JPH11206342A

JPH11206342A - 緑豆抽出エキス

Info

Publication number: JPH11206342A
Application number: JP10029080A
Authority: JP
Inventors: Tatsuo Takahashi; 龍男高橋
Original assignee: RYUEI SOKEN KK
Current assignee: RYUEI SOKEN KK
Priority date: 1998-01-28
Filing date: 1998-01-28
Publication date: 1999-08-03
Anticipated expiration: 2018-01-28
Also published as: JP3257977B2

Abstract

(57)【要約】【課題】花粉症、アトピー性皮膚炎などのアルギー性
の疾患に対する治療効果が高く、かつ副作用のない食品
を提供する。【解決手段】熱酢酸水を用いて、緑豆エキスを抽出し
た。抽出に用いる熱酢酸水のｐＨを３〜５、好ましくは
４に調整するようにした。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明を適用する技術分野】本発明は、緑豆の抽出エキ
スに関するものであり、特に熱酢酸水で抽出した抗アレ
ルギー効果の高い緑豆の抽出エキスに関するものであ
る。

【０００２】

【従来の技術】緑豆はマメ科の１年生植物である「ブン
ドウ」の種子であり、古くから健康食や生薬として用い
られている。現在知られている薬理作用としては、血清
脂質低下作用、抗菌作用、解毒作用などがあり、高脂血
症、農薬中毒、耳下腺炎、鉛・砒素中毒、腰背痛、ウル
シ接触性皮膚炎、日射病・熱射病の治療に用いられてい
る。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】代表的な現代病のとし
て、花粉症、アトピー性皮膚炎などのアルギー性の疾患
が近年問題になっている。このアレルギー性疾患に対し
ては、例えばトラニラストなどの抗アレルギー薬が開発
されているがその効果のほどは十分ではなく、また副作
用の問題もある。そこで、アレルギー性疾患に対する治
療効果が高く、かつ副作用のない治療薬の開発が多くの
患者に待望されているが、現在のところ、このようなア
レルギー性の疾患に画期的な効用のある薬剤、あるいは
食品は知られていない。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者は、緑豆には様
々な薬理作用が認められていることに注目して、緑豆の
生理活性を研究した結果、緑豆、特に酢酸を用いて抽出
した緑豆エキスに高い抗アレルギー作用があることを発
見し、この製品化を試みた。

【０００５】本発明の緑豆抽出エキスは、熱酢酸水を用
いて抽出したことを特徴とする。上述した通り従来から
緑豆には様々な薬効成分が認められているが、花粉症や
アトピー性皮膚炎などのアレルギー症状に対する効力は
知られていなかった。本発明の目的とする抗アレルギー
作用は、熱酢酸水を用いて緑豆を抽出した場合に認めら
れる。後述する本発明者の実験により、通常の熱湯抽出
によって生成した緑豆エキスは抗アレルギー効果が低
く、臨床実験ではむしろアレルギー症状を悪化させる場
合もあることが判明した。本発明にかかる緑豆エキスに
認められる抗アレルギー効果は、熱酢酸水によって抽出
する際に緑豆に含まれている蛋白質が変成するために生
ずると考えられる。

【０００６】また、本発明の緑豆抽出エキスは、前記熱
酢酸水のｐＨを５〜３、特に好ましくはｐＨ４に調整し
て抽出するのが好ましい。本発明者は、緑豆エキスを製
品化するに際して、熱酢酸水のｐＨを変えて実験を行っ
た結果、抽出に用いる酢酸水のｐＨが高いほど、抗アレ
ルギー効果が高いことがわかった。しかしながら、ｐＨ
の高い酢酸水を用いて緑豆エキスを抽出した場合、製品
に強い酢酸臭がのこるため、食品として好適に使用でき
ない。さらに、抽出にあたって、ｐＨの高い酢酸水を用
いると抽出釜が腐食してしまうという問題もある。後に
詳述する通り、ｐＨ５より酸性度が低い酢酸水で抽出し
たエキスは抗アレルギー効果が激減してしまい、一方、
ｐＨ３より酸性度の高い酢酸水で抽出したものは、刺激
臭が強く製品として使用することができない。また、ｐ
Ｈ３より酸性度の高い酢酸水を用いると、製造時に抽出
用の釜が腐食してしまうなどの問題も生じる。従って、
ｐＨ５〜３に調整した熱酢酸水を用いて抽出するのが好
ましく、特にｐＨ４に調整した熱酢酸水を用いて抽出し
たエキスついては、緑豆の作用効果を大幅に失うことな
く、かつ食品としても摂取しやすい。さらに、抽出釜の
腐食の問題もカバーすることができる。

【０００７】また、本発明にかかる緑豆抽出エキスは、
前記エキスを熱酢酸水で抽出した後、中和することが好
ましい。中和することによって、製品の作用効果を維持
したままで、製品に残留する酢酸臭を消失させることが
できるからである。なお、中和剤としては苛性ソーダを
好適に用いることができる。

【０００８】本発明にかかる緑豆抽出エキスは、ラット
を用いて行った実験に基づいて算定したヒスタミン遊離
抑制率が、１２〜７０％であることを特徴とする。

【０００９】本発明者は、ラットの腹腔肥満細胞を用い
て緑豆のヒスタミン遊離作用を確認した。肥満細胞とは
名の通り巨大な細胞であり、花粉や薬物など何らかの刺
激が加わると破裂して、「ヒスタミン」等を遊離する。
この遊離されたヒスタミンが皮膚や気管支に到達する
と、発赤、かゆみ、喘息等を引き起こす、すなわち、ア
レルギー症状が現れることになる。

【００１０】ここでは、ラットの腹腔肥満細胞を取り出
して、本発明にかかる緑豆エキスを共存させた試料と、
共存させていない試料とを作製し、遊離剤を加えて肥満
細胞からヒスタミンを強制的に遊離させるよう試み、所
定の算出方法に従って、緑豆エキスを共存させた試料に
付いてヒスタミンの遊離抑制率を求めて、緑豆エキスの
ヒスタミン遊離抑制作用を確認した。この結果、本発明
にかかる緑豆抽出エキスには強いヒスタミン遊離抑制作
用が認められた。

【００１１】さらに、本発明にかかる緑豆抽出エキス
は、ラットを用いて行った実験に基づいて算定したとき
のアレルギー抑制率が、５〜４５％であることを特徴と
する。

【００１２】本発明者は、ラットを用いて本発明にかか
る緑豆エキスの抗原−抗体反応の抑制率をしらべた。抗
アレルギー作用とは、抗原−抗体反応を制限する作用を
いう。花粉や薬物は、抗原とよばれ、アレルギーを引き
起こす基となるものである。抗原が一旦体内に入ると、
生体内でその抗原に特有の抗体が作られる。しばらくし
て、再度侵入した抗原に対して抗体が破壊活動を行い、
生体に悪影響を及ぼさないようにするのが「免疫」機構
である。この抗原に対する抗体の反応（抗原-抗体反
応）が制限されることなく過剰に働き、その結果ヒスタ
ミンが多量に遊離された状態がアレルギーである。

【００１３】本発明者は、ラットに本発明にかかる緑豆
エキスを事前に投与しておいて、このラットに人為的に
抗原-抗体反応を起こさせて、抗原−抗体反応の抑制の
度合い(アレルギー抑制率）を調べたところ、本発明に
かかる緑豆エキスはアレルギー抑制率が非常に高いこと
が判明した。

【００１４】

【実施例】第１実施例酢酸水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、酢酸水
を約８０°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出
した。酢酸水のｐＨは３になるように調整した。第２実施例酢酸水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、酢酸水
を約８０°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出
した。酢酸水のｐＨは４になるように調整した。第３実施例酢酸水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、酢酸水
を約８０°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出
した。酢酸水のｐＨは５になるように調整した。第４実施例酢酸水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、酢酸水
を約８０°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出
し、その後このエキスを苛性ソーダで中和した。酢酸水
のｐＨは３になるように調整した。第５実施例酢酸水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、酢酸水
を約８０°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出
し、その後このエキスを苛性ソーダで中和した。酢酸水
のｐＨは４になるように調整した。第６実施例酢酸水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、酢酸水
を約８０°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出
し、その後このエキスを苛性ソーダで中和した。酢酸水
のｐＨは５になるように調整した。比較例１酢酸水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、酢酸水
を約８０°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出
した。酢酸水のｐＨは６４になるように調整した。比較例２酢酸水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、酢酸水
を約８０°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出
し、その後このエキスを苛性ソーダで中和した。酢酸水
のｐＨは６になるように調整した。比較例３水４重量部に対して緑豆１重量部を合わせ、水を約８０
°Ｃに熱して、２時間かけて緑豆エキスを抽出した。

【００１５】上述した実施例にかかる緑豆抽出エキス
は、ヒスタミン遊離抑制率が非常に高いこと、抗原
−抗体反応を抑制する作用があること、抗ヒスタミン
作用は認められないことが以下の実験で証明されてい
る。

【００１６】実験１ラットの腹腔肥満細胞を取り出して、上述した本発明の
実施例にかかる緑豆抽出エキスを共存させた試料を作製
し、これに遊離剤を加えて肥満細胞からヒスタミンを強
制的に遊離させるよう試みた。この試料について所定の
方法でヒスタミンの遊離抑制率を求めて、本発明にかか
る緑豆エキスのヒスタミン遊離作用を確認した。

【００１７】抗アレルギー物質（緑豆エキス）を共
存させた試料を以下のようにして用意した。０．０１〜０．００３％の濃度に調整した緑豆エキスの
ＰＳＳ溶液１．７５ｍＬを３７°Ｃの温度で５分間プレ
インキュベートした後、ラット腹腔肥満細胞浮遊液０．
０５ｍＬを加えて３７°Ｃの温度で１５分間インキュベ
ートした。次いで、コンカナバリンＡのＰＳＳ溶液（４
×１０^-4ｇ／ｐ）０．２ｍＬを加えて、３７°Ｃの温度
で１０分間反応させた。コカバナリンＡ（４×１０
^-5Ｍ）は、肥満細胞から強制的にヒスタミンを遊離させ
る遊離剤である。

【００１８】抗アレルギー物質を共存させていない
対照試料を用意した。ＰＳＳ溶液１．７５ｍＬにラット腹腔肥満細胞浮遊液
０．０５ｍＬを加えて、さらにコンカナバリンＡのＰＳ
Ｓ溶液（４×１０^-4ｇ／ｐ）０．２ｍＬを加えて、３７
°Ｃの温度で１０分間反応させた。

【００１９】それぞれの試料を氷で冷やして反応を
停止させた後、３００×ｇ、４°Ｃで遠心分離し、上清
液と沈渣部のそれぞれのヒスタミン量をショアら(Shor
e, et.al.)の方法にしたがって測定してヒスタミンの遊
離率を算定し、更に、このヒスタミン遊離率を用いてヒ
スタミンの遊離を抑制するヒスタミン遊離抑制率を算出
した。

【００２０】上記の方法に基づいて、上述の第１〜第６
の実施例の緑豆エキスおよび比較例１〜３についてヒス
タミン遊離抑制率を求めた。その結果を表１に示す。

【表１】

【００２１】実験１において、ヒスタミンの遊離率は以
下の式に基づいて算定した。ヒスタミンの遊離率＝ＰＳ／ＰＳ＋ＰＲ × １０
０なお、ＰＳ＝上清のヒスタミン量ＰＲ＝細胞中に残存しているヒスタミン量

【００２２】ヒスタミン遊離抑制率は以下の式に基づい
て算定した。遊離抑制率（％）＝１００−（Ｓ−Ｂ）／（Ｃ−Ｂ）×
１００Ｓ＝試料の遊離率Ｃ＝対照試料の遊離率Ｂ＝ブランク試料の遊離率なお、ブランク試料は、上述の緑豆エキスを共存させた
試料を得るために行った操作と同じ操作をラットの血清
に行って得た。

【００２３】ヒスタミンは以下の操作を行って抽出した
一連の試料は、試料自体に蛍光物質あるいは蛍光吸収物
質が含まれているため、ｎ−ブタノールで反応液よりヒ
スタミンを抽出して補正した。すなわち、上清部および
沈渣部のそれぞれ、ＮａＣｌ０．５ｇ、５ＮＮａＯ
Ｈ０．２５ｍＬ、ｎ−ブタノール２．５ｍＬを加えて
１０分間撹拌し、次いで、７８０×ｇ、４°Ｃで１０分
間遠心分離した。ｎ−ブタノール層２．０ｐを取除い
て、ＮａＣｌ飽和０．１ＮＮａＯＨ２．０ｍＬを加え
て１０分間撹拌した後、７８０×ｇ、４°Ｃで１０分間
遠心分離した。更に、ｎ−ブタノール層１．４ｍＬを取
除いて、０．１ＮＨＣｌ２．５ｍＬを加えて１０分間
撹拌した後、７８０×ｇ、４°Ｃで１０分間遠心分離し
た。ｎ−ブタノール層を除去して、水層を測定試料とし
た。

【００２４】ラット腹腔肥満細胞浮遊液は以下のように
して調整した体重３００〜５００ｇのＳＤ系雄性ラット
を断頭放血致死せしめ、腹腔にＰＳＳを１５ｍＬ注入し
た。腹部を約９０秒間穏やかにマッサージした後、開腹
し、腹腔液を採取した。更に、ＰＳＳ１５ｍＬで腹腔内
を洗浄した後、腹腔液を採取し先に採取した腹腔液と混
合した。この混合した腹腔液を５５×ｇ、４°Ｃで８分
間遠心分離した後、上清を除去し、沈渣としてラット腹
腔細胞を得た。この細胞は大部分がマクロファージであ
るため、エナバックら（Enerback et al）の方法によっ
て、肥満細胞を単離精製した。このようにして得た腹腔
細胞にＰＳＳを１ｍＬ加えて懸濁させ、更に８８％のパ
ーコル溶液（Ｐｅｒｃｏｌｌｓｏｌｕｔｉｏｎ）を３
ｍＬ加えて再度懸濁させ、その上にＰＳＳ１ｍＬを重層
した。これを２６５×ｇ、４°Ｃで８分間遠心分離し、
上清をアスピレータで静かに除去し、更にＰＳＳ３ｍＬ
で細胞を洗浄し、５５×ｇ、４°Ｃで８分間遠心分離
し、沈渣として肥満細胞を得た。このようにして得た肥
満細胞をＰＳＳで希釈し肥満細胞が１×１０⁵個／ｍＬ
となるように調整した。

【００２５】ＰＳＳ（Physiological Salt Solution)は
以下のとおり調整した。ＮａＣｌ（１４５ｍＭ）、ＫＣ
ｌ（２．７ｍＭ），ＨＥＰＥＳ（５ｍＭ），グルコース
（５．６ｍＭ）、ＣａＣｌ₂（１ｍＭ）を含有する水溶
液を作り、ＮａＯＨにてｐＨ７．４に調整して緩衝液と
して用いた。

【００２６】８８％パーコール溶液は次のようにして調
整した。Ｐｅｒｃｏｌｌ８８容量をとり、１．５ｍＭの
ＮａＣｌ、５ｍＭのＨＥＰＥＳ溶液を加えて、ｐＨ７．
４に調整し、水を加えて１００とした。

【００２７】結論実験１において、酢酸のｐＨを３、または４に調整して
抽出した緑豆エキス（第１及び第２の実施例）について
は、エキスの濃度が３ｍｇ／ｍＬのときに約６０％とい
う高い抑制率をしめした。また、濃度を０．１ｍｇ／ｍ
Ｌに下げても、２５％以上の抑制率を示し、０．１μｇ
／ｍＬといった低濃度のエキスを用いた場合でも２％の
抑制率が認められた。

【００２８】酢酸のｐＨを５に調整して抽出した緑豆エ
キス（第３の実施例）については、全体的に抑制率が低
下したものの、エキスの濃度が３ｍｇ／ｍＬとある程度
高い場合には、３６％という高い抑制率が認められた。
この例では、エキスの濃度を０．１ｍｇ／ｍＬとした場
合の抑制率は１３％であり、濃度０．１μｇ／ｍＬのと
きは、抑制率は認められなかった。

【００２９】尚、酢酸のｐＨを６に調整して抽出した緑
豆エキス（比較例１）では、エキスの濃度を３ｍｇ／ｍ
Ｌと高くした場合でも抑制率は６％にすぎず、エキスの
濃度を０．１ｍｇ／ｍＬ以下にした場合は顕著な効果が
認められなかった。

【００３０】また、酢酸のｐＨを３、または４に調整し
て緑豆エキスを抽出した後、苛性ソーダで中和したエキ
ス（第４及び第５の実施例）については、濃度が０．３
ｇ／ｍＬと高いときに、４３％以上の抑制率が認められ
ており、濃度を０．１ｍｇ／ｍＬにした場合でも１９％
以上の抑制率が認められた。更に、０．１μｇ／ｍＬと
いった低濃度のエキスを用いた場合でも１％の抑制率が
認められている。

【００３１】更に、酢酸のｐＨを５に調整した実施例
（実施例６）については、濃度が０．３ｇ／ｍＬと高い
ときには２１％の抑制率が認められ、濃度を０．１ｍｇ
／ｍＬにした場合は８％の抑制率を示した。

【００３２】これに対して、ｐＨ６に調整して緑豆エキ
スを抽出した後、苛性ソーダで中和したエキス（比較例
２）については濃度が３ｍｇ／ｍＬと高くても１０％の
抑制率しか示さず、濃度が低い場合には、抑制率はほと
んど認められなかった。

【００３３】なお、同様の実験を、熱水で抽出した緑豆
エキス（比較例９）についておこなったところ、エキス
の濃度が３ｍｇ／ｍＬと高い場合でも、ヒスタミン遊離
抑制率は１０％と非常に低い値となり、それ以下の濃度
では、抑制効果を示さなかった。

【００３４】実験２この実験では、抗アレルギー作用のある薬物として上述
の第１の実施例にかかる緑豆エキスを事前に投与したラ
ットと、代表的な抗アレルギー剤であるトラニストを事
前に投与したラットを用意して、このラットに人為的に
抗原-抗体反応を起こさせて、抗原−抗体反応の抑制の
度合い(抑制率）を調べた。

【００３５】体重２００ｇ前後のＷｉｓｔａｒ系雄
性ラットに、代表的な抗アレルギー剤であるトラニスト
と、本発明にかかる緑豆エキスを投与しておき、エーテ
ル麻酔下で背部を剪毛して、抗体としてＤＮＰ−ＩｇＥ
を０．１ｍＬ皮内注射した。同時に同量の生理食塩水を
投与してブランクとしたラットを用意して、同じく抗体
としてのＤＮＰ−ＩｇＥを０．１ｍＬ皮内注射した。４
８時間後、ＤＮＰ−ＢＳＡ１ｍｇ、０．５％のエバンス
ブルー（ＥｖａｎｓＢｌｕｅ）を含む生理食塩液１ｍ
Ｌを尾静脈より注入して、人為的に抗原−抗体反応を起
こさせた。３０分後にラットを断頭放血至死せしめ、感
作部位を中心に約１ｃｍの円状に皮膚を切り取って、そ
れぞれの試料についてこの皮膚中に漏出している色素量
を比色法を用いて測定した。

【００３６】色素漏出量は、片山ら（Ｋａｔａｙ
ａｍａ，ｅｔａｌ）の方法により測定した。すなわ
ち、切り取った皮膚を試験管に入れて、１ＮＫＯＨ
１ｍＬを加えて、３７°Ｃで一夜振盪させインキュベー
トした。ついで、０．６Ｎ−Ｈ₃ＰＯ₄：アセトンの混液
を９ｍＬ加えて振盪撹拌した。３０００ｒｐｍで１５分
間遠心分離し、上澄みの吸光度を６２０ｎｍの波長の光
を用いて測定した。

【００３７】抑制率は予め色素量の検量線を作成し
て、上記方法に基づいて得た吸色度を代入して漏出色素
量とし、これを下記の式に代入して求めた。抑制率（％）=（Ｃ−Ｓ）／Ｃ × １００ここで、Ｃはコントロール色素量、Ｓは試料の色素量で
ある。

【００３８】以下の表２に、算定結果を示す。表２薬物投与量（経口）抑制率トラニスト１００ｍｇ／ｋｇ２３％実施例１の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ３９％実施例２の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ３８％実施例３の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ１３％実施例４の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ２５％実施例５の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ２３％実施例６の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ１１％比較例１の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ８％比較例２の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ４％比較例３の緑豆エキス１００ｍｇ／ｋｇ３％

【００３９】実験２において、抗アレルギー剤（トラニ
ストおよび緑豆エキス）は以下の通りに投与した。上記
抗アレルギー剤は、０．２％ＣＭＣ−Ｎａ液に懸濁させ
て、抗原注入２時間前にゾンデを用いて強制的に経口投
与した。また、抗原投与２４時間前から絶食させた。た
だし、飲用は自由とした。

【００４０】ＤＮＰ−ＢＳＡ（ＤＮＰ−牛血清アルブミ
ン）は以下の通りに作製した抗原として用いたＤＮＰ−
牛血清アルブミンはエイザンら（Ｅｉｓａｎｅｔａ
ｌ）の方法にしたがって作製した。蛋白の含有量はマイ
クロビューレット法により決定した。

【００４１】ＤＮＰ−ＩｇＥ（ＤＮＰ−免疫グロブリン
Ｅ）は以下の通りに作製した抗体として用いたＤＮＰ−
免疫グロブリンＥは多田ら（Ｔａｄａｅｔａｌ）の
方法にしたがって作製した。感作をかける前に同種のラ
ットを用いて予備試験を行い、最適濃度になるように希
釈した。

【００４２】結論上記表２から明らかな通り、代表的な抗ヒスタミン剤で
あるトラニストに比して、酢酸のｐＨを３または４に調
整して抽出を行った緑豆エキス（実施例１および２）に
ついては、はるかに強力な活性を示し、抑制率が大幅に
改善されていることがわかる。また、酢酸のｐＨを３ま
たは４に調整して抽出を行った後苛性ソーダで中和した
緑豆エキス（実施例４および５）についても、トラニス
トと同程度の抑制率が認められている。

【００４３】一方、酢酸のｐＨを５に調整して抽出を行
った緑豆エキス（実施例３）、および、酢酸のｐＨを５
に調整して抽出を行った後苛性ソーダで中和した緑豆エ
キス（実施例６）ついても、１０％以上の抑制率が認め
られている。また、酢酸のｐＨを６に調整して抽出を行
った緑豆エキス（比較例１）、および、酢酸のｐＨを６
に調整して抽出を行った後苛性ソーダで中和した緑豆エ
キス（比較例２）については、多少の抑制率が認められ
ているものの、その値は低かった。

【００４４】なお、同じ実験を、熱水で抽出した緑豆エ
キス（比較例３）について行ったところ、抗原−抗体反
応の抑制率は、３％と非常に低かった。

【００４５】また、本発明にかかる緑豆抽出エキスに
は、抗ヒスタミン作用は見出せないことが以下の実験３
からわかった。この実験ではモルモットから摘出した腸
管を用いて、上述した本発明の実施例にかかる緑豆エキ
スのヒスタミンによる収縮に対する作用を調べた。抗ヒ
スタミン作用とは、ヒスタミンが臓器に欠乏して作用を
発現する部位（受容体）への到着を阻害することを言
う。すなわち、ヒスタミン受容体に抗ヒスタミン薬を先
に作用させておき、到達したヒスタミンを結合できなく
することによって、発赤やかゆみを押さえる作用であ
る。

【００４６】実験３では、モルモットから摘出した回腸
を栄養液の中につるしてその中にヒスタミンを入れて収
縮させ、その収縮した長さを器械を用いて測定し、ヒス
タミンに対する感受性をみるようにした。栄養液のなか
にあらかじめ抗ヒスタミン作用のある緑豆エキスを入れ
ておくと、ヒスタミンを加えても収縮が抑制される。こ
の抑制率を求めて抗ヒスタミン作用の強さとした。

【００４７】実験３マグナス（Ｍａｇｎｕｓ）法にしたがって実験を
行った。容量１０ｍＬのマグナス装置の液槽中にモルモ
ットの回腸片（２〜３ｃｍ）を吊るし、一端を槽の底
に、他端をアイソトニックトランスデユーサにつない
だ。液槽の温度を３７°Ｃに調節して、腸管を吊るして
から３０分間放置した。槽中には絶えずガス（５％ＣＯ
₂，９５％Ｏ₂）を通じておくようにした。

【００４８】安定した後、１×１０^-6〜１×１０^-5
の濃度のヒスタミンを順次槽内に注入して、腸管をトレ
ーニングした。トレーニング終了後１×１０^-5〜１×１
０^-4濃度のヒスタミンを累積的に投与した。これを数回
繰り返し、一定の反応が得られたところで容量反応曲線
データを得た。洗浄後１０分間休止時間を置いて、回腸
に被検薬物（緑豆エキス）を注入して、５分間放置した
後ヒスタミンを累積的に投与して、同様に容量反応曲線
データを得た。このようにして得たデータを統計学的処
理をして薬物の効果を判定した。

【００４９】この実験の結果を以下に示す。表３薬物作用量抑制率緑豆エキス１ｍｇ／ｍＬ − 緑豆エキス１０ｍｇ／ｍＬ − すなわち、本発明の緑豆エキスには抗ヒスタミン作用は
全く見られない。すなわち、ヒスタミン受容体に対する
直接作用はないものと思われる。なお、ここでは実施例
２の緑豆エキスを用いて実験を行った。

【００５０】実験３において、モルモットの回腸片は以
下の通り調整した。２４時間以上絶食させたハートレイ
系雄性モルモットを撲殺し、直ちに腹壁を切り開いて回
盲部で回腸を切断し、約３０ｃｍの長さで摘出した。こ
れを予めシャーレに用意しておいた加温タイロード液の
中に移した。これを２〜３ｃｍの長さに切って実験に用
いた。

【００５１】タイロード液は、ＮａＣｌ８．０ｇ、Ｋ
Ｃｌ０．２ｇ、ＭｇＣｌ₂ ０．１ｇ、ＮａＨ₂ＰＯ₄
０．０５ｇ、ＮａＨＣＯ₃ １．０ｇ、グルコース
１．０ｇを蒸留水に溶解させ、１０００ｍＬ（ｐＨ７．
８）として用いた。

【００５２】以上の実験１〜３から、本発明にかかる緑
豆エキスは抗ヒスタミン作用は有していないものの、ヒ
スタミンの遊離そのものを抑制する抗アレルギー効果、
および過剰な抗原−抗体反応を抑制する効果は非常に高
いことがわかった。

【００５３】臨床試験上記実験によって熱酢酸水にて抽出した緑豆エキスに抗
アレルギー作用（ヒスタミン遊離抑制作用、および、抗
原−抗体反応抑制作用）があることがわかった。本発明
者は、次いで、花粉症患者に本発明にかかる緑豆のエキ
スを含有する栄養補助食品を投与して臨床試験を行い、
緑豆エキスの花粉症に対する効果を確認した。本臨床試
験は、熱水抽出した緑豆エキス（以下「熱水抽出緑豆エ
キス」という）と、酢酸抽出した緑豆エキス（以下「熱
酢酸抽出緑豆エキス」という）と、酢酸抽出した緑豆エ
キスを中和させたエキス（以下「熱酢酸抽出中和緑豆エ
キス」という）を投与して行い、それぞれの効果を確認
するようにした。

【００５４】それぞれのエキスは以下のようにして得
た。熱水抽出緑豆エキス８０°Ｃの熱水で緑豆を抽出してエキスを得た。抽出時
間は２時間とした。また、熱水と緑豆の配合比は重量比
で４：１とした。熱酢酸抽出緑豆エキス酢酸水をｐＨ４に調整して、８０°Ｃに熱して、緑豆を
抽出してエキスを得た。抽出時間は２時間とした。酢酸
水と緑豆の配合比は重量比で４：１とした。熱酢酸抽出中和緑豆エキス酢酸水をｐＨ４に調整して、８０°Ｃに熱して、緑豆を
抽出してエキスを得、このエキスを更に苛性ソーダで中
和した。抽出時間は２時間とした。酢酸水と緑豆の配合
比は重量比で４：１とした。

【００５５】熱水抽出緑豆エキスを含有する試験剤は、
１３〜５２歳までの男女１５名に、熱酢酸抽出緑豆エキ
スを含有する試験剤は、１５〜４８歳までの男女１６名
に、熱酢酸抽出中和緑豆エキスを含有する試験剤は、１
２〜３７歳までの男女１２名に投与した。患者は、それ
ぞれアレルギー性鼻炎等の原疾患を持っており、何らか
の現代医学的治療を受けていた。

【００５６】各試験剤は粉状であり、一包中に、それぞ
れ、緑豆熱水抽出エキス、緑豆熱酢酸抽出エキス、緑豆
熱酢酸抽出中和エキスを１ｇずつ含むものを用意した。
また、成人患者には、１日２回朝夕食後２包ずつ、計４
包を一日の投与量とし、１５歳未満の患者には、１日２
回朝夕食後１包ずつ、計２包を一日の投与量とした。投
与期間は３０日間であり、スギ花粉が飛散している最盛
期である平成９年３月１０日から開始して平成９年４月
１２日をもって終了した。なお、各患者が受けていた現
代医学的治療（内服薬、点鼻薬等）はそのまま継続させ
た。

【００５７】判定方法各症例とも、投与前の自覚症状を確認して、投与後１ヶ
月目にその自覚症状の改善、悪化、または不変を調べ
た。判定は、症状が消失したかまたはほぼ消失した場合
を「著明改善」、症状がかなり改善した場合を「中等度
改善」、症状が多少軽減した場合を「軽度改善」、症状
が変わらない場合を「不変」、症状が悪くなった場合を
「悪化」として、各試験剤についての効果を比較した。

【００５８】

【表４】

【００５９】

【表５】

【００６０】

【表６】

【００６１】表４に示すように、熱水抽出をした緑豆エ
キスは、患者に投与しても大きな改善が現れず、むしろ
症状が悪化した例も多かった。これに対して、表５及び
６に示すように、酢酸で抽出した緑豆エキスによれば、
中和したものも含めて顕著に花粉症の症状が改善されて
いることがわかる。

【００６２】熱酢酸抽出緑豆エキスを投与した患者につ
いては、投与後７日目あたりから改善があらわれ、１ヶ
月経過後には、インタール等の点鼻薬の併用が全く不要
となった例も多く見られた。このように、酢酸で抽出し
た緑豆エキスには相当の花粉症改善効果があると考えら
れる。一方、熱水抽出緑豆エキスを投与した患者につい
ては、酢酸抽出緑豆エキスを投与した場合の例に比べ
て、改善効果がはるかに下回っており、悪化する症例も
多く見られた。

【００６３】具体的な臨床例を示す。（１）１４歳、男性、中学生、アトピー性皮膚炎。乳児のころからアトピー症状があり、近医の皮膚科で通
院加療していた。平成７年までは、症状がひどい時には
ステロイド軟膏を使用していた。平成７年の夏より全身
にアトピー性皮膚炎が広がり症状が悪化してきた。同年
８月１６日からはステロイド軟膏の使用を中止した。同
年８月２３日に診療した時には、顔面の症状がひどく、
発赤、浸出液がみられた。水治療に加えて漢方薬、抗ア
レルギー剤を処方したところ、顔の症状はやや軽快し
た。同年１０月に入って症状が悪化したため、１８日か
ら本発明にかかる熱湯抽出緑豆エキスを１日に６ｇ投与
しはじめた。約２週間で症状がかなり軽快し、かゆみも
落ち着いてきた。

【００６４】（２）２８歳、男性、会社員、アトピー性
皮膚炎幼少のころからアトピーがあり、近医で通院加療してい
た。中学生の時に皮膚科でステロイドの外用薬をもらう
ようになった。成人後、住居を移転してから症状が悪化
してきた。平成９年１月１１日に診療した時には、上半
身を中心に軽度の色素沈着を伴う発赤を認め、かゆみが
強く夜眠れないとの症状を訴えていた。抗アレルギー剤
と本発明にかかる熱湯抽出緑豆エキスを１日あたり６ｇ
を投与したところ、約１ヶ月でかゆみが軽快し、夜も眠
れるようになった。

【００６５】（３）２６歳、男性、会社員アルコール性肝障害のため、平成７年５月より当院で加
療していたが、平成９年２月に花粉症を併発した。抗ア
レルギー剤の投与は肝臓の負担が増加するため、インタ
ール点鼻薬のみで経過を観察していたが、症状に改善が
みられなかった。本発明にかかる熱酢酸抽出緑豆エキス
を１日あたり６ｇ投与すると、１週間程度で鼻閉、鼻水
等の症状が改善された。晴天強風時でも症状の増悪はみ
られない。

【００６６】(４)１６歳、女性、学生小学２年生ころからアトピーがあり、冬季になると症状
が増悪していた。特に上半身のかゆみが強かった。症状
が悪化している時にはステロイド軟膏を投与してきた
が、副作用を考慮してステロイド軟膏の投与を中止し、
平成９年１２月より本発明にかかる熱酢酸水抽出緑豆エ
キスのみを投与するようにしたところ、約１週間でかゆ
みが激減して、１ヶ月で軽快した。

【００６７】上述した通り、酢酸を用いて抽出した緑豆
エキスは、強い抗アレルギー作用があるが、酢酸で抽出
しているため、製品に強い酢酸臭が残留する。抽出に用
いる酢酸水のｐＨが強いほど、高い抗アレルギー作用が
あると考えられるが、ｐＨを強くすればするほど、残留
する酢酸臭が強くなるため、使用に限界がある。そこ
で、どの程度の刺激臭であれば食品として使用に耐えら
れるかを調べる調査を行った。

【００６８】調査の概要緑豆エキスの抽出に用いる酢酸水のｐＨを変えて、下記
の４種類の熱酢酸水抽出緑豆エキス〜を用意した。
また、これらの４種類の熱酢酸水抽出緑豆エキスを更に
苛性ソーダで中和して下記の熱酢酸水抽出中和緑豆エキ
ス〜を用意した。これらのエキスの抽出方法は、前
記臨床試験に用いた方法と同じようにした。１０〜５８
歳までの男女２０名に、これらの緑豆エキス〜を摂
取させて、各緑豆エキス中の残留酢酸臭の強さを比較し
た。

【００６９】試料緑豆熱酢酸水抽出エキス（ｐＨ３）緑豆熱酢酸水抽出エキス（ｐＨ４）緑豆熱酢酸水抽出エキス（ｐＨ５）緑豆熱酢酸水抽出エキス（ｐＨ６）緑豆熱酢酸水抽出中和エキス（ｐＨ３）緑豆熱酢酸水抽出中和エキス（ｐＨ４）緑豆熱酢酸水抽出中和エキス（ｐＨ５）緑豆熱酢酸水抽出中和エキス（ｐＨ６）

【００７０】判定方法判定の基準は、酢酸臭があまりに強く、かぐことができ
ないほどであるものを不良、酢酸臭はあるがなんとかか
ぐことができるものを普通、酢酸臭が弱く問題なくかぐ
ことができるものを良、酢酸臭がしないものを最良とし
た。

【００７１】

【表７】表７に示すように、試料ととの間の刺激臭の差が大
きく、ｐＨ３に調整した熱酢酸水で抽出した緑豆エキス
（試料）は、残留酢酸臭が強すぎて、食品として摂取
するのが困難であるといえる。一方、試料ととの間
には刺激臭の強さに大きな差異はなく、なんとかかぐこ
とのできる「普通」との判定を出すものが多かった。試
料では、「普通」あるいは「問題なくかげる」と判定
したもので占められている。一方、試料とは、ｐＨ
は強いものの、なんとかかげると答えた者が多かった。

【００７２】この調査の結果から、緑豆熱酢酸水抽出エ
キス（試料〜）の中では、ｐＨ４〜６のものが食品
として適しており、特にｐＨ６の試料は何の問題もな
く摂取することができる。また、緑豆熱酢酸水抽出中和
エキス（試料〜）はｐＨ３〜６のすべてについて食
品として摂取するのに適している。

【００７３】上述した通り、緑豆を酢酸で抽出したエキ
スには強い抗アレルギー作用があることが判明した。ま
た、上述した調査結果から、酢酸抽出緑豆エキスの中で
も抗アレルギー作用を失うことなく、かつ食品として好
適に利用できるのはｐＨ４〜６に調整した熱酢酸水で抽
出したエキス、特にｐＨ４に調整した熱酢酸水で抽出し
たエキスが最適であることがわかった。ｐＨ４の熱酢酸
水で抽出した緑豆エキスはｐＨ３の熱酢酸水で抽出した
緑豆エキスに比べて、抗アレルギー作用はなんら劣るこ
とがなく、残留酢酸臭が比較的少ないからである。更
に、使用する酢酸の量が少ないので経済的である。ｐＨ
５〜６に調整した熱酢酸水で抽出した場合は、更に経済
的であり、残留酢酸臭も少ないが、ｐＨ４の熱酢酸水で
抽出したエキスに比べて作用効果の面で多少劣る。

【００７４】なお、上述の臨床試験の結果から、緑豆を
熱酢酸水で抽出した後、苛性ソーダで中和したものも相
当の抗アレルギー作用があることが判明している。熱酢
酸水抽出中和緑豆エキス（試料〜）のうち、ｐＨ３
〜４に調整した熱酢酸水でエキス抽出して苛性ソーダで
中和したもの（試料及び）が栄養補助食品として最
適である。十分な作用効果が確保されており、残留酢酸
臭が少ないからである。

【００７５】したがって、消費者が成人であって、食品
に多少の酢酸の刺激臭が残っていてもそれを摂取するこ
とができ、高い抗アレルギー効果が期待されている場合
は、ｐＨ４に調整した熱酢酸水で抽出した緑豆エキス
（試料）を投与することが望ましい。一方、子供や、
あるいは成人でも酢酸の刺激臭に過敏な者には、ｐＨ３
〜４に調整した熱酢酸水で抽出した後、苛性ソーダで中
和した緑豆エキスを投与することが好ましい。いずれの
場合も、Ｉ型アレルギーと呼ばれる花粉症(アレルギー
性鼻炎）、アトピーの患者には高い効果を示す。なお、
本発明にかかる緑豆エキスは、このほかにもアレルギー
性喘息にも適用できると考えられる。アレルギー性喘息
も，Ｉ型アレルギーであり、発症のメカニズムは花粉症
と同様であるからである。

【００７６】なお、本発明の緑豆エキスの抽出方法にお
ける酢酸水と緑豆の混合比、抽出温度、抽出時間はごく
一般的な抽出方法にしたがったものであり、特に、上述
の実施例、実施例にて述べた値に限定されるものではな
い。すなわち、混合比は、酢酸水：緑豆の重量比４：１
に限らず、エキスが抽出できる限り、３：１あるいは
５：１といった値でも良い。また、抽出温度も８０°Ｃ
に限らず、約９０〜７０°Ｃ程度の間で抽出ができる温
度であれば良い。さらに抽出時間も、抽出ができれば２
時間よりも短時間であってもかまわない。

【００７７】

【発明の効果】上述した通り、本発明にかかる熱酢酸水
を用いて抽出した緑豆エキスには、高い抗アレルギー作
用がある事が判明し、このエキスを適当量摂取すること
によって、花粉症やアトピー性皮膚炎などのアレルギー
症状を抑えることが可能である。また、抽出に際して、
酢酸のｐＨを適当な値に調整することによって、あるい
はエキスを抽出した後に中和することによって抗アレル
ギー効果を失うことなく患者が容易にエキスを摂取でき
る。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】熱酢酸水を用いて抽出したことを特徴と
する緑豆抽出エキス。
【請求項２】請求項１に記載の緑豆抽出エキスにおい
て、前記熱酢酸水のｐＨを３〜５、特に好ましくは４に
調整して抽出したことを特徴とする緑豆抽出エキス。
【請求項３】請求項１又は２に記載の緑豆抽出エキス
において、前記エキスを熱酢酸水を用いて抽出した後、
中和したことを特徴とする緑豆抽出エキス。
【請求項４】請求項３に記載の緑豆抽出エキスにおい
て、前記緑豆エキスを苛性ソーダを用いて中和したこと
を特徴とする緑豆抽出エキス。
【請求項５】請求項１ないし４に記載の緑豆抽出エキ
スにおいて、ラットを用いて行った実験に基づいて算定
したヒスタミン遊離抑制率が、１２〜７０％であること
を特徴とする緑豆抽出エキス。
【請求項６】請求項１ないし４に記載の緑豆抽出エキ
スであって、ラットを用いて行った実験に基づいて算定
したときのアレルギー抑制率が、５〜４５％であること
を特徴とする緑豆抽出エキス。