JPH10288617A - Method for measuring concentration of ascorbic acid in liquid and test piece for measuring concentration of ascorbic acid in liquid - Google Patents
Method for measuring concentration of ascorbic acid in liquid and test piece for measuring concentration of ascorbic acid in liquidInfo
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- JPH10288617A JPH10288617A JP11352897A JP11352897A JPH10288617A JP H10288617 A JPH10288617 A JP H10288617A JP 11352897 A JP11352897 A JP 11352897A JP 11352897 A JP11352897 A JP 11352897A JP H10288617 A JPH10288617 A JP H10288617A
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、液体、特に血液・
尿等といった体液中のアスコルビン酸濃度の新規な測定
方法と、その測定方法を利用した乾式の試験片に関す
る。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a liquid,
The present invention relates to a novel method for measuring the concentration of ascorbic acid in a body fluid such as urine and the like, and a dry-type test piece using the method.
【０００２】[0002]
【従来の技術】ビタミンＣ、即ちアスコルビン酸（以降
ＡｓＡと略することもある）は、体内では重要なビタミ
ンであり、欠乏した場合には壊血病になることはよく知
られている。ＡｓＡは、人の体内では生合成されないた
め、一般に新鮮な野菜や果物から摂取しているが、近年
では、ビタミン多量摂取健康法に対する関心が高まり、
錠剤等から例えば一日に１０００ｍｇ以上など必要以上
に摂取する傾向が高くなってきた。また、各種飲料や食
物中にも健康増進や保存剤の目的で積極的に添加され、
通常の生活をしていても過剰量を摂取しがちである。摂
取されたＡｓＡは腸管を通して吸収されるが、水溶性で
あるために必要分以外は尿中に排出され、上記のような
理由により血液や尿などの体液中のＡｓＡ濃度の高いケ
ースが多くなっている。2. Description of the Related Art Vitamin C, ie, ascorbic acid (hereinafter sometimes referred to as AsA) is an important vitamin in the body, and it is well known that deficiency results in scurvy. AsA is not biosynthesized in the human body, so it is generally taken from fresh vegetables and fruits.
The tendency to consume more than necessary, such as 1000 mg or more per day, from tablets or the like has increased. In addition, it is actively added to various beverages and foods for the purpose of promoting health and preservatives,
Even during normal life, they tend to consume too much. The ingested AsA is absorbed through the intestinal tract, but is excreted in urine except for the necessary amount because it is water-soluble. In many cases, the AsA concentration in body fluids such as blood and urine is high due to the above reasons. ing.
【０００３】一方、血液、尿などの体液中の特定の成分
は疾病の診療時に有効な判定材料となることから、臨床
検査の分野においては、体液中の目的成分（例えばグル
コース）の濃度を測定することは重要な手段となってい
る。これらの濃度測定は酸化発色反応を利用し、発色後
の反射率等を測定することによって行うことが多い。と
ころが体液中のＡｓＡは還元能力を有するため、酸化発
色反応など化学反応を用いた各種成分測定において、し
ばしば誤差要因となる。例えば、ペルオキシターゼ過酸
化水素系を用いる酸化酵素反応を利用する酸化発色反応
においては、ＡｓＡ等の体液中に存在する還元物質によ
り過酸化水素が消費され、負の誤差を与えることが知ら
れている。このような反応を利用した検査においては、
ＡｓＡの妨害により定量値が少なめに示され、陽性であ
っても陰性と判断される恐れがある。上記のように、近
年では血液や尿などの体液中のＡｓＡ濃度の高いケース
が多いため、特にＡｓＡによる妨害が顕著となってきて
いる。[0003] On the other hand, since specific components in body fluids such as blood and urine are effective judgment materials when diagnosing a disease, in the field of clinical examination, the concentration of a target component (eg, glucose) in body fluids is measured. Is an important tool. These density measurements are often performed by utilizing the oxidative color development reaction and measuring the reflectance and the like after color development. However, AsA in a body fluid has a reducing ability, and often causes an error in measurement of various components using a chemical reaction such as an oxidative coloring reaction. For example, in an oxidative color reaction using an oxidase reaction using a peroxidase hydrogen peroxide system, it is known that hydrogen peroxide is consumed by a reducing substance present in a body fluid such as AsA and gives a negative error. . In tests using such reactions,
Due to the interference of AsA, the quantitative value is shown to be small, and even if positive, there is a possibility that it is determined to be negative. As described above, in recent years, there are many cases where the concentration of AsA in body fluids such as blood and urine is high, so that interference by AsA has been particularly remarkable.
【０００４】そこでＡｓＡの悪影響を回避又は低減する
ための対策として、ＡｓＡをあらかじめ前処理する工夫
や、測定と同時に処理するといった工夫を行なっている
が、前処理方法では時間と手間がかかり、また、同時処
理方法では目的成分の測定前に瞬時に処理する必要があ
る上に、目的成分の反応と競合反応となることが多く、
完全な影響回避は困難である。In order to avoid or reduce the adverse effects of AsA, various measures have been taken to pretreat AsA in advance or to treat it at the same time as measurement. However, the pretreatment method requires time and labor, and However, in the simultaneous processing method, it is necessary to perform an instantaneous treatment before the measurement of the target component.
Complete impact avoidance is difficult.
【０００５】ここで、目的成分の判定前に何らかの方法
でＡｓＡ濃度が判れば、目的成分の反応が影響をどの程
度受けるかが予め判り、ＡｓＡの悪影響をあらかじめ考
慮した判定が出来る。つまり、ＡｓＡの濃度を簡単に知
ることは、ＡｓＡの値が所定値以上かどうかを知るだけ
でも偽陰性の発生を未然に防ぐことができ有効であり、
成分測定結果の信頼性を後々確認する上でも、大きな意
味がある。さて、現在知られているＡｓＡ濃度の測定方
法としては、インドフェノール法、ジクロロフェノール
インドフェノール法、メチレングリーン法、ジニトロフ
ェニルヒドラジン法、２ニトロメトキシアニリン法、高
速液体クロマトグラフィー法等があるが、疾病の診療等
の現場で用いるには大きな設備や、煩雑な手間を要する
測定方法は実用的でない。Here, if the AsA concentration is determined by any method before the determination of the target component, it is possible to determine in advance how much the reaction of the target component will be affected, and the determination can be made in consideration of the adverse effect of AsA. That is, simply knowing the concentration of AsA is effective simply by knowing whether the value of AsA is equal to or higher than a predetermined value can prevent the occurrence of false negatives, and is effective.
It is also significant in confirming the reliability of the component measurement results later. Well, currently known methods for measuring the AsA concentration include an indophenol method, a dichlorophenolindophenol method, a methylene green method, a dinitrophenylhydrazine method, a 2nitromethoxyaniline method, and a high performance liquid chromatography method. Large equipment and complicated measurement methods are not practical for use in the field of medical treatment of diseases and the like.
【０００６】一般的で簡便なＡｓＡ濃度の測定方法とし
ては、ジクロロフェノールインドフェノール法、メチレ
ングリーン法といった色素を用いる方法があるが、いず
れもＡｓＡの還元力を利用して元来有色である指示薬を
脱色させるものであり、溶液系であっても、指示薬の量
で測定域の上限が決まってしまい、広範囲のＡｓＡ濃度
を知るには適さない。これらの方法では一般に０〜５０
ｍｇ／ｄｌの範囲内が限界で、５０ｍｇ／ｄｌを越える
と指示薬の色が完全に脱色され測定が不可能となる。As a general and simple method for measuring the concentration of AsA, there is a method using a dye such as a dichlorophenolindophenol method or a methylene green method. In any case, an indicator which is originally colored using the reducing power of AsA is used. Is decolorized, and even in a solution system, the upper limit of the measurement range is determined by the amount of the indicator, which is not suitable for knowing the AsA concentration in a wide range. In these methods, generally 0 to 50
The limit is in the range of mg / dl, and if it exceeds 50 mg / dl, the color of the indicator is completely bleached and measurement becomes impossible.
【０００７】[0007]
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記問題点
を鑑み、液体、特に血液・尿などの体液中のＡｓＡ濃度
を簡単に測定し、しかも、広範囲なＡｓＡ濃度を測定可
能にする方法を提供するものである。また、さらに検査
試薬の保存安定性や取り扱いの点から、緊急時や検体数
の多い時に有用である、液体中のアスコルビン酸濃度測
定用試験片を提供するものである。SUMMARY OF THE INVENTION In view of the above problems, the present invention provides a method for simply measuring the concentration of AsA in a liquid, particularly a body fluid such as blood or urine, and for measuring the concentration of AsA in a wide range. Is provided. Another object of the present invention is to provide a test strip for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid, which is useful in emergency or when the number of specimens is large, from the viewpoint of storage stability and handling of the test reagent.
【０００８】[0008]
【課題を解決するための手段】本発明は、液体にヨウ素
酸またはその塩、トリンダー試薬、およびカップラーを
添加し、液体中のアスコルビン酸の還元力によりヨウ素
酸またはその塩からヨウ素を遊離させ、該ヨウ素により
トリンダー試薬とカップラーを酸化縮合させて発色させ
ることを特徴とする、液体中のアスコルビン酸濃度の測
定方法を提供するものである。According to the present invention, iodic acid or a salt thereof, a Trinder reagent and a coupler are added to a liquid, and iodine is released from iodic acid or a salt thereof by the reducing power of ascorbic acid in the liquid. An object of the present invention is to provide a method for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid, characterized in that a color is formed by oxidatively condensing a Trinder reagent and a coupler with the iodine.
【０００９】[0009]
【発明の実施の形態】本発明の作用は、液体中のアスコ
ルビン酸がヨウ素酸またはその塩と反応してヨウ素が遊
離し、該ヨウ素の酸化力がトリンダー試薬とカップラー
の酸化縮合を引き起こして発色するものである。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION The function of the present invention is that ascorbic acid in a liquid reacts with iodic acid or a salt thereof to liberate iodine, and the oxidizing power of the iodine causes oxidative condensation of a Trinder reagent and a coupler to form a color. Is what you do.
【００１０】具体的には、例えばアスコルビン酸による
濃度標準液を作成し、上記測定法により発色の度合いを
測定して、検量線を作成し、次に被検体である液体中の
アスコルビン酸による発色の度合いを同様に測定して、
検量線より被検体である液体中のアスコルビン酸の濃度
を求める等の方法が用いられる。発色の度合いの測定方
法としては、反射率や吸光度の測定や、比色測定等が挙
げられる。[0010] Specifically, for example, a concentration standard solution of ascorbic acid is prepared, the degree of color development is measured by the above-described measurement method, a calibration curve is prepared, and then the color development of ascorbic acid in the liquid to be tested is performed. Measure the degree of
A method of determining the concentration of ascorbic acid in a liquid as a test object from a calibration curve is used. Examples of the method for measuring the degree of color development include measurement of reflectance and absorbance, and colorimetry.
【００１１】この現象は、後述するようにアスコルビン
酸に対し特異的なものであるため、例えば、ペルオキシ
ターゼ過酸化水素系を用いる酸化酵素反応を利用する酸
化発色反応のようなアスコルビン酸が妨害要因となる反
応系において、予め、本発明の測定法により、被検体で
ある液体（以下被検液とすることもある。）中のアスコ
ルビン酸濃度を測定しておくことにより、酸化発色反応
におけるアスコルビン酸による妨害度合いを考慮したバ
ックグラウンド測定方法として応用することもできる。Since this phenomenon is specific to ascorbic acid as will be described later, for example, ascorbic acid such as an oxidative color reaction using an oxidase reaction using a peroxidase hydrogen peroxide system is an obstacle. In a reaction system, the concentration of ascorbic acid in a liquid to be tested (hereinafter, also referred to as a test liquid) is measured in advance by the measurement method of the present invention, whereby ascorbic acid in the oxidative color reaction is measured. It can also be applied as a background measurement method that takes into account the degree of interference due to noise.
【００１２】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度の測
定方法の測定対象となる液体としては特に限定はされな
いが、血液、尿等の体液に対して特に有効である。The liquid to be measured by the method for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention is not particularly limited, but is particularly effective for body fluids such as blood and urine.
【００１３】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度の測
定方法で使用するトリンダー試薬としては、特に限定は
されず、目的とする発色の程度や色に応じ適宜選定すれ
ば良いが、好ましくはナフトール、５−メチル−１−ナ
フトール、１−ナフト−ル−３，６−ジスルホン酸、ｏ
−メトキシフェノール、ジメチルアニリン、ジエチルア
ニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スル
ホプロピル）−ｍ−トルイジン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２
−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−メトキ
シアニリンから選ばれるいずれか一種であるのが好まし
い。There are no particular restrictions on the Trinder reagent used in the method for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention, and it may be appropriately selected according to the desired color development degree and color. 5-methyl-1-naphthol, 1-naphthol-3,6-disulfonic acid, o
-Methoxyphenol, dimethylaniline, diethylaniline, N-ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -m-toluidine, N-ethyl-N- (2
-Hydroxy-3-sulfopropyl) -3,5-methoxyaniline.
【００１４】本発明に使用するカップラーは、トリンダ
ー試薬と酸化縮合して呈色するものであれば特に限定は
されず、好ましくは４−アミノアンチピリンが良い。The coupler used in the present invention is not particularly limited as long as it is colored by oxidative condensation with a Trinder reagent, and 4-aminoantipyrine is preferred.
【００１５】本発明において、適切な発色を得るために
は被検液のｐＨが大きく影響する。好ましくは被検液の
ｐＨが４．０〜８．０となるよう調整するのが良く、さ
らに好ましくは、ｐＨ５．６〜６．５であるのが良い。
ｐＨが低すぎると、アスコルビン酸の存在なしにヨウ素
酸またはその塩からヨウ素が遊離しやすくなり、発色の
誤差が生じる。また、ｐＨが高すぎると、ヨウ素酸また
はその塩からのヨウ素の遊離が起らなくなり、発色反応
が生じない。In the present invention, the pH of the test solution has a great influence on obtaining appropriate color development. Preferably, the pH of the test solution is adjusted to be 4.0 to 8.0, and more preferably, the pH is 5.6 to 6.5.
If the pH is too low, iodine tends to be liberated from iodic acid or a salt thereof without the presence of ascorbic acid, causing an error in coloring. On the other hand, when the pH is too high, release of iodine from iodic acid or a salt thereof does not occur, and a color-forming reaction does not occur.
【００１６】本発明において、ヨウ素酸の塩としては、
特に限定はされず、アンモニウム塩、カリウム塩、コバ
ルト塩、ナトリウム塩、リチウム塩等が挙げられる。In the present invention, the salt of iodic acid includes
There is no particular limitation, and examples thereof include ammonium salts, potassium salts, cobalt salts, sodium salts, and lithium salts.
【００１７】被検液のｐＨを上記範囲内に調整するため
の緩衝剤としては、ｐＨを上記範囲内に調整することが
可能であって本発明の作用を阻害しないものであれば、
特に限定はされず、目的とするｐＨの範囲等に応じて適
宜選択すれば良く、例えばＡＤＡ−水酸化ナトリウム緩
衝液、ＭＥＳ−水酸化ナトリウム緩衝液、クエン酸−水
酸化ナトリウム緩衝液等が挙げられる。As a buffer for adjusting the pH of the test solution within the above range, any buffer capable of adjusting the pH within the above range and not inhibiting the action of the present invention can be used.
It is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended pH range and the like, and examples thereof include ADA-sodium hydroxide buffer, MES-sodium hydroxide buffer, citric acid-sodium hydroxide buffer and the like. Can be
【００１８】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度の測
定方法は、液体中のアスコルビン酸がヨウ素酸またはそ
の塩と反応してヨウ素が遊離し、該ヨウ素の酸化力がト
リンダー試薬とカップラーの酸化縮合を引き起こして着
色するものであるから、体液中に存在するＡｓＡ以外の
還元性物質、例えば、尿酸１ナトリウム、シュウ酸、グ
ルコース等が混在している場合、これらの物質がＡｓＡ
と同様に、ヨウ素の遊離を引き起こし、呈色に誤差を生
じる可能性が考えられるが、試験例に示されるように、
それら他の還元性物質の干渉・影響は全く確認されず、
問題はない。特に体液中には存在せず、ＡｓＡよりも還
元能力の高い、没食子酸（３、４、５−トリオキシ安息
香酸）の存在下であっても干渉・影響は全く確認されな
いことから、本発明の測定方法は液体中のアスコルビン
酸濃度の測定に対し、特異的に用いることができる。The method for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention is characterized in that ascorbic acid in the liquid reacts with iodic acid or a salt thereof to release iodine, and the oxidizing power of the iodine is determined by the oxidative condensation of the Triinder reagent and the coupler. When a reducing substance other than AsA present in the body fluid, for example, monosodium urate, oxalic acid, glucose, etc., is present, these substances become AsA.
In the same manner as described above, it is possible that iodine is released and an error may occur in coloration, but as shown in the test examples,
No interference or influence of these other reducing substances was confirmed at all,
No problem. In particular, no interference or influence is observed even in the presence of gallic acid (3,4,5-trioxybenzoic acid), which is not present in body fluids and has a higher reducing ability than AsA, so that no interference or influence is confirmed. The measuring method can be used specifically for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid.
【００１９】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度の測
定法の応用として、ヨウ素酸またはその塩と、トリンダ
ー試薬と、カップラーと、被検液のｐＨを調整する緩衝
剤とを含有する試験片とし、該試験片上に測定対象の液
体によって液層を生じさせ、該試験片上で反応を行わせ
るようにしても良い。As an application of the method for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention, a test piece containing iodic acid or a salt thereof, a Trinder reagent, a coupler, and a buffer for adjusting the pH of a test solution is used. Alternatively, a liquid layer may be formed on the test piece by the liquid to be measured, and the reaction may be performed on the test piece.
【００２０】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度測定
用試験片の上記各成分を含有する試薬層の形成方法は特
に限定はされないが、好ましくは適当な溶媒に溶解し、
多孔性マトリックスに含浸、乾燥して形成するのがよ
い。The method for forming the reagent layer containing the above components of the test strip for measuring the concentration of ascorbic acid in the liquid of the present invention is not particularly limited, but is preferably dissolved in an appropriate solvent.
The porous matrix is preferably formed by impregnating and drying.
【００２１】多孔性マトリックスとしては、濾紙、布、
メンブレンフィルター等が挙げられるが、特に限定はさ
れない。As the porous matrix, filter paper, cloth,
Although a membrane filter etc. are mentioned, it is not specifically limited.
【００２２】試薬層の形成時には、溶媒に、溶液の含浸
性を良くするための界面活性剤や、試薬の溶解性を良く
するための可溶化剤等の添加剤を加えてもよい。When forming the reagent layer, an additive such as a surfactant for improving the impregnation of the solution or a solubilizing agent for improving the solubility of the reagent may be added to the solvent.
【００２３】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度測定
用試験片に各成分を含有させる方法は、常法による。即
ち、それぞれ所望の量が含有されるよう、可溶な溶媒に
溶解して溶液とし、該溶液を多孔性マトリックスに含浸
後、乾燥すれば良い。The method for incorporating each component into the test piece for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention is a conventional method. That is, a solution may be obtained by dissolving in a soluble solvent so that desired amounts are contained, and the solution may be impregnated with a porous matrix and then dried.
【００２４】各成分は、２以上の成分を同一の溶媒に溶
解して含浸してもよいし、それぞれ異なる溶媒に溶解し
順次含浸・乾燥を繰り返してもよい。また、同種の溶媒
に、別々に溶解し順次含浸・乾燥を繰り返してもよい。
さらに、２以上の成分を同一の溶媒に同時に溶解しても
よいし、順次添加して溶解してもよい。また、互いに溶
解する異なる溶媒に別々に溶解後、混合して溶液とし、
含浸しても良い。Each component may be impregnated by dissolving two or more components in the same solvent, or may be dissolved in different solvents and the impregnation and drying may be repeated sequentially. Moreover, you may dissolve in the same kind of solvent separately, and may repeat impregnation and drying sequentially.
Further, two or more components may be dissolved in the same solvent at the same time, or may be sequentially added and dissolved. In addition, after separately dissolved in different solvents that are mutually soluble, mixed to form a solution,
It may be impregnated.
【００２５】各成分を溶解する溶媒は、該成分を溶解
し、本発明の作用を阻害しないものであれば特に限定は
されず、水、エタノール等が挙げられる。The solvent for dissolving each component is not particularly limited as long as it dissolves the component and does not inhibit the action of the present invention, and examples thereof include water and ethanol.
【００２６】乾燥方法は、常法により、自然乾燥、温風
オーブン等により行う。また、 乾燥工程の前に、ロー
ラー等で多孔性マトリックスを圧迫し、該多孔性マトリ
ックス表面上の余分な溶液を除去してもよい。The drying is carried out by a conventional method, such as natural drying and a hot air oven. Before the drying step, the porous matrix may be pressed with a roller or the like to remove excess solution on the surface of the porous matrix.
【００２７】本発明の試験片の試薬層は、試薬成分等を
バインダーと共に適当な溶媒に溶解し、成膜して形成し
てもよい。The reagent layer of the test piece of the present invention may be formed by dissolving reagent components and the like together with a binder in an appropriate solvent and forming a film.
【００２８】使用するバインダーとしては、ポリビニル
ピロリドン（ＰＶＰ）、ヒドロキシプロピルセルロース
（ＨＰＣ）、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロ
ース、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン，ポリアクリル
アミド、ポリビニルアルコールなどの親水性高分子が好
適である。これらの親水性高分子を用いる場合、溶媒は
水性媒体、特に水である。As the binder to be used, hydrophilic polymers such as polyvinylpyrrolidone (PVP), hydroxypropylcellulose (HPC), methylcellulose (MC), ethylcellulose, sodium alginate, gelatin, polyacrylamide and polyvinyl alcohol are preferable. When using these hydrophilic polymers, the solvent is an aqueous medium, especially water.
【００２９】成膜方法は、常法による。支持体の上にコ
ーティング、乾燥させて成膜してもよいし、平面上に塗
布、展開し、乾燥ののち剥離させてフィルム状にしても
よい。The film is formed by a conventional method. It may be coated on a support and dried to form a film, or may be applied and spread on a flat surface, dried and then peeled off to form a film.
【００３０】バインダーを使用する場合、溶媒に緩衝剤
や、試薬の溶解性、溶液の塗布性を良くするための界面
活性剤等の添加剤を加えてもよい。When a binder is used, a buffer may be added to the solvent, or an additive such as a surfactant for improving the solubility of the reagent and the applicability of the solution.
【００３１】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度測定
用試験片が、支持体も含め２層以上の構成となる場合、
積層方法は常法による。すなわちバインダーを使用する
場合は、グラビアロール、グラビアコーター等任意のコ
ーティング法を用いて積層する。When the test piece for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention comprises two or more layers including a support,
The laminating method is a conventional method. That is, when a binder is used, lamination is performed using an arbitrary coating method such as a gravure roll or a gravure coater.
【００３２】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度測定
用試験片に含有される各成分の割合は、各成分の種類、
試験片の使用目的、使用形態および使用方法等によって
適宜変化させる。The proportion of each component contained in the test piece for measuring the concentration of ascorbic acid in the liquid of the present invention depends on the type of each component,
It is appropriately changed depending on the purpose of use, use form, use method, and the like of the test piece.
【００３３】ヨウ素酸またはその塩、トリンダー試薬、
カップラーの各成分は、本発明の試験片の使用時に対象
となる液体によって形成される液層中で、測定対象のＡ
ｓＡと充分反応する量を含んでいる必要がある。また、
被検液のｐＨを調整する緩衝剤の量は、本発明の液体中
のアスコルビン酸濃度測定用試験片の使用時における被
検液の量に応じて決定するのが好ましい。好ましくは、
試験片上に形成された液層における液体のｐＨが４．０
〜８．０、さらに好ましくはｐＨが５．５〜６．５とな
るようにするのが良い。Iodic acid or a salt thereof, a Trinder reagent,
Each component of the coupler is included in the liquid layer formed by the liquid to be measured when the test piece of the present invention is used.
It must contain an amount sufficient to react with sA. Also,
The amount of the buffer for adjusting the pH of the test solution is preferably determined according to the amount of the test solution when the test piece for measuring ascorbic acid concentration in the liquid of the present invention is used. Preferably,
The pH of the liquid in the liquid layer formed on the test piece is 4.0.
The pH is preferably adjusted to 5.5 to 6.5, more preferably 5.5 to 6.5.
【００３４】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度測定
用試験片は、実際の分析において取り扱いが容易なよう
に、支持体を有していてもよい。支持体は、液層を保持
するために液体不透性であるのが好ましく、ポリエチレ
ンテレフタレート等のプラスティックフィルム、不透性
の紙、金属箔等が挙げられる。発色反応の測定を支持体
側から行う場合は、支持体は透明でなければならない。The test piece for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention may have a support so that it can be easily handled in actual analysis. The support is preferably liquid-impermeable in order to hold a liquid layer, and examples thereof include a plastic film such as polyethylene terephthalate, impermeable paper, and metal foil. When the color reaction is measured from the support side, the support must be transparent.
【００３５】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度測定
用試験片は、実際の分析において取り扱いが容易なよう
に、最上層に保護層を設けてもよい。保護層は、液体透
過性、もしくは液体溶解性であれば、特に限定はされな
いが、親水性で透明であるのが好ましい。The test piece for measuring the concentration of ascorbic acid in the liquid of the present invention may be provided with a protective layer on the uppermost layer so that it can be easily handled in actual analysis. The protective layer is not particularly limited as long as it is liquid-permeable or liquid-soluble, but is preferably hydrophilic and transparent.
【００３６】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度測定
用試験片が、支持体、保護層を含め、２層以上の構成と
なる場合、積層方法は常法による。即ち、バインダーを
使用するもしくは樹脂材で構成される層は、グラビアロ
ール等の任意のコーティング方法を用い、濾紙等の多孔
性マトリックスに溶液を含浸する層は、含浸後湿潤状態
でラミネートする、あるいは含浸・乾燥後、接着剤等を
用いて積層する等の方法が挙げられる。When the test piece for measuring the concentration of ascorbic acid in the liquid according to the present invention comprises two or more layers including a support and a protective layer, the laminating method is a conventional method. That is, the layer using a binder or a resin material, using an arbitrary coating method such as a gravure roll, the layer impregnating the porous matrix such as filter paper with the solution is laminated in a wet state after impregnation, or After the impregnation and drying, a method of laminating with an adhesive or the like may be used.
【００３７】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度測定
用試験片は、各層を積層した後、適当な大きさ、例えば
５ｍｍ × ５ｍｍ程度に裁断し、さらにベースフィル
ムに両面テープ、接着剤等で固定してもよい。ベースフ
ィルムの材質はポリエチレンテレフタレート等が挙げら
れるが、特に限定はされない。また、ベースフィルムの
形状も特に限定はされないが、ストリップ状の形状が好
ましい。The test piece for measuring the concentration of ascorbic acid in the liquid of the present invention, after laminating each layer, is cut into an appropriate size, for example, about 5 mm × 5 mm, and fixed to a base film with a double-sided tape, an adhesive or the like. May be. The material of the base film includes polyethylene terephthalate and the like, but is not particularly limited. Also, the shape of the base film is not particularly limited, but a strip shape is preferable.
【００３８】各層を積層した後、適当な大きさ、例えば
５ｍｍ × ７ｍｍ程度にカットし、更にベースフィル
ムに両面テープ、接着剤などで固定してもよい。ベース
フィルムの材質はポリエチレンテレフタレート等が挙げ
られるが、特に限定はされない。また、ベースフィルム
の形状も特に限定はされないが、ストリップ状の形状が
好ましい。After laminating each layer, the layers may be cut into a suitable size, for example, about 5 mm × 7 mm, and fixed to a base film with a double-sided tape, an adhesive or the like. The material of the base film includes polyethylene terephthalate and the like, but is not particularly limited. Also, the shape of the base film is not particularly limited, but a strip shape is preferable.
【００３９】試薬層、または保護層等の厚さは、必要に
応じて適宜定めれば良いが、好ましくは試薬層の厚さが
ウェット厚１００〜 ３００ミクロンであるのが良い。
以下に、本発明を効果を試験例及び実施例を用いて説明
するが、本発明はこれに限られるものではない。The thickness of the reagent layer, the protective layer and the like may be appropriately determined as needed, but preferably the thickness of the reagent layer is 100 to 300 microns in wet thickness.
Hereinafter, the effects of the present invention will be described with reference to Test Examples and Examples, but the present invention is not limited thereto.
【００４０】試験例 試験例１ＡｓＡ濃度の測定（液系） ＡｓＡ濃度が０〜５００ｍｇ／ｄｌとなるよう調整され
た健常人の尿それぞれ１ｍｌを試料として用い、これに １Ｍ ヨウ素酸ナトリウム水溶液 ０． １ｍｌ １Ｍ １−ナフトール−３， ６−ジスルホン酸２ナトリウム水溶液 ０．１ｍｌ １Ｍ ４−アミノアンチピリン水溶液 ０． １ｍｌ ０．２Ｍ ＡＤＡ−水酸化ナトリウム緩衡液（ｐＨ６．０） ８．７ｍｌ （ヨウ素酸ナトリウム、４−アミノアンチピリン、水酸化ナトリウム； （株 ）ナカライテスク製 １−ナフトール−３， ６−ジスルホン酸２ナトリウム；（株）和光純薬製 ＡＤＡ；（株）同仁化学製） を加えて攪拌し、２分後に発色の状態を５６０ｎｍでの
吸光度測定によって行った。吸光度測定には、分光光度
計（（株）島津製作所製ＵＶ−２２００）を用いた。こ
の結果を表１に、また表１の結果より得られる検量線を
図１に示す。表１より、ＡｓＡ濃度の違いにより、発色
に差が現われ、０〜５００ｍｇ／ｄｌという幅広いレン
ジで差を検出できることが分かる。Test Example Test Example 1 Measurement of AsA Concentration (Liquid System) 1 ml of each urine of a healthy person adjusted to have an AsA concentration of 0 to 500 mg / dl was used as a sample, and a 1 M aqueous sodium iodate solution was added thereto. 1 ml 1 M aqueous solution of 1-naphthol-3,6-disulfonate disodium 0.1 ml 1 M aqueous solution of 4-aminoantipyrine 0. 1 ml 0.2 M ADA-sodium hydroxide buffer (pH 6.0) 8.7 ml (sodium iodate, 4-aminoantipyrine, sodium hydroxide; 1-naphthol-3,6-disulfonic acid manufactured by Nacalai Tesque, Inc.) Disodium; ADA manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd .; Dojin Chemical Co., Ltd.) was added and stirred, and after 2 minutes, the state of color development was measured by measuring absorbance at 560 nm. A spectrophotometer (UV-2200 manufactured by Shimadzu Corporation) was used for the absorbance measurement. The results are shown in Table 1, and the calibration curve obtained from the results in Table 1 is shown in FIG. Table 1 shows that the difference in AsA concentration causes a difference in color development, and the difference can be detected in a wide range of 0 to 500 mg / dl.
【００４１】[0041]
【表１】 [Table 1]
【００４２】試験例２ＡｓＡ濃度の定量 ＡｓＡ濃度が未知の尿１ｍｌを試料として用い、これを
試験例１と同様にして、 ２分後に発色の状態を試験
例１と同様に５６０ｎｍでの吸光度測定によって行った
ところ、吸光度は０．０７４％であった。図１よりＡｓ
Ａ濃度は、５６ｍｇ／ｄｌと推定される。比較対照とし
て、ジクロロフェノールインドフェノール法により上記
試料のＡｓＡ濃度を測定したところ、５３ｍｇ／ｄｌで
あった。従って、本発明の測定方法は、従来のＡｓＡ濃
度の測定方法と同等の検出感度を持ち、従ってＡｓＡ濃
度の簡便な測定に有利であることが分かる。Test Example 2 Determination of AsA Concentration 1 ml of urine of unknown AsA concentration was used as a sample, and this was used in the same manner as in Test Example 1. Two minutes later, the state of color development was measured by measuring absorbance at 560 nm as in Test Example 1. As a result, the absorbance was 0.074%. As shown in FIG.
The A concentration is estimated at 56 mg / dl. As a comparative control, the AsA concentration of the sample was measured by the dichlorophenol indophenol method, and was found to be 53 mg / dl. Therefore, it can be seen that the measurement method of the present invention has the same detection sensitivity as the conventional measurement method of AsA concentration, and is therefore advantageous for simple measurement of AsA concentration.
【００４３】[0043]
【表２】 [Table 2]
【００４４】試験例３ 試験片によるＡｓＡ濃度の測定 ＡｓＡ濃度が０〜５００ｍｇ／ｄｌとなるよう調整され
た健常人の尿それぞれ１ｍｌを試料として用い、実施例
１の試験片に試料溶液を１秒間含浸させて２分後に発色
の状態を５６０ｎｍでの反射率測定によって行った。反
射率測定には、色差計Σ９０（（株）日本電色製）を用
いた。この結果を表３に、また表３の結果より得られる
検量線を図２に示す。表３より試験片としても溶液系と
同様にＡｓＡ濃度の違いを検出できることが分かる。Test Example 3 Measurement of AsA Concentration by Test Piece Using 1 ml of each urine of a healthy person whose AsA concentration was adjusted to be 0 to 500 mg / dl as a sample, the sample solution was applied to the test piece of Example 1 for 1 second. Two minutes after the impregnation, the state of color development was determined by measuring the reflectance at 560 nm. For the reflectance measurement, a color difference meter # 90 (manufactured by Nippon Denshoku Co., Ltd.) was used. The results are shown in Table 3, and the calibration curve obtained from the results in Table 3 is shown in FIG. From Table 3, it can be seen that the difference in AsA concentration can be detected in the test piece as in the case of the solution system.
【００４５】[0045]
【表３】 [Table 3]
【００４６】試験例４他の還元物資による妨害の測定 本発明の測定方法のＡｓＡに対する特異性を確認するた
めに、妨害要因となる可能性があるシュウ酸、グルコー
ス、没食子酸の各物質を表４記載の各濃度となるように
調整した健常人の尿をそれぞれ試料とし、試験例３と同
様に試験片に試料溶液を含浸させて２分後に発色の状態
を試験例３と同様に５６０ｎｍでの反射率測定によって
行った。また、尿酸１ナトリウムは、尿中に通常含まれ
ており溶解度が小さいことから、表４記載の各濃度とな
るように調整した水溶液とし、同様の測定を行った。こ
の結果を表４に示す。Test Example 4 Measurement of Interference by Other Reducing Substances In order to confirm the specificity of the assay method of the present invention with respect to AsA, oxalic acid, glucose, and gallic acid, which may be interference factors, were listed. The urine of a healthy person adjusted to each concentration described in 4 was used as a sample, and the test piece was impregnated with the sample solution in the same manner as in Test Example 3, and after 2 minutes, the state of color development was measured at 560 nm as in Test Example 3. Was performed by measuring the reflectance. In addition, since monosodium urate is usually contained in urine and has low solubility, it was used as an aqueous solution adjusted to each concentration shown in Table 4, and the same measurement was performed. Table 4 shows the results.
【００４７】[0047]
【表４】 表４からわかるように、反射率の各物質の各濃度が変化
しても反射率は変化せず、即ち、ＡｓＡ以外の物質には
反応を示さないことがわかる。従って、本発明の測定法
はＡｓＡにたいしてのみ特異性を有することも確認でき
る。[Table 4] As can be seen from Table 4, even if the concentration of each substance of the reflectance changes, the reflectance does not change, that is, it does not react with substances other than AsA. Therefore, it can be confirmed that the assay method of the present invention has specificity only for AsA.
【００４８】[0048]
実施例１ 試験片に各成分を含浸させるため、各成分を以下のよう
な溶液とした 第１溶液 ０．２Ｍ ＡＤＡ−水酸化ナトリウム緩衡液（ｐＨ６．０） １００ｍｌ （ＡＤＡ：（株）同仁化学製、水酸化ナトリウム：（株）ナカライテスク製） ヨウ素酸ナトリウム（（株）ナカライテスク製） ２ｇ １−ナフトール−３，６ジスルホン酸２ナトリウム（（株）和光純薬製） ２ ｇ 第２溶液 エタノール（（株）ナカライテスク製） １００ｍ ｌ ４−アミノアンチピリン（（株）ナカライテスク製） ２ｇ 第１溶液を３０×２０ｃｍの濾紙（ワットマン社製 ３
ＭＭＣＨＲ）に含浸させた後、すばやく７０℃乾燥炉に
入れて１５分間乾燥させた。さらに、その濾紙に第２溶
液を含浸させ、同条件で１０分間乾燥させ、これを５ｍ
ｍ×５ｍｍに裁断した。これを、厚さ２５０μｍ、面積
５ｍｍ×７０ｍｍの白色ポリエチレンテレフタレート
（ＰＥＴ）フィルムの先端に両面テープによって貼り付
け、試験片を作成した。Example 1 In order to impregnate each component into a test piece, each component was prepared as a solution as described below. First solution 0.2 M ADA-sodium hydroxide buffer solution (pH 6.0) 100 ml (ADA: Dojin Corporation) Sodium hydroxide (manufactured by Nacalai Tesque, Inc.) 2 g Sodium iodate (manufactured by Nacalai Tesque, Inc.) 2 g Disodium 1-naphthol-3,6-disulfonate (manufactured by Wako Pure Chemical) 2 g Solution Ethanol (manufactured by Nacalai Tesque, Inc.) 100 ml 4-aminoantipyrine (manufactured by Nacalai Tesque, Inc.) 2 g The first solution was applied to a 30 × 20 cm filter paper (manufactured by Whatman).
(MMCHR), and then immediately put into a drying oven at 70 ° C. and dried for 15 minutes. Further, the filter paper was impregnated with the second solution and dried under the same conditions for 10 minutes.
It was cut to mx 5 mm. This was adhered to the tip of a white polyethylene terephthalate (PET) film having a thickness of 250 μm and an area of 5 mm × 70 mm by a double-sided tape to prepare a test piece.
【００４９】[0049]
【発明の効果】本発明の液体中のアスコルビン酸濃度の
測定方法によれば、水溶液中のＡｓＡ濃度が簡便な処方
で良好に測定でき、しかも、広範囲なＡｓＡ濃度を測定
可能とすることができる。特本発明の液体中のアスコル
ビン酸濃度の測定方法はトリンダー試薬を選択すること
により、自由に発色の度合いを選択することができ、広
範囲なＡｓＡ濃度を測定を可能にしている。According to the method for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention, the concentration of AsA in an aqueous solution can be measured favorably by a simple prescription, and a wide range of AsA concentration can be measured. . In the method of measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention, the degree of color development can be freely selected by selecting a Trinder reagent, and a wide range of AsA concentration can be measured.
【００５０】また、本発明の作用はアスコルビン酸に対
し特異的なものであるため、例えば、ペルオキシターゼ
過酸化水素系を用いる酸化酵素反応を利用する酸化発色
反応のようなアスコルビン酸が妨害要因となる反応系に
おいて、予め、本発明の液体中のアスコルビン酸濃度の
測定方法を用いて、被検体である液体中のアスコルビン
酸濃度を測定することにより、酸化発色反応におけるア
スコルビン酸の影響を補正するためのバックグラウンド
測定に利用することができる。即ち、酸化発色反応にお
いて目的成分が影響をどの程度受けるかが予め判り、Ａ
ｓＡの悪影響をあらかじめ考慮した判定が出来る。Further, since the action of the present invention is specific to ascorbic acid, for example, ascorbic acid such as an oxidative color reaction utilizing an oxidase reaction using a peroxidase hydrogen peroxide system is an obstructive factor. In the reaction system, in advance, by using the method of measuring the concentration of ascorbic acid in the liquid of the present invention, by measuring the concentration of ascorbic acid in the liquid to be tested, to correct the effect of ascorbic acid on the oxidative color reaction. Can be used for background measurement. That is, the extent to which the target component is affected in the oxidative color reaction is known in advance, and A
The determination can be made in consideration of the adverse effect of sA in advance.
【００５１】さらに、本発明の液体中のアスコルビン酸
濃度の測定方法を応用し、測定のための各成分を多孔性
マトリクス内等に乾燥状態で含有させる試験片とするこ
とにより、保存安定性や取り扱い性が格段に向上し、緊
急時や検体数の多い時に有用である。また、トリンダー
試薬の選択によっては目視試験も可能である。Further, by applying the method for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention to prepare a test piece in which each component for measurement is contained in a porous matrix or the like in a dry state, the storage stability and the like are improved. The handling is greatly improved, and it is useful in emergencies and when the number of samples is large. A visual test is also possible depending on the selection of the Trinder reagent.
【図１】ＡｓＡ濃度の異なる水溶液を試料とし、本発明
の液体中のアスコルビン酸濃度の測定方法により５６０
ｎｍにおける波長での吸光度を測定した結果から得られ
る検量線を示す図である。FIG. 1 shows a sample of aqueous solutions having different concentrations of AsA, and a method of measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid according to the present invention.
It is a figure which shows the calibration curve obtained from the result of having measured the light absorbency in the wavelength in nm.
【図２】ＡｓＡ濃度の異なる水溶液を試料とし、本発明
の液体中のアスコルビン酸濃度測定用試験片により５６
０ｎｍにおける波長での反射率を測定した結果から得ら
れる検量線を示す図である。FIG. 2 shows that aqueous solutions having different AsA concentrations were used as samples, and a test piece for measuring the concentration of ascorbic acid in the liquid of the present invention was used.
It is a figure which shows the calibration curve obtained from the result of having measured the reflectance in the wavelength in 0 nm.
Claims (15)
ー試薬、およびカップラーを添加し、液体中のアスコル
ビン酸の還元力によりヨウ素酸またはその塩からヨウ素
を遊離させ、該ヨウ素によりトリンダー試薬とカップラ
ーを酸化縮合させて発色させることを特徴とする、液体
中のアスコルビン酸濃度の測定方法。1. An iodic acid or a salt thereof, a Trinder reagent, and a coupler are added to a liquid, iodine is released from the iodic acid or a salt thereof by the reducing power of ascorbic acid in the liquid, and the iodine separates the trimer reagent and the coupler. A method for measuring the concentration of ascorbic acid in a liquid, wherein the color is formed by oxidative condensation.
メチル−１−ナフトール、１−ナフトール−３，６−ジ
スルホン酸、ｏ−メトキシフェノール、ジメチルアニリ
ン、ジエチルアニリン、Ｎ −エチル−Ｎ−（２−ヒド
ロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジン、Ｎ−
エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）
−３，５−メトキシアニリンから選ばれるいずれか一種
であることを特徴とする請求項１記載の液体中のアスコ
ルビン酸濃度の測定方法。2. The method according to claim 1, wherein the trimer reagent is naphthol, 5-
Methyl-1-naphthol, 1-naphthol-3,6-disulfonic acid, o-methoxyphenol, dimethylaniline, diethylaniline, N-ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -m-toluidine, N −
Ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl)
The method for measuring ascorbic acid concentration in a liquid according to claim 1, wherein the method is any one selected from -3,5-methoxyaniline.
あることを特徴とする請求項１または２記載の液体中の
アスコルビン酸濃度の測定方法。3. The method for measuring ascorbic acid concentration in a liquid according to claim 1, wherein the coupler is 4-aminoantipyrine.
を特徴とする請求項１乃至３のいずれか１項記載の液体
中のアスコルビン酸濃度の測定方法。4. The method for measuring ascorbic acid concentration in a liquid according to any one of claims 1 to 3, wherein the pH of the liquid is 4.0 to 8.0.
を特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項記載の液体
中のアスコルビン酸濃度の測定方法。5. The method for measuring ascorbic acid concentration in a liquid according to claim 1, wherein the pH of the liquid is 5.5 to 6.5.
求項１乃至５のいずれか１項記載の液体中のアスコルビ
ン酸濃度の測定方法。6. The method for measuring ascorbic acid concentration in a liquid according to claim 1, wherein the liquid is a body fluid.
予め、請求項１乃至６のいずれか１項記載の液体中のア
スコルビン酸濃度の測定方法を用いて、被検体である液
体中のアスコルビン酸濃度を測定することを特徴とする
酸化発色反応におけるアスコルビン酸によるバックグラ
ウンド測定方法。7. An analysis utilizing an oxidative color reaction,
7. Ascorbic acid in an oxidative color reaction, wherein the ascorbic acid concentration in a liquid to be examined is measured in advance using the method for measuring ascorbic acid concentration in a liquid according to any one of claims 1 to 6. Background measurement method using acid.
薬と、カップラーと、液体のｐＨを調整する緩衝剤とを
含有することを特徴とする液体中のアスコルビン酸濃度
測定用試験片。8. A test strip for measuring ascorbic acid concentration in a liquid, comprising: iodic acid or a salt thereof, a Trinder reagent, a coupler, and a buffer for adjusting the pH of the liquid.
薬と、カップラーと、液体のｐＨを調整する緩衝剤とを
多孔性マトリクス内に乾燥状態で含有することを特徴と
する液体中のアスコルビン酸濃度測定用試験片。9. A concentration of ascorbic acid in a liquid, which comprises iodic acid or a salt thereof, a Trinder reagent, a coupler, and a buffer for adjusting the pH of the liquid in a porous matrix in a dry state. Test specimen for measurement.
メチル−１−ナフトール、１−ナフトール−３，６−ジ
スルホン酸、ｏ−メトキシフェノール、ジメチルアニリ
ン、ジエチルアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロ
キシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジン、Ｎ−エ
チル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−
３，５−メトキシアニリンから選ばれるいずれか一種で
あることを特徴とする請求項８または９記載の液体中の
アスコルビン酸濃度測定用試験片。10. The method according to claim 1, wherein the trimer reagent is naphthol, 5-
Methyl-1-naphthol, 1-naphthol-3,6-disulfonic acid, o-methoxyphenol, dimethylaniline, diethylaniline, N-ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -m-toluidine, N -Ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl)-
The test piece for measuring ascorbic acid concentration in a liquid according to claim 8 or 9, wherein the test piece is any one selected from 3,5-methoxyaniline.
あることを特徴とする請求項８乃至１０のいずれか１項
記載の液体中のアスコルビン酸濃度測定用試験片。11. The test piece for measuring ascorbic acid concentration in a liquid according to claim 8, wherein the coupler is 4-aminoantipyrine.
することができる緩衡剤であることを特徴とする請求項
８乃至１１のいずれか１項記載の液体中のアスコルビン
酸濃度測定用試験片。12. The ascorbin in a liquid according to any one of claims 8 to 11, wherein the buffer is a buffering agent capable of adjusting the pH of the liquid to 4.0 to 8.0. Test piece for acid concentration measurement.
することができる緩衡剤であることを特徴とする請求項
８乃至１２のいずれか１項記載の液体中のアスコルビン
酸濃度測定用試験片。13. The ascorbin in a liquid according to any one of claims 8 to 12, wherein the buffer is a buffering agent capable of adjusting the pH of the liquid to 5.5 to 6.5. Test piece for acid concentration measurement.
求項８乃至１３のいずれか１項記載の液体中のアスコル
ビン酸濃度測定用試験片。14. The test piece for ascorbic acid concentration measurement in a liquid according to claim 8, wherein the liquid is a body fluid.
予め、請求項８乃至１４のいずれか１項記載の液体中の
アスコルビン酸濃度測定用試験片を用いて、被検体であ
る液体中のアスコルビン酸濃度を測定することを特徴と
する酸化発色反応におけるアスコルビン酸によるバック
グラウンド測定方法。15. An analysis utilizing an oxidative color reaction,
15. The oxidative color-forming reaction, wherein the ascorbic acid concentration in the liquid to be tested is measured in advance using the test piece for measuring ascorbic acid concentration in the liquid according to any one of claims 8 to 14. Background measurement method using ascorbic acid.
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|---|---|---|---|
| JP11352897A JP3723828B2 (en) | 1997-04-14 | 1997-04-14 | Method for measuring ascorbic acid concentration in liquid and test piece for measuring ascorbic acid concentration in liquid |
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| JP11352897A JP3723828B2 (en) | 1997-04-14 | 1997-04-14 | Method for measuring ascorbic acid concentration in liquid and test piece for measuring ascorbic acid concentration in liquid |
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| JPH10288617A true JPH10288617A (en) | 1998-10-27 |
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| JP (1) | JP3723828B2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022185727A1 (en) * | 2021-03-05 | 2022-09-09 | シヤチハタ株式会社 | Kit for making electron donor visible and method for making electron donor visible |
-
1997
- 1997-04-14 JP JP11352897A patent/JP3723828B2/en not_active Expired - Lifetime
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| WO2022185727A1 (en) * | 2021-03-05 | 2022-09-09 | シヤチハタ株式会社 | Kit for making electron donor visible and method for making electron donor visible |
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