JPH11507548A - ブタのリッターサイズ用dnaマーカー - Google Patents
ブタのリッターサイズ用dnaマーカーInfo
- Publication number
- JPH11507548A JPH11507548A JP9502797A JP50279797A JPH11507548A JP H11507548 A JPH11507548 A JP H11507548A JP 9502797 A JP9502797 A JP 9502797A JP 50279797 A JP50279797 A JP 50279797A JP H11507548 A JPH11507548 A JP H11507548A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- opn
- genomic dna
- pigs
- litters
- pig
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2525/00—Reactions involving modified oligonucleotides, nucleic acids, or nucleotides
- C12Q2525/10—Modifications characterised by
- C12Q2525/151—Modifications characterised by repeat or repeated sequences, e.g. VNTR, microsatellite, concatemer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/124—Animal traits, i.e. production traits, including athletic performance or the like
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Absorbent Articles And Supports Therefor (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
(57)【要約】
より多くの同腹子を産するとより考えられるブタおよび/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定するためのブタのスクリーニング方法が、ブタのゲノムDNAのサンプル中に存在するOPN対立遺伝子の同定を基礎として、提供される。このような方法に使用されるキットもまた提供される。
Description
【発明の詳細な説明】
ブタのリッターサイズ用DNAマーカー
本発明は、大きなリッターサイズに関連するオステオポンチン(osteopontin)
(OPN)対立遺伝子の存在または不存在を決定するためのブタのスクリーニン
グ方法、ブタのリッターサイズの推定における上記方法の使用およびこのような
方法を行うためのキットに関するものである。
動物のリッターサイズを増加させることが可能であると、肉の生産及び動物の
繁殖率が向上できる。また、家畜の同等の生産高がより少ない親動物から得られ
るので、生産コストが減少できる。さらに、動物の飼育組織は、改良された遺伝
子を有するものの子孫をより多くスクリーニングできる可能性により利益を享受
することができる。しかしながら、リッターサイズは、従来、一方の性に限られ
非遺伝的な因子の影響をかなり受ける(遺伝率、即ち、遺伝的な相違による表現
型変異の比率の測定結果はブタのリッターサイズで約0.1である)ので、選択
が非常に困難である。
リッターサイズを増加させる方法の一つとしては、有用な遺伝子を有意により
高いリッターサイズを有する品種由来の生産系に導入することである。しかしな
がら、量的遺伝学では、リッターサイズ等の複合特性(complex trait)はそれぞ
れがその特性に関して小さな効果を有する非常に多数の遺伝子によって制御され
ることが示唆される。この示唆が正しいとすると、複合特性(complex trait)の
選択による遺伝的進歩は非常に遅いと考えられる。または、多くの遺伝子が複合
特性に係わっているものの、これらのうち少数の遺伝子(主要遺伝子)がその特
性に関して大きな効果を有するという考えもある。この考えが正しいとすると、
関連のある主要遺伝子の有用な対立遺伝子の同定及び選択が可能であれば、この
ような特性の遺伝的進歩は迅速なものとなる。ゲノムマッピングの出現以降、量
的特性とマップが使用で
きる動物のゲノムに等しく分布する分子マーカーとの関連を模索することによっ
て、量的特性(quantitative trait)(量的特性遺伝子座(quantitative trait lo
cus)、OTL)に影響を及ぼす遺伝子を同定することが可能となった。重要なこ
とには、選択を目的とした場合、このようなマーカーの表現型の遺伝率は1.0
である。
ブタのチャイニーズメイシャンという品種(Chinese Meishan breed)は、最も
多産なヨーロッパの品種に比べて一同腹子当たり約4匹の子豚をさらに産するこ
とが知られている。この品種の多産性(リッターサイズ)に関する遺伝子は、一
般的な西欧のブタの品種のリッターサイズを増加させることを目的としたプログ
ラムにおいて非常に有用である。確かに、メイシャン(Meishan)のエストロゲン
レセプター遺伝子(ESR)に関連する遺伝マーカーは、リッターサイズに好ま
しい作用を及ぼすことが示され、これはWO92/18651号に報告される。
ヒツジのブールーラメリノという品種(Booroola Merino breed)は非常に多産
である。3匹以上のリッターサイズが一般的である。この品種の非常に高い繁殖
率は、単一の遺伝子、FECBの作用によるものであることが示された(評論と
して、ジーダブリュー モントゴメリー(G W Montgomery)ら、エンドクリン レ
ビューズ(Endocrine Reviews)、13:309〜328(1992年)を参照)
。ヒトのDNAマーカーを用いた遺伝地図(genetic mapping)により、ヒト形式(
version)のFECBはクロモソーム4(chromosome 4)上に位置(ジーダブリュー
モントゴメリー(G W Montgomery)ら、ネーチャー ジェネティックス(Nature
Genetics)、4:410〜114(1993年))し、オステオポンチン(OP
N)としても既知の、分泌リンタンパク質−1(secreted phosphoprotein-1)(
SSP−1)、2ar、骨のサイアロプロテイン−1(bone sialoprotein-1)、
44kDaの骨のリンタンパク質及び腫瘍の分泌リンタンパク質をコード化する
遺伝子と密接に関連することが示された。比較の地図(エッチ エレグレン(H E
llegren)ら、ゲノミックス(Genomics)、17:599〜603(1993年)か
ら、ヒトのクロモソーム4(chromosome 4)及びブタのクロモソーム8(chromosom
e 8)は非常に類似する(シンテニッ
クである(syntenic))ことが示される。ブタのSPP−1遺伝子もまたクロモソ
ーム8(chromosome 8)上に位置する。
より近年、ウシのFECB連結マーカーが***速度の速いものについて選択さ
れた群における大きなリッターサイズ用のマーカーとして作用しないことが分か
った(ブラットマン(Blattman)ら、ミッド−ウェスト アニマル サイエンス
ミーティング(Mid-West Animal Science Meeting)、18:43(1995年)
)。
しかしながら、我々は、驚くべきことに、ブタでは、OPNに関する特定のD
NAマーカーは、リッターサイズと関連があり、このため、より大きなリッター
サイズを産するチャンスのより大きなブタを選択したり、より小さなリッターサ
イズを示す対立遺伝子を有するブタを除いて選択する(select against)ことに使
用できることを発見した。本明細書において、「より大きなリッターサイズ(inc
reased litter size)」とは、所定の集団の平均を超えるリッターサイズの有意
な増加を意味する。
興味深いことに、一方のヒツジ、ウシ及びヒトと他方のマウス及びブタとの間
にはOPN付近のクロモソームシンテニーに明白なブレークポイントがあること
が分かった(モントゴメリー(Montgomery)ら、ジェー レプロダクション アン
ド ファーティリティー(J.Reproduction and Fertility)、追補(supplement)
、49:113〜121(1995年))。これから、同腹子が多い動物(マウ
ス及びブタ)と同腹子が少ない動物(ヒト、ヒツジ及びウシ)との間では、クロ
モソームの構造がこの領域で変化しており、これにより繁殖力に関する主要遺伝
子の作用が修飾されることが示唆される。可能性のある説明としては以下が挙げ
られる:主要遺伝子の発現がより転写活性の高いあるいは転写不活性な領域に導
入されることによって向上されるあるいは抑制されること;主要遺伝子が変更さ
れたプロモーターエレメントの制御下に直接導入されること;OPNに関連する
主要遺伝子の位置がOPNがヒツジやウシに比べてブタにおける方がリッターサ
イズの潜在性を評価するのにより有効なマーカーとなるように変更される。
したがって、第一の概念によると、本発明は、以下の段階からなる、より多く
の同腹子を産するとより考えられるブタ、および/またはより同腹子を産すると
はあまり考えられないブタを決定するためのブタのスクリーニング方法を提供す
るものである:
(i) ブタからゲノムDNAのサンプルを得る;および
(ii)(i)で得られたゲノムDNAを分析して、どのOPN対立遺伝子が存
在するかを決定する。
好ましくは、段階(ii)、即ち、OPN対立遺伝子の決定は、OPNに直接
的にあるいは間接的に連結する特定のDNAマーカーを探索することによって行
われる。
遺伝マーカー及び特定の特性に応答可能な遺伝子との間の結合は、遺伝子組換
によって破壊できる。したがって、マーカーと問題の遺伝子間の物理的な距離が
近いほど、組換によりこれらを分離しにくいと考えられる。また、特定の特性と
関連することが既に示された、別のDNAマーカーの特殊な対立遺伝子と特定の
遺伝子(例えば、本明細書に記載されるOPN遺伝子)に結合することが既知の
DNAマーカーの対立遺伝子との間の結合を確立することも可能である。したが
って、現状では、OPN遺伝子を採用して、他のクロモソーム8マーカーの特定
の対立遺伝子の選択を介してOPN結合マーカーのある種の対立遺伝子について
選択することによって、より多くの同腹子を産すると考えられるブタについて、
または間接的には、より少ない同腹子を産すると考えられるブタを排除して、選
択することが、少なくとも短期間で可能である。ブタのクロモソーム8上のOP
Nに連結することが既知のこのようなマーカーの例としては、Sw61、Sw1
085、Sw194、Sw16、Sw790及びSO178が挙げられ、これら
のマーカーはすべてミクロサテライト(microsatellite)である。
本発明のさらなる実施態様によると、数多くのこのようなマーカーが使用され
る。例えば、マーカー対を用いて、主要遺伝子をブラケットし(bracket)、可能
性のあ
る組換効果を抑制する。このようなマーカーの組み合わせの例としては、SO1
78及びSw61、さらにはSO178及びSw790が挙げられる。
上記効果はブタ(及びマウス)およびヒツジ(及びヒトやウシ)の遺伝子の順
番の相違に関連するので、これから、最も有用な第二のマーカーはブタのクロモ
ソーム8の非相同(非シンテニー(non-syntenic))領域にあることが示唆される
。この領域をブラケットする(bracket)ことが既知のマーカーの適当な組み合わ
せの例としては、OPN及びSO178がある。しかしながら、当業者は、他の
有用なマーカーが定常的に同定されることも分かっているであろう。
OPNと結合する(associate)特定の遺伝マーカーはミクロサテライト(micros
atellite)である。これらは、約50,000塩基(1ハプロイドゲノム当たり
約60,000ミクロサテライト(microsatellite))毎にゲノム付近で実質的に
任意に生じる、4、3または、より一般的には2個のヌクレオチドの単純な配列
の繰り返しである。複製中のDNAポリメラーゼのステュターリング(stutterin
g)及び組換中の不等交差により繰り返し単位が失われたりまたは増えると考えら
れる。このことは、ミクロサテライトが一般的に多形性であり、様々な繰り返し
長対立遺伝子(repeat length allele)を有することを意味する。
可能性のある繰り返し単位長対立遺伝子(repeat unit length allele)を生じ
る(CA)n、例えば、(CA)2、(CA)9、(CA)10、(CA)11及び(
CA)12が、所定の遺伝子と結合するミクロサテライトの例である。
標準的なPCR技術と組み合わせて、所定の遺伝子と結合するミクロサテライ
トに隣接する(flanking)領域と(例えば、ストリンジェントな条件下で)ハイブ
リッド形成できることができるプライマーを用いることにより、様々な長さのP
CR産物が得られるが、その長さはミクロサテライトの特定の繰り返し単位長対
立遺伝子(repeat unit length allele)に依存する。
リッターサイズとOPN遺伝子と結合するミクロサテライトを用いた上記PC
R産物との関連を分析することにより、増加した、及び減少したリッターサイズ
に関
連するマーカー長対立遺伝子がブタで決定できた。
このようなミクロサテライトのフランキング領域とハイブリッド形成する適当
なプライマー対としては、以下の配列を有するものが挙げられる:
GCTAGTTAATGACATTGTACATAA;または
CCAATCCTATTCACGAAAAAGC;および
GTGTCATGAGGTTTTTTCCACTGC;または
CAACCCACTTGCTCCCAC。
特に、132及び136と称される、上記ミクロサテライトマーカーの繰り返
し単位長対立遺伝子(repeat unit length allele)は、ブタの大きなリッターサ
イズに関連することが分かった。さらに、112と称される、繰り返し単位長対
立遺伝子は、ブタの小さなリッターサイズに関連することが分かった。
事実、大きなリッターサイズに関連する対立遺伝子は、主として、ヨーロッパ
の親ストック由来である。これは、上述したように、メイシャン(Meishan)はラ
ンドレース(Landrace)またはデュロック(Duroc)に比べて1同腹子当たり4匹の
子豚をさらに有するので、予想に反しており、有用なマーカーは元がメイシャン
(Meishan)の親ストックから受け継がれる遺伝子に関連すると予想された。
第二の概念によると、本発明は、以下の段階からなる、より多くの同腹子を産
するとより考えられるブタ、および/またはより同腹子を産するとはあまり考え
られないブタを決定するためのブタのスクリーニング方法を提供するものである
:
(i) ブタからゲノムDNAのサンプルを得る;
(ii) (i)のゲノムDNAを一またはそれ以上の適当なプライマーとハイ
ブリッド形成させる;
(iii)(ii)のハイブリッド形成した核酸を用いて一またはそれ以上のP
CRサイクルを行う;および
(iv) (iii)で得られたPCR産物の長さを分析する。
好ましくは、本発明の方法は、キットの形態で示される試薬及び指示を用いて
実
施される。
したがって、第三の概念によると、本発明は、ブタのゲノムDNAのサンプル
においてOPN対立遺伝子を同定できる一以上の試薬または材料からなる、より
多くの同腹子を産するとより考えられるブタ、および/またはより同腹子を産す
るとはあまり考えられないブタを決定するためのブタのスクリーニング用キット
を提供するものである。
本発明の好ましいキットは、OPN遺伝子に連結されるDNAマーカー、例え
ば、ミクロサテライトマーカー、と結合する対立遺伝子を同定できる試薬または
材料からなる。このようなキットは、最も好ましくは、一以上のDNAプライマ
ー、さらに必要であれば標準的なPCR試薬からなる。
最後に、当業者によれば、本明細書中に記載される方法及びキットはより多く
の同腹子を産するとより考えられるブタ(またはより同腹子を産するとはあまり
考えられないブタ)を決定するための他の既に報告されたブタのスクリーニング
方法及びキットと組み合わせて使用できることは認識される。このような他の方
法及びキットの例としては、WO92/18651号に記載されるものがある。
言うまでもなく、双方の方法を用いてブタのDNAをスクリーニングするために
使用される組み合わされたキットを製造することも可能である。
WO−A−9218651号及びUSSN 08/312312号には、ES
R遺伝子との連結を基礎としたどのブタがより多くの同腹子を産するとより考え
られるかを決定する方法が開示される。したがって、当業者は、本発明のスクリ
ーニング方法を、先に開示されたESRスクリーニング方法と組み合わせて使用
することにより、このような決定方法を目的としたより強力な道具を提供するこ
とができることを認識するであろう。したがって、さらなる概念によると、本発
明は、以下の段階からなる、より多くの同腹子を産するとより考えられるブタ、
および/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定するため
のブタのスクリーニング方法を提供するものである:
(i) ブタからゲノムDNAのサンプルを得る;
(ii) (i)で得られたゲノムDNAを分析して、どのOPN対立遺伝子が
存在するかを決定する;および
(iii)(i)で得られたゲノムDNAを分析して、どのブタのリッターサイ
ズに関連する少なくとも一の他の遺伝子の対立遺伝子が存在するかを決定する。
本発明の上記概念の一つの好ましい実施態様によると、上記少なくとも一の他
の遺伝子としては、WO−A−9218651号及びUSSN 08/3123
12号に記載される、ESR遺伝子がある。
最後の概念によると、本発明は、ブタのゲノムDNAのサンプルにおいてOP
N対立遺伝子を同定できる一以上の試薬または材料、およびブタのゲノムDNA
のサンプルにおけるブタのリッターサイズに関連する少なくとも一の他の遺伝子
の対立遺伝子を同定できる一以上の試薬または材料からなる、より多くの同腹子
を産するとより考えられるブタ、および/またはより同腹子を産するとはあまり
考えられないブタを決定するためのブタのスクリーニング用キットを提供するも
のである。
本発明の各概念の好ましい態様は、必要であれば変更を加えて(mutatis mutan
dis)、各他の概念に適用できる。
本発明を下記実施例を参照しながら説明するが、本発明は下記実施例に何等制
限されるものではない。実施例1 DNAの調製
DNAは、細胞核を含む組織であればいずれの源、例えば、白血球、毛嚢、耳
のノッチ(ear notch)及び筋肉、から調製されてもよい。本明細書に概説される
工程は、血球調製物に関連するものである;他の組織に関しては、K緩衝液(K b
uffer)に材料を直接懸濁した後血液工程(blood procedure)の同様の段階により
加工することによって、同様に加工される。本明細書に概説される方法により、
PCR増幅に適する未精製DNAを含む細胞ライゼートが得られる。しかしなが
ら、いずれの
精製または未精製のDNAを調製する方法もまた同様にして有効である。
血液は、凝固を防止するために50mM EDTA(pH8.0)中に集めら
れなければならない。50μlの血液を小さなミクロ遠心管(microcentrifuge t
ube)(0.5mlエッペンドルフまたはその等価物)中に入れた。450μlの
TE緩衝液を加え、赤血球(ヘム群はPCRを阻害する)を分解し(lyse)、2秒
間ボルテックスにより混合した。次に、そのままの白血球及び残りの赤血球をミ
クロ遠心器(microcentrifuge)で13,000gで12秒間遠心した。低圧の真
空ポンプシステムを用いて緩やかに吸引することにより、上清を除去した。次に
、450μlのTE緩衝液をさらに加え、残りの赤血球を分解し、白血球を前記
と同様にして遠心によって収集した。ペレットが赤みが残っている際には、この
プロセスをペレットを白くなるまで繰り返した。ペレット化した白血球から上清
を残らず除去した後、100μlのプロテイナーゼK含有K緩衝液を添加し、こ
の混合物を55℃で2時間インキュベートした。次に、この混合物を8分間95
〜100℃に加熱し、DNAライゼートを必要となるまで、−20℃で貯蔵した
。
試薬
TE緩衝液:10mM トリス−塩酸(pH8.0)
1mM EDTA
K緩衝液: 50mM KCl
10mM トリス−塩酸(pH8.3)
2.5mM MgCl2
0.5% ツィーン20(Tween 20)
ライゼートを使用する前に、1.0mlのK緩衝液当たり、10μlの20m
g/mlプロテイナーゼK(ベーリンガー マイハイム(Boehringer Marmheim)
)を添加した。
PCR
反応液を、以下のようにして薄膜0.25ml容管(thin walled 0.25 ml tub
e)
(パーキン エルマー(Perkin Elmer))中に作製した:
1.5μl 10×緩衝液;
1.5μl 15mM MgCl;
1.5μl 2mM dNTP(ファルマシア(Pharmacia));
0.5μl 5mMの各プライマー(ゲノシス(Genosys));
9μl 滅菌脱イオン水;
0.1μl(0.5単位) アンプリタック(AmpliTaq)DNA
ポリメラーゼ(パーキン エルマー(Perkin Elmer));
1μl DNAライゼート。
次に、反応管をパーキン エルマー 9600 熱循環器(Perkin Elmer 9600
thermal cycler)に置き、PCRを下記レジメに従って行った:
94℃で4分間;
94℃で30秒間、58℃で1分間、および72℃で1分間を
30サイクル;
72℃で4分間;
必要になるまで4℃。
試薬
10×PCR緩衝液:100mM トリス−塩酸、pH8.3
(25℃)、500mM KCl
順方向プライマー(forward primer):
GCTAGTTAATGACATTGTACATAA または
CCAATCCTATTCACGAAAAAGC
逆方向プライマー(reverse primer):
GTGTCATGAGGTTTTTTCCACTGC または
CAACCCACTTGCTCCCAC
プライマーの一方が蛍光マーカーで標識される際には、得られる産物は、ジー
ンスキャン(Genescan)及びゲノタイパー ソフトウェアー(Genotyper software)
を用いたアプライド バイオシステムズ 373 DNA シークエンサー(App
lied Biosystems 373 DNA Sequencer)等の自動DNA配列決定器(automated DNA
sequencer)で分析できる。実施例2 ポリアクリルアミドゲル電気泳動
5μlのPCR産物を2μlのローディングバッファー(loading buffer)と混
合し、1×TBE緩衝液中で非変性ポリアクリルアミドスラブゲル上で100V
で4時間分離させた。次に、ゲルを50ng/mlのエチジウムブロミド溶液中
で30分間染色し、PCR産物を可視化し、紫外線透視器(UV light transillum
inator)で撮影した。次に、PCR産物の塩基対としての大きさを、同様のゲル
で流した既知の分子量マーカーと比較して、相対的な移動度から測定した。PC
R産物の大きさの測定結果はミクロサテライト対立遺伝子の長さに反映する。
また、PCR産物を、PCR中の蛍光で標識されたプライマーを使用すること
によって、アプライド バイオシステムズ DNA シークエンサー(Applied B
iosystems DNA Sequencer)で分析した。結果
OPN対立遺伝子の頻度
様々なブタの集団におけるOPN対立遺伝子の頻度を表1に示す。
L93 ランドレース(Landrace)×メイシャン(Meishan)の交配に
よってできる集団由来の動物
L94 デュロック(Duroc)×メイシャン(Meishan)の交配によっ
てできる集団由来の動物
統計学的分析
L93及びL94由来のメス動物について、可能であれば様々なパリティで、
リ
ッターサイズを評価(全出産数(TNB)及び生存出産数(NBA)の双方)し
、これらのデータを同じ動物セットのOPNミクロサテライト遺伝子型と比較し
た。リッターサイズとOPN遺伝子型との統計学的な関連を、最小自乗法を用い
て調べ、一般的な直線モデル(general linear model)に合わせた。リッターサイ
ズに関する最小自乗平均(Least Squares Mean)(LSM)を各OPN遺伝子型で
評価した。LSMは、リッターサイズに影響を及ぼすモデルにおける他の効果を
調節した平均値である。
個々のOPN対立遺伝子の効果を、特定の対立遺伝子の0、1または2コピー
を有するかどうかによって動物をグループに分けた対立遺伝子の置換モデル(all
elesubstitution model)を用いてさらに分類した。リッターサイズに関するL
SMを各群で調べた。L93に関する結果を表2に示す。
上記データから、対立遺伝子112はリッターサイズにおける負の効果に関連
すると考えられ、対立遺伝子132(NBA)及び136(TNB)では正の傾
向が見られることが分かる。表1に示されるデータから、対立遺伝子112及び
136はランドレース(Landrace)由来であると考えられるが、対立遺伝子132
はランドレース(Landrace)またはメイシャン(Meishan)の祖先由来であったこと
が示唆される。しかしながら、対立遺伝子132はメイシャン(Meishan)に比べ
て2倍以上ランドレース(Landrace)で共通しているので、L93における対立遺
伝子132のかなりの部分はランドレース(Landrace)由来であると考えられる。
これらの対立遺伝子がリッターサイズのプレディクター(predictor)として作
用する能力があるかを調べるために、L94からのデータをさらに分析した。対
立遺伝子132はこの系統では見付からなかった(恐らくこの対立遺伝子はデュ
ロック(Duroc)では見付からない)。対立遺伝子132及び136のデーターを
合わせたものを表3に示す。
これらのデータから、対立遺伝子132のみがTNB及びNBA双方に関して
リッターサイズに有意な正の効果を有したことが示される。対立遺伝子136は
TNBではかなり有意性が認められるが、この効果は少数の136/136動物
(3)がかなり高い観察結果を出したことによると考えられる。
OPN対立遺伝子132及び高いリッターサイズとの間の関連は、ブタの2種
の異なる系統(L93及びL94)で示された。これから、リッターサイズに影
響を及ぼすQTLはブタのOPN遺伝子と密接に関連することが示される。しか
しながら、ブタの他の科、系統または品種において、異なるOPN対立遺伝子が
リッターサイズの増加に関連があることは可能である。
L93及びL94に関する及びさらに系統L07(大きな白色系統)に関する
再分析結果を、他のモデルを用いて下記表4に示す。これは、各OPN対立遺伝
子を可変とし、各対立遺伝子に対して0、1または2(即ち、各対立遺伝子の0
、1または2コピー)を有する各動物をコードする(coding)ことを伴う。
群れ(herd)−季節−種付け(service)のタイプ及びパリティは固定された効果
とした。種雄は任意な効果とした。ESR及びOPNは、共可変(covariable)と
適合させた。一系統毎のすべてのデータは全くの同胞あるいは半分同胞の家系に
関するものであった。10未満のリッターの第二の遺伝子型を有するOPN対立
遺伝子は、分析から除外した。
分析した特性は全出産数(TNB)及び生存出産数(NBA)であった。
上記したような固定された、任意の及びESR効果の3モデルを、各系統につ
いて行った。
1.OPNを持たないモデル
2.すべてのOPN対立遺伝子を含むモデル
3.OPN対立遺伝子を個々に含むモデル
-2対数尤度(-2log liklihood)を各モデルについて得た。モデルの有意性を、
モデル1の尤度(liklihood)からモデル2または3の尤度(liklihood)を引くこと
に
より算出し、結果をカイ自乗分布で比較した。2モデル間の差を自由度(df)
として使用した。
モデル2に関する1系統当たりの有意性及びモデル3の有意な対立遺伝子のレ
ベルを下記表に示す。
上記データから以下の結論が引き出せる:
1.OPNでは、L70(P<0.10);L93(TNB:P<0.10;N
BA:P<0.05);及びL94(TNB:P<0.10;NBA:P<0.
05)について、リッターサイズ(ESRを含む後)の変動量は有意性があった
。
2.OPN対立遺伝子132は、L93及びL94においてリッターサイズにお
いて有意なポジティブな効果を示した。
3.他の対立遺伝子OPN122(L07)、OPN112及びOPN154(
L93)、さらにはOPN124(L94)は、有意なネガティブな効果を示し
た。実施例3
さらなる系統L03(他の大きな白色系統(large white based line))由来の
ゲノムDNAサンプルを得、分析した。結果は下記表5に示す。1,010同腹
子の記録を有する416匹の動物を分析した。
様々な異なるモデルを実験した。すべてのモデルは、農場の分娩月(farm-mont
hfarrowed)、パリティ及び種雄の効果を含んだ。ESRは、すべての分析にお
いて共可変(co-variable)として適合させた。
分析した特性は全出産数(TNB)及び生存出産数(NBA)であった。
使用したモデルは下記のとおりである:
1. 全出産数
=分娩月(farrow-month)+雄種+ESR+OPN対立遺伝子
2. TNBまたはNBA
=分娩月+雄種+ESR+OPN112+OPN122等
上記データから、OPN124は各対立遺伝子のコピーに対して0.7のTN
Bで有意な(P<0.01)ポジティブな効果を示すことが示される。さらに、
OPN142は、L03においてリッターサイズについてネガティブな効果を有
する傾向を示し、これと同様の効果がL93において認められた。
上述したように、他の遺伝子、ESR、は、ブタのリッターサイズに影響を及
ぼすことが示され、また、リッターサイズに関連する他の遺伝子もまた将来同定
されると考えられる。我々は、OPN及びESRという2種の異なる遺伝子の特
定の有用な対立遺伝子の組み合わせがリッターサイズにさらに影響を及ぼすか否
かを調べた。
上記可能性を試験するために、我々は、リッターサイズとESR及びOPNの
対立遺伝子の様々な組み合わせとの関連を模索した。結果は下記表4及び5に示
すが、これから、OPNの真に有用な対立遺伝子はESRの有用な対立遺伝子と
ポジティブに組み合わすことにより、OPN及びESR単独の有用な対立遺伝子
を使用する際に得られるよりも優れたリッターサイズの特長が得られることが示
される。
括弧で括ってあるリッターサイズ効果はOPN 132またはESR B=+0.39
の効果を呈する以外はリッターサイズ効果は完全に加算性である
(OPN 132 = +0.49;ESR B = +0.34)。
【手続補正書】特許法第184条の8第1項
【提出日】1997年6月3日
【補正内容】
請求の範囲
1.以下の段階からなる、より多くの同腹子を産するとより考えられるブタ、
および/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定するため
のブタのスタリーニング方法:
(i) ブタからゲノムDNAのサンプルを得る;および
(ii)(i)で得られたゲノムDNAを分析して、どのオステオポンチン(O
PN)対立遺伝子が存在するかを決定する。
2.段階(ii)におけるOPN対立遺伝子の決定がOPNに直接的にあるい
は間接的に連結する少なくとも一のDNAマーカーと結合する少なくとも一の対
立遺伝子の存在を決定することからなる、請求の範囲第1項に記載の方法。
3.該DNAマーカーがミクロサテライトである、請求の範囲第2項に記載の
方法。
4.該DNAマーカーがSw1085、Sw194、Sw16、Sw790、
So178またはSw61である、請求の範囲第3項に記載の方法。
5.ミクロサテライトと結合する領域とハイブリッド形成することが可能な一
以上のプライマーをゲノムDNAのサンプルに添加した後、一以上のPCRサイ
クルを行い、プライマー伸張産物を得る、請求の範囲第4項に記載の方法。
6.ゲノムDNAのサンプル中に存在するOPNの一の対立遺伝子または複数
の対立遺伝子が
16.以下の段階からなる、ブタのOPN遺伝子と結合するDNAマーカーに関
するどの対立遺伝子がより多くのリッターサイズと関連するかを決定する方法:
(i) 一以上のブタからゲノムDNAを得る;
(ii) どの対立遺伝子がOPN遺伝子と結合する特定のDNAマーカーにつ
いて存在するかを決定する;
(iii)段階(ii)の結果をより多くのリッターサイズを産することが既知
の一以上のブタで同様に行われた測定結果と比較する。
17.以下の段階からなる、より多くの同腹子を産するとより考えられるブタ、
および/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定するため
のブタのスクリーニング方法:
(i) ブタからゲノムDNAのサンプルを得る;
(ii) (i)で得られたゲノムDNAを分析して、どのOPN対立遺伝子が
存在するかを決定する;および
(iii)(i)で得られたゲノムDNAを分析して、ブタのリッターサイズに
関連する少なくとも一の他の遺伝子のどの対立遺伝子が存在するかを決定する。
18.該少なくとも一の他の遺伝子がエストロゲンレセプター(ESR)遺伝子
である、請求の範囲第17項に記載の方法。
19.請求の範囲第2から7項のいずれかに記載の一以上の態様によって修飾さ
れる請求の範囲第17項または第18項に記載の方法。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(81)指定国 EP(AT,BE,CH,DE,
DK,ES,FI,FR,GB,GR,IE,IT,L
U,MC,NL,PT,SE),OA(BF,BJ,CF
,CG,CI,CM,GA,GN,ML,MR,NE,
SN,TD,TG),AP(KE,LS,MW,SD,S
Z,UG),UA(AM,AZ,BY,KG,KZ,MD
,RU,TJ,TM),AL,AM,AT,AU,AZ
,BB,BG,BR,BY,CA,CH,CN,CZ,
DE,DK,EE,ES,FI,GB,GE,HU,I
L,IS,JP,KE,KG,KP,KR,KZ,LK
,LR,LS,LT,LU,LV,MD,MG,MK,
MN,MW,MX,NO,NZ,PL,PT,RO,R
U,SD,SE,SG,SI,SK,TJ,TM,TR
,TT,UA,UG,US,UZ,VN
(72)発明者 プラストウ,グラハム,ステュアート
イギリス国,ケンブリッジシャイア シー
ビー7 5エッチユー,ソハム,ミル コ
ーナー 6
(72)発明者 サウスウッド,オルウェン,イレーネ
イギリス国,オックスフォードシャイア
オーエックス12 7イーイー,ウァンテー
ジ,チャールトン ハイツ,エルム ロー
ド 29
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.以下の段階からなる、より多くの同腹子を産するとより考えられるブタ、 および/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定するため のブタのスクリーニング方法: (i) ブタからゲノムDNAのサンプルを得る;および (ii)(i)で得られたゲノムDNAを分析して、どのOPN対立遺伝子が存 在するかを決定する。 2.段階(ii)におけるOPN対立遺伝子の決定がOPNに直接的にあるい は間接的に連結する少なくとも一のDNAマーカーと結合する少なくとも一の対 立遺伝子の存在を決定することからなる、請求の範囲第1項に記載の方法。 3.該DNAマーカーがミクロサテライトである、請求の範囲第2項に記載の 方法。 4.該DNAマーカーがSw1085、Sw194、Sw16、Sw790、 So178またはSw61である、請求の範囲第3項に記載の方法。 5.ミクロサテライトと結合する領域とハイブリッド形成することが可能な一 以上のプライマーをゲノムDNAのサンプルに添加した後、一以上のPCRサイ クルを行い、プライマー伸張産物を得る、請求の範囲第4項に記載の方法。 6.ゲノムDNAのサンプル中に存在するOPNの一の対立遺伝子または複数 の対立遺伝子がプライマー伸張産物の長さを参照することにより決定される、請 求の範囲第5項に記載の方法。 7.一以上の下記プライマーを使用する、請求の範囲第5項または第6項に記 載の方法: GCTAGTTAATGACATTGTACATAA; CCAATCCTATTCACGAAAAAGC; GTGTCATGAGGTTTTTTCCACTGC;または CAACCCACTTGCTCCCAC。 8.以下の段階からなる、より多くの同腹子を産するとより考えられるブタ、 および/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定するため のブタのスクリーニング方法: (i) ブタからゲノムDNAのサンプルを得る; (ii) (i)のゲノムDNAを一またはそれ以上の適当なプライマーとハイ ブリッド形成させる; (iii)(ii)のハイブリッド形成した核酸を用いて一回またはそれ以上の PCRサイクルを行う;および (iv) (iii)で得られたPCR産物の長さを分析する。 9.請求の範囲第2から4項の一以上の態様によって修飾される請求の範囲第 8項に記載の方法。 10.一以上の下記プライマーを使用する、請求の範囲第9項に記載の方法: GCTAGTTAATGACATTGTACATAA; CCAATCCTATTCACGAAAAAGC; GTGTCATGAGGTTTTTTCCACTGC;または CAACCCACTTGCTCCCAC。 11.ブタのゲノムDNAのサンプルにおいてOPN対立遺伝子を同定できる一 以上の試薬または材料からなる、より多くの同腹子を産するとより考えられるブ タ、および/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定する ためのブタのスクリーニング用キット。 12.OPN遺伝子に連結されるDNAマーカーと結合する対立遺伝子を同定で きる試薬または材料からなる、請求の範囲第11項に記載のキット。 13.該DNAマーカーがミクロサテライトであり、該キットがミクロサテライ トと結合するゲノムDNAの領域にハイブリッド形成できる一以上のDNAプラ イマーからなる、請求の範囲第12項に記載のキット。 14.一以上の下記プライマーを含ませる、請求の範囲第13項に記載のキット : GCTAGTTAATGACATTGTACATAA; CCAATCCTATTCACGAAAAAGC; GTGTCATGAGGTTTTTTCCACTGC;または CAACCCACTTGCTCCCAC。 15.標準的なPCR試薬を含む、請求の範囲第13項または第14項に記載の キット。 16.以下の段階からなる、ブタのOPN遺伝子と結合するDNAマーカーに関 するどの対立遺伝子がより多くのリッターサイズと関連するかを決定する方法: (i) 一以上のブタからゲノムDNAを得る; (ii) どの対立遺伝子がOPN遺伝子と結合する特定のDNAマーカーにつ いて存在するかを決定する; (iii)段階(ii)の結果をより多くのリッターサイズを産することが既知 の一以上のブタで同様に行われた測定結果と比較する。 17.以下の段階からなる、より多くの同腹子を産するとより考えられるブタ、 および/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定するため のブタのスクリーニング方法: (i) ブタからゲノムDNAのサンプルを得る; (ii) (i)で得られたゲノムDNAを分析して、どのOPN対立遺伝子が 存在するかを決定する;および (iii)(i)で得られたゲノムDNAを分析して、ブタのリッターサイズに 関連する少なくとも一の他の遺伝子のどの対立遺伝子が存在するかを決定する。 18.該少なくとも一の他の遺伝子がESRである、請求の範囲第17項に記載 の方法。 19.請求の範囲第2から7項のいずれかに記載の一以上の態様によって修飾さ れる請求の範囲第17項または第18項に記載の方法。 20.ブタのゲノムDNAのサンプルにおいてOPN対立遺伝子を同定できる一 以上の試薬または材料、およびブタのゲノムDNAのサンプルにおけるブタのリ ッターサイズに関連する少なくとも一の他の遺伝子の対立遺伝子を同定できる一 以上の試薬または材料からなる、より多くの同腹子を産するとより考えられるブ タ、および/またはより同腹子を産するとはあまり考えられないブタを決定する ためのブタのスクリーニング用キット。 21.該少なくとも一の他の遺伝子がESRである、請求の範囲第20項に記載 のキット。 22.請求の範囲第12から15項のいずれかに記載の一以上の態様によって修 飾される請求の範囲第20項または第21項に記載のキット。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB9511888.1A GB9511888D0 (en) | 1995-06-12 | 1995-06-12 | DNA markers for litter size |
GB9511888.1 | 1995-06-12 | ||
PCT/GB1996/001408 WO1996041892A1 (en) | 1995-06-12 | 1996-06-12 | Dna markers for pig litter size |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH11507548A true JPH11507548A (ja) | 1999-07-06 |
Family
ID=10775917
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP9502797A Pending JPH11507548A (ja) | 1995-06-12 | 1996-06-12 | ブタのリッターサイズ用dnaマーカー |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6410227B1 (ja) |
EP (1) | EP0879296B1 (ja) |
JP (1) | JPH11507548A (ja) |
KR (1) | KR100441311B1 (ja) |
CN (1) | CN1191576A (ja) |
AT (1) | ATE215129T1 (ja) |
AU (1) | AU723769B2 (ja) |
BR (1) | BR9608763A (ja) |
CA (1) | CA2224394A1 (ja) |
CZ (1) | CZ401797A3 (ja) |
DE (1) | DE69620249T2 (ja) |
DK (1) | DK0879296T3 (ja) |
ES (1) | ES2175095T3 (ja) |
GB (1) | GB9511888D0 (ja) |
MX (1) | MX9710091A (ja) |
NZ (1) | NZ309858A (ja) |
PL (1) | PL184518B1 (ja) |
PT (1) | PT879296E (ja) |
RU (1) | RU2162895C2 (ja) |
WO (1) | WO1996041892A1 (ja) |
Families Citing this family (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9511888D0 (en) | 1995-06-12 | 1995-08-09 | Dalgety Plc | DNA markers for litter size |
ATE215610T1 (de) | 1995-07-27 | 2002-04-15 | Dalgety Plc | Verfahren zur bestimmung des hautfärbung-genotyps eines schweins |
US7081335B2 (en) | 1996-07-19 | 2006-07-25 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Prolactin receptor gene as a genetic marker for increased litter size in animals |
US5935784A (en) * | 1996-07-19 | 1999-08-10 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Prolactin receptor gene as a genetic marker for increased litter size in pigs |
US5939264A (en) * | 1996-07-19 | 1999-08-17 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Genes and genetic markers for improved reproductive traits in animals |
GB9722027D0 (en) | 1997-10-17 | 1997-12-17 | Melica Hb | Methods |
US6291174B1 (en) | 1998-06-10 | 2001-09-18 | Pig Improvement Company Uk Limited | DNA markers for pig litter size |
WO2000042218A1 (en) * | 1999-01-15 | 2000-07-20 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Retinol binding protein 4 as a genetic marker for increased litter size |
GB0110036D0 (en) * | 2001-04-24 | 2001-06-13 | Pig Improvement Co Uk Ltd | Methods |
KR100444160B1 (ko) * | 2002-01-05 | 2004-08-09 | 학교법인고려중앙학원 | 돼지 산자수 관련 dna 표지인자 |
KR100532592B1 (ko) * | 2002-10-30 | 2005-12-05 | 진주산업대학교 산학협력단 | 일당증체량, 등지방두께, 등심단면적이 우수한 돼지 조기선발 분석 기법 |
KR100487995B1 (ko) * | 2002-12-07 | 2005-05-06 | 대한민국(진주산업대학교총장) | 육질이 우수한 돼지 유전인자의 조기 선발 분석방법 |
KR100649352B1 (ko) * | 2005-04-30 | 2006-11-27 | 주식회사 하이닉스반도체 | 반도체소자의 제조 방법 |
US20110054246A1 (en) * | 2009-08-28 | 2011-03-03 | Clutter Archie C | Whole genome scan to discover quantitative trai loci (qtl) affecting growth, body composition, and reproduction in maternal pig lines |
KR101735075B1 (ko) | 2015-10-02 | 2017-05-12 | 경남과학기술대학교 산학협력단 | Dmr를 이용한 돼지의 산자수 예측용 조성물 및 예측방법 |
CN111996264B (zh) * | 2020-09-17 | 2022-05-17 | 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一种猪snp分子标记在猪繁殖性状筛选和猪育种中的应用 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0580767B1 (en) * | 1991-04-19 | 2000-12-27 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Genetic markers for pig litter size |
US5550024A (en) * | 1991-04-19 | 1996-08-27 | Biotechnology Research & Development Corporation | Genetic markers for pig litter size |
GB9511888D0 (en) | 1995-06-12 | 1995-08-09 | Dalgety Plc | DNA markers for litter size |
-
1995
- 1995-06-12 GB GBGB9511888.1A patent/GB9511888D0/en active Pending
-
1996
- 1996-06-12 CA CA002224394A patent/CA2224394A1/en not_active Abandoned
- 1996-06-12 AU AU60120/96A patent/AU723769B2/en not_active Ceased
- 1996-06-12 PT PT96917599T patent/PT879296E/pt unknown
- 1996-06-12 CN CN96195760A patent/CN1191576A/zh active Pending
- 1996-06-12 RU RU98100297/13A patent/RU2162895C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-06-12 WO PCT/GB1996/001408 patent/WO1996041892A1/en not_active Application Discontinuation
- 1996-06-12 CZ CZ974017A patent/CZ401797A3/cs unknown
- 1996-06-12 PL PL96324028A patent/PL184518B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-06-12 NZ NZ309858A patent/NZ309858A/xx unknown
- 1996-06-12 EP EP96917599A patent/EP0879296B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-12 BR BR9608763-3A patent/BR9608763A/pt not_active IP Right Cessation
- 1996-06-12 DE DE69620249T patent/DE69620249T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-12 AT AT96917599T patent/ATE215129T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-06-12 JP JP9502797A patent/JPH11507548A/ja active Pending
- 1996-06-12 ES ES96917599T patent/ES2175095T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-12 KR KR1019970709296A patent/KR100441311B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-06-12 DK DK96917599T patent/DK0879296T3/da active
-
1997
- 1997-12-11 MX MX9710091A patent/MX9710091A/es not_active IP Right Cessation
- 1997-12-12 US US08/989,915 patent/US6410227B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CZ401797A3 (cs) | 1998-08-12 |
KR19990022827A (ko) | 1999-03-25 |
PL324028A1 (en) | 1998-05-11 |
EP0879296B1 (en) | 2002-03-27 |
ES2175095T3 (es) | 2002-11-16 |
AU6012096A (en) | 1997-01-09 |
EP0879296A1 (en) | 1998-11-25 |
DE69620249T2 (de) | 2002-07-18 |
MX9710091A (es) | 1998-10-31 |
WO1996041892A1 (en) | 1996-12-27 |
CA2224394A1 (en) | 1996-12-27 |
DE69620249D1 (de) | 2002-05-02 |
GB9511888D0 (en) | 1995-08-09 |
CN1191576A (zh) | 1998-08-26 |
DK0879296T3 (da) | 2002-05-27 |
RU2162895C2 (ru) | 2001-02-10 |
NZ309858A (en) | 2000-01-28 |
US6410227B1 (en) | 2002-06-25 |
ATE215129T1 (de) | 2002-04-15 |
PL184518B1 (pl) | 2002-11-29 |
AU723769B2 (en) | 2000-09-07 |
BR9608763A (pt) | 1999-12-07 |
KR100441311B1 (ko) | 2004-11-26 |
PT879296E (pt) | 2002-09-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Schnabel et al. | Whole‐genome scan to detect QTL for milk production, conformation, fertility and functional traits in two US Holstein families | |
Feugang et al. | Two-stage genome-wide association study identifies integrin beta 5 as having potential role in bull fertility | |
US9856531B2 (en) | Methods and compositions for genetically detecting improved milk production traits in cattle | |
JPH11507548A (ja) | ブタのリッターサイズ用dnaマーカー | |
US5550024A (en) | Genetic markers for pig litter size | |
JP2002504814A (ja) | 動物生産物を分析する方法 | |
WO2003046203A2 (en) | Genetic markers associated with desirable and undesirable traits in horses, methods of identifying and using such markers | |
KR20000067924A (ko) | 피그의 새끼 크기 증가에 대한 유전 마아커로서의 프로락틴 | |
Grobler et al. | Challenges in selection and breeding of polled and scur phenotypes in beef cattle | |
CN110452995B (zh) | 影响嘉兴黑猪母猪繁殖性能的gpr54基因分子标记及其应用 | |
JPH11514212A (ja) | ブタ毛色ゲノタイプの決定方法 | |
JP5560503B2 (ja) | 黒毛和種の成長に関わる遺伝子変異 | |
CN113355427B (zh) | 一种与猪背膘厚相关的snp标记及其利用方法 | |
CN115011704A (zh) | 影响产仔间隔性状的snp分子标记及其应用 | |
Panasiewicz et al. | Novel effects of identified SNPs within the porcine Pregnancy-Associated Glycoprotein gene family (pPAGs) on the major reproductive traits in Hirschmann hybrid-line sows | |
Warner et al. | Genotyping: the HLA system and embryo development | |
US8158356B2 (en) | Screening for the genetic defect causing tibial hemimelia in bovines | |
CN115044666B (zh) | 一种用于预测母猪二胎综合征的snp分子标记及其应用 | |
JP4776037B2 (ja) | 遺伝情報によりブタ筋肉中脂肪蓄積能力を評価する方法 | |
JP2003530117A (ja) | ゲノム−断片の結合不等重量による同定及び分離方法 | |
AU2003226666B2 (en) | Method for identifying animals for milk production qualities by analyzing the polymorphism of the PIT-1 and kappa-casein genes | |
CN115011703A (zh) | 影响弱仔数性状的snp分子标记及其应用 | |
CN116121402A (zh) | 与苏山猪总***数关联的snp分子标记及应用 | |
Bailey | A genomic and quantitative evaluation of modern Charolais sired calves versus multigenerational Angus sired calves for growth and carcass quality and compostion traits | |
Burd | Detection of quantitative trait loci in swine by genome mapping and candidate gene approaches |