JPH0995444A - アミロイド蛋白凝集阻害剤 - Google Patents
アミロイド蛋白凝集阻害剤Info
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- JPH0995444A JPH0995444A JP25491095A JP25491095A JPH0995444A JP H0995444 A JPH0995444 A JP H0995444A JP 25491095 A JP25491095 A JP 25491095A JP 25491095 A JP25491095 A JP 25491095A JP H0995444 A JPH0995444 A JP H0995444A
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Abstract
(57)【要約】 (修正有)
【課題】 アミロイドの生成を抑え、アミロイド蛋白に
よって惹起される細胞毒性を抑制することで、特定臓器
へのアミロイド沈着を特徴とする疾病(アルツハイマー
病、II型糖尿病など)の治療または予防薬となりうる薬
剤を提供する。 【解決手段】 一般式[I] [式中、Rは水酸基または−COOR4(ここで、R4は
水素原子、C1−C10アルキル基等を表す)で置換され
たC1−C5のアルキル基、アリール基、複素環基等を表
し、R1およびR2はそれぞれ独立に、水素原子、C1−
C5アルキル基、またはフェニル基を表し、R3は、水素
原子、C1−C5アルキル基、C1−C4アルコキシカルボ
ニル基等を表す)]で表されるチオナフタレン誘導体ま
たはその薬学的に許容される塩を含有するアミロイド蛋
白の凝集および沈着の阻害剤。
よって惹起される細胞毒性を抑制することで、特定臓器
へのアミロイド沈着を特徴とする疾病(アルツハイマー
病、II型糖尿病など)の治療または予防薬となりうる薬
剤を提供する。 【解決手段】 一般式[I] [式中、Rは水酸基または−COOR4(ここで、R4は
水素原子、C1−C10アルキル基等を表す)で置換され
たC1−C5のアルキル基、アリール基、複素環基等を表
し、R1およびR2はそれぞれ独立に、水素原子、C1−
C5アルキル基、またはフェニル基を表し、R3は、水素
原子、C1−C5アルキル基、C1−C4アルコキシカルボ
ニル基等を表す)]で表されるチオナフタレン誘導体ま
たはその薬学的に許容される塩を含有するアミロイド蛋
白の凝集および沈着の阻害剤。
Description
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、チオナフタレン誘
導体を活性成分として含有する、アミロイド蛋白の凝集
および/または沈着阻害剤に関する。本発明はまた、チ
オナフタレン誘導体を活性成分として含有する、アミロ
イド蛋白によって惹起される細胞毒性の抑制剤に関す
る。
導体を活性成分として含有する、アミロイド蛋白の凝集
および/または沈着阻害剤に関する。本発明はまた、チ
オナフタレン誘導体を活性成分として含有する、アミロ
イド蛋白によって惹起される細胞毒性の抑制剤に関す
る。
【0002】
【従来の技術】特徴的な線維構造をとって重合したアミ
ロイド蛋白が種々の臓器、組織の細胞外に沈着すること
を特徴とする疾病は、アミロイドーシスと総称される。
かかるアミロイドを構成する蛋白質としては、例えば、
アルツハイマー病において脳に沈着するアミロイドβ蛋
白、II型糖尿病において膵臓に沈着するアミリン、家族
性アミロイドニューロパチーにおいて末梢神経に沈着す
る血清プレアルブミン(トランスサイレチン)、原発性
および多発性骨髄腫に伴うアミロイドーシスの場合の免
疫グロブリン軽鎖由来AL蛋白、続発性アミロイドーシ
スの場合のAA蛋白などがある(例えば、Sipe,
J.D.(1992年)Annu.Rev.Bioch
em.,第61巻,947−975頁など参照)。
ロイド蛋白が種々の臓器、組織の細胞外に沈着すること
を特徴とする疾病は、アミロイドーシスと総称される。
かかるアミロイドを構成する蛋白質としては、例えば、
アルツハイマー病において脳に沈着するアミロイドβ蛋
白、II型糖尿病において膵臓に沈着するアミリン、家族
性アミロイドニューロパチーにおいて末梢神経に沈着す
る血清プレアルブミン(トランスサイレチン)、原発性
および多発性骨髄腫に伴うアミロイドーシスの場合の免
疫グロブリン軽鎖由来AL蛋白、続発性アミロイドーシ
スの場合のAA蛋白などがある(例えば、Sipe,
J.D.(1992年)Annu.Rev.Bioch
em.,第61巻,947−975頁など参照)。
【0003】アミロイドはコンゴーレッド染色により偏
光下重屈折性を示し、アミロイドを構成する蛋白質は線
維化の過程で逆平行βシート構造をとることが種々のア
ミロイドに共通する特徴として知られている(例えば、
Sipe,J.D.(1992年)Annu.Rev.
Biochem.,第61巻,947−975頁など参
照)。
光下重屈折性を示し、アミロイドを構成する蛋白質は線
維化の過程で逆平行βシート構造をとることが種々のア
ミロイドに共通する特徴として知られている(例えば、
Sipe,J.D.(1992年)Annu.Rev.
Biochem.,第61巻,947−975頁など参
照)。
【0004】代表的アミロイド蛋白であるアミロイドβ
蛋白はアルツハイマー病において脳に沈着するアミロイ
ドの主要構成成分であり、約40アミノ酸からなるペプ
チドである(例えば、Glenner,G.G.;Wo
ng,C.W.(1984年)Biochem.Bio
phys.Res.Commun.,第120巻,88
5−890頁、Masters,C.L.ら(1985
年),Proc.Natl.Acad.Sci.US
A,第82巻,4245−4249頁、Kang,J.
ら(1987年),Nature,第325巻,733
−736頁など参照)。
蛋白はアルツハイマー病において脳に沈着するアミロイ
ドの主要構成成分であり、約40アミノ酸からなるペプ
チドである(例えば、Glenner,G.G.;Wo
ng,C.W.(1984年)Biochem.Bio
phys.Res.Commun.,第120巻,88
5−890頁、Masters,C.L.ら(1985
年),Proc.Natl.Acad.Sci.US
A,第82巻,4245−4249頁、Kang,J.
ら(1987年),Nature,第325巻,733
−736頁など参照)。
【0005】アミロイドβ蛋白は、自己凝集傾向があり
(例えば、Hilbich,C.ら(1991年),
J.Mol.Biol.,第218巻,149−163
頁、Burdick,D.ら(1992年),J.Bi
ol.Chem.,第267巻,546−554頁など
参照)、凝集したアミロイドβ蛋白は神経細胞に対し毒
性を示す(例えば、Pike,C.J.ら(1993
年),J.Neurosci.,第13巻,1676−
1687頁、Simmons,L.K.ら(1994
年),Mol.Pharmacol.,第45巻,37
3−379頁など参照)ことが知られている。この細胞
毒性がアルツハイマー病脳における神経細胞の脱落、ひ
いては痴呆の発症の原因となっていると考えられている
(例えば、Selkoe,D.J.(1991年),N
euron,第6巻,487−498頁など参照)。
(例えば、Hilbich,C.ら(1991年),
J.Mol.Biol.,第218巻,149−163
頁、Burdick,D.ら(1992年),J.Bi
ol.Chem.,第267巻,546−554頁など
参照)、凝集したアミロイドβ蛋白は神経細胞に対し毒
性を示す(例えば、Pike,C.J.ら(1993
年),J.Neurosci.,第13巻,1676−
1687頁、Simmons,L.K.ら(1994
年),Mol.Pharmacol.,第45巻,37
3−379頁など参照)ことが知られている。この細胞
毒性がアルツハイマー病脳における神経細胞の脱落、ひ
いては痴呆の発症の原因となっていると考えられている
(例えば、Selkoe,D.J.(1991年),N
euron,第6巻,487−498頁など参照)。
【0006】もう一つの代表的アミロイド蛋白であるア
ミリンは、インシュリン非依存性のII型糖尿病の膵臓に
沈着するアミロイドの主要構成成分であり、37アミノ
酸からなるペプチドである(例えば、Westerma
rk,P.ら(1987年),Proc.Natl.A
cad.Sci.USA,第84巻,3881−388
5頁、Cooper,G.J.S.ら(1987年),
Proc.Natl.Acad.Sci.USA,第8
4巻,8628−8632頁、Sanke,T.ら(1
988年),J.Biol.Chem.,第263巻,
17243−17246頁など参照)。
ミリンは、インシュリン非依存性のII型糖尿病の膵臓に
沈着するアミロイドの主要構成成分であり、37アミノ
酸からなるペプチドである(例えば、Westerma
rk,P.ら(1987年),Proc.Natl.A
cad.Sci.USA,第84巻,3881−388
5頁、Cooper,G.J.S.ら(1987年),
Proc.Natl.Acad.Sci.USA,第8
4巻,8628−8632頁、Sanke,T.ら(1
988年),J.Biol.Chem.,第263巻,
17243−17246頁など参照)。
【0007】アミリンもアミロイドβ蛋白同様、凝集し
やすく、凝集したアミリンは膵β細胞に対して毒性を示
すことが報告されている(例えば、Lorenzo,
A.ら(1994年),Nature,第368巻,7
56−760頁など参照)。II型糖尿病患者の膵ランゲ
ルハンス氏島の組織所見などより、アミリン沈着は、膵
ランゲルハンス氏島β細胞の機能低下に関与しているこ
とが推測されている(例えば、Johnson,K.
H.ら(1992年),Lab.Invest.,第6
6巻,522−535頁など参照)。
やすく、凝集したアミリンは膵β細胞に対して毒性を示
すことが報告されている(例えば、Lorenzo,
A.ら(1994年),Nature,第368巻,7
56−760頁など参照)。II型糖尿病患者の膵ランゲ
ルハンス氏島の組織所見などより、アミリン沈着は、膵
ランゲルハンス氏島β細胞の機能低下に関与しているこ
とが推測されている(例えば、Johnson,K.
H.ら(1992年),Lab.Invest.,第6
6巻,522−535頁など参照)。
【0008】このように、いくつかのアミロイド蛋白
は、細胞に対して毒性を示すことが知られているが、か
かる細胞毒性は、アミロイド蛋白が凝集し、線維体を形
成して初めて発揮されること(例えば、Pike,C.
J.ら(1993年),J.Neurosci.,第1
3巻,1676−1687頁、Lorenzo,A.ら
(1994年),Nature,第368巻,756−
760頁など参照)、さらには、その細胞毒性発現のメ
カニズムはいくつかのアミロイド蛋白に共通しているこ
と(例えば、Lorenzo,A.;Yankner,
B.A.(1994年),Proc.Natl.Aca
d.Sci.USA,第91巻,12243−1224
7頁、Schubert,D.ら(1995年),Pr
oc.Natl.Acad.Sci.USA,第92
巻,1989−1993頁など参照)が示唆されてい
る。
は、細胞に対して毒性を示すことが知られているが、か
かる細胞毒性は、アミロイド蛋白が凝集し、線維体を形
成して初めて発揮されること(例えば、Pike,C.
J.ら(1993年),J.Neurosci.,第1
3巻,1676−1687頁、Lorenzo,A.ら
(1994年),Nature,第368巻,756−
760頁など参照)、さらには、その細胞毒性発現のメ
カニズムはいくつかのアミロイド蛋白に共通しているこ
と(例えば、Lorenzo,A.;Yankner,
B.A.(1994年),Proc.Natl.Aca
d.Sci.USA,第91巻,12243−1224
7頁、Schubert,D.ら(1995年),Pr
oc.Natl.Acad.Sci.USA,第92
巻,1989−1993頁など参照)が示唆されてい
る。
【0009】これらの報告は、あるアミロイド蛋白(例
えばアミリンなど)の凝集を阻害する薬剤またはその細
胞毒性を抑制するような薬剤は、他のアミロイド蛋白の
凝集または細胞毒性をも抑制できる可能性を示してい
る。
えばアミリンなど)の凝集を阻害する薬剤またはその細
胞毒性を抑制するような薬剤は、他のアミロイド蛋白の
凝集または細胞毒性をも抑制できる可能性を示してい
る。
【0010】アミロイド蛋白の凝集や沈着を抑える作用
および/または凝集したアミロイド蛋白の細胞毒性を抑
える作用を持つとされる薬物はいくつか報告されてい
る。例えば、リファンピシン(例えば、Tomiyam
a,T.ら(1994年),Biochem.Biop
hys.Res.Commun.,第204巻,76−
83頁など参照)、コンゴーレッド(例えば、Lore
nzo,A.;Yankner,B.A.(1994
年),Proc.Natl.Acad.Sci.US
A,第91巻,12243−12247頁など参照)、
ポリビニルサルフォネートや1,3−プロパンジオール
ジサルフェートなどの化合物群(例えば、Kisile
vsky,R.ら(1995年),Nature Me
dicine,第1巻,143−148頁など参照)お
よびアントラサイクリン4’−ヨード−4’−デオキシ
ドキソルビシン(例えば、Merlini,G.ら(1
995年),Proc.Natl.Acad.Sci.
USA,第92巻,1989−1993頁など参照)な
どである。
および/または凝集したアミロイド蛋白の細胞毒性を抑
える作用を持つとされる薬物はいくつか報告されてい
る。例えば、リファンピシン(例えば、Tomiyam
a,T.ら(1994年),Biochem.Biop
hys.Res.Commun.,第204巻,76−
83頁など参照)、コンゴーレッド(例えば、Lore
nzo,A.;Yankner,B.A.(1994
年),Proc.Natl.Acad.Sci.US
A,第91巻,12243−12247頁など参照)、
ポリビニルサルフォネートや1,3−プロパンジオール
ジサルフェートなどの化合物群(例えば、Kisile
vsky,R.ら(1995年),Nature Me
dicine,第1巻,143−148頁など参照)お
よびアントラサイクリン4’−ヨード−4’−デオキシ
ドキソルビシン(例えば、Merlini,G.ら(1
995年),Proc.Natl.Acad.Sci.
USA,第92巻,1989−1993頁など参照)な
どである。
【0011】しかし、これらは、リファンピシンを除い
ては臨床上使用されている薬剤ではない。また、リファ
ンピシンに関しても、抗菌剤として臨床上使用されてい
るものの、アルツハイマー病、II型糖尿病等に代表され
るアミロイドーシスの治療薬として臨床上有効であると
する報告はない。さらには、これらの薬剤は、本発明で
用いているチオナフタレン誘導体とは全く構造の異なる
化合物群である。
ては臨床上使用されている薬剤ではない。また、リファ
ンピシンに関しても、抗菌剤として臨床上使用されてい
るものの、アルツハイマー病、II型糖尿病等に代表され
るアミロイドーシスの治療薬として臨床上有効であると
する報告はない。さらには、これらの薬剤は、本発明で
用いているチオナフタレン誘導体とは全く構造の異なる
化合物群である。
【0012】一方、本発明で用いているチオナフタレン
誘導体は、免疫グロブリンE抗体産生抑制作用、リポキ
シゲナーゼ阻害作用等の抗アレルギー作用を有すること
が知られているが、かかるチオナフタレン誘導体がアミ
ロイド蛋白の凝集やアミロイド蛋白の細胞毒性に対して
抑制作用を有することは知られていない。また、かかる
抑制作用を有することを示唆するような事実はない。
誘導体は、免疫グロブリンE抗体産生抑制作用、リポキ
シゲナーゼ阻害作用等の抗アレルギー作用を有すること
が知られているが、かかるチオナフタレン誘導体がアミ
ロイド蛋白の凝集やアミロイド蛋白の細胞毒性に対して
抑制作用を有することは知られていない。また、かかる
抑制作用を有することを示唆するような事実はない。
【0013】
【発明が解決しようとする課題】本発明は種々のアミロ
イド蛋白の凝集を阻害することで、アミロイドの生成を
抑え、さらにはアミロイド蛋白によって惹起される細胞
毒性を抑制することで、特定臓器へのアミロイド沈着を
特徴とする疾病、たとえばアルツハイマー病、II型糖尿
病などの治療または予防薬となりうる薬剤を提供するこ
とを目的としている。
イド蛋白の凝集を阻害することで、アミロイドの生成を
抑え、さらにはアミロイド蛋白によって惹起される細胞
毒性を抑制することで、特定臓器へのアミロイド沈着を
特徴とする疾病、たとえばアルツハイマー病、II型糖尿
病などの治療または予防薬となりうる薬剤を提供するこ
とを目的としている。
【0014】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、種々のア
ミロイド蛋白の凝集を阻害する薬剤および/または種々
のアミロイド蛋白によって惹起される細胞毒性を抑制す
る薬剤の可能性を鋭意研究した。この結果、一定構造の
チオナフタレン誘導体が、代表的なアミロイドであるア
ミリンおよびアミロイドβ蛋白の凝集を阻害すること、
およびアミリンやアミロイドβ蛋白によって惹起される
細胞毒性を抑制することを見い出し、本発明に到達し
た。
ミロイド蛋白の凝集を阻害する薬剤および/または種々
のアミロイド蛋白によって惹起される細胞毒性を抑制す
る薬剤の可能性を鋭意研究した。この結果、一定構造の
チオナフタレン誘導体が、代表的なアミロイドであるア
ミリンおよびアミロイドβ蛋白の凝集を阻害すること、
およびアミリンやアミロイドβ蛋白によって惹起される
細胞毒性を抑制することを見い出し、本発明に到達し
た。
【0015】すなわち本発明は、下記式[I]
【0016】
【化2】
【0017】[式中、Rは水酸基または−COOR
4(ここで、R4は水素原子、置換もしくは非置換のC1
−C10アルキル基、置換もしくは非置換のC3−C10ア
ルケニル基、または置換もしくは非置換のC3−C10環
状アルキル基を表す)で置換されたC1−C5のアルキル
基、置換もしくは非置換のアリール基、複素環基、−C
OR5で表される基(ここで、R5は置換もしくは非置換
のC1−C5アルキル基、置換もしくは非置換のアリール
基、または複素環基を表す)、−CONHR6で表され
る基(ここで、R6は置換もしくは非置換のC1−C5ア
ルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、または複
素環基を表す)、またはシアノ基を表し、R1およびR2
はそれぞれ独立に、水素原子、C1−C5アルキル基、ま
たはフェニル基を表し、R3は、水素原子、C1−C5ア
ルキル基、または−COR7で表される基(ここで、R7
は−OR81、−R82もしくは−NR83 2を表し、R81、
R82およびR83はそれぞれC1−C4アルキル基を表
す)]で表されるチオナフタレン誘導体またはその薬学
的に許容される塩を有効成分として含有する、アミロイ
ド蛋白の凝集および/または沈着阻害剤である。
4(ここで、R4は水素原子、置換もしくは非置換のC1
−C10アルキル基、置換もしくは非置換のC3−C10ア
ルケニル基、または置換もしくは非置換のC3−C10環
状アルキル基を表す)で置換されたC1−C5のアルキル
基、置換もしくは非置換のアリール基、複素環基、−C
OR5で表される基(ここで、R5は置換もしくは非置換
のC1−C5アルキル基、置換もしくは非置換のアリール
基、または複素環基を表す)、−CONHR6で表され
る基(ここで、R6は置換もしくは非置換のC1−C5ア
ルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、または複
素環基を表す)、またはシアノ基を表し、R1およびR2
はそれぞれ独立に、水素原子、C1−C5アルキル基、ま
たはフェニル基を表し、R3は、水素原子、C1−C5ア
ルキル基、または−COR7で表される基(ここで、R7
は−OR81、−R82もしくは−NR83 2を表し、R81、
R82およびR83はそれぞれC1−C4アルキル基を表
す)]で表されるチオナフタレン誘導体またはその薬学
的に許容される塩を有効成分として含有する、アミロイ
ド蛋白の凝集および/または沈着阻害剤である。
【0018】本発明はまた、上記式[I]で表されるチ
オナフタレン誘導体またはその薬学的に許容される塩を
有効成分として含有する、アミロイド蛋白によって惹起
される細胞毒性の抑制剤である。
オナフタレン誘導体またはその薬学的に許容される塩を
有効成分として含有する、アミロイド蛋白によって惹起
される細胞毒性の抑制剤である。
【0019】
【発明の実施の形態】上記式[I]で表されるチオナフ
タレン誘導体またはその薬学的に許容される塩におい
て、Rは水酸基または−COOR4(ここで、R4は水素
原子、置換もしくは非置換のC1−C10アルキル基、置
換もしくは非置換のC3−C10アルケニル基、または置
換もしくは非置換のC3−C10環状アルキル基を表す)
で置換されたC1−C5のアルキル基、置換もしくは非置
換のアリール基、複素環基、−COR5で表される基
(ここで、R5は置換もしくは非置換のC1−C5アルキ
ル基、置換もしくは非置換のアリール基、または複素環
基を表す)、−CONHR6で表される基(ここで、R6
は置換もしくは非置換のC1−C5アルキル基、置換もし
くは非置換のアリール基、または複素環基を表す)、ま
たはシアノ基を表す。
タレン誘導体またはその薬学的に許容される塩におい
て、Rは水酸基または−COOR4(ここで、R4は水素
原子、置換もしくは非置換のC1−C10アルキル基、置
換もしくは非置換のC3−C10アルケニル基、または置
換もしくは非置換のC3−C10環状アルキル基を表す)
で置換されたC1−C5のアルキル基、置換もしくは非置
換のアリール基、複素環基、−COR5で表される基
(ここで、R5は置換もしくは非置換のC1−C5アルキ
ル基、置換もしくは非置換のアリール基、または複素環
基を表す)、−CONHR6で表される基(ここで、R6
は置換もしくは非置換のC1−C5アルキル基、置換もし
くは非置換のアリール基、または複素環基を表す)、ま
たはシアノ基を表す。
【0020】Rが−COOR4で置換されたC1−C5の
アルキル基をあらわす場合の、R4としての非置換のC1
−C10アルキル基の好ましい例としては、メチル基、エ
チル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソ
ブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ペ
ンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ヘキシル
基、3,3−ジメチルブチル基、ヘプチル基、オクチル
基、ノニル基、デシル基などが挙げられる。R4の非置
換のC3−C10アルケニル基の好ましい例としては、2
−プロペニル基、2−ブテニル基、3−ブテニル基、2
−ペンテニル基、4−ペンテニル基、2−ヘキセニル
基、3−ヘキセニル基、5−ヘキセニル基、メタリル
基、シトロネリル基、ゲラニル基などが挙げられる。R
4の非置換のC3−C10環状アルキル基の好ましい例とし
ては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘ
プチル基が挙げられる。これらのアルキル基、アルケニ
ル基または環状アルキル基の置換基としては、1つある
いは複数のクロロ、ブロモ、フルオロ基のようなハロゲ
ン基、アルコキシ基などを挙げることができる。
アルキル基をあらわす場合の、R4としての非置換のC1
−C10アルキル基の好ましい例としては、メチル基、エ
チル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソ
ブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ペ
ンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ヘキシル
基、3,3−ジメチルブチル基、ヘプチル基、オクチル
基、ノニル基、デシル基などが挙げられる。R4の非置
換のC3−C10アルケニル基の好ましい例としては、2
−プロペニル基、2−ブテニル基、3−ブテニル基、2
−ペンテニル基、4−ペンテニル基、2−ヘキセニル
基、3−ヘキセニル基、5−ヘキセニル基、メタリル
基、シトロネリル基、ゲラニル基などが挙げられる。R
4の非置換のC3−C10環状アルキル基の好ましい例とし
ては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘ
プチル基が挙げられる。これらのアルキル基、アルケニ
ル基または環状アルキル基の置換基としては、1つある
いは複数のクロロ、ブロモ、フルオロ基のようなハロゲ
ン基、アルコキシ基などを挙げることができる。
【0021】Rが水酸基または−COOR4で置換され
たC1−C5のアルキル基を表す場合、このC1−C5のア
ルキル基部分の好ましい例としては、メチル基、エチル
基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチ
ル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ペンチ
ル基、イソペンチル基、ネオペンチル基などを挙げるこ
とができる。これらのアルキル基の任意の位置におい
て、水酸基または−COOR4のいずれかが置換してい
てよい。
たC1−C5のアルキル基を表す場合、このC1−C5のア
ルキル基部分の好ましい例としては、メチル基、エチル
基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチ
ル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ペンチ
ル基、イソペンチル基、ネオペンチル基などを挙げるこ
とができる。これらのアルキル基の任意の位置におい
て、水酸基または−COOR4のいずれかが置換してい
てよい。
【0022】Rが置換もしくは非置換のアリール基の場
合、その非置換のアリール基の例として、フェニル基、
1−ナフチル基、2−ナフチル基などを好ましいものと
して挙げることができる。この場合の置換基としては1
つあるいは複数のクロロ、ブロモ、フルオロ基のような
ハロゲン基、トリフルオロメチル基、メトキシ基、シア
ノ基、テトラゾリル基、カルボキシル基、アルコキシカ
ルボニル基などを挙げることができる。
合、その非置換のアリール基の例として、フェニル基、
1−ナフチル基、2−ナフチル基などを好ましいものと
して挙げることができる。この場合の置換基としては1
つあるいは複数のクロロ、ブロモ、フルオロ基のような
ハロゲン基、トリフルオロメチル基、メトキシ基、シア
ノ基、テトラゾリル基、カルボキシル基、アルコキシカ
ルボニル基などを挙げることができる。
【0023】Rが複素環基の場合には、その複素環基の
好ましい例として、フリル基、チエニル基、ピロリル
基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル
基、イソチアゾリル基、ピラニル基、ピリジル基、ピラ
ジニル基、トリアゾリル基、イミダゾリル基、ピラゾリ
ル基、テトラゾリル基、ピロリル基、ピペラジニル基、
ピリミジル基、ベンゾフラニル基、インドリル基、ベン
ゾイミダゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサ
ゾリル基、キノリル基、イソキノリル基、キナゾリル
基、プリニル基、プテリジニル基、モルホリニル基、ピ
ペリジニル基などの酸素、窒素または硫黄原子を持つ単
環状または二環状の基を挙げることができる。なかでも
特に好ましい例として、チエニル基、ピリジル基、チア
ゾリル基、オキサゾリル基などを挙げることができる。
好ましい例として、フリル基、チエニル基、ピロリル
基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル
基、イソチアゾリル基、ピラニル基、ピリジル基、ピラ
ジニル基、トリアゾリル基、イミダゾリル基、ピラゾリ
ル基、テトラゾリル基、ピロリル基、ピペラジニル基、
ピリミジル基、ベンゾフラニル基、インドリル基、ベン
ゾイミダゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサ
ゾリル基、キノリル基、イソキノリル基、キナゾリル
基、プリニル基、プテリジニル基、モルホリニル基、ピ
ペリジニル基などの酸素、窒素または硫黄原子を持つ単
環状または二環状の基を挙げることができる。なかでも
特に好ましい例として、チエニル基、ピリジル基、チア
ゾリル基、オキサゾリル基などを挙げることができる。
【0024】Rが−COR5で表される基である場合
に、R5としての置換もしくは非置換のC1−C5アルキ
ル基の好ましい例としては、上記R4の置換もしくは非
置換のアルキル基の例のうち、C1−C5の範囲のものを
そのまま当てはめることができる。R5としての置換も
しくは非置換のアリール基、複素環基の好ましい例とし
ては、上記Rの置換もしくは非置換のアリール基、複素
環基の説明で挙げた好ましい例をそのまま当てはめるこ
とができる。
に、R5としての置換もしくは非置換のC1−C5アルキ
ル基の好ましい例としては、上記R4の置換もしくは非
置換のアルキル基の例のうち、C1−C5の範囲のものを
そのまま当てはめることができる。R5としての置換も
しくは非置換のアリール基、複素環基の好ましい例とし
ては、上記Rの置換もしくは非置換のアリール基、複素
環基の説明で挙げた好ましい例をそのまま当てはめるこ
とができる。
【0025】Rが−CONHR6で表される基である場
合に、R6としての置換もしくは非置換のC1−C5アル
キル基、置換もしくは非置換のアリール基、複素環基の
好ましい例としては、上記R5の置換もしくは非置換の
C1−C5アルキル基、置換もしくは非置換のアリール
基、複素環基の説明で挙げた好ましい例を、それぞれそ
のまま当てはめることができる。
合に、R6としての置換もしくは非置換のC1−C5アル
キル基、置換もしくは非置換のアリール基、複素環基の
好ましい例としては、上記R5の置換もしくは非置換の
C1−C5アルキル基、置換もしくは非置換のアリール
基、複素環基の説明で挙げた好ましい例を、それぞれそ
のまま当てはめることができる。
【0026】上記式[I]で表されるチオナフタレン誘
導体またはその薬学的に許容される塩において、R1お
よびR2はそれぞれ独立に、水素原子、C1−C5アルキ
ル基、またはフェニル基を表す。
導体またはその薬学的に許容される塩において、R1お
よびR2はそれぞれ独立に、水素原子、C1−C5アルキ
ル基、またはフェニル基を表す。
【0027】R1およびR2としてのC1−C5アルキル
基、の具体例としてはメチル基、エチル基、プロピル
基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec
−ブチル基、tert−ブチル基、ペンチル基、イソペ
ンチル基、ネオペンチル基などが挙げられる。
基、の具体例としてはメチル基、エチル基、プロピル
基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec
−ブチル基、tert−ブチル基、ペンチル基、イソペ
ンチル基、ネオペンチル基などが挙げられる。
【0028】上記式[I]で表されるチオナフタレン誘
導体またはその薬学的に許容される塩において、R
3は、水素原子、C1−C5アルキル基、または−COR7
で表される基(ここで、R7は−OR81、−R82もしく
は−NR83 2を表し、R81、R82およびR83はそれぞれ
C1−C4アルキル基を表す)を表す。
導体またはその薬学的に許容される塩において、R
3は、水素原子、C1−C5アルキル基、または−COR7
で表される基(ここで、R7は−OR81、−R82もしく
は−NR83 2を表し、R81、R82およびR83はそれぞれ
C1−C4アルキル基を表す)を表す。
【0029】R3がC1−C5アルキル基である場合の具
体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソ
プロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル
基、tert−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル
基、ネオペンチル基などが挙げられる。
体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソ
プロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル
基、tert−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル
基、ネオペンチル基などが挙げられる。
【0030】R3が−COR7で表される基である場合
に、R7は−OR81、−R82もしくは−NR83 2を表すが
この場合のR81、R82およびR83としてのC1−C4アル
キル基の具体例としては、メチル基、エチル基、プロピ
ル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、se
c−ブチル基、tert−ブチル基などを挙げることが
できる。
に、R7は−OR81、−R82もしくは−NR83 2を表すが
この場合のR81、R82およびR83としてのC1−C4アル
キル基の具体例としては、メチル基、エチル基、プロピ
ル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、se
c−ブチル基、tert−ブチル基などを挙げることが
できる。
【0031】本発明のチオナフタレン誘導体には、その
分子中に存在する場合の酸性基または塩基性基に起因し
て、公知の塩基(例えばナトリウム、カリウム)または
酸(例えば無機酸、有機酸)と形成され得る薬学的に許
容される塩が存在する場合にはそのような塩も含まれ
る。具体的には、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、シュウ
酸、マロン酸、フマル酸、アスコルビン酸、乳酸、酒石
酸、グルタミン酸、メタンスルホン酸等を用いて調製さ
れる塩が挙げられる。
分子中に存在する場合の酸性基または塩基性基に起因し
て、公知の塩基(例えばナトリウム、カリウム)または
酸(例えば無機酸、有機酸)と形成され得る薬学的に許
容される塩が存在する場合にはそのような塩も含まれ
る。具体的には、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、シュウ
酸、マロン酸、フマル酸、アスコルビン酸、乳酸、酒石
酸、グルタミン酸、メタンスルホン酸等を用いて調製さ
れる塩が挙げられる。
【0032】本発明で用いられるチオナフタレン誘導体
は、既知の合成法で容易に合成することが可能である
(WO90/12001参照)。
は、既知の合成法で容易に合成することが可能である
(WO90/12001参照)。
【0033】本発明で用いられるチオナフタレン誘導体
は、R、R1、およびR2が置換している炭素が不斉炭素
となるために、2種類の光学異性体が存在する場合があ
るが、本発明ではいずれの光学異性体も、あるいはそれ
らの任意の割合の混合物をも用いることができる。
は、R、R1、およびR2が置換している炭素が不斉炭素
となるために、2種類の光学異性体が存在する場合があ
るが、本発明ではいずれの光学異性体も、あるいはそれ
らの任意の割合の混合物をも用いることができる。
【0034】化合物の好適な例としては、下記の構造を
持つものが挙げられる。
持つものが挙げられる。
【0035】
【化3】
【0036】
【化4】
【0037】
【化5】
【0038】本発明のアミロイド蛋白の凝集および/ま
たは沈着阻害剤は、好ましくは製薬学的に許容される担
体を配合する。かかる製薬学的に許容される担体として
は、後記賦形剤と同様のものを挙げることができる。こ
の場合の活性成分と担体との配合量については、後記の
ような活性成分の投与量に従うが、特に限定されず広範
囲に選択され、通常活性成分は全組成物中1〜70重量
%、好ましくは5〜50重量%である。得られた組成物
は、さらに公知の方法で適当な賦形剤等を用いて軟カプ
セル剤、硬カプセル剤、錠剤、顆粒剤、散剤、懸濁剤、
液剤、シロップ剤等の経口剤、注射剤、坐剤または外用
剤として提供される。かかる賦形剤としては植物油(例
えばトウモロコシ油、綿実油、ココナッツ油、アーモン
ド油、落花生油、オリーブ油等)、中鎖脂肪酸グリセラ
イド油等の油状エステル、鉱物油、トリカプリリン、ト
リアセチル等のグリセリンエステル類、エタノール等の
アルコール類、生理食塩水、プロピレングリコール、ポ
リエチレングリコール、ワセリン、動物油脂、セルロー
ス誘導体(結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセ
ルロース)、ポリビニルピロリドン、デキストリン、乳
糖、マンニトール、ソルビトール、デンプン等が挙げら
れる。
たは沈着阻害剤は、好ましくは製薬学的に許容される担
体を配合する。かかる製薬学的に許容される担体として
は、後記賦形剤と同様のものを挙げることができる。こ
の場合の活性成分と担体との配合量については、後記の
ような活性成分の投与量に従うが、特に限定されず広範
囲に選択され、通常活性成分は全組成物中1〜70重量
%、好ましくは5〜50重量%である。得られた組成物
は、さらに公知の方法で適当な賦形剤等を用いて軟カプ
セル剤、硬カプセル剤、錠剤、顆粒剤、散剤、懸濁剤、
液剤、シロップ剤等の経口剤、注射剤、坐剤または外用
剤として提供される。かかる賦形剤としては植物油(例
えばトウモロコシ油、綿実油、ココナッツ油、アーモン
ド油、落花生油、オリーブ油等)、中鎖脂肪酸グリセラ
イド油等の油状エステル、鉱物油、トリカプリリン、ト
リアセチル等のグリセリンエステル類、エタノール等の
アルコール類、生理食塩水、プロピレングリコール、ポ
リエチレングリコール、ワセリン、動物油脂、セルロー
ス誘導体(結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセ
ルロース)、ポリビニルピロリドン、デキストリン、乳
糖、マンニトール、ソルビトール、デンプン等が挙げら
れる。
【0039】活性成分の投与量は、疾患の程度、患者の
年令等にもよるが、通常10〜1000mg/日/人程
度で、好ましくは100〜600mg/日/人であり、
このような条件を満足するように製剤するのが好まし
い。
年令等にもよるが、通常10〜1000mg/日/人程
度で、好ましくは100〜600mg/日/人であり、
このような条件を満足するように製剤するのが好まし
い。
【0040】
【実施例】以下、参考例および実施例により本発明を詳
細に説明する。実施例で用いたチオナフタレン誘導体は
全て、WO90/12001の明細書中に記載されてい
る既知の方法に従って合成した。
細に説明する。実施例で用いたチオナフタレン誘導体は
全て、WO90/12001の明細書中に記載されてい
る既知の方法に従って合成した。
【0041】[参考例1]チオフラビンTを用いたアミロイド蛋白の凝集測定法 チオフラビンT(ThT)は、凝集したアミロイド蛋白
のβシート構造に結合して、遊離の状態では示さなかっ
た新たな蛍光(482nm)を発することが知られてお
り、以下に述べるThTを用いた方法は、凝集アミロイ
ド蛋白の定量法として有用である(Harry LeV
ine III,(1993年),Protein Sc
ience,第2巻,404−410頁)。ここで、蛍
光強度はThTが結合するアミロイド蛋白の凝集の程度
に比例する。
のβシート構造に結合して、遊離の状態では示さなかっ
た新たな蛍光(482nm)を発することが知られてお
り、以下に述べるThTを用いた方法は、凝集アミロイ
ド蛋白の定量法として有用である(Harry LeV
ine III,(1993年),Protein Sc
ience,第2巻,404−410頁)。ここで、蛍
光強度はThTが結合するアミロイド蛋白の凝集の程度
に比例する。
【0042】具体的実施方法は以下の通りである。すな
わち、ある薬剤を含むアミロイド蛋白の試料溶液20μ
lを50mMリン酸ナトリウム緩衝液(pH6.0)に
3μMの濃度で溶かされたThT溶液2mlに加え、撹
拌した。撹拌後、速やかにスペクトロフルオロメーター
(JASCO製)を用いて、励起波長450nm、蛍光
波長482nmで溶液の蛍光を測定した。得られた蛍光
強度の値を薬剤を含まないアミロイド蛋白のみの溶液
(コントロール)の値と比較することにより、その薬剤
のアミロイド蛋白凝集阻害活性を調べた。
わち、ある薬剤を含むアミロイド蛋白の試料溶液20μ
lを50mMリン酸ナトリウム緩衝液(pH6.0)に
3μMの濃度で溶かされたThT溶液2mlに加え、撹
拌した。撹拌後、速やかにスペクトロフルオロメーター
(JASCO製)を用いて、励起波長450nm、蛍光
波長482nmで溶液の蛍光を測定した。得られた蛍光
強度の値を薬剤を含まないアミロイド蛋白のみの溶液
(コントロール)の値と比較することにより、その薬剤
のアミロイド蛋白凝集阻害活性を調べた。
【0043】[参考例2]PC12細胞を用いたアミロイド蛋白の細胞毒性測定法 ラット副腎褐色細胞腫由来PC12細胞は、アミロイド
β蛋白などのアミロイド蛋白の細胞毒性を測定するのに
広く用いられている細胞である(例えば、Shearm
an,M.S.ら(1994年),Proc.Nat
l.Acad.Sci.USA,第91巻,1470−
1474頁参照)。理研細胞バンクより入手したPC1
2細胞(登録番号RCB0009)を10%ウシ胎児血
清、5%馬血清を含むDMEM培地で培養した。細胞毒
性試験前日に細胞をトリプシン処理してフラスコよりは
がし、5000細胞/200μl/ウェルの濃度でポリ
−L−リジンでコートされた96ウェルプレートに播き
込んだ。翌日、被験化合物を含むペプチド溶液を1ウェ
ルあたり10μl または20μl 培養液中に加え、
さらに1日間培養を続けた。また、コントロールとし
て、PBSのみを1ウェルあたり10μl または20
μl 培養液中に加え、さらに被験化合物自身の毒性を
みるため、被験化合物を含むPBSを1ウェルあたり1
0μl または20μl 培養液中に加えた。
β蛋白などのアミロイド蛋白の細胞毒性を測定するのに
広く用いられている細胞である(例えば、Shearm
an,M.S.ら(1994年),Proc.Nat
l.Acad.Sci.USA,第91巻,1470−
1474頁参照)。理研細胞バンクより入手したPC1
2細胞(登録番号RCB0009)を10%ウシ胎児血
清、5%馬血清を含むDMEM培地で培養した。細胞毒
性試験前日に細胞をトリプシン処理してフラスコよりは
がし、5000細胞/200μl/ウェルの濃度でポリ
−L−リジンでコートされた96ウェルプレートに播き
込んだ。翌日、被験化合物を含むペプチド溶液を1ウェ
ルあたり10μl または20μl 培養液中に加え、
さらに1日間培養を続けた。また、コントロールとし
て、PBSのみを1ウェルあたり10μl または20
μl 培養液中に加え、さらに被験化合物自身の毒性を
みるため、被験化合物を含むPBSを1ウェルあたり1
0μl または20μl 培養液中に加えた。
【0044】ペプチド溶液を加えた翌日、細胞の還元能
力をMTT法により測定した。MTT法は被験物質の細
胞毒性を測定する方法として広く用いられている方法で
ある(例えば、Hansen,M.B.ら(1989
年),J.Immunol.Methods,第119
巻,203−210頁など参照)。具体的には、PBS
に5mg/mlの濃度で溶解したMTT(シグマ製)溶
液を200μlの培養液に対し20μlずつ加え、37
℃で5時間培養した。培地を除去した後、0.04N塩
酸を含むイソプロピルアルコールを1ウェルあたり10
0μlずつ加え、MTT還元の結果できた細胞表面のフ
ォルマザンをピペッティングにより溶解した。かかるフ
ォルマザン溶液の吸光度(570nm−650nm)を
ELISAリーダーで測定し、PBS添加のコントロー
ルの値を100として各ウェルについて値を計算した。
毒性が強くなるほど値は0に近くなる。
力をMTT法により測定した。MTT法は被験物質の細
胞毒性を測定する方法として広く用いられている方法で
ある(例えば、Hansen,M.B.ら(1989
年),J.Immunol.Methods,第119
巻,203−210頁など参照)。具体的には、PBS
に5mg/mlの濃度で溶解したMTT(シグマ製)溶
液を200μlの培養液に対し20μlずつ加え、37
℃で5時間培養した。培地を除去した後、0.04N塩
酸を含むイソプロピルアルコールを1ウェルあたり10
0μlずつ加え、MTT還元の結果できた細胞表面のフ
ォルマザンをピペッティングにより溶解した。かかるフ
ォルマザン溶液の吸光度(570nm−650nm)を
ELISAリーダーで測定し、PBS添加のコントロー
ルの値を100として各ウェルについて値を計算した。
毒性が強くなるほど値は0に近くなる。
【0045】[参考例3]アミロイドβ1−40蛋白の合成 ペプチドの合成は、Fmoc−アミノ酸を原料として、
固相法によりペプチド合成機(アプライド・バイオシス
テムズ製)を用いて行なった。合成終了後、ペプチドを
樹脂から切り出し、C18カラムを用いた逆相高速液体
クロマトグラフィー(ウオーターズ製)によってこれを
精製した。得られたペプチドが目的のアミノ酸配列を有
していることをペプチドシーケンサー(アプライド・バ
イオシステムズ製)によって確認した。このようにして
得られたペプチドを凍結乾燥し、以下の実施例に用い
た。
固相法によりペプチド合成機(アプライド・バイオシス
テムズ製)を用いて行なった。合成終了後、ペプチドを
樹脂から切り出し、C18カラムを用いた逆相高速液体
クロマトグラフィー(ウオーターズ製)によってこれを
精製した。得られたペプチドが目的のアミノ酸配列を有
していることをペプチドシーケンサー(アプライド・バ
イオシステムズ製)によって確認した。このようにして
得られたペプチドを凍結乾燥し、以下の実施例に用い
た。
【0046】[実施例1]アミリン(ペプチド研究所
製)を200μMの濃度になるようDMSOに溶解した
後、2回脱イオン水で5倍希釈して40μMのペプチド
溶液を得た。この溶液をエッペンドルフチューブ(商
標)に50μlずつ分注した。次に10mM、1mM、
または0.1mMとなるようにDMSOに溶解した被験
化合物1μlを、上記チューブにtriplicate
で加えて撹拌した。コントロールとして、DMSOのみ
を1μlずつ3本のチューブに加えた。続いて、50μ
lの2×PBS溶液をこれらのチューブに加えて撹拌
し、最終的に20μMのペプチド溶液を得た(化合物の
最終濃度は100μM、10μM、または1μMとな
る)。これらの溶液を37℃で7日間インキュベートし
た後、参考例1の方法に従って、溶液中のペプチドの凝
集度を測定した。
製)を200μMの濃度になるようDMSOに溶解した
後、2回脱イオン水で5倍希釈して40μMのペプチド
溶液を得た。この溶液をエッペンドルフチューブ(商
標)に50μlずつ分注した。次に10mM、1mM、
または0.1mMとなるようにDMSOに溶解した被験
化合物1μlを、上記チューブにtriplicate
で加えて撹拌した。コントロールとして、DMSOのみ
を1μlずつ3本のチューブに加えた。続いて、50μ
lの2×PBS溶液をこれらのチューブに加えて撹拌
し、最終的に20μMのペプチド溶液を得た(化合物の
最終濃度は100μM、10μM、または1μMとな
る)。これらの溶液を37℃で7日間インキュベートし
た後、参考例1の方法に従って、溶液中のペプチドの凝
集度を測定した。
【0047】表1に示すように、被験化合物はいずれ
も、凝集ペプチドに対するThTの結合によって生じる
蛍光発光を濃度依存的に抑制した。この結果は、本発明
の薬剤がアミリンの凝集抑制に効果があることを示して
いる。
も、凝集ペプチドに対するThTの結合によって生じる
蛍光発光を濃度依存的に抑制した。この結果は、本発明
の薬剤がアミリンの凝集抑制に効果があることを示して
いる。
【0048】
【表1】
【0049】なお、表中で番号により特定されている被
験化合物は、「化合物の好適な例」のところで述べた同
一番号の化合物である(以下同じ)。
験化合物は、「化合物の好適な例」のところで述べた同
一番号の化合物である(以下同じ)。
【0050】[実施例2]アミロイドβ1−40蛋白
(Bachem社製)を200μMの濃度となるようD
MSOに溶解した後、2回脱イオン水で5倍希釈して4
0μMとし、さらに等量の2×PBS溶液を加えて20
μMのペプチド溶液を得た。この溶液をエッペンドルフ
チューブに100μlずつ分注した。次に10mM、1
mMまたは0.1mMとなるようDMSOに溶解した被
験化合物1μlを、上記チューブにtriplicat
eで加えて撹拌した。コントロールとして、DMSOの
みを1μlずつ3本のチューブに加えた。これらの溶液
を37℃で2週間インキュベートした後、参考例1の方
法に従って溶液中のペプチドの凝集を測定した。
(Bachem社製)を200μMの濃度となるようD
MSOに溶解した後、2回脱イオン水で5倍希釈して4
0μMとし、さらに等量の2×PBS溶液を加えて20
μMのペプチド溶液を得た。この溶液をエッペンドルフ
チューブに100μlずつ分注した。次に10mM、1
mMまたは0.1mMとなるようDMSOに溶解した被
験化合物1μlを、上記チューブにtriplicat
eで加えて撹拌した。コントロールとして、DMSOの
みを1μlずつ3本のチューブに加えた。これらの溶液
を37℃で2週間インキュベートした後、参考例1の方
法に従って溶液中のペプチドの凝集を測定した。
【0051】表2に示すように、被験化合物8および被
験化合物11は、凝集ペプチドに対するThTの結合に
よって生じる蛍光発光を濃度依存的に抑制した。この結
果は、本発明の薬剤がアミロイドβ1−40蛋白の凝集
抑制効果を有することを示している。
験化合物11は、凝集ペプチドに対するThTの結合に
よって生じる蛍光発光を濃度依存的に抑制した。この結
果は、本発明の薬剤がアミロイドβ1−40蛋白の凝集
抑制効果を有することを示している。
【0052】
【表2】
【0053】[実施例3]アミリン(ペプチド研究所
製)を200μMの濃度となるようDMSOに溶解した
後、2回脱イオン水で5倍希釈して40μMとし、さら
に等量の2×PBS溶液を加えて20μMのペプチド溶
液を得た。この溶液をエッペンドルフチューブに100
μlずつ分注した。次に20mMまたは2mMとなるよ
うDMSOに溶解した被験化合物1μlを、上記チュー
ブにtriplicateで加えて撹拌した。コントロ
ールとして、DMSOのみを1μlずつ3本のチューブ
に加えた。これらの溶液を37℃で7日間インキュベー
トした。次にこれらの溶液を100,000×gで20
分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。上清を除去し
た後、ペレットに上清と等量のPBSを加えて撹拌し、
凝集ペプチド懸濁液を得た。この懸濁液10μlを細胞
培養液200μlに加え、参考例2の方法に従って、そ
の細胞毒性(MTT還元能低下作用)を測定した。
製)を200μMの濃度となるようDMSOに溶解した
後、2回脱イオン水で5倍希釈して40μMとし、さら
に等量の2×PBS溶液を加えて20μMのペプチド溶
液を得た。この溶液をエッペンドルフチューブに100
μlずつ分注した。次に20mMまたは2mMとなるよ
うDMSOに溶解した被験化合物1μlを、上記チュー
ブにtriplicateで加えて撹拌した。コントロ
ールとして、DMSOのみを1μlずつ3本のチューブ
に加えた。これらの溶液を37℃で7日間インキュベー
トした。次にこれらの溶液を100,000×gで20
分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。上清を除去し
た後、ペレットに上清と等量のPBSを加えて撹拌し、
凝集ペプチド懸濁液を得た。この懸濁液10μlを細胞
培養液200μlに加え、参考例2の方法に従って、そ
の細胞毒性(MTT還元能低下作用)を測定した。
【0054】表3に示すように被験化合物8、被験化合
物9、および被験化合物11はアミリンが引き起こす細
胞のMTT還元能低下を抑制した。一方、かかる化合物
単独では細胞のMTT還元能に何ら影響を与えなかっ
た。この結果は、本発明の薬剤がアミリンによる細胞毒
性を抑制する効果を有することを示している。
物9、および被験化合物11はアミリンが引き起こす細
胞のMTT還元能低下を抑制した。一方、かかる化合物
単独では細胞のMTT還元能に何ら影響を与えなかっ
た。この結果は、本発明の薬剤がアミリンによる細胞毒
性を抑制する効果を有することを示している。
【0055】
【表3】
【0056】[実施例4]アミリン(Novabioc
hem社製)を40μMの濃度となるよう2回脱イオン
水に溶解した後、等量の2×PBS溶液を加えて20μ
Mのペプチド溶液を得た。この溶液を37℃で7日間イ
ンキュベートし、ペプチドを凝集させた。この凝集した
ペプチド溶液をPBSで20μMに希釈した後、100
μlずつエッペンドルフチューブに分注した。次に20
mMの濃度となるようDMSOに溶解した被験化合物1
μlを、上記チューブにtriplicateで加えて
撹拌した。コントロールとして、DMSOのみを1μl
ずつ3本のチューブに加えた。これらの溶液を37℃で
さらに7日間インキュベートした。次に、これらの溶液
を100,000×gで20分間遠心し、凝集ペプチド
を沈降させた。上清を除去後ペレットに上清と等量のP
BSを加えて撹拌し、凝集ペプチドの懸濁液を得た。こ
の懸濁液10μlを細胞培養液200μlに加え、参考
例2の方法に従って、その細胞毒性(MTT還元能低下
作用)を測定した。表4に示すように、被験化合物8、
被験化合物9および被験化合物11は凝集したアミリン
が引き起こす細胞のMTT還元能低下を抑制した。この
結果は、本発明の薬剤が、予め凝集させたアミリンによ
って惹起される細胞毒性の抑制にも効果があることを示
している。
hem社製)を40μMの濃度となるよう2回脱イオン
水に溶解した後、等量の2×PBS溶液を加えて20μ
Mのペプチド溶液を得た。この溶液を37℃で7日間イ
ンキュベートし、ペプチドを凝集させた。この凝集した
ペプチド溶液をPBSで20μMに希釈した後、100
μlずつエッペンドルフチューブに分注した。次に20
mMの濃度となるようDMSOに溶解した被験化合物1
μlを、上記チューブにtriplicateで加えて
撹拌した。コントロールとして、DMSOのみを1μl
ずつ3本のチューブに加えた。これらの溶液を37℃で
さらに7日間インキュベートした。次に、これらの溶液
を100,000×gで20分間遠心し、凝集ペプチド
を沈降させた。上清を除去後ペレットに上清と等量のP
BSを加えて撹拌し、凝集ペプチドの懸濁液を得た。こ
の懸濁液10μlを細胞培養液200μlに加え、参考
例2の方法に従って、その細胞毒性(MTT還元能低下
作用)を測定した。表4に示すように、被験化合物8、
被験化合物9および被験化合物11は凝集したアミリン
が引き起こす細胞のMTT還元能低下を抑制した。この
結果は、本発明の薬剤が、予め凝集させたアミリンによ
って惹起される細胞毒性の抑制にも効果があることを示
している。
【0057】
【表4】
【0058】[実施例5]上記参考例3で得られたアミ
ロイドβ1−40蛋白を80μMの濃度となるよう2回
脱イオン水に溶解した後、等量の2×PBS溶液を加え
て40μMのペプチド溶液を得た。この溶液をエッペン
ドルフチューブに100μlずつ分注した。次に20m
MとなるようDMSOに溶解した被験化合物1μlを、
上記チューブにtriplicateで加えて撹拌し
た。コントロールとして、DMSOのみを1μlずつ3
本のチューブに加えた。これらの溶液を37℃で7日間
インキュベートした。次にこれらの溶液を100,00
0×gで20分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。
上清を除去した後、ペレットに上清と等量のPBSを加
えて懸濁し、凝集ペプチド溶液を得た。この溶液10μ
lを細胞培養液200μlに加え、参考例2の方法に従
って、その細胞毒性(MTT還元能低下作用)を測定し
た。
ロイドβ1−40蛋白を80μMの濃度となるよう2回
脱イオン水に溶解した後、等量の2×PBS溶液を加え
て40μMのペプチド溶液を得た。この溶液をエッペン
ドルフチューブに100μlずつ分注した。次に20m
MとなるようDMSOに溶解した被験化合物1μlを、
上記チューブにtriplicateで加えて撹拌し
た。コントロールとして、DMSOのみを1μlずつ3
本のチューブに加えた。これらの溶液を37℃で7日間
インキュベートした。次にこれらの溶液を100,00
0×gで20分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。
上清を除去した後、ペレットに上清と等量のPBSを加
えて懸濁し、凝集ペプチド溶液を得た。この溶液10μ
lを細胞培養液200μlに加え、参考例2の方法に従
って、その細胞毒性(MTT還元能低下作用)を測定し
た。
【0059】表5に示すように被験化合物9および被験
化合物11はアミロイドβ1−40蛋白が引き起こす細
胞のMTT還元能低下を抑制した。一方、かかる化合物
単独では細胞のMTT還元能に何ら影響を与えなかっ
た。この結果は、本発明の薬剤が、アミロイドβ1−4
0蛋白による細胞毒性の抑制効果を有することを示して
いる。
化合物11はアミロイドβ1−40蛋白が引き起こす細
胞のMTT還元能低下を抑制した。一方、かかる化合物
単独では細胞のMTT還元能に何ら影響を与えなかっ
た。この結果は、本発明の薬剤が、アミロイドβ1−4
0蛋白による細胞毒性の抑制効果を有することを示して
いる。
【0060】
【表5】
【0061】[実施例6]上記参考例3で得られたアミ
ロイドβ1−40蛋白を80μMの濃度となるよう2回
脱イオン水に溶解した後、等量の2×PBS溶液を加え
て40μMのペプチド溶液を得た。この溶液を37℃で
7日間インキュベートし、ペプチドを凝集させた。この
凝集したペプチド溶液を100μlずつエッペンドルフ
チューブに分注した。次に20mMの濃度となるようD
MSOに溶解した被験化合物1μlを、上記チューブに
triplicateで加えて撹拌した。コントロール
として、DMSOのみを1μlずつ3本のチューブに加
えた。これらの溶液を37℃でさらに7日間インキュベ
ートした。次に、これらの溶液を100,000×gで
20分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。上清を除
去した後、ペレットに上清と等量のPBSを加えて撹拌
し、凝集ペプチドの懸濁液を得た。この懸濁液10μl
を細胞培養液200μlに加え、参考例2の方法に従っ
て、その細胞毒性(MTT還元能低下作用)を測定し
た。表6に示すように、被験化合物9および被験化合物
11は、凝集したアミロイドβ1−40蛋白が引き起こ
す細胞のMTT還元能低下を抑制した。この結果は、本
発明の薬剤が、予め凝集させたアミロイドβ蛋白の細胞
毒性の抑制にも効果があることを示している。
ロイドβ1−40蛋白を80μMの濃度となるよう2回
脱イオン水に溶解した後、等量の2×PBS溶液を加え
て40μMのペプチド溶液を得た。この溶液を37℃で
7日間インキュベートし、ペプチドを凝集させた。この
凝集したペプチド溶液を100μlずつエッペンドルフ
チューブに分注した。次に20mMの濃度となるようD
MSOに溶解した被験化合物1μlを、上記チューブに
triplicateで加えて撹拌した。コントロール
として、DMSOのみを1μlずつ3本のチューブに加
えた。これらの溶液を37℃でさらに7日間インキュベ
ートした。次に、これらの溶液を100,000×gで
20分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。上清を除
去した後、ペレットに上清と等量のPBSを加えて撹拌
し、凝集ペプチドの懸濁液を得た。この懸濁液10μl
を細胞培養液200μlに加え、参考例2の方法に従っ
て、その細胞毒性(MTT還元能低下作用)を測定し
た。表6に示すように、被験化合物9および被験化合物
11は、凝集したアミロイドβ1−40蛋白が引き起こ
す細胞のMTT還元能低下を抑制した。この結果は、本
発明の薬剤が、予め凝集させたアミロイドβ蛋白の細胞
毒性の抑制にも効果があることを示している。
【0062】
【表6】
【0063】
【発明の効果】このように、本発明の前記式[I]で表
されるチオナフタレン誘導体またはその薬学的に許容さ
れる塩を有効成分として含有する薬剤は、代表的なアミ
ロイド蛋白であるアミリンおよびアミロイドβ蛋白等の
凝集を阻害する作用を有している。さらに、本発明の薬
剤は、かかるアミロイド蛋白により惹起される細胞毒性
を抑制する作用を有している。したがって、本発明の薬
剤は、アミロイド蛋白の凝集阻害剤として有用であり、
特定臓器へのアミロイド沈着を特徴とする疾病、たとえ
ばアルツハイマー病、II型糖尿病などの治療薬または予
防薬として有用である。
されるチオナフタレン誘導体またはその薬学的に許容さ
れる塩を有効成分として含有する薬剤は、代表的なアミ
ロイド蛋白であるアミリンおよびアミロイドβ蛋白等の
凝集を阻害する作用を有している。さらに、本発明の薬
剤は、かかるアミロイド蛋白により惹起される細胞毒性
を抑制する作用を有している。したがって、本発明の薬
剤は、アミロイド蛋白の凝集阻害剤として有用であり、
特定臓器へのアミロイド沈着を特徴とする疾病、たとえ
ばアルツハイマー病、II型糖尿病などの治療薬または予
防薬として有用である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 FI 技術表示箇所 A61K 31/235 A61K 31/235 31/275 AED 31/275 AED 31/38 31/38 31/41 31/41 31/42 31/42 31/425 31/425 31/44 31/44 C07D 213/50 C07D 213/50 // C07C 323/21 C07C 323/21 323/56 7419−4H 323/56 323/60 323/60 C07D 257/04 C07D 257/04 C 257/06 257/06 277/24 277/24 (72)発明者 遠藤 則明 東京都日野市旭が丘4丁目3番2号 帝人 株式会社東京研究センター内
Claims (10)
- 【請求項1】 下記式[I] 【化1】 [式中、Rは水酸基または−COOR4(ここで、R4は
水素原子、置換もしくは非置換のC1−C10アルキル
基、置換もしくは非置換のC3−C10アルケニル基、ま
たは置換もしくは非置換のC3−C10環状アルキル基を
表す)で置換されたC1−C5のアルキル基、置換もしく
は非置換のアリール基、複素環基、−COR5で表され
る基(ここで、R5は置換もしくは非置換のC1−C5ア
ルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、または複
素環基を表す)、−CONHR6で表される基(ここ
で、R6は置換もしくは非置換のC1−C5アルキル基、
置換もしくは非置換のアリール基、または複素環基を表
す)、またはシアノ基を表し、 R1およびR2はそれぞれ独立に、水素原子、C1−C5ア
ルキル基、またはフェニル基を表し、 R3は、水素原子、C1−C5アルキル基、または−CO
R7で表される基(ここで、R7は−OR81、−R82もし
くは−NR83 2を表し、R81、R82およびR83はそれぞ
れC1−C4アルキル基を表す)]で表されるチオナフタ
レン誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分
として含有する、アミロイド蛋白の凝集および/または
沈着阻害剤。 - 【請求項2】 上記式[I]において、R1およびR2が
それぞれ独立に水素原子またはC1−C5アルキル基であ
る請求項1に記載のアミロイド蛋白の凝集および/また
は沈着阻害剤。 - 【請求項3】 上記式[I]おいて、Rが−COR5で
表される基(ここで、R5は置換もしくは非置換のC1−
C5アルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、ま
たは複素環基を表す)である請求項1または請求項2に
記載のアミロイド蛋白の凝集および/または沈着阻害
剤。 - 【請求項4】 上記式[I]おいて、Rが−CONHR
6で表される基(ここで、R6は置換もしくは非置換のC
1−C5アルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、
または複素環基を表す)である請求項1または請求項2
に記載のアミロイド蛋白の凝集および/または沈着阻害
剤。 - 【請求項5】 アミロイド蛋白がアミリンおよび/また
はアミロイドβ蛋白である請求項1から請求項4のいず
れかに記載のアミロイド蛋白の凝集および/または沈着
阻害剤。 - 【請求項6】 上記式[I]で表されるチオナフタレン
誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分とし
て含有する、アミロイド蛋白によって惹起される細胞毒
性の抑制剤。 - 【請求項7】 上記式[I]において、R1およびR2が
それぞれ独立に水素原子またはC1−C5アルキル基であ
る請求項6に記載のアミロイド蛋白によって惹起される
細胞毒性の抑制剤。 - 【請求項8】 上記式[I]おいて、Rが−COR5で
表される基(ここで、R5は置換もしくは非置換のC1−
C5アルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、ま
たは複素環基を表す)である請求項6または請求項7に
記載のアミロイド蛋白によって惹起される細胞毒性の抑
制剤。 - 【請求項9】 上記式[I]おいて、Rが−CONHR
6で表される基(ここで、R6は置換もしくは非置換のC
1−C5アルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、
または複素環基を表す)である請求項6または請求項7
に記載のアミロイド蛋白によって惹起される細胞毒性の
抑制剤。 - 【請求項10】 アミロイド蛋白がアミリンおよび/ま
たはアミロイドβ蛋白である請求項6から請求項9のい
ずれかに記載のアミロイド蛋白によって惹起される細胞
毒性の抑制剤。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP25491095A JPH0995444A (ja) | 1995-10-02 | 1995-10-02 | アミロイド蛋白凝集阻害剤 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP25491095A JPH0995444A (ja) | 1995-10-02 | 1995-10-02 | アミロイド蛋白凝集阻害剤 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0995444A true JPH0995444A (ja) | 1997-04-08 |
Family
ID=17271553
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP25491095A Pending JPH0995444A (ja) | 1995-10-02 | 1995-10-02 | アミロイド蛋白凝集阻害剤 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0995444A (ja) |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003500350A (ja) * | 1999-05-24 | 2003-01-07 | クイーンズ ユニバーシティ アット キングストン | アミロイド沈着物を阻害するための方法および化合物 |
JP2003519383A (ja) * | 1999-12-29 | 2003-06-17 | アメリカン・サイアナミド・カンパニー | アミロイド形成性タンパクの検出方法 |
WO2003055850A1 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-10 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Inhibiteurs de la production/secretion de la proteine amyloide-$g(b) |
JP2007516939A (ja) * | 2003-06-23 | 2007-06-28 | ニューロケム (インターナショナル) リミテッド | アミロイド関連疾患を治療するための方法および組成物 |
WO2009034976A1 (ja) | 2007-09-11 | 2009-03-19 | Daiichi Sankyo Company, Limited | アルキルスルホン誘導体 |
US7932271B2 (en) | 2003-06-30 | 2011-04-26 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Heterocyclic methyl sulfone derivative |
US8114886B2 (en) | 2005-04-08 | 2012-02-14 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Pyridylmethylsulfone derivative |
-
1995
- 1995-10-02 JP JP25491095A patent/JPH0995444A/ja active Pending
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003500350A (ja) * | 1999-05-24 | 2003-01-07 | クイーンズ ユニバーシティ アット キングストン | アミロイド沈着物を阻害するための方法および化合物 |
JP2003519383A (ja) * | 1999-12-29 | 2003-06-17 | アメリカン・サイアナミド・カンパニー | アミロイド形成性タンパクの検出方法 |
WO2003055850A1 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-10 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Inhibiteurs de la production/secretion de la proteine amyloide-$g(b) |
EP1466898A1 (en) * | 2001-12-27 | 2004-10-13 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Beta-amyloid protein production/secretion inhibitors |
EP1466898A4 (en) * | 2001-12-27 | 2005-12-07 | Daiichi Seiyaku Co | INHIBITORS OF THE PRODUCTION / SEPARATION OF BETA-AMYLOIDS PROTEINS |
US7399775B2 (en) | 2001-12-27 | 2008-07-15 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | β-amyloid protein production/secretion inhibitor |
JP2007516939A (ja) * | 2003-06-23 | 2007-06-28 | ニューロケム (インターナショナル) リミテッド | アミロイド関連疾患を治療するための方法および組成物 |
JP2007516938A (ja) * | 2003-06-23 | 2007-06-28 | ニューロケム (インターナショナル) リミテッド | アミロイド関連疾患を治療するための方法および組成物 |
US7932271B2 (en) | 2003-06-30 | 2011-04-26 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Heterocyclic methyl sulfone derivative |
US8114886B2 (en) | 2005-04-08 | 2012-02-14 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Pyridylmethylsulfone derivative |
WO2009034976A1 (ja) | 2007-09-11 | 2009-03-19 | Daiichi Sankyo Company, Limited | アルキルスルホン誘導体 |
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