JPH08504204A - 薬剤の有効性の増進 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 リポソーム膜内に蘂剤を被包する工程、および、そのように被包した薬剤を、対象患者から抽出された細胞中に加える工程を含む、薬剤の有効性を増進する方法が開示されている。

Description

【発明の詳細な説明】 薬剤の有効性の増進 本発明は、薬剤の有効性を増進することに関する。 ある種の薬剤は、癌組織に対して有効なことが知られているが、正常な組織に も激しい副作用をもたらす。一般に少量だが有効量の薬剤を疾病組織に直接供給 しながら周りの正常組織には投与しないようにした標的法（targeting）という 考え方が折に触れて検討されてきた。 その手法として、新しい化学物質、たとえば、迅速な再生により主として核酸 交代の大きい細胞に影響を与えるような化学物質の合成に依存するものがある。 しかしながら、この「マジック弾丸（magic bullet）」、すなわち薬理学的手法 によるものは、腫瘍細胞が正常細胞と単に量的に異なるだけであり、毒性を産生 する傾向がある場合には困難である。 他の手法は薬剤学的標的法であり、この場合は、特別に設計された供給手段（ デリバリーデバイス）によって非選択的薬剤を活性化する。「マジックガン（ma gic gun）」システムにおいては、当該デバイスは、問題の領域のみに浸透する が、組織を不活性拡散することなく、認識現象を引き起こすようにすることが要 求されている。 標的細胞は、広く散在している細胞に到達することができる。多くの一次腫瘍 は、二次成長、すなわち転移性成長を引き起こし、これはきわめて抵抗性のある ことが多い。このような成長を殺すデバイスは、非常な進歩をもたらすであろう 。 当然想到される可能性は、自然の免疫力を利用することである。腫瘍細胞は表 面抗原を有することが知られており、この抗原は、当該宿主が成長腫瘍に抗する ことができないにもかかわらず、免疫を誘発する能力がある。この方法において は、種々のやり方で特定のモノクローナル抗体に薬剤を付着させておく。インビ トロで腫瘍細胞に接触させる場合にはうまくゆくが、インビボでは失敗している 。 本発明は、従来からの提示における問題をなくした効果的なドラッグデリバリ ー（薬剤供給）技術を提供するものである。 本発明は薬剤の有効性を増進する方法であり、本発明の方法は、リポソーム膜 内に薬剤を被包する（encapsulate）工程、および、このように被包した薬剤を 、対象患者から抽出した細胞中に加える工程を含むことを特徴とする。 本発明で用いる細胞の例は、マクロファージまたは関連する単核細胞であり、 たとえば、患者の腹膜または血液から取り出される。 抽出された細胞片は、たとえは、細胞付着防止作用を有する物質を加えた培地 に添加される。そのような物質がない場合、細胞は、たとえば培養容器の壁に付 着し、ハーベストを困難にすることがある。そのような作用物質としては、ＰＶ Ｐ被覆コロイドシリカが挙げられ、これはファルマシア社（Pharmacia Inc.）か らパーコール（Percoll）の名で販売されている。 好適な培地はＲＰＭＩ40であり、好適な組成は、10倍強度のＲＰＭＩ40培地１ 部とパーコール９部から成るものである。 細胞活性化剤、たとえばアジュバントペプチドやＭＤＰを加えることもでき、 この段階においてリポソームを添加することもあれば、そうでない場合もある。 これによって（特にリポソームを添加すると）、マクロファージが迅速に活性化 されて腫瘍破壊状態になる。 いずれの場合においても、活性化が起こるまで当該組成物中で細胞は培養され 、このとき活性化は時折顕微鏡で観察するなどにより判断される。この操作は、 体温下において、たとえば数時間を要する。 次いで、リポソームで被包された薬剤が添加され、こうして得られる組成物は 、食作用が起こるまで、すなわち細胞がリポソーム被包薬剤を吸収するようにな るまで、さらにインキュベート（培養）される。その後、薬剤が添加された細胞 は遠心分離法で分離されることができ、そして、薬剤を含まない生理的食塩溶液 に再懸濁されて患者に再導入することが可能となる。 本発明は、さらに、上述した方法を実施するためのキットに関し，、このキッ トは、培地および細胞付着防止性物質からなる組成物を含有する培養容器から構 成される。 この組成物は、さらに前述したような任意成分を含有することもできる。 当然のことであるが、調製する組成物や培養容器はすべて無菌性でなければな らず、さらに、細胞片や添加物を得るための技術も同様に無菌で行わなければな らない。

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Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． リポソーム膜内に薬剤を被包する工程、および、このように被包した薬 剤を対象患者から抽出された細胞中に加える工程を含むことを特徴とする薬剤の 有効性を増進する方法。 ２． 細胞が、マクロファージまたは関連する単核細胞であることを特徴とす る請求の範囲第１項に記載の方法。 ３． 細胞が、患者の腹膜または血液から取り出されることを特徴とする請求 の範囲第１項または第２項に記載の方法。 ４． 抽出された細胞片が、細胞付着防止作用を有する物質を加えた培地から なる組成物に添加されることを特徴とする前記請求の範囲第１項〜第３項のいず れかに記載の方法。 ５． 作用物質がＰＶＰ被覆コロイドシリカであることを特徴とする請求の範 囲第４項に記載の方法。 ６． 培地がＲＰＭＩ40であることを特徴とする請求の範囲第４項に従う方法 。 ７． 前記組成物が、10倍強度のＲＰＭＩ40培地１部と、ＰＶＰ被覆コロイド シリカ９部からなることを特徴とする前記請求の範囲第４項〜第６項のいずれか に記載の方法。 ８． 前記組成物が、さらに、アジュバントペプチドまたはＭＤＰのような細 胞活性剤を含み、この段階においてリポソームを添加するかまたは添加しないこ とを特徴とする前記請求の範囲第４項〜第７項のいずれかに記載の方法。 ９． 活性化されるまで前記組成物中において細胞が培養されることを特徴と する前記請求の範囲第４項〜第８項のいずれかに記載の方法。 10． 細胞の活性化が顕微鏡観察で判断されることを特徴とする請求の範囲第 ９項に記載の方法。 11． 食作用が起こるまで、すなわち、細胞がリポソーム被包薬剤を吸収する ようになるまで前記組成物中でリポソーム被包薬剤が培養されることを特徴とす る前記請求の範囲第４項〜第10項のいずれかに記載の方法。 12． 薬剤添加された細胞が遠心分離法で分離され、薬剤を含まない生理的食 塩溶液に再懸濁されて患者への再導入に供されることを特徴とする請求の範囲第 11項に記載の方法。 13． 培地および細胞付着防止性物質を含む組成物を含有する培養容器から構 成されることを特徴とする、請求の範囲第１項〜第12項に開示された方法を実施 するためのキット。 14． 培地および細胞付着防止性物質を含有することを特徴とする、請求の範 囲第１項〜第12項に開示するための方法を実施し、または請求の範囲第13項に開 示されたキットに使用される組成物。 15． アジュバントまたはＭＤＰのような細胞活性剤をさらに含むことを特徴 とする請求の範囲第14項に従う組成物。