JPH09511334A - Rzr受容体ファミリーを用いるスクリーニング方法 - Google Patents
Rzr受容体ファミリーを用いるスクリーニング方法Info
- Publication number
- JPH09511334A JPH09511334A JP7525376A JP52537695A JPH09511334A JP H09511334 A JPH09511334 A JP H09511334A JP 7525376 A JP7525376 A JP 7525376A JP 52537695 A JP52537695 A JP 52537695A JP H09511334 A JPH09511334 A JP H09511334A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- receptor
- rzr
- activity
- melatonin
- ror
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6875—Nucleoproteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70567—Nuclear receptors, e.g. retinoic acid receptor [RAR], RXR, nuclear orphan receptors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6897—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids involving reporter genes operably linked to promoters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Hematology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
- High Energy & Nuclear Physics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
Abstract
(57)【要約】
本発明は化合物の抗−自己免疫、抗−関節炎、抗−腫瘍、メラトニン様及び/またはメラトニン−拮抗活性についてのテストにおける、 RZR/ROR 受容体ファミリーからの受容体またはその機能的断片の使用並びに前記受容体またはその機能的断片を含む受容体リガンド複合体及び上記受容体のリガンドの生産に関する。前記活性(リガンドのスクリーニングのため)について化合物を試験する方法及びそれにより同定された活性化合物も記載されている。
Description
【発明の詳細な説明】
RZR受容体ファミリーを用いるスクリーニング方法
本発明は化合物の抗−自己免疫活性、抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラト
ニン様活性及び/またはメラトニン−拮抗活性についてのテストにおける、 RZR
/ROR 受容体ファミリーからの受容体またはその機能的断片の使用並びに前記受
容体またはその機能的断片を含む受容体リガンド複合体及び上記受容体のリガン
ドの生産に関する。前記アゴニストまたはアンタゴニスト(リガンドのスクリー
ニングのため)について化合物を試験する方法及びそれにより同定された活性化
合物も記載されている。
序 説
レチノイン酸(RA)、1,25−ジヒドロキシビタミンD3(VD)、甲状腺ホルモ
ン(T3)及びステロイドホルモンのような小さい親脂質性物質は転写因子とし
て直接機能する特異的な受容体に結合することにより、脊椎動物及び無脊椎動物
における、多くの発育及び生理学上の過程を調節する。これらのリガンド依存性
転写因子は核受容体スーパーファミリーのメンバーである。
核受容体スーパーファミリーは、いまだにリガンドが同定されておらず、した
がって親のない受容体と言われている構造的に関連するタンパク質も包含する(
O'Malley他「Mol.Endocrinol」6、第1259〜1361頁、1992年)このような親のな
い受容体の例は、ペルオキシソーム−増殖体活性化受容体(PPARs)及び鶏オボ
アルブミン上流プロモーター転写因子(COUP-TFs)である。機能の多様性が大きい
にもかかわらず、 DNAへの結合に含まれる、2つの保護された亜
鉛−指モチーフは、このスーパーファミリーのすべてのメンバーに現れる。
最近、新規受容体ファミリーが、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)方法
により同定された(Becker-Andre他「Biochem.Biophys.Res.Com.」194、第1371
〜1379頁、1993年;Becker-Andre他「Keystone Symposium」1994年2月7〜13日
、ニーメキシコ州 タオス 第 376頁)。 RZR/ RORsはそれらの特異的応答要
素に単量体として結合できるが、それらは特定の結合部位の集団とホモ二量体と
して協同的に相互作用するようである。 RZR/ RORsは構成的なトランス活性化
を示し、異なったアプローチにもかかわらず、 RZR/ROR 受容体ファミリーに関
するかぎり、リガンドは単離されておらず、したがって、 RZR/ RORsはリガン
ドを誘導し得るトランス活性化というよりは構成的なトランス活性化をもたらす
ものと推測されている。
驚くべきことに、今や、メラトニンが RZR/ROR 受容体ファミリーの天然のリ
ガンドであることが発見された。最近かえるの皮膚(Ebisawa他「Proc.Natl.Acad
.Sci.USA」91、第6133〜6137頁、1994年)及び哺乳類の組織(Reppert他「Neuron
」13、第1177〜1185頁、1994年)からクローン化された、メラトニンは膜受容体
のリガンドとしてのみ公知であった。メラトニンは松果腺の主要なホルモンであ
るが、松果体の外の組織でも産生される。それはMSH(メラノトロピン)の薄黒く
する効果に逆行することにより、両生動物の皮膚の色を明るくする。メラトニン
は光周期情報の伝達物質であり、光周期動物における季節的な再生産サイクルの
調節剤である。メラトニンは、温度調節及び神経免疫調節に包含されることも分
かった(Fraschini及びReiter編「Plenum Press N.Y」ロンドン 1991年)。
メラトニンは動物及びヒトにおいて短い半減期を持ち、したがっ
てメラトニンが核の受容体のリガンドであることは驚くべきことである。
さらに驚くべきことに、合成化学物質も RZR/ROR ファミリーの人工リガンド
として同定された。前記化合物は公知であり、抗−自己免疫活性、抗−関節炎活
性及び/または抗−腫瘍活性を示す(EP−A−494047,EP−A−508955,EP−A
−548017,EP−A−548018,CH−511877及びBE−753532)。これらの性質は、生
体内のたとえばワイゼンベルク他の「臨床実験免疫学(Clin.Exp.Immunol.)」78
、第 245頁に従って、ラットにおけるアジュバント関節炎モデル及びラットにお
けるDMBA−腫瘍モデル(Schmidt-Ruppin他「Experentia」29、第 823〜825 頁)
で証明することができる。
これらの化合物及びそれらの医薬として許容し得る塩は、リューマチ型の病気
の治療に価値のある薬理学的性質を有することが公知である。それらの病気は、
特にリューマチ性関節炎、若年性関節炎、強直性脊椎炎及び他のセロネガティブ
脊椎炎、潰瘍性大腸炎及びクローン病、及び同様に反応性関節炎、コラーゲン病
、たとえば深在性エリマトーデス及び強皮症、変性リューマチ病、関節外リュー
マチ並びにパラリューマチ病、たとえば通風、変形性関節症及び骨粗しょう症を
包含する。さらに、この型の化合物は免疫調節及び抗腫瘍活性を有し、したがっ
て、腫瘍の治療に、自己免疫に基づくまたは自己免疫に関係する病気、たとえば
多発性硬化症、橋本甲状腺炎、若年性糖尿病及び乾癬に一般的に投与できる。
これらの化合物が、 RZR/ROR 受容体ファミリーのリガンドとして機能するこ
とは、だれも期待することも予想することもできなかった。観察された抗−自己
免疫活性、抗−関節炎活性及び/又は抗−腫瘍活性は、リガンドの受容体への結
合が、遺伝子における受容体の特異的 DNA領域(いわゆるホルモン応答要素)(細
胞増殖及び/
または細胞分化の調整に必要となる)への親和性を高めることを暗示する。これ
らの応答遺伝子の転写は、リガンド−受容体複合体の結合後、上方に調節するか
、または下方に調節する。この新規な観察に基づき、今や、この受容体ファミリ
ーを、抗−自己免疫活性、抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラトニン様活性及
び/またはメラトニン拮抗活性を有するさらなる化合物(リガンド)のスクリー
ニングに用いることが可能である。
本発明の詳細な記載
このように、本発明は RZR/ROR 受容体ファミリーの受容体またはその機能的
断片を、抗−自己免疫活性、抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラトニン様活性
及び/またはメラトニン−拮抗活性を有する化合物を同定するための試験に用い
ることに関する。
一般に、これらの化合物(リガンド)を、 RZR/ROR 受容体ファミリーに関し
て、アゴニスト活性及びアンタゴニスト活性を試験することができる。
RZR/ROR 受容体ファミリーは、いくつかのドメインからなり、各ドメインが
特異的な機能を有する核受容体を包含する。核受容体は一般に、リガンドの受容
体への結合後、転写の抑制または活性化を経て作用する。 RZR/ROR 受容体ファ
ミリーは、特定の種類のリガンドに対して親和性を示す。 RZR/ROR ファミリー
の個々のメンバーは、たとえば、前記受容体をコードする共通の DNAの代替的な
スプライシングにより産生される。
これらの受容体の機能的断片は、たとえば、リガンドの選択性の点では同じ性
質を有する構成体、たとえばリガンド結合ドメインと、 RZR/ROR 受容体ファミ
リーの受容体の DNA結合ドメインを含むが、他のドメインを含まないか、または
RZR/ROR に対して、いく
つかの特殊な性質を提出する他のタンパク質断片を挿入された構成物である。同
様に、リガンド結合ドメインと、リガンドがたとえば他の DNA結合ドメインとし
て、そこに結合されているか否かの決定を可能にする、他のドメインとの組み合
せにより構成される断片またはリガンド結合ドメインが釣り(fishing)リガンド
についてスペーサー基を介して、固体担体と結合している構造体を含む。
機能的リガンド結合ドメインを含む RZR/RORs断片をまた、たとえば蛍光、化
学発光もしくは放射性の基として容易に同定し得るか、またはアビジン、ビオチ
ン、受容体酵素もしくはNMR,IR,UV,NMR,MS及び ELISAのような分光法もしく
は免疫法によって検出し得る任意の基と連結し得る1または複数の基を用いて標
識することができる。この型の構成体はウォルター他「TIBTECH」11、第 247〜2
54 頁(1993年)の例に記載されている化合物ライブラリーのスクリーニングに
用い得る。
RZR/ROR 受容体ファミリーの最も好ましいメンバーは、 RZR/ RORα、 RZR
/ RORβまたは RZR/ RORγである(Hirose他「Biochem.Biophys.Res.Comn.」
205、第1976〜1983頁、1994年)。 RZR/ RORsは単量体またはホモ二量体及びヘ
テロ二量体を包含する二量体として用い得る。RORα1(Giguere他「Genes and
Development」8、第 538〜553 頁、1994年)のようなスプライス変異体も可能
である。
これまで公知の、そして上記に関する合成リガンドは自己免疫、リューマチ及
び/または腫瘍型の病気の治療で、薬理学的に有用な性質を有する。
本発明の他の目的は抗−自己免疫活性、抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラ
トニン様活性及び/またはメラトニン−拮抗活性について化合物を試験する方法
を提供し、該方法は、
a) RZR/ROR 受容体ファミリーまたはその機能的断片をコードする発現カセッ
トを用いる適当な宿主のトランスフェクション、
b)上記受容体についての1または複数の応答要素及びレポーター遺伝子の結合
及びこの構成物を用いる宿主の共トランスフェクション、
c)試験される化合物の添加、
d)レポーター遺伝子の発現の測定、
を含む。
RZR/ROR 受容体ファミリーの受容体またはその機能的断片は上に定義されて
いる。
好ましくは、宿主は内在性の RZR/ROR がないか、または RZR/ROR 受容体フ
ァミリーの受容体もしくはその機能的断片をコードする発現カセットと共にトラ
ンスフェクトされる前に、一般に RZR/ROR がないように修飾される。好ましい
宿主は、たとえば、細菌、たとえば酵母のような真菌、昆虫または哺乳類の細胞
である。特に好ましいのは、E.coli、サッカロミセス セレビシアエ及びショウ
ジョウバエの細胞である。
RZR/ROR 受容体ファミリーの受容体またはその機能的断片のための発現カセ
ットは、通常、 RZR/ROR 受容体ファミリーの受容体またはその機能的断片をコ
ードする DNA配列及び転写終了シグナルを含有する DNA配列に作用可能に結合さ
れたプロモーターを含有する。
適当なプロモーター及びターミネーター配列は好ましくは前記宿主中で活性で
あるように選択され、当業界で良く知られている。それらは、構造遺伝子及び任
意にマーカー基及び他の遺伝子工学における標準的技術によって好都合な要素と
結合し得る。
非限定な例は、TRP1遺伝子、 ADHIもしくは ADHII遺伝子、酸性
ホスファターゼ(PHO5)遺伝子、CUP1遺伝子イソシトクロムC遺伝子のプロモー
ターまたは解糖酵素をコードする遺伝子、たとえば、TDH3、グリセルアルデヒド
−3−ホスフェート脱水素酵素(GAPDH)、 GAPDHの短縮された変形(GAPFL)、3−
ホスホグリセリン酸 キナーゼ(PGK)、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸 脱炭酸酵
素、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−6−ホスフェート異性化酵素、3−
ホスホグリセリン酸ムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースホスフェート異
性化酵素、ホスホグルコース異性化酵素、インベルターゼ及びグルコキナーゼ遺
伝子のプロモーターまたはaもしくはα因子をコードする酵母の交配フェロモン
遺伝子のプロモーターである。
たとえばプラスミド経由またはゲノムへの組込みのような、発現カセットの挿
入のためのトランスフェクションプロトコルは周知であり、 RZR/ROR ファミリ
ーの受容体またはその機能的断片を含むカセットに容易に適合し得る。
応答要素は公知であり、通常、試験において用いられる RZR/ROR の DNA結合
ドメインの特異性に従って選択する。 RZR/ROR 受容体ファミリーについての適
当な応答要素はたとえば DNA配列 T(A/G)GGTCAを有するコアの半(half)部位を
含む。
RZR/ RORαに適当な応答要素としては、たとえば NANNT(A/G)GGTCA が好ま
しい。
応答要素は通常適当な制限部位を有する短い断片を経由して挿入される。すな
わち、たとえば、レポーター遺伝子の中または近くに組込むために、たとえば、
適当な制限酵素を有するレポーター遺伝子を切断し、応答要素を挿入するという
ような慣用手段を用いて、適当な末端を有する DNA合成機上に合成される。
用語「レポーター遺伝子の中または近くに」は、受容体の結合時
にレポーター遺伝子の転写に影響を与えることができる位置を表わす。 RZR/ R
ORsの転写活性化特性により、適当なリガンドがリガンド結合ドメインに結合し
たなら、転写を調節するために応答要素は好ましくはレポーター遺伝子の転写活
性化部位のトランスまたはシスに挿入される。
レポーター遺伝子の発現は、たとえば、産生タンパク質、酵素活性もしくは細
胞増殖の量のような、転写レベルまたは翻訳レベルで測定し得る。適当なレポー
ター遺伝子は当業界で良く知られている。例としてはクロラムフェニコール ア
セチルトランスフェラーゼ(CAT)、β−D−ガラクトシダーゼ(lacZ)または細
菌ハイブリッド ルシフェラーゼ(luxAB)である。
リガンドの活性について化合物をスクリーニングする異なったアプローチは、
大量の異なった化合物からなるライブラリー(化合物ライブラリー)を生成させ
ることである。受容体、たとえば容易に検出できる基(上記参照)を有する RZR
/ RORsまたはその断片をこのライブラリーと共にインキュベートし、受容体に
結合する化合物を同定する。化合物ライブラリーの構築は、広く文献、たとえば
ユング(Jung)他「アンゲバンデ ヘミー(Angewandte Chemie)」104、第 375〜
391 頁(1992年)に及び1ビーズ1配列ライブラリーについてはケール(Kerr)
他「米国化学会誌(J.Am.Chem.Soc.)」115、第2529〜2531頁に記載されている
。
さらなる本発明の態様は、受容体リガンド複合体の生産方法であり、 RZR/RO
R 受容体ファミリーからの受容体またはその機能的断片と、抗−自己免疫活性、
抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラトニン様活性及び/またはメラトニン拮抗
活性を示す化合物とインキュベートすることを含む。
RZR/ROR 受容体ファミリーからの受容体またはその機能的断片
は上記のように、たとえば適当な宿主中における発現または自然環
m.Biophys.Res.Com.」194、第1371〜1379頁、1993年)。
インキュベーションの方法は、受容体を供給する方法に依存する。たとえば、
受容体が上記のように適当な宿主中の発現により供給されるなら、試験化合物を
細胞懸濁液に直接添加することができ、化合物が細胞膜を通過できなければ、適
当な担体を加えるか、細胞のない系を用いなければならない。
化合物ライブラリーのスクリーニングの場合、受容体を通常、前記ライブラリ
ーを含む溶液または懸濁液に加える。受容体が、ビーズ、小桿、箔またはセルロ
ース紙のような不溶性担体に固定されるなら、化合物ライブラリーを受容体に加
える、たとえば固定された受容体を含むカラムに受容体を加えることも可能であ
る。受容体(リガンド)に結合する化合物の同定は化合物及び/または受容体が
どのように供給されるかに依存する。細胞内に発現され、レポーター遺伝子の調
節配列に結合する受容体の場合、化合物はレポーター遺伝子の転写または翻訳生
成物により同定でき、化合物ライブラリー、たとえば1ビーズ1配列ライブラリ
ーをスクリーニングする場合、結合された受容体を有するビーズを単離し、ビー
ズに連結するリガンドを同定できる。
本発明のさらなる部分は、上記のように RZR/ROR 受容体ファミリーからの受
容体またはその機能的断片に結合すると同定された新規なリガンドを、治療方法
、特に自己免疫疾患、関節炎疾患、腫瘍、またはメラトニンまたはメラトニン
アゴニストもしくはアンタゴニストが通常適用される病気及びより好ましくは自
己免疫疾患、関節炎疾患及び/または腫瘍に用いることに関する。
これまで用い得る RZR/ROR 受容体で、メラトニン−拮抗特性を
有するリガンドはないので、それらの薬理学上のプロフィール及び治療の可能性
の価値は現在未知である。
RZR/ROR 受容体の適当なリガンドは、たとえばEP−585206に記載したように
、たとえば、メラトニンまたはメラトニン誘導体である。
RZR/ROR 受容体ファミリーに結合する、さらなる化合物は、たとえば、式(
1)〜(17)のものである。
式中、R1及びR5はC3〜C5アルキル、C3〜C5アルケ−2−エン−1−イル
またはC3〜C5アルキ−2−イン−1−イル、及び特にアリル、メタリル及びプ
ロピニルであり、R2及びR6はH、C1〜C5−アルキル、C3〜C5アルケ−2−
エン−1−イル、C3〜C5アルキ−2−イン−1−イル、アリール、アリール低
級アルキル、飽和もしくは不飽和複素環低級アルキルまたは低級アルコキシカル
ボニル低級アルキル;R3及びR4は各々他と独立にH、低級アルキルまたはいっ
しょになって低級アルキリデンを生成し、XはOまたはSであるか、または下記
式の化合物であり、
式中、R34及びR35は他と独立にH、メトキシまたはF、R36はHまたはメトキ
シカルボニル、R37はOまたはS、R38はH、C1〜C6アルキル、シクロプロピ
ル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、Br,Cl,FもしくはIで
置換されたC1〜C6アルキル、フェニル、ハロゲン置換もしくは非置換C1〜C3
アルキル−ベンゼン、インドリル、モルホリノ、メチルモルホリノ、アミノ、C1
〜C4アルキルで置換されたアミノ、または1−(2′,3′,4′−トリメト
キシベンジル)ピペラジン−メチル、2−ピロリジノンであり、R39はCまたは
N原子であり、R41はCもしくはN原子またはカルボニル基、R42はC,Nもし
くはS原子またはビニレン基であり、R40及びR41の間の結合は、R41がカルボ
ニル基またはR40がN原子であるなら単結合という条件で単結合または二重結合
であり得る。
生体内で代謝されて上記化合物を生じるプロドラッグも包含される。
これらの化合物の合成方法及びこれらの化合物の抗−自己免疫活性、抗−関節
炎活性及び/または抗−腫瘍活性についての例は、たとえば、EP-447285,EP−
A−494047,EP−506539,EP−A−508955,EP−527687,EP−530087,EP−A−
548017,EP−A−548018,EP−562956,EP−578620,EP−A−585206,EP−5910
57,US−5283343, US−5206377,デュプルー(Depreux)他(「J.Med.Chem.」37
、第3231〜3239頁、1994年)、ガラ(Garrat)及びフォンホフ(
Vonhoff)(「Bioorganic & Medicinal Lett.」4、第1559〜1565頁、1994年)
及びコピンガ(Copinga)他(「J.Med.Chem.」36、第2819〜2898頁、1993年)に
示されている。適当な化合物のさらなる例は、
式中、R8=Hで、R9=Brで、R7=メチル、または、
R8=Hで、R9=Iで、R7=メチル、または、
R8=Clで、R9=Hで、R7=メチル、または、
R8=Hで、R9=メチルで、R7=クロロプロピル、または、
式中、R10=CHで、R11=SもしくはO、または、
R10=OもしくはNHで、R11=NH、または、
式中、R12=OもしくはSで、R13=NHCH2CH2CH3、または、
R12=Oで、R13=メチル、または、
式中、R14はOもしくはS、または、
式中、R15はOもしくはS、または、
式中、R16はメチル、エチルもしくはクロロメチル、または、
式中、R17はメチル、エチルもしくはクロロメチル、または、
式中、R20はNH,CH=CH,OもしくはSで、R18はOもしくはSで、R19はH、
メチル、エチルもしくはプロピル、または、
式中、R21はメトキシもしくはHで、R22はNH,CH=CH,SもしくはOでR23は
メチル、シクロプロピルもしくはシクロブチル、または、
式中、R24はHもしくはメトキシで、R25はメチル、エチル、プロピル、CF3,C
H2Br,CHBrCH2CH3、シクロプロピルもしくはシクロブチル、または、
式中、R27はメトキシで、R28はHもしくはCOOCH3で、R29はH、メチルもしく
はFで、R30はH、メチル、エチル、ブチル、プロピル、ペンチル、ヘキシル、
イソプロピル、CH=CHCH3、シクロヘキシル、CH2Br,CH2I,CF3,C3H6Cl、フェ
ニル、3,5−ジクロロベンゼン、2−インドリル、トルエン、CH(CH5H5)2,(C
H2)2C6H5,(C
H2)3C6H5、メチル−モルホリノ、1−(2′,3′,4′−トリメトキシ−ベン
ジル)ピペラジン−メチル、2−ピロリジノン、SO2CH3、または、
式中、R31はNH,OもしくはSで、R32はHもしくはFで、R33はプロピル、ブ
チル、CH2I,CF3、もしくはメチル、または、
式中、R7=HもしくC1〜C3アルキルで、R8=C1〜C6アルキル、アリール、
ヒドロキシアリールもしくはハロゲンでR9=C1〜C5アルキルもしくはハロゲ
ン、または、
式中、R10=Hもしくはメトキシで、R11=C1〜C3アルキル、アリール、アリ
ールアルキルもしくはハロゲン置換C1〜C3アルキルである化合物である。
特に言及されたものは次の式(18)〜(32)の化合物である。
好ましくは、化合物(1)〜(3)、より好ましくは(4)〜(17)、最も好
ましくは(4)〜(10)及び(18)〜(32)のようなメラトニン−アンタゴニス
トまたはアゴニストを RZR/ROR 受容体ファミリーの活性の調節のために用いる
こと及び1または複数のこれらの化合物を RZR/ROR 受容体ファミリーのアンタ
ゴニストまたはアゴニストとして用いることも本発明の範囲に含まれる。例 例1.発現系の構築
活性化を誘導されたリガンドについての試験は、本質的にカールバーグ(Carl
berg)他の「ネイチャー」361、第 657〜660 頁に記載されているように実施さ
れる。
RZR/ROR についての応答要素は、CATレポータープラスミド pBLCAT2中のtkプ
ロモーターの上流のXbal部位中にXbal張り出し(overhang)を有する二本鎖オリ
ゴヌクレオチドとしてクローン化される(Luckow他「Nucleic Acid Res.」15、
第5490頁、1987年)。この挿入物は自動 DNA合成機上で合成され、応答要素につ
いての配列の上の鎖は配列番号1として示されている。
ショウジョウバエ3L−3細胞(60mmペトリ皿当り2×106、「J.
Embryol.Expl.Morphol.」27、第353〜365頁)を15%の炭で処理したウシ胎児血
清を補足したシュナイダー培地(Gibco)中で1夜増殖させる。トランスフェクシ
ョンのために、リポソームを、5μgのレポータープラスミド(応答要素挿入物
を有する)、3μgの対照標準プラスミド(pRSVβ−gal)及び1μgの RZR/ RO
Rα発現ベクター(カールバーグ他「ネイチャー」361、第 657〜660 頁、1993年
)と11μgのN−(1−(2,3−ジオレオリルオキシ)プロピル)−N,N,
N−トリメチル アンモニウム メチル硫酸塩(Boeringer-Mannheim)を総容積10
0μlで室温で15分間のインキュベートにより生成させた。0.9mlのシュナイダー
培地で希釈後、リポソームを細胞に加える。例2:選択性の試験
関節炎アジュバント(表1参照)中で活性または不活性と知られている試験化
合物(エタノールに溶解、試験濃度1μM、表1参照)を RZRαとのトランスフ
ェクション後8時間で細胞に加える。40時間後、 CAT活性の測定のために細胞を
収集する(CATアッセイ、遺伝子工学の標準技術、たとえばGorman他「Molec.Cel
.Biol.」2、第1044〜1051頁(1982年)参照)。表1の値は、純粋な溶媒(エ
タノール)の添加と比較した、3つの別個の実験で測定された CAT活性の平均活
性化を表わす。
本発明の化合物の特異的な作用を示すために、応答要素として配列番号2及び
3を用いて、ビタミンD3受容体(VDR)及びレチノイン酸受容体(RAR及びRXR)と並
行して実験を行う(カールバーグ他「ネイチャー」361、第 657〜660 頁、1993
年)。
これは、 RZR/ RORαの応答は特定のクラスの化合物に特異的であることを明
確に表わしている。例3:適用量応答試験
種々の量の試験化合物を、例2に記載されたように、表2に記載の化合物(3)
,(4),(6)またはメラトニン、 RZR/ RORα及び配列番号1を含有する試験系
に加える(表2参照)。
この例は、ナノモル範囲で適用した時、 RZR/ RORα受容体に対する、化合物
3,4,6及びメラトニンの高親和性を表わしている。
RZR/ RORαまたは RZRβのいずれかを用いる供試化合物の特異性(表1)及
び親和性(表2)は、同等であった。例4:認識部位の試験
例2に記載された試験を RZR/ROR 及び次の応答要素に化合物(3)を用いて
繰り返す。
溶媒と比較された CAT活性の増加(例1参照)を表3に示す。
この例は、応答は応答要素中の特定の配列に特異的であることを表わしている
。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 FI
A61K 31/40 ABB 9454−4C A61K 31/40 ABB
ADU 9454−4C ADU
AED 9454−4C AED
31/415 9454−4C 31/415
31/42 ABE 9454−4C 31/42 ABE
31/535 ABG 9454−4C 31/535 ABG
45/00 8615−4C 45/00
C07D 235/08 9551−4C C07D 235/08
C07K 14/705 9356−4H C07K 14/705
C12Q 1/68 7823−4B C12Q 1/68 A
// C07D 209/14 9159−4C C07D 209/14
209/30 9159−4C 209/30
209/86 9159−4C 209/86
261/20 9639−4C 261/20
263/58 9639−4C 263/58
265/30 9639−4C 265/30
265/36 9639−4C 265/36
277/50 9283−4C 277/50
277/68 9283−4C 277/68
279/06 9283−4C 279/06
307/79 7822−4C 307/79
471/04 103 9283−4C 471/04 103H
(81)指定国 EP(AT,BE,CH,DE,
DK,ES,FR,GB,GR,IE,IT,LU,M
C,NL,PT,SE),OA(BF,BJ,CF,CG
,CI,CM,GA,GN,ML,MR,NE,SN,
TD,TG),AP(KE,MW,SD,SZ,UG),
AM,AU,BB,BG,BR,BY,CA,CN,C
Z,EE,FI,GE,HU,JP,KG,KP,KR
,KZ,LK,LR,LT,LV,MD,MG,MN,
MX,NO,NZ,PL,RO,RU,SG,SI,S
K,TJ,TT,UA,US,UZ,VN
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.抗−自己免疫活性、抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラトニン様活性及 び/またはメラトニン拮抗活性を有する化合物を同定する試験における、 RZR/ ROR 受容体ファミリーの受容体またはその機能的断片の使用。 2.受容体が RZR/ RORα, RZR/ RORβまたは RZR/ RORγである請求項1 に記載の受容体の使用。 3.受容体が RZR/ RORαである請求項1に記載の受容体の使用。 4.受容体が単量体または二量体である請求項1に記載の受容体の使用。 5.機能的断片が機能的リガンド結合ドメインを包含する請求項1に記載の受 容体の断片の使用。 6.容易に同定し得る1または複数の基により標識されている請求項1に記載 の受容体の断片の使用。 7.化合物を抗−自己免疫活性、抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラトニン 様活性及び/またはメラトニン拮抗活性について試験する方法であって、 a)請求項1に記載の受容体をコードする発現カセットを用いる適当な宿主のト ランスフェクション、 b)前記受容体のための1または複数の応答要素及びレポーター遺伝子の結合並 びにこの構成物を用いる宿主の共トランスフェクション、 c)試験される化合物の添加、 d)レポーター遺伝子の発現の測定、 を含む方法。 8. RZR/ROR が RZR/ RORα, RZR/ RORβまたは RZR/ RORγである請求 項7に記載の方法。 9. RZR/ROR が RZR/ RORαである請求項7に記載の方法。 10.トランスフェクトされていない宿主が内因性 RZR/ROR を欠いている請求 項7に記載の方法。 11.宿主が細菌細胞、真菌細胞、昆虫細胞または哺乳類の細胞である請求項7 に記載の方法。 12.宿主が酵母細胞またはショウジョウバエ細胞である請求項7に記載の方法 。 13.応答要素が RZR/ROR に特異的である請求項7に記載の方法。 14.応答要素が DNA配列 T(A/G)GGTCA を含む請求項7に記載の方法。 15.レポーター遺伝子の発現が転写レベルまたは翻訳レベルで測定し得る請求 項7に記載の方法。 16.レポーター遺伝子がクロラムフェニコール アセチルトランスフェラーゼ (CAT)、lacZ及び細菌ハイブリッド ルシフェラーゼ(luxAB)からなる群から選択 される請求項7に記載の方法。 17.化合物を、抗−自己免疫活性、抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラトニ ン様活性及び/またはメラトニン拮抗活性について試験する方法であって、化合 物ライブラリーと請求項1に記載の受容体とをインキュベートすること及び前記 受容体に結合する化合物を選択することを含む方法。 18.受容体リガンド複合体の生産方法であって、請求項1に記載の受容体と、 抗−自己免疫活性、抗−関節炎活性、抗−腫瘍活性、メラトニン様活性及び/ま たはメラトニン拮抗活性を示す化合物とをインキュベートすることを含む方法。 19.受容体が RZR/ RORα, RZR/ RORβまたは RZR/ RORγである請求項18 に記載の方法。 20.受容体が RZR/ RORαである請求項18に記載の方法。 21.受容体が単量体または二量体である請求項18に記載の方法。 22.受容体が機能的リガンド結合ドメインを包含する断片である請求項18に記 載の方法。 23.断片が容易に同定し得る基により標識されている請求項22に記載の方法。 24. RZR/ROR 受容体ファミリーの活性の調節のためのメラトニン アンタゴ ニストまたはメラトニン アゴニストの使用。 25.式(1),(2)または(3)に記載の化合物の RZR/ROR 受容体ファミリ ーの活性の調節のための使用。 (式中、R1及びR5は、C3〜C5アルキル、C3〜C5アルケ−2−エン−1−イ ルまたはC3〜C5アルキ−2−イン−1−イルで、特にアリル、メタリルまたは プロピニル、 R2及びR6は、H、C1〜C5アルキル、C3〜C5アルケ−2−エン−1−イル、 C3〜C5アルキ−2−イン−1−イル、アリール、アリール低級アルキル、飽和 もしくは不飽和複素環低級アルキルまたは低級アルコキシカルボニル低級アルキ ル、 R3及びR4は各々他と独立に、H、低級アルキルまたはいっしょになって低級ア ルキリデンを生成する、 XはOまたはS、 R34及びR35は他と独立に、H、メトキシまたはF、 R36はHまたはメトキシカルボニル、 R37はOまたはS、 R38はH、C1〜C6アルキル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル 、シクロヘキシル、Br,Cl,FもしくはIで置換されたC1〜C6アルキル、フェ ニル、ハロゲン置換もしくは非置換C1〜C3アルキルベンゼン、インドリル、モ ルホリノ、メチルモルホリノ、アミノ、C1〜C4アルキルで置換されたアミノま たは1−(2′,3′,4′−トリメトキシベンジル)ピペラジン−メチル、2 −ピロリジノン、 R39はH、メチルまたはF、 R40はCまたはN原子、 R41はCもしくはN原子またはカルボニル基、 R42はC,NもしくはS原子またはビニレン基で、 R40及びR41の間の結合は、R41がカルボニル基であるか、R40がN原子である なら単結合であるという条件で、単結合または二重結合であり得る。) 26. RZR/ROR 受容体ファミリーのアンタゴニストまたはアゴニストとしての 請求項24に記載の化合物の使用。 27. RZR/ROR 受容体ファミリーからの受容体またはその機能的 断片に結合すると同定されたリガンドの治療方法における使用。 28.自己免疫疾患、関節炎疾患及び/または腫瘍の治療方法における請求項26 に記載のリガンドの使用。 29.リガンドがメラトニンまたはメラトニン誘導体である請求項26に記載の使 用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP94810196 | 1994-03-30 | ||
DE94810196.9 | 1994-03-30 | ||
PCT/EP1995/001017 WO1995027202A1 (en) | 1994-03-30 | 1995-03-18 | Screening method using the rzr receptor family |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH09511334A true JPH09511334A (ja) | 1997-11-11 |
Family
ID=8218235
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP7525376A Pending JPH09511334A (ja) | 1994-03-30 | 1995-03-18 | Rzr受容体ファミリーを用いるスクリーニング方法 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5958683A (ja) |
EP (1) | EP0753147A1 (ja) |
JP (1) | JPH09511334A (ja) |
AU (1) | AU2109695A (ja) |
CA (1) | CA2182700A1 (ja) |
FI (1) | FI963028A (ja) |
HU (1) | HUT75128A (ja) |
WO (1) | WO1995027202A1 (ja) |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2746313B1 (fr) * | 1996-03-22 | 1998-04-17 | Adir | Utilisation de la melatonine et des ligands melatoninergiques pour l'obtention de compositions pharmaceutiques destinees a la prevention et au traitement du diabete et des complications diabetiques |
EP0835660A1 (en) * | 1996-10-14 | 1998-04-15 | Gaston Edmond Filomena Merckx | Products containing methylcobalamin for the treatment of multiple sclerosis or other demyelinating conditions |
FR2776388B1 (fr) * | 1998-03-20 | 2006-04-28 | Lipha | Utilisation de recepteurs de la famille ror pour le criblage de substances utiles pour le traitement de l'atherosclerose |
US6348497B1 (en) | 1998-06-02 | 2002-02-19 | Arthromics Plc | Compounds which interact with the thyroid hormone receptor for the treatment of fibrotic disease |
GB9924057D0 (en) * | 1999-10-11 | 1999-12-15 | Novartis Ag | Organic compounds |
FR2813315B1 (fr) | 2000-08-23 | 2002-10-18 | Genfit S A | Procede d'identification de substances utiles pour le traitement de l'inflammation mettant en oeuvre l'element de reponse du recepteur ror du gene ikbalpha |
WO2003091700A2 (en) * | 2002-03-26 | 2003-11-06 | Centocor, Inc. | Epitope mapping using nuclear magnetic resonance |
JP2006502970A (ja) * | 2002-04-29 | 2006-01-26 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | レチノイン酸関連オーファンレセプターアルファ(ror−アルファ)のリガンド結合ドメインの結晶構造 |
WO2004047855A2 (en) * | 2002-11-27 | 2004-06-10 | Develogen Aktiengesellschaft Fur Entwicklungsbiologische Forschung | Proteins involved in the regulation of energy homeostasis |
AU2003302741A1 (en) * | 2002-12-10 | 2004-06-30 | The Regents Of The University Of California | A method for creating nuclear receptor activity modulating pharmaceuticals |
US20050186138A1 (en) * | 2003-10-16 | 2005-08-25 | Irm, Llc | Methods and compositions for modulating circadian rhythm |
WO2014026329A1 (en) * | 2012-08-15 | 2014-02-20 | Merck Sharp & Dohme Corp. | N-alkylated indole and indazole compounds as rorgammat inhibitors and uses thereof |
WO2014026328A1 (en) * | 2012-08-15 | 2014-02-20 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 3-cyclohexenyl substituted indole and indazole compounds as rorgammat inhibitors and uses thereof |
Family Cites Families (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH459216A (de) * | 1965-10-29 | 1968-07-15 | Geigy Ag J R | Verfahren zur Herstellung von neuen Azinen |
CH511877A (de) * | 1969-07-17 | 1971-08-31 | Ciba Geigy Ag | Verfahren zur Herstellung eines neuen Thiosemicarbazons |
DE2632747A1 (de) * | 1975-08-06 | 1977-02-24 | Ciba Geigy Ag | Azine von sechs- und siebengliedrigen thiazaheterocyclen |
ATE18044T1 (de) * | 1982-01-22 | 1986-03-15 | Ciba Geigy Ag | Substituierte thiazolidinylester von mineralsaeuren. |
US4771056A (en) * | 1985-08-29 | 1988-09-13 | Roman Rozencwaig | Method of medical treatment with serotonin antagonists |
US5283343A (en) * | 1987-08-17 | 1994-02-01 | Whitby Research, Inc. | 2-aryl substituted N-acetyltryptamines and process of preparing such |
US4981784A (en) * | 1987-12-02 | 1991-01-01 | The Salk Institute For Biological Studies | Retinoic acid receptor method |
US5151446A (en) * | 1989-09-25 | 1992-09-29 | Northwestern University | Substituted 2-amidotetralins as melatonin agonists and antagonists |
US6492137B1 (en) * | 1989-11-16 | 2002-12-10 | The Salk Institute For Biological Studies | Response element compositions and assays employing same |
FR2658818B1 (fr) * | 1990-02-27 | 1993-12-31 | Adir Cie | Nouveaux derives a structure naphtalenique, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
DK0483077T3 (da) * | 1990-09-28 | 1996-04-15 | I F L O S A S Di Giorgio E Ald | Fremgangsmåde til syntese af et kontraceptivt og menstruationscyklus-kontrollerende lægemiddel med onkostatiske, antikinetosiske, præventive og terapeutiske egenskaber til behandling af brysttumorer og melanomer |
US5177091A (en) * | 1990-12-06 | 1993-01-05 | Ciba-Geigy Corporation | Use of carbazones as novel active ingredients in medicaments |
EP0575528A4 (en) * | 1991-03-18 | 1994-09-14 | Salk Inst For Biological Studi | Response element compositions and assays employing same |
FR2674524B1 (fr) * | 1991-03-25 | 1993-05-21 | Adir | Nouveaux amides alkyl heterocycliques, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
AU658175B2 (en) * | 1991-04-12 | 1995-04-06 | Novartis Ag | Use of 2-iminothiazolidin-4-one derivatives as novel pharmaceutical active ingredients |
FR2680366B1 (fr) * | 1991-08-13 | 1995-01-20 | Adir | Nouveaux derives d'arylethylamines, leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
FR2680507B1 (fr) * | 1991-08-23 | 1993-10-08 | Adir Cie | Nouvelles naphtylethylurees et naphtylethylthiourees, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
US5206377A (en) * | 1991-12-05 | 1993-04-27 | Whitby Research, Inc. | Compounds useful as antiproliferative agents |
EP0548017A1 (de) * | 1991-12-18 | 1993-06-23 | Ciba-Geigy Ag | Neue Thiazole |
TW211005B (ja) * | 1991-12-18 | 1993-08-11 | Ciba Geigy Ag | |
FR2689124A1 (fr) * | 1992-03-27 | 1993-10-01 | Adir | Nouvelles naphtylalkylamines, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
SG41955A1 (en) * | 1992-04-07 | 1997-08-15 | Neurim Pharma 1991 | Use of melatonin for the manufacture of a medicament for the treatment of benign prostatic hyperplasia |
IT1254995B (it) * | 1992-06-24 | 1995-10-11 | Farmaco contenente melatonina e/o agonisti, con somministrazione particolarmente efficace nelle patologie che interferiscono con i ritmi circandiani | |
IT1255199B (it) * | 1992-07-01 | 1995-10-20 | Franco Fraschini | Farmaco sintetizzato analogo della melatonina particolarmente efficacenelle patologie che interferiscono con i ritmi circadiani |
FR2696453B1 (fr) * | 1992-10-02 | 1994-12-23 | Adir | Nouveaux arylalkyl(thio)amides, leur procédé de préparation, et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
US5403851A (en) * | 1994-04-05 | 1995-04-04 | Interneuron Pharmaceuticals, Inc. | Substituted tryptamines, phenalkylamines and related compounds |
-
1995
- 1995-03-18 US US08/696,900 patent/US5958683A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-03-18 JP JP7525376A patent/JPH09511334A/ja active Pending
- 1995-03-18 AU AU21096/95A patent/AU2109695A/en not_active Abandoned
- 1995-03-18 WO PCT/EP1995/001017 patent/WO1995027202A1/en not_active Application Discontinuation
- 1995-03-18 CA CA002182700A patent/CA2182700A1/en not_active Abandoned
- 1995-03-18 EP EP95930315A patent/EP0753147A1/en not_active Withdrawn
- 1995-03-18 HU HU9602670A patent/HUT75128A/hu unknown
-
1996
- 1996-07-31 FI FI963028A patent/FI963028A/fi unknown
-
1999
- 1999-06-29 US US09/342,479 patent/US6218359B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
MX9603966A (es) | 1997-12-31 |
AU2109695A (en) | 1995-10-23 |
US6218359B1 (en) | 2001-04-17 |
FI963028A (fi) | 1996-09-27 |
HUT75128A (en) | 1997-04-28 |
EP0753147A1 (en) | 1997-01-15 |
CA2182700A1 (en) | 1995-10-12 |
HU9602670D0 (en) | 1996-11-28 |
FI963028A0 (fi) | 1996-07-31 |
WO1995027202A1 (en) | 1995-10-12 |
US5958683A (en) | 1999-09-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPH09511334A (ja) | Rzr受容体ファミリーを用いるスクリーニング方法 | |
Hedvat et al. | The isolation and characterization of MINOR, a novel mitogen-inducible nuclear orphan receptor. | |
JPH11514873A (ja) | 新規なヘモポエチン受容体およびそれをコードする遺伝子配列 | |
JP2001502183A (ja) | サイトカインに対する細胞の応答性を調節することができる治療薬および診断薬 | |
Finn et al. | Hormone-receptor studies with avidin and biotinylinsulin-avidin complexes. | |
JP2007523166A (ja) | Hm74の調節剤としてのフロセミド誘導体および炎症を処置するためのそれらの使用 | |
Stephani et al. | Nerve growth factor (NGF) in serum: Evaluation of serum NGF level with a sensitive bioassay employing embryonic sensory neurons | |
JPH11501515A (ja) | ニューロン制限サイレンサー因子蛋白質 | |
EP1235934B1 (en) | Screening method for candidate drugs | |
JP4468361B2 (ja) | 新規創薬ターゲットならびにこれに作用する医薬 | |
WO2004039773A2 (en) | Coumpounds modulating the activity of gapdh and/or iamt | |
US8058009B2 (en) | Target protein and target gene in drug designing and screening method | |
CA2403307A1 (en) | Substituted 2-cyclohexyl-4-phenyl-1h-imidazole derivatives | |
US5849514A (en) | Method of identifying agents that modulate UCP2 promoter activity | |
JP2001514496A (ja) | ヒトカルシウムチャンネルアルファ1サブユニット及び関連するプローブ,細胞系及び方法 | |
JPH11503308A (ja) | ヒトstat4 | |
US6576444B2 (en) | IRAK3 polynucleotides | |
EP1121457B1 (en) | Use of socs-2 or cis to screen for compounds enhancing growth hormone effect | |
JP4558045B2 (ja) | アレルギー疾患の治療に有用な化合物をスクリーニングする方法 | |
Hosoda et al. | NSP-C contributes to the upregulation of CLOCK/BMAL1-mediated transcription | |
EP1077219A1 (en) | Transcriptional regulatory factor | |
AU9244798A (en) | Screening method using the RZR receptor family | |
JP2003528599A (ja) | Gタンパク質共役レセプター | |
JP4527428B2 (ja) | メタボリックシンドロームの治療薬成分のスクリーニング方法と、メタボリックシンドロームの診断方法 | |
Sievert et al. | Specific derivatization of the vesicle monoamine transporter with novel carrier-free radioiodinated reserpine and tetrabenazine photoaffinity labels |