JPH0723792A - Production of nicotinic acid derivative and new microorganism - Google Patents
Production of nicotinic acid derivative and new microorganismInfo
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- JPH0723792A JPH0723792A JP19321293A JP19321293A JPH0723792A JP H0723792 A JPH0723792 A JP H0723792A JP 19321293 A JP19321293 A JP 19321293A JP 19321293 A JP19321293 A JP 19321293A JP H0723792 A JPH0723792 A JP H0723792A
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、微生物の培養液、該菌
体または該菌体処理物によるニコチン酸誘導体の製造法
及び３−ピコリン分解能を有する新規微生物に関するも
のである。ニコチン酸誘導体は農医薬の中間原料として
有用な物質である。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a culture solution of a microorganism, a method for producing a nicotinic acid derivative by the cells or a treated product of the cells, and a novel microorganism having a 3-picoline degrading property. Nicotinic acid derivatives are useful substances as intermediate raw materials for agricultural medicine.
【０００２】[0002]
【従来の技術】従来、３−ピコリンをニコチン酸に変換
する微生物として、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ）属やノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）
属〔Ｉｚｖ．Ａｋａｄ．Ｎａｕｋ ＳＳＳＲ，Ｓｅｒ．
Ｂｉｏｌ．，１９６９，（５），６６０， Ｉｚｖ．Ａ
ｋａｄ．Ｎａｕｋ ＳＳＳＲ，Ｓｅｒ．Ｂｉｏｌ．，１
９７６，（６），８３４〕、シュードモナス（Ｐｓｅｕ
ｄｏｍｏｎａｓ）属〔特開平４−２２９１８５、特開平
５−７４９４〕等が知られている。また、３−ピコリン
を完全に分解する能力を有する微生物として純粋に分離
されたものは、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ）属〔Ｐｒｉｋｌ．Ｂｉｏｋｈｉｍ．Ｍｉｋｒｏｂｉ
ｏｌ．，１７，３８０（１９８１）〕が知られている
が、他の微生物は知られていない。2. Description of the Related Art Conventionally, Mycobacterium (Mycobaca) has been used as a microorganism for converting 3-picoline into nicotinic acid.
terium) and Nocardia
Genus [Izv. Akad. Nauk SSSR, Ser.
Biol. , 1969, (5), 660, Izv. A
kad. Nauk SSSR, Ser. Biol. , 1
977, (6), 834], Pseudomonas (Pseu
Domonas) genus [JP-A-4-229185, JP-A-5-7494] and the like are known. In addition, a purely isolated microorganism having the ability to completely decompose 3-picoline is Pseudomona (Pseudomona).
s) genus [Prikl. Biohim. Mikrobi
ol. , 17, 380 (1981)], but other microorganisms are not known.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題】３−ピコリンをニコチ
ン酸に変換する場合、従来知られているミコバクテリウ
ム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ノカルディア
（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属やシュードモナス（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）属は、酵素の誘導や変換の際に難水溶性
のアルカンやトルエン、キシレン等を存在させる必要が
あった。本発明の目的は、酵素の誘導や変換の際に難水
溶性のアルカンやトルエン、キシレン等を必要としな
い、微生物を用いたニコチン酸誘導体の簡便な製造法を
提供することである。[Problems to be Solved by the Invention] When 3-picoline is converted to nicotinic acid, conventionally known genus Mycobacterium, Nocardia or Pseudomonas.
In the genus Omonas), it was necessary to allow a poorly water-soluble alkane, toluene, xylene, etc. to be present during the induction or conversion of the enzyme. An object of the present invention is to provide a simple method for producing a nicotinic acid derivative using a microorganism, which does not require a poorly water-soluble alkane, toluene, xylene or the like when inducing or converting an enzyme.
【０００４】[0004]
【課題を解決するための手段】本発明者らは、微生物を
用いたニコチン酸誘導体の簡便な製造法を提供すべく、
鋭意検討した結果、３−ピコリン資化能を有し、ロドコ
ッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する新規微生
物が、ニコチン酸誘導体を効率よく生産することを見い
出し、本発明を完成した。即ち、本発明は、（１）ロド
コッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属し、一般式
〔Ｉ〕[Means for Solving the Problems] The present inventors intend to provide a simple method for producing a nicotinic acid derivative using a microorganism.
As a result of intensive studies, it was found that a novel microorganism belonging to the genus Rhodococcus, which has an ability to assimilate 3-picoline, efficiently produces a nicotinic acid derivative, and completed the present invention. That is, the present invention (1) belongs to the genus Rhodococcus and has the general formula [I]
【化５】 （式中、Ｘは水素，ハロゲン，アルキル基，あるいはア
ルコキシ基を示す）で表される３−ピコリン誘導体から
一般式〔II〕[Chemical 5] (Wherein, X represents hydrogen, halogen, an alkyl group, or an alkoxy group) and represented by the general formula [II]
【化６】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を生成せしめる能力を有する微生物の培養
液、該菌体または該菌体処理物を一般式〔Ｉ〕[Chemical 6] (Wherein X has the same meaning as described above), a culture solution of a microorganism having the ability to form a nicotinic acid derivative, the microbial cell or the treated product of the microbial cell is represented by the general formula [I]
【化７】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表される３−ピ
コリン誘導体に作用せしめ、一般式〔II〕[Chemical 7] (In the formula, X has the same meaning as described above), and the 3-picoline derivative represented by the general formula [II]
【化８】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を採取することを特徴とするニコチン酸誘導
体の製造法及び、（２）ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏ
ｃｃｕｓ）属に属し、３−ピコリン分解能を有する新規
微生物ＮＳ１５６菌及びその突然変異体である。[Chemical 8] A nicotinic acid derivative represented by the formula (wherein X has the same meaning as described above), and (2) Rhodococcus (Rhodococcus)
ccus) belonging to the genus ccus) and having the ability to decompose 3-picoline, a novel microorganism NS156 and mutants thereof.
【０００５】本発明の微生物は、ロドコッカス（Ｒｈｏ
ｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物であり、本発明者
らが新たに群馬県の土壌より分離した菌株ロドコッカス
エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）ＮＳ１
５６が好適に使用できる。ＮＳ１５６菌の菌学的性質は
以下の通りである。The microorganism of the present invention is Rhodococcus (Rho).
Rhodococcus sp. NS1 which is a microorganism belonging to the genus Dococcus and is newly isolated from the soil of Gunma prefecture by the present inventors.
56 can be used conveniently. The mycological properties of NS156 are as follows.
【０００６】[0006]
【表１】 （ａ）形態及び生理学的性質 １）細菌の形 ： 最初、菌糸状に生育して
いたものが、徐々に***し、短桿菌状を呈する。 ２）細胞の多形性の有無 ： 有り ３）運動性の有無 ： 無し ４）胞子の有無 ： 無し ５）グラム染色性 ： 陽性 ６）抗酸性 ： 無し ７）集落の色 ： 肌色〜オレンジ ８）カタラーゼ ： ＋ ９）酸素に対する態度 ： 好気性 （ｂ）化学的性質 １）細胞壁のジアミノ酸 ： ｍｅｓｏ−ジアミノピメ
リン酸 ２）全菌体中の糖 ： アラビノース ＋ ガラクトース ＋ ３）グリコレート試験（Ｇｌｙｃｏｌａｔｅ ｔｅｓ
ｔ）：グリコリル型 ４）キノン類の分析 ： ＭＫ−９（Ｈ2 ） ５）ミコール酸の分析 ： 炭素数５６〜６２のミコ
ール酸を検出。二重結合数１〜４個[Table 1] (a) Morphology and Physiological Properties 1) Bacterial Shape: What initially grew in a hyphal form gradually divides into a short rod-shaped form. 2) Presence or absence of cell polymorphism: Yes 3) Presence or absence of motility: None 4) Presence or absence of spores: None 5) Gram stainability: Positive 6) Anti-acidic: None 7) Color of colony: Skin color to orange 8) Catalase: +9) Attitude toward oxygen: Aerobic (b) Chemical properties 1) Cell wall diamino acid: meso-diaminopimelic acid 2) Sugars in whole cells: Arabinose + galactose + 3) Glycolate test (Glycolate tests)
t): Glycolyl type 4) Analysis of quinones: MK-9 (H 2 ) 5) Analysis of mycolic acid: Mycolic acid having 56 to 62 carbon atoms is detected. Number of double bonds 1-4
【０００７】以上の菌学的性質をバージーズ マニュア
ル オブ システマティック バクテリオロジー（BERG
EY'S MAMUAL OF Systematic Bacteriology）に基づ
いて検索した結果、ＮＳ１５６はロドコッカス（Ｒｈｏ
ｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物であると判断され
た。ＮＳ１５６菌が３−ピコリン分解能を有することは
本発明の微生物の特徴である。そこで本発明者らは、Ｎ
Ｓ１５６菌をロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏ
ｃｃｕｓ ｓｐ．）ＮＳ１５６と命名し、工業技術院生
命工学工業技術研究所に寄託した（ＦＥＲＭ Ｐ−１３
７０６）。本発明に従えば、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏ
ｃｏｃｃｕｓ）属菌を適当な培地で培養中、あるいは培
養後に得られた培養物を、３−ピコリン誘導体に作用さ
せて、ニコチン酸誘導体を製造することができる。[0007] The above-mentioned mycological properties are described in the Vergie's Manual of Systematic Bacteriology (BERG
As a result of searching based on EY'S MAMUAL OF Systematic Bacteriology, NS156 was Rhodococcus (Rho).
It was determined to be a microorganism belonging to the genus Dococcus. It is a feature of the microorganism of the present invention that NS156 has the ability to decompose 3-picoline. Therefore, the present inventors
S156 fungus was used for Rhodococcus sp.
ccus sp. ) Named NS156 and deposited at the Institute of Biotechnology, Institute of Industrial Science and Technology (FERM P-13
706). According to the invention, Rhodococcus (Rhodo)
A nicotinic acid derivative can be produced by culturing a bacterium belonging to the genus Coccus) in a suitable medium or by allowing the culture obtained after the culturing to act on the 3-picoline derivative.
【０００８】３−ピコリン誘導体に本微生物を作用させ
る方法は、本微生物を３−ピコリン誘導体を含む培地中
で培養してもよいし、本微生物の菌体または菌体処理物
を水溶液中で３−ピコリン誘導体に接触させてもよい。
本微生物を培養することにより３−ピコリン誘導体をニ
コチン酸誘導体に変換する方法としては、培養当初より
３−ピコリン誘導体を含有する培地で本発明の微生物を
培養してもよいし、培養途中で３−ピコリン誘導体を培
地に添加してもよい。本微生物の培養のために用いられ
る培地は本微生物が資化しうる炭素源、窒素源、無機イ
オンさらに必要ならば有機栄養源を含む通常の培地であ
る。炭素源としては、グルコース等の炭水化物、グリセ
ロール等のアルコール類、有機酸、その他が適宜使用さ
れる。窒素源としては、アンモニウム塩や硝酸塩、その
他が用いられる。無機イオンとしては、マグネシウムイ
オン、鉄イオン、銅イオン、リン酸イオン、その他が必
要に応じ適宜使用される。有機栄養源としては、ビタミ
ン、アミノ酸等およびこれらを含有する酵母エキス、ポ
リペプトン、肉エキス、その他が適宜用いられる。培養
は好気的条件下に、ｐＨ６ないし１０、温度２０ないし
４２℃の適当な範囲に制御しつつ行えば望ましい結果が
得られる。かくして１ないし２０日間も培養を行えば、
３−ピコリン誘導体は効率よくニコチン酸誘導体に変換
される。In the method of allowing the present microorganism to act on the 3-picoline derivative, the present microorganism may be cultured in a medium containing the 3-picoline derivative, or the cells of the microorganism or a treated product of the cells may be used in an aqueous solution. -It may be contacted with a picoline derivative.
As a method for converting a 3-picoline derivative into a nicotinic acid derivative by culturing the present microorganism, the microorganism of the present invention may be cultivated in a medium containing the 3-picoline derivative from the beginning of the culturing, or 3 -The picoline derivative may be added to the medium. The medium used for culturing the present microorganism is a usual medium containing a carbon source, a nitrogen source, inorganic ions and, if necessary, an organic nutrient source which the present microorganism can assimilate. As the carbon source, carbohydrates such as glucose, alcohols such as glycerol, organic acids, etc. are appropriately used. As the nitrogen source, ammonium salts, nitrates, etc. are used. As the inorganic ion, magnesium ion, iron ion, copper ion, phosphate ion, and the like are appropriately used as necessary. As the organic nutrient source, vitamins, amino acids and the like, yeast extract, polypeptone, meat extract and the like containing these are appropriately used. The desired results can be obtained if the culture is carried out under aerobic conditions while controlling the pH within the range of 6 to 10 and the temperature within the range of 20 to 42 ° C. Thus, if the culture is carried out for 1 to 20 days,
The 3-picoline derivative is efficiently converted into a nicotinic acid derivative.
【０００９】一方、本微生物の菌体または菌体処理物を
水溶液中にて３−ピコリン誘導体と接触させて作用させ
る場合には、３−ピコリン誘導体と菌体または菌体処理
物を懸濁または溶解した水溶液中で温度１５〜４５℃、
好ましくは２５〜３５℃、ｐＨ５〜１０、好ましくは６
〜９に保ちつつ暫時撹拌または静置すればよい。３−ピ
コリン誘導体の濃度は０．０１〜５％、好ましくは０.
５％以下であり、３−ピコリン誘導体を反応の間追補添
加してもよい。菌体としては、菌体を含む培養液をその
まま用いてもよい。また、これを一旦培養液より分離し
て洗浄または洗浄せずに使用してもよい。このような菌
体を得る方法は前記の培地および培養方法がそのまま採
用できるが、培地にはさらに３−ピコリンを少量添加す
ることが望ましい。また、培養時間はこの場合、微生物
が十分増殖すればよいので、１５ないし７２時間程度で
培養を終えてもよい。水溶液には必要に応じて、グルコ
ース等の炭水化物、グリセロール等のアルコール類、有
機酸、あるいは金属イオン等が添加されると変換効率が
向上する場合がある。かくして１ないし２０日間も経過
すれば、水溶液中の３−ピコリン誘導体は効率よく、ニ
コチン酸誘導体に変換される。On the other hand, when the cells of the present microorganism or the treated product of the microorganisms are brought into contact with the 3-picoline derivative in an aqueous solution to act, the 3-picoline derivative and the cells or the treated product of the cells are suspended or 15-45 ° C in the dissolved aqueous solution,
Preferably 25-35 ° C, pH 5-10, preferably 6
It may be agitated or allowed to stand for a while while being maintained at -9. The concentration of the 3-picoline derivative is 0.01 to 5%, preferably 0.1.
It is 5% or less, and the 3-picoline derivative may be supplementarily added during the reaction. As the cells, a culture solution containing the cells may be used as it is. In addition, this may be used once after being separated from the culture solution and washed or not washed. As the method for obtaining such cells, the above-mentioned medium and culture method can be employed as they are, but it is desirable to add a small amount of 3-picoline to the medium. Further, in this case, the culture may be completed in about 15 to 72 hours because the microorganisms may sufficiently grow in this case. If necessary, carbohydrates such as glucose, alcohols such as glycerol, organic acids, or metal ions may be added to the aqueous solution to improve the conversion efficiency. Thus, even after 1 to 20 days, the 3-picoline derivative in the aqueous solution is efficiently converted into the nicotinic acid derivative.
【００１０】[0010]
【実施例】以下、実施例によって本発明を更に具体的に
説明する。本発明は、以下の実施例のみに限定されるも
のではなく、本発明の技術分野における通常の変更をす
ることができる。 実施例１ 常法に従い、酵母エキス１０. ０g ／l ，トリプトン１
０. ０g ／l ，ＮａＣｌ １０. ０g ／l ，ＣａＣｌ2
・ ２Ｈ2 Ｏ ０. ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ０. ５mg／l ，
ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ2 Ｏ ０. ０４mg／l ，ＫＩ ０. １
mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ １. ０mg／l ，ＭｎＣ
ｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ
０. ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・ ２Ｈ2 Ｏ ０. ２mg
／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製し、滅菌後滅菌済
１００ml容三角フラスコ（バッフル付）に２０ml分注し
た。２, ５−ルチジンを無菌的に８. ４ｍＭになるよう
に添加した。これにＬＢ寒天培地で３０℃にて培養した
ロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓ
ｐ．）ＮＳ１５６菌を接種し、３０℃で２３０時間振盪
培養を行なった後、培養液を高速液体クロマトグラフ法
により分析したところ、６ｍＭの６−メチルニコチン酸
が蓄積していた。収率は７１％であった。生成した６−
メチルニコチン酸の構造は、薄層クロマトグラフ法によ
る分取後、ＮＭＲ、質量スペクトル分析により確認し
た。EXAMPLES The present invention will be described in more detail below with reference to examples. The present invention is not limited to the following examples, and can be modified in a usual manner in the technical field of the present invention. Example 1 Yeast extract 10.0 g / l, tryptone 1 according to a conventional method
0.0 g / l, NaCl 10.0 g / l, CaCl 2
2H 2 O 0.4 mg / l, H 3 BO 3 0.5 mg / l,
CuSO 4 .5H 2 O 0.04 mg / l, KI 0.1
mg / l, FeSO 4 .7H 2 O 1.0 mg / l, MnC
l 2 .4H 2 O 0.4 mg / l, ZnSO 4 .7H 2 O
0.4 mg / l, Na 2 MoO 4 .2H 2 O 0.2 mg
A medium (pH 7.0) containing 1 / l was prepared, and after sterilization, 20 ml was dispensed into a sterilized 100 ml Erlenmeyer flask (with a baffle). 2,5-lutidine was aseptically added to 8.4 mM. Rhodococcus sp. (Rhodococcus sp.) Cultured on LB agar medium at 30.degree.
p. ) NS156 was inoculated, shake-cultured at 30 ° C. for 230 hours, and the culture was analyzed by high performance liquid chromatography to find that 6 mM 6-methylnicotinic acid had accumulated. The yield was 71%. Generated 6-
The structure of methylnicotinic acid was confirmed by NMR and mass spectral analysis after fractionation by thin layer chromatography.
【００１１】実施例２ 常法に従って、グルコース２. ０g ／l ，リン酸二ナト
リウム６. ０g ／l （別滅菌），リン酸一カリウム３.
０g ／l （別滅菌），３−ピコリン２. ０g ／l ，Ｍｇ
ＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ０. ５g ／l ，ＣａＣｌ2 ・ ２Ｈ2
Ｏ ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ５mg／l ，ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ
2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＫＩ １mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７
Ｈ2 Ｏ １０mg／l ，ＭｎＣｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ４mg／l
，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・
２Ｈ2 Ｏ ２mg／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製
し、滅菌済小型試験管に１ml分注した。これに上記組成
寒天培地で３０℃にて培養したロドコッカス エスピー
（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．） ＮＳ１５６菌を
接種し、３０℃で振盪培養した。培養２０時間後、培養
液のＴＬＣ分析を行ったところ、３−ピコリンは完全に
消失していた。Example 2 According to a conventional method, glucose 2.0 g / l, disodium phosphate 6.0 g / l (separate sterilization), monopotassium phosphate 3.
0 g / l (separate sterilization), 3-picoline 2.0 g / l, Mg
SO 4 · 7H 2 O 0. 5g / l, CaCl 2 · 2H 2
O 4mg / l, H 3 BO 3 5mg / l, CuSO 4 · 5H
2 O 0. 4mg / l, KI 1mg / l, FeSO 4 · 7
H 2 O 10 mg / l, MnCl 2 · 4H 2 O 4 mg / l
, ZnSO 4 · 7H 2 O 4mg / l, Na 2 MoO 4 ·
A medium (pH 7.0) containing 2 mg / l of 2H 2 O was prepared, and 1 ml was dispensed into a sterilized small test tube. This was inoculated with Rhodococcus sp. NS156 bacteria cultivated at 30 ° C. in the agar medium having the above composition, and shake-cultured at 30 ° C. After 20 hours of culturing, TLC analysis of the culture broth revealed that 3-picoline had completely disappeared.
【００１２】実施例３ 常法に従って、グルコース２. ０g ／l ，リン酸二ナト
リウム６. ０g ／l （別滅菌），リン酸一カリウム３.
０g ／l （別滅菌），３−ピコリン２. ０g ／l ，Ｍｇ
ＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ０. ５g ／l ，ＣａＣｌ2 ・ ２Ｈ2
Ｏ ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ５mg／l ，ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ
2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＫＩ １mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７
Ｈ2 Ｏ １０mg／l ，ＭｎＣｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ４mg／l
，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・
２Ｈ2 Ｏ ２mg／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製
し、滅菌済１００ml容三角フラスコ（バッフル付）に２
０ml分注した。これにＬＢ寒天培地で３０℃にて培養し
たロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ
ｓｐ．） ＮＳ１５６菌を接種し、３−ピコリンが消失
するまで３０℃で振盪培養した。培養後、菌体を遠心分
離により採取し、１０mlの０.１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
７. ０）で一回洗浄し、菌体を集めた。この洗浄菌体を
２０mMの３−ピコリンを含む０. １Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７.０）１０mlに添加して、３０℃で振盪し、反応を
行った。反応２８時間後、反応液を高速液体クロマトグ
ラフ法により分析したところ、３−ピコリンは完全に消
失していた。Example 3 Glucose 2.0 g / l, disodium phosphate 6.0 g / l (separate sterilization), monopotassium phosphate 3.
0 g / l (separate sterilization), 3-picoline 2.0 g / l, Mg
SO 4 · 7H 2 O 0. 5g / l, CaCl 2 · 2H 2
O 4mg / l, H 3 BO 3 5mg / l, CuSO 4 · 5H
2 O 0. 4mg / l, KI 1mg / l, FeSO 4 · 7
H 2 O 10 mg / l, MnCl 2 · 4H 2 O 4 mg / l
, ZnSO 4 · 7H 2 O 4mg / l, Na 2 MoO 4 ·
Prepare a medium (pH 7.0) containing 2 mg / l of 2H 2 O and place it in a sterilized 100 ml Erlenmeyer flask (with baffle).
0 ml was dispensed. Rhodococcus sp. (Rhodococcus sp.) Cultured on LB agar medium at 30 ° C
sp. ) NS156 was inoculated and cultured with shaking at 30 ° C until 3-picoline disappeared. After culturing, the cells were collected by centrifugation and 10 ml of 0.1 M phosphate buffer (pH
The cells were washed once with 7.0) to collect the cells. The washed cells were treated with 0.1 M phosphate buffer (p of 20 mM 3-picoline (p
H7.0) was added to 10 ml and the reaction was carried out by shaking at 30 ° C. After 28 hours of reaction, the reaction solution was analyzed by high performance liquid chromatography to find that 3-picoline had completely disappeared.
【００１３】[0013]
【発明の効果】本発明によって、農医薬の中間原料とし
て有用であるニコチン酸誘導体〔II〕をロドコッカス
（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物を利用し
て、３−ピコリン誘導体から簡便に製造することが可能
になった。INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, a nicotinic acid derivative [II] which is useful as an intermediate raw material for agricultural medicine can be easily produced from a 3-picoline derivative using a microorganism belonging to the genus Rhodococcus. Became.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 児嶋 高和 神奈川県小田原市高田字柳町345 日本曹 達株式会社小田原研究所内─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. 6 Identification code Internal reference number FI technical display location C12R 1:01) (72) Inventor Takakazu Kojima 345 Nippon Soda Co., Ltd. Yanagimachi, Takada, Odawara-shi, Kanagawa Company Odawara Research Center
Claims (2)
属に属し、一般式〔Ｉ〕 【化１】 （式中、Ｘは水素，ハロゲン，アルキル基，あるいはア
ルコキシ基を示す）で表される３−ピコリン誘導体から
一般式〔II〕 【化２】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を生成せしめる能力を有する微生物の培養
液、該菌体または該菌体処理物を一般式〔Ｉ〕 【化３】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表される３−ピ
コリン誘導体に作用せしめ、一般式〔II〕 【化４】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を採取することを特徴とするニコチン酸誘導
体の製造法。1. Rhodococcus
Belongs to the genus and has the general formula [I] (Wherein, X represents hydrogen, halogen, an alkyl group, or an alkoxy group), and a 3-picoline derivative represented by the general formula [II] (Wherein X has the same meaning as described above), a culture solution of a microorganism having the ability to form a nicotinic acid derivative, the bacterial cell or the treated product of the bacterial cell is represented by the general formula [I] (Wherein X has the same meaning as described above), the compound is reacted with a 3-picoline derivative to give a compound represented by the general formula [II] A method for producing a nicotinic acid derivative, characterized in that a nicotinic acid derivative represented by the formula (wherein X has the same meaning as described above) is collected.
属に属し、３−ピコリン分解能を有する新規微生物ＮＳ
１５６菌及びその突然変異体。2. Rhodococcus
New microorganism NS belonging to the genus and having 3-picoline degrading ability
156 bacteria and its mutants.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19321293A JPH0723792A (en) | 1993-07-08 | 1993-07-08 | Production of nicotinic acid derivative and new microorganism |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19321293A JPH0723792A (en) | 1993-07-08 | 1993-07-08 | Production of nicotinic acid derivative and new microorganism |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0723792A true JPH0723792A (en) | 1995-01-27 |
Family
ID=16304173
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19321293A Pending JPH0723792A (en) | 1993-07-08 | 1993-07-08 | Production of nicotinic acid derivative and new microorganism |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0723792A (en) |
-
1993
- 1993-07-08 JP JP19321293A patent/JPH0723792A/en active Pending
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