JPH08253495A - Mannose structure-containing styrene derivative and polystyrene derivative and their production - Google Patents
Mannose structure-containing styrene derivative and polystyrene derivative and their productionInfo
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は新規な糖鎖含有化合物、
特に、マンノース構造を含有するスチレン誘導体とその
製法、並びにそのスチレン誘導体を重合したマンノース
構造を含有するポリスチレン誘導体及びその製法に関す
る。The present invention relates to a novel sugar chain-containing compound,
In particular, the present invention relates to a styrene derivative having a mannose structure, a method for producing the same, a polystyrene derivative having a mannose structure obtained by polymerizing the styrene derivative, and a method for producing the same.
【０００２】[0002]
【従来の技術】近年の糖鎖工学の進歩には目ざましいも
のがある。例えば、糖鎖を有する生体高分子としては、
細胞の安定化に寄与する植物細胞の細胞壁のプロテオグ
リカン、細胞の分化、増殖、接着、移動等に影響を与え
る糖脂質、及び細胞間相互作用や細胞認識に関与してい
る糖タンパク質等が挙げられるが、これらの高分子の糖
鎖が、互いに機能を代行、補助、増幅、調節、あるいは
阻害しあいながら高度で精密な生体反応を制御する機構
が次第に明らかにされつつある。2. Description of the Related Art Recent advances in sugar chain engineering have been remarkable. For example, as a biopolymer having a sugar chain,
Proteoglycans of the cell wall of plant cells that contribute to cell stabilization, glycolipids that affect cell differentiation, proliferation, adhesion, migration, etc., and glycoproteins involved in cell-cell interaction and cell recognition, etc. However, the mechanism by which sugar chains of these macromolecules control high-precision biological reactions while acting, assisting, amplifying, regulating, or inhibiting functions of each other is gradually being clarified.
【０００３】さらに、このような糖鎖と細胞の分化増
殖、細胞接着、免疫、及び細胞の癌化との関係が明確に
されれば、この糖鎖工学と、医学、細胞工学、あるいは
臓器工学とを密接に関連させて新たな展開を図ることが
期待できる。Furthermore, if the relationship between such sugar chains and cell differentiation / proliferation, cell adhesion, immunity, and cell carcinogenesis is clarified, this sugar chain engineering and medical, cell engineering, or organ engineering is performed. It can be expected that new developments will be made by closely linking and.
【０００４】その一例として、細胞表面の糖鎖や、糖鎖
-レセプター間の相互作用異常による疾病の発生、ある
いはエイズなどのウイルス感染における糖鎖の役割等に
関する研究が活発化してきている。また、細胞-細胞間
相互作用、細胞-マトリックス間相互作用における糖鎖
の関与に関する研究も、生体反応を理解する上で重要に
なってきている。[0004] As one example, sugar chains on the cell surface and sugar chains
-Research on the role of sugar chains in the occurrence of diseases caused by abnormal interactions between receptors or in the infection of viruses such as AIDS is becoming active. In addition, studies on the involvement of sugar chains in cell-cell interactions and cell-matrix interactions have also become important for understanding biological reactions.
【０００５】各種細胞による糖鎖認識の特異性について
例示すると、肝実質細胞はガラクトース（Ｇａｌ）やマ
ンノース（Ｍａｎ）を選択的に認識するのに対し、肝非
実質細胞はＭａｎ、グルコース（Ｇｌｃ）、Ｎ-アセチ
ルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）に対する親和性が高
い。血清組織はＭａｎ、ＧｌｃＮＡｃ、及びＮ-アセチ
ルマンノサミン（ＭａｎＮＡｃ）を、リンパ組織はＭａ
ｎＮＡｃ及びＧｌｃＮＡｃを特異的に認識する。To illustrate the specificity of sugar chain recognition by various cells, hepatic parenchymal cells selectively recognize galactose (Gal) and mannose (Man), whereas hepatic non-parenchymal cells have Man and glucose (Glc). , N-acetylglucosamine (GlcNAc) has a high affinity. Serum tissue was Man, GlcNAc, and N-acetylmannosamine (ManNAc), and lymphoid tissue was Ma.
It specifically recognizes nNAc and GlcNAc.
【０００６】また、各種細胞表面に存在するマクロファ
ージ上のアシアロ糖タンパク質やレクチン様タンパク質
等の糖鎖認識タンパク質も、各々選択的に糖鎖を認識す
る。例えば、肺胞マクロファージ上の分子量１７５Ｋの
タンパク質は、Ｍａｎ、フコース（Ｆｕｃ）、及びＧｌ
ｃＮＡｃを、腹腔マクロファージ上の分子量１８０Ｋの
タンパク質はＭａｎ、Ｆｕｃ、及びＧｌｃＮＡｃを、ラ
ットクッパー細胞上の分子量３０Ｋのタンパク質、腹腔
マクロファージ上の分子量４２Ｋのタンパク質、及び活
性化マクロファージ上の分子量４５〜６０Ｋのタンパク
質はＧａｌ及びＮ-アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮ
Ａｃ）を、各々特異的に認識する。[0006] Further, sugar chain recognizing proteins such as asialoglycoprotein and lectin-like protein on macrophages existing on the surface of various cells also selectively recognize sugar chains. For example, a protein with a molecular weight of 175K on alveolar macrophages is represented by Man, Fuc, and Gl.
cNAc, 180K molecular weight protein on peritoneal macrophages Man, Fuc, and GlcNAc, 30K molecular weight protein on rat Kupffer cells, 42K molecular weight protein on peritoneal macrophage, and 45-60K molecular weight on activated macrophages. The proteins are Gal and N-acetylgalactosamine (GalN
Ac) is specifically recognized.
【０００７】本発明者らは、従来から糖鎖の特異的な親
和力に着目し鋭意研究を行ってきており、例えば、アシ
アロ糖タンパク質レセプターに対するリガンドのモデル
として、ガラクトースを側鎖に有する高分子であるポリ
（Ｎ-ｐ-ビニルベンジル-［Ｏ-β-Ｄ-ガラクトピラノシ
ル-（１→４）-Ｄ-グルコンアミド］）（ＰＶ-ＬＡと略
記）を設計・合成した。[0007] The inventors of the present invention have been intensively researching by focusing on the specific affinity of sugar chains. For example, as a model of a ligand for an asialoglycoprotein receptor, a polymer having galactose as a side chain is used. A poly (Np-vinylbenzyl- [O-β-D-galactopyranosyl- (1 → 4) -D-gluconamide]) (abbreviated as PV-LA) was designed and synthesized.
【０００８】例えば、このＰＶ-ＬＡを被覆したシャー
レ上での肝細胞の培養実験において、ＰＶ-ＬＡと肝実
質細胞表面のアシアロ糖レセプターとの特異的親和力を
介して肝実質細胞が選択的に接着され、しかもその接着
形態が特異的であって三次元の自己集合体が導かれるこ
とを見いだした。（由良洋文、赤池敏宏、「細胞培
養」、第１９巻、３１７−３２２頁、１９９３年）。[0008] For example, in an experiment for culturing hepatocytes on a Petri dish coated with PV-LA, hepatocytes are selectively selected through the specific affinity between PV-LA and the asialoglycoreceptor on the surface of hepatocytes. It was found that the three-dimensional self-assembly was guided by the adhesion and the specific adhesion form. (Yura, Y., Akaike, Toshihiro, "Cell Culture", Vol. 19, 317-322, 1993).
【０００９】しかしながら、これまでにマンノース構造
を含有する糖鎖含有高分子は得られていなかった。本発
明者らは、このマンノース構造を含有する単量体の設計
・合成及びその単量体の重合に関して詳細に検討した結
果、本発明をなすに至った。However, no sugar chain-containing polymer containing a mannose structure has been obtained so far. The present inventors have completed the present invention as a result of detailed investigations on the design and synthesis of a monomer containing this mannose structure and the polymerization of the monomer.
【００１０】[0010]
【発明が解決しようとする課題】よって本発明における
課題は、マンノース構造を含有する新規な単量体及びそ
の製法、並びに、その単量体を重合して得られる糖鎖含
有高分子を提供することにある。Therefore, an object of the present invention is to provide a novel monomer having a mannose structure, a process for producing the same, and a sugar chain-containing polymer obtained by polymerizing the monomer. Especially.
【００１１】[0011]
【課題を解決するための手段】本発明では、マンノビオ
ース（正式名：Ｏ-β-Ｄ-マンノピラノシル-（１→４）
-Ｄ-マンノピラノース）をアミド結合を介してスチレン
誘導体に結合してなるマンノース構造含有スチレン誘導
体により上記課題を解決した。即ち、本発明は、スチレ
ン誘導体とマンノビオースとから合成したマンノース構
造含有単量体、及び、その単量体を重合することによっ
て得られるマンノース構造含有高分子を提供する。In the present invention, mannobiose (formal name: O-β-D-mannopyranosyl- (1 → 4)) is used.
The above-mentioned problems were solved by a styrene derivative having a mannose structure, which is formed by binding -D-mannopyranose) to a styrene derivative through an amide bond. That is, the present invention provides a mannose structure-containing monomer synthesized from a styrene derivative and mannobiose, and a mannose structure-containing polymer obtained by polymerizing the monomer.
【００１２】本発明のマンノース構造含有スチレン誘導
体は、スチレン誘導体とマンノビオースラクトンとがア
ミド結合を介して結合したものである。このマンノビオ
ースを導入する位置は、ｐ-位が好ましいが、それに限
られることなく、ｏ-位、ｍ-位、またはそれらの混合物
であってもよい。さらに、本発明のマンノース構造含有
スチレン誘導体は、そのスチレン誘導体をなすベンゼン
環の水素原子が、メチル、エチル、プロピル等のアルキ
ル基、アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、脂
環式基等の他の置換基によって置換されていてもよい。The mannose structure-containing styrene derivative of the present invention comprises a styrene derivative and mannobiose lactone linked via an amide bond. The position for introducing mannobiose is preferably the p-position, but is not limited thereto, and may be the o-position, m-position, or a mixture thereof. Further, the mannose structure-containing styrene derivative of the present invention has a hydrogen atom of a benzene ring forming the styrene derivative, other than an alkyl group such as methyl, ethyl and propyl, an alkoxy group, a hydroxy group, a halogen atom, an alicyclic group and the like. It may be substituted by the substituent of.
【００１３】本発明にあっては、それらの中でも、下記
式（１）で表されるように、ｐ-ビニルベンジルアミン
のアミノ基とマンノビオースラクトンのカルボニル基と
でアミド結合を形成したビニルベンジルマンノビオース
ラクトンアミド（正式名：Ｎ-ｐ-ビニルベンジル-［Ｏ-
β-Ｄ-マンノピラノシル-（１→４）-Ｄ-マンナアミ
ド］）が好ましい。In the present invention, among them, as shown by the following formula (1), vinyl in which an amide bond is formed by an amino group of p-vinylbenzylamine and a carbonyl group of mannobiose lactone. Benzylmannobiose lactonamide (formal name: Np-vinylbenzyl- [O-
β-D-mannopyranosyl- (1 → 4) -D-mannamide]) is preferred.
【００１４】[0014]
【化３】 Embedded image
【００１５】このビニルベンジルマンノビオースラクト
ンアミド（以後、ＶＢ-Ｍａｎと略記する）は、マンノ
ビオースの１位をラクトン化してマンノビオースラクト
ンとし、そのマンノビオースラクトンとビニルベンジル
アミドのベンジルアミンとの間にアミド結合を形成させ
ることにより合成される。以下に、このＶＢ-Ｍａｎの
製法を具体的に詳述する。This vinylbenzylmannobiose lactone amide (hereinafter abbreviated as VB-Man) is obtained by lactonizing the 1-position of mannobiose to mannobiose lactone, and mannobiose lactone and benzylamine of vinylbenzylamide. It is synthesized by forming an amide bond between. The method for producing VB-Man will be described in detail below.
【００１６】（１）マンノビオースのラクトン化 マンノビオースを蒸留水に分散させてメタノールで希釈
する。その希釈した分散液を、加温したヨウ素のメタノ
ール溶液に加え、撹拌した後、水酸化カリウム／メタノ
ール溶液をヨウ素の色が消失するまで徐々に添加する。
引き続き、反応液を氷冷し、析出した沈澱を濾取する。
沈澱を洗浄し再結晶することにより酸カリウム塩を得
る。(1) Lactonization of mannobiose Mannobiose is dispersed in distilled water and diluted with methanol. The diluted dispersion is added to a warm iodine methanol solution, and after stirring, a potassium hydroxide / methanol solution is gradually added until the color of iodine disappears.
Subsequently, the reaction solution is cooled with ice, and the deposited precipitate is collected by filtration.
The acid potassium salt is obtained by washing and recrystallizing the precipitate.
【００１７】得られたカリウム塩を、イオン交換樹脂に
通すことにより酸型とし、その酸型の分画にメタノール
を加えて減圧濃縮して結晶を得る。その結晶を少量のメ
タノールに溶かし、さらにエーテルを加えて沈澱させる
という操作を数回繰り返した後、減圧乾固してマンノビ
オースラクトンを得る。The potassium salt thus obtained is passed through an ion exchange resin to give an acid form, and methanol is added to the acid form fraction to concentrate under reduced pressure to obtain crystals. The crystals are dissolved in a small amount of methanol, and ether is further added to cause precipitation, which is repeated several times, and then dried under reduced pressure to obtain mannobiose lactone.
【００１８】（２）ＶＢ-Ｍａｎの合成 上記のマンノビオースラクトンをメタノールに溶解し、
ｐ-ビニルベンジルアミンのメタノール溶液を加熱還流
下で加えた。１２０分間加熱還流した後、アセトンを加
えて結晶化させる。得られた結晶をカラム精製し、ＶＢ
-Ｍａｎ分画を凍結乾燥して目的とするＶＢ-Ｍａｎを得
る。(2) Synthesis of VB-Man The above mannobiose lactone was dissolved in methanol,
A solution of p-vinylbenzylamine in methanol was added with heating under reflux. After heating under reflux for 120 minutes, acetone is added for crystallization. The obtained crystals are purified by column, and VB
-The Man fraction is lyophilized to obtain the desired VB-Man.
【００１９】本発明のマンノース構造含有スチレン誘導
体の製法は、マンノビオースをラクトン化し、そのマン
ノビオースラクトンとスチレン誘導体との間にアミド結
合を形成させて合成する方法であればよく、上記の例に
限定されるものではない。例えば、マンノビオースをラ
クトン化する際に使用する酸化剤としては、ヨウ素以外
に、臭素、塩素等が使用できる。また、スチレン誘導体
が他の置換基を有することにより溶解性が変化した場合
には、それに応じて適当な溶媒が選択される。The mannose structure-containing styrene derivative of the present invention may be produced by lactonizing mannobiose and forming an amide bond between the mannobiose lactone and the styrene derivative to synthesize it. It is not limited. For example, as the oxidizing agent used when mannobiose is lactonized, bromine, chlorine and the like can be used in addition to iodine. Further, when the styrene derivative has another substituent and thus the solubility is changed, an appropriate solvent is selected accordingly.
【００２０】本発明の製法で使用するマンノビオース
は、日下部等の方法（日下部 功ら、Agric. Biol. Che
m., Vol.51, No.10, pp.2825-2826, (1987)）により、
コプラ搾油残渣マンナンに、アスペルギルス属、バチル
ス属、トリコデルマ属、ペニシリウム属に属する微生物
から得られるβ-マンナーゼを作用させ調整することが
できる。また、ｐ-ビニルベンジルアミンは、市販のも
のを用いてもよいが、種々の方法で合成することもで
き、例えば以下のようにして合成するのが好ましい。出
発原料としてｐ-クロロメチルスチレンとフタルイミド
とを用い、それらを反応させることにより、ｐ-ビニル
ベンジルフタルイミドとする。得られたｐ-ベンジルフ
タルイミドを、ヒドラジンで還元することによりｐ-ビ
ニルベンジルアミンが得られる。Mannobiose used in the production method of the present invention can be prepared by the method of Kusakabe et al. (Kusube Kusaku et al., Agric. Biol.
m., Vol.51, No.10, pp.2825-2826, (1987)),
The β-mannanase obtained from a microorganism belonging to the genus Aspergillus, the genus Bacillus, the genus Trichoderma, and the genus Penicillium can be caused to act on the copra oil residue mannan. Although commercially available p-vinylbenzylamine may be used, it can be synthesized by various methods. For example, it is preferable to synthesize as follows. P-Chloromethylstyrene and phthalimide are used as starting materials, and they are reacted to obtain p-vinylbenzylphthalimide. The obtained p-benzylphthalimide is reduced with hydrazine to obtain p-vinylbenzylamine.
【００２１】本発明は、マンノース構造を有するポリス
チレン誘導体をも提供する。このマンノース構造含有ポ
リスチレン誘導体は、上記のマンノース構造含有スチレ
ン誘導体を重合したものを基本構造とするものである。
即ち、本発明のマンノース構造含有ポリスチレンは、ポ
リスチレン誘導体を主鎖とし、その主鎖にマンノビオー
スを側鎖としてアミド結合させたものが好ましい。The present invention also provides a polystyrene derivative having a mannose structure. The mannose structure-containing polystyrene derivative has a basic structure obtained by polymerizing the mannose structure-containing styrene derivative.
That is, it is preferable that the mannose structure-containing polystyrene of the present invention has a polystyrene derivative as a main chain and amide bonds with mannobiose as a side chain on the main chain.
【００２２】このマンノビオースは、主鎖のｐ-位に結
合されているのが好ましいが、それに限られることな
く、ｏ-位、ｍ-位、またはそれらの混合物であってもよ
い。さらに、本発明のマンノース構造含有ポリスチレン
誘導体は、その主鎖のポリスチレン誘導体をなすベンゼ
ン環の水素原子が、メチル、エチル、プロピル等のアル
キル基、アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、
脂環式基等の他の置換基によって置換されていてもよ
い。The mannobiose is preferably bonded to the p-position of the main chain, but is not limited thereto, and may be the o-position, m-position, or a mixture thereof. Further, in the mannose structure-containing polystyrene derivative of the present invention, the hydrogen atom of the benzene ring forming the polystyrene derivative of the main chain is an alkyl group such as methyl, ethyl or propyl, an alkoxy group, a hydroxy group, a halogen atom,
It may be substituted with another substituent such as an alicyclic group.
【００２３】本発明のマンノース構造含有ポリスチレン
は、これらの中でも、例えば下記式（２）で表されるポ
リ（ｐ-ビニルベンジルマンノビオースラクトンアミ
ド）（正式名：ポリ（Ｎ-ｐ-ビニルベンジル-［Ｏ-β-
Ｄ-マンノピラノシル-（１→４）-Ｄ-マンナアミ
ド］）、以後ＰＶ-Ｍａｎと略記する）が好ましい。Among them, the mannose structure-containing polystyrene of the present invention is, for example, poly (p-vinylbenzylmannobiose lactone amide) represented by the following formula (2) (formal name: poly (Np-vinylbenzyl)). -[O-β-
D-mannopyranosyl- (1 → 4) -D-mannanamide]), hereinafter abbreviated as PV-Man) is preferred.
【００２４】[0024]
【化４】 [Chemical 4]
【００２５】本発明のマンノース構造含有ポリスチレン
誘導体は、上記したマンノース構造含有スチレン誘導体
を重合させることにより合成することができる。その重
合条件は、一般のスチレン誘導体の重合に用いられてい
る条件が使用でき、特に限定されるものではない。例え
ば、マンノース含有スチレン誘導体を、水、ジメチルス
ルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭ
Ｆ）等の適当な溶媒に溶解し、アゾビスイソブチロニト
リル（ＡＩＢＮ）等のアゾ化合物、過硫酸カリウム等の
過硫酸塩、過酸化ベンゾイル等の過酸化物といったラジ
カル重合開始剤を添加して加熱重合させればよい。この
ような溶液重合の他にも、塊状重合、乳化重合、懸濁重
合等の方法を用いてもよい。The mannose structure-containing polystyrene derivative of the present invention can be synthesized by polymerizing the mannose structure-containing styrene derivative. The polymerization conditions may be the same as those used for the polymerization of general styrene derivatives, and are not particularly limited. For example, a mannose-containing styrene derivative can be prepared by adding water, dimethyl sulfoxide (DMSO), dimethylformamide (DM
F) dissolved in a suitable solvent, and added with a radical polymerization initiator such as an azo compound such as azobisisobutyronitrile (AIBN), a persulfate such as potassium persulfate, or a peroxide such as benzoyl peroxide. And heat-polymerize. In addition to such solution polymerization, methods such as bulk polymerization, emulsion polymerization and suspension polymerization may be used.
【００２６】本願のマンノース構造含有ポリスチレン誘
導体は、マンノース構造含有スチレン誘導体を単独重合
させたホモポリマーとするのが好ましいが、他の単量体
と共重合させてもよい。例えば、スチレン、エチレン、
プロピレン、アクリル酸、メタクリル酸、メタクリル酸
メチル等の疎水性単量体と共重合させれば、得られるマ
ンノース構造含有ポリスチレン誘導体は疎水性の強いも
のとなり、酢酸ビニル等の親水性単量体と共重合させれ
ば、得られるマンノース構造含有ポリスチレン誘導体は
親水性の強いものとなる。The mannose structure-containing polystyrene derivative of the present application is preferably a homopolymer obtained by homopolymerizing the mannose structure-containing styrene derivative, but may be copolymerized with another monomer. For example, styrene, ethylene,
When copolymerized with a hydrophobic monomer such as propylene, acrylic acid, methacrylic acid, or methyl methacrylate, the obtained mannose structure-containing polystyrene derivative has strong hydrophobicity, and can be treated with a hydrophilic monomer such as vinyl acetate. When copolymerized, the obtained mannose structure-containing polystyrene derivative becomes strongly hydrophilic.
【００２７】また、本願のマンノース含有ポリスチレン
誘導体は、マンノビオースラクトンとアミド結合可能な
官能基を有する単量体を重合した後にマンノビオースラ
クトンを結合させても合成できる。但し、１分子中に導
入されるマンノースの数を制御できることから、マンノ
ース含有スチレン誘導体を重合するのが好ましい。The mannose-containing polystyrene derivative of the present application can also be synthesized by polymerizing a monomer having a functional group capable of forming an amide bond with mannobiose lactone and then binding mannobiose lactone. However, it is preferable to polymerize the mannose-containing styrene derivative because the number of mannose introduced into one molecule can be controlled.
【００２８】このマンノース構造含有ポリスチレン誘導
体の分子量は、その用途によって適宜設定されるが、例
えば水溶液にして使用する場合は、水溶液中に溶解させ
た際にミセルを形成して可溶化する程度とするのが好ま
しく、マンノース構造含有スチレン誘導体のホモポリマ
ーの場合は３万から５万程度のものが通常用いられる。
この場合、例えば親水性基を有する単量体との共重合体
とすることにより、その親水性基によって上記の範囲を
はずれる分子量を有しても水溶性が保たれるものも好適
に使用される。The molecular weight of the mannose structure-containing polystyrene derivative is appropriately set depending on its use. For example, when the mannose structure-containing polystyrene derivative is used in the form of an aqueous solution, the molecular weight of the polystyrene derivative is such that when it is dissolved in the aqueous solution, it forms micelles. In the case of a homopolymer of a styrene derivative containing a mannose structure, a homopolymer having a mannose structure of 30,000 to 50,000 is usually used.
In this case, for example, by using a copolymer with a monomer having a hydrophilic group, a hydrophilic group having a molecular weight outside the above range and maintaining water solubility is also preferably used. It
【００２９】[0029]
（実施例１） （１）マンノビオースのラクトン化 マンノビオース５ｇを蒸留水１７．５ｍｌに分散させ、
その分散液を２６．３ｍｌのメタノールで希釈する。そ
の希釈した分散液を、４０℃の加温したヨウ素のメタノ
ール溶液（１５ｇ／１７５ｍｌ）に加え、３０分間撹拌
した後、４％の水酸化カリウム／メタノール溶液を、ヨ
ウ素の色が消失するまで徐々に添加した。３５０ｍｌの
水酸化カリウム／メタノール溶液の添加でヨウ素の色が
消失した。引き続き、反応液を氷冷し、析出した沈澱を
濾取した。沈澱を冷エタノール、冷エーテルの順で洗浄
し、エタノール／水［９：１（重量／容量）］から再結
晶することによりカリウム塩を得た。(Example 1) (1) Lactonization of mannobiose 5 g of mannobiose was dispersed in 17.5 ml of distilled water,
The dispersion is diluted with 26.3 ml of methanol. The diluted dispersion was added to a methanol solution of iodine (15 g / 175 ml) heated at 40 ° C. and stirred for 30 minutes, and then 4% potassium hydroxide / methanol solution was gradually added until the color of iodine disappeared. Was added to. The color of iodine disappeared upon addition of 350 ml of potassium hydroxide / methanol solution. Subsequently, the reaction solution was ice-cooled, and the deposited precipitate was collected by filtration. The precipitate was washed with cold ethanol and cold ether in this order, and recrystallized from ethanol / water [9: 1 (weight / volume)] to obtain a potassium salt.
【００３０】得られたカリウム塩を、イオン交換樹脂
（例えば、アンバーライトＩＲ-１２Ｂ（Ｈ+型））に通
すことにより酸型とした。その酸型の分画にメタノール
を加えて減圧濃縮して結晶を得た。その結晶に少量のメ
タノールを加えて溶かし、さらにエタノールを加えて脱
水濃縮するという操作を５回繰り返した後、減圧乾固し
て、３．６ｇ（収率７２％）の目的とするマンノビオー
スラクトンを得た。The obtained potassium salt was converted to the acid form by passing it through an ion exchange resin (for example, Amberlite IR-12B (H + type)). Methanol was added to the acid fraction and concentrated under reduced pressure to give crystals. After repeating the procedure of adding a small amount of methanol to the crystals to dissolve the crystals and further adding ethanol to dehydrate and concentrate, the mixture was dried under reduced pressure to give 3.6 g (yield 72%) of the desired mannobiose. The lactone was obtained.
【００３１】（２）ＶＢ-Ｍａｎの合成 上記のマンノビオースラクトン１．３ｇをメタノール３
０ｍｌに溶解し、その溶液に、ｐ-ビニルベンジルアミ
ンのメタノール溶液（０．５３ｇ／０．５ｍｌ）を、加
熱還流下で加えた。１２０分間加熱還流した後、アセト
ン２００ｍｌを加えて結晶化させた。得られた結晶を、
蒸留水を展開溶媒としてカラム（ＨＷ４０Ｈトヨパー
ル）に通して精製し、ＵＶ測定（２５０ｎｍ、２８０ｎ
ｍ）にて確認したＶＢ-Ｍａｎの分画を凍結乾燥し、
１．０ｇ（収率７７％）の目的とするＶＢ-Ｍａｎを得
た。(2) Synthesis of VB-Man 1.3 g of the above mannobiose lactone was added to methanol 3
It was dissolved in 0 ml, and a solution of p-vinylbenzylamine in methanol (0.53 g / 0.5 ml) was added to the solution while heating under reflux. After heating under reflux for 120 minutes, 200 ml of acetone was added for crystallization. The obtained crystals are
Purified by passing through a column (HW40H Toyopearl) with distilled water as a developing solvent, and UV measurement (250 nm, 280 n
m) was confirmed by freeze-drying the VB-Man fraction,
1.0 g (yield 77%) of the desired VB-Man was obtained.
【００３２】（３）ＶＢ-Ｍａｎの構造確認 得られたＶＢ-Ｍａｎを、1Ｈ-ＮＭＲ及び13Ｃ-ＮＭＲに
より構造を確認した。得られたＮＭＲスペクトルを、1
Ｈ-ＮＭＲに関しては図１に、13Ｃ-ＮＭＲに関しては図
２に各々示す。図１には、３．２〜４．０ｐｐｍにマン
ノビオースに由来するピーク、５．２〜６．８ｐｐｍに
ビニル基の二重結合に由来するピーク、７．４ｐｐｍ付
近にスチレン骨格のベンゼンに由来するピークが見られ
た。図２には、４３．４３９ｐｐｍにＮＨ−ＣＨ2のピ
ーク、６２．２７７〜７８．１９８ｐｐｍにマンノース
のピーク、１０１．０１８ｐｐｍにβ結合されている１
位の炭素のピークが見られた。さらに、１１５．２６８
ｐｐｍにビニル基の二重結合のピーク、１２７．４１５
〜１３８．５０２ｐｐｍ付近にスチレン骨格のベンゼン
のピーク、１７５．５００ｐｐｍにアミド結合のＣ＝Ｏ
のピークが見られた。これらの結果からＶＢ-Ｍａｎの
構造が明らかに確認された。(3) Structure confirmation of VB-Man The structure of the obtained VB-Man was confirmed by 1 H-NMR and 13 C-NMR. The resulting NMR spectrum, 1
1 H-NMR is shown in FIG. 1 and 13 C-NMR is shown in FIG. In FIG. 1, a peak derived from mannobiose at 3.2 to 4.0 ppm, a peak derived from a double bond of a vinyl group at 5.2 to 6.8 ppm, and a peak derived from benzene of a styrene skeleton at around 7.4 ppm. A peak was seen. In FIG. 2, the NH—CH 2 peak at 43.439 ppm, the mannose peak at 62.277 to 78.198 ppm, and β-bonded at 101.018 ppm 1
Carbon peaks were seen. Furthermore, 115.268
Peak of double bond of vinyl group at ppm: 127.415
The peak of benzene in the styrene skeleton around 138.502 ppm, and C = O of the amide bond at 175.500 ppm.
The peak of was seen. From these results, the structure of VB-Man was clearly confirmed.
【００３３】（実施例２） ＶＢ-Ｍａｎの重合（ＰＶ-Ｍａｎの合成） 実施例１で合成したＶＢ-Ｍａｎ（１ｇ）をＤＭＳＯ
（１ｍｌ）に溶解し、重合開始剤としてＡＩＢＮ（１ｍ
ｇ）を添加した。その溶液を窒素下で６０℃に加熱して
２４時間重合させ、ＰＶ-Ｍａｎを得た。数平均分子量
は約４０，０００であった。Example 2 Polymerization of VB-Man (Synthesis of PV-Man) VB-Man (1 g) synthesized in Example 1 was added to DMSO.
Dissolve in (1 ml) and use AIBN (1 m
g) was added. The solution was heated to 60 ° C. under nitrogen and polymerized for 24 hours to obtain PV-Man. The number average molecular weight was about 40,000.
【００３４】[0034]
【発明の効果】本発明によれば、これまでになかったマ
ンノース構造を有する単量体及びマンノース構造を側鎖
に有する高分子が提供される。本発明のマンノース構造
含有ポリスチレンでは、疎水性の主鎖に、マンノビオー
スが側鎖として結合しているので、例えばポリスチレン
シャーレ等の疎水性基材に吸着させやすく、例えば、マ
ンノース修飾したシャーレ等を容易に作ることができ
る。EFFECTS OF THE INVENTION According to the present invention, there are provided a monomer having a mannose structure, which has never existed before, and a polymer having a mannose structure in its side chain. In the mannose structure-containing polystyrene of the present invention, since mannobiose is bonded as a side chain to the hydrophobic main chain, it is easy to adsorb it onto a hydrophobic substrate such as a polystyrene dish, for example, a mannose-modified dish is easy. Can be made into
【００３５】また、高分子化することにより、高密度に
存在するマンノース構造によるクラスター効果が得られ
る。本発明のマンノース構造含有スチレン誘導体及びポ
リスチレン誘導体は、細胞との特異的親和性を有するマ
ンノース構造を有しているため、例えば細胞培養基材や
ハイブリッド型人工臓器等への応用が可能である。Further, by polymerizing the polymer, a cluster effect due to the mannose structure existing at high density can be obtained. Since the mannose structure-containing styrene derivative and polystyrene derivative of the present invention have a mannose structure having a specific affinity with cells, they can be applied to, for example, cell culture substrates and hybrid artificial organs.
【図１】 実施例１で合成したＶＢ-Ｍａｎの1Ｈ-ＮＭ
Ｒスペクトルを示す図である。FIG. 1 1 H-NM of VB-Man synthesized in Example 1
It is a figure which shows R spectrum.
【図２】 実施例１で合成したＶＢ-Ｍａｎの13Ｃ-ＮＭ
Ｒスペクトルを示す図である。FIG. 2 shows 13 C-NM of VB-Man synthesized in Example 1.
It is a figure which shows R spectrum.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 赤池 敏宏 東京都保谷市下保谷４−15−23 (72)発明者 小林 一清 愛知県愛知郡東郷町白鳥４−７−107−403 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (72) Inventor Toshihiro Akaike 4-15-23 Shimohoya, Hoya-shi, Tokyo (72) Inventor Issei Kobayashi 4-7-107-403 Shiratori, Togo-cho, Aichi-gun, Aichi Prefecture
Claims (6)
チレン誘導体に結合してなることを特徴とするマンノー
ス構造含有スチレン誘導体。1. A styrene derivative having a mannose structure, characterized in that mannobiose is bound to a styrene derivative through an amide bond.
る請求項１記載のマンノース構造含有スチレン誘導体。 【化１】 2. The styrene derivative having a mannose structure according to claim 1, which is represented by the following formula (1). Embedded image
ビオースラクトンとし、このマンノビオースラクトンと
ビニルベンジルアミンとを反応させてビニルベンジルマ
ンノビオースラクトンアミドを合成することからなるマ
ンノース構造含有スチレン誘導体の製法。3. A method for producing a styrene derivative having a mannose structure, which comprises lactonizing mannobiose to give mannobiose lactone and reacting mannobiose lactone with vinylbenzylamine to synthesize vinylbenzyl mannobiose lactone amide. .
リスチレン誘導体に結合してなることを特徴とするマン
ノース構造含有ポリスチレン誘導体。4. A mannose structure-containing polystyrene derivative, characterized in that mannobiose is bound to the polystyrene derivative through an amide bond.
る請求項４記載のマンノース構造含有ポリスチレン誘導
体。 【化２】 5. The polystyrene derivative containing a mannose structure according to claim 4, which is represented by the following formula (2). Embedded image
ビオースラクトンとし、このマンノビオースラクトンと
ビニルベンジルアミンとを反応させてビニルベンジルマ
ンノビオースラクトンアミドを合成し、得られたビニル
ベンジルマンノビオースラクトンアミドを重合すること
をからなるマンノース構造含有ポリスチレン誘導体の製
法。6. Mannobiose is lactonized into mannobiose lactone, and this mannobiose lactone is reacted with vinylbenzylamine to synthesize vinylbenzyl mannobiose lactone amide, and the obtained vinylbenzyl mannobiose lactone is obtained. A method for producing a polystyrene derivative containing a mannose structure, which comprises polymerizing an amide.
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|---|---|---|---|
| JP5957595A JPH08253495A (en) | 1995-03-17 | 1995-03-17 | Mannose structure-containing styrene derivative and polystyrene derivative and their production |
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| JP (1) | JPH08253495A (en) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005112987A (en) * | 2003-10-07 | 2005-04-28 | Celagix:Kk | Anti-thrombogenic copolymer |
| WO2008117644A1 (en) * | 2007-03-23 | 2008-10-02 | Jsr Corporation | Coating composition and usage thereof |
| WO2009136563A1 (en) * | 2008-05-09 | 2009-11-12 | 有限会社セラジックス | Moisturizing agent |
| WO2010074097A1 (en) * | 2008-12-24 | 2010-07-01 | Jsr株式会社 | Graft polymer manufacturing method |
| JP2011522040A (en) * | 2008-06-05 | 2011-07-28 | アールエヌエル バイオ カンパニー リミテッド | Novel diarylhepatonoid compounds and uses thereof |
-
1995
- 1995-03-17 JP JP5957595A patent/JPH08253495A/en active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005112987A (en) * | 2003-10-07 | 2005-04-28 | Celagix:Kk | Anti-thrombogenic copolymer |
| JP4631263B2 (en) * | 2003-10-07 | 2011-02-16 | Ｊｓｒ株式会社 | Antithrombotic copolymer |
| WO2008117644A1 (en) * | 2007-03-23 | 2008-10-02 | Jsr Corporation | Coating composition and usage thereof |
| JP5419682B2 (en) * | 2007-03-23 | 2014-02-19 | Ｊｓｒ株式会社 | Coating composition and method of use thereof |
| WO2009136563A1 (en) * | 2008-05-09 | 2009-11-12 | 有限会社セラジックス | Moisturizing agent |
| JP2011522040A (en) * | 2008-06-05 | 2011-07-28 | アールエヌエル バイオ カンパニー リミテッド | Novel diarylhepatonoid compounds and uses thereof |
| WO2010074097A1 (en) * | 2008-12-24 | 2010-07-01 | Jsr株式会社 | Graft polymer manufacturing method |
| JP2010150312A (en) * | 2008-12-24 | 2010-07-08 | Jsr Corp | Manufacturing method of graft polymer |
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