JPH092966A - ボタンピより得られるアミラーゼ阻害物質及びそれを含有するダイエット食品 - Google Patents
ボタンピより得られるアミラーゼ阻害物質及びそれを含有するダイエット食品Info
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- JPH092966A JPH092966A JP7153052A JP15305295A JPH092966A JP H092966 A JPH092966 A JP H092966A JP 7153052 A JP7153052 A JP 7153052A JP 15305295 A JP15305295 A JP 15305295A JP H092966 A JPH092966 A JP H092966A
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- amylase inhibitor
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Abstract
(57)【要約】
【構成】ボタンピを水、極性溶媒或いはそれらの混合溶
媒より抽出して得られるα−アミラーゼ阻害物質。それ
を含有するダイエット食品。 【効果】安全性及び有効性に優れ、体内の糖質の供給を
抑制するために肥満や糖尿病の予防・治療に有用であ
る。
媒より抽出して得られるα−アミラーゼ阻害物質。それ
を含有するダイエット食品。 【効果】安全性及び有効性に優れ、体内の糖質の供給を
抑制するために肥満や糖尿病の予防・治療に有用であ
る。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、糖質分解酵素であるア
ミラーゼ阻害物質、及びそれを含有するダイエット食品
に関する。
ミラーゼ阻害物質、及びそれを含有するダイエット食品
に関する。
【０００２】
【従来の技術】アミラーゼは、デンプン、グリコーゲン
等のα−１、４グルコシド結合を加水分解する酵素であ
り、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ及び糖化型アミラ
ーゼに大別され、動植物、糸状菌、細菌に広く存在し、
これらから結晶状で得られている。動物の唾液、膵液中
に含まれる酵素であるα−アミラーゼは口腔内又は消化
管内でデンプンを糖に変換する役割を果たしている。α
−アミラーゼ阻害物質は、このα−アミラーゼの活性を
阻害することにより、体内への糖質の供給を抑制する作
用がある。従って、上述のα−アミラーゼ阻害物質は過
剰なエネルギーの供給を抑制するので糖尿病や肥満症の
予防、治療に有効である。近年、先進諸国において、栄
養過多等の原因により種々の成人病が増加している。こ
れら成人病の中には、デンプン等の過剰摂取による血糖
上昇が誘因となって起こるものが多くあり、その例とし
て、糖尿病や肥満症、動脈硬化症を挙げることができ
る。一般に、このような疾患の治療は食餌療法が主体と
なるが、患者にとっては精神的な負担に加えて、カロリ
ー計算等も大変である。このような問題点を解消すべ
く、日本人の食生活の中心である米・うどん等のデンプ
ン食品を食べる際に前述のα−アミラーゼ障害物質を利
用して、デンプンの消化を阻害し、体内への糖質の供給
を抑制する方法が考えられている。
等のα−１、４グルコシド結合を加水分解する酵素であ
り、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ及び糖化型アミラ
ーゼに大別され、動植物、糸状菌、細菌に広く存在し、
これらから結晶状で得られている。動物の唾液、膵液中
に含まれる酵素であるα−アミラーゼは口腔内又は消化
管内でデンプンを糖に変換する役割を果たしている。α
−アミラーゼ阻害物質は、このα−アミラーゼの活性を
阻害することにより、体内への糖質の供給を抑制する作
用がある。従って、上述のα−アミラーゼ阻害物質は過
剰なエネルギーの供給を抑制するので糖尿病や肥満症の
予防、治療に有効である。近年、先進諸国において、栄
養過多等の原因により種々の成人病が増加している。こ
れら成人病の中には、デンプン等の過剰摂取による血糖
上昇が誘因となって起こるものが多くあり、その例とし
て、糖尿病や肥満症、動脈硬化症を挙げることができ
る。一般に、このような疾患の治療は食餌療法が主体と
なるが、患者にとっては精神的な負担に加えて、カロリ
ー計算等も大変である。このような問題点を解消すべ
く、日本人の食生活の中心である米・うどん等のデンプ
ン食品を食べる際に前述のα−アミラーゼ障害物質を利
用して、デンプンの消化を阻害し、体内への糖質の供給
を抑制する方法が考えられている。
【０００３】このため、α−アミラーゼ阻害物質に関す
る研究は古くから行われ、数多くのα−アミラーゼ阻害
物質が開発されてきた。特に、放線菌の産生するオリゴ
糖系またはペプチド系α−アミラーゼ阻害物質が報告さ
れている。植物由来のものでは、小麦より抽出した蛋白
性物質、ビンロウジ（Areca catechu L.）より抽出した
フェノール性物質ＮＦ−８６Ｉ、ＮＦ−８６ＩＩ（特願
昭６２−１５５６８）、サトイモ（Colocasia esculent
a ）より抽出した蛋白性物質ＮＳＡＩ−Ｉ、ＮＳＡＩ−
ＩＩ（特願平２−９５９９２）、月桂樹（Laurus nobil
is L. ）より抽出した粗エキス（特願平２−１３０８５
２）等が報告されている。
る研究は古くから行われ、数多くのα−アミラーゼ阻害
物質が開発されてきた。特に、放線菌の産生するオリゴ
糖系またはペプチド系α−アミラーゼ阻害物質が報告さ
れている。植物由来のものでは、小麦より抽出した蛋白
性物質、ビンロウジ（Areca catechu L.）より抽出した
フェノール性物質ＮＦ−８６Ｉ、ＮＦ−８６ＩＩ（特願
昭６２−１５５６８）、サトイモ（Colocasia esculent
a ）より抽出した蛋白性物質ＮＳＡＩ−Ｉ、ＮＳＡＩ−
ＩＩ（特願平２−９５９９２）、月桂樹（Laurus nobil
is L. ）より抽出した粗エキス（特願平２−１３０８５
２）等が報告されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】以上のように、現在ま
でに多くのα−アミラーゼ阻害物質が開発されてきた
が、植物由来のものは未だ医薬品及び食品への実用化は
行われていない。従って、本発明の目的は、毎日食用す
ることにより肥満及び糖尿病の予防及び改善が可能とな
り、かつ、生体に安全なα−アミラーゼ阻害物質及びそ
れを含有する食品を提供することにある。
でに多くのα−アミラーゼ阻害物質が開発されてきた
が、植物由来のものは未だ医薬品及び食品への実用化は
行われていない。従って、本発明の目的は、毎日食用す
ることにより肥満及び糖尿病の予防及び改善が可能とな
り、かつ、生体に安全なα−アミラーゼ阻害物質及びそ
れを含有する食品を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、新規な糖
質分解酵素阻害物質を見いだすべく、スパイス、ハー
ブ、生薬、野菜、海藻等についてスクリーニングを行っ
た。結果、ボタンピ（牡丹皮、Moutan Cortex、Moutan
Bark、Paeonia suffruticosa Andrews （ Paeonia mout
an Sims ）の根皮）、及びその同属近縁植物 （Paeonia
ceae）の抽出エキス中に安全性及び有効性に優れ、肥満
及び糖尿病の予防及び改善に有用なα−アミラーゼ阻害
物質を見いだし、本発明を完成した。ボタンピは、昔か
ら現在に至るまで、漢方薬の要薬として用いられ、主と
して婦人薬の処方及びその他の処方に配合される。本発
明で使用されるボタンピの産地としては、中国、韓国、
日本（長野、奈良、茨城県など）等が挙げられる。現在
までにボタンピの中に存在が確認されている成分として
は、Paeonol（2−hydroxy−4−methoxyacetophenon
e）、paeonolide（paeonol＋D−glucose＋L−rabinos
e）、paeonosede（paeonol−β−D−glucoside）、paeo
niflorin、oxypaeoniflorin 誘導体、タンニン等が挙げ
られる。なお、「応用薬理」２５，３９３（１９８３）
にラット、ウサギ、ネコにおいて静脈内投与で血糖下降
作用を示すことが報告されている。しかし、経口投与に
よるα−アミラーゼ阻害に起因する血糖値上昇抑制効果
については未だ報告されていない。
質分解酵素阻害物質を見いだすべく、スパイス、ハー
ブ、生薬、野菜、海藻等についてスクリーニングを行っ
た。結果、ボタンピ（牡丹皮、Moutan Cortex、Moutan
Bark、Paeonia suffruticosa Andrews （ Paeonia mout
an Sims ）の根皮）、及びその同属近縁植物 （Paeonia
ceae）の抽出エキス中に安全性及び有効性に優れ、肥満
及び糖尿病の予防及び改善に有用なα−アミラーゼ阻害
物質を見いだし、本発明を完成した。ボタンピは、昔か
ら現在に至るまで、漢方薬の要薬として用いられ、主と
して婦人薬の処方及びその他の処方に配合される。本発
明で使用されるボタンピの産地としては、中国、韓国、
日本（長野、奈良、茨城県など）等が挙げられる。現在
までにボタンピの中に存在が確認されている成分として
は、Paeonol（2−hydroxy−4−methoxyacetophenon
e）、paeonolide（paeonol＋D−glucose＋L−rabinos
e）、paeonosede（paeonol−β−D−glucoside）、paeo
niflorin、oxypaeoniflorin 誘導体、タンニン等が挙げ
られる。なお、「応用薬理」２５，３９３（１９８３）
にラット、ウサギ、ネコにおいて静脈内投与で血糖下降
作用を示すことが報告されている。しかし、経口投与に
よるα−アミラーゼ阻害に起因する血糖値上昇抑制効果
については未だ報告されていない。
【０００６】本発明は、以下に示した方法によりボタン
ピから得られるα−アミラーゼ阻害物質、及びこれを含
有する食品に関するものである。先ず、α−アミラーゼ
阻害物質として使用できるエキスとしては、 （１）精製水で抽出することによって得られるエキス。 （２）エタノールで抽出することによって得られるエキ
ス。 （３）含水エタノール溶液で抽出することによって得ら
れるエキス。 （４）メタノール溶液で抽出することによって得られる
エキス。 （５）含水メタノール溶液で抽出することによって得ら
れるエキス。 （６）上記抽出エキスを吸着クロマトグラフィー用の合
成樹脂製担体（例えばＨＰ２０（株）三菱化成社製）に
吸着させ、分画して得られる非吸着画分、３０％のエタ
ノール水で溶出される画分。 （７）精製水中で透析処理（透析膜として Spectra／Po
r Membran MWCO:6〜8000を使用）して得られる透析内液
及び外液。 （８）上記抽出エキスを疎水クロマトグラフィー用の担
体（例えば、フェニルセファロース ＣＬ ４Ｂ、ファル
マシア社製）に吸着させ、４０〜６０％のメタノール水
で溶出される画分。 （９）（１）〜（８）を組み合わせることによって得ら
れる画分等が挙げられる。
ピから得られるα−アミラーゼ阻害物質、及びこれを含
有する食品に関するものである。先ず、α−アミラーゼ
阻害物質として使用できるエキスとしては、 （１）精製水で抽出することによって得られるエキス。 （２）エタノールで抽出することによって得られるエキ
ス。 （３）含水エタノール溶液で抽出することによって得ら
れるエキス。 （４）メタノール溶液で抽出することによって得られる
エキス。 （５）含水メタノール溶液で抽出することによって得ら
れるエキス。 （６）上記抽出エキスを吸着クロマトグラフィー用の合
成樹脂製担体（例えばＨＰ２０（株）三菱化成社製）に
吸着させ、分画して得られる非吸着画分、３０％のエタ
ノール水で溶出される画分。 （７）精製水中で透析処理（透析膜として Spectra／Po
r Membran MWCO:6〜8000を使用）して得られる透析内液
及び外液。 （８）上記抽出エキスを疎水クロマトグラフィー用の担
体（例えば、フェニルセファロース ＣＬ ４Ｂ、ファル
マシア社製）に吸着させ、４０〜６０％のメタノール水
で溶出される画分。 （９）（１）〜（８）を組み合わせることによって得ら
れる画分等が挙げられる。
【０００７】次に、α−アミラーゼ阻害物質の抽出方法
を以下に示す。なお、本発明で使用するボタンピの性状
は、チップ状、あるいは粉末状等を問わない。また、生
の状態でも乾燥状態のものでもよい。 （１）抽出温度は、４〜８０℃が使用できるが、通常は
室温による抽出が望ましい。 （２）抽出時間は、１時間〜２週間であるが、通常は１
週間程度である。 （３）抽出方法は、冷浸、振とうを問わない。なお、ボ
タンピの重量１に対し、１０〜３０倍の溶媒で３回程度
繰り返すことが望ましい。
を以下に示す。なお、本発明で使用するボタンピの性状
は、チップ状、あるいは粉末状等を問わない。また、生
の状態でも乾燥状態のものでもよい。 （１）抽出温度は、４〜８０℃が使用できるが、通常は
室温による抽出が望ましい。 （２）抽出時間は、１時間〜２週間であるが、通常は１
週間程度である。 （３）抽出方法は、冷浸、振とうを問わない。なお、ボ
タンピの重量１に対し、１０〜３０倍の溶媒で３回程度
繰り返すことが望ましい。
【０００８】本発明のα−アミラーゼ阻害エキスの性質
を以下に示す。 （１）酵素特異性：ブタ膵臓由来α−アミラーゼを阻害
する。 （２）吸着クロマトグラフィー担体（例えばＨＰ２０、
（株）三菱化成社製）に吸着する。 （３）逆相クロマトグラフィー担体（例えばＣ１８、ウ
オーターズ社製）に吸着する。 （４）疎水クロマトグラフィーフェニルセファロース
（例えばＣＬ ４Ｂ、ファルマシア社製）に吸着する。
を以下に示す。 （１）酵素特異性：ブタ膵臓由来α−アミラーゼを阻害
する。 （２）吸着クロマトグラフィー担体（例えばＨＰ２０、
（株）三菱化成社製）に吸着する。 （３）逆相クロマトグラフィー担体（例えばＣ１８、ウ
オーターズ社製）に吸着する。 （４）疎水クロマトグラフィーフェニルセファロース
（例えばＣＬ ４Ｂ、ファルマシア社製）に吸着する。
【０００９】そこで以下に、本発明で用いたα−アミラ
ーゼ活性測定方法及びα−アミラーゼ阻害活性算出方法
を示す。 （イ）α−アミラーゼ活性測定方法：４０μＬの精製
水、６０μＬのバッファー（０.２Ｍ トリス マレイン
酸ー水酸化ナトリウムバッファー；ｐＨ７.０、５ｍＭ
ＣａＣｌ２）、約０.２Ｕのブタ膵臓由来のα−アミ
ラーゼ （worthington biochemical corporation製、酵
素活性１Ｕ＝２５℃、ｐＨ６．９の条件下にてデンプン
から１μＭのマルトースを遊離する活性）を含有する酵
素溶液１００μＬを混合し、３７℃にて５分間予備加熱
を行う。ついで、この溶液に４％可溶性デンプン溶液
（０.２Ｍ トリス マレイン酸ー水酸化ナトリウムバッ
ファー；ｐＨ７.０、５ｍＭ ＣａＣｌ２ に溶解）２０
０μＬを添加し、３７℃にて１２分間反応させる。この
反応液に０．５Ｎ塩酸を５００μＬ添加し、振とうする
ことによりα−アミラーゼ反応を停止させる。この反応
液５０μＬを採取し、精製水９５０μＬ、ルゴール液
（０．００１６Ｎよう素含有）５００μＬを添加し、振
とうする。この溶液の６５５ｎｍにおける吸光度をＣと
する。別にブランクとして上記酵素溶液のかわりに精製
水を用いて反応液を調製し、同様の操作を行う。これに
よって得られた吸光度をＢとする。このようにして得ら
れた吸光度Ｃ及びＢからα−アミラーゼ活性Ａが次式に
よって算出される。ここでＡの計算値が０．５となると
きのα−アミラーゼ活性を１単位とする。 Ａ＝（Ｂ−Ｃ）／Ｂ 従って、阻害物質が存在しない場合のα−アミラーゼ活
性をＡｏとするとＡｏは上記α−アミラーゼ活性を測定
と同様にして測定され、得られた吸光度をＴｏとする
と、次式を用いて算出される。 Ａｏ＝（Ｂ−Ｔｏ）／Ｂ （ロ）α−アミラーゼ阻害活性算出方法：上記α−アミ
ラーゼ活性測定方法における反応系中の精製水４０μＬ
の代わりに阻害物質溶液４０μｌを用いて反応液を調製
し、同様の操作を行う。この操作によって得られた吸光
度をＴｉとする。阻害物質が存在する場合のα−アミラ
ーゼ活性をＡｉとするとＡｉは次式により算出される． Ａｉ＝（Ｂ−Ｔｉ）／Ｂ 阻害物質が存在するときの阻害率をＩ（％）とすると、
Ｉは次式により算出される。 Ｉ＝（（Ａｏ−Ａｉ）×１００）÷Ａｏ 上記ブタ膵臓α−アミラーゼ活性の２単位の５０％を阻
害するα−アミラーゼ阻害物質の量を１阻害単位とする
と、α−アミラーゼ阻害物質の阻害活性は、次式により
算出される。 阻害活性＝（Ａｏ÷１）×（Ｉ÷５０）×阻害物質の希
釈倍率
ーゼ活性測定方法及びα−アミラーゼ阻害活性算出方法
を示す。 （イ）α−アミラーゼ活性測定方法：４０μＬの精製
水、６０μＬのバッファー（０.２Ｍ トリス マレイン
酸ー水酸化ナトリウムバッファー；ｐＨ７.０、５ｍＭ
ＣａＣｌ２）、約０.２Ｕのブタ膵臓由来のα−アミ
ラーゼ （worthington biochemical corporation製、酵
素活性１Ｕ＝２５℃、ｐＨ６．９の条件下にてデンプン
から１μＭのマルトースを遊離する活性）を含有する酵
素溶液１００μＬを混合し、３７℃にて５分間予備加熱
を行う。ついで、この溶液に４％可溶性デンプン溶液
（０.２Ｍ トリス マレイン酸ー水酸化ナトリウムバッ
ファー；ｐＨ７.０、５ｍＭ ＣａＣｌ２ に溶解）２０
０μＬを添加し、３７℃にて１２分間反応させる。この
反応液に０．５Ｎ塩酸を５００μＬ添加し、振とうする
ことによりα−アミラーゼ反応を停止させる。この反応
液５０μＬを採取し、精製水９５０μＬ、ルゴール液
（０．００１６Ｎよう素含有）５００μＬを添加し、振
とうする。この溶液の６５５ｎｍにおける吸光度をＣと
する。別にブランクとして上記酵素溶液のかわりに精製
水を用いて反応液を調製し、同様の操作を行う。これに
よって得られた吸光度をＢとする。このようにして得ら
れた吸光度Ｃ及びＢからα−アミラーゼ活性Ａが次式に
よって算出される。ここでＡの計算値が０．５となると
きのα−アミラーゼ活性を１単位とする。 Ａ＝（Ｂ−Ｃ）／Ｂ 従って、阻害物質が存在しない場合のα−アミラーゼ活
性をＡｏとするとＡｏは上記α−アミラーゼ活性を測定
と同様にして測定され、得られた吸光度をＴｏとする
と、次式を用いて算出される。 Ａｏ＝（Ｂ−Ｔｏ）／Ｂ （ロ）α−アミラーゼ阻害活性算出方法：上記α−アミ
ラーゼ活性測定方法における反応系中の精製水４０μＬ
の代わりに阻害物質溶液４０μｌを用いて反応液を調製
し、同様の操作を行う。この操作によって得られた吸光
度をＴｉとする。阻害物質が存在する場合のα−アミラ
ーゼ活性をＡｉとするとＡｉは次式により算出される． Ａｉ＝（Ｂ−Ｔｉ）／Ｂ 阻害物質が存在するときの阻害率をＩ（％）とすると、
Ｉは次式により算出される。 Ｉ＝（（Ａｏ−Ａｉ）×１００）÷Ａｏ 上記ブタ膵臓α−アミラーゼ活性の２単位の５０％を阻
害するα−アミラーゼ阻害物質の量を１阻害単位とする
と、α−アミラーゼ阻害物質の阻害活性は、次式により
算出される。 阻害活性＝（Ａｏ÷１）×（Ｉ÷５０）×阻害物質の希
釈倍率
【００１０】
実施例１ ボタンピ（松浦薬品製）５００ｇを１０％のエタノール
水５Ｌで、室温にて１週間抽出し、濾紙にて濾過し、濾
液を得た。エバポレータにて濃縮乾固することにより、
赤みをおびた茶色の抽出エキス１０６．２ｇを得た。次
に抽出エキスを精製水約１Ｌに溶解し、凍結乾燥を行っ
た。凍結乾燥粉を精製水に溶解し、所定濃度に調製して
阻害活性を測定した。結果、α−アミラーゼ阻害活性の
ＩＣ５０値は２７０μｇ／ｍＬ（反応液）であった。な
お、精製水に溶解したとき、不溶物質が生じた。本物質
は、メタノール、エタノール、アセトニトリルおよび酢
酸エチルに不溶であった。本物質をＤＭＳＯに溶解し、
阻害活性を測定した結果、α−アミラーゼ阻害作用は有
していなかった。
水５Ｌで、室温にて１週間抽出し、濾紙にて濾過し、濾
液を得た。エバポレータにて濃縮乾固することにより、
赤みをおびた茶色の抽出エキス１０６．２ｇを得た。次
に抽出エキスを精製水約１Ｌに溶解し、凍結乾燥を行っ
た。凍結乾燥粉を精製水に溶解し、所定濃度に調製して
阻害活性を測定した。結果、α−アミラーゼ阻害活性の
ＩＣ５０値は２７０μｇ／ｍＬ（反応液）であった。な
お、精製水に溶解したとき、不溶物質が生じた。本物質
は、メタノール、エタノール、アセトニトリルおよび酢
酸エチルに不溶であった。本物質をＤＭＳＯに溶解し、
阻害活性を測定した結果、α−アミラーゼ阻害作用は有
していなかった。
【００１１】実施例２ 実施例１にて調製した抽出エキスを直径５ｃｍ、長さ３
５ｃｍのカラムに充填した吸着クロマトグラフィー用の
担体ＨＰ２０（三菱化成社製）に吸着させ、精製水３Ｌ
で洗浄し、非吸着画分１９．０ｇを得た。本画分は黄色
で、エバポレーターで濃縮乾固することによりアメ状と
なった。ついで、３０％のエタノール水３Ｌで溶出し、
３０％エタノール溶出画分２．１ｇを得た。本画分は、
エバポレーターで濃縮乾固することにより赤茶色の粉末
状となり、また無臭であった。さらに、１００％のエタ
ノール３Ｌで溶出し、１００％エタノール溶出画分０．
６ｇを得た。本画分は、ボタンピ特有のニオイを呈して
いた。各画分の阻害活性を測定した結果、３０％のエタ
ノール水で溶出した画分および１００％のエタノールで
溶出した画分に阻害物質を濃縮した。３０％のエタノー
ル水で溶出した画分のα−アミラーゼ阻害活性のＩＣ５
０値は１００μｇ／ｍＬ（反応液）であった。
５ｃｍのカラムに充填した吸着クロマトグラフィー用の
担体ＨＰ２０（三菱化成社製）に吸着させ、精製水３Ｌ
で洗浄し、非吸着画分１９．０ｇを得た。本画分は黄色
で、エバポレーターで濃縮乾固することによりアメ状と
なった。ついで、３０％のエタノール水３Ｌで溶出し、
３０％エタノール溶出画分２．１ｇを得た。本画分は、
エバポレーターで濃縮乾固することにより赤茶色の粉末
状となり、また無臭であった。さらに、１００％のエタ
ノール３Ｌで溶出し、１００％エタノール溶出画分０．
６ｇを得た。本画分は、ボタンピ特有のニオイを呈して
いた。各画分の阻害活性を測定した結果、３０％のエタ
ノール水で溶出した画分および１００％のエタノールで
溶出した画分に阻害物質を濃縮した。３０％のエタノー
ル水で溶出した画分のα−アミラーゼ阻害活性のＩＣ５
０値は１００μｇ／ｍＬ（反応液）であった。
【００１２】実施例３ ボタンピ３００ｇを３０％のエタノール水２Ｌで室温に
て５日間抽出し、濾紙で濾過して上清を得、ついで、エ
バポレーターで濃縮乾固することにより、抽出エキス１
４．８４ｇを得た。抽出エキスを１００ｍｇ／ｍＬ精製
水に調製したところ、不溶物質が生じたので遠心分離に
より除いた。精製水に溶解した画分は１４．０３ｇであ
った。本画分を直径５ｃｍ、長さ３５ｃｍのカラムに充
填した吸着クロマトグラフィー用の担体ＨＰ２０に吸着
させた。５Ｌの精製水で洗浄し、非吸着画分を得た。つ
いで、３０％のエタノール水５Ｌで溶出し、２．４７ｇ
を回収した。さらに、１００％のエタノール３Ｌで溶出
した。各画分の阻害活性を確認した結果、３０％のエタ
ノール水で溶出した画分に阻害物質を濃縮した。本画分
を直径４ｃｍ、長さ１０ｃｍのカラムに充填した疎水ク
ロマトグラフィー用の担体フェニルセファロース ＣＬ
４Ｂ（ファルマシア社製）に吸着させ、精製水１Ｌで洗
浄し、非吸着画分１．３３ｇを得た。次いで２０％のメ
タノール水１Ｌ、４０％のメタノール水１Ｌ、６０％の
メタノール水１Ｌ、８０％のメタノール水１Ｌ、１００
％のメタノール１Ｌで溶出し、それぞれ２２５ｍｇ、３
０６ｍｇ、１２５ｍｇ、３３ｍｇ、８ｍｇを回収した。
各画分を所定濃度に調製し、阻害活性を測定した結果、
４０〜６０％のメタノール水溶出画分に阻害物質を濃縮
した。本活性画分のα−アミラーゼ阻害活性のＩＣ５０
値は０．８μｇ／ｍＬ（反応液）であった。
て５日間抽出し、濾紙で濾過して上清を得、ついで、エ
バポレーターで濃縮乾固することにより、抽出エキス１
４．８４ｇを得た。抽出エキスを１００ｍｇ／ｍＬ精製
水に調製したところ、不溶物質が生じたので遠心分離に
より除いた。精製水に溶解した画分は１４．０３ｇであ
った。本画分を直径５ｃｍ、長さ３５ｃｍのカラムに充
填した吸着クロマトグラフィー用の担体ＨＰ２０に吸着
させた。５Ｌの精製水で洗浄し、非吸着画分を得た。つ
いで、３０％のエタノール水５Ｌで溶出し、２．４７ｇ
を回収した。さらに、１００％のエタノール３Ｌで溶出
した。各画分の阻害活性を確認した結果、３０％のエタ
ノール水で溶出した画分に阻害物質を濃縮した。本画分
を直径４ｃｍ、長さ１０ｃｍのカラムに充填した疎水ク
ロマトグラフィー用の担体フェニルセファロース ＣＬ
４Ｂ（ファルマシア社製）に吸着させ、精製水１Ｌで洗
浄し、非吸着画分１．３３ｇを得た。次いで２０％のメ
タノール水１Ｌ、４０％のメタノール水１Ｌ、６０％の
メタノール水１Ｌ、８０％のメタノール水１Ｌ、１００
％のメタノール１Ｌで溶出し、それぞれ２２５ｍｇ、３
０６ｍｇ、１２５ｍｇ、３３ｍｇ、８ｍｇを回収した。
各画分を所定濃度に調製し、阻害活性を測定した結果、
４０〜６０％のメタノール水溶出画分に阻害物質を濃縮
した。本活性画分のα−アミラーゼ阻害活性のＩＣ５０
値は０．８μｇ／ｍＬ（反応液）であった。
【００１３】実施例４ ボタンピ１００ｇを１００％のメタノール１Ｌで、室温
にて１週間抽出した。抽出後、濾紙にて濾過し、抽出エ
キスを得た。抽出エキスを直径５ｃｍ、長さ２０ｃｍの
カラムに充填したシリカゲルに吸着させ、クロロホル
ム：メタノール＝９：１溶液３Ｌで溶出し、３．３８ｇ
を得た。ついで、１００％メタノール３Ｌで溶出し、
９．５２ｇを得た。各溶出画分を所定の濃度に調製し、
阻害活性を測定した。その結果、１００％のメタノール
で溶出した画分に阻害物質が濃縮し、その画分のα−ア
ミラーゼ阻害活性のＩＣ５０値は２２０μｇ／ｍＬ（反
応液）であった。
にて１週間抽出した。抽出後、濾紙にて濾過し、抽出エ
キスを得た。抽出エキスを直径５ｃｍ、長さ２０ｃｍの
カラムに充填したシリカゲルに吸着させ、クロロホル
ム：メタノール＝９：１溶液３Ｌで溶出し、３．３８ｇ
を得た。ついで、１００％メタノール３Ｌで溶出し、
９．５２ｇを得た。各溶出画分を所定の濃度に調製し、
阻害活性を測定した。その結果、１００％のメタノール
で溶出した画分に阻害物質が濃縮し、その画分のα−ア
ミラーゼ阻害活性のＩＣ５０値は２２０μｇ／ｍＬ（反
応液）であった。
【００１４】実施例５ 実施例２にて調製した画分１．４ｇを精製水５０Ｌ中
で、室温にて１０日間透析処理を行った。用いた透析膜
（Spectra／Por）の分画分子量は６〜８０００であっ
た。透析内液と透析外液の阻害活性を測定した結果、透
析内液と透析外液ともに阻害物質が回収された。
で、室温にて１０日間透析処理を行った。用いた透析膜
（Spectra／Por）の分画分子量は６〜８０００であっ
た。透析内液と透析外液の阻害活性を測定した結果、透
析内液と透析外液ともに阻害物質が回収された。
【００１５】実施例６ ７〜９週齢のｄｄＹ系雄マウス（体重３０〜４０ｇ）
を、１群５匹として使用した。２０時間絶食させたの
ち、各群のマウスに精製水に溶かした澱粉２．５ｇ／ｋ
ｇを経口投与した。なお、被検試料投与群には、澱粉と
共に所定の被検試料を経口投与した。また、対照群に
は、被検試料のかわりに精製水のみを投与した。澱粉負
荷前及び澱粉負荷後３０分、６０分、９０分に眼底静脈
叢よりヘマトクリット毛細管を用いて５０μＬの血液を
採血し、遠心分離により約２０μＬの血清を得た。血清
中のグルコース濃度はグルコースＣIIテストワコーを用
いて測定した。被検試料として実施例３に示した物質を
投与した結果を表１に示した。被検試料の投与量は１０
０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ及び９００ｍｇ／ｋｇ
である。各群ともに血糖値上昇抑制傾向が認められた。
なお、９００ｍｇ／ｋｇの投与群では３０分目で０．１
％の危険率で有意差が認められた。さらに、実施例で示
した他の調製法による当該エキスを使用した場合におい
ても、同様に有意な血糖値上昇抑制効果が認められた。
（添付表１参照）
を、１群５匹として使用した。２０時間絶食させたの
ち、各群のマウスに精製水に溶かした澱粉２．５ｇ／ｋ
ｇを経口投与した。なお、被検試料投与群には、澱粉と
共に所定の被検試料を経口投与した。また、対照群に
は、被検試料のかわりに精製水のみを投与した。澱粉負
荷前及び澱粉負荷後３０分、６０分、９０分に眼底静脈
叢よりヘマトクリット毛細管を用いて５０μＬの血液を
採血し、遠心分離により約２０μＬの血清を得た。血清
中のグルコース濃度はグルコースＣIIテストワコーを用
いて測定した。被検試料として実施例３に示した物質を
投与した結果を表１に示した。被検試料の投与量は１０
０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ及び９００ｍｇ／ｋｇ
である。各群ともに血糖値上昇抑制傾向が認められた。
なお、９００ｍｇ／ｋｇの投与群では３０分目で０．１
％の危険率で有意差が認められた。さらに、実施例で示
した他の調製法による当該エキスを使用した場合におい
ても、同様に有意な血糖値上昇抑制効果が認められた。
（添付表１参照）
【００１６】
【表１】
【００１７】実施例７（ビスケット） 小麦粉１００ｇ、ボタンピの１０％エタノール抽出エキ
スの凍結乾燥粉０．１ｇ、人工甘味料（アスパラテー
ム）３０ｇ、ショートニング１２．５ｇ、食塩０．８
ｇ、炭酸水素ナトリウム０．５ｇ、炭酸アンモニウム
０．７ｇおよび水１５ｇを用いて、常法によりドゥーを
作成し、成型、焙焼してビスケットを製造した。
スの凍結乾燥粉０．１ｇ、人工甘味料（アスパラテー
ム）３０ｇ、ショートニング１２．５ｇ、食塩０．８
ｇ、炭酸水素ナトリウム０．５ｇ、炭酸アンモニウム
０．７ｇおよび水１５ｇを用いて、常法によりドゥーを
作成し、成型、焙焼してビスケットを製造した。
【００１８】実施例８（パン） 小麦粉１００ｇ、ボタンピの１０％エタノール抽出エキ
スの凍結乾燥粉０．１ｇ、イースト２ｇ、イーストフー
ド０．１ｇ、人工甘味料（アスパラテーム）５ｇ、ショ
ートニング５ｇ及び水９０ｇを用いて、常法によりドゥ
ーを作成し、成型、焙焼してパンを製造した。
スの凍結乾燥粉０．１ｇ、イースト２ｇ、イーストフー
ド０．１ｇ、人工甘味料（アスパラテーム）５ｇ、ショ
ートニング５ｇ及び水９０ｇを用いて、常法によりドゥ
ーを作成し、成型、焙焼してパンを製造した。
【００１９】実施例９（クッキー） ショートニング１００ｇ、牛乳５ｇ、人工甘味料（アス
パラテーム）２０ｇ、卵２０ｇ、小麦粉１００ｇ、ベー
キングパウダー０．３ｇ及びボタンピの１０％エタノー
ル抽出エキスの凍結乾燥粉０．１ｇを用いて、常法によ
りドゥーを作成し、成型、焙焼してクッキーを製造し
た。
パラテーム）２０ｇ、卵２０ｇ、小麦粉１００ｇ、ベー
キングパウダー０．３ｇ及びボタンピの１０％エタノー
ル抽出エキスの凍結乾燥粉０．１ｇを用いて、常法によ
りドゥーを作成し、成型、焙焼してクッキーを製造し
た。
【００２０】実施例１０（ドリンク剤） ビタミンＢ1、ビタミンＢ2０．３ｍｇ、ビタミンＢ
6０．４ｍｇ、ビタミンＤ３０ＩＵ、アスコルビン酸２
０ＩＵ、カルシウム２００ｍｇ、鉄４ｍｇ、人工甘味料
（アスパラテーム）２０ｇ、ボタンピの１０％エタノー
ル抽出エキスの凍結乾燥粉０．１ｇ、水５０ｇおよび牛
乳５０ｇをミキサーで混合し、ドリンク剤を製造した。
6０．４ｍｇ、ビタミンＤ３０ＩＵ、アスコルビン酸２
０ＩＵ、カルシウム２００ｍｇ、鉄４ｍｇ、人工甘味料
（アスパラテーム）２０ｇ、ボタンピの１０％エタノー
ル抽出エキスの凍結乾燥粉０．１ｇ、水５０ｇおよび牛
乳５０ｇをミキサーで混合し、ドリンク剤を製造した。
【００２１】
【発明の効果】本発明のボタンピより得られたアミラー
ゼ阻害活性を有するエキスは、安全性及び有効性に優
れ、それを含有する食品は体内への糖質の供給を抑制す
るために肥満や糖尿病の予防・治療に有用である。
ゼ阻害活性を有するエキスは、安全性及び有効性に優
れ、それを含有する食品は体内への糖質の供給を抑制す
るために肥満や糖尿病の予防・治療に有用である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｎ 9/99 (72)発明者 渡辺 常一 東京都港区東新橋１丁目１番19号 株式会 社ヤクルト本社内 (72)発明者 横倉 輝男 東京都港区東新橋１丁目１番19号 株式会 社ヤクルト本社内
Claims (2)
- 【請求項１】ボタンピを水、極性溶媒或いはそれらの混
合溶媒より抽出して得られるアミラーゼ阻害物質。 - 【請求項２】請求項１記載のアミラーゼ阻害物質を含有
するダイエット食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7153052A JPH092966A (ja) | 1995-06-20 | 1995-06-20 | ボタンピより得られるアミラーゼ阻害物質及びそれを含有するダイエット食品 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7153052A JPH092966A (ja) | 1995-06-20 | 1995-06-20 | ボタンピより得られるアミラーゼ阻害物質及びそれを含有するダイエット食品 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH092966A true JPH092966A (ja) | 1997-01-07 |
Family
ID=15553931
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7153052A Pending JPH092966A (ja) | 1995-06-20 | 1995-06-20 | ボタンピより得られるアミラーゼ阻害物質及びそれを含有するダイエット食品 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH092966A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5191505A (ja) * | 1974-12-28 | 1976-08-11 | ||
| JP2000044484A (ja) * | 1998-07-31 | 2000-02-15 | Higashimaru Shoyu Co Ltd | アミラーゼ阻害活性物質及びその用途 |
| US7150889B2 (en) | 2000-01-18 | 2006-12-19 | Nagaoka Perfumery Co., Ltd. | Anti-obestic composition |
| KR20190111726A (ko) * | 2018-03-23 | 2019-10-02 | 한국 한의학 연구원 | 천연 혼합 추출물을 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 |
| CN112941127A (zh) * | 2021-02-08 | 2021-06-11 | 上海华源制药安徽广生药业有限公司 | 一种从牡丹皮中提取丹皮酚并联产牡丹皮多糖的方法 |
-
1995
- 1995-06-20 JP JP7153052A patent/JPH092966A/ja active Pending
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5191505A (ja) * | 1974-12-28 | 1976-08-11 | ||
| JPS5522282B2 (ja) * | 1974-12-28 | 1980-06-16 | ||
| JP2000044484A (ja) * | 1998-07-31 | 2000-02-15 | Higashimaru Shoyu Co Ltd | アミラーゼ阻害活性物質及びその用途 |
| US7150889B2 (en) | 2000-01-18 | 2006-12-19 | Nagaoka Perfumery Co., Ltd. | Anti-obestic composition |
| US7687085B2 (en) | 2000-01-18 | 2010-03-30 | Nagaoka Perfumery Co., Ltd | Anti-obestic composition |
| KR20190111726A (ko) * | 2018-03-23 | 2019-10-02 | 한국 한의학 연구원 | 천연 혼합 추출물을 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 |
| US11484562B2 (en) | 2018-03-23 | 2022-11-01 | Korea Institute Of Oriental Medicine | Composition for preventing or treating obesity comprising natural mixture extracts |
| CN112941127A (zh) * | 2021-02-08 | 2021-06-11 | 上海华源制药安徽广生药业有限公司 | 一种从牡丹皮中提取丹皮酚并联产牡丹皮多糖的方法 |
| CN112941127B (zh) * | 2021-02-08 | 2023-07-07 | 上海华源制药安徽广生药业有限公司 | 一种从牡丹皮中提取丹皮酚并联产牡丹皮多糖的方法 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20040804 |
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| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050308 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20050705 |