JPH10276792A - ヒドロキシカルボン酸およびそのアミドの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 ヒドロキシニトリルのニトリル基に対し
加水分解または水和能を有する微生物または該処理物を
水性媒体中で該ヒドロキシニトリルに作用させることに
より、ヒドロキシカルボン酸またはそのアミドを生成さ
せる。 【効果】 基質を穏和な条件で加水分解または水和反応
を行うことにより副生成物の生成を抑え、且つ高収率で
ヒドロキシカルボン酸またはそのアミドに変換すること
ができ、従来の製造法に比べて操作および経済性の面で
工業上優位な該化合物の製造法を提供し得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】後記一般式〔II〕および〔II
I 〕で示されるヒドロキシカルボン酸およびそのアミド
は、医薬、香料、あるいは医薬中間体として重要な化合
物群である。中でも、３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸
は、最近、種々の薬理活性が報告されるなど食品用、医
薬中間体あるいは農薬中間体などとして有用な化合物で
ある。

【０００２】

【従来の技術】ヒドロキシカルボン酸の合成化学的製造
法で公知のものとしては、（１）ケトンとケテンよりラ
クトンを合成した後、開環する方法〔Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅ
ｍ．Ｓｏｃ．，７６，４８６（１９５４）〕、（２）ア
ルコ−ル、一酸化炭素および過酸化水素の混合物を、硫
酸化鉄存在下に反応する方法〔Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓ
ｏｃ．，８０，２８８２（１９５８）〕、（３）ケトン
とハロゲン化アルキルエステルをレフォルマトスキー反
応（Ｒｅｆｏｒｍａｔｓｋｙ ｒｅａｃｔｉｏｎ）後、
アルカリ加水分解する方法〔Ｚｈ．Ｒｕｓｓ．Ｆｉｚ．
−Ｋｈｉｍ．Ｏ−ｖａ．２２，４７（１８９０）〕、
（４）同一分子内にオレフィン結合とヒドロキシル基を
有する化合物を過マンガン酸カリウムにより酸化する方
法〔Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．，２３，２０６（１８
８１）〕、（５）オレフィン結合を有する一級アルコー
ルの硝酸による水和、酸化反応〔Ｋｈｉｍ．Ｐｒｉｒ．
Ｓｏｅｄｉｎ．，３，３１３（１９９１）〕、（６）
４，４−ジメチル−１，３−ジオキサンを硝酸を触媒と
して酸化する方法（Ａｒｍ．Ｋｈｉｍ．Ｚｈ．，４４
（７−８），４４３（１９９１）〕、（７）同一分子内
にヒドロキシル基および末端アセチル基を有する化合物
の末端アセチル基を次亜塩素酸ソ−ダにより酸化させ、
カルボキシル基へ誘導する方法〔米国特許第４９９２４
７０号〕、（８）３−ヒドロキシ−３−メチルブタノ−
ルを水の存在下、白金系触媒により酸素酸化する方法
〔特開平８−１９８８００号〕等が知られている。ま
た、微生物学的製造法で公知のものとしては、（９）エ
ンドマイセス レシー（Ｅｎｄｏｍｙｃｅｓｒｅｅｓｓ
ｉｉ）ＣＢＳ １７９．６０株によるイソ吉草酸のβ−
酸化反応による合成〔Ｊ．Ｆｅｒｍｅｎｔ．Ｔｅｃｎｏ
ｌ．，５９，２５７（１９８１）〕が知られている。

【０００３】一方、ヒドロキシル基を有するアミド化合
物の微生物学的製造法としては、（１０）ロドコッカス
（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属細菌を用いた水和反応
〔特公平２−２９１２８３号〕が知られている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】上記のように、ヒドロ
キシカルボン酸およびそのアミドの製造法は数多く報告
されている。しかしながら、（１）の方法は原料のケテ
ンが常温常圧で気体であり取り扱いに困難が生じる上、
未反応原料が残る。（２）の方法は危険な高圧一酸化炭
素ガスを用いる上、収率が低い。（３）、（４）では反
応後の処理で産業廃棄上の問題となる有毒重金属を用い
ている上、原料も高価である。（５）、（６）の方法で
は酸化反応の触媒に硝酸を用いているため装置の腐食、
酸化窒素の副生といった問題がある。（７）の方法では
反応後、有毒なホルマリンが生成するので食品用途とし
ての製造法には適さない。（８）は高価な白金触媒を用
いる必要があり、また加圧酸素酸化反応であるためにス
ケ−ルアップ等に問題を残す。また（９）の反応は収率
が低く、微生物触媒の生産性も低い。（１０）の反応で
は、一般式〔II〕で示されるヒドロキシアミドの製造例
について、実施例による具体的な開示がなく、該当のヒ
ドロキシアミドの生成については不明であった。このよ
うに、上記（１）〜（１０）の方法はいずれも解決すべ
き問題点を含み、ヒドロキシカルボン酸およびそのアミ
ドの満足すべき製造方法ではなかった。

【０００５】このような状況下、本発明者らはヒドロキ
シカルボン酸およびそのアミドの工業的に有利な製造法
の開発を目的とし、一般式〔Ｉ〕で示されるヒドロキシ
ニトリルのニトリル基を酸性もしくは塩基性条件下、化
学的に加水分解または水和することで、一般式〔II〕お
よび〔III 〕で示されるヒドロキシカルボン酸またはそ
のアミドを製造する方法について種々、検討した。しか
しながら一般的な化学的加水分解の方法では、いずれの
方法においても加水分解反応あるいは水和反応はほとん
ど進行せず、目的とするヒドロキシカルボン酸およびそ
のアミドの生産反応における収率は極めて低く、工業生
産には適さないことが判った。

【０００６】

【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは温
和な条件下でニトリルを加水分解または水和する微生物
触媒に着目し、微生物によるヒドロキシカルボン酸およ
びそのアミドの製造法について検討を行い、その結果、
ニトリル基を加水分解または水和する能力を有する微生
物の使用が、意外にも、一般的な化学的加水分解の方法
では成し得なかった収率向上に極めて有効であることを
見出し本発明に至った。

【０００７】すなわち、本発明は、下記一般式〔Ｉ〕で
示されるヒドロキシニトリルのニトリル基に対し加水分
解能を有する微生物または該処理物を水性媒体中で該ヒ
ドロキシニトリルに作用させることにより、下記一般式
〔II〕で示されるヒドロキシカルボン酸を生成させるこ
とを特徴とするヒドロキシカルボン酸の製造法、 〔式中、Ｒ₁ 、Ｒ₂ は、同一または異なっていてもよ
く、水素原子、炭素数１〜４の直鎖状もしくは分岐状の
アルキル基、またはＲ₁ 、Ｒ₂ が結合して形成するシク
ロ環、ｎは１〜３の整数を表す。〕 ならびに、上記一般式〔Ｉ〕で示されるヒドロキシニト
リルのニトリル基に対し水和能を有する微生物または該
処理物を水性媒体中で該ヒドロキシニトリルに作用させ
ることにより、下記一般式〔III 〕で示されるヒドロキ
シカルボン酸アミドを生成させることを特徴とするヒド
ロキシカルボン酸アミドの製造法、である。 〔式中、Ｒ₁ 、Ｒ₂ およびｎの定義は、上記と同じであ
る。〕

【０００８】

【発明の実施の形態】本発明は一般式〔Ｉ〕で示される
ヒドロキシニトリルのニトリル基に対し加水分解または
水和能を有する微生物由来の酵素反応に基づくものであ
るが、一般式〔II〕で示されるヒドロキシカルボン酸
は、一般式〔Ｉ〕で示されるヒドロキシニトリルから、
ニトリラーゼの作用により直接あるいはニトリルヒドラ
ターゼとアミダーゼの組合せにより一般式〔III 〕で示
されるヒドロキシカルボン酸アミドの生成を経て、ま
た、一般式〔III 〕で示されるヒドロキシカルボン酸ア
ミドは、一般式〔Ｉ〕で示されるヒドロキシニトリルか
らニトリルヒドラターゼの作用により得ることができる
と考えられる。

【０００９】１つの微生物細胞内に、上記３種の酵素が
混在する例も報告されているが、培養条件や反応条件を
適宜選択することにより、目的とする生成物を得るため
の酵素活性を優位に発現させることができる。

【００１０】本発明における微生物は、例えば、ロドコ
ッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、ブレビバクテリウ
ム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、コリネバクテリ
ウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ノカルディ
ア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）、マイコバクテリウム（Ｍｙｃ
ｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｕ）またはミクロコッカス（Ｍｉ
ｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物である。

【００１１】具体的には、ロドコッカス ロドクラウス
（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｈｏｄｏｃｈｒｏｕｓ）
Ｊ−１（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４７８）、ロドコッカス
エリスロポリス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｅｒｙｔｈ
ｒｏｐｏｌｉｓ）ＩＦＯ１２５３８、ロドコッカス エ
スピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）ＳＫ７０
（ＦＥＲＭ Ｐ−１１３０４）、ロドコッカス エスピ
ー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）ＨＴ４０−６
（ＦＥＲＭ ＢＰ−５２３１）、ブレビバクテリウム
アセチリカム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｅ
ｔｙｌｉｃｕｍ）ＩＡＭ１７９０、コリネバクテリウム
ニトロフィラス（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｎｉｔｒｉｌｏｐｈｉｌｕｓ）ＡＴＣＣ２１４１９、コ
リネバクテリウム エスピー（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ. ｓｐ．）ＫＯ−２−４（ＦＥＲＭ ＢＰ−２
５３）、ノカルディア エリスロポリス（Ｎｏｃａｒｄ
ｉａｅｒｙｔｈｒｏｐｏｌｉｓ）ＩＦＯ１２５３９、マ
イコバクテリウム エスピー（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍｕ. ｓｐ．）ＡＣ ７７７（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３
５２）、ミクロコッカス ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓ）ＡＴＣＣ３８３等の菌株が挙げ
られる。これらの菌株は、上記番号にて寄託されてお
り、それぞれ、工業技術院 生命工学工業技術研究所、
財団法人 醗酵研究所（ＩＦＯ）、東京大学応用微生物
研究所（ＩＡＭ）およびアメリカン タイプカルチャー
コレクション（ＡＴＣＣ）から容易に入手することが
できる。

【００１２】本発明において原料として用いられる一般
式〔Ｉ〕で示されるヒドロキシニトリルは、ケトン化合
物またはアルデヒド化合物とアルキル基にハロゲンおよ
びニトリルが置換した化合物とのレフォルマトスキ−反
応（Ｒｅｆｏｒｍａｔｓｋｙｒｅａｃｔｉｏｎ）によっ
て容易かつ工業的に安価に製造することができる〔Ｓｙ
ｎｔｈｅｓｉｓ（１９８７）、（１２）、１１３
０）〕。

【００１３】さらに、一般式〔Ｉ〕におけるｎ＝１のヒ
ドロキシニトリルに関しては、ケトン化合物またはアル
デヒド化合物とアセトニトリルとを反応させることによ
って容易かつ工業的に安価に製造することができる〔Ｃ
ｏｍｐｔ．ｒｅｎｄ．Ａｃａｄ．ｂｕｌｇ．Ｓｃｉ．１
９，８，７３９（１９６６）、 Ｅｅｓｔｉ ＮＳＶＴ
ｅａｄ．Ａｋａｄ．Ｔｏｉｍ．，Ｋｅｅｍ．（１９８
８），３７（４），２４８〕。

【００１４】一般式〔Ｉ〕で示されるヒドロキシニトリ
ルとして、具体的には、３−ヒドロキシプロピオニトリ
ル、４−ヒドロキシブチロニトリル、３−ヒドロキシブ
チロニトリル、３−ヒドロキシ−３−メチルブチロニト
リル、４−ヒドロキシペンタンニトリル、３−ヒドロキ
シペンタンニトリル、５−ヒドロキシヘキサンニトリ
ル、４−ヒドロキシヘキサンニトリル、３−ヒドロキシ
ヘキサンニトリル、４−ヒドロキシヘプタンニトリル、
３−ヒドロキシ−４−メチルペンタンニトリル、３−ヒ
ドロキシへプタンニトリル、３−ヒドロキシ−３−メチ
ルペンタンニトリル、４−ヒドロキシオクタンニトリ
ル、４−ヒドロキシ−４−メチルヘキサンニトリル、３
−ヒドロキシ−３−メチルヘキサンニトリル、４−ヒド
ロキシ−４−メチルヘプタンニトリル、３−ヒドロキシ
−３、４−ジメチルペンタンニトリル、３−ヒドロキシ
−３−メチルヘプタンニトリル、４−ヒドロキシ−４−
メチルオクタンニトリル、３−ヒドロキシ−３、４−ジ
メチルヘキサンニトリル、３−ヒドロキシ−３、４、
４’−トリメチルペンタンニトリル、３−ヒドロキシ−
３、５−ジメチルヘキサンニトリル、４−エチル−４−
ヒドロキシヘキサンニトリル、３−エチル−３−ヒドロ
キシヘキサンニトリル、４−エチル−４−ヒドロキシヘ
プタンニトリル、３−エチル−３−ヒドロキシ−４−メ
チルペンタンニトリル、３−エチル−３−ヒドロキシヘ
プタンニトリル、４−エチル−４−ヒドロキシオクタン
ニトリル、３−エチル−３−ヒドロキシ−４−メチルヘ
キサンニトリル、３−エチル−３−ヒドロキシ−４、
４’−ジメチルペンタンニトリル、３−エチル−３−ヒ
ドロキシ−５−メチルヘキサンニトリル、４−ヒドロキ
シ−４−プロピルヘプタンニトリル、３−ヒドロキシ−
３−イソプロピルヘキサンニトリル、３−ヒドロキシ−
３−プロピルヘプタンニトリル、４−ヒドロキシ−４−
プロピルオクタンニトリル、３−ヒドロキシ−４−メチ
ル−３−プロピルヘキサンニトリル、４−ｓｅｃ−ブチ
ル−４−ヒドロキシヘプタンニトリル、３−ｔｅｒｔ−
ブチル−３−ヒドロキシヘキサンニトリル、３−ヒドロ
キシ−５−メチル−３−プロピルヘキサンニトリル、３
−ヒドロキシ−３−イソプロピルヘプタンニトリル、３
−ヒドロキシ−４−メチル−３−イソプロピルヘキサン
ニトリル、３−ヒドロキシ−４、４’−ジメチル−３−
イソプロピルペンタンニトリル、３−ヒドロキシ−５−
メチル−３−イソプロピルヘキサンニトリル、４−ブチ
ル−４−ヒドロキシオクタンニトリル、３−ｓｅｃ−ブ
チル−３−ヒドロキシヘプタンニトリル、３−ｔｅｒｔ
−ブチル−３−ヒドロキシヘプタンニトリル、３−イソ
ブチル−３−ヒドロキシヘプタンニトリル、３−ｔｅｒ
ｔ−ブチル−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサンニト
リル、３−イソブチル−３−ヒドロキシ−４−メチルヘ
キサンニトリル、３−ｓｅｃ−ブチル−３−ヒドロキシ
−４−メチルヘキサンニトリル、５−ヒドロキシ−６−
メチルヘプタンニトリル、５−ヒドロキシ−６−メチル
オクタンニトリル、５−ヒドロキシ−５−メチルオクタ
ンニトリル、５−ヒドロキシ−５、６、６’−トリメチ
ルヘプタンニトリル、３−エチル−３−ヒドロキシペン
タンニトリル、５−エチル−５−ヒドロキシオクタンニ
トリル、５−エチル−５−ヒドロキシ−７−メチルオク
タンニトリル、３−ヒドロキシ−３−プロピルヘキサン
ニトリル、５−ヒドロキシ−５−プロピルオクタンニト
リル、５−プロピル−５−ヒドロキシ−６−メチルオク
タンニトリル、３−ヒドロキシ−４−メチル−３−イソ
プロピルペンタンニトリル、５−ヒドロキシ−６、６’
−ジメチル−５−イソプロピルヘプタンニトリル、３−
ブチル−３−ヒドロキシヘプタンニトリル、５−ｔｅｒ
ｔ−ブチルー５ーヒドロキシノナンニトリル、５−イソ
ブチル−５−ヒドロキシノナンニトリル、３−ｓｅｃ−
ブチル−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサンニトリ
ル、５−イソブチル−５−ヒドロキシ−６−メチルオク
タンニトリル、３−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシ
−４、４’−ジメチルペンタンニトリル、５−ｔｅｒｔ
−ブチル−５−ヒドロキシ−６、６’−ジメチルヘプタ
ンニトリル、３−イソブチル−３−ヒドロキシ−５−メ
チルヘキサンニトリル、５−イソブチル−５−ヒドロキ
シ−７−メチルオクタンニトリル、（１−ヒドロキシシ
クロヘキシル）アセトニトリル、（１−ヒドロキシシク
ロペンチル）アセトニトリル、（１−ヒドロキシシクロ
ヘキシル）プロピオニトリル、（１−ヒドロキシシクロ
ペンチル）プロピオニトリル、（１−ヒドロキシシクロ
ヘキシル）ブチロニトリル、（１−ヒドロキシシクロペ
ンチル）ブチロニトリルなどが挙げられる。

【００１５】本発明は一般式〔II〕で示されるヒドロキ
シカルボン酸の生成に好適である。ヒドロキシカルボン
酸として、具体的には、３−ヒドロキシプロピオン酸、
４−ヒドロキシ酪酸、３−ヒドロキシ酪酸、３−ヒドロ
キシ−３−メチル酪酸、４−ヒドロキシ吉草酸、３−ヒ
ドロキシ吉草酸、５−ヒドロキシヘキサン酸、４−ヒド
ロキシヘキサン酸、３−ヒドロキシヘキサン酸、４−ヒ
ドロキシヘプタン酸、３−ヒドロキシ−４−メチル吉草
酸、３−ヒドロキシへプタン酸、３−ヒドロキシ−３−
メチル吉草酸、４−ヒドロキシオクタン酸、４−ヒドロ
キシ−４−メチルヘキサン酸、３−ヒドロキシ−３−メ
チルヘキサン酸、４−ヒドロキシ−４−メチルヘプタン
酸、３−ヒドロキシ−３、４−ジメチル吉草酸、３−ヒ
ドロキシ−３−メチルヘプタン酸、４−ヒドロキシ−４
−メチルオクタン酸、３−ヒドロキシ−３、４−ジメチ
ルヘキサン酸、３−ヒドロキシ−３、４、４’−トリメ
チル吉草酸、３−ヒドロキシ−３、５−ジメチルヘキサ
ン酸、４−エチル−４−ヒドロキシヘキサン酸、３−エ
チル−３−ヒドロキシヘキサン酸、４−エチル−４−ヒ
ドロキシヘプタン酸、４−エチル−３−ヒドロキシ−４
−メチル吉草酸、３−エチル−３−ヒドロキシヘプタン
酸、４−エチル−４−ヒドロキシオクタン酸、３−エチ
ル−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサン酸、３−エチ
ル−３−ヒドロキシ−４、４’−ジメチル吉草酸、３−
エチル−３−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸、４−
ヒドロキシ−４−プロピルヘプタン酸、３−ヒドロキシ
−３−イソプロピルヘキサン酸、３−ヒドロキシ−３−
プロピルヘプタン酸、４−ヒドロキシ−４−プロピルオ
クタン酸、３−ヒドロキシ−４−メチル−３−プロピル
ヘキサン酸、４−ｓｅｃ−ブチル−４−ヒドロキシヘプ
タン酸、３−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシヘキサ
ン酸、３−ヒドロキシ−５−メチル−３−プロピルヘキ
サン酸、３−ヒドロキシ−３−イソプロピルヘプタン
酸、３−ヒドロキシ−４−メチル−３−イソプロピルヘ
キサン酸、３−ヒドロキシ−４、４’−ジメチル−３−
イソプロピル吉草酸、３−ヒドロキシ−５−メチル−３
−イソプロピルヘキサン酸、４−ブチル−４−ヒドロキ
シオクタン酸、３−ｓｅｃ−ブチル−３−ヒドロキシヘ
プタン酸、３−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシヘプ
タン酸、３−イソブチル−３−ヒドロキシヘプタン酸、
３−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシ−４−メチルヘ
キサン酸、３−イソブチル−３−ヒドロキシ−４−メチ
ルヘキサン酸、３−ｓｅｃ−ブチル−３−ヒドロキシ−
４−メチルヘキサン酸、５−ヒドロキシ−６−メチルヘ
プタン酸、５−ヒドロキシ−６−メチルオクタン酸、５
−ヒドロキシ−５−メチルオクタン酸、５−ヒドロキシ
−５、６、６’−トリメチルヘプタン酸、３−エチル−
３−ヒドロキシ吉草酸、５−エチル−５−ヒドロキシオ
クタン酸、５−エチル−５−ヒドロキシ−７−メチルオ
クタン酸、３−ヒドロキシ−３−プロピルヘキサン酸、
５−ヒドロキシ−５−プロピルオクタン酸、５−プロピ
ル−５−ヒドロキシ−６−メチルオクタン酸、３−ヒド
ロキシ−４−メチル−３−イソプロピル吉草酸、５−ヒ
ドロキシ−６、６’−ジメチル−５−イソプロピルヘプ
タン酸、３−ブチル−３−ヒドロキシヘプタン酸、５−
ｔｅｒｔ−ブチルー５ーヒドロキシノナン酸、５−イソ
ブチル−５−ヒドロキシノナン酸、３−ｓｅｃ−ブチル
−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサン酸、５−イソブ
チル−５−ヒドロキシ−６−メチルオクタン酸、３−ｔ
ｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシ−４、４’−ジメチル
吉草酸、５−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヒドロキシ−６、
６’−ジメチルヘプタン酸、３−イソブチル−３−ヒド
ロキシ−５−メチルヘキサン酸、５−イソブチル−５−
ヒドロキシ−７−メチルオクタン酸、（１−ヒドロキシ
シクロヘキシル）酢酸、（１−ヒドロキシシクロペンチ
ル）酢酸、（１−ヒドロキシシクロヘキシル）プロピオ
ン酸、（１−ヒドロキシシクロペンチル）プロピオン
酸、（１−ヒドロキシシクロヘキシル）酪酸、（１−ヒ
ドロキシシクロペンチル）酪酸などを挙げることができ
る。就中、３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸の生成に本
発明は好適である。

【００１６】また、一般式〔III 〕で示されヒドロキシ
アミドとして、具体的には、３−ヒドロキシプロパンア
ミド、４−ヒドロキシブタンアミド、３−ヒドロキシブ
タンアミド、３−ヒドロキシ−３−メチルブタンアミ
ド、４−ヒドロキシペンタンアミド、３−ヒドロキシペ
ンタンアミド、５−ヒドロキシヘキサンアミド、４−ヒ
ドロキシヘキサンアミド、３−ヒドロキシヘキサンアミ
ド、４−ヒドロキシヘプタンアミド、３−ヒドロキシ−
４−メチルペンタンアミド、３−ヒドロキシへプタンア
ミド、３−ヒドロキシ−３−メチルペンタンアミド、４
−ヒドロキシオクタンアミド、４−ヒドロキシ−４−メ
チルヘキサンアミド、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキ
サンアミド、４−ヒドロキシ−４−メチルヘプタンアミ
ド、３−ヒドロキシ−３、４−ジメチルペンタンアミ
ド、３−ヒドロキシ−３−メチルヘプタンアミド、４−
ヒドロキシ−４−メチルオクタンアミド、３−ヒドロキ
シ−３、４−ジメチルヘキサンアミド、３−ヒドロキシ
−３、４、４’−トリメチルペンタンアミド、３−ヒド
ロキシ−３、５−ジメチルヘキサンアミド、４−エチル
−４−ヒドロキシヘキサンアミド、３−エチル−３−ヒ
ドロキシヘキサンアミド、４−エチル−４−ヒドロキシ
ヘプタンアミド、３−エチル−３−ヒドロキシ−４−メ
チルペンタンアミド、３−エチル−３−ヒドロキシヘプ
タンアミド、４−エチル−４−ヒドロキシオクタンアミ
ド、３−エチル−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサン
アミド、３−エチル−３−ヒドロキシ−４、４’−ジメ
チルペンタンアミド、３−エチル−３−ヒドロキシ−５
−メチルヘキサンアミド、４−ヒドロキシ−４−プロピ
ルヘプタンアミド、３−ヒドロキシ−３−イソプロピル
ヘキサンアミド、３−ヒドロキシ−３−プロピルヘプタ
ンアミド、４−ヒドロキシ−４−プロピルオクタンアミ
ド、３−ヒドロキシ−４−メチル−３−プロピルヘキサ
ンアミド、４−ｓｅｃ−ブチル−４−ヒドロキシヘプタ
ンアミド、３−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシヘキ
サンアミド、３−ヒドロキシ−５−メチル−３−プロピ
ルヘキサンアミド、３−ヒドロキシ−３−イソプロピル
ヘプタンアミド、３−ヒドロキシ−４−メチル−３−イ
ソプロピルヘキサンアミド、３−ヒドロキシ−４、４’
−ジメチル−３−イソプロピルペンタンアミド、３−ヒ
ドロキシ−５−メチル−３−イソプロピルヘキサンアミ
ド、４−ブチル−４−ヒドロキシオクタンアミド、３−
ｓｅｃ−ブチル−３−ヒドロキシヘプタンアミド、３−
ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシヘプタンアミド、３
−イソブチル−３−ヒドロキシヘプタンアミド、３−ｔ
ｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサン
アミド、３−イソブチル−３−ヒドロキシ−４−メチル
ヘキサンアミド、３−ｓｅｃ−ブチル−３−ヒドロキシ
−４−メチルヘキサンアミド、５−ヒドロキシ−６−メ
チルヘプタンアミド、５−ヒドロキシ−６−メチルオク
タンアミド、５−ヒドロキシ−５−メチルオクタンアミ
ド、５−ヒドロキシ−５、６、６’−トリメチルヘプタ
ンアミド、３−エチル−３−ヒドロキシペンタンアミ
ド、５−エチル−５−ヒドロキシオクタンアミド、５−
エチル−５−ヒドロキシ−７−メチルオクタンアミド、
３−ヒドロキシ−３−プロピルヘキサンアミド、５−ヒ
ドロキシ−５−プロピルオクタンアミド、５−プロピル
−５−ヒドロキシ−６−メチルオクタンアミド、３−ヒ
ドロキシ−４−メチル−３−イソプロピルペンタンアミ
ド、５−ヒドロキシ−６、６’−ジメチル−５−イソプ
ロピルヘプタンアミド、３−ブチル−３−ヒドロキシヘ
プタンアミド、５−ｔｅｒｔ−ブチルー５ーヒドロキシ
ノナンアミド、５−イソブチル−５−ヒドロキシノナン
アミド、３−ｓｅｃ−ブチル−３−ヒドロキシ−４−メ
チルヘキサンアミド、５−イソブチル−５−ヒドロキシ
−６−メチルオクタンアミド、３−ｔｅｒｔ−ブチル−
３−ヒドロキシ−４、４’−ジメチルペンタンアミド、
５−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヒドロキシ−６、６’−ジ
メチルヘプタンアミド、３−イソブチル−３−ヒドロキ
シ−５−メチルヘキサンアミド、５−イソブチル−５−
ヒドロキシ−７−メチルオクタンアミド、（１−ヒドロ
キシシクロヘキシル）アセトアミド、（１−ヒドロキシ
シクロペンチル）アセトアミド、（１−ヒドロキシシク
ロヘキシル）プロパンアミド、（１−ヒドロキシシクロ
ペンチル）プロパンアミド、（１−ヒドロキシシクロヘ
キシル）ブタンアミド、（１−ヒドロキシシクロペンチ
ル）ブタンアミドなどが挙げられる。

【００１７】本発明に使用される微生物の培養は、資化
し得る炭素源（グリセロ−ル、グルコ−ス、サッカロ−
ス等）、窒素源（カザミノ酸、肉エキス、酵母エキス、
コ−ンスティ−プリカ−等）各微生物の生育に必須の無
機塩（塩化マグネシウム、塩化カルシウム、硫酸マンガ
ン、塩化鉄、硫酸亜鉛等）、およびニトリル加水分解酵
素の補欠分子族として必要な金属塩（塩化コバルト等）
などを含有した通常の培地を用いて行われる。培養の初
期または中期に生育を大きく阻害しない程度にニトリル
類またはアミド類（ケイ皮酸ニトリル、ベンジルシアニ
ド、イソブチロニトリル、２−フェニルプロピオニトリ
ル、ベンゾニトリル、２−シアノピリジン、３−シアノ
ピリジン、４−シアノピリジン、ｏ−アミノベンゾニト
リル、１−シクロヘキセニルアセトニトリル、ε−カプ
ロラクタム、γ−ブチロニトリル、尿素、ブチルアミド
等）などを添加することは、より高い酵素活性が得られ
るので好ましい。培養は、培養液のｐＨ４〜１０、培養
温度２０〜７０℃の範囲で、１〜１４日好気的に行う。

【００１８】反応は上記の方法において培養した微生物
の菌体、または菌体処理物（菌体破砕物、粗酵素液、精
製酵素液、固定化菌体、固定化酵素等）を水または緩衝
液等の水性媒体中に懸濁し、これに一般式〔Ｉ〕で示さ
れるヒドロキシニトリル、すなわち基質を共存させるこ
とによって行われる。反応はｐＨを４〜１１、好ましく
は６〜１０で行う。反応液中基質は０．１〜１０重量
％、好ましくは０．１〜５．０重量％である。微生物の
使用量は、乾燥菌体として０．０１〜２０重量％でよ
い。反応温度は５〜５０℃、好ましくは１０〜３０℃で
０．１〜２００時間反応させればよい。

【００１９】微生物反応終了液からのヒドロキシカルボ
ン酸またはヒドロキシカルボン酸アミドの取得方法とし
ては、公知の方法、例えば遠心分離により微生物を除
き、さらに必要に応じ限外ろ過などにより顆粒成分、蛋
白、多糖類の除去を行うことや、活性炭処理を施した
後、減圧濃縮、有機溶媒抽出などを行うことなどが挙げ
られる。

【００２０】

【実施例】次に、本発明を実施例により更に詳細に説明
するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではな
い。 実施例１ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 コリネバクテリウム ニトロフィラス ＡＴＣＣ２１４
１９を下記培地Ａにて３０℃、４８時間培養後、得られ
た菌体をさらに培地Ｂで３０℃、９６時間培養した。

【００２１】〔培地Ａ〕５ｍＭ リン酸緩衝液（ｐＨ
７．５）１００ｍＬ中、グルコ−ス ４％、グルタミン
酸ナトリウム ２％、シェフトンＮ ０．５％、味液
０．５％、酵母エキス ０．６％、硫酸ナトリウム
０．３％、塩化マグネシウム ０．０４％、塩化カルシ
ウム ０．００４％、硫酸マンガン ０．００３％、塩
化鉄 ０．０００６％、硫酸亜鉛０．０００３％、を含
む培地（全てｗ／ｖ）。

【００２２】〔培地Ｂ〕培地Ａにｏ−アミノベンゾニト
リル ０．０３％（ｗ／ｖ）添加した培地。

【００２３】培地から菌体を遠心分離（１００００ｒｐ
ｍ、２０分）し、５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）
で１回洗浄し、同リン酸緩衝液（１００ｍＬ）に懸濁
し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝４０．０）を調整した。

【００２４】（２）５−ヒドロキシヘキサンニトリルの
加水分解反応 上記の菌体懸濁液に５−ヒドロキシヘキサンニトリル
（０．３ｇ）を加え、３０℃で３日間撹拌した。反応液
について遠心分離により微生物除去したのち、得られた
水層に活性炭処理を施した。さらに、酢酸エチル抽出を
行ったのち、溶媒を留去して濃縮残査（０．２５ｇ）を
得た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結
果、この濃縮残査は、５−ヒドロキシヘキサン酸である
ことを確認した（反応収率７１％）。

【００２５】実施例２ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ブレビバクテリウム アセチリカム ＩＡＭ１７９０を
培地Ａにて３０℃、４８時間培養後、得られた菌体をさ
らに培地Ｂで３０℃、９６時間培養した。培地から菌体
を遠心分離（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩
衝液（１００ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝
２４．６）を調整した。

【００２６】（２）５−イソブチル−５−ヒドロキシノ
ナンニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に５−イソブチル−５−ヒドロキシノ
ナンニトリル（０．３ｇ）を加え、３０℃で１８時間撹
拌した。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結
果５−イソブチル−５−ヒドロキシノナン酸（０．３２
ｇ）が生成しているのを確認した（反応収率９７％）。

【００２７】実施例３ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ブレビバクテリウム アセチリカム ＩＡＭ１７９０を
下記培地Ｃにて３０℃、４８時間培養後、得られた菌体
をさらに培地Ｄで３０℃、７２時間培養した。

【００２８】〔培地Ｃ〕５ｍＭ リン酸緩衝液（ｐＨ
７．５）１０００ｍＬ中、グリセロール ２．０％、酵
母エキス ０．６％、硫酸ナトリウム ０．３％、塩化
マグネシウム ０．０４％、塩化カルシウム ０．００
４％、硫酸マンガン ０．００３％、塩化鉄 ０．００
０６％、硫酸亜鉛０．０００３％、を含む培地（全てｗ
／ｖ）。 〔培地Ｄ〕培地Ｃにε−カプロラクタム ０．０５％
（ｗ／ｖ）添加した培地。

【００２９】培地から菌体を遠心分離（１００００ｒｐ
ｍ、２０分）し、５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７.５）
で１回洗浄し、同リン酸緩衝液（１００ｍＬ）に懸濁
し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝９．５）を調整した。

【００３０】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．５ｇ）を加え、３０℃で１８時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．５８ｇ）が生成
しているのを確認した（反応収率９８％）。

【００３１】実施例４ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ブレビバクテリウム アセチリカム ＩＡＭ１７９０を
培地Ｃにて３０℃、４８時間培養後、得られた菌体をさ
らに培地Ｄで３０℃、７２時間培養した。培地から菌体
を遠心分離（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩
衝液（１００ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝
１３．３）を調整した。

【００３２】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．７ｇ）を加え、３０℃で撹拌を開始し
た。以後２時間ごとに３−ヒドロキシ−３−メチルブチ
ロニトリル（０．１４ｇ）逐次添加し、合計２．６ｇの
３−ヒドロキシ−３−メチルブチロニトリルを後添加し
た（全添加量３．３ｇ）。撹拌開始７２時間後、反応液
をＯＤＳカラムを用いＨＰＬＣにより分析したところ、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（３．３ｇ）が生成し
ているのを確認した（反応収率８９％）。

【００３３】実施例５ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ブレビバクテリウム アセチリカム ＩＡＭ１７９０を
培地Ｅにて３０℃、４８時間培養後、得られた菌体をさ
らに培地Ｆで３０℃、９６時間培養した。

【００３４】〔培地Ｅ〕蒸留水（ｐＨ ７．０）１００
０ｍＬ中、ペプトン ０．５％、肉エキス ０．５％、
酵母エキス ０．０５％、塩化ナトリウム ０．２％、
を含む培地（全てｗ／ｖ）。

【００３５】〔培地Ｆ〕蒸留水（ｐＨ ７．０）１００
０ｍＬ中、グルコース １．５％、グルタミン酸ナトリ
ウム ０．７５％、酵母エキス ０．１％、硫酸マグネ
シウム７水和物０．０５％、リン酸二水素カリウム
０．０５％、リン酸水素二カリウム ０．０５％、ε−
カプロラクタム ０．０５％（ｗ／ｖ）を含む培地（全
てｗ／ｖ）。

【００３６】培地から菌体を遠心分離（１００００ｒｐ
ｍ、２０分）し、５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）
で１回洗浄し、同リン酸緩衝液（１００ｍＬ）に懸濁
し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝１５．８）を調整した。

【００３７】（２）４−エチル−４−ヒドロキシオクタ
ンニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に４−エチル−４−ヒドロキシオクタ
ンニトリル（０．８４ｇ）を加え、３０℃で撹拌を開始
した。以後２時間ごとに４−エチル−４−ヒドロキシオ
クタンニトリル（０．１７ｇ）逐次添加し、合計２．６
ｇの４−エチル−４−ヒドロキシオクタンニトリルを後
添加した（全添加量３．４ｇ）。撹拌開始９６時間後、
反応液をＯＤＳカラムを用いＨＰＬＣにより分析したと
ころ、４−エチル−４−ヒドロキシオクタン酸（３．０
ｇ）が生成しているのを確認した（反応収率８０％）。

【００３８】実施例６ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ロドコッカス ロドクラウス Ｊ−１株を培地Ｅにて３
０℃、４８時間培養後、得られた菌体をさらに培地Ｆで
３０℃、９６時間培養した。培地から菌体を遠心分離
（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭリン酸緩衝
液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩衝液（１０
０ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝２４．０）
を調整した。

【００３９】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．５ｇ）を加え、３０℃で４８時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．５２ｇ）が生成
しているのを確認した（反応収率８７％）。

【００４０】実施例７ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ロドコッカス エリスロポリス ＩＦＯ１２５３８株を
培地Ｅにて３０℃、４８時間培養後、得られた菌体をさ
らに培地Ｆで３０℃、９６時間培養した。培地から菌体
を遠心分離（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩
衝液（１００ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝
１０．０）を調整した。

【００４１】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．３ｇ）を加え、３０℃で４８時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．３５ｇ）が生成
しているのを確認した（反応収率９９％）。

【００４２】実施例８ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ロドコッカス エスピー ＨＴ４０−６株を培地Ｅにて
３０℃、４８時間培養後、得られた菌体をさらに培地Ｆ
で３０℃、９６時間培養した。培地から菌体を遠心分離
（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭリン酸緩衝
液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩衝液（１０
０ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝１０．３）
を調整した。

【００４３】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．３ｇ）を加え、３０℃で２４時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．３６ｇ）が生成
しているのを確認した（反応収率１００％）。

【００４４】実施例９ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ロドコッカス エスピー ＳＫ７０株を培地Ｅにて３０
℃、４８時間培養後、得られた菌体をさらに培地Ｆで３
０℃、９６時間培養した。培地から菌体を遠心分離（１
００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩衝液（１００
ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝２０．０）を
調整した。

【００４５】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．３ｇ）を加え、３０℃で２４時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．３６ｇ）が生成
しているのを確認した（反応収率１００％）。

【００４６】実施例１０ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 ノカルディア エリスロポリス ＩＦＯ１２５３９株を
培地Ｅにて３０℃、４８時間培養後、得られた菌体をさ
らに培地Ｆで３０℃、９６時間培養した。培地から菌体
を遠心分離（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩
衝液（１００ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝
１１．８）を調整した。

【００４７】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．３ｇ）を加え、３０℃で２４時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．３５ｇ）が生成
しているのを確認した（反応収率９９％）。

【００４８】実施例１１ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 特公平３−２２４４９６３記載の方法により培養して得
られた、コリネバクテリウム エスピー ＫＯ−２−４
株を遠心分離（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍ
Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸
緩衝液（１００ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀
＝７．７）を調整した。

【００４９】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．３ｇ）を加え、３０℃で２４時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．２９ｇ）が生成
しているのを確認した（反応収率７９％）。

【００５０】実施例１２ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 特公平３−２２４４９６３記載の方法により培養して得
られた、マイコバクテリウム エスピー ＡＣ７７７株
を遠心分離（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩
衝液（１００ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝
１１．４）を調整した。

【００５１】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの加水分解反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．３ｇ）を加え、３０℃で２４時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（０．３５ｇ）が生成
しているのを確認した（反応収率９９％）。

【００５２】実施例１３ （１）培養及び菌体懸濁液の調整 特公平２−２９１２８３記載の方法により培養して得ら
れた、ロドコッカスロドクラウス Ｊ−１株を遠心分離
（１００００ｒｐｍ、２０分）し、５０ｍＭリン酸緩衝
液（ｐＨ７．５）で１回洗浄し、同リン酸緩衝液（１０
０ｍＬ）に懸濁し、菌体懸濁液（ＯＤ₆₃₀ ＝１４．４）
を調整した。

【００５３】（２）３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリルの水和反応 上記の菌体懸濁液に３−ヒドロキシ−３−メチルブチロ
ニトリル（０．３ｇ）を加え、３０℃で１８時間撹拌し
た。ＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣによる分析の結果、
３−ヒドロキシ−３−メチルブタンアミド（０．３２
ｇ）が生成しているのを確認した（反応収率９０％）。

【００５４】実施例１〜５の比較例として、種々な条件
にて以下に挙げる化学的加水分解を行った。 比較例１ ５−ヒドロキシヘキサンニトリルの加水分解反応 ５−ヒドロキシヘキサンニトリル（０．８９ｇ）に３５
％塩酸（１．５６ｇ）を加え８０℃で４時間撹拌した
後、３５％塩酸（１．５８ｇ）を加え８０℃で２．５時
間熟成を行い、さらに３５％塩酸（１．５８ｇ）を加え
８０℃で１．５時間熟成を行った。反応液について塩基
性下（ｐＨ１１）、塩化メチレンにより未反応原料を抽
出除去後、残った水層を再度、酸性（ｐＨ２）として塩
化メチレン抽出を行った。この酸性下にて抽出した有機
層を硫酸マグネシウム乾燥、溶媒を留去後、残った濃縮
残渣をＧＬＣによって分析したが、目的の５−ヒドロキ
シヘキサン酸は含まれていなかった。

【００５５】比較例２ ３−ヒドロキシ−３−メチルブチロニトリルの加水分解
反応 ３−ヒドロキシ−３−メチルブチロニトリル（０．８９
ｇ）に６２％硫酸（７．０ｇ）を加え８０℃で１時間撹
拌した後、さらに６２％硫酸（７．０ｇ）を加え８０℃
で５時間撹拌した。反応液について塩基性下（ｐＨ１
１）、塩化メチレンにより未反応原料を抽出除去したの
ち、残った水層を再度、酸性（ｐＨ２）に戻して塩化メ
チレン抽出を行った。この酸性下にて抽出した有機層を
硫酸マグネシウム乾燥、溶媒を留去後、残った濃縮残渣
をＧＬＣによって分析したが、目的の３−ヒドロキシ−
３−メチル酪酸は含まれていなかった。

【００５６】比較例３ ４−エチル−４−ヒドロキシオクタンニトリルの加水分
解反応 ４−エチル−４−ヒドロキシオクタンニトリル（０．８
９ｇ）にエタノール（１．７３ｇ）、３５％塩酸（１．
５６ｇ）を加え２０℃で１時間撹拌後、さらに８０℃で
４．５時間熟成を行った。水を加えて２０℃で１．５時
間撹拌した。反応液について塩基性下（ｐＨ１１）、塩
化メチレンで未反応原料を抽出除去したのち、残った水
層を再度、酸性（ｐＨ２）に戻して塩化メチレン抽出を
行った。この酸性下にて抽出した有機層を硫酸マグネシ
ウム乾燥、溶媒を留去後、残った濃縮残渣をＧＬＣによ
って分析したが、目的の４−エチル−４−ヒドロキシオ
クタン酸は含まれていなかった。

【００５７】比較例４ ５−イソブチル−５−ヒドロキシノナンニトリルの加水
分解反応 ５−イソブチル−５−ヒドロキシノナンニトリル（０．
８３ｇ）にエタノール（１７ｇ）、水酸化カリウム
（０．８４ｇ）を加え８０℃で２．５時間撹拌した。反
応液について塩化メチレンで未反応原料を抽出除去した
のち、残った水層を酸性に調節して塩化メチレン抽出を
行った。この酸性下にて抽出した有機層を硫酸マグネシ
ウム乾燥、溶媒を留去後、残った濃縮残渣をＧＬＣによ
って分析したが、目的の５−イソブチル−５−ヒドロキ
シノナン酸は含まれていなかった。

【００５８】比較例５ ３−ヒドロキシヘプタンニトリルの加水分解反応 ３−ヒドロキシヘプタンニトリル（０．８３ｇ）に２５
％水酸化カリウム（１．６８ｇ）、３０％過酸化水素水
（１．７ｇ）を加え、窒素雰囲気下、４０℃で１時間撹
拌した。その後、さらに８０℃で３時間撹拌した。反応
液について塩化メチレンで未反応原料を抽出除去したの
ち、残った水層を酸性（ｐＨ２）として塩化メチレン抽
出を行った。この酸性下にて抽出した有機層を硫酸マグ
ネシウム乾燥、溶媒留去後、残った濃縮残渣をＧＬＣに
よって分析したが、目的の３−ヒドロキシヘプタン酸は
含まれていなかった。

【００５９】比較例６ ４−ヒドロキシブチロニトリルの加水分解反応 ４−ヒドロキシブチロニトリル（０．８３ｇ）に水（９
００ｍｇ）、二酸化マンガン（１５ｍｇ）を加え、６０
℃で４時間撹拌して終夜放置した。反応液をセライトろ
過したのち、ろ液を乾固して残査（１５．９ｍｇ）を得
た。この残査をＧＬＣによって分析したが、目的の４−
ヒドロキシブタンアミドは含まれていなかった。

【００６０】比較例７ ４−ブチル−４−ヒドロキシオクタンニトリルの加水分
解反応 ４−ブチル−４−ヒドロキシオクタンニトリル（０．１
ｇ）にエチレングリコール（１．１１ｇ）、水酸化カリ
ウム（０．２７ｇ）を加え１００℃で１時間撹拌後、さ
らに１２０℃で４時間熟成を行った。反応液について塩
化メチレンで未反応原料を抽出除去したのち、残った水
層を酸性に調節して塩化メチレン抽出した。この酸性下
にて抽出した有機層を硫酸マグネシウム乾燥、溶媒を留
去後、残った濃縮残渣をＧＬＣによって分析したが、目
的の４−ブチル−４−ヒドロキシオクタン酸は含まれて
いなかった。

【００６１】

【発明の効果】本発明によれば、基質を穏和な条件で加
水分解または水和反応を行うことにより副生成物の生成
を抑え、且つ高収率でヒドロキシカルボン酸またはその
アミドに変換することができ、従来の製造法に比べて操
作および経済性の面で工業上優位な該化合物の製造法を
提供し得る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:15） (Ｃ１２Ｐ 7/42 Ｃ１２Ｒ 1:365） (Ｃ１２Ｐ 7/42 Ｃ１２Ｒ 1:32） (Ｃ１２Ｐ 7/42 Ｃ１２Ｒ 1:265） (Ｃ１２Ｐ 13/02 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 田村 鋼二 神奈川県横浜市鶴見区大黒町10番１号 日 東化学工業株式会社中央研究所内 (72)発明者 古林 祥正 神奈川県横浜市鶴見区大黒町10番１号 日 東化学工業株式会社中央研究所内

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記一般式〔Ｉ〕で示されるヒドロキシ
   ニトリルのニトリル基に対し加水分解能を有する微生物
   または該処理物を水性媒体中で該ヒドロキシニトリルに
   作用させることにより、下記一般式〔II〕で示されるヒ
   ドロキシカルボン酸を生成させることを特徴とするヒド
   ロキシカルボン酸の製造法。 〔式中、Ｒ₁ 、Ｒ₂ は、同一または異なっていてもよ
   く、水素原子、炭素数１〜４の直鎖状もしくは分岐状の
   アルキル基、またはＲ₁ 、Ｒ₂ が結合して形成するシク
   ロ環、ｎは１〜３の整数を表す。〕
2. 【請求項２】 請求項１記載の一般式〔Ｉ〕で示される
   ヒドロキシニトリルのニトリル基に対し水和能を有する
   微生物または該処理物を水性媒体中で該ヒドロキシニト
   リルに作用させることにより、下記一般式〔III 〕で示
   されるヒドロキシカルボン酸アミドを生成させることを
   特徴とするヒドロキシカルボン酸アミドの製造法。 〔式中、Ｒ₁ 、Ｒ₂ およびｎの定義は、請求項１記載と
   同じである。〕
3. 【請求項３】 微生物がロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏ
   ｃｃｕｓ）、ブレビバクテリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔ
   ｅｒｉｕｍ）、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａ
   ｃｔｅｒｉｕｍ）、ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉ
   ａ）、マイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕ
   ｍｕ）またはミクロコッカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕ
   ｓ）属に属する微生物である請求項１または２記載のヒ
   ドロキシカルボン酸またはヒドロキシカルボン酸アミド
   の製造法。