JPH0735B2 - グリセロ−ルの製造法 - Google Patents
グリセロ−ルの製造法Info
- Publication number
- JPH0735B2 JPH0735B2 JP50185A JP50185A JPH0735B2 JP H0735 B2 JPH0735 B2 JP H0735B2 JP 50185 A JP50185 A JP 50185A JP 50185 A JP50185 A JP 50185A JP H0735 B2 JPH0735 B2 JP H0735B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glycerol
- methanol
- production method
- production
- medium
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は各種製品の原料として有用なグリセロールの微
生物学的製造法に関する。
生物学的製造法に関する。
（従来の技術） 従来、メタノールを炭素源とするアミノ酸、ビタミン
酸、多糖類、酵素、補酵素などの微生物学的生産が知ら
れている。これらの多くは、微生物のメタノール代謝の
特徴を生かしたものであり、酵母を利用したものとして
は、FAD、ATPなどの生産や、アルコールオキシダーゼを
利用したホルムアルデヒドの生産などがある。しかしな
がら、メタノール資化経路を利用して中間代謝産物を生
産した例はほとんどない。
酸、多糖類、酵素、補酵素などの微生物学的生産が知ら
れている。これらの多くは、微生物のメタノール代謝の
特徴を生かしたものであり、酵母を利用したものとして
は、FAD、ATPなどの生産や、アルコールオキシダーゼを
利用したホルムアルデヒドの生産などがある。しかしな
がら、メタノール資化経路を利用して中間代謝産物を生
産した例はほとんどない。
本発明者は、このような中間代謝物の生産について、種
々検討し、本発明に到達した。
々検討し、本発明に到達した。
すなわち、本発明の要旨は、ハンセヌラ（Hansenula）
属に属し、グリセロールを生産する能力を有する微生物
を使用してメタノールをグリセロールに変換することを
特徴とするグリセロールの製造法にある。
属に属し、グリセロールを生産する能力を有する微生物
を使用してメタノールをグリセロールに変換することを
特徴とするグリセロールの製造法にある。
（発明の構成） 以下、本発明を詳細に説明する。
まず、本発明において使用される微生物はハンセヌラ
（Hansenula）属に属し、グリセロールを生産する能力
を有するものであり、たとえば、ハンセヌラ・ポリモル
フアMCI 1976（Hansenula polymorpha MCI 1976）（FER
M P−7954）が挙げられる。
（Hansenula）属に属し、グリセロールを生産する能力
を有するものであり、たとえば、ハンセヌラ・ポリモル
フアMCI 1976（Hansenula polymorpha MCI 1976）（FER
M P−7954）が挙げられる。
この変異株は、ハンセヌラ・ポリモルフアCBS 4732を親
株として、ニトロソグアニジン処理により変異誘導させ
て得られたものである。
株として、ニトロソグアニジン処理により変異誘導させ
て得られたものである。
この親株の菌学的性質は、たとえば、ザ イースツ（Th
e Yeasts）（J.ロダ（LODDER））第２版（1970）の第29
6〜299頁に記載されているが、上記変異株は、この親株
とは以下の点で性質を異にする。
e Yeasts）（J.ロダ（LODDER））第２版（1970）の第29
6〜299頁に記載されているが、上記変異株は、この親株
とは以下の点で性質を異にする。
すなわち、親株がグリセロール産生能を有しないが、メ
タノールを含む培地中生育できるのに対して、上記変異
株はグリセロール産生能を有するが、メタノールを含む
培地中で生育できない。メタノールよりグリセロールへ
の変換は、メタノールを含む反応液中に上記微生物を存
在させることにより行なわれる。
タノールを含む培地中生育できるのに対して、上記変異
株はグリセロール産生能を有するが、メタノールを含む
培地中で生育できない。メタノールよりグリセロールへ
の変換は、メタノールを含む反応液中に上記微生物を存
在させることにより行なわれる。
メタノールを含む反応液において、メタノールの濃度は
通常0.05−10vol％程度から選ばれる。
通常0.05−10vol％程度から選ばれる。
この反応液としては、培地又は、緩衝液が好適に使用さ
れる。
れる。
培地を用いる場合、エタノール、グルコース等のアルコ
ール、有機酸、炭水化物等の一種以上を、メタノール以
外の炭素源として添加するのが好ましい。メタノールの
添加は、培養開始から一定時間経過した時点であつても
よい。窒素源としては、有機アンモニウム塩、無機アン
モニウム塩、尿素等を用いることができる。
ール、有機酸、炭水化物等の一種以上を、メタノール以
外の炭素源として添加するのが好ましい。メタノールの
添加は、培養開始から一定時間経過した時点であつても
よい。窒素源としては、有機アンモニウム塩、無機アン
モニウム塩、尿素等を用いることができる。
また、必要に応じ、無機物として各種リン酸塩、硫酸塩
等を使用することができ、必要に応じ各種有機栄養物を
添加することもできる。
等を使用することができ、必要に応じ各種有機栄養物を
添加することもできる。
反応は、通常12時間〜10日間程度、好気的条件下に行な
われる。
われる。
pHは４−10、温度は20−40℃程度から選ばれる。
また、緩衝液を用いる場合、その種類は限定されず、リ
ン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液等が好適に使用される。
ン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液等が好適に使用される。
グリセロールの生産に際しては、増殖菌体、休止菌体の
いずれをも用いることができる。
いずれをも用いることができる。
反応液からグリセロールの採取、精製に際しては、有機
化合物の採取、精製に一般に使用される方法を採用する
ことができる。
化合物の採取、精製に一般に使用される方法を採用する
ことができる。
（実施例） 以下、実施例により、本発明をさらに説明する。
実施例１ （１）変異株の取得 使用菌株：ハンセヌラ・ポリモルフアCBS 4732を親株と
して使用した。
して使用した。
培地：培地組成は表−１に示した通りである。炭素源と
してグルコース、エタノール、グリセロール、ジヒドロ
キシアセトン（DHA）、メタノールをそれぞれ１％濃度
で用いた。
してグルコース、エタノール、グリセロール、ジヒドロ
キシアセトン（DHA）、メタノールをそれぞれ１％濃度
で用いた。
培養：培養は培地１を含む２容坂口フラスコを30
℃、48時間往復振とうして行つた。
℃、48時間往復振とうして行つた。
変異株の取得：ニトロソグアニジン処理をした後、エタ
ノール培地でマスタープレートを作成し各種の炭素源を
含むプレートにレプリカして、各炭素源の資化能を欠い
た約80株の変異株を得た。このなかから、資化パターン
が、メタノールー、エタノール＋、グリセロール±、ジ
ヒドロキシアセトン±、グルコース＋の変異株ハンセヌ
ラ・ポリモルフアMCI 1976（FERM P−7954）を採取し
た。
ノール培地でマスタープレートを作成し各種の炭素源を
含むプレートにレプリカして、各炭素源の資化能を欠い
た約80株の変異株を得た。このなかから、資化パターン
が、メタノールー、エタノール＋、グリセロール±、ジ
ヒドロキシアセトン±、グルコース＋の変異株ハンセヌ
ラ・ポリモルフアMCI 1976（FERM P−7954）を採取し
た。
（グリセロールの産生） 上記ハンセヌラ・ポリモルフアMCI 1976（FERM P−795
4）を上記表−１に示す培地（＋エタノール１％濃度）
で30℃、48時間培養した後、集菌し、0.01Mリン酸緩衝
液で３回洗浄した。ついで、１％メタノールを含む0.01
Mリン酸緩衝液中で、30℃、36時間振とうしメタノール
代謝関連酵素の誘導を行なつた後、集菌し、0.01Mリン
酸緩衝液で３回洗浄した。
4）を上記表−１に示す培地（＋エタノール１％濃度）
で30℃、48時間培養した後、集菌し、0.01Mリン酸緩衝
液で３回洗浄した。ついで、１％メタノールを含む0.01
Mリン酸緩衝液中で、30℃、36時間振とうしメタノール
代謝関連酵素の誘導を行なつた後、集菌し、0.01Mリン
酸緩衝液で３回洗浄した。
ついで、500ml容坂口フラスコを用いて30℃で振とう反
応させた（振幅70mm、毎分110往復）。
応させた（振幅70mm、毎分110往復）。
菌体濃度（乾燥菌体）:5mg/ml 反応液量：約250ml（0.01Mリン酸緩衝液（pH6.0）250m
l、メタノール2.5ml） グリセロール及び副生ジヒドロキシアセトンの産生量の
経時変化を図−１に示す。
l、メタノール2.5ml） グリセロール及び副生ジヒドロキシアセトンの産生量の
経時変化を図−１に示す。
なおグリセロールとジヒドロキシアセトンの定量：反応
上澄液中の生成物は、バイオ・ラド製HPX−87Hカラムを
用いる高速液体クロマトグラフイーと酵素法によつて定
量した。
上澄液中の生成物は、バイオ・ラド製HPX−87Hカラムを
用いる高速液体クロマトグラフイーと酵素法によつて定
量した。
（発明の効果） 本発明方法によれば、効率よく微生物学的方法によりグ
リセロールを製造することができる。
リセロールを製造することができる。
図−１は実施例１におけるグリセロール及びジヒドロキ
シアセトンの産生量を示す。
シアセトンの産生量を示す。
Claims (1)
- 【請求項１】ハンセヌラ（Hansenula）属に属し、グリ
セロールを生産する能力を有する微生物を使用してメタ
ノールをグリセロールに変換することを特徴とするグリ
セロールの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP50185A JPH0735B2 (ja) | 1985-01-07 | 1985-01-07 | グリセロ−ルの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP50185A JPH0735B2 (ja) | 1985-01-07 | 1985-01-07 | グリセロ−ルの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61162190A JPS61162190A (ja) | 1986-07-22 |
| JPH0735B2 true JPH0735B2 (ja) | 1995-01-11 |
Family
ID=11475503
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP50185A Expired - Lifetime JPH0735B2 (ja) | 1985-01-07 | 1985-01-07 | グリセロ−ルの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0735B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1057339C (zh) * | 1995-10-18 | 2000-10-11 | 北京思拓粮食仓储应用技术研究所 | 发酵法生产甘油的二步发酵生产工艺 |
-
1985
- 1985-01-07 JP JP50185A patent/JPH0735B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS61162190A (ja) | 1986-07-22 |
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