JPH07242556A - Dental caries-resistant lavonoid polymer and glucosyl transferase-inhibiting agent and food containing the same active ingredient - Google Patents

Abstract

PURPOSE:To provide the subject safe polymer obtained by condensing a specific compound with a catechin compound, having a strong glucosyl transferase- inhibiting action, preventing the formation of bacterial plaques or the generation of dental caries, and useful for a dental caries-resistant agent as an oral cavity hygienic agent or a food additive agent. CONSTITUTION:This polymer is obtained by condensing (A) the reduction product of a flavonone compound, the reduction product of a flavonol compound, or a leucoanthocyanidin compound with (B) a catechin compound such as (+)-epi(gallo)catechin, (-)epi(gallo)catechin or (-)-epi(gallo)catechin gallate and has a weight-average mol.wt. of 1,000-10,000. The objective polymer is preferably obtained by condensing 1 pt.wt. of the component A with 0.1-0.5 pt.wt. of the component B in the presence of hydrochloric acid, sulfuric acid, boron trifluoride, etc.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明はフラバノン類またはフラ
バノノール類の還元物あるいはロイコアントシアニジン
類をカテキン類と縮合させることにより製造される抗う
蝕性フラボノイド重合物およびこれを有効成分とするグ
ルコシルトランスフェラーゼ阻害剤並びに食品に関す
る。FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to an anti-caries flavonoid polymer produced by condensing a reduced product of flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins with catechins and a glucosyltransferase inhibitor containing the same. And related to food.

【０００２】[0002]

【従来の技術】う蝕の原因については過去、種々の仮説
が提唱されたが、現在ではミラー（Miller）の化学細菌
説に基づく細菌感染症の一種であると認められている。
この説に基づいたう蝕の発生機構は以下のごとくであ
る。 即ち、口腔連鎖球菌、特にストレプトコッカス・
ミュータンス（Streptococcus mutans）が産生するグル
コシルトランスフェラーゼという酵素が、まず、口中の
しょ糖を基質として、粘着性、不溶性の多糖（グルカ
ン）を生成する。 ストレプトコッカス・ミュータンス
（以下、「Ｓ.ミュータンス」と略称する）の菌体は、
生成したグルカンによって、歯表面に付着して菌塊（歯
垢）を形成する。2. Description of the Related Art Although various hypotheses have been proposed in the past regarding the cause of dental caries, it is now recognized as a kind of bacterial infectious disease based on Miller's theory of chemical bacteria.
The caries generation mechanism based on this theory is as follows. That is, oral streptococci, especially Streptococcus
First, an enzyme called glucosyltransferase produced by mutans (Streptococcus mutans) produces a sticky, insoluble polysaccharide (glucan) using sucrose in the mouth as a substrate. Streptococcus mutans (hereinafter referred to as "S. mutans") cells are
The generated glucan attaches to the tooth surface and forms a bacterial mass (plaque).

【０００３】この歯垢中ではＳ.ミュータンスを始め種
々の微生物が共生、繁殖しているが、これら微生物の代
謝によって有機酸が産生され、この有機酸の作用で歯表
面のｐＨが低下し、エナメル質表面に脱灰が生じて、う
蝕が発生、進行する。また、歯垢形成はう蝕のほかに、
歯周病や口臭の原因となるとされている。In this dental plaque, various microorganisms including S. mutans coexist and propagate. The metabolism of these microorganisms produces organic acids, and the action of these organic acids lowers the pH of the tooth surface. , Demineralization occurs on the enamel surface, causing caries to develop. In addition to dental caries, plaque formation
It is said to cause periodontal disease and bad breath.

【０００４】このようにＳ.ミュータンスを中心とする
口腔連鎖球菌によって形成される歯垢がう蝕の原因とな
っていることから、歯垢形成を抑えることが、ひいては
う蝕の発生を予防する有効な手段となりうる。As described above, plaque formed by S. mutans and other oral streptococci causes dental caries. Therefore, suppressing the formation of dental plaque prevents the occurrence of dental caries. Can be an effective means of

【０００５】従来から、う蝕を予防するために、口腔内
微生物の増殖を抑制するための抗菌剤、口腔内微生物の
産生するグルコシルトランスフェラーゼの作用を抑える
阻害剤、しょ糖を基質とし、グルコシルトランスフェラ
ーゼにより形成されたグルカンを分解する酵素等の抗う
蝕物質等が種々研究され、更に歯垢形成の基質とならな
い非う蝕性の糖類についても種々の研究がなされてい
る。Conventionally, in order to prevent dental caries, an antibacterial agent for suppressing the growth of oral microorganisms, an inhibitor for suppressing the action of glucosyltransferase produced by oral microorganisms, sucrose as a substrate, and glucosyltransferase Various studies have been conducted on anti-carious substances such as enzymes that decompose the formed glucan, and various studies have also been conducted on non-cariogenic saccharides that do not serve as a substrate for plaque formation.

【０００６】近年、抗う蝕物質として植物成分、特にタ
ンニン類が注目されるに至っている。 例えば、特開昭
５９−１５２３１１号公報にはフラバン−３−オールの
縮合物である縮合型タンニンを配合する口腔用組成物が
開示されている。In recent years, plant components, especially tannins, have been attracting attention as anticaries substances. For example, JP-A-59-152311 discloses an oral composition containing a condensed tannin which is a condensate of flavan-3-ol.

【０００７】この公報では、大黄タンニン、何首鳥タン
ニンおよび雅黄タンニンについて、実際にグルコシルト
ランスフェラーゼ阻害活性が試験されているが、これは
不十分なものであり、到底実用に耐えられるものではな
かった。また、ビンロウジュの実より単離した２〜４量
体のプロシアニジン類のグルコシルトランスフェラーゼ
阻害活性〔Sumitra Hada et al.; Phytotherapy Resear
ch 3(4),140-144(1989)〕についても試験されている
が、これも同様に十分といえないものである。[0007] In this publication, the glucosyltransferase inhibitory activity is actually tested for rhododendron tannin, swordbird tannin and yam tannin, but this is insufficient and cannot be put to practical use at all. It was In addition, the glucosyltransferase inhibitory activity of a 2- to 4-meric procyanidins isolated from areca nut [Sumitra Hada et al .; Phytotherapy Resear
ch 3 (4), 140-144 (1989)] have also been tested, but this too is less than satisfactory.

【０００８】[0008]

【発明が解決しようとする課題】従って、十分強力な効
果を有し、かつ人体に対して安全性等の面でなんら問題
を起こすことのない新しい抗う蝕剤の開発が課題として
残されていた。Therefore, the development of a new anticaries agent which has a sufficiently strong effect and does not cause any problems in terms of safety for the human body has been left as a problem. .

【０００９】[0009]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、このよう
な事情に鑑み、歯垢の形成あるいはう蝕の発生を効果的
に抑制し、かつ、人体に対して有害な作用を有しない物
質を見いだすべく鋭意研究を行った結果、フラバノン類
またはフラバノノール類の還元物あるいはロイコアント
シアニジン類をカテキン類と重合させて合成されたフラ
ボノイド重合物は強力な抗う蝕活性を有することを見い
だし、本発明を完成させるに至った。In view of such circumstances, the present inventors have effectively suppressed the formation of dental plaque or the occurrence of dental caries and have no harmful effect on the human body. As a result of diligent research to find a substance, it was found that a flavonoid polymer synthesized by polymerizing a reduced product of flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins with catechins has a strong anticaries activity, and the present invention. Has been completed.

【００１０】すなわち、本発明の第一の目的は、フラバ
ノン類またはフラバノノール類の還元物あるいはロイコ
アントシアニジン類をカテキン類と縮合させることによ
り製造される、重量平均分子量が１,０００〜１０,００
０の抗う蝕性フラボノイド重合物を提供することであ
る。また、本発明の第二の目的は、フラバノン類または
フラバノノール類の還元物あるいはロイコアントシアニ
ジン類をカテキン類と縮合させることにより製造される
フラボノイド重合物を有効成分とするグルコシルトラン
スフェラーゼ阻害剤を提供することである。更に、本発
明の第三の目的は、上記フラボノイド重合物を含有する
食品を提供することである。That is, the first object of the present invention is to produce a reduced product of flavanones or flavanonols or a leucoanthocyanidin with catechins, which has a weight average molecular weight of 1,000 to 10,000.
To provide an anti-cariogenic flavonoid polymer of 0. A second object of the present invention is to provide a glucosyltransferase inhibitor containing a flavonoid polymer produced by condensing a reduced product of flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins with catechins as an active ingredient. Is. Further, a third object of the present invention is to provide a food containing the flavonoid polymer.

【００１１】本発明の抗う蝕性フラボノイド重合物（以
下、「フラボノイド重合物」という）は、４位に水酸基
を持つ、フラバノン類またはフラバノノール類の還元物
あるいはロイコアントシアニジン類（以下、「４−ヒド
ロキシフラボノイド」という）とカテキン類とを縮合さ
せることにより製造されるThe anti-caries flavonoid polymer of the present invention (hereinafter referred to as "flavonoid polymer") is a reduced product of flavanones or flavanonols having a hydroxyl group at the 4-position or leucoanthocyanidins (hereinafter "4-hydroxy"). It is produced by condensing catechins with flavonoids)

【００１２】より具体的には、常法に従ってフラバン類
またはフラバノノール類を還元処理し、その４位のカル
ボニル基を水酸基に還元した後、これをカテキン類と縮
合させても良いし、すでに４位に水酸基を有するロイコ
アントシアニジン類をカテキン類と縮合させても良い。
この縮合は、４−ヒドロキシフラボノイドの４位水酸基
とカテキン類もしくは４−ヒドロキシフラボノイドの
８'位の水素間の脱水による４−８'位炭素間結合の生成
あるいは４−ヒドロキシフラボノイドの４位水酸基とカ
テキン類もしくは４−ヒドロキシフラボノイドの６'位
の水素間の脱水による４−６'位炭素結合の生成により
進行するものである。More specifically, flavans or flavanonols may be subjected to reduction treatment according to a conventional method to reduce the carbonyl group at the 4-position to a hydroxyl group and then condensed with catechins. Leucoanthocyanidins having a hydroxyl group may be condensed with catechins.
This condensation is carried out by dehydration between 4-hydroxyflavonoid 4-position hydroxyl group and catechins or 4-hydroxyflavonoid 8-position hydrogen to form a 4-8'-carbon bond or 4-hydroxyflavonoid 4-position hydroxyl group. It proceeds by the formation of a carbon bond at the 4-6 'position by dehydration between hydrogens at the 6'position of catechins or 4-hydroxyflavonoid.

【００１３】本発明の抗う蝕性フラボノイド重合物の調
製にあたり、４位のカルボニル基を水酸基に還元する際
の原料としては、フラバノン類またはフラバノノール類
ならば特に限定はなく用いることが出来る。この際、フ
ラバノン類またはフラバノノール類を豊富に含む植物の
磨砕物あるいは抽出物そのものを原料としてもかまわな
い。In preparing the anti-cariogenic flavonoid polymer of the present invention, flavanones or flavanonols can be used without particular limitation as a raw material for reducing the carbonyl group at the 4-position to a hydroxyl group. At this time, a ground product of the plant rich in flavanones or flavanonols or the extract itself may be used as a raw material.

【００１４】フラバノン類またはフラバノノール類の還
元処理に用いる還元剤に関しては、特に限定されるもの
ではないが、好ましくは水素化ホウ素ナトリウム、水素
化アルミニウムリチウム等を使用することが出来る。The reducing agent used for the reduction treatment of flavanones or flavanonols is not particularly limited, but sodium borohydride, lithium aluminum hydride or the like can be preferably used.

【００１５】一方、４−ヒドロキシフラボノイドに重合
させるカテキン類としては、（＋）−カテキン、（−）
−エピカテキン、（＋）−ガロカテキン、（−）−エピ
ガロカテキン、（−）−エピカテキンガレート、（−）
−エピガロカテキンガレート等が挙げられる。On the other hand, as catechins to be polymerized to 4-hydroxyflavonoid, (+)-catechin, (-)
-Epicatechin, (+)-gallocatechin, (-)-epigallocatechin, (-)-epicatechin gallate, (-)
-Epigallocatechin gallate and the like.

【００１６】これらのカテキン類を４−ヒドロキシフラ
ボノイドと重合させるには、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸
や、三フッ化ホウ素、五フッ化アンチモン、塩化アルミ
ニウム等のルイス酸の存在下で反応させれば良い。 ま
た、この重合反応においては、４−ヒドロキシフラボノ
イド１に対し、重量比で０.０１〜１０のカテキン類を
使用することができる。To polymerize these catechins with 4-hydroxyflavonoid, they are reacted in the presence of hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, acetic acid, and Lewis acids such as boron trifluoride, antimony pentafluoride and aluminum chloride. Just go. Further, in this polymerization reaction, catechins in a weight ratio of 0.01 to 10 with respect to 4-hydroxyflavonoid 1 can be used.

【００１７】カテキン類の量比を少なくするほど、得ら
れるフラボノイド重合物の重合度は大きくなる。例え
ば、４−ヒドロキシフラボノイドの１に対し、重量比で
カテキン類が１ならば重合度２程度、カテキン類０.３
ならば重合度５程度、カテキン類０.２前後ならば重合
度７〜１０程度、カテキン類０.１前後ならば重合度１
５程度の重合度のフラボノイド重合物をそれぞれ得るこ
とができる。The degree of polymerization of the resulting flavonoid polymer increases as the amount of catechins decreases. For example, if the weight ratio of catechins to 1 of 4-hydroxyflavonoid is 1, the degree of polymerization is about 2 and catechins is 0.3.
If so, the degree of polymerization is about 5; if catechins are around 0.2, the degree of polymerization is about 7 to 10; if catechins are around 0.1, the degree of polymerization is 1
A flavonoid polymer having a degree of polymerization of about 5 can be obtained.

【００１８】この時の反応温度は特に限定するものでは
ないが室温が好ましい。また反応時間は特に限定するも
のではないが２４時間程度が好ましい。The reaction temperature at this time is not particularly limited, but room temperature is preferable. The reaction time is not particularly limited, but is preferably about 24 hours.

【００１９】上記の様にして製造されるフラボノイド重
合物は、使用される４−ヒドロキシフラボノイドに応じ
て種々の重合物として得られる。 例えば原料であるフ
ラボノイドとしてフスチン（Fustin）を用いた場合には
プロフィセチニジンタイプのタンニンが、原料にタキシ
フォリン（Taxifolin）を用いた場合にはプロシアニジ
ンタイプのフラボノイド重合物がそれぞれ合成される。The flavonoid polymer produced as described above can be obtained as various polymers depending on the 4-hydroxyflavonoid used. For example, when fustin (Fustin) is used as the raw material, prophycetinidine-type tannin is synthesized, and when taxifolin is used as the raw material, procyanidin-type flavonoid polymer is synthesized.

【００２０】以上のようにして得られた反応生成物はそ
れ自体でグルコシルトランスフェラーゼ阻害能を有する
が、更にセファデックス ＬＨ−２０（米国、ファルマ
シア社製）、ダイヤイオンＨＰ２０（三菱化成工業
製）、セパビーズＨＰ１ＭＧ（三菱化成工業製）、トヨ
パールＨＷ４０Ｆ（東洋曹達工業製）等の合成吸着剤カ
ラムなどを用いて精製することも出来る。The reaction product obtained as described above has a glucosyltransferase-inhibiting ability by itself, but Sephadex LH-20 (manufactured by Pharmacia, USA), Diaion HP20 (manufactured by Mitsubishi Kasei Co., Ltd.), It can also be purified using a synthetic adsorbent column such as SepaBeads HP1MG (manufactured by Mitsubishi Kasei) or Toyopearl HW40F (manufactured by Toyo Soda Kogyo).

【００２１】このときそれぞれの画分によって平均分子
量〔数平均分子量（Ｍｎ）、重量平均分子量（Ｍｗ）〕
を算出することが出来る。At this time, the average molecular weight [number average molecular weight (Mn), weight average molecular weight (Mw)] depends on each fraction.
Can be calculated.

【００２２】以上のようにして得られた重合物は、その
ままのもの、濃縮したもの、溶剤を除去した乾燥物など
いかなる状態のものでも使用することが出来るが、保存
性、有機溶剤の安全性の点で乾燥物の状態にするのが好
ましい。The polymer obtained as described above can be used as it is, in a concentrated state, in a dried state after removing the solvent, in any state, but in storage stability and safety of organic solvent. From the point of, it is preferable to make it a dried product.

【００２３】なお、本願の出願人は先に、ペルオキシダ
ーゼ処理することにより製造されるフラボノイド重合物
を有効成分とする抗う蝕剤に係る出願をしているが（特
願平５−５７９９１号）、このフラボノイド重合物はフ
ラボノイドを酸化し、重合せしめるものであるから、本
発明のフラボノイド重合物とは製造方法が異なり、従っ
てフラボノイドの重合様式ひいては構造の異なる重合物
であると判断される。The applicant of the present application has previously filed an application for an anticaries agent containing a flavonoid polymer produced by treatment with peroxidase as an active ingredient (Japanese Patent Application No. 5-57991). Since this flavonoid polymer is a compound that oxidizes and polymerizes flavonoids, it has a different production method from the flavonoid polymer of the present invention, and is therefore considered to be a polymer having a different flavonoid polymerization mode and thus a different structure.

【００２４】本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻
害剤は、上記のようにして得られた抗う蝕性フラボノイ
ド重合物を有効成分とし、これを公知の薬学的に許容さ
れる担体と組み合わせることにより調製される。 この
フラボノイド重合物としては、前記重合反応の粗生成物
や種々の重合度のフラボノイド重合物の混合物のいずれ
であっても良いが、カラム分取等により純化したフラボ
ノイド重合物を用いることがより好ましい。The glucosyltransferase inhibitor of the present invention is prepared by using the anti-cariogenic flavonoid polymer obtained as described above as an active ingredient and combining this with a known pharmaceutically acceptable carrier. The flavonoid polymer may be either a crude product of the polymerization reaction or a mixture of flavonoid polymers having various degrees of polymerization, but it is more preferable to use a flavonoid polymer purified by column fractionation or the like. .

【００２５】本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻
害剤の有効成分として好ましいフラボノイド重合物は、
１,０００〜１０,０００の重量平均分子量を有し、その
重合度が３.５〜３５のものであり、より好適な本発明
のフラボノイド重合物は、重量平均分子量が１,３００
〜４,３００、重合度が４.６〜１５.０のものである。
中でも、重量平均分子量１,７００〜３,５００、重合度
が６.０〜１２.０のフラボノイド重合物は最も好適であ
る。 なお、分子量値の範囲と重量平均分子量との関係
は、本発明のフラボノイド重合物の場合、最小分子量値
が重量平均分子量値の約１／４、最大分子量値が重量平
均分子量値の約２倍である。The preferred flavonoid polymer as the active ingredient of the glucosyltransferase inhibitor of the present invention is
The flavonoid polymer having a weight average molecular weight of 1,000 to 10,000 and a degree of polymerization of 3.5 to 35 is more preferable, and the flavonoid polymer of the present invention has a weight average molecular weight of 1,300.
Up to 4,300 and a degree of polymerization of 4.6 to 15.0.
Among them, the flavonoid polymer having a weight average molecular weight of 1,700 to 3,500 and a degree of polymerization of 6.0 to 12.0 is most suitable. In the case of the flavonoid polymer of the present invention, the minimum molecular weight value is about ¼ of the weight average molecular weight value, and the maximum molecular weight value is about twice the weight average molecular weight value. Is.

【００２６】本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻
害剤は、主に抗う蝕の目的のための抗う蝕剤、口腔衛生
剤などに用いることができ、その剤形の例としては、歯
磨、洗口液、トローチ等が挙げられる。The glucosyltransferase inhibitor of the present invention can be used mainly as an anti-caries agent for the purpose of anti-caries, an oral hygiene agent and the like, and examples of its dosage form include toothpaste, mouthwash, troche. Etc.

【００２７】抗う蝕剤、口腔衛生剤などの製造に当って
は、例えば、炭酸カルシウム、第二リン酸カルシウム、
無水ケイ酸、炭酸マグネシウム、グリセリン、ソルビト
ール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、
アルギン酸ソーダ、カラギーナン、カルボキシビニルポ
リマー、ジオクチルスルホコハク酸ソーダ、ラウリル硫
酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウ
ム、パラオキシ安息香酸ブチル、ヒノキチオール、アラ
ントイン、グリチルリチン、アルコール、アラビアゴ
ム、デンプン、コーンスターチ、サッカリンナトリウ
ム、ステビオサイド、ブドウ糖、乳糖、ステアリン酸マ
グネシウム、リン酸一カリウム、リン酸二カリウム、メ
ントール、ユーカリ油、ペッパーミント、スペアミン
ト、色素等の他、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン
酸ナトリウム等のフッ化物、塩化リゾチーム、アズレン
等の抗炎症剤、塩化ナトリウム等の通常使用される成分
を適宣配合することができる。In producing an anticaries agent, an oral hygiene agent, etc., for example, calcium carbonate, dicalcium phosphate,
Silica anhydride, magnesium carbonate, glycerin, sorbitol, propylene glycol, polyethylene glycol, carboxymethyl cellulose, methyl cellulose,
Sodium alginate, carrageenan, carboxyvinyl polymer, sodium dioctyl sulfosuccinate, sodium lauryl sulfate, sodium dodecylbenzenesulfonate, butyl paraoxybenzoate, hinokitiol, allantoin, glycyrrhizin, alcohol, acacia, starch, corn starch, sodium saccharin, stevioside, glucose, Lactose, magnesium stearate, monopotassium phosphate, dipotassium phosphate, menthol, eucalyptus oil, peppermint, spearmint, pigments, etc., fluorides such as sodium fluoride, sodium monofluorophosphate, lysozyme chloride, azulene, etc. Ordinarily used ingredients such as anti-inflammatory agents, sodium chloride and the like can be appropriately blended.

【００２８】また、本発明のグルコシルトランスフェラ
ーゼ阻害剤は、抗う蝕を目的として各種食品中に添加す
ることができる。The glucosyltransferase inhibitor of the present invention can be added to various foods for the purpose of caries prevention.

【００２９】食品の例としては、練りあん、カステラ、
水ようかん、どら焼きの皮、スポンジケーキ、バターケ
ーキ、ババロア、カスタードクリーム、バタークリー
ム、カスタードプディング、クッキー、菓子パン、蒸し
パン、ジャム、乳酸菌飲料、炭酸飲料、コーヒー飲料、
コーヒーゼリー、キャラメル、アイスクリーム、チュー
インガム、ジュース、キャンディー、チョコレート等が
挙げられ、その製造にはその種類に応じて通常使用され
る適宜な成分を使用することが出来る。[0029] Examples of foods include paste bean paste, castella,
Water yokan, dorayaki peel, sponge cake, butter cake, bavarois, custard cream, butter cream, custard pudding, cookies, sweet bread, steamed bread, jam, lactic acid beverage, carbonated beverage, coffee beverage,
Coffee jelly, caramel, ice cream, chewing gum, juice, candy, chocolate and the like can be mentioned, and appropriate components generally used can be used for the production thereof depending on the type.

【００３０】食品において使用される成分の例として
は、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトー
ル、ステビオサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン
酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコル
ビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナ
トリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセ
リン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、
ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プ
ロピレングリコール脂肪酸エステル、アラビアガム、カ
ラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビ
タミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウ
ム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤
等、通常の食品原料として使用されているものを挙げる
ことができる。Examples of components used in foods include glucose, fructose, sucrose, maltose, sorbitol, stevioside, corn syrup, lactose, citric acid, tartaric acid, malic acid, succinic acid, lactic acid, L-ascorbic acid, dl-α-tocopherol, sodium erythorbate, glycerin, propylene glycol, glycerin fatty acid ester, polyglycerin fatty acid ester,
Sucrose fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, propylene glycol fatty acid ester, gum arabic, carrageenan, casein, gelatin, pectin, agar, vitamin Bs, nicotinic acid amide, calcium pantothenate, amino acids, calcium salts, pigments, flavors, preservation Examples include agents that are used as usual food materials, such as agents.

【００３１】なお、本発明のグルコシルトランスフェラ
ーゼ阻害剤は、これを砂糖と組合せて抗う蝕性砂糖とす
ることができるが、食品に砂糖とグルコシルトランスフ
ェラーゼ阻害剤を添加する場合には、これに替えてこの
抗う蝕性砂糖を利用することも可能である。The glucosyltransferase inhibitor of the present invention can be combined with sugar to give an anti-cariogenic sugar. However, when sugar and a glucosyltransferase inhibitor are added to foods, the sugar is replaced with this. It is also possible to utilize this anti-caries sugar.

【００３２】本発明のフラボノイド重合物は、その原料
であるフラボノイドが食用植物に含まれるものであるの
で、安全性の点では問題ないが、口腔衛生剤、食品など
に配合するに際しては、味、色、香りなどの面から０.
０００１〜０.５％の濃度範囲とすることが好ましく、
０.００１〜０.２％の濃度範囲とすることがより好適で
ある。The flavonoid polymer of the present invention contains the flavonoid, which is the raw material, in edible plants, so there is no problem in terms of safety, but when blended in oral hygiene agents, foods, etc. From the perspective of color, scent, etc.
It is preferable to set the concentration range of 0001 to 0.5%,
It is more preferable that the concentration range is 0.001 to 0.2%.

【００３３】[0033]

【発明の効果】本発明のフラボノイド重合物は、極めて
強力なグルコシルトランスフェラーゼ阻害作用を有し、
歯垢形成を顕著に抑制するとともに、それ自身には特異
な味、におい等がないため、任意の量で薬剤や食品等に
配合することが出来るものである。従って、このフラボ
ノイド重合物を有効成分とする本発明のグルコシルトラ
ンスフェラーゼ阻害剤は、う蝕の予防等に利用される抗
う蝕剤や抗う蝕性食品の添加成分として有利に利用する
ことができるものである。INDUSTRIAL APPLICABILITY The flavonoid polymer of the present invention has an extremely strong glucosyltransferase inhibitory action,
Since it notably suppresses the formation of plaque and does not have a peculiar taste or odor, it can be incorporated into a drug, a food or the like in an arbitrary amount. Therefore, the glucosyltransferase inhibitor of the present invention having the flavonoid polymer as an active ingredient can be advantageously used as an additive component of an anti-caries agent or an anti-caries food used for the prevention of caries, etc. is there.

【００３４】また、現在、日本では年間１億２０００万
立方メートルの木材が消費されており、そのうちの１０
〜２０％の樹皮は産業廃棄物となっているが、本発明で
は、フラボノイドを豊富に含む植物の磨砕物あるいは抽
出物を原料として用いることができるのでこの木材資源
の有効利用につながる効果もある。At present, 120 million cubic meters of wood are consumed annually in Japan, 10 of which are consumed.
Although ~ 20% of the bark is industrial waste, in the present invention, since the ground product or extract of flavonoid-rich plants can be used as a raw material, it also has an effect of effectively utilizing this wood resource. .

【００３５】[0035]

【実施例】次に本発明のフラボノイド重合物の製造法、
高活性物質の精製法、分子量測定法、グルコシルトラン
スフェラーゼ阻害活性の検定試験に関する実施例を挙げ
て本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実
施例になんら制約されるものではない。EXAMPLES Next, a method for producing the flavonoid polymer of the present invention,
The present invention will be described in more detail with reference to Examples relating to a method for purifying a highly active substance, a method for measuring a molecular weight, and an assay test for glucosyltransferase inhibitory activity, but the present invention is not limited to these Examples.

【００３６】実 施 例 １ フラボノイド重合物の製造例：原料としてフスチン（Fu
stin）、タキシフォリン（Taxifolin）各３００ｍｇを
エタノール３.０ｍｌに溶解し、水素化ホウ素ナトリウ
ムを６００ｍｇを加えて還元処理を施した。 ２５℃、
２時間反応後、セファデックス ＬＨ−２０（米国、フ
ァルマシア社製）のカラムに反応物を吸着させ、これを
エタノールで溶出した。 得られたエタノール液に等量
の蒸留水を加え、これを減圧下濃縮し、エタノールを除
去した後、凍結乾燥した。 その結果、ロイコフィセチ
ニジン（leucofisetinidin）、ロイコシアニジン（leuc
ocyanidin）を各２７０ｍｇ、２１９ｍｇ得た。Example 1 Production Example of Flavonoid Polymer: As a raw material, fustine (Fu
stin) and taxifolin (300 mg each) were dissolved in ethanol (3.0 ml), and sodium borohydride (600 mg) was added for reduction treatment. 25 ° C,
After reacting for 2 hours, the reaction product was adsorbed on a column of Sephadex LH-20 (manufactured by Pharmacia, USA), and this was eluted with ethanol. An equal amount of distilled water was added to the obtained ethanol solution, which was concentrated under reduced pressure to remove ethanol and then freeze-dried. As a result, leucofisetinidin and leucocyanidin
Cyanidin) was obtained in an amount of 270 mg and 219 mg, respectively.

【００３７】更に、このロイコフィセチニジンを３つに
分け（各９０ｍｇ）、それぞれに、０.０５Ｎ ＨＣｌ中
でＤ−（＋）−カテキンを９０ｍｇ、３０ｍｇおよび１
５ｍｇ加え、２５℃で２４時間重合反応を行った。ロイ
コシアニジンにも同様に３つに分け（各７３ｍｇ）、同
様にしてＤ−（＋）−カテキンを１８ｍｇ、１０ｍｇお
よび７ｍｇずつ加えて重合反応を行わせた。Further, the leukophycetinidine was divided into three (90 mg each), and 90 mg, 30 mg and 1 mg of D-(+)-catechin were added to each of them in 0.05N HCl.
5 mg was added, and a polymerization reaction was carried out at 25 ° C. for 24 hours. Similarly, leucocyanidin was divided into three (73 mg each), and 18 mg, 10 mg and 7 mg of D-(+)-catechin were added in the same manner to carry out the polymerization reaction.

【００３８】実 施 例 ２ フラボノイド重合物の精製例：実施例１で得られた各反
応液をセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ） ＬＨ−２
０（米国、ファルマシア社製）のカラムに供し、アセト
ン−水（７：３ｖ／ｖ）で溶出後、これを減圧下濃縮、
凍結乾燥した。この結果、ロイコフィセチニジン９０ｍ
ｇにＤ−（＋）−カテキン各９０、３０、１５ｍｇを反
応させた場合、プロフィセチニジンタイプのフラボノイ
ド重合物をそれぞれ１６０、１１０、９５ｍｇを得た。
ロイコシアニジン７３ｍｇにＤ−（＋）−カテキン各
１８、１０、７ｍｇを反応させた場合には、プロシアニ
ジンタイプのフラボノイド重合物をそれぞれ８２、７
５、７１ｍｇ得た。Example 2 Purification Example of Flavonoid Polymer: Each reaction solution obtained in Example 1 was treated with Sephadex LH-2.
0 (manufactured by Pharmacia, USA) column, eluted with acetone-water (7: 3 v / v), and concentrated under reduced pressure.
Lyophilized. As a result, leucoficetinidine 90m
When 90 g, 30 mg, and 15 mg of D-(+)-catechin were reacted with g, 160 mg, 110 mg, and 95 mg of flavonoid polymer of prophycetinidine type were obtained, respectively.
When leucocyanidin (73 mg) was reacted with D-(+)-catechin (18, 10, 7 mg), procyanidin type flavonoid polymer was obtained (82, 7).
5,71 mg was obtained.

【００３９】実 施 例 ３ 各フラボノイド重合物の平均分子量の測定：ショーデッ
クス（Ｓｈｏｄｅｘ）カラムを用いて、実施例２で得ら
れた各重合物の数平均分子量と重量平均分子量を測定し
た。すなわち、各試料のサンプル２ｍｇをテトラヒドロ
フラン１０ｍｌに溶解し、これをショーデックス ＫＦ
−８０２および８０４（昭和電工）カラムに吸着させた
後、テトラヒドロフランで溶出し、各重合物の溶出を２
８０ｎｍで検出することにより、各重合物の数平均分子
量と重量平均分子量を測定した。 検量線はポリスチレ
ン標準品を用いて作成した。Example 3 Measurement of average molecular weight of each flavonoid polymer: The number average molecular weight and weight average molecular weight of each polymer obtained in Example 2 were measured using a Shodex column. That is, 2 mg of each sample was dissolved in 10 ml of tetrahydrofuran, and this was dissolved in Shodex KF.
After adsorbing to -802 and 804 (Showa Denko) columns, elution with tetrahydrofuran was performed to elute each polymer by 2 times.
The number average molecular weight and the weight average molecular weight of each polymer were measured by detecting at 80 nm. The calibration curve was created using polystyrene standards.

【００４０】各重合物の重合度は最大ピークを示す最大
含有分子種について算出した。すなわち、検量線からそ
の分子量を算出後、１ユニット２９０と考えて重合度を
算出した。 この結果を第１表にまとめた。また、各重
合物と重合原料の量比の関係は第２表に示す通りであ
る。The degree of polymerization of each polymer was calculated for the maximum contained molecular species showing the maximum peak. That is, after calculating the molecular weight from the calibration curve, the degree of polymerization was calculated considering 1 unit 290. The results are summarized in Table 1. The relationship between the amounts of each polymer and the polymerization raw materials is as shown in Table 2.

【００４１】 [0041]

【００４２】 [0042]

【００４３】実 施 例 ４ グルコシルトランスフェラーゼ阻害活性の検定：下記方
法に従い、本発明のフラボノイド重合物のグルコシルト
ランスフェラーゼ阻害活性を調べた。すなわち、ショ糖
５.０％、デキストランＴ−１０ ０.５％及びアジ化ナ
トリウム ０.５％を含む５００ｍＭリン酸ナトリウム緩
衝液（ｐＨ６.０） ０.６ｍｌおよび被験試料水溶液
０.１５ｍｌに、トッド−ヒューウィット（Todd-Hewit
t）培地で培養したストレプトコッカス・ミュータンス
（Streptococcus mutans）ＭＴ８１４８株菌体から８Ｍ
尿素で抽出したグルコシルトランスフェラーゼ酵素液
〔S. Hamada et al.; J. Gen. Microbiol., 135, 335-3
44(1989)〕を加え、更に全量３ｍｌとなる量の水を加え
て反応系を作成した。 この反応系を、ガラス試験管内
で３７℃、３時間の条件下反応させた。 この際に添加
する酵素量は、３７℃、３時間の反応で５５０ｎｍの吸
光度が約１.０になるように設定した。Example 4 Assay of glucosyltransferase inhibitory activity: The glucosyltransferase inhibitory activity of the flavonoid polymer of the present invention was examined according to the following method. That is, 0.6 ml of a 500 mM sodium phosphate buffer (pH 6.0) containing 5.0% sucrose, 0.5% dextran T-10 and 0.5% sodium azide, and a test sample aqueous solution.
Todd-Hewit to 0.15 ml
t) 8M from Streptococcus mutans MT8148 strain cultured in medium
Glucosyltransferase enzyme solution extracted with urea [S. Hamada et al .; J. Gen. Microbiol., 135, 335-3
44 (1989)], and a total amount of 3 ml of water was added to prepare a reaction system. This reaction system was allowed to react in a glass test tube at 37 ° C. for 3 hours. The amount of enzyme added at this time was set so that the absorbance at 550 nm was about 1.0 in the reaction at 37 ° C. for 3 hours.

【００４４】生成した不溶性グルカンを超音波破砕し、
５５０ｎｍの吸光度（Ａ）を測定し、試料液の代わりに
水を用いたときの吸光度をコントロール（Ｂ）として、
以下の計算式で阻害率（％）を求めた。 阻害率（％） ＝ （Ｂ−Ａ）×１００／Ｂ 得られた阻害率から、実施例２で得たプロフィセチニジ
ン、プロシアニジンタイプのフラボノイド重合物のグル
コシルトランスフェラーゼ阻害活性（ＩＣ₅₀）を測定し
た。 その結果を第３表に示す。The resulting insoluble glucan is ultrasonically disrupted,
The absorbance (A) at 550 nm was measured, and the absorbance when water was used instead of the sample solution was used as a control (B).
The inhibition rate (%) was calculated by the following formula. From the inhibition rate (%) = (B-A ) × 100 / B obtained inhibition rate was measured profilin cell Hee Jin obtained in Example 2, procyanidin type of flavonoid polymer of glucosyltransferase inhibitory activity (IC ₅₀₎ . The results are shown in Table 3.

【００４５】 [0045]

【００４６】実 施 例 ５ 歯垢形成抑制作用の検定：下記方法に従い、本発明のフ
ラボノイド重合物の歯垢形成抑制作用を調べた。すなわ
ち、ショ糖 ５％および被験試料水溶液を含むイーグル
（Eagle）培地（ニッスイ製薬）を用い、斜めに傾斜さ
せた試験管中、３７℃でストレプトコッカス・ソブリヌ
ス（Streptococcus sobrinus）６７１５株を培養した。
２日間培養後、試験管壁に付着したグルカン−菌体複合
体（歯垢）の重量を測定し、これを歯垢形成量とした。
その結果を第４表に示す。Example 5 Assay of Plaque Formation Inhibitory Action: The flavonoid polymer of the present invention was examined for the plaque formation inhibitory action according to the following method. That is, using an Eagle medium (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) containing 5% sucrose and an aqueous solution of a test sample, Streptococcus sobrinus 6715 strain was cultured at 37 ° C. in a test tube inclined at an angle.
After culturing for 2 days, the weight of the glucan-bacterial body complex (plaque) attached to the wall of the test tube was measured, and this was defined as the amount of plaque formation.
The results are shown in Table 4.

【００４７】 [0047]

【００４８】実 施 例 ６ 歯 磨 き 剤：下記組成により、常法に従って歯磨き
剤を調製した。 （ 組 成 ） 重 量 部 第２リン酸カルシウム ４２ グリセリン １８ カラギーナン ０.９ ラウリル硫酸ナトリウム １.２ サッカリンナトリウム ０.０９ パラオキシ安息香酸ブチル ０.００５ 香 料 １ フラボノイド重合物^* ０.０５ 水 残 量 ──────────────────── 全 量 １００ * 実施例２で得たプロフィセチニジンタイプの重合物
（重合度７.２）Example 6 Toothpaste: A dentifrice having the following composition was prepared according to a conventional method. (Composition) Heavy part Dibasic calcium phosphate 42 Glycerin 18 Carrageenan 0.9 Sodium lauryl sulfate 1.2 Sodium saccharin 0.09 Butyl paraoxybenzoate 0.005 Flavor 1 Flavonoid polymer ^* 0.05 Water remaining amount ─── ───────────────── Total amount 100 * Proficetinidine type polymer obtained in Example 2 (degree of polymerization 7.2)

【００４９】実 施 例 ７ 洗 口 液：下記組成により、常法に従って洗口液を調
製した。 （ 組 成 ） 重 量 部 ラウリル硫酸ナトリウム ０.８ グリセリン ７ ソルビトール ５ エチルアルコール １５ フラボノイド重合物^** ０.０５ Ｌ−メントール ０.０５ 香 料 ０.０４ サッカリンナトリウム ０.１ 水 残 量 ─────────────────── 全 量 １００ **実施例２で得たプロシアニジンタイプの重合物（重合
度１０.０）Example 7 Mouthwash: A mouthwash having the following composition was prepared by a conventional method. (Composition) Heavy part Sodium lauryl sulfate 0.8 Glycerin 7 Sorbitol 5 Ethyl alcohol 15 Flavonoid polymer ^** 0.05 L-Menthol 0.05 Perfume 0.04 Saccharin sodium 0.1 Water residual amount ─── ─────────────── Total amount 100 ** Procyanidin type polymer obtained in Example 2 (degree of polymerization 10.0)

【００５０】実 施 例 ７ チューイングガム：下記組成により、常法に従ってチュ
ーイングガムを調製した。 （ 組 成 ） 重 量 部 ガムベース ２０ 炭酸カルシウム ２ ステビオサイド ０.１ フラボノイド重合物^*** ０.０１ 乳 糖 ７６.８９ 香 料 １ ──────────────────── 全 量 １００ *** 実施例２で得たプロシアニジンタイプの重合物（重
合度７.２） 以 上Example 7 Chewing gum: A chewing gum having the following composition was prepared according to a conventional method. (Composition) Weight part Gum base 20 Calcium carbonate 2 Stevioside 0.1 Flavonoid polymer ^*** 0.01 Lactose 76.89 Flavor 1 1 ───────────────── ─── Total amount 100 *** Procyanidin type polymer obtained in Example 2 (degree of polymerization 7.2)

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｇ 17/00 Ｚ ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. ⁶ Identification code Internal reference number FI technical display location C07G 17/00 Z

Claims (13)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 フラバノン類またはフラバノノール類の
還元物あるいはロイコアントシアニジン類をカテキン類
と縮合させることにより製造される、重量平均分子量が
１,０００〜１０,０００である抗う蝕性フラボノイド重
合物。1. An anti-caries flavonoid polymer having a weight average molecular weight of 1,000 to 10,000 produced by condensing flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins with catechins. 【請求項２】 重合度が４.６〜１５.０である請求項第
１項記載の抗う蝕性フラボノイド重合物。2. The cariostatic flavonoid polymer according to claim 1, which has a degree of polymerization of 4.6 to 15.0. 【請求項３】 重合度が６.０〜１２.０である請求項第
１項記載の抗う蝕性フラボノイド重合物。3. The cariogenic flavonoid polymer according to claim 1, having a degree of polymerization of 6.0 to 12.0. 【請求項４】 フラバノン類またはフラバノノール類の
還元物あるいはロイコアントシアニジン類をカテキン類
と縮合させることにより製造されるフラボノイド重合物
を有効成分とするグルコシルトランスフェラーゼ阻害
剤。4. A glucosyltransferase inhibitor containing a flavonoid polymer produced by condensing a reduced product of flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins with catechins as an active ingredient. 【請求項５】 抗う蝕剤として使用されるものである請
求項第４項記載のグルコシルトランスフェラーゼ阻害
剤。5. The glucosyltransferase inhibitor according to claim 4, which is used as an anticaries agent. 【請求項６】 口腔衛生剤として使用されるものである
請求項第４項または第５項記載のグルコシルトランスフ
ェラーゼ阻害剤。6. The glucosyltransferase inhibitor according to claim 4 or 5, which is used as an oral hygiene agent. 【請求項７】 食品添加用剤として使用されるものであ
る請求項第４項記載のグルコシルトランスフェラーゼ阻
害剤。7. The glucosyltransferase inhibitor according to claim 4, which is used as a food additive. 【請求項８】 フラバノン類またはフラバノノール類の
還元物あるいはロイコアントシアニジン類をカテキン類
と縮合させることにより製造されるフラボノイド重合物
を含む抗う触性食品。8. An anti-cariogenic food containing a flavonoid polymer produced by condensing a reduced product of flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins with catechins. 【請求項９】 フラボノイド重合物が、４.６〜１５.０
の重合度を有するフラボノイド重合物である請求項第８
項記載の抗う触性食品。9. The flavonoid polymer is 4.6 to 15.0.
A flavonoid polymer having a degree of polymerization of 8.
An anti-cariogenic food according to the item. 【請求項１０】 フラボノイド重合物が、６.０〜１２.
０の重合度を有するフラボノイド重合物である請求項第
９項記載の抗う触性食品。10. The flavonoid polymer is from 6.0 to 12.
The anti-cariogenic food according to claim 9, which is a flavonoid polymer having a degree of polymerization of 0. 【請求項１１】 フラバノン類またはフラバノノール類
の還元物あるいはロイコアントシアニジン類をカテキン
類と縮合させることにより製造されるフラボノイド重合
物と、砂糖よりなる抗う蝕性砂糖。11. An anti-cariogenic sugar consisting of sugar and a flavonoid polymer produced by condensing a reduced product of flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins with catechins. 【請求項１２】 フラバノン類またはフラバノノール類
の還元物あるいはロイコアントシアニジン類をカテキン
類と縮合させることを特徴とする抗う蝕性物質の製造方
法。12. A method for producing an anticaries agent, which comprises condensing a reduced product of flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins with catechins. 【請求項１３】 フラバノン類またはフラバノノール類
の還元物あるいはロイコアントシアニジン類の１重量部
に対し、カテキン類０.１〜０.５重量部を加えて縮合さ
せることを特徴とする請求項第１２項記載の抗う蝕性物
質の製造方法。13. The catechins are added in an amount of 0.1 to 0.5 parts by weight to 1 part by weight of a reduced product of flavanones or flavanonols or leucoanthocyanidins to condense them. A method for producing the anti-carious substance described.