JPH07504888A - ＣＤｗ５２−多発性硬化症の治療のための特異抗体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ００ｗ５２−多発性硬化症の治療のための特異抗体この発明は、ヒトもしくは動 物患者における特定の自己免疫状態の治療方法に関する。

動物体内の細胞および分子は、「自己寛容」と呼ばれる状態を保証する幾つかの 機構の結果として、通常その体内における受動免疫応答を刺激することはない。

しかしながら、特定の状況下では、これらの機構がそのような免疫応答の刺激を 妨げようとして果たせないことがあり、この状態を「自己免疫」と呼ぶ。現在、 ヒトおよび動物における幾つかの疾患は自己免疫の結果であると考えられている 。

多発性硬化症は中枢神経系の脱髄性疾患であり、その発病は一般に１５ないし４ ５才程度の年齢範囲で起こる。懸案は中枢神経線維の周囲を取り巻く鞘を形成し 、筋肉の正確かつ繊細な運動を可能にする速度で神経インパルスを伝達する脂肪 性物質である。この疾患は、鞘によって普通に伝達されるインパルスを妨げる、 様々な大きさや位置のプラークを形成する要因となる鞘物質の硬化によって特徴 付けられる。この疾患の経過は個々の患者において大きく変化し、自然緩和の期 間もあり得る。しかしながら一般に、この疾患は多くの場合最終的な麻痺を伴う 進行性の筋肉機畦の制御の低下に至る。多発性硬化症の正確な経過は知られてい ない。これは多数の異なる要素の複合的な相互作用の結果である。しかしながら 、現在では、この疾患の因果関係に少なくとも自己免疫要素があることが一般に 認識されている。

００ｗ５２抗原（ＣＡＭＰＡＴＨ−１とも呼ばれる２３ｋＤａ１１１タンパク質 ）は、全てのヒトリンパ球およびほとんどの単球表面に強く発現するが、幹細胞 を含む他の血液細胞には存在しない補体介在攻撃に対する非常に良好な標的であ るＣＯ冑５２に対する多くの抗体が開発されている。００ｗ５２に対する抗体は イン・ビボで、全てのリンパ球および単球に結合するが、（ＴおよびＢ）リンパ 球のみを溶解する。他の哺乳動物種においては、００ｗ５２に類似する抗原が発 現する。

００ｗ５２に対して発現し、治療に用いられている抗体には以下のものが含まれ る： ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＭは、骨髄移植に先立ってＴ細胞ポピユレーションを枯渇さ せるために骨髄回収物を除去する目的で、インビトロで広く用いられているラッ トＩｇＭモノクローナル抗体である。この療法には、移植片対宿主病の出現およ び重篤性に顕著な減少が見られる。

ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＧは、００ｗ５２抗原を認識するラットＩｇＧ２ａ抗体のＩ ｇＧ２ｂクラス−スイッチ変異体であり、臓器および骨髄移植を受ける１００名 をこえる患者の免疫抑制、臓器拒絶の管理並びに血液の悪性疾患の治療を高いレ ベルで成功裡に達成するためにイン・ビボで用いられている。しかしながら、ア ナフィラキシ−の可能性を含む抗ラット免疫グロブリン応答の急激な出現が、ヒ トのイン・ビポでの００ｗ５２抗原に対するラットモノクローナル抗体の使用を 制限するようである。

ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＨは、ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＧ由来の相補性決定領域をヒトフ レームワーク領域にグラフト化することにより得られる遺伝的に操作されたＩｇ Ｇ抗体である。得られた“ヒト化”抗体はイン・ビトロで非常に有効であって。

補体溶解においてラットモノクローナル抗体と同等であり、ヒトリンパ球の細胞 介在溶解において２ないし４倍優れている。このヒト化抗体には、制限する抗グ ロブリン応答は予期されない。

ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＨの発現は、最初は、免疫グロブリンプロモーター／エンハ ンサ−の制御の下で操作された抗体鎖をコードするＤＮＡを遺伝的コンチクスト に入れることにより、ラットミエローマ細胞において達成された。最近では、　 ＯＡＭＰ八Ｔ）へ−ＩＨはチャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞におい て高いレベルで発現されている。

驚くべきことに、００ｗ５２抗原に対する抗体が多発性硬化症の治療に有効であ ることが見出された。

この発明は、多発性硬化症に罹患したヒト患者の治療方法であって、この患者に ００ｗ５２抗原を認識する抗体の有効量を投与することを具備する方法を提供す る。

この発明はまた、００ｗ５２抗原を認識する抗体の、多発性硬化症の治療のため の医薬の製造への使用をも提供する。

それ自身に対する免疫反応が現われる危険性を伴わない抗−ＣＤｗ５２抗体を用 いることが好ましい。したがって、マウスもしくはラットモノクローナル抗体を 用いることが可能ではあるものの、組換えＤＮＡ技術で製造され、免疫反応を引 き起こす危険性を減するように処理された抗体を用いることが好ましい。このよ うな理由から、マウスもしくはラット抗−ＣＤｗ５２抗体の定常ドメインがヒト 抗体の定常ドメインで置換されているキメラ抗体を用いることが可能である。し かしながら、ヒトの治療には、ヒト化またはＣＤＲ−グラフト化抗体、すなわち 、マウスもしくはラット抗体由来の相補性決定領域が１種以上のヒト抗体のフレ ームワーク領域および定常ドメインと結合している抗体を用いることが好ましい 。

最も好ましくは、この発明による方法は、ＣＤＲ−グラフト化抗体ＣＡＭＰＡＴ Ｈ−ＩＨ（Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ　ｅｔ　ａｔ、　／ｆ８ｔｕｒｅ、　３２２゜３ ２３−３２７を参照）を用いて行なわれる。上述のように、抗体ＣＡＭＦＡＴ） ｌ−ＩＨは、最初に記述された通りにラットミエローマ細胞において産生させる こともできるし、あるいは他のいかなる発現系、特には正確に折り畳まれ、グリ コジル化された哺乳動物のタンパク質の産生に適した発現系においても産生させ ることができる。遺伝的に操作されたＣＨＯ細胞株において発現させることによ り高収率のＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＨが得られている（Ｐａｇｅ　ａｎｄ　Ｓｙｄｅ ｎｈａｍ。

Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、　９．６４−６８　（＋９９１））。

多発性硬化症に罹患している患者に投与される抗−〇〇ｗ５２抗体、好ましくは ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＨの投与量（ｄｏｓａｇｅ　）は、処置される状態の正確な 性質および治療のレシピエンドに応じて変化する。−回投与量（ｄｏｓｅ　）は 、一般に成人患者に対して１ないし約１００ｍｇの範囲にあり、通常１ないし３ ０日間毎日投与される。１日当り４０ｍｇまでのより多量の投与量を用いる場合 もいくらかはあるものの、好ましい１日投与量は１日当り１ないしｆＯｍｇであ る。

抗−〇Ｄｗ５２抗体、特にＣＡＭＰＡ丁）１−ＩＮは、一般に医薬処方の形態で 患者に投与される。このような処方には、好ましくは、抗体に加えて、生理学的 に許容し得る担体もしくは希釈剤が、場合によっては他の抗体もしくは抗生物質 等の薬物のような薬剤と混合して含まれる。適切な担体には、生理食塩水、リン 酸緩衝塩溶液、リン酸緩衝塩グルコース溶液および緩衝塩溶液が含まれるが、こ れらに限定されるものではない。これに代えて、抗体を凍結乾燥し、上述の緩衝 水溶液を添加することにより用事に使用のために戻すこともできる。投与経路は 、静脈内、筋肉内、皮下および腹腔内を含む所定の非経口注入もしくは搬送であ る。

抗−ＣＤｗ５２抗体は、他の薬物と組み合わせて、もしくは連続的に投与するこ とができる。この薬物は、特には、ステロイド、例えばメチルプレドニゾロン等 のヒドロコルチゾンのような多発性硬化症の治療において通常用いられる他の薬 物、あるいはこの疾患に特徴的な症状を緩和するための医薬である。抗体を他の 薬物と連続して投与することが適当である場合もいくらかある。

この発明を、以下に示すＣＤＲ−グラフト化洗−ＣＤｗ５２抗体ＣＡＭＰＡＴＨ −ＩＨで治療した患者の症例履歴により説明する。使用した抗体は、組換えＣ） １０細胞株（Ｐａｇｅ　ａｎｄＳｙｄｅｎｈａｍ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 、　９．６４−６８　（１９９１））において発現させた後細胞培養培地から抽 出し、精製することにより製造した。

以下の症例履歴は、いかなる意味においても発明の範囲を限定することを意図す るものではないことは理解されるであろう。

症例−履一歴 患者は、会陰の進行性の感覚損失の１０日後に医者の手当てをめた４３才の女性 であった。彼女はまた、尿および大便を失禁するという幾つかのエピソードを経 験していた。臨床評価は、正常な視覚喚起応答、脳關旧によって同定された脳半 球における複数の白色異常体、並びにＣＳＦにお１するオリゴクローナルバンド について目立っていた；多発性硬化症の診断がなされた。

高用量の静脈内投与メチルプレドニゾロンを用いる治療は不完全な回復（会陰の 感覚喪失の持続および足の硬直を伴う失禁の減少）を銹発した。最初に医者の手 当てをめてから４力月後、患者には、脳幹の脱髄に一致する顔面左側の痛みと左 足の感覚喪失のエピソードがあった。次の１２力月にわたって症状は次第に悪化 し、この期間の最後に視神経炎およびレーミッテ現象（Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ’　 ｓｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ　）を伴って入院した。第２クールの静脈内投与メチル プレドニゾロン（５００ｍｇ　／日、５日間）による改善は限られたものにとど まった。この疾患は慢性進行性フェーズに入っているものと判定されこの患者は 次の数カ月にわたって脳幹脱髄の同定可能なさらなるエピソードに苦しみ、視神 経炎が残った。

彼女が初めて医者の手当てをめてから２０か列後、ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＨを用い る治療が施された（　２ｍｇ　／日静注を５日間、２日間休んだ後１０ｍｇ　／ 日静注を５日間）。白血球の枯渇が急速に進み、投与２日目には投与前の値３、 ８　ｘ　＋０９細胞／Ｌから０．２　Ｘ　１０９細胞／Ｌに低下した。

リンパ球数は、約１か月間０．３ｘｌＯ９細胞／Ｌ未満にとどまり、次いで治療 ３か月後に１．０７　Ｘ　１０９細胞／Ｌの値までゆっくりと上昇した。治療前 は正常範囲内であったＣＲＰは、投与３日目に１４０ｍｇ　／　Ｌに上昇し、下 降した後投与９日目に再び９１ｍｇ／Ｌに増加した。この゛ダブル・ピーク”パ ターンは好中球にも見られた好中球は、同じ時間経過の中で増加し、２ｍｇ投与 の２日目および１０ｍｇ投与の３日目でそれぞれ一致した（　１０ｍｇ投与は２ 日間休んだ後に行なった）。

疾患の活性は、ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＨ治療の最中およびその直後には大きく変わ らなかった。治療開始の約１および２力月後のクルツケ神経学的状態（Ｋｕｒｔ ｚｋｅ　ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌｓｔａｔｕｓ　）は、治療前のスコア１４か ら複合スコア１１まで改善された。脱髄疾患における疾患活性を採点する第２評 価システムもまた、進行、廃疾および再発の評価項目における改善を裏付けた。

１０回投与ＣＡＭＰＡＴＨ−ＩＨ治療コースに対しては非常に寛容であった。発 熱および頭痛が、いずれも２ｍｇおよび１０ｍｇ投与量の最初の投与に伴って発 生する逆の結果として報告された。３日目の一過性の左側視覚障害もまた報告さ れたが、その重要性は既存の左視神経炎に照らしても明確ではない。

ＣＡＭＦＡＴ）ｌ−ＩＨでの治療の約１８か月後、患者の状態の改善は維持され ていた。

国際調査報告 フロントページの続き （７２）発明者　ヘイル、ジェフリー イギリス国、シービー２・１キユーピー、ケンブリッジ、テニス・コート・ロー ド（番地なし）、イムノロジー・ディビジョン、デパートメント・オブ・パソロ ジー、ケンブリッジ・ユニバージティー （７２）発明者　ワルドマン、バーマンイギリス国、シービー２・１キユーピー 、ケンブリッジ、テニス・コート・ロード（番地なし）、イムノロジー・ディビ ジョン、デパートメント・オブ・パソロジー。

ケンブリッジ・ユニバーシティー

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. １．ＣＤｗ５２抗原を認識する抗体の、多発性硬化症の治療のための医薬の製造 への使用。
2. ２．抗体がマウスもしくはラット抗体由来のＣＤＲを含むヒト化抗体であり、該 ＣＤＲが１種以上のヒト抗体由来のフレームワーク領域および定常ドメインと結 合している請求の範囲第１項記載の使用。
3. ３．抗体がＣＡＭＰＡＴＨ−１Ｈである請求の範囲第２項記載の方法。
4. ４．治療には、１日当り１ないし１０ｍｇの投与量で１ないし３０日の期間、患 者に毎日投与することが含まれる請求の範囲第１項ないし第３項のいずれか１項 に記載の使用。
5. ５．治療にはステロイドの投与が含まれる請求の範囲第４項記載の使用。
6. ６．ＣＤｗ５２抗原を認識する抗体を活性成分として含有する、多発性硬化症を 治療するための治療薬。
7. ７．抗体がマウスもしくはラット抗体由来のＣＤＲを含むヒト化抗体であり、該 ＣＤＲが１種以上のヒト抗体由来のフレームワーク領域および定常ドメインと結 合している請求の範囲第６項記載の治療薬。
8. ８．抗体がＣＡＭＰＡＴＨ−１Ｈである請求の範囲第７項記載の治療薬。
9. ９．抗体の１日投与量が、１ないし３０日の期間、１日当り１ないし１０ｍｇで ある請求の範囲第６項ないし第８項のいずれか１項に記載の治療薬。
10. １０．治療にはステロイドの投与が含まれる請求の範囲第６項ないし第９項のい ずれか１項に記載の治療薬。
11. １１．多発性硬化症に罹患したヒト患者の治療方法であってＣＯｗ５２抗原を認 識する抗体の有効量を該患者に投与することを具備する方法。
12. １２．抗体がマウスもしくはラット抗体由来のＣＯＲを含むヒト化抗体であり、 該ＣＤＲが１種以上のヒト抗体由来のフレームワーク領域および定常ドメインと 結合している請求の範囲第１１項記載の方法。
13. １３．抗体がＣＡＭＰＡＴＨ−１Ｈである請求の範囲第１２項記載の方法。
14. １４．１日当り１ないし１０ｍｇで１ないし３０日の期間、抗体を毎日投与する ことを具備する請求の範囲第１１項ないし第１３項のいずれか１項記載の方法。
15. １５．有効量のステロイドを投与することを包含する請求の範囲第１１項ないし 第１４項のいずれか１項に記載の方法。