JPH09132529A - 一酸化窒素合成酵素阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 一般式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴はそれぞれ独立して、
Ｈ、アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ＯＨ、Ｓ
Ｈ、ハロゲン、ＣＦ₃、ＮＯ₂、ＣＮ、ＣＯＯＲ⁶、ＮＲ⁷
Ｒ⁸、ＣＯＮＲ⁹Ｒ¹⁰（Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰はＨ、
アルキル）、Ｐｈ、Ｐｈアルキル等を表わすか、または
Ｒ¹およびＲ²、Ｒ²およびＲ³、またはＲ³およびＲ⁴が一
緒になってアルキレン；Ｒ⁵はＨ、アルキルを表わ
す。）の化合物を有効成分とする一酸化窒素合成酵素
（ＮＯＳ）阻害剤。 【効果】 一般式（Ｉ）の化合物とそれらの塩は、ＮＯ
Ｓ阻害作用を有しており、ショック、低血圧、慢性関節
リウマチ、潰瘍性大腸炎、虚血性脳障害、腫瘍、インス
リン依存性糖尿病等の治療及び／又は予防に有用であ
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は一酸化窒素合成酵素阻害剤に関す
る。さらに詳しくは一般式（Ｉ）

【化２】 （式中、すべての記号は後記と同じ意味を表す。）で示
される化合物、それらの非毒性塩またはそれらの酸付加
塩を有効成分として含有する一酸化窒素合成酵素阻害剤
に関する。

【０００２】

【発明の背景】免疫担当細胞の一つであるマクロファー
ジが多量の硝酸塩を産生するという発見から、一酸化窒
素（ＮＯ）が生体内で生成されるということが発見され
た［Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82, 7738-7742 (198
5) ; J. Immunol., 138, 550-565 (1987)]。また、循環
器系分野では血管内皮細胞から放出される弛緩作用を有
する物質が発見され、血管内皮由来弛緩因子（ＥＤＲ
Ｆ）と名付けられた。さらに、このＥＤＲＦの本体がＮ
Ｏであることがわかった［Nature, 327, 524-526 (198
7)]。このように生体内で産生されることが明らかにな
ったＮＯは、Ｌ−アルギニンを基質として一酸化窒素合
成酵素（ＮＯＳ）により以下の経路によって生成され
る。

【０００３】

【化３】

【０００４】ＮＯＳには少なくとも非誘導型（血管内皮
型および神経型）および誘導型のアイソザイムが存在す
る。血管内皮型ＮＯＳは、主に血管内皮細胞に存在し、
細胞内カルシウム濃度により活性が制御されている。神
経型ＮＯＳは、中枢神経細胞、末梢神経細胞、または膵
島β細胞、消化管神経、副腎髄質、腎臓緻密斑等に存在
し、血管内皮型ＮＯＳと同様に細胞内カルシウム濃度に
より活性が制御されている。

【０００５】血管内皮型ＮＯＳおよび神経型ＮＯＳ（co
nstitutive NOS、ｃ−ＮＯＳと省略される。）は細胞内
に恒常的に存在し、生理的変化による酵素量の変化はほ
とんど見られない。誘導型ＮＯＳ（inducible NOS、ｉ
−ＮＯＳと省略される。）は、肝実質細胞、好中球、マ
クロファージ、平滑筋、線維芽細胞、腎メサンギウム細
胞、消化管上皮、膵島β細胞、血管平滑筋細胞またはグ
リア細胞等に存在する。これは通常細胞内で認められ
ず、エンドトキシンや各種サイトカイン等による刺激に
より誘導される。

【０００６】ＮＯＳにより生成されるＮＯの作用は多彩
であり、ほとんど全ての細胞がＮＯを産生し多くの生物
作用に関与するが、そのＮＯの作用が非誘導型ＮＯＳに
よるのか、誘導型ＮＯＳによるのかは明確ではない。作
用としては、例えば、血管弛緩作用、血小板凝集抑制作
用、粘着抑制、白血球粘着・遊走抑制、交感神経活動抑
制、エンドトキシンショック、エンドトキシン・サイト
カインによる低血圧、神経細胞間の情報伝達物質として
の作用、虚血性脳細胞障害、抗腫瘍・殺菌作用、自己免
疫疾患、インスリン依存性糖尿病、関節炎、移植後組織
障害、拒絶反応等が挙げられる。

【０００７】

【従来の技術】生体内でのＮＯの生理活性を解析する上
で、ＮＯ合成酵素阻害剤は有用であり、またショックや
虚血性疾患等の治療薬として用いられる可能性があるこ
とより、近年種々のＮＯＳ阻害剤の開発が現在進められ
ている。例えば、基質競合剤としてアルギニン類似体が
あり、Ｎ^ω−モノメチル−Ｌ−アルギニン（Ｌ−ＮＭＭ
Ａ）、Ｎ^ω−ニトロ−Ｌ−アルギニン（Ｌ−ＮＮＡ）、
Ｎ^ω−アミノ−Ｌ−アルギニン（Ｌ−ＮＡＡ）、Ｎ^ω−
イミノエチル−オルニチン（Ｌ−ＮＩＯ）等がそれに当
たる。また、コファクター（Cofactor）競合阻害剤とし
てジフェニレンヨードニウム（ＤＰＩ）、ジ−２−チエ
ニルヨードニウム（ＤＴＩ）、カルシニューリン等があ
る。また、遺伝子転写、誘導阻害するものとしては、コ
ルチコステロイド、ＴＧＦβ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０等
が挙げられる。また、（１）ＰＣＴ公開WO9324126 号の
明細書中に一般式（Ａ）

【０００８】

【化４】

【０００９】（式中、Ｒ^Aは−（ＣＨ₂）_yAＣＨ₃基また
は水素原子を表わし、Ｒ^A1は−ＣＨ₂−または−ＣＨ
（（ＣＨ₂）_yAＣＨ₃）−基を表わし、Ｒ^A2は−ＣＨ₂−
または−ＣＨ（（ＣＨ₂）_yAＣＨ₃）−基を表わし、ｙ^A
は０〜５を表わし、ｘ^Aは０〜１を表わし、Ｑ^AはＣ１〜
６のアルキル基、アミノ基またはニトロ基を表わす。）
で示される化合物が選択的に誘導型ＮＯＳを阻害するア
ルギニン拮抗剤である旨の開示がある。

【００１０】（２）ＰＣＴ公開WO9313055 号の明細書中
に一般式（Ｂ）

【化５】

【００１１】（式中、Ｒ^1BはＣ１〜６のアルキル、Ｃ２
〜６のアルケニル、Ｃ２〜６のアルキニル、Ｃ３〜６の
シクロアルキル、Ｃ３〜６のシクロアルキル−（Ｃ１〜
６）アルキル基を表わし、Ｑ^BはＣ１〜３のアルキル基
１個以上で置換されているかあるいは置換されていない
Ｃ３〜６のアルキレン、アルケニレン、アルキニレン
基、−（ＣＨ₂）_pB−Ｘ^B−（ＣＨ₂）_qB−または−（Ｃ
Ｈ₂）_rB−Ａ^B−（ＣＨ₂）_sB−を表わし、ｐＢは２また
は３を表わし、ｑＢは１または２を表わし、Ｘ^BはＳ
（Ｏ）_xBまたはＮＲ^2Bを表わし、ｘＢは０〜２を表わ
し、Ｒ^2Bは水素原子またはＣ１〜６のアルキル基を表わ
し、ｒＢおよびｓＢは０〜２を表わし、Ａ^BはＣ３〜６
の炭素環またはヘテロ環を表わす。）で示される化合物
が非誘導型ＮＯＳに対し、誘導型ＮＯＳをより選択的に
阻害する化合物である旨の開示がある。

【００１２】（３）ＰＣＴ公開WO9412163 号の明細書中
に一般式（Ｃ）

【化６】

【００１３】（式中、Ｒ^1Cは水素原子、Ｃ１〜６のアル
キル基、Ｃ６〜１２のアリール−（Ｃ１〜４）アルキル
基等を表わし、Ｒ^2Cは水素原子、Ｃ１〜６のアルキル基
またはＣ６〜１２のアリール−（Ｃ１〜４）アルキル基
を表わし、Ｒ^3CはＣＯＯＲ^6C、ＣＨ（Ｒ^7C）ＯＲ^8C等を
表わし、Ｒ^4Cは水素原子、Ｃ１〜６のアルキル基または
Ｃ６〜１２のアリール−（Ｃ１〜３）アルキル基を表わ
し、Ｗ^CはＣ２〜４のアルキレン、アルケニレン、アル
キニレン、フェニレン基等を表わし、Ｒ^9CおよびＲ^10C
は水素原子またはＣ１〜６のアルキル基を表わし、Ｚ^C
は硫黄原子または置換されていてもよい窒素原子を表わ
し、Ｒ^5Cは置換されたフェニル基あるいはＣ９〜１４の
二環または三環の炭素環を表わし、Ｒ^6Cは水素原子、Ｃ
１〜６のアルキル基、Ｃ２〜６のアルケニル基等を表わ
し、Ｒ^7Cは水素原子、Ｃ１〜６のアルキル基、Ｃ３〜７
のシクロアルキル基等を表わし、Ｒ^8Cは水素原子、Ｃ１
〜６のアルキル基等を表わす。）で示される化合物がグ
アニル酸シクラーゼまたは一酸化窒素合成酵素の阻害剤
である旨の開示がある。

【００１４】（４）ＰＣＴ公開WO9412165 号の明細書中
に一般式（Ｄ）

【化７】

【００１５】（式中、Ｒ^Dは（ａ）Ｃ１〜１４の炭化水
素基、（ｂ）５または６員のヘテロ環、または（ｃ）９
員の二環ヘテロ環を表わし、Ｒ^D基には１または２個の
置換基が置換していてもよく、その置換基は以下から選
ばれる。

【００１６】(i) ハロゲン原子、(ii)−ＸＲ^1D基（基
中、Ｘは酸素原子、Ｃ（Ｏ）_mD（式中、ｍＤは１または
２を表わす。）、Ｓ（Ｏ）_nD（式中、ｎＤは０、１また
は２を表わす。）またはＮＲ^2D（式中、Ｒ^2Dは水素原
子、Ｃ１〜６のアルキル基、Ｃ３〜６のシクロアルキル
基等を表わす。）を表わし、Ｒ^1Dは水素原子、Ｃ１〜６
のアルキル基、Ｃ２〜６のアルケニル基、Ｃ３〜６のシ
クロアルキル基、Ｃ７〜９のアラルキル基、Ｃ６〜１０
のアリール基、５または６員のヘテロ環を表わすか、ま
たは上記した各基はＣ１〜３のアルキル基、水酸基、Ｃ
１〜３のアルコキシ基、アミノ基、Ｃ１〜３のアルキル
アミノ基、ハロゲン原子、ニトロ基、Ｃ（Ｏ）_mD'Ｒ^2D
（式中、ｍＤ′は１または２を表わし、Ｒ^2Dは水素原子
またはＣ１〜４のアルキル基を表わす。）から選ばれる
基１または２個で置換されていてもよく、あるいはＮＲ
^3DＲ^4D（式中、Ｒ^3DおよびＲ^4Dはそれぞれ独立して、水
素原子、Ｃ１〜４のアルキル基または一緒になって、Ｃ
２〜６のアルキレン基を表わす。）を表わす。）、

【００１７】(iii)

【化８】

【００１８】（式中、Ｙ^Dは酸素原子、Ｓ（Ｏ）_nD（式
中、ｎＤは前記と同じ意味を表わす。）またはＮＲ
^5D（式中、Ｒ^5Dは水素原子、Ｃ１〜４のアルキル基を表
わす。）を表わし、ｗＤは０または１を表わし、Ｑ^Dは
Ｃ２〜４の炭化水素基を表わす。）、(iv)Ａ基（基中、
Ａは

【化９】 で置換されていてもよいヘテロ環を表わす。）、または
(v) Ｃ１〜６のアルキル基、Ｃ２〜６のアルケニル基ま
たはＣ３〜６のシクロアルキル基。あるいはＲ^D基中の
炭素原子１個が一般式（Ｄ）中のイミノ基の窒素原子に
結合して５または６員のヘテロ環を表わす。）で示され
る化合物が一酸化窒素合成酵素の阻害剤である旨の開示
がある。

【００１９】（５）シトルリン誘導体として、Ｌ−チオ
シトルリン（L-thiocitrulline)、Ｌ−ホモチオシトル
リン(L-homothiocitrulline) および Ｓ−メチル−Ｌ−
チオシトルリン(S-methyl-L-thiocitrulline)がＮＯＳ
阻害作用を有する旨開示された[J. Med. Chem., 37, 88
5-887 (1994)] 。

【化１０】

【００２０】（６）アミノグアニジン、メチルアミノグ
アニジン、ジメチルアミノグアニジン、ジアミノグアニ
ジンがＮＯＳ阻害活性を有することも公知である（特開
平5-255079号、特開平6-9380号、米国特許5,358,970
号）。

【００２１】また、（７）ＰＣＴ公開ＷＯ9414780号の
明細書中に一般式（Ｅ）

【化１１】

【００２２】(式中、Ｒ^1EおよびＲ^2Eは水素原子または
Ｃ１〜４のアルキル基等を表わし、Ｘ^Eは窒素原子また
は炭素原子を表わし、Ｙ^Eは窒素原子、ＣＨまたはＣＨ
ＮＨ₂基を表わし、Ｄ^EはＳ（Ｏ）_xE、Ｃ１〜４アルキレ
ン、Ｃ２〜４アルケニレンまたはアルキニレン基を表わ
し、ｘＥは０〜２、ｄ^Eは０〜１を表わし、Ａｒ^Eは単環
または２環式の環を表わし、Ｒ^3Eは水素原子、１〜３個
の置換基を有するＡｒ^Eを表わし、Ｒ^4Eは水素原子、Ｃ
１〜４のアルキル、水酸基、ハロゲン、ＣＦ₃、ＮＲ^10E
Ｒ^11E基（基中、Ｒ^10EおよびＲ^11Eは水素原子またはＣ
１〜４のアルキル基を表わす。）等を表わす。）で示さ
れる化合物が、一酸化窒素合成酵素のテトラヒドロビオ
プテリンサイトに結合すると開示されている。

【００２３】（８）ＰＣＴ公開ＷＯ9511231号の明細書
中に一般式（Ｆ）

【化１２】 （式中、Ｘ^FはＣＨ₂、窒素原子、酸素原子、硫黄原子、
ＳＯまたはＳＯ₂を表わし、ｎ^Fは０〜７を表わし、Ｒ^1F
およびＲ^2Fは水素原子、Ｃ１〜１０のアルキル、アルコ
キシ、アルキルチオ、ハロアルキル、Ｃ２〜１０のアル
ケニル、アルキニル基、ハロゲン、ニトロ、アミノ、カ
ルボン酸、シアノ基等またはＲ^1FおよびＲ^2Fが一緒にな
って、Ｃ３〜１０の脂肪族炭化水素基、Ｃ４〜１６の芳
香族炭化水素基、Ｃ４〜１０のヘテロ環を表わし、Ｒ^3F
およびＲ^4Fは水素原子、水酸基、Ｃ１〜１０のアルコキ
シ基を表わす。）で示される化合物が、選択的に一酸化
窒素合成酵素を調節または阻害すると開示されている。

【００２４】一方、本発明化合物は試薬として市販され
ている公知化合物である。例えば、２−アミノ−４−メ
チルピリジンは市販されており、鎮痛剤または強心剤と
しての用途[Merck Index No.478]、および血管のα−ア
ドレナリン受容体刺激による昇圧作用の用途[Med. Bio
l. Inf. 1, 3-6 (1981)]が知られている。

【００２５】

【発明の目的】本発明者等は、一酸化窒素合成酵素（特
に誘導型ＮＯＳ）を阻害する化合物を見出すべく鋭意研
究を行なった結果、一般式（Ｉ）で示される化合物が目
的を達成することを見出し、本発明を完成した。

【００２６】

【従来技術との比較】従来技術の項で記載した化合物
中、Ｌ−ＮＭＭＡ、Ｌ−ＮＮＡ、Ｌ−ＮＡＡ、一般式
（Ａ）および一般式（Ｂ）で示される化合物はアルギニ
ン構造を必須とする化合物群である。一般式（Ｃ）で示
される化合物はアミン構造を必須とする化合物であり、
一般式（Ｄ）で示される化合物はイソチオウレア誘導体
である。従来技術（５）で示した化合物はシトルリン誘
導体である。従来技術（６）で示した化合物はいずれも
グアニジル基を有する化合物である。一方、本発明化合
物は、アミノピリジン誘導体であり、Ｌ−ＮＭＭＡ、Ｌ
−ＮＮＡ、Ｌ−ＮＡＡ、一般式（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）
および（Ｄ）で示される化合物および従来技術（５）お
よび（６）で示される化合物とは構造的に異なる化合物
である。よって、従来のＮＯＳ阻害剤として知られてい
る化合物から本発明化合物がその活性を有することは容
易に予測することはできない。

【００２７】また、一般式（Ｅ）で示される化合物は、
ＮＲ^1EＲ^2Eが置換した窒素原子を１個、２個または３個
含有するヘテロ環を基本骨格とする。これらの化合物は
一酸化窒素合成酵素のテトラヒドロビオプテリンサイト
に結合することによって目的を達する。よって、本発明
化合物とは阻害作用の機序が異なる。一般式（Ｆ）で示
される化合物は、イミノ基が置換した窒素原子を１個、
２個、または窒素原子１個と酸素原子１個、窒素原子１
個と硫黄原子１個を有する飽和ヘテロ環を基本骨格とす
る化合物であり、本発明化合物とは構造が異なる。

【００２８】また、本発明化合物は試薬として既に市販
されており、中には医薬品としての用途が知られている
化合物もある。例えば、２−アミノ−４−メチルピリジ
ンは、鎮痛剤または強心剤としての用途が知られてい
る。しかし、この化合物および本発明のその他の化合物
がＮＯＳ阻害作用を有することは全く知られていなかっ
た。

【００２９】

【発明の開示】本発明は、一般式（Ｉ）

【化１３】

【００３０】（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴はそれぞ
れ独立して、水素原子、Ｃ１〜６のアルキル基、Ｃ１〜
６のアルコキシ基、Ｃ１〜６のアルキルチオ基、Ｃ３〜
７のシクロアルキル基、Ｃ２〜５のアシル基、水酸基、
メルカプト基、ハロゲン原子、トリフルオロメチル基、
ニトロ基、シアノ基、ＣＯＯＲ⁶基（基中、Ｒ⁶は水素原
子またはＣ１〜６のアルキル基を表わす。）、ＮＲ⁷Ｒ⁸
基（基中、Ｒ⁷およびＲ⁸はそれぞれ独立して、水素原子
またはＣ１〜６のアルキル基を表わす。）、ＣＯＮＲ⁹
Ｒ¹⁰基（基中、Ｒ⁹およびＲ¹⁰はそれぞれ独立して、水
素原子またはＣ１〜６のアルキル基を表わす。）、フェ
ニル基、フェニル−（Ｃ１〜４）アルキル基、フェノキ
シ基、フェニル−（Ｃ１〜４）アルコキシ基、ベンゾイ
ル基、ベンゾイル−（Ｃ１〜４）アルキル基、チエニル
基を表わすか、またはＲ¹およびＲ²、Ｒ²およびＲ³、ま
たはＲ³およびＲ⁴が一緒になってＣ３〜５のアルキレン
基を表わし、Ｒ⁵は水素原子またはＣ１〜６のアルキル
基を表わす。）で示される化合物、それらの非毒性塩ま
たはそれらの酸付加塩を有効成分として含有する一酸化
窒素合成酵素阻害剤に関する。

【００３１】一般式（Ｉ）中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ
⁵、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰が表わすＣ１〜６のアル
キル基とは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペン
チル、ヘキシル基およびそれらの異性体を意味する。一
般式（Ｉ）中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が表わすＣ１〜６の
アルコキシ基とは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、
ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ基およびそ
れらの異性体を意味する。

【００３２】一般式（Ｉ）中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が表
わすＣ１〜６のアルキルチオ基とは、メチルチオ、エチ
ルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、ペンチルチオ、ヘ
キシルチオ基およびそれらの異性体を意味する。一般式
（Ｉ）中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が表わすＣ３〜７のシク
ロアルキル基とは、シクロプロピル、シクロブチル、シ
クロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル基を意
味する。

【００３３】一般式（Ｉ）中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が表
わすＣ２〜５のアシル基とは、アセチル、プロピオニ
ル、ブチリル、イソブチリル、バレリル、イソバレリ
ル、ピバロイル基を意味する。一般式（Ｉ）中、Ｒ¹、
Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が表わすハロゲン原子とは、フッ素、塩
素、臭素およびヨウ素を意味する。一般式（Ｉ）中、Ｒ
¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が表わすフェニル−（Ｃ１〜４）アル
キル基とはフェニル基１個が置換したメチル、エチル、
プロピル、ブチル基およびそれらの異性体を意味する。

【００３４】一般式（Ｉ）中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が表
わすフェニル−（Ｃ１〜４）アルコキシ基とはフェニル
基１個が置換したメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブ
トキシ基およびそれらの異性体を意味する。一般式
（Ｉ）中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が表わすベンゾイル−
（Ｃ１〜４）アルキル基とはベンゾイル基１個が置換し
たメチル、エチル、プロピル、ブチル基およびそれらの
異性体を意味する。一般式（Ｉ）中、Ｒ¹およびＲ²、Ｒ
²およびＲ³、またはＲ³およびＲ⁴が一緒になって表わす
Ｃ３〜５のアルキレン基とはプロピレン、ブチレン、ペ
ンチレン基を意味する。

【００３５】本発明においては、特に指示しない限り異
性体はこれをすべて包含する。例えば、アルキル基、ア
ルコキシ基、アルキレン基、およびアルケニル基には直
鎖のもの、分枝鎖のものが含まれ、アルケニル基中の二
重結合は、Ｅ、ＺおよびＥＺ混合物であるものを含む。
また、分枝鎖のアルキル基が存在する場合等の不斉炭素
原子の存在により生ずる異性体も含まれる。

【００３６】一般式（Ｉ）で示される化合物は、公知の
方法で非毒性塩または酸付加塩に変換される。塩は、毒
性のない、水溶性のものが好ましい。適当な塩として
は、アルカリ金属（カリウム、ナトリウム等）の塩、ア
ルカリ土類金属（カルシウム、マグネシウム等）の塩、
アンモニウム塩、薬学的に許容される有機アミン（テト
ラメチルアンモニウム、トリエチルアミン、メチルアミ
ン、ジメチルアミン、シクロペンチルアミン、ベンジル
アミン、フェネチルアミン、ピペリジン、モノエタノー
ルアミン、ジエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメ
チル）アミン、リジン、アルギニン、Ｎ−メチル−Ｄ−
グルカミン等）の塩が挙げられる。

【００３７】酸付加塩は、毒性のない水溶性のものが好
ましい。適当な酸付加塩としては、塩酸塩、臭化水素酸
塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩のよう
な無機酸塩、または酢酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、シュウ
酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、安息香
酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベン
ゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、イセチオン
酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩のような有機酸塩
が挙げられる。

【００３８】

【本発明の具体的な化合物】一般式（Ｉ）で示される具
体的な化合物として、以下の（１）〜（１１７）に示す
化合物、それらの非毒性塩またはそれらの酸付加塩が挙
げられる。 （１）２−アミノ−４−メチルピリジン、（２）２−ア
ミノ−６−メチルピリジン、（３）２−アミノ−４，６
−ジメチルピリジン、（４）２−ｎ−ブチルアミノ−４
−メチルピリジン、（５）２−ｎ−ブチルアミノピリジ
ン、（６）２−ｎ−ブチルアミノ−４−クロロピリジ
ン、（７）２−アミノ−６−エチルピリジン、（８）２
−エチルアミノ−６−メチルピリジン、（９）２−アミ
ノ−６−プロピルピリジン、（１０）２−アミノ−３−
カルボキシピリジン、（１１）２−アミノピリジン、
（１２）２−アミノ−３−ヒドロキシピリジン、（１
３）２−アミノ−６−ヒドロキシピリジン、（１４）２
−アミノ−３−ベンジルオキシピリジン、（１５）２−
アミノ−５−クロロピリジン、（１６）２−アミノ−５
−メチルピリジン、

【００３９】（１７）２−アミノ−３−メチルピリジ
ン、（１８）２−アミノ−６−ｎ−ブチル−３−メチル
ピリジン、（１９）２，３−ジアミノピリジン、（２
０）２−アミノ−４−メチル−３−ニトロピリジン、
（２１）２−アミノ−５−ニトロピリジン、（２２）２
−アミノ−４−メチル−５−ニトロピリジン、（２３）
２−アミノ−３−アミノメチル−６−メチルピリジン、
（２４）２−アミノ−５−トリフルオロメチルピリジ
ン、（２５）２−アミノ−４−トリフルオロメチルピリ
ジン、（２６）２−アミノ−５−シアノピリジン、（２
７）２−アミノ−４，６−ジトリフルオロメチルピリジ
ン、（２８）２−アミノ−３，５−ジトリフルオロメチ
ルピリジン、（２９）２−アミノ−４−エチルピリジ
ン、（３０）２−アミノ−４−プロピルピリジン、（３
１）２，６−ジアミノ−４−メチルピリジン、（３２）
２−アミノ−４−フェニルピリジン、

【００４０】（３３）２−アミノ−５−ブロモ−４，６
−ジメチルピリジン、（３４）２−アミノ−４−ベンジ
ルピリジン、（３５）２−アミノ−３−メルカプトピリ
ジン、（３６）２−アミノ−３，５−ジクロロピリジ
ン、（３７）２−アミノ−３−ニトロピリジン、（３
８）２−アミノ−５−ブロモピリジン、（３９）２−ア
ミノ−５−カルボキシピリジン、（４０）２−アミノ−
５−カルバモイルピリジン、（４１）２−アミノ−５−
シアノ−４，６−ジメチルピリジン、（４２）２−アミ
ノ−３，５−ジブロモピリジン、（４３）２，５−ジア
ミノピリジン、（４４）２−アミノ−３−クロロ−５−
トリフルオロメチルピリジン、（４５）２−アミノ−６
−クロロ−３−ニトロピリジン、（４６）２−アミノ−
５−ブロモ−３−ニトロピリジン、（４７）２−アミノ
−５−メチル−３−ニトロピリジン、（４８）２−アミ
ノ−６−メチル−３−ニトロピリジン、

【００４１】（４９）２，４−ジアミノ−６−ヒドロキ
シピリジン、（５０）２−アミノ−６−メチル−５−ニ
トロピリジン、（５１）２−アミノ−３，５−ジブロモ
−６−メチルピリジン、（５２）２−アミノ−５−ブロ
モ−６−メチルピリジン、（５３）２−アミノ−３−ブ
ロモ−５−メチルピリジン、（５４）２−アミノ−５−
ブロモ−３−メチルピリジン、（５５）２，６−ジアミ
ノ−３−クロロピリジン、（５６）２−アミノ−５−ブ
ロモ−６−メチル−３−ニトロピリジン、（５７）２−
アミノ−６−ブロモ−３−メチル−５−ニトロピリジ
ン、（５８）２−アミノ−５−クロロ−３−ニトロピリ
ジン、（５９）２−アミノ−３−シアノピリジン、（６
０）２−アミノ−３−メトキシカルボニルピリジン、
（６１）２−アミノ−３−カルバモイルピリジン、（６
２）２−アミノ−６−クロロ−４−トリフルオロメチル
ピリジン、（６３）２，６−ジアミノ−４−トリフルオ
ロメチルピリジン、（６４）２−アミノ−３，５−ジク
ロロ−６−メチルピリジン、

【００４２】（６５）２−アミノ−５−クロロ−３−メ
チルピリジン、（６６）２−アミノ−３，５−ジクロロ
−４−メチルピリジン、（６７）２−アミノ−３，５−
ジクロロ−４，６−ジメチルピリジン、（６８）２−ア
ミノ−６−ブロモピリジン、（６９）２−アミノ−３−
カルボキシ−４，６−ジメチルピリジン、（７０）２−
アミノ−３−カルバモイル−４，６−ジメチルピリジ
ン、（７１）２，３−ジアミノ−５−ブロモ−６−メチ
ルピリジン、（７２）２−アミノ−３，５−ジニトロピ
リジン、（７３）２−アミノ−３−クロロ−５−ニトロ
ピリジン、（７４）２−アミノ−５−ヨードピリジン、
（７５）２，４−ジアミノ−３，５−ジシアノピリジ
ン、（７６）２，４−ジアミノ−３−シアノ−６−メト
キシピリジン、（７７）２，６−ジアミノピリジン、
（７８）２−アミノ−４−シクロプロピルピリジン、
（７９）２−アミノ−４−シクロヘキシルピリジン、
（８０）２−アミノ−４−チエニルピリジン、（８１）
２−アミノ−３−アセチルピリジン、

【００４３】

【表１】

【００４４】

【表２】

【００４５】

【表３】

【００４６】

【本発明化合物の製造方法】本発明における各化合物は
それ自体公知であるかまたは公知の方法により製造する
ことができる。例えば、一般式（Ｉ）で示される化合物
中、２−アミノ−４−メチルピリジンは市販されてい
る。

【００４７】

【毒性】また、一般式（Ｉ）で示される本発明化合物の
毒性は、非常に低いものであり、医薬として使用するた
めに十分安全であると判断できる。例えば、２−アミノ
−４メチルピリジンは、雄性マウスを用いた静注での毒
性（ＬＤ₅₀）は、３０ｍｇ／Ｋｇ以上であった。

【００４８】

【医薬品への適用】一般式（Ｉ）で示される本発明化合
物、およびそれらの非毒性塩および酸付加塩は、一酸化
窒素合成酵素を阻害する作用を有しており、特にｉ−Ｎ
ＯＳに特異性が高いため、ショック、低血圧、リウマチ
性炎症、慢性関節リウマチ、変形性関節炎、潰瘍性大腸
炎、ストレス性胃潰瘍、クローン病、自己免疫疾患、臓
器移植後の組織障害、拒絶反応、虚血再灌流障害、急性
冠微小血管塞栓、ショック性血管塞栓（汎発性血管内血
液凝固症候群（ＤＩＣ）等）、虚血性脳障害、動脈硬
化、悪性貧血、ファンコニー貧血症、鎌形赤血球性貧血
病、膵炎、ネフローゼ症候群、糸球体腎炎、インスリン
依存性糖尿病、肝性ポルフィリン症、アルコール中毒、
パーキンソン病、慢性白血病、急性白血病、腫瘍、骨髄
腫、抗癌剤副作用軽減、幼児および成人性呼吸窮迫症候
群、肺気腫、アルツハイマー症、多発性硬化症、ビタミ
ンＥ欠乏症、老化、サンバーン、筋ジストロフィー、白
内障、インフルエンザ感染症、マラリア、ＡＩＤＳ、放
射線障害・火傷、体外受精効率化等の治療および／また
は予防に有用であることが期待される。

【００４９】本発明に含まれる各有効成分およびその非
毒性の塩を上記の目的で用いるには、通常、全身的また
は局所的に、経口または非経口で投与される。投与量
は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間
等により異なるが、通常成人一人あたり、１回に１ｍｇ
〜1000ｍｇの範囲で、１日１回から数回経口投与される
か、または１回に１００μｇ〜１００ｍｇの範囲で、１
日１回から数回非経口投与（好ましくは静脈内または脳
室内投与）される。もちろん、前記したように投与量は
種々の条件で変動するので、上記投与量より少ない量で
十分な場合もあるし、また範囲を超えて投与する必要の
ある場合もある。本発明化合物を投与する際には、経口
投与のための固体組成物、液体組成物およびその他の組
成物、非経口投与のための注射剤、外用剤、坐剤等とし
て用いられる。

【００５０】経口投与のための固体組成物には、錠剤、
丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤などが含まれる。この
ような固体組成物においては、ひとつまたはそれ以上の
活性物質が、少なくともひとつの不活性な希釈剤（乳
糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセル
ロース、微結晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロ
リドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）と混合
して用いられる。

【００５１】これらの組成物は、常法に従って、不活性
な希釈剤以外の添加物、例えば潤滑剤（ステアリン酸マ
グネシウム等）、崩壊剤（線維素グリコール酸カルシウ
ム等）、溶解補助剤（アルギニン、グルタミン酸、アス
パラギン酸等）や安定化剤（ヒト血清アルブミン、ラク
トース等）を含有していてもよい。錠剤または丸剤は、
必要により胃溶性または腸溶性物質（白糖、ゼラチン、
ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメ
チルセルロースフタラート等）のフィルムで被覆してい
てもよい。カプセル剤にはハードカプセルおよびソフト
カプセルが含まれる。

【００５２】経口投与のための液体組成物としては、溶
液剤、乳濁剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤が含
まれる。このような液体組成物においては、一般的に用
いられる不活性な希釈剤（精製水、エタノール等）が含
まれる。

【００５３】これらの組成物は、不活性な希釈剤以外
に、湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味料、風味料、
芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。経口投与のため
のその他の組成物としては、１種または２種以上の活性
物質を含み、常法により処方されるスプレー剤が含まれ
る。スプレー剤は、不活性な希釈剤以外に安定化剤（亜
硫酸ナトリウム等）や等張性を与えるための緩衝剤（塩
化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸等）を含
有していてもよい。スプレー剤の製造には、例えば米国
特許第2,868,691 号、同第3,095,355 号明細書記載の方
法を用いることができる。

【００５４】非経口投与のための注射剤としては、無菌
の水性または非水性の溶液剤、懸濁剤、乳濁剤が含まれ
る。このような注射剤においては、１種または２種以上
の活性物質が少なくとも１種の不活性な水性の希釈剤
（注射用蒸留水、生理食塩水等）や不活性な非水性の希
釈剤（プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル、オリーブ油、エタノール、ポリソルベート８０（登
録商標）等）と混合して用いられている。これらの注射
剤は、さらに防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化
剤（ヒト血清アルブミン、ラクトース等）、溶解補助剤
（アルギニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、ポリビ
ニルピロリドン等）のような補助剤を含有していてもよ
い。これらは、通常、バクテリア保留フィルター等を用
いるろ過、殺菌剤の配合または照射によって無菌化され
るか、またはこれらの処理をした後、凍結乾燥等の方法
により固体組成物とし、使用直前に無菌水または無菌の
注射用希釈剤を加えて使用される。

【００５５】

【実施例】以下に、実施例を挙げて本発明をより具体的
に説明するが、これらは本発明の範囲を制限するもので
はない。

【００５６】実施例１：誘導型ＮＯＳ（ｉ−ＮＯＳ）の
阻害作用 マウスマクロファージ由来の細胞ＲＡＷ２６４．７に１
０ｎｇ／ｍｌのリポポリサッカライド（ＬＰＳ）を添加
して、２４時間後に細胞を超音波で破砕し、15,000ｒｐ
ｍの遠心上清をｉ−ＮＯＳの酵素源とした。基質として
¹⁴Ｃ標識Ｌ−アルギニンを用い、以下のようにしてＮＯ
Ｓにより変換されるＬ−シトルリンの生成量から各々の
化合物の阻害率を求めた。５０ｍＭＨｅｐｅｓ（Ｎ−２
−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ′−２−エタンスル
ホン酸）（ｐＨ7.8)、 １ｍＭ ＤＴＴ（ジチオトレイオ
ール）、１ｍＭ ＮＡＤＰＨ（還元型ニコチンアミドア
デニンジヌクレオチドリン酸）、0.1ｍＭ テトラヒドロ
ビオプテリン（ＢＨ₄）、１０μＭ ＦＡＤ（フラビン
アデニンジヌクレオチド）を含む溶液７０μｌに、1.55
ｍＭのＬ-[Ｕ-¹⁴Ｃ] アルギニン（１０μｌ）、セルホ
モジネート（Cell homogenates）上清（１０μｌ）、阻
害剤（１０μｌ）を添加し、全量を１００μｌとした。
溶液を３７℃で１０分間インキュベーションした後、Ｄ
ｏｗｅｘ ５０ＷＸ (Ｎａ⁺型,容量２５０μl)に供し、
１００ｍＭ Ｈｅｐｅｓと１０ｍＭ ＥＤＴＡ（エチレン
ジアミン四酢酸）(５００μl；ｐＨ 5.4）をＤｏｗｅｘ
５０ＷＸに通し、未反応のＬ−アルギニンを除いて、
液体シンチレーションカウンターでＮＯ合成酵素の活性
を測定した。結果を表４に示す。

【００５７】実施例２：非誘導型ＮＯＳ（ｃ−ＮＯＳ）
の阻害作用 ヒト血管内皮細胞型ＮＯＳ（ｅｃ−ＮＯＳ）をヒト胎児
ｃＤＮＡライブラリー（Library）よりクローニング
し、バキュロウィルストランスペクター（ＰＶＬ１３９
２）に挿入し、リコンビナントウィルスを得た。このウ
ィルスをｓｆ−２１細胞に感染させることにより、ヒト
ｅｃ−ＮＯＳを発現させた。このｓｆ−２１細胞を２０
ｍＭ ＣＨＡＰＳ含有ホモジネート緩衝液中、超音波で
破砕し、15,000ｒｐｍの遠心上清をヒトｅｃ−ＮＯＳの
酵素源とした。基質として¹⁴Ｃ標識Ｌ−アルギニンを用
い、以下のようにしてＮＯＳにより変換されるＬ−シト
ルリンの生成量から各々の化合物の阻害率を求めた。５
０ｍＭＨｅｐｅｓ（ｐＨ7.8)、１ｍＭ ＤＴＴ、１ｍＭ
ＣａＣｌ₂、１ｍＭ ＮＡＤＰＨ、 0.1ｍＭ テトラヒド
ロビオプテリン、１０μＭ ＦＡＤ、１０μｇ／ｍｌカ
ルモジュリンを含む溶液７０μｌに、1.55ｍＭのＬ-[Ｕ
-¹⁴Ｃ] アルギニン（１０μｌ）、セルホモジネート上
清（１０μｌ）、阻害剤（１０μｌ）を添加し、全量を
１００μlとしたものを用いて、実施例１と同様の操作
を行った。結果を表４に示す。

【００５８】

【表４】

【００５９】上記の表で明らかなように、本発明化合物
は、誘導型ＮＯＳおよび非誘導型ＮＯＳの双方に強い阻
害活性を示すことが分かる。特に誘導型に対する阻害作
用は非誘導型に対する阻害活性より強く、そのため、本
発明化合物は、定常的な一酸化窒素の発生を抑えること
なく、炎症等による一酸化窒素の産生を抑えることがで
きる。

【００６０】製剤実施例１：錠剤の製造 以下の化合物を常法により混合し、打錠して一錠中に１
００ｍｇの活性成分を含有する錠剤１００個を得た。 ・２−アミノ−４−メチルピリジン…………………………………………１０ｇ ・繊維素グリコール酸カルシウム（崩壊剤）…………………………２００ｍｇ ・ステアリン酸マグネシウム（滑沢剤）………………………………１００ｍｇ ・微結晶セルロース…………………………………………………………… 9.7ｇ 製剤実施例２：注射剤の製造 以下の各成分を常法により混合したのち、溶液を常法に
より滅菌し、５ｍｌずつ、アンプルに充填し、常法によ
り凍結乾燥し、１アンプル中、２０ｍｇの活性成分を含
有するアンプル１００本を得た。 ・２−アミノ−４−メチルピリジン……………………………………………２ｇ ・マンニット………………………………………………………………………５ｇ ・蒸留水………………………………………………………………………1000ｍｌ

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31/44 ＡＤＵ Ａ６１Ｋ 31/44 ＡＤＵ 31/435 ＡＢＡ 31/435 ＡＢＡ ＡＣＢ ＡＣＢ 31/47 ＡＢＧ 31/47 ＡＢＧ // Ｃ０７Ｄ 213/73 Ｃ０７Ｄ 213/73 215/38 215/38 221/04 221/04

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴はそれぞれ独立して、
   水素原子、Ｃ１〜６のアルキル基、Ｃ１〜６のアルコキ
   シ基、Ｃ１〜６のアルキルチオ基、Ｃ３〜７のシクロア
   ルキル基、Ｃ２〜５のアシル基、水酸基、メルカプト
   基、ハロゲン原子、トリフルオロメチル基、ニトロ基、
   シアノ基、ＣＯＯＲ⁶基（基中、Ｒ⁶は水素原子またはＣ
   １〜６のアルキル基を表わす。）、ＮＲ⁷Ｒ⁸基（基中、
   Ｒ⁷およびＲ⁸はそれぞれ独立して、水素原子またはＣ１
   〜６のアルキル基を表わす。）、ＣＯＮＲ⁹Ｒ¹⁰基（基
   中、Ｒ⁹およびＲ¹⁰はそれぞれ独立して、水素原子また
   はＣ１〜６のアルキル基を表わす。）、フェニル基、フ
   ェニル−（Ｃ１〜４）アルキル基、フェノキシ基、フェ
   ニル−（Ｃ１〜４）アルコキシ基、ベンゾイル基、ベン
   ゾイル−（Ｃ１〜４）アルキル基、チエニル基を表わす
   か、またはＲ¹およびＲ²、Ｒ²およびＲ³、またはＲ³お
   よびＲ⁴が一緒になってＣ３〜５のアルキレン基を表わ
   し、Ｒ⁵は水素原子またはＣ１〜６のアルキル基を表わ
   す。）で示される化合物、それらの非毒性塩またはそれ
   らの酸付加塩を有効成分として含有する一酸化窒素合成
   酵素阻害剤。