JPH0751505B2 - Cardiovascular agent - Google Patents
Cardiovascular agentInfo
- Publication number
- JPH0751505B2 JPH0751505B2 JP30854888A JP30854888A JPH0751505B2 JP H0751505 B2 JPH0751505 B2 JP H0751505B2 JP 30854888 A JP30854888 A JP 30854888A JP 30854888 A JP30854888 A JP 30854888A JP H0751505 B2 JPH0751505 B2 JP H0751505B2
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- JP
- Japan
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- compound
- physiologically acceptable
- acid addition
- acceptable acid
- moranolin
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- Hydrogenated Pyridines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
本発明は、 次の一般式〔II〕で表される化合物、その生理学的に
許容される酸付加塩、及びその四級塩 ノジリマイシン及びその生理学的に許容される酸付加
塩 1,4−ビス(3−モラノリノ−1−プロペニル)ベン
ゼン及びその生理学的に許容される酸付加塩 カスタノスペルミン の上記〜で構成される群から選択される化合物を主
成分とする血栓溶解剤等に関する。 ここに、R2は、水素、アルキル、カルボキシアルキル、
アルキルオキシカルボニルアルキル、ヒドロキシアルキ
ル、シクロアルキルアルキル、置換若しくは無置換のア
リールアルキル、置換若しくは無置換のアリールオキシ
アルキル、アルケニル、ヒドロキシアルケニル、置換若
しくは無置換のアリールアルケニル、アリールオキシア
ルケニル又はアルキルカルバモイルアルキルを表す。The present invention provides a compound represented by the following general formula [II], a physiologically acceptable acid addition salt thereof, and a quaternary salt thereof, nojirimycin and a physiologically acceptable acid addition salt 1,4- The present invention relates to a thrombolytic agent containing a compound selected from the group consisting of bis (3-moranolino-1-propenyl) benzene and a physiologically acceptable acid addition salt thereof, castanospermine, as a main component. Where R 2 is hydrogen, alkyl, carboxyalkyl,
Alkyloxycarbonylalkyl, hydroxyalkyl, cycloalkylalkyl, substituted or unsubstituted arylalkyl, substituted or unsubstituted aryloxyalkyl, alkenyl, hydroxyalkenyl, substituted or unsubstituted arylalkenyl, aryloxyalkenyl or alkylcarbamoylalkyl. Represent
血管に物理的損傷ができた場合に生じる止血栓の生成に
は、血小板の凝集に続くフィブリンの析出が不可欠であ
る。一方止血栓は、血管内で血流を阻害し組織の虚血や
壊死を招来し、心筋梗塞、脳梗塞の原因となるため、生
体は血管内の過剰の血栓を除去するしくみを備えている
が、そのしくみの大きな役割を担うのがプラスミノゲン
・プラスミン系によるフィブリン分解作用である。 プラスミノゲンは、プラスミノゲン活性化因子により活
性化されてプラスミンとなり、プラスミンがフィブリン
を分解する(線溶)。この機構に異常が生じることによ
り、心筋梗塞、脳梗塞等の病弊が発生する。 これらの現代病の原因はさまざまであるが、その治療に
あたっては、生じた血栓を溶解し組織の虚血状態を改善
する血栓溶解療法が有効であり、そのためウロキナーゼ
やストレプトキナーゼ等のプラスミノゲン活性化因子を
投与することが行われている。従って、ウロキナーゼの
分泌を促進する物質は、上記血栓溶解療法を行うに際し
て良好なる医薬品となる可能性があった。 さて、生体内には過剰な線溶に対してもそれを阻害する
機構が備わっていて、例えばプラスミン阻害物質である
α2−プラスミンインヒビター(以下「α2−PI」とい
う)は、プラスミン作用を瞬時に阻害してフィブリン分
解を阻止することが判っている。α2−PIは従って、血
栓溶解療法時には治療阻止因子として働き、また一種の
急性期蛋白質として手術後に発生して術後血栓の原因の
一つともなっている。Precipitation of fibrin following aggregation of platelets is essential for the formation of a hemostatic plug that occurs when physical damage to blood vessels occurs. On the other hand, a hemostatic plug inhibits blood flow in a blood vessel and causes tissue ischemia and necrosis, which causes myocardial infarction and cerebral infarction. However, it is the fibrin-degrading action of the plasminogen / plasmin system that plays a major role in this mechanism. Plasminogen is activated by plasminogen activator to become plasmin, and plasmin decomposes fibrin (fibrinolysis). Abnormalities in this mechanism cause diseases such as myocardial infarction and cerebral infarction. The causes of these modern diseases are various, but in treating them, thrombolytic therapy that dissolves the generated thrombus and improves the ischemic state of tissue is effective, and therefore plasminogen activator such as urokinase and streptokinase is effective. Is being administered. Therefore, the substance that promotes the secretion of urokinase may be a good drug for the above thrombolytic therapy. By the way, there is a mechanism in vivo that inhibits even excessive fibrinolysis, and, for example, α 2 -plasmin inhibitor (hereinafter referred to as “α 2 -PI”), which is a plasmin inhibitor, exerts a plasmin action. It has been shown to inhibit instantly and prevent fibrin degradation. Therefore, α 2 -PI acts as a treatment inhibitor during thrombolytic therapy, and is also generated as a kind of acute phase protein after surgery and is one of the causes of postoperative thrombosis.
叙上のことから、α2−PIの活性を低下させる薬剤があ
れば、血栓溶解療法の効果をより高め、また術後血栓や
血栓症の予防にも役立つことが示唆されていた。 従って本発明の目的は、心筋梗塞、脳梗塞治療に有効な
医薬品を創成するため、優れたα2−PI阻害剤を提供す
ることにあった。 また、ウロキナーゼがプラスミノゲン活性化因子である
ところから、ウロキナーゼの分泌を促進する物質を提供
することも、本発明の重要な目的であった。From the above, it has been suggested that if there is a drug that reduces the activity of α 2 -PI, the effect of thrombolytic therapy will be further enhanced and that it will be useful for the prevention of postoperative thrombosis and thrombosis. Therefore, an object of the present invention was to provide an excellent α 2 -PI inhibitor in order to create a drug effective for treating myocardial infarction and cerebral infarction. Further, since urokinase is a plasminogen activator, it was also an important object of the present invention to provide a substance that promotes the secretion of urokinase.
上記した目的を達成するため、本発明者らは多くの化合
物群をスクリーニングしていたが、極めて特異な僥倖に
恵まれた結果、本発明に係る化合物が優れたα2−PI活
性低下作用及びウロキナーゼ分泌促進作用を有している
ことを突き止め、またこれらの化合物がα2−PI活性低
下作用と同時にウロキナーゼによる血栓溶解効果時にお
いてその溶解促進効果をも有することを見出し、本発明
に到達することができた。 本発明化合物は、後に詳述するように、優れたα2−PI
低下作用及びウロキナーゼ分泌促進作用を有し、血栓溶
解治療剤として心筋梗塞、脳梗塞の治療のための医薬品
となるため、極めて重要である。 本発明化合物は、特許請求の範囲に記載した構造上の特
徴を有している。 一般式〔I〕、〔II〕におけるR1、R2としては、前記し
た置換基等を挙げることができる。 ここにアルキルとは炭素数1〜10程度のものを挙げるこ
とができるが、例えばメチル、エチル等の低級アルキル
が好ましい。 カルボキシアルキルとしては、例えば、カルボキシメチ
ル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル等を挙げる
ことができるが、アルキルの炭素数がより大きいものも
本発明化合物に含まれるものである。 アルキルオキシカルボニルアルキルとしては、例えば、
メトキシカルボニルメチル、メトキシカルボニルエチ
ル、メトキシカルボニルプロピル、メトキシカルボニル
ブチル、エトキシカルボニルメチル、エトキシカルボニ
ルエチル、エトキシカルボニルプロピル、エトキシカル
ボニルブチル等を挙げることができるが、アルキルの炭
素数がより大きいものも本発明化合物に含まれるもので
ある。 ヒドロキシアルキルとしては、例えば、ヒドロキシメチ
ル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ヒドロキ
シブチル等を挙げることができるが、アルキルの炭素数
がより大きいものも本発明化合物に含まれるものであ
る。 シクロアルキルアルキルとしては、例えば、シクロプロ
ピルメチル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチ
ル等を挙げることができるが、アルキルの炭素数がより
大きいものも本発明化合物に含まれるものである。 アリールアルキルとしては、例えば、ベンジル、フェネ
チル、フェニルプロピル、フェニルブチル、フェニルペ
ンチル、ナフチルメチル、ナフチルエチル、ナフチルプ
ロピル、ナフチルブチル等を挙げることができるが、ア
ルキルの炭素数がより大きいものも本発明化合物に含ま
れるものである。 アリールオキシアルキルとしては、例えば、フェノキシ
メチル、フェノキシエチル、フェノキシプロピル、フェ
ノキシブチル、ナフチルオキシメチル、ナフチルオキシ
エチル、ナフチルオキシプロピル、ナフチルオキシブチ
ル等を挙げることができるが、アルキルの炭素数がより
大きいものも本発明化合物に含まれるものである。 アルケニルとしては、例えば、ビニル、プロペニル、ブ
テニル等を挙げることができるが、炭素数がより大きい
ものも本発明化合物に含まれるものである。 ヒドロキシアルケニルとしては、例えば、ヒドロキシビ
ニル、ヒドロキシプロペニル、ヒドロキシブテニル等を
挙げることができるが、炭素数がより大きいものも本発
明化合物に含まれるものである。 アリールアルケニルとしては、例えば、フェニルビニ
ル、フェニルプロペニル、フェニルブテニル、ナフチル
ビニル、ナフチルプロペニル、ナフチルブテニル等を挙
げることができるが、炭素数がより大きいものも本発明
化合物に含まれるものである。 アリールオキシアルケニルとしては、例えば、フェノキ
シビニル、フェノキシプロペニル、フェノキシブテニ
ル、ナフチルオキシビニル、ナフチルオキシプロペニ
ル、ナフチルオキシブテニル等を挙げることができる
が、炭素数がより大きいものも本発明化合物に含まれる
ものである。 アルキルカルバモイルアルキルとしては、例えば、メチ
ルカルバモイルメチル、メチルカルバモイルエチル、メ
チルカルバモイルプロピル等を挙げることができるが、
炭素数がより大きいものも本発明化合物に含まれるもの
である。 本発明化合物としては、上記したもののほか、モラノリ
ンの基本骨格における1位がOHで置換されたノジリマイ
シン及びその誘導体(例えばN置換体)を挙げることが
できる。これらの化合物群もまた、モラノリンの誘導体
(N置換体)と同様の作用を有し、本発明化合物に含ま
れるものである。 本発明化合物にはまた、モラノリン基本骨格をビス体と
して有する化合物も含まれる。これらもまた他の本発明
化合物と同様の薬理効果を有している。 本発明化合物にはカスタノスペルミンも含まれ、他の本
発明化合物と同様の薬理効果を有している。 これら化合物の代表例として、本発明化合物にはノジリ
マイシン及びその生理学的に許容される塩、及び、1,4
−ビス(3−モラノリノ−1−プロペニル)ベンゼン及
びその生理学的に許容される塩、更には、カスタノスペ
ルミンが含まれる。これらもまた、その他の本発明化合
物と同様に、優れたα2−PI低下作用及びウロキナーゼ
分泌促進作用を有するものである。 本発明化合物は、公知の方法によって製造することがで
きる。例えば、N−ブチルモラノリンの製造例を以下に
掲げる。 〔製造例1〕 モラノリン50g、n−ブチルブロマイド126g、炭酸カリ
ウム170gをジメチルホルムアミド1300ml中に加え、室温
で7日間撹拌し反応を完結させた。濾過して不純物を除
去後、溶媒を減圧下に留去し強酸性イオン交換樹脂ダウ
エックス50W×2(H+)1000mlを通過させ、充分水洗し
た後、1Nアンモニア水で溶出した。溶出液を減圧下に濃
縮した後、メタノール50mlを加え、室温に放置して生じ
た結晶(47g)を集めた。 これをメタノール500mlに熱時溶解後、室温まで冷却し
た後、活性炭で処理し、約100mlまで濃縮後、室温に放
置して析出した結晶40gを集めた。これをメタノール200
mlに熱時溶解後、軽く濃縮して室温に放置して析出した
結晶を集め、70℃、減圧下で充分乾燥して、目的物たる
N−(n−ブチル)モラノリン34gを得た。収率50.6
%。 融点128〜129℃。 元素分析値 計算値(%) C:54.78 H:9.65 N:6.39 実測値(%) C:54.57 H:9.65 N:6.60 ▲[α]24 D▼=−14.59゜(1%、水)1 H−MNR:0.88(3H,t,J=7.2Hz,CH3CH2CH2CH2−), 1.16〜1.56(4H,m,CH3CH2CH2CH2−), 2.17〜2.36(2H,m,CH3CH2CH2CH2−), 2.48〜2.82(2H,m,H−1a,H−5), 3.02(1H,dd,J=5.1,11.4Hz,H−1e), 3.22(1H,t,J=9.0Hz,H−4), 3.66(1H,t,J=9.4Hz,H−3), 3.44〜3.60(1H,m,H−2), 3.74〜3.96(2H,m,H−6,H−6′) 〔製造例2] モラノリン5g、n−ブチルブロマイド13g、炭酸カリウ
ム17gをジメチルホルムアミド130ml中に加え、100℃で
5時間反応した。製造例1と同様に処理して、N−(n
−ブチル)モラノリン5.1gを得た。収率75.8%。 [製造例3] 5gのモラノリンを100mlのメタノール中に加え、室温で
撹拌しながら0.7gの塩化水素を溶かしたメタノール50ml
に20mlのn−ブチルアルデヒドを溶かした溶液と3gのNa
CNBH3を加え、終夜反応した。反応後、減圧下に溶媒を
除去し、水に溶かし、クロロホルムで分配した。水層を
200mlのダイアイオンSA−11A(OH-)型のカラムに通過
させ充分水洗した。通過液と洗液とを合わせ、200mlの
ダウエックス50W×28(H+)のカラムに通過させ、充分
水洗後1Nアンモニア水で溶出した。溶出液を減圧下で溶
媒を留去した後、エタノールより結晶化、エタノールで
再結晶して、5.1gのN−(n−ブチル)モラノリンを得
た。収率75.8%。 本発明化合物の典型的な例として、以下の化合物を挙げ
ることができる。 化合物番号1 モラノリン 化合物番号2 N−メチルモラノリン 化合物番号2a N−(n−ブチル)モラノリン 化合物番号3 N−(5−メトキシカルボニルペンチル)モラノリント
シレート 化合物番号4 N−ハイドロキシエチルモラノリン 化合物番号5 N−(4−メトキシカルボニルブチル)モラノリン 化合物番号6 ノジリマイシン バイサルファイト 化合物番号7 1,4−ビス(3−モラノリノ−1−プロペニル)ベンゼ
ン ジヒドロクロライド 化合物番号8 N−(n−ヘキシル)モラノリン トシレート 化合物番号9 N−イソプレニルモラノリン 化合物番号10 N−(2−ヒドロキシデシル)モラノリン トシレート 化合物番号11 N−(10−カルボキシデシル)モラノリン ナトリウム
塩 化合物番号12 N−(3−フェニルプロピル)モラノリン トシレート 化合物番号13 N−ベンジルモラノリン トシレート 化合物番号14 N−シンナミルモラノリン 塩酸塩 化合物番号15 N−(4−フェニルブチル)モラノリン トシレート 化合物番号16 N−(2−フェノキシエチル)モラノリン 化合物番号17 N−(3−フェノキシプロピル)モラノリン トシレー
ト 化合物番号18 N−(5−フェニルペンチル)モラノリン トシレート 化合物番号19 N−(2−シクロペンチルエチル)モラノリン トシレ
ート 化合物番号20 N−〔3−(3−(2−メトキシエトキシ)フェニル)
2−2ブテニル〕モラノリン 化合物番号21 N,N−ジメチルモラノリン アンモニウム アイオダイ
ド 化合物番号22 N−エチルモラノリン 化合物番号23 N−シンナミルモラノリン 化合物番号24 N−ゲラニルモラノリン トシレート 化合物番号25 N−(2−ヒドロキシ−3−フェノキシプロピル)モラ
ノリン トシレート 化合物番号26 N−ファルネシルモラノリン トシレート 化合物番号27 N−10−(N−メチルカルバモイル)デシルモラノリン 化合物番号28 N−(4−フェニル−3−ブテニル)モラノリン トシ
レート 化合物番号29 N−(3−フェニル−2−メチル−2−プロペニル)モ
ラノリン 化合物番号30 N−[3−(o−クロロフェノキシ)プロピル]モラノ
リン 化合物番号31 N−(γ−メチル−4−ブロモシンナミル)モラノリン 化合物番号32 N−〔4−(3−フルオロ−4−メチルフェニル)ブチ
ル〕モラノリン 化合物番号33 N−(p−エトキシシンナミル)モラノリン 化合物番号34 N−(p−イソプロポキシシンナミル)モラノリン 化合物番号35 N−(γ−メチル−m−メチルシンナミル)モラノリン 化合物番号36 N−[4−(m−メトキシフェニル)−3−ペンテニ
ル]モラノリン 化合物番号37 N−(p−エトキシカルボニルフェノキシエチル)モラ
ノリン 〔エミグリテート(emiglitate)〕 化合物番号38 カスタノスペルミン 本発明に係る化合物としては、前記に掲げるもののほ
か、例えば以下のものを挙げることができる。 N−イソブチルモラノリン トシレート N−ヒドロシキエチルモラノリン トシレート N−アミノモラノリン ハイドロブロマイド N−メトキシエチルモラノリン トシレート N−メトキシエトキシエチルモラノリン トシレート N−デシルモラノリン トシレート N−(2−ヒドロキシヘキサデシル)モラノリン トシ
レート N−[2−ヒドロキシ−3−(p−トリルオキシ)プロ
ピル]モラノリン トシレート N−[2−ヒドロキシ−3−(p−メトキシフェニルオ
キシ)プロピルモラノリン トシレート N−[2−ヒドロキシ−3−(p−クロロフェニルオキ
シ)プロピル]モラノリン トシレート N−(3−カルバモイルプロピル)モラノリン N−ノニルモラノリン トシレート N−ウンデシルモラノリン トシレート N−(2−ヒドロキシテトラデシル)モラノリン トシ
レート N−(4,4−ジフェニル−3−ブテニル)モラノリン N−(5−カルボキシペンチル)モラノリン N−ファルネシルモラノリン N−(γ−メチル−4−クロロシンナミル)モラノリン N−(γ−メチル−4−メチルシンナミル)モラノリン N−[4−(p−クロロフェニル)−3−ペンテニル]
モラノリン N−[4−(m−クロロフェニル)−3−ペンテニル]
モラノリン N−[4−(o−クロロフェニル)−3−ペンテニル]
モラノリン N−[4−(p−フェノキシフェニル)−3−ペンテニ
ル]モラノリン N−[4−(p−エトキシフェニル)−3−ペンテニ
ル]モラノリン N−(m−メトキシシンナミル)モラノリン N−〔3−(3−クロロフェニル)−2−ブテニル〕モ
ラノリン N−〔4−(4−クロロフェニル)−3−ブテニル〕モ
ラノリン N−(4−カルボキシシンナミル)モラノリン ハイド
ロクロライド N−(3−カルボキシ−2−プロペニル)モラノリン N−(m−トリエチルアンモニオエトキシシンナミル)
モラノリン ジピクレート N−イソプロピルモラノリン N−(p−トリメチルアンモニオエトキシシンナミル)
モラノリンクロライド 塩酸塩 本発明化合物を医薬として投与する場合、本発明化合物
はそのまま又は医薬的に許容される無毒性かつ不活性の
担体中に、例えば0.1%〜99.5%、好ましくは0.5%〜90
%含有する医薬組成物として、人を含む動物に投与され
る。 担体としては、固形、半固形、又は液状の希釈剤、充填
剤、及びその他の処方用の助剤一種以上が用いられる。
医薬組成物は、投与単位形態で投与することが望まし
い。本発明医薬組成物は、経口投与、静脈内投与等の組
織内投与、局所投与(経皮投与等)又は経直腸的に投与
することができる。これらの投与方法に適した剤型で投
与されるのはもちろんである。例えば、経口投与が特に
好ましい。 血栓溶解治療剤としての用量は、年齢、体重、等の患者
の状態、投与経路、病気の性質と程度等を考慮した上で
調整することが望ましいが、通常は、成人に対して本発
明の有効成分量として、1日あたり、50〜3000mg/ヒト
の範囲が、好ましくは500mg〜1000mg/ヒトの範囲が一般
的である。場合によっては、これ以下でも足りるし、ま
た逆にこれ以上の用量を必要とすることもある。また1
日2〜3回に分割して投与することが望ましい。In order to achieve the above-mentioned object, the present inventors screened many compound groups, but as a result of being endowed with an extremely specific number of compounds, the compound according to the present invention has an excellent α 2 -PI activity lowering action and urokinase. discovered that it has a secretion-stimulating action, also found to have also the dissolution accelerating effect during thrombolytic effect simultaneously urokinase and these compounds alpha 2 -PI activity lowering effect, to reach the present invention I was able to. The compound of the present invention has excellent α 2 -PI, as described in detail below.
It has a lowering action and a urokinase secretagogue action, and is extremely important because it serves as a thrombolytic therapeutic drug for treating myocardial infarction and cerebral infarction. The compounds of the present invention have the structural characteristics recited in the claims. Examples of R 1 and R 2 in the general formulas [I] and [II] include the substituents described above. Examples of the alkyl include those having about 1 to 10 carbon atoms, and lower alkyl such as methyl and ethyl is preferable. Examples of carboxyalkyl include carboxymethyl, carboxyethyl, carboxypropyl and the like, and those having a higher alkyl carbon number are also included in the compound of the present invention. Examples of alkyloxycarbonylalkyl include:
Examples thereof include methoxycarbonylmethyl, methoxycarbonylethyl, methoxycarbonylpropyl, methoxycarbonylbutyl, ethoxycarbonylmethyl, ethoxycarbonylethyl, ethoxycarbonylpropyl, ethoxycarbonylbutyl, etc., but those having a higher alkyl carbon number are also included in the present invention. It is included in the compound. Examples of hydroxyalkyl include hydroxymethyl, hydroxyethyl, hydroxypropyl, hydroxybutyl, and the like, and those having a higher alkyl carbon number are also included in the compound of the present invention. Examples of cycloalkylalkyl include cyclopropylmethyl, cyclobutylmethyl, cyclopentylmethyl and the like, but those having a higher alkyl carbon number are also included in the compound of the present invention. Examples of the arylalkyl include benzyl, phenethyl, phenylpropyl, phenylbutyl, phenylpentyl, naphthylmethyl, naphthylethyl, naphthylpropyl, naphthylbutyl, and the like, but those having a larger alkyl carbon number are also included in the present invention. It is included in the compound. Examples of the aryloxyalkyl include phenoxymethyl, phenoxyethyl, phenoxypropyl, phenoxybutyl, naphthyloxymethyl, naphthyloxyethyl, naphthyloxypropyl, and naphthyloxybutyl, but the number of carbon atoms of the alkyl is larger. Those are also included in the compound of the present invention. Examples of alkenyl include vinyl, propenyl, butenyl, etc., but those having a larger number of carbon atoms are also included in the compound of the present invention. Examples of hydroxyalkenyl include hydroxyvinyl, hydroxypropenyl, hydroxybutenyl and the like, but those having a larger carbon number are also included in the compound of the present invention. Examples of the arylalkenyl include phenylvinyl, phenylpropenyl, phenylbutenyl, naphthylvinyl, naphthylpropenyl, naphthylbutenyl, etc., but those having a larger carbon number are also included in the compound of the present invention. Examples of the aryloxyalkenyl include phenoxyvinyl, phenoxypropenyl, phenoxybutenyl, naphthyloxyvinyl, naphthyloxypropenyl, naphthyloxybutenyl, etc., but those having a larger carbon number are also included in the compound of the present invention. It is what is done. Examples of the alkylcarbamoylalkyl include methylcarbamoylmethyl, methylcarbamoylethyl, methylcarbamoylpropyl and the like.
Those having a larger carbon number are also included in the compound of the present invention. Examples of the compound of the present invention include, in addition to those described above, nojirimycin in which the 1-position in the basic skeleton of moranolin is substituted with OH and a derivative thereof (eg, N-substituted product). These compound groups also have the same action as the derivative of moranolin (N-substituted form) and are included in the compound of the present invention. The compounds of the present invention also include compounds having a moranoline basic skeleton as a bis form. These also have the same pharmacological effects as the other compounds of the present invention. The compound of the present invention also includes castanospermine and has the same pharmacological effect as that of the other compounds of the present invention. As typical examples of these compounds, the compounds of the present invention include nojirimycin and physiologically acceptable salts thereof, and 1,4
-Bis (3-moranolino-1-propenyl) benzene and its physiologically acceptable salts, as well as castanospermine. Similar to the other compounds of the present invention, these also have excellent α 2 -PI lowering action and urokinase secretagogue action. The compound of the present invention can be produced by a known method. For example, a production example of N-butylmoranolin is shown below. [Production Example 1] 50 g of moranolin, 126 g of n-butyl bromide and 170 g of potassium carbonate were added to 1300 ml of dimethylformamide, and the mixture was stirred at room temperature for 7 days to complete the reaction. After filtering to remove impurities, the solvent was distilled off under reduced pressure, 1000 ml of strongly acidic ion exchange resin Dowex 50W × 2 (H + ) was passed through, thoroughly washed with water, and then eluted with 1N aqueous ammonia. The eluate was concentrated under reduced pressure, 50 ml of methanol was added, and the mixture was left standing at room temperature to collect crystals (47 g). This was dissolved in 500 ml of methanol under heat, cooled to room temperature, treated with activated carbon, concentrated to about 100 ml, and allowed to stand at room temperature to collect 40 g of precipitated crystals. Add this to methanol 200
After hot-dissolving in ml, the solution was concentrated lightly and allowed to stand at room temperature, and the precipitated crystals were collected and sufficiently dried at 70 ° C. under reduced pressure to obtain 34 g of N- (n-butyl) moranolin as a target product. Yield 50.6
%. Melting point 128-129 ° C. Elemental analysis value Calculated value (%) C: 54.78 H: 9.65 N: 6.39 Measured value (%) C: 54.57 H: 9.65 N: 6.60 ▲ [α] 24 D ▼ = -14.59 ° (1%, water) 1 H −MNR: 0.88 (3H, t, J = 7.2Hz, CH 3 CH 2 CH 2 CH 2 −), 1.16 to 1.56 (4H, m, CH 3 CH 2 CH 2 CH 2 −), 2.17 to 2.36 (2H, m, CH 3 CH 2 CH 2 CH 2 −), 2.48 to 2.82 (2H, m, H−1a, H-5), 3.02 (1H, dd, J = 5.1,11.4Hz, H−1e), 3.22 ( 1H, t, J = 9.0Hz, H-4), 3.66 (1H, t, J = 9.4Hz, H-3), 3.44 to 3.60 (1H, m, H-2), 3.74 to 3.96 (2H, m) , H-6, H-6 ') [Production Example 2] 5 g of moranolin, 13 g of n-butyl bromide and 17 g of potassium carbonate were added to 130 ml of dimethylformamide, and the mixture was reacted at 100 ° C for 5 hours. N- (n
-Butyl) moranolin 5.1 g was obtained. Yield 75.8%. [Production Example 3] 5 g of moranolin was added to 100 ml of methanol, and while stirring at room temperature, 0.7 g of hydrogen chloride was dissolved in 50 ml of methanol.
A solution of 20 ml of n-butyraldehyde and 3 g of Na
CNBH 3 was added and reacted overnight. After the reaction, the solvent was removed under reduced pressure, the residue was dissolved in water and partitioned with chloroform. Water layer
It was passed through a 200 ml Diaion SA-11A (OH − ) type column and washed thoroughly with water. The passing solution and the washing solution were combined and passed through a 200 ml Dowex 50W × 28 (H + ) column, thoroughly washed with water and eluted with 1N ammonia water. The solvent was distilled off from the eluate under reduced pressure, followed by crystallization from ethanol and recrystallization from ethanol to obtain 5.1 g of N- (n-butyl) moranolin. Yield 75.8%. The following compounds can be mentioned as typical examples of the compound of the present invention. Compound No. 1 Moranolin Compound No. 2 N-Methyl Moranolin Compound No. 2a N- (n-butyl) Moranolin Compound No. 3 N- (5-Methoxycarbonylpentyl) Moranolin Tosylate Compound No. 4 N-Hydroxyethyl Moranolin Compound No. 5 N- (4-methoxycarbonylbutyl) moranolin Compound No. 6 nojirimycin bisulfite Compound No. 7 1,4-bis (3-moranolino-1-propenyl) benzene dihydrochloride Compound No. 8 N- (n-hexyl) moranolin tosylate Compound No. 9 N-isoprenylmoranolin Compound No. 10 N- (2-hydroxydecyl) moranolin tosylate Compound No. 11 N- (10-carboxydecyl) moranolin sodium salt Compound No. 12 N- (3-phenylpropyl) moranolin Tosylate Compound No. 13 N-benzylmoranolin Tosylate Compound No. 14 N-Cinnamyl Moranolin Hydrochloride Compound No. 15 N- (4-phenylbutyl) moranolin Tosylate Compound No. 16 N- (2-phenoxyethyl) moranolin Compound No. 17 N- (3-phenoxypropyl) moranolin tosylate Compound No. 18 N- (5-phenylpentyl) moranolin tosylate Compound No. 19 N- (2-cyclopentylethyl) moranolin tosylate Compound No. 20 N- [3- (3- (2-methoxyethoxy) ) Phenyl)
2-2 butenyl] Moranolin Compound No. 21 N, N-Dimethylmoranolin Ammonium iodide Compound No. 22 N-Ethyl Moranolin Compound No. 23 N-Cinnamyl Moranoline Compound No. 24 N-geranyl Moranolin Tosylate Compound No. 25 N- (2 -Hydroxy-3-phenoxypropyl) moranolin tosylate Compound No. 26 N-farnesylmoranolin tosylate Compound No. 27 N-10- (N-methylcarbamoyl) decylmoranolin Compound No. 28 N- (4-phenyl-3-butenyl) moranolin Tosylate Compound No. 29 N- (3-phenyl-2-methyl-2-propenyl) moranolin Compound No. 30 N- [3- (o-chlorophenoxy) propyl] moranolin Compound No. 31 N- (γ-methyl-4-bromocinnamyl ) Moranoline compound number No. 32 N- [4- (3-fluoro-4-methylphenyl) butyl] moranolin Compound No. 33 N- (p-ethoxycinnamyl) moranolin Compound No. 34 N- (p-isopropoxycinnamyl) moranolin Compound No. 35 N- (γ-methyl-m-methylcinnamyl) moranolin Compound No. 36 N- [4- (m-methoxyphenyl) -3-pentenyl] moranolin Compound No. 37 N- (p-ethoxycarbonylphenoxyethyl) moranolin [Emiglitate (Emiglitate)] Compound No. 38 Castanospermine Examples of the compound according to the present invention include the following, in addition to the compounds listed above. N-isobutyl moranoline tosylate N-hydroxyethyl moranoline tosylate N-amino moranoline hydrobromide N-methoxyethyl moranoline tosylate N-methoxyethoxyethyl moranoline tosylate N-decyl moranoline tosylate N- (2-hydroxyhexadecyl ) Moranoline tosylate N- [2-hydroxy-3- (p-tolyloxy) propyl] moranoline tosylate N- [2-hydroxy-3- (p-methoxyphenyloxy) propyl moranoline tosylate N- [2-hydroxy-3-] (P-Chlorophenyloxy) propyl] moranolin tosylate N- (3-carbamoylpropyl) moranolin N-nonylmoranolin tosylate N-undecylmoranolin tosylate N- (2-hydroxy Tetradecyl) moranolin tosylate N- (4,4-diphenyl-3-butenyl) moranolin N- (5-carboxypentyl) moranolin N-farnesylmoranolin N- (γ-methyl-4-chlorocinnamyl) moranolin N- (γ -Methyl-4-methylcinnamyl) moranolin N- [4- (p-chlorophenyl) -3-pentenyl]
Moranolin N- [4- (m-chlorophenyl) -3-pentenyl]
Moranolin N- [4- (o-chlorophenyl) -3-pentenyl]
Moranoline N- [4- (p-phenoxyphenyl) -3-pentenyl] moranoline N- [4- (p-ethoxyphenyl) -3-pentenyl] moranolin N- (m-methoxycinnamyl) moranolin N- [3- (3-Chlorophenyl) -2-butenyl] moranolin N- [4- (4-chlorophenyl) -3-butenyl] moranolin N- (4-carboxycinnamyl) moranolin hydrochloride N- (3-carboxy-2-propenyl) Moranoline N- (m-triethylammonioethoxycinnamyl)
Moranoline dipicrate N-isopropyl Moranoline N- (p-trimethylammonioethoxycinnamyl)
Moranolin chloride hydrochloride When the compound of the present invention is administered as a pharmaceutical, the compound of the present invention is used as it is or in a pharmaceutically acceptable non-toxic and inert carrier, for example, 0.1% to 99.5%, preferably 0.5% to 90%.
%, And is administered to animals including humans. As the carrier, one or more solid, semi-solid, or liquid diluents, fillers, and other auxiliaries for formulation are used.
The pharmaceutical composition is preferably administered in dosage unit form. The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally, intratically such as intravenously, locally (such as transdermally), or rectally. It is needless to say that the dosage form is suitable for these administration methods. For example, oral administration is particularly preferred. The dose as a thrombolytic agent is preferably adjusted in consideration of the patient's condition such as age and body weight, administration route, nature and degree of disease, etc. The amount of the active ingredient per day is generally in the range of 50 to 3000 mg / human, preferably 500 mg to 1000 mg / human. In some cases, lower doses may be sufficient, and conversely, higher doses may be required. Again 1
It is desirable to administer in 2 to 3 divided doses daily.
以下に本発明化合物のα2−PI低下作用、ウロキナーゼ
分泌促進作用及び毒性について詳述し、本発明を更に詳
しく説明する。 試験例1 インビトロ(in vitro)における活性 ヒト肝ガン由来HepG2細胞は、α2−プラスミンインヒ
ビター(α2−PI)を合成し、分泌することが知られて
いる。このHepG2細胞2×106個をファルコン社製プラス
チック培養プレート(直径100mm)にまき、10%の牛胎
児血清を含むイーグル最小培地を用いて培養した。 3日後、プレート底面に付着した細胞をダルベッコ リ
ン酸緩衝液で2回洗浄した後、本発明化合物被験検体を
200μg/ml含む無血清イーグル培地(フェノールレッド
不含)8mlを用いてさらに3〜4日間培養した。培養
後、培地7mlを採取し、アミコン社製セントリフロー(C
F25)を用い、約1mlに濃縮し、さらに凍結乾燥した。 凍結乾燥したサンプルに塩酸モノメチルアミン8.1mg/ml
を含む50mMトリス緩衝液0.7mlを加え溶解することによ
り約10培に濃縮した。 濃縮したサンプル100μに50μの15mCUプラスミン液
を加え、さらに50μの0.25μモルS−2251合成発色基
質液を加え、37℃で10分間反応させた。2%クエン酸溶
液1mlを加えることにより反応を停止し、O.D.405nmでS
−2251基質から遊離するp−ニトロアニリドを測定し
た。 濃縮サンプルの代わりに上述のトリス緩衝液を用いて、
S−2251基質の分解を測定したものをプラスミン活性10
0%のコントロールとし、被験検体を加えずに培養した
濃縮サンプルをα2−PI活性100%のコントロールとし
た。得られた結果は、次式に従って計算した。 A1は100%コントロールの吸光度を、A2は濃縮サンプル
を用いたときの吸光度を、またA3はα2−PI活性100%
コントロールの吸光度を、それぞれ表す。サンプル数
は、おのおの3個であった。結果は、表1に示した。本
発明化合物がα2−PI活性を低下させることは明白であ
る。 試験例2 インビボ(in vivo)における活性 投与対象動物として、雄性ビーグル犬を、コントロール
群、投与群それぞれ3匹ずつ用いた。 被験検体(化合物番号2)は、0.1モルリン酸緩衝液(p
H7.2)を用いて0.1mlあたり10mgとなるように溶解し
た。溶解後、滅菌フィルター(ポアサイズ0.2μm)を
用いて濾過滅菌した後に、体重1kg当たり0.3ml投与した
(30mg/kg)。投与は右前肢静脈より7日間行った。採
取した血液は3.8%クエン酸ナトリウム1容に対し血液
9容となるように混合し、3000rpm、15分間遠心分離し
て血漿を分離した。 α2−PI活性は、合成発色基質S−2251のプラスミン分
解に対する阻害作用として測定した。測定結果は被験検
体投与前のプラスミン阻害活性を100%として、それに
対する投与後の阻害活性の変化として示した(表2)。
各サンプル数は、3個であった。 α2−PI活性は、被験検体の30mg/kg連続投与により、
明らかに低下した。 Cはコントロールを表し、検体は被験検体を表す。 試験例3 インビトロ(in vitro)血栓溶解試験 被験検体(化合物番号2)を、30mg/kgの用量でビーグ
ル犬に対して1日1回連続投与し、投与前、投与4日
目、に血漿を前述のように分離した。血漿中のα2−PI
活性を測定するとともにその血漿を用いてインビトロで
フィブリン塊を作製し、血栓溶解剤であるウロキナーゼ
を作用させたときの溶解度を、投与前血漿と投与4日後
血漿との間で比較した。 分離した血漿300μに125I−フィブリノーゲン(0.1mC
i/ml)を40μ加え、混合し、これを50μずつ試験管
に分注した。25U/mlトロンビン、0.5M塩化カルシウム混
合溶液を各試験管に5μずつ加え、37℃で30分間イン
キュベートし、フィブリン塊を作製した。2%アルブミ
ン溶液及びこの液のウロキナーゼを15、30U/mlとなるよ
うに溶解したものを、おのおの試験管に1mlずつ加え
た。 37℃で12時間インキュベートし、上清25μをRAI用チ
ューブに採取し、γ−カウンターで上清中に遊離する
125I−フィブリン分解物を測定した。サンプル数は、そ
れぞれ3個であった。 表3に示すように、被験検体の投与によりα2−PI活性
の低下した血漿を用いた場合、投与前血漿よりフィブリ
ン塊の溶解が亢進したことは明らかである。 試験例4 インビトロ(in vitro)血栓溶解試験 樹立血管内皮細胞培養系における血栓溶解活性誘導能
を、CPAE(ウシ肺動脈血管内皮細胞Endothelia)を用い
て検討した。 CPAE細胞は、大日本製薬ラボラトリープロダクツ部より
購入した。CPAE細胞は、25cm2の培養フラスコに10%FCS
−Eagle MEM培地を用いて継代し、継代時に分取した細
胞懸濁液から0.1mlを滅菌したピペットで試験管に移し
た後、トリパンブルー溶液0.9mlで10倍に希釈し、血球
計算盤で細胞数を計測し、細胞数が2×105cells/mlと
なるように10%FCS−Eagle MEM培地で希釈後、96ウェル
のマイクロタイタープレート(コーニング社製)に各ウ
ェル100μずつ、すなわち2×104cells/ウェルとなる
ようにマイクロピペットで注入した。プレートは、37
℃、5%CO2中で培養を開始した。 培養開始後24時間めに、本発明化合物を0.2mg/mlとなる
ように培地で溶解し、溶解しないものは1%以下のDMSO
に溶解した溶液をフィルターを使って無菌濾過し、その
5μを滅菌したマイクロピペットでウェルに加え、37
℃、5%CO2中で72時間培養した後、採取した培養上清
を測定に供した。 測定は、以下のようにして行う。フィブリンプレート
(北里研究所製)のウェルにプラスミノーゲンを5μ
注入し拡散するまで放置する。拡散後、培養上清を5μ
注入した後37℃の単産ガス培養器中に入れ、4時間後
に線溶による透明な溶解円の形成をもって判定する。こ
の時、同時にポジティブコントロールとしてt−PAを入
れたウェルにおける線溶による透明な円ができることを
確認した。その透明な円の径は9〜10mmであった。 本発明化合物を添加した培養上清の場合にも、4.5〜8.5
mmの透明な溶解円が認められたが、本発明化合物を添加
しない細胞の培養上清の場合(コントロール)には、何
らの変化も認められなかった。4mm以上の溶解円を形成
した場合に、CPAE細胞の血栓溶解能を誘導したものと判
定した。 線溶活性のチェックが終了した後、ウェルを最終濃度2.
5%グルタルアルデヒドて固定した後、液を捨て、PBSで
洗浄し、洗浄後、水分を切って0.1クリスタルバイオレ
ットを100μ入れて染色し、2〜3分間放置後、流水
で流す。余分の染色液を流去した後、水分を切って100
μのメタノールで細胞に結合している色素を溶出し、
マルチスキャン(タイターテック)を用いABS法とマト
リックス法による測定を波長580nmで行い、細胞が障害
を受けていないことを堪忍した。 表4に溶解円の直径(mm)を示した。本発明化合物の血
栓溶解作用が明白である。 試験例5 インビトロ(in vitro)血栓溶解試験 本発明化合物がCPAE細胞における線溶活性の誘導能を有
することが判明したが、この線溶活性がα2−PI低下作
用のほかにいかなる物質によって生じているのかを確認
するため、本発明化合物のうち化合物番号2を加えた培
養液についてフィブリンオートグラフィーの手法を用い
て解析した。 10%ゲルを用いたSDS−ポリアクリルアミドゲルでこの
培養液とt−PA(組織型プラスミノーゲンアクチベー
タ)と、ウロキナーゼを電気泳動する。泳動後、このゲ
ルを2.5%トリトンX−100で処理し、フィブリノーゲ
ン、トロンビン、及びプラスミノーゲンを加えた寒天天
板上にのせ、37℃、5%CO2の培養器に入れ、フィブリ
ンの溶解位置を確認した。 その結果、本発明化合物添加培養上清では、ウロキナー
ゼ型のプラスミノーゲンアクチベータの分子量位置に大
きなフィブリンの溶解が認められ、本発明化合物は、CP
AEにおけるウロキナーゼ型のプラスミノーゲンアクチベ
ータの産生を強力に誘導していることが明らかになっ
た。 急性毒性試験 ddY系雄性マウス、6週令を、被験検体群当たり4匹ず
つ用いた。 実験方法 静脈内投与では、各検体を0.9%生理食塩水に溶解後、
尾静脈より投与した。腹腔内投与では、各検体を0.5%C
MC−生理食塩水で懸濁させ、マウス体重10g当たり、0.1
ml腹腔内投与した。経口投与では、各検体を0.5%CMC−
生理食塩水で懸濁させ、マウス体重10g当たり、0.2ml経
口投与した。 投与直後から観察を行い、投与後1週間観察した後にク
ロロホルムで屠殺し、剖検した。 各被験検体のLD50を次表にまとめた。本発明化合物の安
全性が明白である。 実施例1 本発明化合物(化合物番号2)に、一錠あたり以下の物
質を加え、常法に従って錠剤を得た。 一錠中(300mg中) 本発明化合物(化合物番号2) 200mg 乳糖 50mg トウモロコシデンプン 20mg 低置換度ヒドロキシプロピルセルロース 15mg ヒドロキシプロピルセルロース 5mgステアリン酸マグネシウム 10mg 300mg 実施例2 本発明化合物(化合物番号2)に、一管あたり以下の物
質を加え、常法に従って注射剤を得た。 一管中(10ml中) 本発明化合物(化合物番号2) 200mg 塩化ナトリウム 90mg注射用蒸留水 適量 10mlThe α 2 -PI lowering action, urokinase secretagogue action and toxicity of the compound of the present invention will be described in detail below, and the present invention will be described in more detail. Active human hepatoma-derived HepG2 cells in Test Example 1 In vitro (in vitro) is, alpha 2 - plasmin inhibitor was synthesized over (α 2 -PI), it is known to secrete. 2 × 10 6 of these HepG2 cells were seeded on a Falcon plastic culture plate (diameter 100 mm) and cultured using Eagle's minimal medium containing 10% fetal bovine serum. After 3 days, the cells attached to the bottom surface of the plate were washed twice with Dulbecco's phosphate buffer, and the test sample of the compound of the present invention was added.
The cells were further cultured for 3 to 4 days using 8 ml of serum-free Eagle medium (phenol red-free) containing 200 μg / ml. After culturing, collect 7 ml of the medium and use Centriflow (C
It was concentrated to about 1 ml using F25) and further lyophilized. Monomethylamine hydrochloride 8.1mg / ml in freeze-dried sample
Then, 0.7 ml of 50 mM Tris buffer containing the above was added and dissolved to be concentrated to about 10 cultures. 50 μm of 15 mCU plasmin solution was added to 100 μm of the concentrated sample, and further 50 μm of 0.25 μmol S-2251 synthetic chromogenic substrate solution was added and reacted at 37 ° C. for 10 minutes. The reaction was stopped by adding 1 ml of 2% citric acid solution, and S at OD405 nm
The p-nitroanilide released from the −2251 substrate was measured. Using Tris buffer as described above instead of concentrated sample,
Plasmin activity 10 was measured by measuring the degradation of S-2251 substrate.
As a control of 0%, a concentrated sample cultured without adding a test sample was used as a control of 100% α 2 -PI activity. The obtained results were calculated according to the following formula. A 1 is the absorbance of the 100% control, A 2 is the absorbance of the concentrated sample, and A 3 is the α 2 -PI activity of 100%.
The absorbance of each control is shown. The number of samples was 3, respectively. The results are shown in Table 1. That the compounds of the present invention reduces the alpha 2 -PI activity is evident. Test Example 2 In Vivo Activity As the animals to be administered, three male Beagle dogs were used, one each for the control group and the administration group. The test sample (Compound No. 2) was 0.1 mol phosphate buffer (p
H7.2) was used to dissolve to 0.1 mg per 0.1 ml. After dissolution, the solution was sterilized by filtration using a sterilizing filter (pore size 0.2 μm), and then 0.3 ml per 1 kg body weight was administered (30 mg / kg). The administration was carried out through the right forelimb vein for 7 days. The collected blood was mixed with 1 volume of 3.8% sodium citrate so as to have 9 volumes of blood, and centrifuged at 3000 rpm for 15 minutes to separate plasma. The α 2 -PI activity was measured as an inhibitory effect on the plasmin degradation of the synthetic chromogenic substrate S-2251. The measurement results were shown as changes in the inhibitory activity after administration, assuming that the plasmin inhibitory activity before administration of the test sample was 100% (Table 2).
The number of each sample was 3. alpha 2 -PI activity by 30 mg / kg continuous administration of the test specimen,
Clearly reduced. C represents a control, and the sample represents a test sample. Test Example 3 In vitro thrombolysis test A test sample (Compound No. 2) was continuously administered to Beagle dogs once a day at a dose of 30 mg / kg, and plasma was administered before the administration and on the fourth administration day. Separated as above. Α 2 -PI in plasma
The activity was measured, and fibrin clots were prepared in vitro using the plasma, and the solubilities when urokinase, which is a thrombolytic agent, was allowed to act were compared between the plasma before administration and the plasma 4 days after administration. 125 I-fibrinogen (0.1 mC
i / ml) was added to 40 μm and mixed, and 50 μm of this was dispensed into test tubes. A 5 U mixed solution of 25 U / ml thrombin and 0.5 M calcium chloride was added to each test tube in an amount of 5 μm and incubated at 37 ° C. for 30 minutes to prepare a fibrin clot. A 2% albumin solution and urokinase of this solution dissolved at 15 and 30 U / ml were added to each test tube in an amount of 1 ml. Incubate for 12 hours at 37 ℃, collect 25μ of supernatant in a tube for RAI, and release in the supernatant by γ-counter.
The 125 I-fibrin degradation product was measured. The number of samples was 3, respectively. As shown in Table 3, it is clear that when plasma in which α 2 -PI activity was decreased by administration of the test sample was used, dissolution of fibrin clot was enhanced as compared with plasma before administration. Test Example 4 In vitro thrombolytic test The ability to induce thrombolytic activity in an established vascular endothelial cell culture system was examined using CPAE (bovine pulmonary artery endothelial cell Endothelia). CPAE cells were purchased from Dainippon Pharmaceutical Laboratory Products Department. CPAE cells were added to 10% FCS in a 25 cm 2 culture flask.
− Passage using Eagle MEM medium, transfer 0.1 ml from the cell suspension collected at the time of passage to a test tube with a sterilized pipette, dilute 10-fold with 0.9 ml trypan blue solution, and count the blood cells. Count the number of cells in a plate, dilute with 10% FCS-Eagle MEM medium so that the number of cells will be 2 × 10 5 cells / ml, and add 100 μl to each well in a 96-well microtiter plate (Corning). That is, the cells were injected with a micropipette so that the concentration was 2 × 10 4 cells / well. 37 plates
Cultivation was started at 5 ° C. and 5% CO 2 . The compound of the present invention is dissolved in a medium to a concentration of 0.2 mg / ml 24 hours after the start of culture, and 1% or less of DMSO is not dissolved.
Aseptic filtration of the solution dissolved in was added to the well with 5μ of it with a sterilized micropipette.
After culturing for 72 hours at 5 ° C. and 5% CO 2 , the collected culture supernatant was used for measurement. The measurement is performed as follows. Place 5μ of plasminogen in the well of the fibrin plate (Kitasato Institute)
Inject and leave until diffused. After diffusion, add 5μ of culture supernatant
After pouring, the mixture is placed in a single-product gas incubator at 37 ° C, and 4 hours later, it is judged by the formation of a transparent dissolution circle by fibrinolysis. At this time, at the same time, it was confirmed that a transparent circle was formed by fibrinolysis in the well containing t-PA as a positive control. The diameter of the transparent circle was 9-10 mm. Also in the case of the culture supernatant containing the compound of the present invention, 4.5 to 8.5
Although a transparent lysis circle of mm was observed, no change was observed in the case of the culture supernatant of cells to which the compound of the present invention was not added (control). When a lysis circle of 4 mm or more was formed, it was judged that the thrombolytic ability of CPAE cells was induced. After the check of fibrinolytic activity is completed, the wells are placed at the final concentration 2.
After fixing with 5% glutaraldehyde, the liquid is discarded and washed with PBS. After washing, the water is removed and 100 μl of 0.1 crystal violet is added for staining, and the mixture is left for 2 to 3 minutes, and then washed with running water. After draining off the excess dyeing solution, remove water and
Elute the cell-bound dye with μ methanol,
Using the multi-scan (Titer Tech), the ABS method and the matrix method were measured at a wavelength of 580 nm, and we were patient that the cells were not damaged. Table 4 shows the diameter (mm) of the melting circle. The thrombolytic action of the compounds of the invention is evident. Test Example 5 In Vitro Thrombolytic Test It was found that the compound of the present invention has the ability to induce fibrinolytic activity in CPAE cells. This fibrinolytic activity is caused by any substance in addition to the α 2 -PI lowering effect. In order to confirm whether or not the compound of the present invention was added, the culture solution containing Compound No. 2 was analyzed using the method of fibrin autography. This culture solution, t-PA (tissue type plasminogen activator), and urokinase are electrophoresed on an SDS-polyacrylamide gel using a 10% gel. After electrophoresis, the gel was treated with 2.5% Triton X-100, placed on an agar plate containing fibrinogen, thrombin, and plasminogen, and placed in a 37 ° C, 5% CO 2 incubator to dissolve fibrin. I confirmed the position. As a result, in the culture supernatant containing the compound of the present invention, large dissolution of fibrin was observed at the molecular weight position of urokinase-type plasminogen activator.
It was revealed that it strongly induces the production of urokinase-type plasminogen activator in AE. Acute toxicity test ddY male mice, 6-week-old, 4 mice per test sample group were used. Experimental method In intravenous administration, after dissolving each sample in 0.9% saline,
It was administered via the tail vein. For intraperitoneal administration, 0.5% C
MC-suspended in physiological saline, 0.1
It was administered intraperitoneally in ml. For oral administration, 0.5% CMC-
The suspension was suspended in physiological saline and orally administered in an amount of 0.2 ml per 10 g of mouse body weight. Observation was performed immediately after the administration, and after observing for 1 week after the administration, the animals were sacrificed with chloroform and autopsied. The LD 50 of each test sample is summarized in the following table. The safety of the compounds of the present invention is clear. Example 1 The following substances per tablet were added to the compound of the present invention (Compound No. 2) to give tablets according to a conventional method. In one tablet (in 300 mg) Compound of the present invention (Compound No. 2) 200 mg Lactose 50 mg Corn starch 20 mg Low-substituted hydroxypropyl cellulose 15 mg Hydroxypropyl cellulose 5 mg Magnesium stearate 10 mg 300 mg Example 2 Compound of the present invention (Compound No. 2), The following substances were added per tube to obtain an injection according to a conventional method. In one tube (in 10 ml) Compound of the present invention (Compound No. 2) 200 mg Sodium chloride 90 mg Distilled water for injection 10 ml
Claims (3)
の生理学的に許容される酸付加塩及びその四級塩 ノジリマイシン及びその生理学的に許容される酸付加
塩 1,4−ビス(3−モラノリノ−1−プロペニル)ベン
ゼン及びその生理学的に許容される酸付加塩 カスタノスペルミン の上記〜で構成される群から選択される化合物を主
成分とするα2−プラスミンインヒビター低下剤。 ここに、R1は、水素、アルキル、カルボキシアルキル、
アルキルオキシカルボニルアルキル、ヒドロキシアルキ
ル、シクロアルキルアルキル、アリールアルキル、アリ
ールオキシアルキル、アルケニル、アリールアルケニ
ル、ハロゲノアリールアルケニル、低級アルコキシアリ
ールアルケニル、低級アルキルアリールアルケニル、ア
リールオキシアリールアルケニル、カルボキシアリール
アルケニル又はトリ低級アルキルアンモニオエトキシア
リールアルケニルを表す。1. A compound represented by the following general formula [I], a physiologically acceptable acid addition salt thereof and a quaternary salt thereof: Nojirimycin and a physiologically acceptable acid addition salt thereof 1,4- bis (3-Moranorino-1-propenyl) benzene and a physiologically acceptable acid addition salts of castanospermine as a main component a compound selected from the group consisting of the ~ alpha 2 - plasmin inhibitor lowering agent . Where R 1 is hydrogen, alkyl, carboxyalkyl,
Alkyloxycarbonylalkyl, hydroxyalkyl, cycloalkylalkyl, arylalkyl, aryloxyalkyl, alkenyl, arylalkenyl, halogenoarylalkenyl, lower alkoxyarylalkenyl, lower alkylarylalkenyl, aryloxyarylalkenyl, carboxyarylalkenyl or tri-lower alkyl Represents ammonioethoxyarylalkenyl.
の生理学的に許容される酸付加塩及びその四級塩 ノジリマイシン及びその生理学的に許容される酸付加
塩 1,4−ビス(3−モラノリノ−1−プロペニル)ベン
ゼン及びその生理学的に許容される酸付加塩 カスタノスペルミン の上記〜で構成される群から選択される化合物を主
成分とするウロキナーゼ分泌促進剤。 ここに、R2は、水素、アルキル、カルボキシアルキル、
アルキルオキシカルボニルアルキル、ヒドロキシアルキ
ル、シクロアルキルアルキル、低級アルキル又はハロゲ
ンで置換されていてもよいアリールアルキル、アリール
オキシアルキル、ヒドロキシアリールオキシアルキル、
ハロゲノアリールオキシアルキル、エトキシカルボニル
アリールオキシアルキル、低級アルコキシアリールオキ
シアルキル、アルケニル、ヒドロキシアルケニル、アリ
ールアルケニル、ハロゲノアリールアルケニル、低級ア
ルコキシアリールアルケニル、低級アルキルアリールア
ルケニル、アリールオキシアリールアルケニル、カルボ
キシアリールアルケニル、トリ低級アルキルアンモニオ
エトキシアリールアルケニル、アリールオキシアルケニ
ル又はアルキルカルバモイルアルキルを表す。2. A compound represented by the following general formula [II], a physiologically acceptable acid addition salt thereof and a quaternary salt thereof: Nojirimycin and a physiologically acceptable acid addition salt thereof 1,4- A urokinase secretagogue comprising, as a main component, a compound selected from the group consisting of bis (3-moranolino-1-propenyl) benzene and a physiologically acceptable acid addition salt thereof, castanospermine. Where R 2 is hydrogen, alkyl, carboxyalkyl,
Alkyloxycarbonylalkyl, hydroxyalkyl, cycloalkylalkyl, lower alkyl or arylalkyl optionally substituted with halogen, aryloxyalkyl, hydroxyaryloxyalkyl,
Halogenoaryloxyalkyl, ethoxycarbonylaryloxyalkyl, lower alkoxyaryloxyalkyl, alkenyl, hydroxyalkenyl, arylalkenyl, halogenoarylalkenyl, lower alkoxyarylalkenyl, lower alkylarylalkenyl, aryloxyarylalkenyl, carboxyarylalkenyl, tri-lower Represents alkylammonioethoxyarylalkenyl, aryloxyalkenyl or alkylcarbamoylalkyl.
の生理学的に許容される酸付加塩及びその四級塩 ノジリマイシン及びその生理学的に許容される酸付加
塩 1,4−ビス(3−モラノリノ−1−プロペニル)ベン
ゼン及びその生理学的に許容される酸付加塩 カスタノスペルミン の上記〜で構成される群から選択される化合物を主
成分とする血栓溶解剤。 ここに、R2は、水素、アルキル、カルボキシアルキル、
アルキルオキシカルボニルアルキル、ヒドロキシアルキ
ル、シクロアルキルアルキル、低級アルキル又はハロゲ
ンで置換されていてもよいアリールアルキル、アリール
オキシアルキル、ヒドロキシアリールオキシアルキル、
ハロゲノアリールオキシアルキル、エトキシカルボニル
アリールオキシアルキル、低級アルコキシアリールオキ
シアルキル、アルケニル、ヒドロキシアルケニル、アリ
ールアルケニル、ハロゲノアリールアルケニル、低級ア
ルコキシアリールアルケニル、低級アルキルアリールア
ルケニル、アリールオキシアリールアルケニル、カルボ
キシアリールアルケニル、トリ低級アルキルアンモニオ
エトキシアリールアルケニル、アリールオキシアルケニ
ル又はアルキルカルバモイルアルキルを表す。3. A compound represented by the following general formula [II], a physiologically acceptable acid addition salt thereof and a quaternary salt thereof: Nojirimycin and a physiologically acceptable acid addition salt thereof 1,4- A thrombolytic agent comprising a compound selected from the group consisting of bis (3-moranolino-1-propenyl) benzene and a physiologically acceptable acid addition salt thereof, castanospermine, as a main component. Where R 2 is hydrogen, alkyl, carboxyalkyl,
Alkyloxycarbonylalkyl, hydroxyalkyl, cycloalkylalkyl, lower alkyl or arylalkyl optionally substituted with halogen, aryloxyalkyl, hydroxyaryloxyalkyl,
Halogenoaryloxyalkyl, ethoxycarbonylaryloxyalkyl, lower alkoxyaryloxyalkyl, alkenyl, hydroxyalkenyl, arylalkenyl, halogenoarylalkenyl, lower alkoxyarylalkenyl, lower alkylarylalkenyl, aryloxyarylalkenyl, carboxyarylalkenyl, tri-lower Represents alkylammonioethoxyarylalkenyl, aryloxyalkenyl or alkylcarbamoylalkyl.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP30854888A JPH0751505B2 (en) | 1987-12-09 | 1988-12-06 | Cardiovascular agent |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP31134887 | 1987-12-09 | ||
JP62-311348 | 1987-12-09 | ||
JP30854888A JPH0751505B2 (en) | 1987-12-09 | 1988-12-06 | Cardiovascular agent |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH01250350A JPH01250350A (en) | 1989-10-05 |
JPH0751505B2 true JPH0751505B2 (en) | 1995-06-05 |
Family
ID=26565584
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP30854888A Expired - Lifetime JPH0751505B2 (en) | 1987-12-09 | 1988-12-06 | Cardiovascular agent |
Country Status (1)
Country | Link |
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JP (1) | JPH0751505B2 (en) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0733364A4 (en) * | 1993-11-12 | 1998-05-06 | Nippon Shinyaku Co Ltd | Medicinal composition for circulatory organ |
ZA97324B (en) * | 1996-01-17 | 1998-07-15 | Nippon Shinyaku Co Ltd | Ischemic myocardium protectant |
EP1903034A1 (en) * | 2006-09-19 | 2008-03-26 | Technische Universität Graz | Iminosugar glycoconjugates |
-
1988
- 1988-12-06 JP JP30854888A patent/JPH0751505B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH01250350A (en) | 1989-10-05 |
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