JPH1036383A - 4-n-acyl-2-thiocytosine arabinoside and anticancer agent containing the compound as active ingredient - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a new 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside, having anticancer activity in vivo, useful in the field of a medicine, nucleic acid chemistry, etc., usable as an active ingredient for an anticancer agent. SOLUTION: This new 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside (e.g. 4-N-pivaloyl-2- thiocytosine arabinoside) is shown by formula I (R is a 4-20C alkyl), has anticancer activity in vivo, is useful in the field of a medicine, nucleic acid, etc., and can be used as an active ingredient for an anticancer agent. The compound is obtained by dissolving 2-thiocytosine arabinoside of formula II in pyridine, dripping chlorotrimethylsilane to the solution, stirring the solution at room temperature for 30 minutes, adding pivaloyl chloride, etc., and reacting at room temperature for 2 hours.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明が属する技術分野】本発明は、医薬および核酸化
学等の分野に有用な４−Ｎ−アシル−２−チオシトシン
アラビノシドならびに該化合物を活性成分として含有す
る抗癌剤に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside useful in the fields of medicine and nucleic acid chemistry, and to an anticancer agent containing the compound as an active ingredient.

【０００２】[0002]

【従来の技術】Ｗ．Ｖ．Ｒｕｙｌｅらにより合成された
下記式（２）で表される２−チオシトシンアラビノシド
は、抗ウイルス活性を有することが知られているが、抗
癌活性に関しては報告されていない［Ｗ．Ｖ．Ｒｕｙｌ
ｅ，Ｔ．Ｙ．Ｓｈｅｎ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１
０，３３１（１９６７）］。2. Description of the Related Art V. Although 2-thiocytosine arabinoside represented by the following formula (2) synthesized by Ruyle et al. Is known to have antiviral activity, no report has been reported on anticancer activity [W. V. Ruyl
e, T. Y. Shen, J. et al. Med. Chem. , 1
0 , 331 (1967)].

【０００３】[0003]

【化２】 Embedded image

【０００４】本発明者らは、前記２−チオシトシンアラ
ビノシドの抗癌活性に着目し、種々の検討を行った結
果、２−チオシトシンアラビノシドは、細胞実験におい
て、抗白血病剤として知られるシトシンアラビノシド
（シタラビン）と同程度の活性を示すのに対して、動物
実験においては全く抗癌活性を示さないことが明らかと
なった。The present inventors have focused on the anticancer activity of the 2-thiocytosine arabinoside and made various studies. As a result, 2-thiocytosine arabinoside was found to be an anti-leukemic agent in cell experiments. It has been shown that while showing the same activity as known cytosine arabinoside (cytarabine), it does not show any anticancer activity in animal experiments.

【０００５】[0005]

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、生体
内において抗癌活性を有する２−チオシトシンアラビノ
シドの誘導体を提供すること、ならびに該化合物を活性
成分として含有する抗癌剤を提供するものである。DISCLOSURE OF THE INVENTION An object of the present invention is to provide a derivative of 2-thiocytosine arabinoside having an anticancer activity in a living body, and to provide an anticancer agent containing the compound as an active ingredient. Things.

【０００６】[0006]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するため鋭意研究を行った結果、２−チオシトシ
ンアラビノシドの特定の誘導体が、生体内において抗癌
活性を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明における第１発明は、下記式（１）で
表される４−Ｎ−アシル−２−チオシトシンアラビノシ
ドである。Means for Solving the Problems The present inventors have conducted intensive studies to solve the above-mentioned problems, and as a result, have found that a specific derivative of 2-thiocytosine arabinoside exhibits anticancer activity in vivo. And completed the present invention.
That is, the first invention in the present invention is a 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside represented by the following formula (1).

【０００７】[0007]

【化３】 Embedded image

【０００８】（式中、Ｒは炭素数が４〜２０個の分岐状
アルキル基を示す）(Wherein, R represents a branched alkyl group having 4 to 20 carbon atoms)

【０００９】本発明における第２発明は、前記４−Ｎ−
アシル−２−チオシトシンアラビノシドを活性成分とし
て含有する抗癌剤である。The second invention according to the present invention is directed to the 4-N-
It is an anticancer agent containing acyl-2-thiocytosine arabinoside as an active ingredient.

【００１０】[0010]

【発明の実施の形態】本発明における４−Ｎ−アシル−
２−チオシトシンアラビノシドは、前記式（１）で表さ
れる化合物であり、式（１）におけるＲは炭素数が４〜
２０個の分岐状アルキル基を示し、式（１）における−
ＣＯＲで表される置換基としては、イソブチロイル基、
ピバロイル基、２，２−ジメチルブチロイル基、２−エ
チルブチロイル基、２−メチルヘキサノイル基、２−エ
チルヘキサノイル基、シクロヘキサノイル基、１−アダ
マンタンカルボニル基、ジフェニルアセチル基およびト
リフェニルアセチル基等が例示され、原料入手の容易性
および抗癌活性の面からピバロイル基、１−アダマンタ
ンカルボニル基およびジフェニルアセチル基が好まし
い。本発明における４−Ｎ−アシル−２−チオシトシン
アラビノシドは、２−チオシトシンアラビノシドと炭素
数４〜２０個の分岐状カルボン酸、酸ハロゲン化物、酸
無水物およびエステルなどとの反応により、製造するこ
とができる。以下、前記酸ハロゲン化物の１種である酸
塩化物を用いた製造方法について説明する。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION 4-N-acyl- in the present invention
2-thiocytosine arabinoside is a compound represented by the formula (1), wherein R in the formula (1) has 4 to 4 carbon atoms.
Represents 20 branched alkyl groups, and represents-in formula (1).
Examples of the substituent represented by COR include an isobutyroyl group,
Pivaloyl group, 2,2-dimethylbutyroyl group, 2-ethylbutyroyl group, 2-methylhexanoyl group, 2-ethylhexanoyl group, cyclohexanoyl group, 1-adamantanecarbonyl group, diphenylacetyl group and triphenylacetyl group And the like, and a pivaloyl group, a 1-adamantanecarbonyl group, and a diphenylacetyl group are preferred from the viewpoint of availability of raw materials and anticancer activity. The 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside in the present invention is a mixture of 2-thiocytosine arabinoside with a branched carboxylic acid having 4 to 20 carbon atoms, an acid halide, an acid anhydride and an ester. It can be produced by a reaction. Hereinafter, a production method using an acid chloride, which is one of the acid halides, will be described.

【００１１】〔４−Ｎ−アシル−２−チオシトシンアラ
ビノシドの製造例〕塩基性物質の存在下に、２−チオシ
トシンアラビノシドと塩化トリメチルシランを反応さ
せ、２−チオシトシンアラビノシドの水酸基をトリメチ
ルシリル基で保護した下記式（３）で表される化合物
（以下第一中間体という）を生成させる。前記塩基性物
質としては、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジ
イソプロピルエチルアミン、ピリジンおよびルチジン等
の第三級アミン類が好適であり、これらの第三級アミン
類は２−チオシトシンアラビノシド１モルに対して４モ
ル以上使用することが好ましい。また、前記塩化トリメ
チルシランは、２−チオシトシンアラビノシド１モルに
対して４モル〜１０モル使用することが好ましい。さら
に、前記反応は有機溶媒中で行うことが好ましく、有機
溶媒としては反応の進行を妨げるものでなければ良く、
ピリジン、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、
アセトニトリル、クロロホルム、Ｎ，Ｎージメチルホル
ムアミドおよびジメチルスルホキシドならびにこれらの
混合溶媒等を用いることができる。反応温度は０℃〜２
５℃が好ましく、反応時間は５分間〜２時間の範囲が好
適である。[Production Example of 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside] 2-thiocytosine arabinoside is reacted with trimethylsilane chloride in the presence of a basic substance to give 2-thiocytosine arabinoside. A compound represented by the following formula (3) in which the hydroxyl group of the side is protected by a trimethylsilyl group (hereinafter referred to as a first intermediate) is produced. As the basic substance, tertiary amines such as trimethylamine, triethylamine, diisopropylethylamine, pyridine and lutidine are preferable. It is preferable to use at least mol. The trimethylsilane chloride is preferably used in an amount of 4 mol to 10 mol per 1 mol of 2-thiocytosine arabinoside. Further, the reaction is preferably performed in an organic solvent, as long as the organic solvent does not hinder the progress of the reaction,
Pyridine, 1,4-dioxane, tetrahydrofuran,
Acetonitrile, chloroform, N, N-dimethylformamide, dimethylsulfoxide, a mixed solvent thereof and the like can be used. Reaction temperature is 0 ° C ~ 2
5 ° C. is preferred, and the reaction time is suitably in the range of 5 minutes to 2 hours.

【００１２】[0012]

【化４】 Embedded image

【００１３】（式中、Ｒ¹ はトリメチルシリル基を示
す）(Wherein R ¹ represents a trimethylsilyl group)

【００１４】次に、上記で得られた第一中間体を、特に
単離を行わずに粗生成物の状態で炭素数４〜２０個の分
岐状カルボン酸の酸塩化物と反応させ、前記式（４）で
表される化合物（以下第二中間体という）を生成させ
る。前記炭素数４〜２０個の分岐状カルボン酸の酸塩化
物としては、イソブチロイルクロリド、ピバロイルクロ
リド、２，２−ジメチルブチロイルクロリド、２−エチ
ルブチロイルクロリド、２−メチルヘキサノイルクロリ
ド、２−エチルヘキサノイルクロリド、シクロヘキサノ
イルクロリド、１−アダマンタンカルボニルクロリド、
ジフェニルアセチルクロリドおよびトリフェニルアセチ
ルクロリド等が例示され、原料入手の容易性および抗癌
活性の面からピバロイルクロリド、１−アダマンタンカ
ルボニルクロリドおよびジフェニルアセチルクロリドが
好ましい。該カルボン酸塩化物は、２−チオシトシンア
ラビノシド１モルに対して１モルから１０モル使用する
ことが好ましい。反応温度は０℃〜５０℃が好ましく、
反応時間は使用するカルボン酸塩化物の種類により異な
るが、１０分間〜２４時間の範囲が好適である。Next, the first intermediate obtained above is reacted with an acid chloride of a branched carboxylic acid having 4 to 20 carbon atoms in the form of a crude product without particular isolation, A compound represented by the formula (4) (hereinafter referred to as a second intermediate) is produced. Examples of the acid chlorides of the branched carboxylic acid having 4 to 20 carbon atoms include isobutyroyl chloride, pivaloyl chloride, 2,2-dimethylbutyroyl chloride, 2-ethylbutyroyl chloride, and 2-methylhexanoyl. Chloride, 2-ethylhexanoyl chloride, cyclohexanoyl chloride, 1-adamantanecarbonyl chloride,
Examples thereof include diphenylacetyl chloride and triphenylacetyl chloride, and pivaloyl chloride, 1-adamantanecarbonyl chloride and diphenylacetyl chloride are preferred in view of availability of raw materials and anticancer activity. The carboxylic acid chloride is preferably used in an amount of 1 to 10 mol per 1 mol of 2-thiocytosine arabinoside. The reaction temperature is preferably 0 ° C to 50 ° C,
The reaction time varies depending on the type of carboxylic acid chloride used, but is preferably in the range of 10 minutes to 24 hours.

【００１５】[0015]

【化５】 Embedded image

【００１６】（式中、Ｒは炭素数が４〜２０個の分岐状
アルキル基を示し、Ｒ¹ はトリメチルシリル基を示す）Wherein R represents a branched alkyl group having 4 to 20 carbon atoms, and R ¹ represents a trimethylsilyl group.

【００１７】次に、上記で得られた第二中間体のトリメ
チルシリル基に酸、アルカリまたはフッ化物を作用させ
て、第二中間体のトリメチルシリル基を水素原子に置換
することにより、前記式（１）で表される４−Ｎ−アシ
ル−２−チオシトシンアラビノシドを製造する。前記ト
リメチルシリル基を水素原子に置換する反応で用いる
酸、アルカリまたはフッ化物としては、特に限定されな
いが、塩酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、アン
モニア水、フッ化水素酸ピリジニウム塩およびフッ化テ
トラブチルアンモニウムなどが好適である。上記反応で
酸を用いる場合は、反応を行う前に前記第二中間体をジ
エチルエーテル、クロロホルムおよび酢酸エチルなどの
有機溶媒で抽出した後、水または飽和食塩水による洗浄
を行うか、あるいは、減圧下で濃縮することによって、
過剰の塩基性物質を除去することが好ましい。反応温度
は０℃〜２５℃が好ましく、反応時間は使用する酸、ア
ルカリまたはフッ化物の種類により異なるが、１０分間
〜２４時間の範囲が好適である。また、本反応では、反
応の進行を妨げない範囲で任意の有機溶媒を用いること
ができ、有機溶媒としては前記２−チオシトシンアラビ
ノシドおよび塩化トリメチルシランとの反応で挙げた溶
媒を用いることができる。４−Ｎ−アシル−２−チオシ
トシンアラビノシドは、上記反応終了後に、溶媒抽出、
再結晶およびシリカゲルカラムクロマトグラフィーなど
の常法により、単離・精製することができる。Next, an acid, an alkali or a fluoride acts on the trimethylsilyl group of the second intermediate obtained above to replace the trimethylsilyl group of the second intermediate with a hydrogen atom. ) To produce 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside. The acid, alkali or fluoride used in the reaction for replacing the trimethylsilyl group with a hydrogen atom is not particularly limited, but hydrochloric acid, trifluoroacetic acid, trichloroacetic acid, aqueous ammonia, pyridinium hydrofluoride, and tetrabutylammonium fluoride And the like are preferred. When an acid is used in the above reaction, the second intermediate is extracted with an organic solvent such as diethyl ether, chloroform and ethyl acetate before the reaction, and then washed with water or a saturated saline solution, or reduced pressure. By concentrating under
It is preferred to remove excess basic substances. The reaction temperature is preferably from 0 ° C to 25 ° C, and the reaction time varies depending on the type of acid, alkali or fluoride used, but is preferably from 10 minutes to 24 hours. In this reaction, any organic solvent can be used as long as it does not hinder the progress of the reaction. As the organic solvent, the solvents mentioned in the reaction with 2-thiocytosine arabinoside and trimethylsilane chloride are used. Can be. After completion of the reaction, 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside was subjected to solvent extraction,
It can be isolated and purified by a conventional method such as recrystallization and silica gel column chromatography.

【００１８】また、本発明における４−Ｎ−アシル−２
−チオシトシンアラビノシドを活性成分として含有する
抗癌剤の調製では、前記４−Ｎ−アシル−２−チオシト
シンアラビノシドと薬学的に許容される賦形剤を組み合
わせることが好ましい。この薬学的に許容される賦形剤
としては、水、生理食塩水、動物油、植物油、ポリエチ
レングリコールおよびグリセリン等の多価アルコール、
界面活性剤、酸化防止剤、抗菌性物質ならびに緩衝剤な
どが例示される。The 4-N-acyl-2 in the present invention
In the preparation of an anticancer agent containing -thiocytosine arabinoside as an active ingredient, it is preferable to combine the 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside with a pharmaceutically acceptable excipient. Examples of the pharmaceutically acceptable excipient include water, physiological saline, animal oil, vegetable oil, polyhydric alcohols such as polyethylene glycol and glycerin,
Examples include surfactants, antioxidants, antibacterial substances, and buffers.

【００１９】[0019]

【実施例】以下、実施例により本発明における４−Ｎ−
アシル−２−チオシトシンアラビノシドの合成例につい
て説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるも
のではない。The following examples illustrate 4-N- according to the present invention.
Synthesis examples of acyl-2-thiocytosine arabinoside will be described, but the present invention is not limited to these examples.

【００２０】［実施例１］ ４−Ｎ−ピバロイル−２−チオシトシンアラビノシド
［下記式（５）で表される化合物であり、以下化合物１
という］の合成Example 1 4-N-pivaloyl-2-thiocytosine arabinoside [a compound represented by the following formula (5);
The synthesis of

【００２１】[0021]

【化６】 Embedded image

【００２２】ピリジン２５ｍｌに２−チオシトシンアラ
ビノシド１．５０ｇ（５．７６ｍｍｏｌ）を溶解させ、
この溶解液に塩化トリメチルシラン３．７０ｍｌ（２
９．２ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で３０分間撹拌後、さ
らにピバロイルクロリド０．８５ｍｌ（６．９０ｍｍｏ
ｌ）を加えた。室温下で２時間反応させた後、水３ｍｌ
を加え１０分間撹拌した。次に、０℃の条件で２８重量
％のアンモニア水３ｍｌを加え、室温下で６０分間撹拌
した。得られた反応混合物を濃縮後、水およびクロロホ
ルムを加えて結晶化し、無色結晶性の化合物１．５４７
ｇを得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲおよびＩＲ分析により上記化合
物１であることを確認した。化合物１の収率は７８モル
％であった。 ¹Ｈ−ＮＭＲおよびＩＲ分析チャートの各
ピークならびにシリカゲル薄層クロマトグラフィーの移
動度を以下に示す。 １） ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯd6）δ：１．２５（９Ｈ，
ｓ），３．７２（２Ｈ，ｍ），３．９７（２Ｈ，ｍ），
４．３８（１Ｈ，ｍ），５．３７（３Ｈ，ｂｒ），６．
８３（１Ｈ，ｄ），７．５３（１Ｈ，ｄ），８．２０
（１Ｈ，ｄ），１０．４３（１Ｈ，ｂｒ） ２）ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３６０，２９６０，２９
３０，１７００，１６１０，１５１０，１４２０，１３
３０，１１２０． ３）シリカゲル薄層クロマトグラフィー Ｒｆ：０．２
４（クロロホルム：メタノール＝１０：１）1.25 g (5.76 mmol) of 2-thiocytosine arabinoside was dissolved in 25 ml of pyridine,
3.70 ml of trimethylsilane chloride (2.
After stirring at room temperature for 30 minutes, pivaloyl chloride (0.85 ml, 6.90 mmol) was further added.
l) was added. After reacting at room temperature for 2 hours, water 3ml
Was added and stirred for 10 minutes. Next, 3 ml of 28% by weight aqueous ammonia was added at 0 ° C., and the mixture was stirred at room temperature for 60 minutes. After concentrating the obtained reaction mixture, water and chloroform were added thereto to crystallize, and a colorless crystalline compound 1.547 was obtained.
g was obtained. It was confirmed to be the above compound 1 by ¹ H-NMR and IR analysis. The yield of compound 1 was 78 mol%. ^The peaks of the ¹ H-NMR and IR analysis charts and the mobility of silica gel thin layer chromatography are shown below. 1) ¹ H-NMR (DMSOd6) δ: 1.25 (9H,
s), 3.72 (2H, m), 3.97 (2H, m),
4.38 (1H, m), 5.37 (3H, br), 6.
83 (1H, d), 7.53 (1H, d), 8.20
(1H, d), 10.43 (1H, br) 2) IR (KBr) cm ^-1 : 3360, 2960, 29
30, 1700, 1610, 1510, 1420, 13
30, 1120. 3) Silica gel thin layer chromatography Rf: 0.2
4 (chloroform: methanol = 10: 1)

【００２３】［実施例２］ ４−Ｎ−シクロヘキサノイル−２−チオシトシンアラビ
ノシド［下記式（６）で表される化合物であり、以下化
合物２という］の合成Example 2 Synthesis of 4-N-cyclohexanoyl-2-thiocytosine arabinoside [a compound represented by the following formula (6), hereinafter referred to as compound 2]

【００２４】[0024]

【化７】 Embedded image

【００２５】ピリジン２０ｍｌに２−チオシトシンアラ
ビノシド１．１２ｇ（４．３０ｍｍｏｌ）を溶解させ、
この溶解液に塩化トリメチルシラン３．３０ｍｌ（２
６．０ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で３０分間撹拌後、さ
らにシクロヘキサノイルクロリド０．８６ｍｌ（６．４
３ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で１時間反応させた後、
メタノール２ｍｌを加え反応を停止した。次に、あらか
じめ０℃の条件でピリジン２０ｍｌにフッ化水素酸ピリ
ジニウム（フッ化水素酸７０％、ピリジン３０％混合
物）２ｍｌを混合させた溶液を加え、室温下で３０分間
撹拌した。得られた反応混合物をクロロホルムで抽出
し、水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮
後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、さら
にエタノール−ヘキサン混合溶媒より再結晶し、無色結
晶性の化合物９１７ｍｇを得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲおよびＩ
Ｒ分析により上記化合物２であることを確認した。化合
物２の収率は５８モル％であった。 ¹Ｈ−ＮＭＲおよび
ＩＲ分析チャートの各ピークならびにシリカゲル薄層ク
ロマトグラフィーの移動度を以下に示す。 １） ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯd6−ＣＤＣＬ₃ ）δ：１．
１０−１．９７（１０Ｈ，ｍ），２．５０（１Ｈ，
ｍ），３．７５（２Ｈ，ｍ），４．０３（２Ｈ，ｍ），
４．４７（１Ｈ，ｍ），５．０７−５．５０（３Ｈ，
ｍ），６．９３（１Ｈ，ｄ），７．６５（１Ｈ，ｄ），
８．３３（１Ｈ，ｄ），１１．０５（１Ｈ，ｂｒ） ２）ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３９０，２９３０，２８
５０，１７００，１６１０，１５６０，１５１０，１４
２０，１３２０． ３）シリカゲル薄層クロマトグラフィー Ｒｆ：０．２
８（クロロホルム：メタノール＝１０：１）In 20 ml of pyridine, 1.12 g (4.30 mmol) of 2-thiocytosine arabinoside was dissolved.
3.30 ml of trimethylsilane chloride (2.
6.0 mmol) was added dropwise, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. Then, 0.86 ml (6.4 mmol) of cyclohexanoyl chloride was further added.
3 mmol) was added. After reacting for 1 hour at room temperature,
The reaction was stopped by adding 2 ml of methanol. Next, a solution in which 2 ml of pyridinium hydrofluoride (a mixture of 70% hydrofluoric acid and 30% pyridine) was mixed in advance with 20 ml of pyridine at 0 ° C. was added, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. The resulting reaction mixture was extracted with chloroform and washed with water. After drying over anhydrous magnesium sulfate and concentration, the mixture was subjected to silica gel column chromatography, and further recrystallized from a mixed solvent of ethanol and hexane to obtain 917 mg of a colorless crystalline compound. ¹ H-NMR and I
By R analysis, it was confirmed to be the above compound 2. The yield of compound 2 was 58 mol%. ^The peaks of the ¹ H-NMR and IR analysis charts and the mobility of silica gel thin layer chromatography are shown below. 1) ¹ H-NMR (DMSOd6-CDCL ₃ ) δ: 1.
10-1.97 (10H, m), 2.50 (1H,
m), 3.75 (2H, m), 4.03 (2H, m),
4.47 (1H, m), 5.07-5.50 (3H,
m), 6.93 (1H, d), 7.65 (1H, d),
8.33 (1H, d), 11.05 (1H, br) 2) IR (KBr) cm ^-1 : 3390, 2930, 28
50, 1700, 1610, 1560, 1510, 14
20, 1320. 3) Silica gel thin layer chromatography Rf: 0.2
8 (chloroform: methanol = 10: 1)

【００２６】［実施例３］ ４−Ｎ−（１−アダマンタンカルボニル）−２−チオシ
トシンアラビノシド［下記式（７）で表される化合物で
あり、以下化合物３という］の合成Example 3 Synthesis of 4-N- (1-adamantanecarbonyl) -2-thiocytosine arabinoside [a compound represented by the following formula (7), hereinafter referred to as compound 3]

【００２７】[0027]

【化８】 Embedded image

【００２８】ピリジン３０ｍｌに２−チオシトシンアラ
ビノシド１．６２ｇ（６．２２ｍｍｏｌ）を溶解させ、
この溶解液に塩化トリメチルシラン４．４０ｍｌ（３
１．５ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で３０分間撹拌後、さ
らに１−アダマンタンカルボニルクロリド１．８５ｇ
（９．３１ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で１６時間反応
させた後、メタノール２ｍｌを加え反応を停止した。次
に、あらかじめ０℃の条件でピリジン２０ｍｌにフッ化
水素酸ピリジニウム（フッ化水素酸７０％、ピリジン３
０％混合物）２ｍｌを混合させた溶液を加え、室温下で
３０分間撹拌した。得られた反応混合物をクロロホルム
で抽出し、水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾
燥、濃縮後、メタノールより再結晶し、黄色結晶性の化
合物１．７６ｇを得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲおよびＩＲ分析に
より上記化合物３であることを確認した。化合物３の収
率は６７モル％であった。 ¹Ｈ−ＮＭＲおよびＩＲ分析
チャートの各ピークならびにシリカゲル薄層クロマトグ
ラフィーの移動度を以下に示す。また、図１に化合物３
の ¹Ｈ−ＮＭＲチャートを示した。 １） ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯd6）δ：１．６８（６Ｈ，
ｍ），１．９６（９Ｈ，ｍ），３．６４（２Ｈ，ｍ），
３．９２（２Ｈ，ｍ），４．３６（１Ｈ，ｄ），５．１
０（１Ｈ，ｔ），５．５２（２Ｈ，ｑ），６．８８（１
Ｈ，ｄ），７．６３（１Ｈ，ｄ），８．２３（１Ｈ，
ｄ），１０．６７（１Ｈ，ｓ） ２）ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３５０，２９１０，２８
５０，１６９０，１６１０，１５７０，１５１０，１４
２０，１２３０，１１５０． ３）シリカゲル薄層クロマトグラフィー Ｒｆ：０．２
５（クロロホルム：メタノール＝１０：１）1.62 g (6.22 mmol) of 2-thiocytosine arabinoside was dissolved in 30 ml of pyridine.
4.40 ml of trimethylsilane chloride (3.
1.5 mmol) was added dropwise, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. Then, 1.85 g of 1-adamantanecarbonyl chloride was further added.
(9.31 mmol) was added. After reacting at room temperature for 16 hours, 2 ml of methanol was added to stop the reaction. Next, pyridinium hydrofluoride (hydrofluoric acid 70%, pyridine 3
(0% mixture) was added thereto, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. The resulting reaction mixture was extracted with chloroform and washed with water. After drying over anhydrous magnesium sulfate and concentration, recrystallization from methanol gave 1.76 g of a yellow crystalline compound. It was confirmed to be the above compound 3 by ¹ H-NMR and IR analysis. The yield of compound 3 was 67 mol%. ^The peaks of the ¹ H-NMR and IR analysis charts and the mobility of silica gel thin layer chromatography are shown below. In addition, FIG.
The ¹ H-NMR chart was shown. 1) ¹ H-NMR (DMSOd6) δ: 1.68 (6H,
m), 1.96 (9H, m), 3.64 (2H, m),
3.92 (2H, m), 4.36 (1H, d), 5.1
0 (1H, t), 5.52 (2H, q), 6.88 (1
H, d), 7.63 (1H, d), 8.23 (1H,
d), 10.67 (1H, s) 2) IR (KBr) cm ^-1 : 3350, 2910, 28
50, 1690, 1610, 1570, 1510, 14
20, 1230, 1150. 3) Silica gel thin layer chromatography Rf: 0.2
5 (chloroform: methanol = 10: 1)

【００２９】［実施例４］ ４−Ｎ−ジフェニルアセチル−２−チオシトシンアラビ
ノシド［下記式（８）で表わされる化合物であり、以下
化合物４という］の合成Example 4 Synthesis of 4-N-diphenylacetyl-2-thiocytosine arabinoside [a compound represented by the following formula (8), hereinafter referred to as compound 4]

【００３０】[0030]

【化９】 Embedded image

【００３１】ピリジン２５ｍｌに２−チオシトシンアラ
ビノシド１．５０ｇ（５．７６ｍｍｏｌ）を溶解させ、
この溶解液に塩化トリメチルシラン３．７０ｍｌ（２
９．２ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で３０分間撹拌後、さ
らにテトラヒドロフラン１０ｍｌにジフェニルアセチル
クロリド３．７９ｇ（１６．５ｍｍｏｌ）を溶解させた
溶液を加えた。室温下で１時間反応させた後、クロロホ
ルムで抽出し、水で洗浄した。有機層を濃縮後、残さを
クロロホルム５０ｍｌに溶解し、トリフルオロ酢酸５ｍ
ｌを加え、室温下で３０分間撹拌した。次に、得られた
反応混合物を濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフ
ィーによる精製を行い、淡黄色粉末状の化合物１．０７
ｇを得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲおよびＩＲ分析により上記化合
物４であることを確認した。化合物４の収率は４１％で
あった。 ¹Ｈ−ＮＭＲおよびＩＲ分析チャートの各ピー
クならびにシリカゲル薄層クロマトグラフィーの移動度
を以下に示す。 １） ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯd6）δ：３．６３（２Ｈ，
ｍ），３．９２（２Ｈ，ｍ），４．３６（１Ｈ，ｄ），
５．４０（１Ｈ，ｓ），５．５２（３Ｈ，ｂｒ），６．
８４（１Ｈ，ｄ），７．３１（１０Ｈ，ｍ），７．６１
（１Ｈ，ｄ），８．２６（１Ｈ，ｄ），１１．７６（１
Ｈ，ｓ） ２）ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３７０，２９４０，１７
２０，１６１０，１５６０，１５１０，１４２０，１３
８０，１３２０，１１５０． ３）シリカゲル薄層クロマトグラフィー Ｒｆ：０．２
５（クロロホルム：メタノール＝１０：１）In 25 ml of pyridine, 1.50 g (5.76 mmol) of 2-thiocytosine arabinoside was dissolved.
3.70 ml of trimethylsilane chloride (2.
9.2 mmol) was added dropwise, and after stirring at room temperature for 30 minutes, a solution of 3.79 g (16.5 mmol) of diphenylacetyl chloride in 10 ml of tetrahydrofuran was further added. After reacting at room temperature for 1 hour, the mixture was extracted with chloroform and washed with water. After concentrating the organic layer, the residue was dissolved in 50 ml of chloroform, and 5 ml of trifluoroacetic acid was added.
was added and stirred at room temperature for 30 minutes. Next, the obtained reaction mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography to obtain a pale yellow powdery compound (1.07).
g was obtained. It was confirmed to be the above compound 4 by ¹ H-NMR and IR analysis. The yield of compound 4 was 41%. ^The peaks of the ¹ H-NMR and IR analysis charts and the mobility of silica gel thin layer chromatography are shown below. 1) ¹ H-NMR (DMSOd6) δ: 3.63 (2H,
m), 3.92 (2H, m), 4.36 (1H, d),
5.40 (1H, s), 5.52 (3H, br), 6.
84 (1H, d), 7.31 (10H, m), 7.61
(1H, d), 8.26 (1H, d), 11.76 (1
H, s) 2) IR (KBr) cm ^-1 : 3370, 2940, 17
20, 1610, 1560, 1510, 1420, 13
80, 1320, 1150. 3) Silica gel thin layer chromatography Rf: 0.2
5 (chloroform: methanol = 10: 1)

【００３２】（実施例５〜７および比較例） 〔抗癌活性に関する動物実験〕Ｐ３８８（マウス白血病
株）腹水移植マウスに対する延命効果により抗癌活性を
評価した。マウス（ＣＤＦ１，雄）腹水にて継代維持さ
れたＰ３８８細胞を回収し、生理食塩水にて洗浄後、再
度生理食塩水で希釈し細胞数を顕微鏡下で数え、１×１
０⁷ 個／ｍｌの細胞懸濁液を調製した。０．１ｍｌの細
胞懸濁液（１×１０⁶ 個のＰ３８８細胞を含む）を同系
マウス（ＣＤＦ１，雄、４週齢）の腹腔内に移植した。
次に、表１に示す被験化合物を癌細胞移植翌日より５日
間に渡り、表１に示す量を腹腔内に投与し、その結果を
表１に示す。抗癌活性の指標としてＩＬＳ（％）を以下
の式にて求めた。 なお対照群には生理食塩水を同様の方法で投与した。(Examples 5 to 7 and Comparative Examples) [Animal Experiment on Anticancer Activity] The anticancer activity was evaluated by the survival effect on mice transplanted with P388 (mouse leukemia strain) ascites. P388 cells subcultured and maintained in mouse (CDF1, male) ascites were collected, washed with physiological saline, diluted again with physiological saline, and the number of cells was counted under a microscope.
0 ⁷ cells / ml of cell suspension was prepared. 0.1 ml of the cell suspension (containing 1 × 10 ⁶ P388 cells) was implanted intraperitoneally into syngeneic mice (CDF1, male, 4 weeks old).
Next, the test compounds shown in Table 1 were intraperitoneally administered in the amounts shown in Table 1 for 5 days from the day after the cancer cell transplantation, and the results are shown in Table 1. ILS (%) was determined by the following formula as an index of anticancer activity. The control group was administered with physiological saline in the same manner.

【００３３】[0033]

【表１】 [Table 1]

【００３４】対照群Ａ：生存日数 9.2 ±0.4 日 対照群Ｂ：生存日数 9.7 ±0.6 日Control group A: surviving days 9.2 ± 0.4 days Control group B: surviving days 9.7 ± 0.6 days

【００３５】[0035]

【発明の効果】本発明における４−Ｎ−アシル−２−チ
オシトシンアラビノシドは、動物実験において抗癌活性
を示し、医薬および核酸化学等の分野での利用価値は高
い。Industrial Applicability The 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside of the present invention has anticancer activity in animal experiments, and has a high utility value in the fields of medicine and nucleic acid chemistry.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】 化合物３の ¹Ｈ−ＮＭＲのチャートを示す。FIG. 1 shows a ¹ H-NMR chart of Compound 3.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 永田 敏幸 茨城県つくば市大久保２番 東亞合成株式 会社つくば研究所内 (72)発明者 吉田 ▲祇▼生 茨城県つくば市大久保２番 東亞合成株式 会社つくば研究所内 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continuing from the front page (72) Inventor Toshiyuki Nagata No. 2 Okubo Tsukuba, Ibaraki Prefecture Toagosei Co., Ltd. Inside Tsukuba Research Laboratories (72) Inventor Yoshida ▲ Gionsei No. 2 Okubo Tsukuba City, Ibaraki Prefecture Toagosei Tsukuba Co., Ltd. In the laboratory

Claims (2)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】下記式（１）で表される４−Ｎ−アシル−
２−チオシトシンアラビノシド。 【化１】 （式中、Ｒは炭素数が４〜２０個の分岐状アルキル基を
示す）1. A 4-N-acyl- represented by the following formula (1):
2-thiocytosine arabinoside. Embedded image (Wherein, R represents a branched alkyl group having 4 to 20 carbon atoms) 【請求項２】請求項１記載の４−Ｎ−アシル−２−チオ
シトシンアラビノシドを活性成分として含有する抗癌
剤。2. An anticancer agent comprising the 4-N-acyl-2-thiocytosine arabinoside according to claim 1 as an active ingredient.