JPH11228451A - Anticancer action-enhancing medicine composition - Google Patents

Anticancer action-enhancing medicine composition

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JPH11228451A
JPH11228451A JP4468698A JP4468698A JPH11228451A JP H11228451 A JPH11228451 A JP H11228451A JP 4468698 A JP4468698 A JP 4468698A JP 4468698 A JP4468698 A JP 4468698A JP H11228451 A JPH11228451 A JP H11228451A
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JP
Japan
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antitumor
present
antitumor agent
agent
oligonucleotide
Prior art date
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Pending
Application number
JP4468698A
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Japanese (ja)
Inventor
Kunitaka Hirose
国孝 広瀬
Eiji Inoguchi
英司 井野口
Kenji Sakauchi
堅二 坂内
Kazumi Obara
かず美 小原
Yukako Ishida
裕香子 石田
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kureha Corp
Original Assignee
Kureha Corp
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Publication date
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain an antitumor action-enhancing medicine capable of exhibiting a sufficient antitumor action against cancer cells at a lower dose than a usual administration dose, and to provide an antitumor composition. SOLUTION: This antitumor action-enhancing medicine contains an oligonucleotide capable of hybridizing with a template region in a RNA portion contained in telomerase as an active ingredient. The antitumor composition contains the oligonucleotide and an antitumor medicine as active ingredients.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、抗腫瘍剤の抗腫瘍
作用増強剤及び抗腫瘍組成物に関する。
BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to an antitumor effect enhancer of an antitumor agent and an antitumor composition.

【0002】[0002]

【従来の技術】テロメラーゼは、細胞の癌化や老化との
関わりにおいて近年注目されている酵素であり、テロメ
アDNAを延長する作用を有する。テロメアは、短い繰
り返し塩基配列からなり、この塩基配列を基軸として、
多くのタンパク質を含む高次の複合体を形成し、染色体
の分解や染色体同士の癒合などを防ぐ機能を有する[P
roc.Natl.Acad.Sci.USA,85
6622−6626(1988)]。ヒトテロメアDN
Aは、TTAGGGの数百回に及ぶ繰り返し塩基配列か
らなり、この塩基配列は、細胞***の複製の度に5’末
端部分が短縮する[Nature,345,458−5
60(1990)]。テロメアDNAが一定の長さにま
で短縮されると細胞***の停止が起こると考えられてお
り、テロメアDNA長は***加齢を図る「時計」の役割
を果たすと推定されている[Nature,346,8
66−868(1990)]。テロメラーゼは、リボヌ
クレオタンパク質からなる酵素であり、鋳型RNAを介
して、染色体末端部にテロメアDNAを合成する[Na
ture,344,126−132(1990)]。
2. Description of the Related Art Telomerase is an enzyme that has recently attracted attention in connection with canceration and aging of cells, and has an action of elongating telomere DNA. Telomere consists of a short repeating base sequence, and with this base sequence as the axis,
It forms a high-order complex containing many proteins, and has a function to prevent chromosome degradation and chromosome fusion.
rc. Natl. Acad. Sci. USA, 85 ,
6622-6626 (1988)]. Human telomere DN
A is composed of several hundred repetitive nucleotide sequences of TTAGGG, and this nucleotide sequence is shortened at the 5 ′ end every time cell division replicates [Nature, 345 , 458-5].
60 (1990)]. It is thought that cell division arrest occurs when telomere DNA is shortened to a certain length, and telomere DNA length is estimated to play a role as a "clock" for division aging [Nature, 346]. , 8
66-868 (1990)]. Telomerase is an enzyme composed of ribonucleoprotein, and synthesizes telomere DNA at the end of chromosome via template RNA [Na
cure, 344 , 126-132 (1990)].

【0003】ヒトにおいては、生殖系列(germ l
ine)でテロメラーゼ活性が検出される場合がある
が、一般的には成人の正常組織ではテロメラーゼ活性は
検出されない[Dev.Genet,18,173−1
79(1996)]。一方、多くの悪性腫瘍において
は、テロメラーゼの高い活性が、テロメアの伸長ととも
に認められている。細胞が無限に***するためには、複
製の度に起こるテロメア短縮を補償する必要があり、多
くの場合に、テロメアを伸長するテロメラーゼ活性によ
ってテロメア長が維持されることが推定される[Sci
ence,266,2011−2015(1994);
Proc.Natl.Acad.Sci.USA,
,2882−2885(1994);Nature
Med.,,249−255(1995);Canc
er Res.,55,2734−2736(199
5);Cancer Res.,55,3258−32
62(1995);Cancer Res.,56,6
45−650(1996);及びJ.Natl.Can
cer Inst.,88,116−122(199
6)]。最近では、テロメラーゼ活性がプログラム死
(アポトーシス)のアンタゴニストであるBcl−2タ
ンパク質によって調節されていることを示す知見が得ら
れ、抗アポトーシス経路(anti−apoptoti
c pathway)を介して、多くの癌細胞における
テロメラーゼの活性化が発現する可能性が示されている
[J.Biol.Chem.,272,14183−1
4187(1997)]。これらの一連の情報等から、
テロメラーゼをターゲットとした制癌療法の可能性が考
えられるようになった[Cancer Res.,
,645−650(1996)]。
In humans, the germline (germl)
ine), telomerase activity is generally not detected in normal adult tissues [Dev. Genet, 18 , 173-1
79 (1996)]. On the other hand, in many malignant tumors, high telomerase activity is observed along with telomere elongation. In order for cells to divide indefinitely, it is necessary to compensate for telomere shortening that occurs with each replication, and it is presumed that telomere length is often maintained by telomerase activity that extends telomeres [Sci.
ence, 266 , 2011-2015 (1994);
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 9
1 , 2882-2885 (1994); Nature.
Med. , 1 , 249-255 (1995); Canc.
er Res. , 55 , 2734-2736 (199).
5); Cancer Res. , 55 , 3258-32
62 (1995); Cancer Res. , 56 , 6
45-650 (1996); Natl. Can
cer Inst. , 88 , 116-122 (199
6)]. Recently, findings have been obtained indicating that telomerase activity is regulated by the Bcl-2 protein, an antagonist of programmed death (apoptosis), and the anti-apoptotic pathway (anti-apoptotic) has been obtained.
c pathway) has been shown to potentially activate telomerase in many cancer cells [J. Biol. Chem. , 272 , 14183-1
4187 (1997)]. From these series of information, etc.,
The possibility of anticancer therapy targeting telomerase has been considered [Cancer Res. , 5
6 , 645-650 (1996)].

【0004】[0004]

【発明が解決しようとする課題】このようなテロメラー
ゼをターゲットとしたアンチセンス療法として、例え
ば、ヒトテロメラーゼに含まれるRNA部分に対するア
ンチセンスDNAのヒト癌細胞(HeLa細胞)への導
入により、テロメラーゼ活性が消失し、細胞***ととも
にテロメアDNAが短縮し、約25回の細胞***の後に
細胞が死に至ることが報告されている[Scienc
e,269,1236−1241(1995)]。しか
しながら、この方法では、約25回の***が終了するま
では癌細胞が増殖し続けるはずであるから、その間は癌
組織として大きくなり続け、抗癌剤として使用するに
は、効果が表われるまでの期間が長すぎる欠点がある。
As such antisense therapy targeting telomerase, for example, telomerase activity is increased by introducing antisense DNA to an RNA portion contained in human telomerase into human cancer cells (HeLa cells). Have been reported to decrease, telomere DNA shortens with cell division, and cells die after about 25 cell divisions [Scienc].
e, 269 , 1236-1241 (1995)]. However, in this method, cancer cells should continue to proliferate until about 25 divisions have been completed, during which time they continue to grow as cancerous tissues, and when used as an anticancer drug, the period until the effect appears. Has the disadvantage of being too long.

【0005】一方、現在一般的に用いられている抗癌剤
を用いた化学療法では、薬剤の有効投与量において、細
胞に非特異的にDNA傷害や転写阻害が生じる場合が多
く、耐薬量や細胞毒性を考慮しつつ、投与量の制限を余
儀なくされる場合が少なくない。本発明者は、抗腫瘍剤
を投与する際に、テロメラーゼに含まれるRNA部分の
特定領域の塩基配列に対するアンチセンスDNAを併用
投与すると、従来よりも少量の抗腫瘍剤で充分な抗腫瘍
作用を示すことができることを見出した。前記アンチセ
ンスDNAが抗腫瘍剤の抗腫瘍作用を増強することは、
従来全く知られておらず、本発明は、こうした知見に基
づくものである。
On the other hand, in the chemotherapy using an anticancer drug which is generally used at present, in many cases, DNA damage or transcriptional inhibition occurs nonspecifically in cells at an effective dose of the drug, and the drug dose or cytotoxicity is high. In many cases, it is necessary to limit the dose in consideration of the above. The present inventor has found that when an antitumor agent is administered, when an antisense DNA against a base sequence of a specific region of an RNA portion contained in telomerase is administered in combination, a sufficient antitumor effect can be obtained with a smaller amount of an antitumor agent than before. It has been found that it can be shown. The antisense DNA enhances the antitumor effect of the antitumor agent,
The present invention is not known at all, and the present invention is based on such knowledge.

【0006】[0006]

【課題を解決するための手段】本発明は、テロメラーゼ
に含まれるRNA部分における鋳型領域にハイブリダイ
ズ可能なオリゴヌクレオチドを有効成分として含有する
ことを特徴とする、抗腫瘍剤の抗腫瘍作用増強剤に関す
る。また、本発明は、テロメラーゼに含まれるRNA部
分における鋳型領域にハイブリダイズ可能なオリゴヌク
レオチドと、抗腫瘍剤とを有効成分として含有すること
を特徴とする、抗腫瘍組成物にも関する。
DISCLOSURE OF THE INVENTION The present invention provides an agent for enhancing the antitumor activity of an antitumor agent, which comprises, as an active ingredient, an oligonucleotide capable of hybridizing to a template region in an RNA portion contained in telomerase. About. The present invention also relates to an antitumor composition comprising an oligonucleotide capable of hybridizing to a template region in an RNA portion contained in telomerase and an antitumor agent as active ingredients.

【0007】[0007]

【発明の実施の形態】以下、本発明について詳細に説明
する。本発明による抗腫瘍作用増強剤、又は本発明によ
る抗腫瘍組成物において有効成分として用いるオリゴヌ
クレオチドは、テロメラーゼに含まれるRNA部分(以
下、鋳型RNAと称する)における鋳型領域にハイブリ
ダイズ可能なオリゴヌクレオチド、すなわち、鋳型領域
の塩基配列に対して相補的な塩基配列を含むオリゴヌク
レオチドである。本明細書において「鋳型RNAにおけ
る鋳型領域」とは、テロメラーゼに含まれているRNA
部分の内、テロメア配列に相補的な領域を意味する。前
記テロメア配列とは、染色体の末端領域に存在し、短い
反復配列が数十回から数百回繰り返す塩基配列を意味す
る。テロメラーゼは、微生物から高等動物(ヒトを含
む)に至る生物一般に存在する酵素であり、現在、各種
生物において、テロメア配列における前記反復配列、及
び鋳型領域の配列が知られている。例えば、哺乳類にお
いては、ヒト及びマウスの各配列が知られており、ヒト
又はマウスのテロメア配列における前記反復配列は、 5’−TTAGGG−3’ であり、ヒト又はマウスにおける前記鋳型領域は、 5’−CAAUCCCAAUC−3’ である。現在のところ、その配列が明らかにされていな
い生物の前記各配列も、公知の手段により容易に決定す
ることができる。
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Hereinafter, the present invention will be described in detail. The antitumor effect enhancer according to the present invention or the oligonucleotide used as an active ingredient in the antitumor composition according to the present invention is an oligonucleotide capable of hybridizing to a template region in an RNA portion (hereinafter referred to as template RNA) contained in telomerase. That is, it is an oligonucleotide containing a base sequence complementary to the base sequence of the template region. As used herein, the term "template region in template RNA" refers to RNA contained in telomerase.
It means the region that is complementary to the telomere sequence. The telomere sequence means a nucleotide sequence which is present in a terminal region of a chromosome and in which a short repetitive sequence is repeated several tens to several hundred times. Telomerase is an enzyme generally present in organisms ranging from microorganisms to higher animals (including humans). At present, the sequence of the repetitive sequence in the telomere sequence and the sequence of the template region are known in various organisms. For example, in mammals, human and mouse sequences are known, the repeat sequence in the human or mouse telomere sequence is 5′-TTAGGG-3 ′, and the template region in human or mouse is '-CAAUCCCAAUC-3'. At present, each of the above-mentioned sequences of an organism whose sequence has not been determined can also be easily determined by known means.

【0008】本発明において有効成分として用いるオリ
ゴヌクレオチドの塩基数は、特に限定されるものではな
いが、鋳型RNAにおける前記の鋳型領域に特異的にハ
イブリタイズ可能な塩基数以上であることが好ましく、
細胞膜や核膜を透過することのできる塩基数以下である
ことが好ましい。鋳型RNAにおける鋳型領域に特異的
にハイブリタイズ可能な前記の塩基数は、好ましくは1
0塩基以上、より好ましくは13塩基以上である。ま
た、膜透過性を保証するためには、好ましくは100塩
基以下、より好ましくは50塩基以下である。従って、
本発明で用いるオリゴヌクレオチドは、好ましくは10
〜100塩基、より好ましくは13〜50塩基からな
る。
[0008] The number of bases of the oligonucleotide used as an active ingredient in the present invention is not particularly limited, but is preferably at least the number of bases capable of specifically hybridizing to the template region in the template RNA,
It is preferable that the number of bases is equal to or less than the number of bases that can pass through a cell membrane or a nuclear membrane. The number of bases capable of specifically hybridizing to the template region in the template RNA is preferably 1
It has 0 bases or more, more preferably 13 bases or more. In order to ensure membrane permeability, it is preferably 100 bases or less, more preferably 50 bases or less. Therefore,
The oligonucleotide used in the present invention is preferably 10
-100 bases, more preferably 13-50 bases.

【0009】本発明で用いるオリゴヌクレオチドには、
鋳型RNAにおける鋳型領域と特異的に結合して二重鎖
を形成することができる限り、鋳型RNAにおける鋳型
領域に相補的な塩基配列を連続して含む必要はなく、非
相補的塩基1又はそれ以上が、1又はそれ以上の箇所で
欠失、挿入及び/又は置換されていることができる。本
発明で用いるオリゴヌクレオチドは、鋳型RNAにおけ
る鋳型領域の塩基配列からなるDNAとハイストリンジ
ェントな条件下[例えば、25℃での2×SSC(0.
3M塩化ナトリウム及び0.03Mクエン酸ナトリウ
ム)中]でハイブリダイズするオリゴヌクレオチドが好
ましく、鋳型RNAにおける鋳型領域に相補的な塩基配
列を連続して含むオリゴヌクレオチドが特に好ましい。
The oligonucleotide used in the present invention includes:
It is not necessary to continuously include a base sequence complementary to the template region in the template RNA, as long as it can specifically bind to the template region in the template RNA to form a duplex, and may include the non-complementary base 1 or The above can be deleted, inserted and / or substituted at one or more points. Oligonucleotides used in the present invention may be used under conditions of high stringency with DNA consisting of the base sequence of the template region in the template RNA [for example, 2 × SSC (0.
In 3M sodium chloride and 0.03M sodium citrate), and an oligonucleotide containing a continuous base sequence complementary to the template region in the template RNA is particularly preferred.

【0010】本発明において用いるオリゴヌクレオチド
において、各ヌクレオシド間のインターヌクレオチド結
合は、それぞれ独立に、リン酸ジエステル結合、又は修
飾リン酸ジエステル結合である。修飾リン酸ジエステル
結合としては、例えば、リン酸ジエステル結合の非架橋
酸素原子2個のうちの酸素原子1個をメチル基に置換し
たメチルホスホネート型結合、リン酸ジエステル結合の
非架橋酸素原子2個のうちの酸素原子1個をアミノ基若
しくは置換アミノ基に置換したホスホロアミデート型結
合、リン酸ジエステル結合の非架橋酸素原子2個のうち
の酸素原子1個を硫黄原子に置換したホスホロチオエー
ト型結合、又はリン酸ジエステル結合の非架橋酸素原子
2個のうちの酸素原子2個を硫黄原子2個に置換したホ
スホロジチオエート型結合などを挙げることができ、そ
れらの1種又はそれ以上を、ヌクレオシド間の結合の1
箇所又はそれ以上の箇所に導入することができる。塩基
配列特異性、二重鎖安定性、抗ヌクレアーゼ耐性、細胞
膜透過性、低細胞毒性と適度な代謝性、及び簡便な調製
法などの点から、修飾されたリン酸ジエステル結合であ
ることが好ましく、生体内での安定性がよいことから、
ホスホロチオエート型結合であることが特に好ましい。
更に、半分以上(特には全部)のヌクレオシド間の結合
が修飾されたリン酸ジエステル結合(特には、ホスホロ
チオエート型結合)であることが特に好ましい。
[0010] In the oligonucleotide used in the present invention, the internucleotide bond between each nucleoside is independently a phosphodiester bond or a modified phosphodiester bond. Examples of the modified phosphodiester bond include a methylphosphonate-type bond in which one oxygen atom of two non-crosslinking oxygen atoms of a phosphodiester bond is substituted with a methyl group, and two non-crosslinking oxygen atoms of a phosphodiester bond A phosphoramidate-type bond in which one oxygen atom is substituted with an amino group or a substituted amino group, and a phosphorothioate type in which one oxygen atom of two non-crosslinked oxygen atoms in a phosphodiester bond is substituted with a sulfur atom Or a phosphorodithioate-type bond in which two oxygen atoms of two non-bridging oxygen atoms of a phosphodiester bond are substituted with two sulfur atoms, and one or more of these are bonded. , One of the bonds between nucleosides
It can be introduced at a point or more. From the viewpoint of nucleotide sequence specificity, double-stranded stability, antinuclease resistance, cell membrane permeability, low cytotoxicity and moderate metabolism, and a simple preparation method, it is preferable that the modified phosphodiester bond is a modified phosphodiester bond. , Because of its good stability in vivo
Particularly preferred are phosphorothioate-type bonds.
Further, it is particularly preferable that at least half (particularly all) of the bonds between nucleosides are modified phosphodiester bonds (particularly, phosphorothioate type bonds).

【0011】本発明において用いるオリゴヌクレオチド
は、鋳型RNAにおける鋳型領域と特異的に結合して二
重鎖を形成することができる限り、デオキシヌクレオシ
ド、リボヌクレオシド、及び/又はそれらの修飾リボヌ
クレオシド、例えば、2’−O−修飾リボヌクレオシド
から形成することができる。修飾リボヌクレオシドとし
ては、標的となる塩基配列との結合力の強さの点から、
2’−O−メチルリボヌクレオシドが好ましい。従っ
て、本発明において用いるオリゴヌクレオチドは、リボ
ヌクレオシド及び/又は修飾リボヌクレオシドからなる
オリゴリボヌクレオチド(RNA)、デオキシリボヌク
レオシドのみからなるオリゴデオキシリボヌクレオチド
(DNA)、あるいはリボヌクレオシド(及び/又は修
飾リボヌクレオシド)とデオキシリボヌクレオシドとの
両方からなるキメラオリゴリボ/デオキシリボヌクレオ
チド(RNA/DNA)であることができる。
The oligonucleotide used in the present invention is a deoxynucleoside, a ribonucleoside, and / or a modified ribonucleoside thereof, for example, as long as it can specifically bind to the template region of the template RNA to form a duplex. , 2'-O-modified ribonucleosides. As a modified ribonucleoside, from the viewpoint of the strength of binding to the target base sequence,
2'-O-methyl ribonucleoside is preferred. Therefore, the oligonucleotide used in the present invention is an oligoribonucleotide (RNA) composed of ribonucleoside and / or modified ribonucleoside, an oligodeoxyribonucleotide (DNA) composed only of deoxyribonucleoside, or a ribonucleoside (and / or modified ribonucleoside). And chimeric oligoribo / deoxyribonucleotides (RNA / DNA) consisting of both oxynucleotides and deoxyribonucleosides.

【0012】ヒト鋳型RNAにおける鋳型領域にハイブ
リダイズ可能なオリゴヌクレオチドとしては、例えば、
配列表の配列番号1の配列で表される塩基配列を有する
オリゴヌクレオチドを挙げることができる。
Oligonucleotides that can hybridize to the template region in human template RNA include, for example,
An oligonucleotide having a base sequence represented by SEQ ID NO: 1 in the sequence listing can be mentioned.

【0013】本発明において用いるオリゴヌクレオチド
は、公知の方法で合成することができる。2’−O−メ
チルリボヌクレオチド又はホスホロチオエート結合を導
入する部位を除いては、例えば、通常のホスホジエステ
ル法又はホスホトリエステル法、例えば、H−ホスホネ
ート法、又はホスホロアミダイト法によるDNA/RN
A自動合成機を利用して合成することができる。2’−
O−メチルリボヌクレオチドを有するオリゴヌクレオチ
ドは、例えば、5’−ジメトキシトリチル−2’−O−
メチルリボヌクレオシド−3’−〔(2−シアノエチ
ル)−(N,N−ジイソプロピル)〕−ホスホロアミダ
イトユニットを用いて、ホスホロアミダイト法によるD
NA/RNA自動合成機を利用して合成することができ
る。ホスホロチオエート結合を有するオリゴヌクレオチ
ドは、例えば、通常のポリヌクレオチド合成に用いられ
る酸化剤である水/ヨウ素/ピリジン溶液の代わりに、
15%N,N,N’,N’−テトラエチルチオラムジス
ルフィド/アセトニトリル溶液を用いて合成することが
できる。
The oligonucleotide used in the present invention can be synthesized by a known method. Except for the site for introducing a 2′-O-methyl ribonucleotide or phosphorothioate bond, for example, DNA / RN by the usual phosphodiester method or phosphotriester method, for example, H-phosphonate method or phosphoramidite method
A It can be synthesized using an automatic synthesizer. 2'-
Oligonucleotides having O-methylribonucleotides are, for example, 5'-dimethoxytrityl-2'-O-
Using a phosphoramidite method, methylribonucleoside-3 ′-[(2-cyanoethyl)-(N, N-diisopropyl)]-phosphoramidite unit is used.
It can be synthesized using an NA / RNA automatic synthesizer. Oligonucleotides having a phosphorothioate linkage can be used, for example, instead of a water / iodine / pyridine solution which is an oxidizing agent used for ordinary polynucleotide synthesis.
It can be synthesized using a 15% N, N, N ', N'-tetraethylthiolamb disulfide / acetonitrile solution.

【0014】本発明において用いるオリゴヌクレオチド
の膜透過性を向上させるために、種々の公知の方法を利
用することもできる。公知の方法としては、例えば、リ
ポソームに包埋する方法[Cancer Res.,
,7826(1991)]、コレステロールをオリゴ
マーの末端に導入する方法[Nucleic Acid
s Res.,20,533(1993)]、トランス
フェリン−ポリ−L−リジン複合体[Proc.Nat
l.Acad.Sci.USA,89,7031(19
92)]と非共有的に結合させ、それぞれガラクトース
レセプターを発現する肝細胞や、トランスフェリンレセ
プターを発現する癌細胞に、特異的にオリゴマーを取り
込ませる方法、あるいは、カチオン性の脂質(例えば、
リポフェクチン)をオリゴマーと相互作用させ、標的細
胞に加えることにより、細胞内への取り組み、更には核
内への移行を増大させ、アンチセンス効果を強める方法
[J.Biol.Chem.,266,18162(1
991)]などを挙げることができる。本発明において
用いるオリゴヌクレオチドは、リポソーム[例えば、正
荷電リポソーム(コートソームEL−C−01,日本油
脂)など]に包埋して膜透過性を向上させることが好ま
しい。
In order to improve the membrane permeability of the oligonucleotide used in the present invention, various known methods can be used. Known methods include, for example, a method of embedding in liposomes [Cancer Res. , 5
0 , 7826 (1991)], a method of introducing cholesterol to the terminal of an oligomer [Nucleic Acid]
s Res. , 20 , 533 (1993)], transferrin-poly-L-lysine complex [Proc. Nat
l. Acad. Sci. USA, 89 , 7031 (19
92)] in a non-covalent manner to specifically incorporate oligomers into hepatocytes expressing the galactose receptor or cancer cells expressing the transferrin receptor, respectively, or by using a cationic lipid (for example,
Lipofectin) interacts with oligomers and is added to target cells to increase intracellular approach, translocation into the nucleus, and enhance antisense effects [J. Biol. Chem. , 266 , 18162 (1
991)]. The oligonucleotide used in the present invention is preferably embedded in a liposome [for example, a positively charged liposome (Coatsome EL-C-01, Nippon Oil & Fat) and the like] to improve membrane permeability.

【0015】本発明による抗腫瘍作用増強剤によって、
その抗腫瘍作用が増強される抗腫瘍剤、あるいは、本発
明による抗腫瘍組成物において有効成分として用いる抗
腫瘍剤としては、それ自体単独で抗腫瘍作用を有する化
合物である限り特に限定されるものではなく、例えば、
癌治療に用いることのできる化学療法剤を挙げることが
できる。前記化学療法剤としては、例えば、アルキル化
剤(例えば、メルファラン、カルボコン、又はシクロホ
スファミドなど)、制癌性金属錯体[例えば、シスプラ
チン(CDDP)など]、抗生物質[例えば、アドリア
マイシン、又はマイトマイシンC(MMC)など]、代
謝拮抗剤(例えば、シタラビン、フルオロウラシル、又
はメソトレキセートなど)、植物製剤[例えば、ビンク
リスチン、ビンデシン(VDS)又はビンブラスチンな
ど]、又はDNAトポイソメラーゼII阻害剤[例えば、
エトポシド(VP−16)]などを挙げることができ
る。
The antitumor effect enhancer according to the present invention
The antitumor agent whose antitumor activity is enhanced, or the antitumor agent used as an active ingredient in the antitumor composition according to the present invention is particularly limited as long as it is a compound having an antitumor effect by itself. But, for example,
Examples include chemotherapeutic agents that can be used for treating cancer. Examples of the chemotherapeutic agent include alkylating agents (eg, melphalan, carbone, or cyclophosphamide), anticancer metal complexes [eg, cisplatin (CDDP), etc.], antibiotics [eg, adriamycin, Or mitomycin C (MMC)), antimetabolites (eg, cytarabine, fluorouracil, or methotrexate), plant preparations [eg, vincristine, vindesine (VDS) or vinblastine, etc.], or DNA topoisomerase II inhibitors [eg,
Etoposide (VP-16)].

【0016】本発明による抗腫瘍作用増強剤は、有効成
分として、鋳型RNAにおける鋳型領域にハイブリダイ
ズ可能なオリゴヌクレオチドを含有し、所望により、製
剤学的若しくは獣医学的に許容することのできる通常の
担体を含有することができる。また、本発明による抗腫
瘍組成物は、有効成分として、前記オリゴヌクレオチド
と抗腫瘍剤とを含有し、所望により、製剤学的若しくは
獣医学的に許容することのできる通常の担体を含有する
ことができる。
The antitumor effect enhancer according to the present invention contains, as an active ingredient, an oligonucleotide capable of hybridizing to the template region of the template RNA, and if necessary, can be pharmaceutically or veterinarily acceptable. May be contained. In addition, the antitumor composition according to the present invention contains the oligonucleotide and the antitumor agent as active ingredients, and, if desired, contains a usual carrier that is pharmaceutically or veterinarily acceptable. Can be.

【0017】本発明による抗腫瘍作用増強剤、又は本発
明による抗腫瘍組成物の投与剤型としては、特に限定が
なく、例えば、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル
剤、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エキス剤、
若しくは丸剤等の経口剤、又は注射剤、外用液剤、軟膏
剤、坐剤、局所投与のクリーム、若しくは点眼薬などの
非経口剤を挙げることができる。
The dosage form of the antitumor effect enhancer of the present invention or the antitumor composition of the present invention is not particularly limited, and examples thereof include powders, fine granules, granules, tablets, capsules, and suspensions. Liquids, emulsions, syrups, extracts,
Oral preparations such as pills, or parenteral preparations such as injections, external solutions, ointments, suppositories, creams for topical administration, or eye drops can be mentioned.

【0018】これらの経口剤は、例えば、ゼラチン、ア
ルギン酸ナトリウム、澱粉、コーンスターチ、白糖、乳
糖、ぶどう糖、マンニット、カルボキシメチルセルロー
ス、デキストリン、ポリビニルピロリドン、結晶セルロ
ース、大豆レシチン、ショ糖、脂肪酸エステル、タル
ク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコー
ル、ケイ酸マグネシウム、無水ケイ酸、又は合成ケイ酸
アルミニウムなどの賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性
剤、滑沢剤、流動性促進剤、希釈剤、保存剤、着色剤、
香料、矯味剤、安定化剤、保湿剤、防腐剤、又は酸化防
止剤等を用いて、常法に従って製造することができる。
These oral preparations include, for example, gelatin, sodium alginate, starch, corn starch, sucrose, lactose, glucose, mannitol, carboxymethylcellulose, dextrin, polyvinylpyrrolidone, crystalline cellulose, soy lecithin, sucrose, fatty acid ester, talc Excipients, such as magnesium stearate, polyethylene glycol, magnesium silicate, silicic anhydride, or synthetic aluminum silicate, binders, disintegrants, surfactants, lubricants, fluidity promoters, diluents, and preservatives Agents, coloring agents,
It can be produced according to a conventional method using a flavor, a flavoring agent, a stabilizer, a humectant, a preservative, an antioxidant and the like.

【0019】非経口投与方法としては、注射(皮下、静
脈内等)、又は直腸投与等が例示される。これらのなか
で、注射剤が最も好適に用いられる。例えば、注射剤の
調製においては、有効成分としての、鋳型RNAにおけ
る鋳型領域にハイブリダイズ可能なオリゴヌクレオチ
ド、又は前記オリゴヌクレオチド及び抗腫瘍剤の他に、
例えば、生理食塩水若しくはリンゲル液等の水溶性溶
剤、植物油若しくは脂肪酸エステル等の非水溶性溶剤、
ブドウ糖若しくは塩化ナトリウム等の等張化剤、溶解補
助剤、安定化剤、防腐剤、懸濁化剤、又は乳化剤等を任
意に用いることができる。
Examples of parenteral administration methods include injection (subcutaneous, intravenous, etc.) and rectal administration. Of these, injections are most preferably used. For example, in the preparation of an injection, as an active ingredient, in addition to an oligonucleotide capable of hybridizing to a template region in a template RNA, or the oligonucleotide and an antitumor agent,
For example, water-soluble solvents such as saline or Ringer's solution, water-insoluble solvents such as vegetable oils or fatty acid esters,
An isotonic agent such as glucose or sodium chloride, a solubilizer, a stabilizer, a preservative, a suspending agent, an emulsifier, or the like can be optionally used.

【0020】また、本発明による抗腫瘍作用増強剤、又
は本発明の抗腫瘍組成物は、徐放性ポリマーなどを用い
た徐放性製剤の手法を用いて投与してもよい。例えば、
本発明による抗腫瘍作用増強剤、又は本発明の抗腫瘍組
成物をエチレンビニル酢酸ポリマーのペレットに取り込
ませて、このペレットを治療すべき組織中に外科的に移
植することができる。
The antitumor effect enhancer of the present invention or the antitumor composition of the present invention may be administered by using a sustained-release preparation technique using a sustained-release polymer or the like. For example,
The antitumor effect enhancer according to the present invention or the antitumor composition of the present invention can be incorporated into a pellet of ethylene vinyl acetate polymer, and the pellet can be surgically implanted into a tissue to be treated.

【0021】本発明による抗腫瘍組成物は、動物、好ま
しくは哺乳動物(特にはヒト)に単独で、経口的に又は
非経口的に投与することができる。本発明の抗腫瘍組成
物を用いる場合の投与量は、投与対象である動物の種
類、年齢、性別、若しくは体重、疾病の種類、又は投与
方法などにより異なり、適宜決定することができる。更
に、形態も医薬品に限定されるものではなく、種々の形
態、例えば、機能性食品や健康食品、又は飼料として飲
食物の形で与えることも可能である。
The antitumor composition according to the present invention can be administered alone, orally or parenterally to an animal, preferably a mammal, especially a human. The dosage in the case of using the antitumor composition of the present invention differs depending on the type, age, sex, or weight of the animal to be administered, the type of disease, the administration method, and the like, and can be determined as appropriate. Furthermore, the form is not limited to pharmaceuticals, and it can be provided in various forms, for example, in the form of food or drink as a functional food, a health food, or a feed.

【0022】本発明による抗腫瘍作用増強剤において
は、(1)抗腫瘍剤の抗腫瘍作用を増強することのでき
る、鋳型RNAにおける鋳型領域にハイブリダイズ可能
なオリゴヌクレオチドと、抗腫瘍剤とを、有効成分とし
て一緒に含有する単一製剤(すなわち、本発明による抗
腫瘍組成物)として投与することもできるし、あるい
は、(2)抗腫瘍剤の抗腫瘍作用を増強することのでき
る、鋳型RNAにおける鋳型領域にハイブリダイズ可能
なオリゴヌクレオチドのみを有効成分として含む製剤と
して、本発明による抗腫瘍作用増強剤を調製し、これと
は別に調製した抗腫瘍剤を含有する製剤と一緒に、実質
的に同時に投与することもできる。
The antitumor agent enhancer according to the present invention comprises (1) an oligonucleotide capable of enhancing the antitumor effect of the antitumor agent and capable of hybridizing to the template region of the template RNA, and an antitumor agent. A template that can be administered as a single formulation (ie, an anti-tumor composition according to the present invention) that contains together as an active ingredient, or (2) an anti-tumor effect of an anti-tumor agent can be enhanced An antitumor effect enhancer according to the present invention was prepared as a preparation containing only an oligonucleotide capable of hybridizing to a template region in RNA as an active ingredient, and together with a preparation containing an antitumor agent separately prepared, Can be simultaneously administered.

【0023】本発明による抗腫瘍作用増強剤において、
前記抗腫瘍作用増強剤と抗腫瘍剤とを別々の製剤として
調製する場合には、動物、好ましくは哺乳動物(特には
ヒト)に、抗腫瘍剤を含有する製剤と、本発明による抗
腫瘍作用増強剤とを一緒に、経口的に又は非経口的に投
与することができる。この場合に、抗腫瘍剤、及び本発
明の抗腫瘍作用増強剤の投与量は、投与対象である動物
の種類、年齢、性別、若しくは体重、疾病の種類、又は
投与方法などにより異なり、適宜決定することができ
る。更に、形態も医薬品に限定されるものではなく、種
々の形態、例えば、機能性食品や健康食品、又は飼料と
して飲食物の形で与えることも可能である。
In the antitumor effect enhancer according to the present invention,
When the antitumor effect enhancer and the antitumor agent are prepared as separate preparations, a preparation containing the antitumor agent in an animal, preferably a mammal (particularly a human), and an antitumor effect according to the present invention are prepared. The enhancer can be administered together orally or parenterally. In this case, the dosage of the antitumor agent and the antitumor effect enhancer of the present invention varies depending on the type, age, gender, or weight of the animal to be administered, the type of disease, or the method of administration, and is determined as appropriate. can do. Furthermore, the form is not limited to pharmaceuticals, and it can be provided in various forms, for example, in the form of food or drink as a functional food, a health food, or a feed.

【0024】動物、好ましくは哺乳動物(特にはヒト)
に、本発明による抗腫瘍組成物を単独投与するか、ある
いは、本発明による抗腫瘍作用増強剤を抗腫瘍剤と一緒
に投与すると、通常の抗腫瘍剤投与量よりも低用量の抗
腫瘍剤投与においても、癌細胞に対して充分な抗腫瘍作
用を示す。すなわち、本発明において有効成分として用
いる、鋳型RNAにおける鋳型領域にハイブリダイズ可
能なオリゴヌクレオチドは、抗腫瘍剤の抗腫瘍作用を相
乗的に高めることができる。
Animals, preferably mammals (especially humans)
When the antitumor composition according to the present invention is administered alone, or when the antitumor effect enhancer according to the present invention is administered together with an antitumor agent, the antitumor agent can be administered at a lower dose than a normal antitumor agent dose. Even when administered, it shows a sufficient antitumor effect on cancer cells. That is, the oligonucleotide capable of hybridizing to the template region of the template RNA used as an active ingredient in the present invention can synergistically enhance the antitumor effect of the antitumor agent.

【0025】本発明による抗腫瘍組成物又は抗腫瘍作用
増強剤は、任意の腫瘍、特には任意の悪性腫瘍(例え
ば、肺癌、胃癌、大腸癌、又は白血病など)の治療に用
いることができる。
The antitumor composition or the antitumor effect enhancer according to the present invention can be used for the treatment of any tumor, especially any malignant tumor (for example, lung cancer, stomach cancer, colon cancer, leukemia, etc.).

【0026】[0026]

【実施例】以下、実施例によって本発明を具体的に説明
するが、これらは本発明の範囲を限定するものではな
い。
EXAMPLES The present invention will be described below in more detail with reference to examples, but these examples do not limit the scope of the present invention.

【実施例1】本実施例では、ヒト肺扁平上皮癌由来細胞
株RERF−LC−A1(理化学研究所,RCB044
4;以下、RERF細胞と称する)を用いて、本発明に
よる抗腫瘍作用増強剤の腫瘍増殖抑制効果を確認した。
本実施例では、鋳型RNAにおける鋳型領域にハイブリ
ダイズ可能なオリゴヌクレオチドとして、配列表の配列
番号1の配列で表される塩基13個からなるDNAを使
用し、抗腫瘍剤として、CDDP(商品名=ランダ,日
本化薬)、エトポシド(商品名=ラステット,日本化
薬;以下、VP−16と称することがある)、マイトマ
イシンC(商品名=マイトマイシン,協和発酵;以下、
MMCと称することがある)、及びビンデシン(商品名
=フィルデシン,塩野義製薬:以下、VDSと称するこ
とがある)を使用した。
Example 1 In this example, a human lung squamous cell carcinoma cell line RERF-LC-A1 (RIKEN, RCB044) was used.
4; hereinafter referred to as RERF cells) to confirm the tumor growth inhibitory effect of the antitumor effect enhancer of the present invention.
In this example, a DNA consisting of 13 bases represented by the sequence of SEQ ID NO: 1 in the sequence listing was used as an oligonucleotide capable of hybridizing to the template region of the template RNA, and CDDP (trade name) was used as an antitumor agent. = Landa, Nippon Kayaku), etoposide (trade name = Lastet, Nippon Kayaku; hereinafter sometimes referred to as VP-16), mitomycin C (trade name = mitomycin, Kyowa Hakko;
MMC) and vindesine (trade name: fildesine, Shionogi & Co., Ltd .; hereinafter, sometimes referred to as VDS) were used.

【0027】配列表の配列番号1の配列で表されるDN
A(以下、アンチセンスDNAと称する)131.3n
molを生理的食塩水1.313mlに溶解(100μ
M)し、得られたアンチセンスDNA溶液全量を、コー
トソームEL−C−01粉末(日本油脂)1バイアルに
加え、転倒攪拌(転倒回数=3回)した後に、4℃で保
存した。
DN represented by the sequence of SEQ ID NO: 1 in the sequence listing
A (hereinafter referred to as antisense DNA) 131.3n
mol was dissolved in 1.313 ml of physiological saline (100 μl).
M), and the whole amount of the obtained antisense DNA solution was added to one vial of coatsome EL-C-01 powder (Nippon Oil & Fat), and the mixture was stored at 4 ° C. after inverting and stirring (number of inversions = 3 times).

【0028】10%ウシ胎児血清、100unit/m
lペニシリン、及び100unit/mlストレプトマ
イシン含有MEM培地(以下、培養培地と称する)を用
いて、37℃及び5%CO2 通気の条件下でRERF細
胞を培養し、増殖期にある前記RERF細胞を96ウェ
ルプレートに播種(2×104 個/ウェル,99μl)
した。先に調製した100μMリポソーム封入アンチセ
ンスDNA1μlを各ウェルに添加し、24時間培養し
た後に、細胞をリン酸緩衝溶液(phosphate
buffered saline;以下、PBSと称す
る)で洗浄し、以下に示す所定濃度の抗腫瘍剤を含む培
養培地100μlを加え、更に48時間培養した。MT
Tアッセイにより腫瘍増殖抑制活性を測定した。
10% fetal bovine serum, 100 units / m
Using an MEM medium containing 1 penicillin and 100 unit / ml streptomycin (hereinafter referred to as a culture medium), the RERF cells were cultured under the conditions of 37 ° C. and 5% CO 2 aeration. Seeding into well plate (2 × 10 4 cells / well, 99 μl)
did. 1 μl of the 100 μM liposome-encapsulated antisense DNA prepared above was added to each well, and after culturing for 24 hours, the cells were washed with a phosphate buffer solution (phosphate).
buffered saline; hereinafter, referred to as PBS), added with 100 μl of a culture medium containing the following anti-tumor agent at a predetermined concentration, and further cultured for 48 hours. MT
Tumor growth inhibitory activity was measured by T assay.

【0029】抗腫瘍剤の濃度は、それぞれ3段階(すな
わち、低レベル、中レベル、及び高レベル)とし、各抗
腫瘍剤を単独投与する場合の濃度を表1に示す。表1に
おいて、各抗腫瘍剤の濃度の単位は、μg/mlであ
る。また、複数の抗腫瘍剤の同時投与として、(1)C
DDP、VDS、及びMMCの組合せ、並びに(2)C
DDP、VP−16、及びMMCの組合せを実施し、こ
れらの組合せにおいても、濃度を3段階(すなわち、低
レベル、中レベル、及び高レベル)とした。表2に示す
ように、複数の抗腫瘍剤の同時投与では、各レベルにお
ける各抗腫瘍剤の濃度が、抗腫瘍剤の単独投与における
各濃度と同じになるようにした。表2においても、各抗
腫瘍剤の濃度の単位は、μg/mlである。
The concentrations of the antitumor agents were set at three levels (ie, low level, medium level and high level), and the concentrations when each antitumor agent was administered alone are shown in Table 1. In Table 1, the unit of the concentration of each antitumor agent is μg / ml. In addition, as simultaneous administration of a plurality of antitumor agents, (1) C
Combination of DDP, VDS and MMC, and (2) C
Combinations of DDP, VP-16, and MMC were performed, and also in these combinations, the concentration was three levels (ie, low, medium, and high). As shown in Table 2, in the simultaneous administration of a plurality of antitumor agents, the concentration of each antitumor agent at each level was set to be the same as that in the single administration of the antitumor agent. Also in Table 2, the unit of the concentration of each antitumor agent is μg / ml.

【0030】[0030]

【表1】抗腫瘍剤 低レベル 中レベル 高レベル CDDP 0.132 0.66 3.3 VP−16 0.106 0.532 2.66 MMC 0.008 0.04 0.2VDS 0.003 0.016 0.08 Table 1 Antitumor agent Low level Medium level High level CDDP 0.132 0.66 3.3 VP-16 0.106 0.532 2.66 MMC 0.008 0.04 0.2 VDS 0.0030 .016 0.08

【0031】[0031]

【表2】 抗腫瘍剤 低レベル 中レベル 高レベル (1)CDDP、VDS、及びMMCの組合せ CDDP 0.132 0.66 3.3 VDS 0.003 0.016 0.08 MMC 0.008 0.04 0.2 (2)CDDP、VP−16、及びMMCの組合せ CDDP 0.132 0.66 3.3 VP−16 0.106 0.532 2.66 MMC 0.008 0.04 0.2 [Table 2] Antitumor agent Low level Medium level High level (1) Combination of CDDP, VDS and MMC CDDP 0.132 0.66 3.3 VDS 0.003 0.016 0.08 MMC 0.008 04 0.2 (2) Combination of CDDP, VP-16 and MMC CDDP 0.132 0.66 3.3 VP-16 0.106 0.532 2.66 MMC 0.008 0.04 0.2

【0032】一方、リポソーム封入アンチセンスDNA
を添加せずに、抗腫瘍剤を単独で投与した場合の作用を
検討するために、増殖期にある前記RERF細胞を96
ウェルプレートに播種した後に、前記所定濃度の抗腫瘍
剤を含む培養培地100μl中で72時間培養し、同様
の方法で腫瘍増殖抑制活性を測定した。
On the other hand, liposome-encapsulated antisense DNA
In order to examine the effect of the administration of the antitumor agent alone without the addition of
After seeding in a well plate, the cells were cultured for 72 hours in 100 μl of a culture medium containing the antitumor agent at a predetermined concentration, and the tumor growth inhibitory activity was measured in the same manner.

【0033】結果を図1に示す。図1に示す記号1〜7
及び記号a〜cは、以下のとおりである。 1:アンチセンスDNA単独投与(コントロール)。 2:CDDP単独投与。 3:VP−16単独投与。 4:MMC単独投与。 5:VDS単独投与。 6:CDDP、VDS、及びMMCの組み合わせによる
同時投与。 7:CDDP、VP−16、及びMMCの組み合わせに
よる同時投与。 a:低レベル。 b:中レベル。 c:高レベル。 また、図1の棒グラフにおいて、「黒塗り棒」は、リポ
ソーム封入アンチセンスDNAを添加した場合の結果を
示し、「白抜き棒」は、リポソーム封入アンチセンスD
NAを添加しない場合の結果を示す。また、「*」はp
<0.001であることを示す。抗腫瘍剤とリポソーム
封入アンチセンスDNAとを併用投与した場合には、い
ずれの抗腫瘍剤においても、抗腫瘍剤の単独投与では充
分に腫瘍増殖抑制効果を示さない濃度であっても、充分
な(90%以上)腫瘍増殖抑制活性を示した。
FIG. 1 shows the results. Symbols 1 to 7 shown in FIG.
And symbols a to c are as follows. 1: Administration of antisense DNA alone (control). 2: CDDP alone administration. 3: VP-16 alone administration. 4: MMC alone administration. 5: VDS alone administration. 6: Co-administration with a combination of CDDP, VDS and MMC. 7: Co-administration with a combination of CDDP, VP-16 and MMC. a: Low level. b: Medium level. c: High level. In addition, in the bar graph of FIG. 1, “solid bars” indicate the results when liposome-encapsulated antisense DNA was added, and “open bars” indicate liposome-encapsulated antisense D.
The result when no NA is added is shown. “*” Indicates p
<0.001. When the antitumor agent and the liposome-encapsulated antisense DNA are administered in combination, a sufficient concentration of any antitumor agent, even if the antitumor agent alone does not show a sufficient tumor growth inhibitory effect, is sufficient. (90% or more) showed tumor growth inhibitory activity.

【0034】[0034]

【実施例2】RERF細胞の代わりに、ヒト肺腺癌由来
細胞株A427(ATCC HTB53;以下、A42
7細胞と称する)又はヒト扁平上皮癌由来細胞株A54
9(理化学研究所,RCB0098;以下、A549細
胞と称する)を用いること以外は、前記実施例1の操作
を繰り返した。
Example 2 Instead of RERF cells, a human lung adenocarcinoma-derived cell line A427 (ATCC HTB53; hereinafter, A42
7 cells) or human squamous cell carcinoma-derived cell line A54
Example 9 was repeated except that No. 9 (RIKEN, RCB0098; hereinafter, referred to as A549 cells) was used.

【0035】A549細胞に関する結果を図2に示し、
A427細胞に関する結果を図3に示す。図2又は図3
に示す記号1〜7及び記号a〜cは、図1に示す各記号
と同じ意味である。図2及び図3において、「黒塗り矩
形」は、リポソーム封入アンチセンスDNAを添加した
場合の結果を示し、「白抜き矩形」は、リポソーム封入
アンチセンスDNAを添加しない場合の結果を示す。ま
た、「*」はp<0.001であることを示し、「*
*」はp<0.01であることを示し、「***」はp
<0.05であることを示す。抗腫瘍剤とリポソーム封
入アンチセンスDNAとを併用投与した場合には、いず
れの抗腫瘍剤においても、抗腫瘍剤の単独投与では充分
に腫瘍増殖抑制効果を示さない濃度であっても、充分な
腫瘍増殖抑制活性を示した(但し、A427細胞におい
てCDDPの濃度が0.132μg/mlである場合を
除く)。
The results for A549 cells are shown in FIG.
The results for A427 cells are shown in FIG. FIG. 2 or FIG.
1 to 7 and symbols a to c have the same meanings as those shown in FIG. 2 and 3, "black rectangles" indicate the results when the liposome-encapsulated antisense DNA was added, and "white rectangles" indicate the results when the liposome-encapsulated antisense DNA was not added. "*" Indicates that p <0.001, and "*"
“*” Indicates that p <0.01, and “***” indicates p
<0.05. When the antitumor agent and the liposome-encapsulated antisense DNA are administered in combination, a sufficient concentration of any antitumor agent, even if the antitumor agent alone does not show a sufficient tumor growth inhibitory effect, is sufficient. It showed tumor growth inhibitory activity (except when the concentration of CDDP in A427 cells was 0.132 μg / ml).

【0036】[0036]

【発明の効果】動物、好ましくは哺乳動物(特にはヒ
ト)に、本発明による抗腫瘍組成物を単独投与するか、
あるいは、本発明による抗腫瘍作用増強剤を抗腫瘍剤と
一緒に投与すると、通常の抗腫瘍剤投与量よりも低用量
の抗腫瘍剤投与でおいても、癌細胞に対して充分な抗腫
瘍作用を示す。
EFFECT OF THE INVENTION An animal, preferably a mammal (particularly a human) is administered with the antitumor composition according to the present invention alone,
Alternatively, when the antitumor effect enhancer according to the present invention is administered together with an antitumor agent, even if the antitumor agent is administered at a lower dose than a normal antitumor agent dose, sufficient antitumor activity against cancer cells is obtained. Show action.

【0037】[0037]

【配列表】[Sequence list]

【0038】配列番号:1 配列の長さ:13 配列の型:核酸 配列 TAGGGTTAGA CAA 13SEQ ID NO: 1 Sequence length: 13 Sequence type: nucleic acid sequence TAGGGTTAGA CAA 13

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図1】本発明による抗腫瘍作用増強剤のRERF細胞
における腫瘍増殖抑制効果を示すグラフである。
FIG. 1 is a graph showing the tumor growth inhibitory effect on RERF cells of the antitumor effect enhancer according to the present invention.

【図2】本発明による抗腫瘍作用増強剤のA549細胞
における腫瘍増殖抑制効果を示すグラフである。
FIG. 2 is a graph showing the inhibitory effect of the antitumor effect enhancer of the present invention on tumor growth in A549 cells.

【図3】本発明による抗腫瘍作用増強剤のA427細胞
における腫瘍増殖抑制効果を示すグラフである。
FIG. 3 is a graph showing the tumor growth inhibitory effect of A427 cells of the antitumor effect enhancer of the present invention.

フロントページの続き (72)発明者 石田 裕香子 東京都狛江市西野川4丁目6番1号 京王 柴崎コーポラス508号Continued on the front page (72) Inventor Yukiko Ishida 4-6-1 Nishinogawa, Komae-shi, Tokyo Keio Shibasaki Corporus 508

Claims (2)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 テロメラーゼに含まれるRNA部分にお
ける鋳型領域にハイブリダイズ可能なオリゴヌクレオチ
ドを有効成分として含有することを特徴とする、抗腫瘍
剤の抗腫瘍作用増強剤。
1. An antitumor agent-enhancing agent for an antitumor agent, comprising an oligonucleotide capable of hybridizing to a template region in an RNA portion contained in telomerase as an active ingredient.
【請求項2】 テロメラーゼに含まれるRNA部分にお
ける鋳型領域にハイブリダイズ可能なオリゴヌクレオチ
ドと、抗腫瘍剤とを有効成分として含有することを特徴
とする、抗腫瘍組成物。
2. An antitumor composition comprising an oligonucleotide capable of hybridizing to a template region in an RNA portion contained in telomerase and an antitumor agent as active ingredients.
JP4468698A 1998-02-10 1998-02-10 Anticancer action-enhancing medicine composition Pending JPH11228451A (en)

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Cited By (3)

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