ，１Ｈ)，６.９６−７.０７(ｍ，２Ｈ)，６.８６−６.９１(ｍ ，１Ｈ)，６.７３(ｄ，１Ｈ)，４.００(ｂｒ ｓ，２Ｈ)。 ｅ）２−[２−[３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニルスルホンアミトセ] −４−トリフルオロメチルフェノキシ]安息香酸ベンズヒドロール ２−(２−アミノ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)安息香酸ベンズヒドロ ール（４g、８.６ミリモル）をピリジン（２５mＬ）に溶解させ、アルゴン下、 室温で攪拌した。３,５−ビス(トリフルオロメチル)ベンゼンスルホニルクロリ ド（４.０５g、１２.９ミリモル）を滴下し、該混合物を１６時間攪拌した。溶 媒を蒸発させ、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチ ル／ヘキサン）に付すことにより精製して、白色固体として標記化合物を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨz,ＣＤＣl₃）ｄ８.２５(ｂｒ ｓ，１Ｈ)，８.１５(ｓ ，２Ｈ)，７.９９(ｄｄ，１Ｈ)，７.８５−７.９２(ｍ，２Ｈ)，７.１−７.５( ｍ，１３Ｈ)，７.０１(ｓ，１Ｈ)，６.７２(ｄ，１Ｈ)，６.４５(ｄｄ，１Ｈ)。 ｆ）２−[２−[３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニルスルホンアミド]− ４−トリフルオロメチルフェノキシ]安息香酸 ２−[２−[３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニルスルホンアミド]−４− トリフルオロメチルフェノキシ]安息香酸ベンズヒドロール（３.７g、５ミリモ ル）を酢酸エチル（１２５mＬ）に溶解させ、１０％パラジウム−炭（０.５g） 上、５０psi で０.７５時間水素添加した。触媒を濾去し、溶媒を蒸発させて、 粗製生成物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチ ル／ヘキサン／ギ酸）に付すことにより精製した。酢酸エチル／ヘキサンからの 再結晶により、白色結晶固体として標記化合物を得た；融点１３３−１３４℃。 同様の方法で、２−[２−[３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニルスルホ ンアミド]−４−トリフルオロメチルフェノキシ]安息香酸のナトリウム塩を製造 することもできる。実施例２ ２−[２−[３−(４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)フェニル]ウレイド］ −４−(トリフルオロメチル)フェノキシ]−４,５−ジクロロベンゼンスルホン酸 のナトリウム塩 ａ）２−(２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)−４,５−ジクロ ロベンゼン アルゴン下、１２０℃で２４時間、３,４−ジクロロフェノール(２５グラム( 以下、gと記す)、０.１５３モル)、４−クロロ−３−ニトロベンゾ−トリフルオ リド（５２g、０.２３モル）および炭酸カリウム（６３g、０.４５９モル）のジ メチルホルムアミド（４５０mＬ）中混合物を攪拌した。該反応混合物を濾過し 、濾液を蒸発させた。残留物を酢酸エチルに溶解させ、水、食塩水で洗浄し、無 水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残留物をフラッシュクロ マトグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン／ヘキサン）に付して、黄色油状物 として標記化合物を得た。 ｂ）２−８２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)−４,５−ジクロ ロベンゼンスルホン酸のアンモニウム塩 発煙硫酸（８ミリリットル(以下、mＬと記す)）を−２０℃に冷却し、該溶液 に塩化メチレン（８mＬ）中の２−(２−ニトロ−４−トリフルオロメチル−フェ ノキシ)−４,５−ジクロロベンゼン（８g、２２.８ミリモル）を添加した。該混 合物を１５分間攪拌し、次いで、氷中で急冷した。酢酸エチルで抽出し、次いで 、 フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン／イソプロパノール ／水酸化アンモニウム）に付して、標記化合物を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（４００Ｍ Ｈz,ＣＤ₃ＯＤ）ｄ８.３１(ｄ，１Ｈ)，８.１１(ｓ，１Ｈ)，７.８７(ｄｄ，１ Ｈ)，７.４(ｓ，１Ｈ)，７.１６(ｄ，１Ｈ)。 ｃ）２−(２−アミノ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)−４,５−ジクロ ロベンゼンスルホン酸 ２−(２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)−４,５−ジクロロベ ンゼンスルホン酸のアンモニウム焔（５g、１１.２ミリモル）を酢酸（７５mＬ ）に溶解させた。該混合物を水（７５mＬ）で希釈し、三塩化チタンの２０％水 溶液（６５mＬ）を添加した。水性処理後、粗製生成物をフラッシュクロマトグ ラフィー（シリカゲル、塩化メチレン／エタノール／水酸化アンモニウム）に付 して、標記化合物を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨz,ＣＤ₃ＯＤ）ｄ８.０２(ｓ ，１Ｈ)，７.１７(ｄ，１Ｈ)，７.１２(ｄ，１Ｈ)，６.９４(ｄｄ，１Ｈ)，６. ８７(ｓ，１Ｈ)。 ｄ）２−[２−[３−(４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)フェニル]ウレイ ド]−４−(トリフルオロメチル９フェノキシ]−４,５−ジクロロベンゼンスルホ ン酸のアンモニウム塩 アルゴン下、２−(２−アミノ−４−トリフルオロメチルフェノキシ)−４,５ −ジクロロベンゼンスルホン酸（２g、４.８ミリモル）および４−クロロ−３− トリフルオロメチルフェニルイソシアナート（１.１１g、５ミリモル）のピリジ ン（２０mＬ）中溶液を７２時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をフラッシ ュクロマトグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン／エタノール／水酸化アンモ ニウム）に付して、標記化合物を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨz,ＣＤ₃ＯＤ） ｄ８.６１(ｄ，１Ｈ)，８.０８(ｓ，１Ｈ)，７.９５(ｄ，１Ｈ)，７.６０(ｄｄ, １Ｈ)，７.４３(ｄ，１Ｈ)，７.３０−７.３６(ｍ，２Ｈ)，７.１０(ｓ，１Ｈ) 。 ｅ）２−[２−[３−(４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)フェニル]ウレイ ド]−４−(トリフルオロメチル)フェノキシ]−４,５−ジクロロベンゼンスルホ ン酸のナトリウム塩 アルゴン下、２−[２−[３−(４−クロロ−３−(トリフルオロメチル)フェニ ル]ウレイド]−４−(トリフルオロメチル)フェノキシ]−４,５−ジクロロベンゼ ンスルホン酸のアンモニウム塩（２.１g、３.２８ミリモル）および重炭酸ナト リウム（０.３３１g、３.９４ミリモル）のメタノール（２０mＬ）および水（２ mＬ）中混合物を３０分間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をフラッシュクロ マトグラフィー（Ｃ₁₈逆相、ＭeＯＨ／Ｈ₂Ｏ）に付し、凍結乾燥後、標記化合物 を得た。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ６４３.８［Ｍ＋Ｈ］⁺。実施例３ ７−(３,４,５−トリフェニル−２−オキソ−２,３−ジヒドロ−イミダゾール −１−イル)ヘプタン−ホスホン酸ジエチル １,４,５−トリフェニル-３−(７−ブロモヘプチル)イミダゾール−２−オン （１.０g）およびトリエチルホスファイト（１.６６g）のキシレン（５ml）中溶 液を還流温度で４０時間加熱した。該溶液を油状物に蒸発させ、シリカゲル上で クロマトグラフィー（酢酸エチル／エタノール）に付した。 得られた油状物をジエチルエーテル中に取り、濾過し、蒸発させて、透明な油 状物として７−(３,４,５−トリフェニル−２−オキソ−２,３−ジヒドロイミダ ゾール-１−イル)ヘプタンホスホン酸ジエチルを得た(０.８４g、７５％)。測定 値：Ｃ，７０.１１；Ｈ，７.３７；Ｎ，４.９４％；Ｃ₃₂Ｈ₃₉Ｎ₂Ｏ₄Ｐ；理論値 ：Ｃ，７０.３１；Ｈ，７.１９；Ｎ，５.１２％。実施例４ ７−(１,４,５−トリフェニルイミダゾール−２−イルオキシ)ヘプタンホスホ ン酸ジエチル １,４,５−トリフェニル−３−(７−ブロモヘプチル)−イミダゾール−２−オ ン（１.０g）および亜リン酸トリエチル（１.６６g）のキシレン（５ml）中混合 物を還流温度で４０時間加熱した。該溶液を油状物に蒸発させ、エタノールから 再蒸発させた。該油状物をエーテルおよび水に分配させ、エーテル溶液を分離し 、硫酸マグネシウムで乾燥させ、油状物に蒸発させ、これをシリカゲル上でクロ マ トグラフィー（酢酸エチル）に付して、油状物として７−(１,４,５−トリフェ ニルイミダゾール−２−イル−オキシ)ヘプタンホスホン酸ジエチルを得、これ を静置して白色固体に固化した(０.８３g、７５％)。融点７６−７℃。測定値： Ｃ，７０.４９；Ｈ，７.４０；Ｎ，４.９４％；Ｃ₃₂Ｈ₃₉Ｎ₂Ｏ₄Ｐ；理論値：Ｃ ，７０.３１；Ｈ，７.１９；Ｎ，５.１２％。実施例５ ６−(１,４,５−トリフェニルイミダゾール−２−オキシ)ヘキサン酸エチル アルゴン下、６−ブロモヘキサン酸エチル(１３.３８g)、１,４,５−トリフェ ニルイミダゾール(６.２４g)、炭酸カリウム（１３.８２g）およびブタン−２− オン（２５０ml）の混合物を還流させながら２４時間撹拌した。該混合物を濾過 し、濾液を蒸発させた。残留物をシリカゲル上でクロマトグラフィーに付して１ ０％酢酸エチルで溶離して、６−(１,４,５−トリフェニルイミダゾール−２− オン-３−イル)ヘキサン酸エチル（５.６１g）および標記化合物（２.２１g）を 得た。融点１０２−１０３.５℃。測定値：Ｃ，７６.７３；Ｈ，６.７３；Ｎ， ６.１１％；Ｃ₂₉Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₃；理論値：Ｃ，７６.６３；Ｈ，６.６５；Ｎ，６.１ ６％。 該化合物は、DE 3,228,271 A1（引用して本明細書の記載とする）に開示さ れている方法に従って合成することもできる。実施例６ ５−(１,４,５−トリフェニルイミダゾール−２−オン−３−イル)吉草酸 ａ）５−(１,４,５−トリフェニルイミダゾール−２−イルオキシ)吉草酸エチ ル １,４,５−トリフェニルイミダゾール−２−オンをブタノン中の５−ブロモ吉 草酸エチルおよび炭酸カリウムで処理し、クロマトグラフィー処理に付した後、 ５−(１,４,５−トリフェニルイミダゾール−２−イルオキシ)吉草酸エチルを得 た。融点９５−９６℃。測定値：Ｃ，７６.５；Ｈ，６.５；Ｎ，６.３％；Ｃ₂₈ Ｈ₂₈Ｎ₂Ｏ₃)；理論値：Ｃ，７６.３；Ｈ，６.４；Ｎ，６.４％。 ｂ）５−(１,４,５−トリフェニルイミダゾール−２−オン−３−イル)吉草酸 (１.２５g)、１０％水酸化ナトリウム水溶液およびエタノール（５０ml）の混合 物を１時間撹拌した。該溶液を酸性化し、沈殿物を回収した。エタノールからの 再結晶により、標記化合物（０.６６g）を得た。融点１３０−１３２℃。測定値 ：Ｃ，７５.８０；Ｈ，５.９１；Ｎ，６.６７％；Ｃ₂₆Ｈ₂₄Ｎ₂Ｏ₃；理論値：Ｃ ，７５.７１；Ｈ，５.８６；Ｎ，６.７９％。実施例７ ２−[２−[３−[３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニル]ウレイド]−４− トリフルオロメチルフェノキシ]−５−(１,１−ジメチルプロピル)ベンゼンスル ホンアミドの製造 ａ）２−(ニトロ)−４−(トリフルオロメチル)フェノキシ−４−(１,１−ジメ チルプロピル)ベンゼンスルホン酸のアンモニウム塩 ジメチルホルムアミド（２５ml）中、５(１,１−ジメチルプロピル)−２−(ヒ ドロキシル)ベンゼンスルホン酸のアンモニウム塩(１.０g、０.００３８３モル) 、４−ブロモ−３−ニトロベンゾトリフルリド（１.５g、０.００５５７モル） およびＫ₂ＣＯ₃（１.０g、０.００７６６モル）を１５０℃で１６時間混合した 。該反応をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン／イソプ ロパノール／水酸化アンモニウム）に付すことにより精製して、標記化合物（１ .０g、５８％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨz,ＣＤ₃ＯＤ）ｄ８.２２(ｄ， １Ｈ)，８.０５(ｄ，１Ｈ)，７.７０−７.６０(ｄｄ，１Ｈ)，７.５５−７.４５ (ｄｄ，１Ｈ)，７.１０−７.００(ｍ，２Ｈ)，１.７８−１.６５(ｑ，２Ｈ)，１ .４２(ｓ，６Ｈ)，０.７８−０.６４(ｔ，３Ｈ)。 ｂ）２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェノキシ−４−(１,１−ジメチ ルプロピル)ベンゼンスルホニルクロリド ２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェノキシ−４−(１,１−ジメチルプ ロピル)ベンゼンスルホン酸のアンモニウム塩（５００mg、０.００１１モル）お よび塩化チオニル（５.０ml、０.０６８８モル）を３０分間混合した。ジメチル ホルムアミド５滴を添加すると、５分以内に色変化が示された(紫色から黄色へ) 。反応を１時間混合した。ＴＬＣによって決定した。塩化チオニルを蒸発させ、 標 記化合物をさらに精製したり特徴付けしたりせずに用いた。 ｃ）２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェノキシ−４−(１,１−ジチメ ルプロピル)ベンゼンスルホンアミド 水酸化アンモニウム（２０ml）中、２−ニトロ−４−８トリフルオロメメチル )フェノキシ−４−(１,１−ジメチルプロピル)ベンゼンスルホニルクロリドを０ ℃で１時間混合した。該反応を酢酸エチルで抽出し、有機層をＭgＳＯ₄で乾燥さ せ、濾過し、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／ヘキサ ン）に付して、標記化合物（３００mg、６１％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（２５０ ＭＨz,ＣＤ₃ＯＤ）ｄ８.３５(ｓ，１Ｈ)，８.００(ｓ，１Ｈ)，７.８５(ｄ，１ Ｈ)，７.６５(ｄｄ，１Ｈ)，７.１９(ｔ，２ｈ)，１.７３(ｑ，２Ｈ)，１.３８( ｓ，６ｈ)，０.７６(ｔ，３Ｈ)。 ｄ）２−アミノ−４−(トリフルオロメチル)フェノキシ−４−(１,１−ジメチ ルプロピル)ベンゼンスルホンアミド 酢酸エチル（２５ml）中、２−ニトロ−４−(トリフルオロメチル)フェノキシ −４−(１,１−ジメチルプロピル)ベンゼンスルホンアミド（３００mg、０.００ ０７モル）を混合し、アルゴン下、パラジウム−炭（１００mg）を添加した。該 混合物を５８psi で５時間水素添加し、メタノールおよびクロロホルムと一緒に 濾過し、蒸発させた。標記化合物をさらに精製したり特徴付けしたりせずに用い た。 ｅ）２−[２−[３−[３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニル]ウレイド]− ４−トリフルオロメチルフェノキシ]−５−(１,１−ジメチルプロピル)ベンゼン スルホンアミド ピリジン（１０ml）中、２−アミノ−４−８ トリフルオロメチル)フェノキシ −４−(１,１−ジメチルプロピル)ベンゼンスルホンアミド（３６０mg、０.００ ０９モル）および３,５−ジ(トリフルオロメチル)フェニルイソシアナートを１ ６時間混合した。ピリジンを蒸発させ、該反応をフラッシュクロマトグラフィー （シリカゲル、２５％酢酸エチル／ヘキサン）に付した。生成物をさらにフラッ シュクロマトグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン／ヘキサン／酢酸エチル） に付すことにより精製して、標記化合物（１３０mg、２２％）を得た。¹Ｈ Ｎ ＭＲ（２５０ＭＨz,ＣＤ₃ＯＤ）δ８.６０(ｓ，１Ｈ)，８.００(ｓ，３Ｈ)，７. ５５(ｓ，２Ｈ)，７.３５(ｍ，１Ｈ)，７.１５(ｄ，１Ｈ)，６.９５(ｄ，１Ｈ) ，１.７０(ｑ，２Ｈ)，１.３０(ｓ，６Ｈ)，０.７０(ｔ，３Ｈ)。 略語：本明細書で用いた略語は、以下のとおりである：ＡＡ、アラキドン酸、 ５−８−１１−１４エイコサテトラエン酸；１−アルキル、１−Ｏ−アルキル； １−アルケニル、１−Ｏ−アルク−１'−エニル；ＢＳＡ、ウシ血清アルブミン ；ＣoＡ−ＩＴ、補酵素Ａ−非依存性トランスアシラーゼ；ＣＯＸ、シクロオキ シゲナーゼ；ＥＴ−１８−Ｏ−ＣＨ₃１−Ｏ−オクタデシル−２−Ｏ−メチル− ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；ＧＰＣ、ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリ ン；５ＬＯ、５−リポキシゲナーゼ；ＰＬＡ₂、ホスホリパーゼＡ２；ＰＢＳ、 リン酸緩衝生理食塩水；ＴＬＣ、薄層クロマトグラフィー；ＴＮＦ、腫瘍壊死因 子α。 前記説明は、本発明をその好ましい具体例を含んで記載している。本明細書に 詳細に記載された具体例の修飾および改良は、以下の請求の範囲の範囲内である 。さらに説明せずとも、当業者は、前記説明を用いて、本発明を最も充分に利用 することができると思われる。したがって、本明細書の実施例は、単に説明とし てのものであり、如何なる場合も本発明の範囲を限定しようとするものではない 。排他的な権利を請求する本発明の具体例を以下に定義する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/18 Ａ６１Ｋ 31/18 31/185 31/185 31/195 31/195 31/675 31/675 31/685 ６０２ 31/685 ６０２ (72)発明者 ウィンクラー，ジェイムズ・デイビッド アメリカ合衆国19034ペンシルベニア州 フォート・ワシントン、ハートランフト・ アベニュー 701番 (72)発明者 チルトン，フロイド・ザ・サード アメリカ合衆国27041ノースカロライナ州 パイロット・マウンテン、ニーダム・ス トリート 106番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．細胞増殖の阻害または低下を必要とする哺乳動物におけるその阻害または 低下方法であって、有効量のＣoＡ-非依存性トランスアシラーゼ（ＣoＡ-ＩＴ） 阻害剤またはその医薬上許容される塩（ただし、かかる阻害剤は１-Ｏ-オクタデ シル-２-Ｏ-メチル-sｎ-グリセロ-３-ホスホコリン（ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃）または アルキルリゾリン脂質アナログ以外の化合物である）をそのようなヒトまたは哺 乳動物に投与することからなる方法。 ２．ＣoＡ-ＩＴ阻害剤を、有効量のＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃またはアルキルリゾリン 脂質アナログと共同投与する請求項１記載の方法。 ３．哺乳動物が乾癬、慢性リウマチ関節炎またはアテローム性動脈硬化症に罹 患している請求項１記載の方法。 ４．癌細胞増殖の治療を必要とする哺乳動物におけるその治療方法であって、 有効量のＣoＡ-非依存性トランスアシラーゼ（ＣoＡ-ＩＴ）阻害剤またはその医 薬上許容される塩（ただし、かかる阻害剤は１-Ｏ-オクタデシル-２-Ｏ-メチル- ｓｎ-グリセロ-３-ホスホコリン（ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃）またはアルキルリゾリン 脂質アナログ以外の化合物である）をそのような哺乳動物に投与することからな る方法。 ５．ＣoＡ-ＩＴ阻害剤を、有効量のＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃またはアルキルリゾリン 脂質アナログと共同投与する請求項４記載の方法。 ６．哺乳動物が白血病に罹患している請求項４記載の方法。 ７．アポトーシス誘発を必要とする哺乳動物におけるその誘発方法であって、 有効量のＣoＡ-非依存性トランスアシラーゼ（ＣoＡ-ＩＴ）阻害剤またはその医 薬上許容される塩（ただし、かかる阻害剤は１-Ｏ-オクタデシル-２-Ｏ-メチル- ｓｎ-グリセロ-３-ホスホコリン（ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃）またはアルキルリゾリン 脂質アナログ以外の化合物である）をそのようなヒトまたは哺乳動物に投与する ことからなる方法。 ８．ＣoＡ-ＩＴ阻害剤を、有効量のＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃またはアルキルリゾリン 脂質アナログと共同投与する請求項７記載の方法。 ９．１-Ｏ-オクタデシル-２-Ｏ-メチル-ｓn-グリセロ-３-ホスホコリン（ＥＴ -18-Ｏ-ＣＨ₃）のＣoＡ-ＩＴ阻害剤としての使用。 １０．ＣoＡ-ＩＴ介在疾患または障害の治療を必要とする哺乳動物におけるそ の疾患または障害の治療法であって、有効量のＣoＡ-ＩＴ阻害剤としての１-Ｏ- オクタデシル-２-Ｏ-メチル-ｓｎ-グリセロ-３-ホスホコリン（ＥＴ-18-Ｏ-ＣＨ₃ ）をかかる哺乳動物に投与することからなる方法；ただし、かかる疾患または 障害は細胞増殖の阻害またはアポトーシスの誘発を必要とする疾患または障害以 外の疾患または障害である。