JPH07215940A

JPH07215940A - 抗ウイルス活性を有する化合物

Info

Publication number: JPH07215940A
Application number: JP6023541A
Authority: JP
Inventors: Shigeru Ikeda; 滋池田; Yoshitsugu Hanya; 吉嗣判谷; Shozo Shoji; 省三庄司
Original assignee: Torii Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Torii Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1994-01-27
Filing date: 1994-01-27
Publication date: 1995-08-15

Abstract

(57)【要約】【目的】本発明は、ミリストイル化の生物学的意義
の探求のための有用なＮ−ミリストイル転移酵素活性測
定方法を提供すると共に、ウイルス、レトロウイルス、
中でも免疫不全症候群（エイズ）の原因ウイルス（ＨＩ
Ｖ−Ｉ）に対する抗ウイルス活性を有する化合物を提供
する。【構成】式（Ｉ）Ｚ−Ｙ−（ＣＨ₂）ｘＣＯＯＲ（式中、Ｚはピリジル基、ピリミジル基、トリアゾリル
基またはテトラゾリル基を、Ｙは酸素原子又は硫黄原子
を、Ｒは水素又は炭素数１〜８のアルキル基およびｘは
７〜１１を示す。）で示される脂肪酸類縁体および医薬
として使用可能な塩化合物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規脂肪酸類縁体を用
いる、Ｎ−ミリストイル転移酵素活性測定方法、ウイル
ス、レトロウイルス、中でも免疫不全症候群（エイズ）
の原因ウイルス（ＨＩＶ−Ｉ）に対する抗ウイルス活性
を有する化合物に関する。

【０００２】

【従来の技術】一般にある種のタンパク質のアミノ末端
はアセチル基、ピログルタミル基、およびホルミル基に
よりブロックされていることが知られている。タンパク
質のアミノ末端に炭素鎖１４個の長鎖脂肪酸、ミリスチ
ン酸が酸アミド結合を介し、共有結合している事がｃ
ＡＭＰ−依存性プロテインキナ−ゼの全一次構造決定の
途上、１９８２年に庄司ら（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃ
ａｄ．Ｓｃｉ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．，７９，６１２８（１９
８２））によって初めて発見されて以来、種々のタンパ
ク質のアミノ末端ミリストイル基の同定がなされてい
る。

【０００３】アミノ末端ミリストイル化タンパク質とし
て、細胞由来のタンパク質およびウイルス由来のタンパ
ク質に大別する事が出来る。前者は、ｃＡＭＰ−依存性
プロテインキナ−ゼをはじめ、ホスホプロテインホスフ
ァタ−ゼであるカルシニュリン（ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉ
ｎ）Ｂ、還元型ニコチンアミド−ジヌクレオチドリン
酸（ＮＡＤＨ）−シトクロ−ムｂ5 レダクタ−ゼ、ＢＣ
3 Ｈ1 筋細胞系の細胞内タンパク質、ｐｐ６０
^v-src（ｓｒｃ−ｇｅｎｅ遺伝子産物，チロシンキナー
ゼ）のｐ３６Ｋ基質タンパク質、マクロファージ内の細
胞内タンパク質、インシュリンレセプタ−、ビンキュリ
ンなどがある。

【０００４】後者のアミノ末端がミリストイル化を受け
ているウイルス構成タンパク質として、ラウシャ−・モ
ロニ−マウス白血病ウイルスのＰｒ６５^gag コアタンパ
ク質、ＦｅＳＶのｇａｇ−ｏｎｃタンパク質、モロニ−
マウス白血病ウイルスのチロシンプロテインキナ−ゼ、
ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）のｐｐ６０^v-src 、成人
Ｔ細胞白血病（ＡＴＬ）ウイルス（ＨＴＬＶ−Ｉ）のｐ
１９^gagタンパク質、免疫不全症候群（エイズ）の原因
ウイルス（ＨＩＶ−Ｉ）のｐ１７^ga ^g タンパク質、ポリ
オーマウイルスおよびＳＶ４０の外被タンパク質ＶＰ
２、メイソン−ファイザ−（Ｍａｓｏｎ−Ｐｆｉｚｅ
ｒ）サルウイルスのコアタンパク質、Ｂ型肝炎ウイルス
（ＨＢＶ）のプレＳ１コアタンパク質、ポリオウイルス
のコアタンパク質ＶＰ４が知られている。ヒト癌遺伝
子（ｓｒｃ−ｇｅｎｅ）産物ｐｐ６０^c-src 、グアノシ
ントリホスフェ−ト（ＧＴＰ）結合タンパク質のα−サ
ブユニットにミリストイル基が見いだされ、また免疫グ
ロブリンにもミリストイル基の結合が示唆されている。
以上のように、種々の細胞内タンパク質、ウイルス構
成タンパク質、あるいは発癌遺伝子産物のミリストイル
化が見いだされている。

【０００５】タンパク質アミノ末端ミリストイル化を触
媒する酵素は酵母（Ｄ．Ａ．Ｔｏｗｌｅｒら，Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６３，１７８４（１９８８））あ
るいは動物組織（Ｃ．Ｊ．Ｇｌｏｖｅｒら，Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ．Ｊ．，２５０，４８５（１９８８））から見い出
され、部分精製されているがその酵素化学的諸性質は明
確でない。本酵素はミリストイル補酵素（ＣｏＡ）を
ミリストイル供与体、Ｎ末端グリシルペプチドを受容体
とし、その間のミリストイル基の授受を触媒することが
知られている。

【０００６】ミリストイル化酵素の活性は実際には以下
のように行われている。放射性同位体で標識されたミリ
ストイル供与体すなわち［³Ｈ］−ミリストイル−Ｃｏ
Ａか、あるいはミリストイル基受容体すなわちグリシル
ペプチドを標識して酵素反応により生じた、標識された
アミノ末端ミリストイル化ペプチドを高速液体クラマト
グラフィ−（ＨＰＬＣ）で分析して求める方法が広く行
われている。

【０００７】ミリストイル化酵素の受容体となり得る比
較的短い合成Ｎ末端グリシルペプチドが、米国特許第
４，７４０，５８８号および第４，７７８，８７８号に
記載されている。このようなペプチドの例としては、
Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａ
ｒｇ−ＡｒｇおよびＧｌｙ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−
Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇである。

【０００８】一方、ミリストイル化の生物学的意義が種
々論じられている。例えば、ＲＳＶのｐｐ６０^v-src
の場合、ミリストイル化を阻害すると細胞の形質変化を
引き起こす能力を失う（Ｄ．Ｐｅｌｌｍａｎら，Ｎａｔ
ｕｒｅ，３１４，３７４（１９８５））、またポリオウ
イルスのコアタンパク質ＶＰ４においては、ウイルスが
カプシド構造を保持するため、あるいは自己のＲＮＡを
宿主細胞に送り込む過程でミリストイル化が重要な役割
を果たしていることが報告されている（Ｍ．Ｃｈｏｗ
ら，Ｎａｔｕｒｅ，３２７，４８２（１９８７））。

【０００９】Ｓ．Ｐ．Ａｄａｍｓらは、４〜１３番目の
炭素が酸素あるいは硫黄で置換された炭素鎖１３または
１４のオキシまたはチオ脂肪酸（米国特許第４０２，０
９４号）、あるいは、ω位にアジド、テトラゾイルまた
はトリアゾリル基を有する炭素鎖９〜１３のアジド置換
オキシまたはチオ脂肪酸（米国特許第５９６，１８３
号）のＣｏＡエステルがミリストイル化酵素の基質とな
ることを、さらにこれら脂肪酸類縁体がウイルスに感染
した哺乳動物宿主中のウイルスを阻害することを報告し
ている。

【００１０】

【本発明が解決しようとする課題】上述したように、ミ
リストイル化の生物学的意義とミリストイル化阻害によ
る抗ウイルス作用の重要性が明らかになるに従い、ミリ
ストイル化酵素の簡便な活性測定方法および新規のミリ
ストイル化阻害化合物の開発が望まれている。

【００１１】

【課題を解決するための手段】そこで、本発明は種々脂
肪酸類縁体について検討し、本発明に至った。本発明に
より、タンパク質アミノ末端ミリストイル化を触媒する
酵素に対して、活性を有する脂肪酸類縁体基質が提供さ
れる。これらの化合物は、脂肪酸骨格中に、ピリジル
基、ピリミジル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、
酸素原子あるいは硫黄原子を含む。

【００１２】好ましい脂肪酸類縁体は、下記の一般式で
示される。Ｚ−Ｙ−（ＣＨ₂）ｘＣＯＯＲ（Ｉ）式中、Ｚはピリジル基、ピリミジル基、トリアゾリル基
又はテトラゾリル基を、Ｙは酸素原子または硫黄原子
を、Ｒは水素又は炭素数１〜８のアルキル基およびｘは
７〜１１を示す。より好ましくは、式中、Ｚはピリジル
基又はピリミジル基を、Ｙは硫黄原子を、ＲはＨを、ｘ
は８〜１０を示す。

【００１３】従来ミリストイル化酵素の活性測定には放
射性同位体で標識されたミリストイル供与体すなわち［
³Ｈ］−ミリストイル−ＣｏＡか、あるいはミリストイ
ル基受容体すなわちグリシルペプチドを標識して、酵素
反応により生じた標識されたアミノ末端ミリストイル化
ペプチドを高速液体クラマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で
分離し、オンライン放射能検出器で評価する方法が行わ
れている。本発明のこれら新規化合物は、何れも２５
０、３００あるいは３１６ｎｍに吸収極大を持つ特徴あ
る化合物である。これら吸収特性を利用することで、
ミリストイル化酵素活性の非放射的な測定が可能となっ
た。

【００１４】また、本発明化合物存在下、ヒトＴ−細胞
（ＣＥＭ）に免疫不全症候群（エイズ）の原因ウイルス
（ＨＩＶ−Ｉ）を初感染させ、感染性娘ウイルスをウイ
ルス感染価（ＴＣＩＤ50、細胞培養において５０％の細
胞に感染するウイルスの投与量）を指標に求めると、本
発明化合物はウイルス産生を阻害することがわかった。
さらに、本発明化合物をＨＩＶ−Ｉ持続産生株（ＣＥ
Ｍ／ＬＡＶ−Ｉ）に作用させた場合にも、本発明化合物
はウイルス産生を阻害することがわかった。

【００１５】このことは、本発明新規化合物が、ミリス
トイル転移酵素の働きを阻害しているため、またはミリ
ストイル転移酵素によりタンパク質に組み込まれた場合
にミリストイル化タンパク質とは違った疎水性を示すた
め、ミリストイル化の生物学的意義として論じられてい
る細胞の形質変化、コアタンパク質におけるウイルスの
カプシド構造の保持あるいはウイルスのＲＮＡを宿主細
胞に送り込む過程で変化を与えることを意味している。
すなわち、本発明の新規脂肪酸類縁体は、ミリストイル
化の生物学的意義の探求のための有用なＮ−ミリストイ
ル転移酵素活性測定方法を提供すると共に、ウイルス、
レトロウイルス、中でも免疫不全症候群（エイズ）の原
因ウイルス（ＨＩＶ−Ｉ）に対する抗ウイルス活性を有
する化合物としての有用性を含んでいる。

【００１６】本発明により、新規脂肪酸類縁体を用いた
簡便なＮ−ミリストイル転移酵素活性測定方法、さら
に、ウイルス、レトロウイルス、中でも免疫不全症候群
（エイズ）の原因ウイルス（ＨＩＶ−Ｉ）に対する抗ウ
イルス活性を有する化合物が提供される。

【００１７】より詳細には、以下の脂肪酸類縁体が提供
される。９−（２−ピリジルチオ）−ノナン酸（１）１０−（２−ピリジルチオ）−デカン酸（２）１１−（２−ピリジルチオ）−ウンデカン酸（３）９−（４−ピリジルチオ）−ノナン酸（４）１０−（４−ピリジルチオ）−デカン酸（５）１１−（４−ピリジルチオ）−ウンデカン酸（６）９−（２−ピリミジルチオ）−ノナン酸（７）１０−（２−ピリミジルチオ）−デカン酸（８）１１−（２−ピリミジルチオ）−ウンデカン酸（９）なお、本発明の脂肪酸類縁体はこれらに限定されるもの
ではない。

【００１８】本発明の生物学的に活性な脂肪酸類縁体
は、種々の合成経路により調整ることが出来る。例え
ば、必要な鎖長を持つω−臭化アルキルカルボン酸誘導
体を、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭ
Ｆ）等の有機溶媒中、あるいは、例えば、無水炭酸カリ
ウム存在下、室温で、チオ−ル化合物と反応させること
で合成出来るが、他の同等の既知の方法を用いることも
出来る。

【００１９】

【発明の効果】本発明により、簡便なＮ−ミリストイル
転移酵素活性測定、さらに、ウイルスの宿主細胞への感
染阻害およびウイルス感染細胞の増殖阻害ができた。

【００２０】以下の例は、本発明を例示するものであ
り、これを限定するものではない。

【００２１】例１９−（２−ピリジルチオ）−ノナン酸（１）の製造９−臭化ノナン酸１ｇ、２−メルカプトピリジン０．５
ｇ、炭酸カリウム１．２ｇ、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムア
ミド（ＤＭＦ）８ｍｌの混液を室温で一夜攪拌する。
反応溶液に水１０ｍｌを加えた後、ジエチルエーテルで
抽出する。水層をクエン酸酸性にした後、これを酢酸
エチルエステルで抽出する。有機層を水で洗浄後、無
水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒を減圧留去すると
９−（２−ピリジルチオ）−ノナン酸０．８１ｇが得ら
れた。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
０−１．５１（ｍ，１０Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₅ ）、１．５９（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．１９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．１０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
３Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．
９Ｈｚ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−５）、７．２
７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−３）、
７．６３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｊ＝８．０Ｈ
ｚ，ピリジル−Ｈ−４）、８．４４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝
６．９Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−６）、１１．９５（ｂｒ
ｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）＝２５
０、３１６

【００２２】例２１０−（２−ピリジルチオ）−デカン酸（２）の製造例１と同様に、１０−臭化デカン酸１ｇと２−メルカプ
トピリジン０．４４ｇより１０−（２−ピリジルチオ）
−デカン酸０．８２ｇを得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
１−１．５１（ｍ，１２Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₆ ）, １．５８（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．１１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
２Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．０９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．
０Ｈｚ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−５）、７．２
５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−３）、
７．６０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｊ＝７．９Ｈ
ｚ，ピリジル−Ｈ−４）、８．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝
７．０Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−６）、１１．９５（ｂｒ
ｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）＝２５
０、３１６

【００２３】例３１１−（２−ピリジルチオ）−ウンデカン酸（３）の製
造例１と同様に、１１−臭化ウンデカン酸１ｇと２−メル
カプトピリジン０．４２ｇより１１−（２−ピリジルチ
オ）−ウンデカン酸０．８６ｇを得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
１−１．５２（ｍ，１４Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₇ ）, １．５９（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．１８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．１１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
３Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．０９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．
９Ｈｚ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−５）、７．２
５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−３）、
７．６２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｊ＝８．２Ｈ
ｚ，ピリジル−Ｈ−４）、８．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝
６．９Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−６）、１１．９６（ｂｒ
ｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）＝２５
０、３１６

【００２４】例４９−（４−ピリジルチオ）−ノナン酸（４）の製造例１と同様に、９−臭化ノナン酸１ｇと４−メルカプト
ピリジン０．４７ｇより９−（４−ピリジルチオ）−ノ
ナン酸０．８７ｇを得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
１−１．５２（ｍ，１０Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₅）、１．６８（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．０８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
３Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．４
Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−３，５）、８．４０（ｄ，２Ｈ，
Ｊ＝６．４Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−２，６）、１１．９９
（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）
＝２３０、３００

【００２５】例５１０−（４−ピリジルチオ）−デカン酸（５）の製造例１と同様に、１０−臭化デカン酸１ｇと４−メルカプ
トピリジン０．４４ｇより１０−（４−ピリジルチオ）
−デカン酸０．８９ｇを得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
２−１．５１（ｍ，１２Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₆ ）、１．６５（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．１８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．０４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
３Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．２５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．４
Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−３，５）、８．３６（ｄ，２Ｈ，
Ｊ＝６．４Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−２，６）、１１．９８
（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）
＝２３０、３００

【００２６】例６１１−（４−ピリジルチオ）−ウンデカン酸（６）の製
造例１と同様に、１１−臭化ウンデカン酸１ｇと４−メル
カプトピリジン０．４２ｇより１１−（４−ピリジルチ
オ）−ウンデカン酸０．９０ｇを得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
１−１．５１（ｍ，１４Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₇ ）、１．６３（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．１７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．０５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
３Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．３
Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−３，５）、８．３６（ｄ，２Ｈ，
Ｊ＝６．３Ｈｚ，ピリジル−Ｈ−２，６）、１１．９８
（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）
＝２３０、３００

【００２７】例７９−（２−ピリミジルチオ）−ノナン酸（７）の製造例１と同様に、９−臭化ノナン酸１ｇと２−メルカプト
ピリミジン０．４７ｇより９−（２−ピリミジルチオ）
−ノナン酸０．８０ｇを得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
１−１．５２（ｍ，１０Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₅ ）、１．６３（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．１７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．１０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
３Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．１８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．０
Ｈｚ，ピリミジル−Ｈ−５）、８．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ
＝５．０Ｈｚ，ピリミジル−Ｈ−４，６）、１１．９６
（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）
＝２５０

【００２８】例８１０−（２−ピリミジルチオ）−デカン酸（８）の製造例１と同様に、１０−臭化デカン酸１ｇと４−メルカプ
トピリミジン０．４５ｇより１０−（２−ピリミジルチ
オ）−デカン酸０．８１ｇを得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
０−１．５０（ｍ，１２Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₆ ）、１．６２（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．１５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．０６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
３Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．１６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．０
Ｈｚ，ピリミジル−Ｈ−５）、８．５９（ｄ，２Ｈ，Ｊ
＝５．０Ｈｚ，ピリミジル−Ｈ−４，６）、１１．９６
（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）
＝２５０

【００２９】例９１１−（２−ピリミジルチオ）−ウンデカン酸（９）の
製造例１と同様に、１１−臭化ウンデカン酸１ｇと４−メル
カプトピリミジン０．４２ｇより１１−（２−ピリミジ
ルチオ）−ウンデカン酸０．８４ｇを得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）：δ＝１．２
４−１．５３（ｍ，１４Ｈ，ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＨ₂ ）
₇ ）、１．６３（ｑｕｉｎｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，
ＳＣＨ₂ ＣＨ₂ ）、２．１８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ，ＣＨ₂ ＣＯＯＨ）、３．１２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．
３Ｈｚ，ＳＣＨ₂ ）、７．２１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．０
Ｈｚ，ピリミジル−Ｈ−５）、８．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ
＝５．０Ｈｚ，ピリミジル−Ｈ−４，６）、１１．９７
（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ）ＵＶ：λｍａｘ（ｎｍ）
＝２５０

【００３０】例１０１０−（４−ピリジルチオ）−デカノイル−ＣｏＡ（１
０）の調製と化学的分析Ｈｅｕｃｋｅｒｏｔｈらの方法
（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８
５，８７９５（１９８８））に従い、化合物５とＬｉＣ
ｏＡを、アシル−ＣｏＡ合成酵素の存在下３０℃１時間
３０分反応させた。反応液を逆相Ｃ１８ＨＰＬＣカラ
ムに注入し、６〜４０％のアセトニトリル／０．１％ト
リフルオロ酢酸水溶液の直線グラジエントの条件で溶出
させた。生成物の評価は、当該脂肪酸類縁体の吸収極
大波長３００ｎｍで測定した。未反応の化合物５のピ
−クに対する、化合物１０のピ−ク比は９９以上であっ
た。

【００３１】例１１Ｎα−１０−（４−ピリジルチオ）−デカノイルグリシ
ル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル
−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アルギニル−Ｌ−
アルギニン（１１）の製造化合物５、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドとＮ，Ｎ’−
ジシクロヘキシルカルボジイミドをアセトニトリル中室
温、一夜、反応させた。得られた活性エステルのアセ
トニトリル溶液とペプチド固相合成により別途合成した
グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−ア
ラニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アルギニル
−Ｌ−アルギニンの水溶液をトリエチルアミンの存在下
反応させた。反応混合物を逆相Ｃ１８ＨＰＬＣカラム
に注入し、６〜４０％のアセトニトリル／０．１％トリ
フルオロ酢酸水溶液の直線グラジエントの条件で溶出さ
せた。各分画を逆相Ｃ１８ＨＰＬＣおよびＰＩＣＯ−
ＴＡＧ法によるアミノ酸組成分析により精査し、Ｎα−
１０−（４−ピリジルチオ）−デカノイルグリシル−Ｌ
−アスパラギニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−
アラニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アルギニル−Ｌ−アルギ
ニン（１１）を得た。アミノ酸組成分析値（６Ｍ塩酸、
１１０℃、２４時間）Ｇｌｙ（１．１２）、Ａｓｐ（０．９０）、Ａｌａ
（３．７８），Ａｒｇ（２．１９）

【００３２】試験例１Ｎ−ミリストイル転移酵素（ＮＭＴ）活性測定Ｈｅｕｃｋｅｒｏｔｈらの方法（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８５，８７９５（１９８
８））に従い、例１０と同様に調整した本発明化合物の
ＣｏＡエステル、基質としてグリシル−Ｌ−アスパラギ
ニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｌ
−アラニル−Ｌ−アルギニル−Ｌ−アルギニン、酵素と
して、ＨＴＬＶ−Ｉ持続感染細胞ＭＴ−２を遠心分画法
に従い細胞分画し、調整した１００，０００×ｇＰｐｔ
画分をもちいて、ＮＭＴの酵素活性を測定した。反応
液を逆相Ｃ１８ＨＰＬＣカラムに注入し、６〜４０％の
アセトニトリル／０．１％トリフルオロ酢酸水溶液の直
線グラジエントの条件で溶出させた。生成物の評価
は、例１１で化学合成した化合物１１を指標に、当該脂
肪酸類縁体の吸収極大波長３００ｎｍで測定した。未反
応の１０−（４−ピリジルチオ）−デカノイル−ＣｏＡ
（１０）のピ−クに対する、化合物１１のピ−ク比は９
９以上であった。

【００３３】試験例２初感染細胞を用いる抗ＨＩＶ活性の測定庄司らの方法（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅ
ｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９４，６１０（１９９３））に
従い、対数増殖期にあるヒトＴ−細胞（ＣＥＭ、２×１
０5 ｃｅｌｌｓ／ｍｌ、１０ｍｌ）を本発明化合物の最
終濃度が１００μＭになるように９ｍｌの１０％ＦＣＳ
ＲＰＭＩ−１６４０を加え、ＨＩＶ−Ｉウイルス
（０．００２ＭＯＩ（感染性ウイルス粒子数／培養物中
の細胞数））を感染させた。３７℃、１時間感染後、
１０ｍｌの１０％ＦＣＳＲＰＭＩ−１６４０で２回洗
浄し、１００μＭ本発明化合物を含む１０％ＦＣＳＲ
ＰＭＩ−１６４０、１０ｍｌを加えた。２４時間ごと
にトリパンブルー染色法により細胞数を計測し、化合物
の毒性を判定した。２６０×ｇ、５分遠心した後、培
養上清を０．４５μｍフィルタ−で濾過し、５０％ウイ
ルス感染価（ＴＣＩＤ50）を求めた。遠心により回収
した細胞は、１００μＭ本発明化合物を含む１０％ＦＣ
ＳＲＰＭＩ−１６４０１０ｍｌで再懸濁し培養を継
続した。

【００３４】トリパンブル−染色法による検定では、上
記化合物濃度での細胞毒性は見られなかった。

【００３５】薬物なしでのウイルス感染価を基に４８時
間後のウイルス産生阻害率を求めた結果を表１に示し
た。表１初感染細胞を用いた脂肪酸類縁体の抗ウイルス活性 ─────────────────────────── 化合物Ｎｏウイルス産生阻害率（％） ─────────────────────────── ４９０．０５９８．７ ─────────────────────────── 表１から明らかなように、本発明の脂肪酸類縁体は初感
染系においてウイルスの産生を押さえていることがわか
る。

【００３６】試験例３ＨＩＶ−Ｉ持続産生細胞（ＣＥＭ／ＬＡＶ−Ｉ）に対す
る抗ＨＩＶ活性の測定庄司らの方法（Ｂｉｏｃｈｅｍ．
Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９４，６
１０（１９９３））に従い、対数増殖期にあるＨＩＶ−
Ｉ持続産生株（ＣＥＭ／ＬＡＶ−Ｉ、５×１０5 ｃｅｌ
ｌｓ／ｍｌ、１０ｍｌ）を０．００１％Ｐ．Ｏ．Ｅ．
（６０）硬化ヒマシ油を含むＦＣＳ−ｆｒｅｅＲＰＭ
Ｉ−１６４０で２回洗浄し、細胞表面に付着しているウ
イルス粒子を除去後、１．２５×１０6 ｃｅｌｌｓを、
１ｍＭ本発明化合物を含むＦＣＳ−ｆｒｅｅＲＰＭＩ
−１６４０１ｍｌで再懸濁し、３７℃、３０分処理し
た。化合物の最終濃度が１００μＭになるように９ｍ
ｌのＲＰＭＩ−１６４０を加えた。試験例２と同様に
２４時間ごとに、トリパンブル−染色法により、化合物
の細胞毒性を、ウイルス感染価の検定より、抗ＨＩＶ活
性を求めた。

【００３７】トリパンブル−染色法による検定では、上
記化合物濃度での細胞毒性は、見られなかった。

【００３８】薬物なしでのウイルス感染価を基にウイル
ス産生阻害率を求めた結果を表２に示した。表２ＨＩＶ−Ｉ持続産生細胞を用いた脂肪酸類縁体の抗ウイルス活性 ────────────────────────────── 化合物Ｎｏウイルス産生阻害率（％） ────────────────────────────── ５７０ ────────────────────────────── 表２から明らかなように、本発明の脂肪酸類縁体は感染
細胞ウイルスの増殖を押さえていることがわかる。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｄ 239/34 239/38 249/12 ５１２ 257/04 ＧＨ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）Ｚ−Ｙ−（ＣＨ₂）ｘＣＯＯＲ（式中、Ｚはピリジル基、ピリミジル基、トリアゾリル
基またはテトラゾリル基を、Ｙは酸素原子または硫黄原
子を、Ｒは水素または炭素数１〜８のアルキル基および
ｘは７〜１１を示す。）で示される脂肪酸類縁体、およ
び医薬として使用可能な塩化合物。
【請求項２】式（Ｉ）で示される脂肪酸類縁体を基質
とするＮ−ミリストイル転移酵素活性測定方法。
【請求項３】式（Ｉ）で示される抗ウイルス活性を有
する化合物。
【請求項４】式（Ｉ）で示される抗レトロウイルス活
性を有する化合物。
【請求項５】式（Ｉ）で示される抗免疫不全症候群
（エイズ）ウィルス（ＨＩＶ）活性を有する化合物。