JPH08151334A - リポソームおよびその製剤 - Google Patents
リポソームおよびその製剤Info
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- JPH08151334A JPH08151334A JP29132994A JP29132994A JPH08151334A JP H08151334 A JPH08151334 A JP H08151334A JP 29132994 A JP29132994 A JP 29132994A JP 29132994 A JP29132994 A JP 29132994A JP H08151334 A JPH08151334 A JP H08151334A
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- acid
- phosphatidylcholine
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- Pending
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-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 本発明は、生体内で安定性が高く薬物の放出
制御等に有用な、リポソームおよびドコサヘキサエン酸
のアスコルビン酸エステルを含有するその製剤を提供す
ること。 【構成】 ドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の１０
％以上を占めるホスファチジルコリンを膜形成脂質とし
て含むリポソームおよびドコサヘキサエン酸のアスコル
ビン酸エステル（ＤＨＡ−Ａｓ）を含有するその製剤。 【効果】 本発明のリポソームは、生体内での安定性
が高く、薬物の放出制御等に有用であり、その製剤は、
例えば、ＤＨＡ−Ａｓの含有量が高く、かつ、優れた安
定性を有しており、ＤＨＡ−Ａｓを生体内で一定量づつ
放出することが可能であり、ＤＨＡ−Ａｓの有用な生理
活性を有効に作用させることが期待できる。
制御等に有用な、リポソームおよびドコサヘキサエン酸
のアスコルビン酸エステルを含有するその製剤を提供す
ること。 【構成】 ドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の１０
％以上を占めるホスファチジルコリンを膜形成脂質とし
て含むリポソームおよびドコサヘキサエン酸のアスコル
ビン酸エステル（ＤＨＡ−Ａｓ）を含有するその製剤。 【効果】 本発明のリポソームは、生体内での安定性
が高く、薬物の放出制御等に有用であり、その製剤は、
例えば、ＤＨＡ−Ａｓの含有量が高く、かつ、優れた安
定性を有しており、ＤＨＡ−Ａｓを生体内で一定量づつ
放出することが可能であり、ＤＨＡ−Ａｓの有用な生理
活性を有効に作用させることが期待できる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、薬物の放出制御等に有
用な、ドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の１０％以
上を占めるホスファチジルコリンを膜形成脂質として含
むリポソームおよびドコサヘキサエン酸のアスコルビン
酸エステルを含有するその製剤に関する。
用な、ドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の１０％以
上を占めるホスファチジルコリンを膜形成脂質として含
むリポソームおよびドコサヘキサエン酸のアスコルビン
酸エステルを含有するその製剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】リポソームは、脂質人工膜より形成され
る小胞であり、生体との親和性がよく、生物的に分解可
能な素材からなり、種々の物質を保持させることが可能
であることから、種々のマイクロカプセルとして薬物等
をその小胞に含有させ、薬物の放出制御やドラッグデリ
バリーシステムに利用することが検討されている。
る小胞であり、生体との親和性がよく、生物的に分解可
能な素材からなり、種々の物質を保持させることが可能
であることから、種々のマイクロカプセルとして薬物等
をその小胞に含有させ、薬物の放出制御やドラッグデリ
バリーシステムに利用することが検討されている。
【０００３】この目的のためには、リポソームは、少な
くとも薬物を放出し終わるまでは生体内で安定に存在
し、一定速度で封入薬物を放出することなどが要求され
る。生体内において、リポソームが破壊される要因の一
つとして、ホスフォリパーゼＡ 2（ＰＬＡ2）の作用が知
られている。
くとも薬物を放出し終わるまでは生体内で安定に存在
し、一定速度で封入薬物を放出することなどが要求され
る。生体内において、リポソームが破壊される要因の一
つとして、ホスフォリパーゼＡ 2（ＰＬＡ2）の作用が知
られている。
【０００４】従来、このリポソーム形成脂質としてのリ
ン脂質としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジ
ルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファ
チジルイノシトール、リゾホスファチジルコリン、スフ
ィンゴエミリン、卵黄ホスファチジルコリン、大豆ホス
ファチジルコリンや水添大豆ホスファチジルコリン等が
用いられ、グリセロリン脂質のアシル基は飽和アシル基
であるものがよいとされており（例えば、特開平６−９
３７４号公報等）、高度不飽和脂肪酸であるドコサヘキ
サエン酸を多く含有するホスファチジルコリンを膜形成
脂質とするリポソームが有用であることは全く知られて
いない。このドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）には、同じ
ｎ−３系列のイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）やα−リノ
レン酸には見られない、学習能向上作用、明度識別能向
上作用、抗アレルギー作用などが知られており、老人性
痴呆症や、成人病が深刻になりつつある現代社会におい
て、医薬品や健康食品或いは化粧品への応用が期待され
ている。
ン脂質としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジ
ルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファ
チジルイノシトール、リゾホスファチジルコリン、スフ
ィンゴエミリン、卵黄ホスファチジルコリン、大豆ホス
ファチジルコリンや水添大豆ホスファチジルコリン等が
用いられ、グリセロリン脂質のアシル基は飽和アシル基
であるものがよいとされており（例えば、特開平６−９
３７４号公報等）、高度不飽和脂肪酸であるドコサヘキ
サエン酸を多く含有するホスファチジルコリンを膜形成
脂質とするリポソームが有用であることは全く知られて
いない。このドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）には、同じ
ｎ−３系列のイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）やα−リノ
レン酸には見られない、学習能向上作用、明度識別能向
上作用、抗アレルギー作用などが知られており、老人性
痴呆症や、成人病が深刻になりつつある現代社会におい
て、医薬品や健康食品或いは化粧品への応用が期待され
ている。
【０００５】
【本発明が解決しようとする課題】本発明は、生体内で
安定性が高く薬物の放出制御等に有用なリポソーム、お
よびドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸エステルを含
有するその製剤を提供することを目的とする。
安定性が高く薬物の放出制御等に有用なリポソーム、お
よびドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸エステルを含
有するその製剤を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決するために鋭意研究した結果、膜形成脂質とし
てドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の１０％以上を
占めるホスファチジルコリンを用いると、常法により容
易にリポソームを形成しうる上、優れた安定性を有して
いることを見出した。更に、このドコサヘキサエン酸に
富んだ疎水部へのドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸
エステルの親和性が高くなり、優れたリポソーム製剤を
形成しうることを見出し本発明を完成した。
題を解決するために鋭意研究した結果、膜形成脂質とし
てドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の１０％以上を
占めるホスファチジルコリンを用いると、常法により容
易にリポソームを形成しうる上、優れた安定性を有して
いることを見出した。更に、このドコサヘキサエン酸に
富んだ疎水部へのドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸
エステルの親和性が高くなり、優れたリポソーム製剤を
形成しうることを見出し本発明を完成した。
【０００７】即ち、本発明は、ドコサヘキサエン酸が構
成脂肪酸組成の１０％以上を占めるホスファチジルコリ
ンを膜形成脂質として含むリポソーム、およびドコサヘ
キサエン酸のアスコルビン酸エステルを含有するその製
剤に関する。
成脂肪酸組成の１０％以上を占めるホスファチジルコリ
ンを膜形成脂質として含むリポソーム、およびドコサヘ
キサエン酸のアスコルビン酸エステルを含有するその製
剤に関する。
【０００８】本発明のリポソームの膜形成脂質としての
リン脂質は、ドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の１
０％以上を占めるホスファチジルコリンであれば何れで
もよいが、膜の安定性の点で、ドコサヘキサエン酸が２
５％以上であることがより好ましく、例えば、合成によ
り製造したホスファチジルコリンやイカの皮から分離し
たホスファチジルコリン（ｓＰＣ）が好ましい。イカの
皮にはリン脂質が湿重量当り約２％含まれ、リン脂質の
約５０％がコリン型リン脂質で、約２０％がエタノール
アミン型リン脂質であり、このコリン型リン脂質の構成
脂肪酸のうち約５０％をドコサヘキサエン酸が占めてい
る。ＰＣの結合型としては、ジアシル型とアルキルアシ
ル型のいずれでもよいが、ジアシル型を多く含む方が好
ましい。
リン脂質は、ドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の１
０％以上を占めるホスファチジルコリンであれば何れで
もよいが、膜の安定性の点で、ドコサヘキサエン酸が２
５％以上であることがより好ましく、例えば、合成によ
り製造したホスファチジルコリンやイカの皮から分離し
たホスファチジルコリン（ｓＰＣ）が好ましい。イカの
皮にはリン脂質が湿重量当り約２％含まれ、リン脂質の
約５０％がコリン型リン脂質で、約２０％がエタノール
アミン型リン脂質であり、このコリン型リン脂質の構成
脂肪酸のうち約５０％をドコサヘキサエン酸が占めてい
る。ＰＣの結合型としては、ジアシル型とアルキルアシ
ル型のいずれでもよいが、ジアシル型を多く含む方が好
ましい。
【０００９】膜の形態は多重ラメラ小胞（ＭＬＶ）と単
ラメラ小胞のいずれであってもよく、また、小さな単ラ
メラ小胞（ＳＵＶ）であっても大きな単ラメラ小胞（Ｌ
ＵＶ）であってもよい。
ラメラ小胞のいずれであってもよく、また、小さな単ラ
メラ小胞（ＳＵＶ）であっても大きな単ラメラ小胞（Ｌ
ＵＶ）であってもよい。
【００１０】原料のイカとしては、ムラサキイカ、アメ
リカオオアカイカ、ヤリイカ、コウイカ、ホタルイカ等
が挙げられる。イカの皮は、可食部を取った後の廃棄物
として大量に存在し、かつ実質的に無償で入手できる。
ホスファチジルコリンは、常法によりイカの皮から溶剤
分別した後、既存の吸着クロマトグラフィーとイオン交
換クロマトグラフィーを組み合わせることによって、ホ
スファチジルコリンとホスファチジルエタノールアミン
を他のリン脂質から別個に容易に単離できる。
リカオオアカイカ、ヤリイカ、コウイカ、ホタルイカ等
が挙げられる。イカの皮は、可食部を取った後の廃棄物
として大量に存在し、かつ実質的に無償で入手できる。
ホスファチジルコリンは、常法によりイカの皮から溶剤
分別した後、既存の吸着クロマトグラフィーとイオン交
換クロマトグラフィーを組み合わせることによって、ホ
スファチジルコリンとホスファチジルエタノールアミン
を他のリン脂質から別個に容易に単離できる。
【００１１】すなわち、脂質成分の抽出は、脂質成分の
抽出の前に、イカの皮を凍結乾燥した後、細かく砕いて
表面積を広げることが好ましく、通常、有機溶剤を用い
ることにより好適に達成される。用いられる有機溶媒と
しては、リン脂質を溶解する通常の溶媒を単独又は混合
して用いることができ、例えばクロロホルム、エーテ
ル、ブチルアルコール、クロロホルム−メタノール系、
ｎ−ヘキサン−エタノール水系、クロロホルム−ｎ−ヘ
キサン系、クロロホルム−エーテル系、クロロホルム−
エタノール系などが挙げられる。これらの溶媒のうち、
クロロホルム−メタノール系が好ましく、特に、クロロ
ホルムの比率が５０％以上、より好ましくは６５％以上
であることが脂質成分の抽出効率が良い点で望ましい。
抽出の前に、イカの皮を凍結乾燥した後、細かく砕いて
表面積を広げることが好ましく、通常、有機溶剤を用い
ることにより好適に達成される。用いられる有機溶媒と
しては、リン脂質を溶解する通常の溶媒を単独又は混合
して用いることができ、例えばクロロホルム、エーテ
ル、ブチルアルコール、クロロホルム−メタノール系、
ｎ−ヘキサン−エタノール水系、クロロホルム−ｎ−ヘ
キサン系、クロロホルム−エーテル系、クロロホルム−
エタノール系などが挙げられる。これらの溶媒のうち、
クロロホルム−メタノール系が好ましく、特に、クロロ
ホルムの比率が５０％以上、より好ましくは６５％以上
であることが脂質成分の抽出効率が良い点で望ましい。
【００１２】次いで、得られた脂質成分を分画すること
により、ＤＨＡを含むリン脂質を取得できる。分画は、
一般に有機溶剤を除去した後、脂質成分からリン脂質を
分画するのに通常用いられる方法のいずれかにより行な
うことができるが、大量に処理できる点で、分別用溶剤
を加えて不溶性物質を分離する方法、すなわち溶剤分別
法により行なうことが好ましい。分別用溶剤としては、
通常、脂質の分別に用いられる有機溶剤を用いることが
でき、例えば、アセトン、酢酸、クロロホルム、エーテ
ルなどが挙げられる。これらの溶剤のうち、分画効率が
よい点で、特に、アセトンが好ましい。また、溶剤に塩
化マグネシウム、塩化カルシウムなどを添加し、その共
存下、分別を行ってもよく、必要に応じて加熱、冷却な
どを行ってもよい。更に、得られた画分をカラムクロマ
トグラフィーで再分画し、目的とするリン脂質の画分を
集めることにより、高純度のリン脂質組成物を高収率で
得ることができる。カラムクロマトグラフィーとして
は、シリカ系クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラ
フィー、イオン交換クロマトグラフィーなどを用いるこ
とができる。さらに、ホスファチジルコリンをホスファ
チジルエタノールアミン（ＰＥ）から分画するために
は、溶剤分別により得られたリン脂質組成物をまずシリ
カ系クロマトグラフィーに付してＰＥを分離したのち、
イオン交換クロマトグラフィーに付することによりホス
ファチジルコリンを分離することができる。
により、ＤＨＡを含むリン脂質を取得できる。分画は、
一般に有機溶剤を除去した後、脂質成分からリン脂質を
分画するのに通常用いられる方法のいずれかにより行な
うことができるが、大量に処理できる点で、分別用溶剤
を加えて不溶性物質を分離する方法、すなわち溶剤分別
法により行なうことが好ましい。分別用溶剤としては、
通常、脂質の分別に用いられる有機溶剤を用いることが
でき、例えば、アセトン、酢酸、クロロホルム、エーテ
ルなどが挙げられる。これらの溶剤のうち、分画効率が
よい点で、特に、アセトンが好ましい。また、溶剤に塩
化マグネシウム、塩化カルシウムなどを添加し、その共
存下、分別を行ってもよく、必要に応じて加熱、冷却な
どを行ってもよい。更に、得られた画分をカラムクロマ
トグラフィーで再分画し、目的とするリン脂質の画分を
集めることにより、高純度のリン脂質組成物を高収率で
得ることができる。カラムクロマトグラフィーとして
は、シリカ系クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラ
フィー、イオン交換クロマトグラフィーなどを用いるこ
とができる。さらに、ホスファチジルコリンをホスファ
チジルエタノールアミン（ＰＥ）から分画するために
は、溶剤分別により得られたリン脂質組成物をまずシリ
カ系クロマトグラフィーに付してＰＥを分離したのち、
イオン交換クロマトグラフィーに付することによりホス
ファチジルコリンを分離することができる。
【００１３】このようにして得られる各々のリン脂質
は、薄層クロマトグラフィーとＮＭＲで分析してその種
類を同定することができ、更に常法によって、ケン化分
解、メチルエステル化、または、メタノリシスによっ
て、脂肪酸メチルエステルとした後、ガスクロマトグラ
フィーで分析して構成脂肪酸組成を求めることができ
る。
は、薄層クロマトグラフィーとＮＭＲで分析してその種
類を同定することができ、更に常法によって、ケン化分
解、メチルエステル化、または、メタノリシスによっ
て、脂肪酸メチルエステルとした後、ガスクロマトグラ
フィーで分析して構成脂肪酸組成を求めることができ
る。
【００１４】更に、これらのリン脂質をホスフォリパー
ゼＡ2で処理し、生成した遊離脂肪酸とリゾリン脂質を
薄層クロマトグラフィーで分画した後、上述のように脂
肪酸分析を行うことによって、脂肪酸のリン脂質分子内
分布を決定することができる。
ゼＡ2で処理し、生成した遊離脂肪酸とリゾリン脂質を
薄層クロマトグラフィーで分画した後、上述のように脂
肪酸分析を行うことによって、脂肪酸のリン脂質分子内
分布を決定することができる。
【００１５】上述の方法により得られるイカの皮から単
離したｓＰＣの構成脂肪酸は、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ステア
リン酸、パルミチン酸などであり、ＤＨＡ含量は一般に
５０％程度と高含量であった。
離したｓＰＣの構成脂肪酸は、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ステア
リン酸、パルミチン酸などであり、ＤＨＡ含量は一般に
５０％程度と高含量であった。
【００１６】本発明のリポソーム及びその製剤は、上記
のようにして単離したホスファチジルコリンを用いて、
常法により調製することができる。
のようにして単離したホスファチジルコリンを用いて、
常法により調製することができる。
【００１７】膜脂質の構成成分としては、上記ホスファ
チジルコリンの他にコレステロールおよび／または電荷
脂質を加えてリポソーム製剤を形成させても良く、電荷
脂質としては、例えば、ＰＥ、ホスファチジルグリセロ
ール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシト
ール、ホスファチジン酸、ジセチルリン酸、ステアリル
アミン、脂肪酸等を添加してもよい。また、膜安定化
剤、凍結保護剤、酸化防止剤として、コレステロール、
コレスタノール等のステロール類、糖、糖脂質、グリセ
リン、ポリエチレングリコールおよびトコフェロールや
アスコルビン酸等を添加することもできる。これらの添
加量はホスファチジルコリン１モルに対して１モル以下
が好ましく、その一例は、まず、上記のホスファチジル
コリンを、適当量のコレステロールおよびホスファチジ
ン酸と共に、溶媒に溶解させ、フラスコ等の容器中で溶
媒を除去して容器の内壁に均一に付着させる。この乾燥
物に蒸留水を加えて懸濁することにより、ＭＬＶ型のリ
ポソームが得られる。また、同様に調製した乾燥物を凍
結乾燥し、凍結乾燥物をリン酸塩緩衝液（ＰＢＳ）に懸
濁することにより、ＬＵＶ型のリポソームが得られる。
このものを超音波破砕することにより、ＳＵＶ型のリポ
ソームが得られる。
チジルコリンの他にコレステロールおよび／または電荷
脂質を加えてリポソーム製剤を形成させても良く、電荷
脂質としては、例えば、ＰＥ、ホスファチジルグリセロ
ール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシト
ール、ホスファチジン酸、ジセチルリン酸、ステアリル
アミン、脂肪酸等を添加してもよい。また、膜安定化
剤、凍結保護剤、酸化防止剤として、コレステロール、
コレスタノール等のステロール類、糖、糖脂質、グリセ
リン、ポリエチレングリコールおよびトコフェロールや
アスコルビン酸等を添加することもできる。これらの添
加量はホスファチジルコリン１モルに対して１モル以下
が好ましく、その一例は、まず、上記のホスファチジル
コリンを、適当量のコレステロールおよびホスファチジ
ン酸と共に、溶媒に溶解させ、フラスコ等の容器中で溶
媒を除去して容器の内壁に均一に付着させる。この乾燥
物に蒸留水を加えて懸濁することにより、ＭＬＶ型のリ
ポソームが得られる。また、同様に調製した乾燥物を凍
結乾燥し、凍結乾燥物をリン酸塩緩衝液（ＰＢＳ）に懸
濁することにより、ＬＵＶ型のリポソームが得られる。
このものを超音波破砕することにより、ＳＵＶ型のリポ
ソームが得られる。
【００１８】なお、本発明のリポソームには、常法に従
って、ヒトおよび動物用の医薬や検査薬をはじめとする
種々の薬物を含有させることができ、これら薬物を含む
リポソーム製剤も本発明の範囲である。特に、脂溶性の
ため水に溶け難く有機溶媒や可溶化剤等の使用が必要と
され、また、経口投与では消化器官内で分解を受ける可
能性が高く、多くの場合血中投与が好ましい投与形態
で、しかも、血液中での安定性の確保等が要求されてい
る、例えば、ドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸エス
テルの如き、アスコルビン酸の抗酸化作用及びビタミン
Ｃ効果と高度不飽和脂肪酸の生理活性効果をあわせ持
ち、用途の応用性の高いアスコルビン酸エステル（特開
平３−９９０７３号）で、循環器治療薬、特に狭心症、
心筋梗塞症のごとき虚血性心疾患および高血圧症の予防
及び治療に有効なカルシウム拮抗薬（ＷＯ９４／２００
９２号）として有用な化合物が挙げられる。
って、ヒトおよび動物用の医薬や検査薬をはじめとする
種々の薬物を含有させることができ、これら薬物を含む
リポソーム製剤も本発明の範囲である。特に、脂溶性の
ため水に溶け難く有機溶媒や可溶化剤等の使用が必要と
され、また、経口投与では消化器官内で分解を受ける可
能性が高く、多くの場合血中投与が好ましい投与形態
で、しかも、血液中での安定性の確保等が要求されてい
る、例えば、ドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸エス
テルの如き、アスコルビン酸の抗酸化作用及びビタミン
Ｃ効果と高度不飽和脂肪酸の生理活性効果をあわせ持
ち、用途の応用性の高いアスコルビン酸エステル（特開
平３−９９０７３号）で、循環器治療薬、特に狭心症、
心筋梗塞症のごとき虚血性心疾患および高血圧症の予防
及び治療に有効なカルシウム拮抗薬（ＷＯ９４／２００
９２号）として有用な化合物が挙げられる。
【００１９】以下、実施例により本発明を更に詳細に説
明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもので
はない。
明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもので
はない。
【００２０】
参考例１：イカの皮に含まれるリン脂質の単離と分析 湿重量１０ｇのムラサキイカの皮を凍結乾燥し、１．６
ｇの乾燥物を得た。これを細かく砕いた後、クロロホル
ム：メタノール＝２：１の混合溶剤で抽出し、０．２６
ｇの脂質成分を得た。この脂質成分にアセトン４０ｍｌ
を加え、冷却しながら撹拌を行い、中性脂質を分別濾過
し、アセトン不溶分０．２２ｇを得た。これをシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム：メ
タノール＝８５：１５、８０：２０、７５：２５の順で
各々５００ｍｌ、４００ｍｌ、２０００ｍｌ展開した。
これによって、ＰＥ及びその他のリン脂質混合物に分画
できた。次に、その他のリン脂質混合物をセファロース
カラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム：メタ
ノール＝１：４、酢酸、クロロホルム：メタノール＝
１：４＋酢酸アンモニウム(0.2%)を１００ｍｌづつで順
次展開した。これによって、他のリン脂質混合物からｓ
ＰＣを単離できた。単離されたｓＰＣとＰＥは各々０．
１１ｇと０．０４ｇであった。これらのリン脂質はＮＭ
Ｒで各々の構造を確認した後、脂肪酸組成を分析したと
ころ、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ステアリン酸、パルミチン酸は
ｓＰＣでは各々５１％、５％、２％、３３％、ＰＥでは
１９％、３３％、１２％、６％であった。又、これらの
脂肪酸の分子内分布を分析したところ、ｓＰＣのｓｎ−
２位はすべてＤＨＡであった。ＰＥのｓｎ−２位はＤＨ
Ａ又はＥＰＡであった。
ｇの乾燥物を得た。これを細かく砕いた後、クロロホル
ム：メタノール＝２：１の混合溶剤で抽出し、０．２６
ｇの脂質成分を得た。この脂質成分にアセトン４０ｍｌ
を加え、冷却しながら撹拌を行い、中性脂質を分別濾過
し、アセトン不溶分０．２２ｇを得た。これをシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム：メ
タノール＝８５：１５、８０：２０、７５：２５の順で
各々５００ｍｌ、４００ｍｌ、２０００ｍｌ展開した。
これによって、ＰＥ及びその他のリン脂質混合物に分画
できた。次に、その他のリン脂質混合物をセファロース
カラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム：メタ
ノール＝１：４、酢酸、クロロホルム：メタノール＝
１：４＋酢酸アンモニウム(0.2%)を１００ｍｌづつで順
次展開した。これによって、他のリン脂質混合物からｓ
ＰＣを単離できた。単離されたｓＰＣとＰＥは各々０．
１１ｇと０．０４ｇであった。これらのリン脂質はＮＭ
Ｒで各々の構造を確認した後、脂肪酸組成を分析したと
ころ、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ステアリン酸、パルミチン酸は
ｓＰＣでは各々５１％、５％、２％、３３％、ＰＥでは
１９％、３３％、１２％、６％であった。又、これらの
脂肪酸の分子内分布を分析したところ、ｓＰＣのｓｎ−
２位はすべてＤＨＡであった。ＰＥのｓｎ−２位はＤＨ
Ａ又はＥＰＡであった。
【００２１】参考例２：イカの皮に含まれるリン脂質の
単離と分析 湿重量３０ｇのムラサキイカの皮を凍結乾燥し、４．８
ｇの乾物を得た。これを細かく砕いた後、クロロホル
ム：メタノール＝２：１の混合溶剤で抽出し、０．６１
ｇの脂質成分を得た。この脂質成分にアセトン４０ｍｌ
を加え、冷却しながら撹拌を行い、中性脂質を分別濾過
し、アセトン不溶分０．５４ｇを得た。これをシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム：メ
タノール＝８５：１５、８０：２０、７５：２５の順で
各々５００ｍｌ、４００ｍｌ、２０００ｍｌ展開した。
これによって、ＰＥ及びその他のリン脂質混合物に分画
できた。次に、その他のリン脂質混合物をセファロース
カラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム：メタ
ノール＝１：４、酢酸、クロロホルム：メタノール＝
１：４＋酢酸アンモニウム(0.2%)を１００ｍｌづつで順
次展開した。これによって、その他のリン脂質混合物か
らｓＰＣを単離できた。単離されたｓＰＣとＰＥは各々
０．２９ｇと０．１５ｇであった。これらのリン脂質は
ＮＭＲで各々の構造を確認した後、脂肪酸組成を分析し
たところ、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ステアリン酸、パルミチン
酸はｓＰＣでは各々４９％、６％、２％、３３％、ＰＥ
では１８％、３３％、１１％、６％であった。又、これ
らの脂肪酸の分子内分布を分析したところ、ｓＰＣのｓ
ｎ−２位はすべてＤＨＡであった。ＰＥのｓｎ−２位は
ＤＨＡ又はＥＰＡであった。
単離と分析 湿重量３０ｇのムラサキイカの皮を凍結乾燥し、４．８
ｇの乾物を得た。これを細かく砕いた後、クロロホル
ム：メタノール＝２：１の混合溶剤で抽出し、０．６１
ｇの脂質成分を得た。この脂質成分にアセトン４０ｍｌ
を加え、冷却しながら撹拌を行い、中性脂質を分別濾過
し、アセトン不溶分０．５４ｇを得た。これをシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム：メ
タノール＝８５：１５、８０：２０、７５：２５の順で
各々５００ｍｌ、４００ｍｌ、２０００ｍｌ展開した。
これによって、ＰＥ及びその他のリン脂質混合物に分画
できた。次に、その他のリン脂質混合物をセファロース
カラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム：メタ
ノール＝１：４、酢酸、クロロホルム：メタノール＝
１：４＋酢酸アンモニウム(0.2%)を１００ｍｌづつで順
次展開した。これによって、その他のリン脂質混合物か
らｓＰＣを単離できた。単離されたｓＰＣとＰＥは各々
０．２９ｇと０．１５ｇであった。これらのリン脂質は
ＮＭＲで各々の構造を確認した後、脂肪酸組成を分析し
たところ、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ステアリン酸、パルミチン
酸はｓＰＣでは各々４９％、６％、２％、３３％、ＰＥ
では１８％、３３％、１１％、６％であった。又、これ
らの脂肪酸の分子内分布を分析したところ、ｓＰＣのｓ
ｎ−２位はすべてＤＨＡであった。ＰＥのｓｎ−２位は
ＤＨＡ又はＥＰＡであった。
【００２２】実施例１：リポソームの調製 参考例１で単離されたｓＰＣとコレステロール(chol)と
ジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）とを８：
５：１のモル比でクロロホルム／メタノール＝２／１の
混合溶媒に溶解した。この溶液をナシ型フラスコに入
れ、ロータリーエバポレーターを用いて溶媒を留去し
た。脂質膜がフラスコ内壁に均一に形成されるように、
必要に応じてクロロホルムを０．２ｍｌ加えて、再度エ
バポレーターで溶媒を留去した。真空ポンプで０．５〜
１時間減圧に保ったのち、蒸留水約０．６ｍｌに懸濁
し、ネジ口試験管に移して凍結乾燥した。ＰＢＳ-(0.8%
NaCl, 0.02% KCl, 0.115% Na2HPO4, 0.02% KH2PO4) ２
ｍｌに懸濁し、０．１Ｍ ＣａＣｌ2 ０．５ｍｌを添加
して二つに分け、一方は超音波破砕を行った。４００倍
の光学顕微鏡を用いての観察の結果、超音波破砕を行っ
た試料は、粒子径１μｍ以下のリポソーム（以下、ｓＰ
Ｃ／ＳＵＶと略称する）であり、破砕を行わなかった試
料は粒子径が〜１μｍ程度のリポソーム（以下、ｓＰＣ
／ＬＵＶと略称する）であることが確認された。
ジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）とを８：
５：１のモル比でクロロホルム／メタノール＝２／１の
混合溶媒に溶解した。この溶液をナシ型フラスコに入
れ、ロータリーエバポレーターを用いて溶媒を留去し
た。脂質膜がフラスコ内壁に均一に形成されるように、
必要に応じてクロロホルムを０．２ｍｌ加えて、再度エ
バポレーターで溶媒を留去した。真空ポンプで０．５〜
１時間減圧に保ったのち、蒸留水約０．６ｍｌに懸濁
し、ネジ口試験管に移して凍結乾燥した。ＰＢＳ-(0.8%
NaCl, 0.02% KCl, 0.115% Na2HPO4, 0.02% KH2PO4) ２
ｍｌに懸濁し、０．１Ｍ ＣａＣｌ2 ０．５ｍｌを添加
して二つに分け、一方は超音波破砕を行った。４００倍
の光学顕微鏡を用いての観察の結果、超音波破砕を行っ
た試料は、粒子径１μｍ以下のリポソーム（以下、ｓＰ
Ｃ／ＳＵＶと略称する）であり、破砕を行わなかった試
料は粒子径が〜１μｍ程度のリポソーム（以下、ｓＰＣ
／ＬＵＶと略称する）であることが確認された。
【００２３】参考例３：リポソームの調製 ｓＰＣを大豆ホスファチジルコリン（大豆ＰＣ）に代
え、モル比を大豆ＰＣ／ｃｈｏｌ／ＤＰＰＡ＝４：５：
１として、実施例１と同様の操作を行って、大豆ＰＣ由
来のリポソーム（以下、大豆ＰＣ／ＬＵＶおよび大豆Ｐ
Ｃ／ＳＵＶと略称する）を調製した。
え、モル比を大豆ＰＣ／ｃｈｏｌ／ＤＰＰＡ＝４：５：
１として、実施例１と同様の操作を行って、大豆ＰＣ由
来のリポソーム（以下、大豆ＰＣ／ＬＵＶおよび大豆Ｐ
Ｃ／ＳＵＶと略称する）を調製した。
【００２４】試験例１ ｓＰＣ／ＬＵＶ、ｓＰＣ／ＳＵＶ、大豆ＰＣ／ＬＵＶお
よび大豆ＰＣ／ＳＵＶの各リポソーム溶液を０．２ｍｌ
づつ４本のネジ口試験管に分注し、１本は反応０時間の
試料として氷中保存した。残り３本にブタ膵臓由来ＰＬ
Ａ2を１０μｌ（１１単位）添加し、３７℃で１０，２
０，６０分間インキュベーションしたのち、１０ｍＭ
ＥＧＴＡ ３０μｌを添加して反応を停止した。各試料
からフォルチの方法に準じて脂質を抽出し、シリカゲル
薄層クロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール／
水＝６５／２５／２）を行った。遊離酸画分をかきと
り、塩酸−メタノール法で脂肪酸メチルエステルに変換
し、ガスクロマトグラフィーで定量した。ｓＰＣ／ＬＵ
ＶとｓＰＣ／ＳＵＶについてはドコサヘキサエン酸（2
2:6(n-3) ）、大豆ＰＣ／ＬＵＶと大豆ＰＣ／ＳＵＶに
ついてはリノール酸（18:2( n-6)）に関して、それぞれ
遊離酸のモル数（nmol）の、ホスファチジルコリン中の
対応する酸のモル数に対する割合（加水分解率、％）を
算出して比較した。結果を図１と図２に示す。
よび大豆ＰＣ／ＳＵＶの各リポソーム溶液を０．２ｍｌ
づつ４本のネジ口試験管に分注し、１本は反応０時間の
試料として氷中保存した。残り３本にブタ膵臓由来ＰＬ
Ａ2を１０μｌ（１１単位）添加し、３７℃で１０，２
０，６０分間インキュベーションしたのち、１０ｍＭ
ＥＧＴＡ ３０μｌを添加して反応を停止した。各試料
からフォルチの方法に準じて脂質を抽出し、シリカゲル
薄層クロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール／
水＝６５／２５／２）を行った。遊離酸画分をかきと
り、塩酸−メタノール法で脂肪酸メチルエステルに変換
し、ガスクロマトグラフィーで定量した。ｓＰＣ／ＬＵ
ＶとｓＰＣ／ＳＵＶについてはドコサヘキサエン酸（2
2:6(n-3) ）、大豆ＰＣ／ＬＵＶと大豆ＰＣ／ＳＵＶに
ついてはリノール酸（18:2( n-6)）に関して、それぞれ
遊離酸のモル数（nmol）の、ホスファチジルコリン中の
対応する酸のモル数に対する割合（加水分解率、％）を
算出して比較した。結果を図１と図２に示す。
【００２５】これらの結果から、本発明のドコサヘキサ
エン酸を多く含むホスファチジルコリンより調製された
リポソームは、一般的な大豆ＰＣを含むリポソームに比
べて、遊離した酸の量は少なく、酵素による分解に対し
て優れた安定性を有することが明らかである。
エン酸を多く含むホスファチジルコリンより調製された
リポソームは、一般的な大豆ＰＣを含むリポソームに比
べて、遊離した酸の量は少なく、酵素による分解に対し
て優れた安定性を有することが明らかである。
【００２６】実施例２：イカの皮から得たホスファチジ
ルコリン（ｓＰＣ）を用いたドコサヘキサエン酸のアス
コルビン酸エステルを含有するリポソームの調製 参考例１で単離されたｓＰＣ 5μmol 、ドコサヘキサエ
ン酸のアスコルビン酸エステル（ＤＨＡ−Ａｓ）4 μmo
l 、ＤＰＰＡ0.5 μmol 、コレステロール 2.5μmol を
クロロホルムに溶解し、ナシ型フラスコに移し、脂質膜
がフラスコ内に均一に形成されるように、ロータリーエ
バポレーターを用いて溶媒を留去した後、真空ポンプで
更に減圧乾燥した。次に、フラスコ内に蒸留水 0.2mlを
加えて、この薄膜を懸濁した。得られたＭＬＶ型のリポ
ソームの粒子径は、４００倍の光学顕微鏡を用いて観察
の結果、１μｍ以下であることが確認された。
ルコリン（ｓＰＣ）を用いたドコサヘキサエン酸のアス
コルビン酸エステルを含有するリポソームの調製 参考例１で単離されたｓＰＣ 5μmol 、ドコサヘキサエ
ン酸のアスコルビン酸エステル（ＤＨＡ−Ａｓ）4 μmo
l 、ＤＰＰＡ0.5 μmol 、コレステロール 2.5μmol を
クロロホルムに溶解し、ナシ型フラスコに移し、脂質膜
がフラスコ内に均一に形成されるように、ロータリーエ
バポレーターを用いて溶媒を留去した後、真空ポンプで
更に減圧乾燥した。次に、フラスコ内に蒸留水 0.2mlを
加えて、この薄膜を懸濁した。得られたＭＬＶ型のリポ
ソームの粒子径は、４００倍の光学顕微鏡を用いて観察
の結果、１μｍ以下であることが確認された。
【００２７】参考例４：卵黄ＰＣ（ｅＰＣ）を用いたド
コサヘキサエン酸のアスコルビン酸エステルを含有する
リポソームの調製 ｅＰＣ ５μｍｏｌ、ＤＨＡ−Ａｓ４μｍｏｌ、ＤＰＰ
Ａ０.５μｍｏｌ、コレステロール ２．５μｍｏｌをク
ロロホルムに溶解し、実施例１と同様の方法により、Ｍ
ＬＶ(DHA-As/ePC)を得た。
コサヘキサエン酸のアスコルビン酸エステルを含有する
リポソームの調製 ｅＰＣ ５μｍｏｌ、ＤＨＡ−Ａｓ４μｍｏｌ、ＤＰＰ
Ａ０.５μｍｏｌ、コレステロール ２．５μｍｏｌをク
ロロホルムに溶解し、実施例１と同様の方法により、Ｍ
ＬＶ(DHA-As/ePC)を得た。
【００２８】参考例５：ジパルミトイルＰＣ（ＤＰＰ
Ｃ）を用いたドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸エス
テルを含有するリポソームの調製 ＤＰＰＣ５μｍｏｌ、ＤＨＡ−Ａｓ４μｍｏｌ、ＤＰＰ
Ａ０．５μｍｏｌ、コレステロール ２．５μｍｏｌを
クロロホルムに溶解し、実施例１と同様の方法により、
ＭＬＶ(DHA-As/DPPC)を得た。
Ｃ）を用いたドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸エス
テルを含有するリポソームの調製 ＤＰＰＣ５μｍｏｌ、ＤＨＡ−Ａｓ４μｍｏｌ、ＤＰＰ
Ａ０．５μｍｏｌ、コレステロール ２．５μｍｏｌを
クロロホルムに溶解し、実施例１と同様の方法により、
ＭＬＶ(DHA-As/DPPC)を得た。
【００２９】試験例２：ドコサヘキサエン酸のアスコル
ビン酸エステルを含有するリポソームの安定性 実施例２、参考例４、５で得たＭＬＶのリポソーム溶液
０．２ｍｌにＰＢＳ-（0.8% Na Cl, 0.02% KCl, 0.115%
NaHPO4, 0.02% KH2PO4）０．８ｍｌを加え懸濁し、各
リポソーム溶液を０．２ｍｌづつ３本のネジ付試験管に
分注して、１本は反応０時間の試料とした。残り２本は
３７℃で、１２、２４時間放置後の試料とした。この試
料を遠心分離（14,000rpm(約24,000×g)）し、リポソー
ムを分離した。リポソームはＰＢＳ-で２回洗浄後、更
に遠心分離し、脂質をフォルチの方法に従って抽出し
た。この脂質をシリカゲルＴＬＣに展開してホスファチ
ジルコリンとＤＨＡ−Ａｓをかき取り、塩酸−メタノー
ル法で各々の構成脂肪酸メチルエステルを調製してＧＬ
Ｃ分析を行い、脂肪酸組成を調べた。その結果を図３〜
５にまとめた。
ビン酸エステルを含有するリポソームの安定性 実施例２、参考例４、５で得たＭＬＶのリポソーム溶液
０．２ｍｌにＰＢＳ-（0.8% Na Cl, 0.02% KCl, 0.115%
NaHPO4, 0.02% KH2PO4）０．８ｍｌを加え懸濁し、各
リポソーム溶液を０．２ｍｌづつ３本のネジ付試験管に
分注して、１本は反応０時間の試料とした。残り２本は
３７℃で、１２、２４時間放置後の試料とした。この試
料を遠心分離（14,000rpm(約24,000×g)）し、リポソー
ムを分離した。リポソームはＰＢＳ-で２回洗浄後、更
に遠心分離し、脂質をフォルチの方法に従って抽出し
た。この脂質をシリカゲルＴＬＣに展開してホスファチ
ジルコリンとＤＨＡ−Ａｓをかき取り、塩酸−メタノー
ル法で各々の構成脂肪酸メチルエステルを調製してＧＬ
Ｃ分析を行い、脂肪酸組成を調べた。その結果を図３〜
５にまとめた。
【００３０】ｓＰＣを用いた場には、図３より明らかな
ように、ＭＬＶの生成量はｅＰＣやＤＰＰＣを用いた場
合よりも少ないが、ＰＣ量の経時変化は最も少なく安定
であった。そして、ＭＬＶに含まれるＤＨＡ−Ａｓ量の
変動も、ｓＰＣより調製したＭＬＶはｅＰＣやＤＰＰＣ
よりもＤＨＡ−Ａｓを安定して保持（図４）していた。
更に、このｓＰＣのＭＬＶはＤＨＡ−Ａｓを多く含有
（図５）していた。
ように、ＭＬＶの生成量はｅＰＣやＤＰＰＣを用いた場
合よりも少ないが、ＰＣ量の経時変化は最も少なく安定
であった。そして、ＭＬＶに含まれるＤＨＡ−Ａｓ量の
変動も、ｓＰＣより調製したＭＬＶはｅＰＣやＤＰＰＣ
よりもＤＨＡ−Ａｓを安定して保持（図４）していた。
更に、このｓＰＣのＭＬＶはＤＨＡ−Ａｓを多く含有
（図５）していた。
【００３１】
【発明の効果】本発明のリポソームは、膜形成脂質とし
てＤＨＡを高濃度で含むホスファチジルコリンを用いる
ことにより、生体内で高い安定性を有しており、更に、
その製剤は、例えば、有用な生理作用を有するＤＨＡ−
Ａｓを高濃度で含有することができ、かつ、生体内での
ＤＨＡ−Ａｓの放出を制御することが可能となり、ＤＨ
Ａ−Ａｓの有する生理活性を有効に作用させることが期
待できる。
てＤＨＡを高濃度で含むホスファチジルコリンを用いる
ことにより、生体内で高い安定性を有しており、更に、
その製剤は、例えば、有用な生理作用を有するＤＨＡ−
Ａｓを高濃度で含有することができ、かつ、生体内での
ＤＨＡ−Ａｓの放出を制御することが可能となり、ＤＨ
Ａ−Ａｓの有する生理活性を有効に作用させることが期
待できる。
【図１】実施例１で得られたｓＰＣ／ＬＵＶおよび参考
例３で得られた大豆ＰＣ／ＬＵＶのＰＬＡ2に対する安
定性試験結果を示すグラフである。
例３で得られた大豆ＰＣ／ＬＵＶのＰＬＡ2に対する安
定性試験結果を示すグラフである。
【図２】実施例１で得られたｓＰＣ／ＳＵＶおよび参考
例３で得られた大豆ＰＣ／ＳＵＶのＰＬＡ2に対する安
定性試験結果を示すグラフである。
例３で得られた大豆ＰＣ／ＳＵＶのＰＬＡ2に対する安
定性試験結果を示すグラフである。
【図３】実施例１、参考例４及び参考例５で得られた各
種ＰＣを素材としたＤＨＡ−Ａｓを含むＭＬＶの３７℃
における経時変化をＰＣの量で示す。
種ＰＣを素材としたＤＨＡ−Ａｓを含むＭＬＶの３７℃
における経時変化をＰＣの量で示す。
【図４】実施例１、参考例４及び参考例５で得られた各
種ＰＣを素材としたＭＬＶの３７℃における経時変化を
ＤＨＡ−Ａｓの量で示す。
種ＰＣを素材としたＭＬＶの３７℃における経時変化を
ＤＨＡ−Ａｓの量で示す。
【図５】実施例１、参考例４及び参考例５で得られた各
種ＰＣを素材としたＭＬＶの３７℃における経時変化を
ＤＨＡ−Ａｓ／ＰＣ比で示す。
種ＰＣを素材としたＭＬＶの３７℃における経時変化を
ＤＨＡ−Ａｓ／ＰＣ比で示す。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成７年８月１５日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２２】実施例１：リポソームの調製 参考例１で単離されたｓＰＣとコレステロール(chol)と
ジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）とを８：
５：１のモル比でクロロホルム／メタノール＝２／１の
混合溶媒に溶解した。この溶液をナシ型フラスコに入
れ、ロータリーエバポレーターを用いて溶媒を留去し
た。脂質膜がフラスコ内壁に均一に形成されるように、
必要に応じてクロロホルムを０．２ｍｌ加えて、再度エ
バポレーターで溶媒を留去した。真空ポンプで０．５〜
１時間減圧に保ったのち、蒸留水約０．６ｍｌに懸濁
し、ネジ口試験管に移して凍結乾燥した。ＰＢＳ-(0.8%
NaCl, 0.02% KCl, 0.115% Na2HPO4, 0.02% KH2PO4) ２
ｍｌに懸濁し、０．１Ｍ ＣａＣｌ2 ０．５ｍｌを添加
して二つに分け、一方は超音波破砕を行った。超音波破
砕を行った試料は、ｓＰＣ／ＳＵＶ、破砕を行わなかっ
た試料はｓＰＣ／ＬＵＶと略称する。
ジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）とを８：
５：１のモル比でクロロホルム／メタノール＝２／１の
混合溶媒に溶解した。この溶液をナシ型フラスコに入
れ、ロータリーエバポレーターを用いて溶媒を留去し
た。脂質膜がフラスコ内壁に均一に形成されるように、
必要に応じてクロロホルムを０．２ｍｌ加えて、再度エ
バポレーターで溶媒を留去した。真空ポンプで０．５〜
１時間減圧に保ったのち、蒸留水約０．６ｍｌに懸濁
し、ネジ口試験管に移して凍結乾燥した。ＰＢＳ-(0.8%
NaCl, 0.02% KCl, 0.115% Na2HPO4, 0.02% KH2PO4) ２
ｍｌに懸濁し、０．１Ｍ ＣａＣｌ2 ０．５ｍｌを添加
して二つに分け、一方は超音波破砕を行った。超音波破
砕を行った試料は、ｓＰＣ／ＳＵＶ、破砕を行わなかっ
た試料はｓＰＣ／ＬＵＶと略称する。
Claims (3)
- 【請求項１】 ドコサヘキサエン酸が構成脂肪酸組成の
１０％以上を占めるホスファチジルコリンを膜形成脂質
として含むリポソーム。 - 【請求項２】 ホスファチジルコリンが、イカの皮から
単離したホスファチジルコリンであることを特徴とする
請求項１に記載のリポソーム。 - 【請求項３】 ドコサヘキサエン酸のアスコルビン酸エ
ステルを含有する、請求項１に記載のリポソーム製剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29132994A JPH08151334A (ja) | 1994-11-25 | 1994-11-25 | リポソームおよびその製剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29132994A JPH08151334A (ja) | 1994-11-25 | 1994-11-25 | リポソームおよびその製剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08151334A true JPH08151334A (ja) | 1996-06-11 |
Family
ID=17767508
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP29132994A Pending JPH08151334A (ja) | 1994-11-25 | 1994-11-25 | リポソームおよびその製剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08151334A (ja) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5955459A (en) * | 1997-11-26 | 1999-09-21 | Neuromedica, Inc. | Fatty acid-antipsychotic compositions and uses thereof |
| US5977174A (en) * | 1997-11-26 | 1999-11-02 | Neuromedica, Inc. | Cholinergic compositions and uses thereof |
| US6107499A (en) * | 1988-02-26 | 2000-08-22 | Neuromedica, Inc. | Dopamine analog amide |
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| WO2007046386A1 (ja) * | 2005-10-17 | 2007-04-26 | Cosmo Foods Co., Ltd. | 有用リン脂質組成物を含む機能性素材及び機能性食品 |
| JP2008179563A (ja) * | 2007-01-24 | 2008-08-07 | Cosmo Shokuhin Kk | 有用リン脂質組成物を含む機能性素材及び機能性食品 |
| US7439267B2 (en) | 2001-01-25 | 2008-10-21 | Pfizer Italia S.R.L. | Essential n-3 fatty acids in cardiac insufficiency and heart failure therapy |
| JP2012529502A (ja) * | 2009-06-08 | 2012-11-22 | エピターゲット・アーエス | 非ラメラ形成ホスファチジルコリンを含む音響感受性薬物送達粒子 |
| CN104394850A (zh) * | 2012-02-16 | 2015-03-04 | 布莱特赛德创新有限公司 | 膳食和营养组合物及应用的方法 |
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1994
- 1994-11-25 JP JP29132994A patent/JPH08151334A/ja active Pending
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