JPH0757184B2 - New microorganism - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、新規な微生物に関し、さらに詳細には、グラ
ム陽性で、メタノールを資化できる新規な細菌に係わ
る。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a novel microorganism, and more particularly, to a novel gram-positive bacterium capable of assimilating methanol.

メタノールは、石油化学工業あるいは、天然ガス化学工
業により大量、かつ、安価に供給され、また、水溶性で
あることなどから、有用な醗酵工業原料である。Methanol is a useful raw material for the fermentation industry because it is supplied in large quantities at low cost by the petrochemical industry or the natural gas chemical industry, and is water-soluble.

メタノールを資化できる微生物を見出すことができれ
ば、菌体自体ならび菌体内に含有され、または、菌体外
に排出された有用物質を、メタノールを炭素源とする培
養により得ることが可能となる。If it is possible to find a microorganism that can assimilate methanol, it becomes possible to obtain a useful substance contained in the bacterial cell itself and in the bacterial cell or discharged outside the bacterial cell by culturing using methanol as a carbon source.

〔従来技術，発明が解決しようとする問題点〕[Problems to be Solved by Prior Art and Invention]

メタノール資化性を有する微生物としては、多くのグラ
ム陰性メタノール資化性細菌が報告されている（醗酵工
学会誌 第64巻 第２号 第99〜114頁 1986年）。し
かし、グラム陽性のメタノール資化性細菌は、ほとんど
知られてない。Many gram-negative methanol-assimilating bacteria have been reported as microorganisms capable of assimilating methanol (Journal of Fermentation Engineering, Vol. 64, No. 2, pages 99 to 114, 1986). However, few Gram-positive, methanol-assimilating bacteria are known.

〔問題を解決するための手段，作用〕[Means and actions for solving problems]

本発明者は、グラム陽性で、メタノールを唯一の炭素源
とする培地に生育できる細菌を広く自然界より検索した
結果、メタノールを資化して旺盛に生育するグラム陽性
の新菌種の細菌を得ることができた。The present inventor has extensively searched from the natural world for bacteria that are gram-positive and can grow in a medium containing only methanol as a carbon source, and as a result, obtain a gram-positive new bacterium that assimilates methanol and grows vigorously. I was able to.

すなわち、本発明における細菌（以下 本細菌と記す）
は、炭水化物などの他の炭素源の不存在下でもメタノー
ルを唯一の炭素源として資化することができるグラム陽
性細菌である。本細菌は、その菌学的性質によれば、ミ
コバクテリウム属に属する細菌とみられが、ミコバクテ
リウム属に属する公知の菌種と比較した場合に種々の点
で相違があり、新菌種と判断した。That is, the bacterium in the present invention (hereinafter referred to as the present bacterium)
Is a Gram-positive bacterium that can assimilate methanol as the sole carbon source in the absence of other carbon sources such as carbohydrates. This bacterium is considered to be a bacterium belonging to the genus Mycobacterium according to its bacteriological characteristics, but there are various differences when compared with known strains belonging to the genus Mycobacterium. I decided.

すなわち、本発明は、少なくとも下記の菌学的性質を有
することを特徴とするミコバクテリウム属に属する新規
微生物 （イ）グラム陽性 （ロ）桿 菌 （ハ）運動性なし （ニ）抗酸性あり （ホ）ミコール酸を含有する （ヘ）メタノールを資化する である。That is, the present invention is a novel microorganism belonging to the genus Mycobacterium characterized by having at least the following mycological properties: (a) Gram-positive (b) Bacillus (c) No motility (d) Anti-acidic (E) It uses mycolic acid-containing (f) Methanol.

本発明者は、この新規な微生物をミコバクテリウム メ
タノリカ（Mycobacterium metanolica）と命名した。The present inventor has named this novel microorganism Mycobacterium metanolica.

本細菌のうち代表的な菌株であるミコバクテリウム メ
タノリカBT−84（微工研菌寄第8823号），同BT−143
（微工研菌寄第8824号），同Ｐ−23（微工研菌寄第8825
号），同Ｐ−26（微工研菌寄第8826号）および同Ｐ−85
（微工研菌寄第8827号）のそれぞれの菌学的性質を示
す。Mycobacterium methanolica BT-84 (Microtechnology Research Institute No. 8823) and BT-143, which are typical strains of this bacterium
(Microtechnological Research Institute No. 8824), P-23 (Microtechnical Research Institute No. 8825)
No.), P-26 (Publication No. 8826) and P-85.
The respective microbiological properties of (Microtechnology Research Institute, No. 8827) are shown below.

菌学的性質 （１）顕微鏡的形態 肉汁液体培地および肉汁寒天培地で37℃で３日間培養し
た。Bacteriological Properties (1) Microscopic Morphology It was cultured in a broth liquid medium and a broth agar medium at 37 ° C. for 3 days.

細胞の形状および大きさ 通常は端桿菌。幅0.5〜0.8μ，長さ１〜３μ。Ｖ型の分
裂細胞が認められる。Cell shape and size Usually a rod bacillus. Width 0.5-0.8μ, length 1-3μ. V-type dividing cells are observed.

運動性 なし。 No motility.

胞子の有無 生産されない。 Presence or absence of spores Not produced.

グラム染色 グラム陽性 抗酸性 陽性 （２）各種の培地における生育状態 肉汁寒天平板培養 37℃で３日間培養。 Gram stain Gram positive anti-acid positive (2) Growth state in various media Meat agar plate culture Cultured at 37 ° C for 3 days.

中程度の生育を示す。Shows moderate growth.

コロニーの形状：外形は円形，大きさは２〜3mm,***は
半球状，構造は均質，表面は粗面，辺縁は波状，色は黄
白色で光沢なし，透明度は不透明，硬度はバター質。Shape of colony: Outer shape is circular, size is 2-3 mm, ridge is hemispherical, structure is uniform, surface is rough, edges are wavy, color is yellowish white and glossless, transparency is opaque, hardness is buttery .

メタノール含有寒天平板培養 37℃で３日間培養。 Agar plate culture containing methanol Cultivated at 37 ℃ for 3 days.

肉汁寒天平板培養と同じ。Same as broth agar plate culture.

肉汁寒天斜面培養 37℃で３日間培養。 Broth agar slope culture Cultivated at 37 ℃ for 3 days.

接種線に一様に中程度な生育を示す。Uniformly moderate growth on inoculum.

***は中程度，表面は粗面，辺縁は波状，色は黄白色で
光沢なし，透明度は不透明，硬度はバター質。Medium ridge, rough surface, wavy edges, yellowish white color with no gloss, transparency opaque, buttery hardness.

メタノール含有寒天斜面培養 37℃で３日間培養。 Agar slant culture containing methanol Cultivated at 37 ℃ for 3 days.

肉汁寒天斜面培養と同じ。Same as broth agar slope culture.

肉汁液体培養 37℃で３日間培養。 Broth liquid culture Cultivated at 37 ℃ for 3 days.

白クリーム色の菌環を形成する。また、皮膜を形成す
る。A white cream-colored fungus ring is formed. Also, a film is formed.

ペプトン水液体培養 37℃で３日間培養。 Peptone water liquid culture Cultivated at 37 ℃ for 3 days.

肉汁液体培養と同じ。Same as broth broth.

メタノール含有液体培養 37℃で３日間培養。旺盛に生育する。 Liquid culture containing methanol Cultivated at 37 ℃ for 3 days. It grows vigorously.

白クリーム色の菌環を形成する。また、皮膜を形成す
る。A white cream-colored fungus ring is formed. Also, a film is formed.

肉汁ゼラチン穿刺培養 20℃で４週間培養。 Broth gelatin stab culture Cultivated at 20 ℃ for 4 weeks.

生育する。しかし、ゼラチン液化性はない。To grow. However, it is not gelatin liquefiable.

リトマスミルク培養 37℃で４週間培養。 Litmus milk culture Cultured at 37 ℃ for 4 weeks.

生育し、培養液はアルカリに変化し（pH6.8→pH8.3）す
るが、ペプトン化はしない。It grows and the culture solution changes to alkali (pH 6.8 → pH 8.3), but it does not peptone.

１％小川培地培養 37℃で３日間培養。 1% Ogawa medium culture Cultivated at 37 ℃ for 3 days.

旺盛に生育する。集落性状はスムースである。It grows vigorously. The property of the settlement is smooth.

HA培地（塩酸ヒドロキシルアミン500μg/ml添加１
％小川培地）培養 37℃で５日間培養。HA medium (hydroxylamine hydrochloride 500 μg / ml addition 1
% Ogawa medium) Culture Culture at 37 ℃ for 5 days.

旺盛に生育する。It grows vigorously.

PAS培地（パラアミノサリチル酸ナトリウム2mg/ml
添加１％小川培地）培養 37℃で７日間培養。PAS medium (sodium paraaminosalicylate 2mg / ml
Added 1% Ogawa medium) Culture Culture at 37 ℃ for 7 days.

旺盛に生育し、培地が黒変する。It grows vigorously and the medium turns black.

Ｐ−23株のみ培地の黒変はみられない。Only the P-23 strain has no blackening of the medium.

ピクリン酸培地（0.2％ピクリン酸添加変法Sauton
寒天培地）培養 37℃で２週間間培養。Picric acid medium (modified Sauton with 0.2% picric acid added)
Agar culture) Culture Incubate at 37 ℃ for 2 weeks.

旺盛に生育し、培地が赤褐色となる。It grows vigorously and the medium turns reddish brown.

Ｐ−23株のみ培地が赤褐色にならない。Only for the P-23 strain, the medium does not turn reddish brown.

PNB培地（パラニトロ安息香酸500μg/ml添加１％小
川培地）培養 37℃で７日間培養。PNB medium (1% Ogawa medium containing 500 μg / ml of para-nitrobenzoic acid) Culture Culture at 37 ° C for 7 days.

旺盛に生育する。It grows vigorously.

EB培養（エタンプトール５μg/ml添加１％小川培
地）培養 37℃で７日間培養。EB culture (1% Ogawa's medium with 5 µg / ml of ethaneputol) Culture Culture at 37 ° C for 7 days.

旺盛に生育する。It grows vigorously.

（３）生理学的性質 硝酸塩の還元 硝酸塩を亜硝酸塩に還元する。(3) Physiological Properties Reduction of Nitrate Nitrate is reduced to nitrite.

MRテスト 陰性 VRテスチ 陰性 インドールの生成 陰性 硫化水素の生成 陽性 でんぷんの加水分解 陰性 窒素源の利用 アンモニウム塩，硝酸塩，尿素，およびペプトンを窒素
源として利用する。MR test Negative VR test Negative Indole formation Negative hydrogen sulfide formation Positive Starch hydrolysis Negative Use of nitrogen source Use ammonium salts, nitrates, urea, and peptone as nitrogen sources.

色素の生成 生成しない。Dye formation No formation.

ウレアーゼ 陽性 カタラーゼ 陽性 アンモニアの生成 生成する。Urease positive Catalase positive Ammonia formation Generates.

脱窒反応 陰性 オキシダーゼ反応 陰性 ０−Ｆテスト 陰性 生育の範囲 pH5〜９の範囲で生育する。pH6〜８が好ましい。 Denitrification reaction Negative oxidase reaction Negative 0-F test Negative range of growth It grows in the range of pH 5-9. pH 6-8 is preferred.

５℃,43℃で生育しない。25〜40℃が好ましい。Does not grow at 5 ℃ and 43 ℃. 25-40 degreeC is preferable.

酸素に対する態度 好気性 耐塩性 ３重量％NaCl含有培地で旺盛に生育する。６重量％NaCl
含有培地で、BT−84,Bt−143株は弱く生育するが、Ｐ−
23,P−26,P−85株は生育しない。Attitude toward oxygen Aerobic Salt tolerance Grows vigorously in a medium containing 3% by weight NaCl. 6 wt% NaCl
The BT-84 and Bt-143 strains grow weakly in the containing medium, but P-
The 23, P-26 and P-85 strains do not grow.

ビタミン要求性 なし 光発色試験 陰性 暗発色試験 陰性 ツィーン80水解試験 陰性 ミコール酸の含有 陽性 GC（グアニン＋シトシン）含量 BT−84 66.2mol％ Bt−143 66.2mol％ Ｐ−23 67.2mol％ Ｐ−26 66.8mol％ Ｐ−85 68.7mol％ 主要な菌体脂肪酸組成物 直鎖脂肪酸 C_16:0 モノ不飽和脂肪酸 C_16:1,C_18:1 10メチル脂肪酸 10-methylC_19:0 キノンタイプ メナキノン MK-9(H₂) 細胞壁の構造 meso−ジアミノピメリン酸 分離源 土壌 バージィズ マニュアル オブ デターミネイティブ
バクテリオロジー（Bergey′s Manual Determinative B
acteriology）第８版〔編集者ブッキャナン（Buchana
n），ギボンズ（Gibbons），コワン（Cowan），ホルト
（Holt），リストン（Liston），ムレー（Murray），ニ
ィヴン（Niven），ラヴィン（Ravin）およびスタニィア
（Stainier）：ウィリアムズ アンド ウィルキンス社
（Williams ＆ Wilkins），（1974）〕によると、これ
らの菌株は、桿菌であり、運動性がなく、グラム陽性菌
であり、抗酸性であり、ミコール酸を含有し、好気的で
あることから、ミコバクテリウム属（Mycobacterium）
に属するものと判断した。このことは、GC含量，菌体脂
肪酸組成，キノン・タイプおよび細胞壁の構造の点から
も支持される。No vitamin requirement Photochromic test Negative Dark test Negative Tween 80 Hydrolysis test Negative Mycolic acid content Positive GC (guanine + cytosine) content BT-84 66.2mol% Bt-143 66.2mol% P-23 67.2mol% P-26 66.8mol% P-85 68.7mol% Main microbial fatty acid composition Linear fatty acid C _{16: 0} Monounsaturated fatty acid C _{16: 1} , C _{18: 1} 10 Methyl fatty acid 10-methylC _{19: 0} Quinone type Menaquinone MK- 9 (H ₂ ) Cell wall structure meso-diaminopimelic acid Separation source Soil varieties Manual of Determinative
Bacteriology (Bergey's Manual Determinative B
acteriology) 8th Edition [Editor Buchana
n), Gibbons, Cowan, Holt, Liston, Murray, Niven, Ravin and Stainier: Williams & Wilkins & Company. Wilkins), (1974)], these strains are rod-shaped, non-motile, gram-positive, anti-acidic, contain mycolic acid, and are aerobic. Mycobacterium
I decided to belong to. This is also supported by GC content, cell fatty acid composition, quinone type, and cell wall structure.

しかしながら、ミコバクテリウム属に属する公知の菌種
と比較すると、メタノールをはじめとする各々の炭素源
の資化性，炭素化合物からの酸の生成，耐塩性，生育温
度などの点から一致するものはみあたらない。またミコ
バクテリウム属に属する細菌でメタノール資化能を有す
る細菌は見出されてはおらず、本細菌が最初である。However, when compared with known bacterial species belonging to the genus Mycobacterium, they are in agreement with each other in terms of assimilation of each carbon source including methanol, generation of acid from carbon compounds, salt tolerance, and growth temperature. It doesn't hit. In addition, a bacterium belonging to the genus Mycobacterium having methanol-assimilating ability has not been found, and this bacterium is the first.

実験方法は前記のバージィズ マニュアルおよび医科学
研究所学友会偏「細菌学実習提要」（1958）に従った。The experimental method was in accordance with the above-mentioned Vergiz Manual and the Institute of Medical Science, Alumni Association Bacteriology Practice Guide (1958).

また、メタノール含有寒天平板培地，メタノール含有寒
天斜面培地として次の組成のものをもちいた。すなわ
ち、(NH₄)₂SO₄ 3g,KH₂PO₄ 1.4g,Na₂HPO₄ 2.1g,MgSO₄・7H
₂O 0.2g,CaCl₂・2H₂O 30mg,FeC₆H₅O₇・xH₂O 30mg,MnCl₂・4
H₂O 5mg ZnSO₄・7H₂O 5mg,CuSO₄・5H₂O 0.5mgおよびディ
フコ（Difco）社製寒天（バクトアガー Bacto−agar）
15gを純粋１に溶解し、これをpH7.1に調整し1kg/cm²
Ｇで20分間殺菌したのちメタノール10gを無菌的に添加
し、平板培地あるいは斜面培地を形成し、また、メタノ
ール含有液体培地としては、前記の培地において、寒天
を添加しないものを用いた。Further, the following composition was used as a methanol-containing agar plate medium and a methanol-containing agar slant medium. That is, (NH ₄ ) ₂ SO ₄ 3g, KH ₂ PO ₄ 1.4g, Na ₂ HPO ₄ 2.1g, MgSO ₄・ 7H
₂ O 0.2 g, CaCl ₂ .2H ₂ O 30 mg, FeC ₆ H ₅ O ₇ .xH ₂ O 30 mg, MnCl ₂ .4
H ₂ O 5 mg ZnSO ₄ 7H ₂ O 5 mg, CuSO ₄ 5H ₂ O 0.5 mg and Difco agar (Bacto-agar)
Dissolve 15g in pure 1 and adjust the pH to 7.1, 1kg / cm ²
After sterilizing with G for 20 minutes, 10 g of methanol was aseptically added to form a plate medium or a slant medium, and as the methanol-containing liquid medium, the above-mentioned medium to which agar was not added was used.

分離源の土壌からの本細菌の分離は、前記のメタノール
含有寒天平板培地を用い常法で行った。Separation of the bacterium from the soil of the separation source was carried out by a conventional method using the above-mentioned methanol-containing agar plate medium.

本細菌の培養に使用する培地は、本細菌が資化し得る炭
素源を含有していることを要し、さらに適量の窒素源お
よび無機物などを含有する培地ならば合成培地および天
然培地のどちらでもよい。The medium used for culturing the bacterium needs to contain a carbon source that can be assimilated by the bacterium, and if it is a medium containing an appropriate amount of nitrogen source and inorganic substances, both synthetic medium and natural medium can be used. Good.

炭素源としては、本細菌が資化しうる炭素源であれば特
に制限はないが、メタノール，エタノールなどの合成炭
素源を好適に使用しうるが、その他の炭素源−たとえば
糖蜜，ペプトンおよび肉エキスなどの天然物，グルコー
ス，フラクトース,D−ソルビトール,D−マンニトールな
どの糖類，また、こはく酸などの有機酸なども使用する
ことができる。これらのうち、工業用の醗酵原料として
は、メタノールが最も好ましい。培地におけるこれらの
炭素源の濃度は炭素源の種類により適宜選択される。た
とえば、培養液のメタノールの濃度は６重量％以下が好
ましく、菌の生育および増殖の良好さからは３重量％以
下が好ましい。The carbon source is not particularly limited as long as it can be assimilated by the bacterium, but synthetic carbon sources such as methanol and ethanol can be preferably used, but other carbon sources such as molasses, peptone and meat extract can be preferably used. Natural products such as glucose, fructose, D-sorbitol and D-mannitol, and organic acids such as succinic acid can also be used. Of these, methanol is most preferable as the industrial fermentation raw material. The concentration of these carbon sources in the medium is appropriately selected depending on the type of carbon source. For example, the concentration of methanol in the culture solution is preferably 6% by weight or less, and is preferably 3% by weight or less from the viewpoint of good growth and growth of the bacterium.

窒素源としては、たとえば、アンモニウム塩，硝酸塩な
どの無機窒素化合物および／または、たとえば、尿素，
コーン，スティープ・リカー，カゼイン，ペプトン，酵
母エキス、肉エキスなどの有機窒素含有物が用いられ
る。Examples of the nitrogen source include inorganic nitrogen compounds such as ammonium salts and nitrates and / or urea,
Organic nitrogen-containing substances such as corn, steep liquor, casein, peptone, yeast extract and meat extract are used.

また、無機成分としては、たとえば、カルシウム塩，マ
グネシウム塩，カリウム塩，ナトリウム塩、りん酸塩、
マンガン塩、亜鉛塩，鉄塩，銅塩，モルブデン塩，コバ
ルト塩，ほう素化合物およびよう素化合物が用いられ
る。Further, as the inorganic component, for example, calcium salt, magnesium salt, potassium salt, sodium salt, phosphate,
Manganese salt, zinc salt, iron salt, copper salt, morbuden salt, cobalt salt, boron compound and iodine compound are used.

培養条件は、温度20〜42℃，好ましくは25〜40℃、pH5
〜9,好ましくは６〜８である。このような条件で好気的
に培養を行う。これらの条件をはずれて培養した場合に
は、本細菌の増殖は悪くなるが、これらの条件をはずし
て培養することを妨げない。The culture conditions are temperature 20 to 42 ° C, preferably 25 to 40 ° C, pH 5
-9, preferably 6-8. The culture is performed aerobically under such conditions. When the culture is performed under these conditions, the growth of the bacterium is deteriorated, but it does not prevent the culture without these conditions.

また、培養液の溶存酸素濃度には特に制限はないが、通
常は、0.5〜20ppmが好ましい。そのために、通気量を調
節したり、攪拌したり、酸素を使用したり、また、培養
槽内の圧力を高めるなどの手段が採用される。また、培
養方式は、回分培養または連続培養のいずれでもよい。The dissolved oxygen concentration of the culture medium is not particularly limited, but usually 0.5 to 20 ppm is preferable. For that purpose, means such as adjusting the amount of aeration, stirring, using oxygen, and increasing the pressure in the culture tank are adopted. Further, the culture system may be either batch culture or continuous culture.

窒素源としてアンモニウム塩を使用した場合には、培養
期間中にアンモニアが菌体生成のために消費されて培養
液のpHが低下する。この場合に、培養液のpHを所定の値
に保つために、アンモニア，苛性カリ，苛性ソーダなど
のアルカリを添加することが好ましい。When an ammonium salt is used as the nitrogen source, ammonia is consumed for the production of bacterial cells during the culture period, and the pH of the culture solution decreases. In this case, it is preferable to add an alkali such as ammonia, caustic potash or caustic soda in order to keep the pH of the culture solution at a predetermined value.

このようにして、細菌を培養したのち、菌体を培養液か
ら分離する。分離には通常の固液分離手段が採用され
る。たとえば、培養液そのものをそのまま遠心分離する
との手段、培養液中に本細菌よりも大きい他の微生物の
細胞を濾過助剤として加えたり、あるいは、プレコート
することにより培養液から菌体を濾過分離するとの手
段、培養液に種々の凝集剤を加えて菌体を凝集させてこ
れを濾過あるいは遠心分離により培養液から菌体を分離
するとの手段、培養液のpHを５以下にすることにより、
あるいはpHを５以下にしさらに50〜100℃で加熱するこ
とにより菌体を凝集させ、これを濾過あるいは遠心分離
にかけ菌体を分離するとの手段などを適用しうる。分離
された菌体は、さらに必要に応じて各種の有機溶剤ある
いは水で洗浄され湿潤菌体を得る。湿潤菌体はそのま
ま、もしくは乾燥され、またはさらに種々の処理がほど
こされた後、たとえば、飼料などとして利用されるほか
に、たん白質樹脂、糊剤およびたん白質泡消火剤などの
それぞれの原料として使用しうることは通常の微生物菌
体と同様である。また、得られた菌体から、補酵素，核
酸，ビタミン類，たん白質または脂質などの菌体に含有
されている物質も、単独の物質として、またはこれらの
相互の混合物として抽出され、食品，医薬品，飼料，飼
料添加剤および工業原料などに有効に使用される。After culturing the bacteria in this manner, the bacterial cells are separated from the culture solution. Conventional solid-liquid separation means is adopted for the separation. For example, when the culture solution itself is centrifuged as it is, cells of other microorganisms larger than the bacterium are added as a filter aid in the culture solution, or when the bacterial cells are separated by filtration from the culture solution by precoating. Means for adding various aggregating agents to the culture medium to aggregate the cells and separating the cells from the culture solution by filtering or centrifuging the cells, by adjusting the pH of the culture solution to 5 or less,
Alternatively, a method may be applied in which the cells are aggregated by adjusting the pH to 5 or less and further heating at 50 to 100 ° C., and the cells are filtered or centrifuged to separate the cells. The separated bacterial cells are further washed with various organic solvents or water as necessary to obtain wet bacterial cells. The wet cells may be used as they are, after being dried, or after being subjected to various treatments, as well as being used as, for example, feed, etc., as raw materials for protein resin, sizing agent, protein foam extinguishing agent, etc. What can be used is the same as that of normal microbial cells. Also, substances contained in the bacterial cells such as coenzymes, nucleic acids, vitamins, proteins or lipids are extracted from the obtained bacterial cells as a single substance or as a mixture thereof, and food, It is effectively used for medicines, feeds, feed additives and industrial raw materials.

また、有効成分を抽出したのちの廃菌体も、通常の微生
物の廃菌体と同様に飼料および肥料などとしてならびに
たん白質樹脂，糊剤およびたん白泡消火剤などの原料と
して使用しうる。Also, the waste cells after extracting the active ingredient can be used as feed and fertilizer as well as the waste cells of ordinary microorganisms and as a raw material for protein resins, sizing agents, protein foam extinguishing agents and the like.

〔実施例〕〔Example〕

実施例によって本発明をさらに具体的に説明する。な
お、本発明は実施例に限定されるものではない。The present invention will be described in more detail by way of examples. The present invention is not limited to the examples.

実施例 各地より採取した土壌サンプル約0.5〜1gを殺菌水10ml
に無菌的に入れ懸濁させた。この懸濁液1mlをメタノー
ル含有寒天平板培地上に液深さがほぼ一様になるように
入れ、水分を寒天培地に吸収させたのち、28℃で約７日
間静置培養を行った。寒天培地上に生成したコロニーの
部分をさらにメタノール含有寒天培地で培養し、単一コ
ロニーとなったものをメタノール含有斜面培地に植菌
し、培養した。Example About 0.5 to 1 g of soil sample collected from various places 10 ml of sterilized water
Aseptically placed in and suspended. 1 ml of this suspension was placed on a methanol-containing agar plate medium so that the liquid depth became almost uniform, water was absorbed in the agar medium, and then static culture was performed at 28 ° C. for about 7 days. The portion of the colonies formed on the agar medium was further cultured on a methanol-containing agar medium, and single colonies were inoculated on a methanol-containing slope medium and cultured.

このようにして、純粋菌株としてのミコバクテリウム
メタノリカBT−84,同BT−143,同Ｐ−23,同Ｐ−26および
同Ｐ−85が得られた。なお、これらの培養液の吸光度
（610nm）はいずれもほぼ3.5であった。Thus, mycobacterium as a pure strain
Methanolica BT-84, BT-143, P-23, P-26 and P-85 were obtained. The absorbance (610 nm) of each of these cultures was approximately 3.5.

〔発明の効果〕〔The invention's effect〕

本発明によれば、工業生産により、安定して容易に入手
しうる物質をも原料として使用することができ、しか
も、種々の醗酵生産物を、安価に、安定的に得ることが
できる。According to the present invention, it is possible to use, as a raw material, a substance that is stable and easily available by industrial production, and various fermentation products can be stably obtained at low cost.

Claims (1)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】少なくとも下記の菌学的性質を有すること
を特徴とするミコバクテリウム メタノリカに属する新
規微生物 （イ）グラム陽性 （ロ）桿 菌 （ハ）運動性なし （ニ）抗酸性あり （ホ）ミコール酸を含有する （ヘ）メタノールを資化する1. A novel microorganism belonging to Mycobacterium methanolica characterized by having at least the following mycological properties: (a) Gram-positive (b) Bacillus (c) No motility (d) Anti-acidity ( E) Utilizing mycolic acid (f) Utilizing methanol