JPH06511381A - Dust-free enzyme manufacturing method - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。 (57) [Summary] This bulletin contains application data before electronic filing, so abstract data is not recorded.

Description

【発明の詳細な説明】 無粉塵酵素の製造方法 発明の分野 本発明は、酵素を含む発酵ブロスから乾燥した無粉塵酵素顆粒を製造する新規な 方法に関する。[Detailed description of the invention] Dust-free enzyme manufacturing method field of invention The present invention is a novel method for producing dry, dust-free enzyme granules from enzyme-containing fermentation broths. Regarding the method.

発明の背景 多くの商業的に有用な酵素は微生物、特に細菌類、酵母、および繊維状菌類によ り生産される。例えば、プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、およびセルラー ゼのような洗剤用途に有用な酵素は、多種多様な微生物宿主中で生産されている 。酵素が微生物宿主中で生産される場合、酵素は、微生物により発酵ブロス中に 直接分泌されるか、あるいは細胞を分解することにより発酵ブロス中に放出させ る。次いで酵素は、濾過、遠心分離、メンプラン濾過、クロマトグラフィー、等 の多くの技術により可溶な形態でブロスから回収される。乾燥酵素製造に関連す る問題点は、粉塵量が大きいことであり、これが製造者、消費者、または酵素を 取り扱う他のすべての人々に皮膚科学的な苦痛を引き起こすことがある。これら の乾燥酵素を処理する分野では、粉塵発生を下げることが望まれている。粉塵発 生を抑え、粒子径を増加するために、乾燥酵素は、当業者には公知の様々な手段 により造粒されることが多い。粉塵の問題を軽減させる努力の中で、様々な酵素 配合およびそれらの製造方法が開発されている。例えば、秒間特許第２１３７０ ４２号は、押出し可能な酵素含有配合物をダイスを通し、球形化装置の回転板上 に押し出し、酵素含有配合物の球形粒子を形成し、これらの粒子を所望により粉 塵防止用の材料で被覆する方法を開示している。Background of the invention Many commercially useful enzymes are derived from microorganisms, especially bacteria, yeasts, and filamentous fungi. produced. For example, proteases, amylases, lipases, and cellular Enzymes useful for detergent applications, such as enzymes, are produced in a wide variety of microbial hosts. . If the enzyme is produced in a microbial host, the enzyme is added to the fermentation broth by the microorganism. It can be secreted directly or released into the fermentation broth by breaking down the cells. Ru. The enzyme is then processed by filtration, centrifugation, membrane filtration, chromatography, etc. It is recovered from the broth in soluble form by a number of techniques. Related to dry enzyme production The problem with this is the large amount of dust, which can be used by manufacturers, consumers or enzymes. May cause dermatological distress to all others who handle it. these In the field of processing dried enzymes, it is desirable to reduce dust generation. Dust emission In order to reduce the oxidation and increase the particle size, dried enzymes can be dried by various means known to those skilled in the art. It is often granulated by In an effort to reduce dust problems, various enzymes Formulations and methods of their manufacture have been developed. For example, Second Patent No. 21370 No. 42 passes the extrudable enzyme-containing formulation through a die and onto the rotating plate of a spheronizer. to form spherical particles of the enzyme-containing formulation and optionally powder these particles. Discloses a method of coating with anti-dust material.

米国特許第４，０８７，３６８号には、酵素をアルキル硫酸マグネシウムおよび エチレンオキシドとの混合物で棒または球にする酵素顆粒配合物が記載されてい る。U.S. Pat. No. 4,087,368 discloses that enzymes are combined with magnesium alkyl sulfate and Enzyme granule formulations made into rods or balls in a mixture with ethylene oxide have been described. Ru.

米国特許第４，０１６，０４０は、粉末化した酵素の濃縮物を溶融した形の結合 剤と混合し、その混合物の小滴をスプレーノズルを通して低温空気中に噴霧し、 小滴を固化させ、ビーズを形成することにより製造される、自由流動性で、実質 的に無粉塵性の、球状酵素含有ビーズの製造方法を開示している。U.S. Pat. No. 4,016,040 discloses the combination of powdered enzyme concentrates in molten form. spraying droplets of the mixture into the cold air through a spray nozzle; A free-flowing, substantially Discloses a method for producing spherical enzyme-containing beads that is virtually dust-free.

米国特許第４，２４２，２１９号では、乾燥酵素を親水性有機凝集材料、ビルデ ィング剤、または混合物調整剤と混合し、それを所望の大きさおよび形状の粒子 に機械的に分割し、次いで撥水性材料で被覆することにより製造した酵素含有の 製造方法を特許請求している。U.S. Pat. No. 4,242,219 describes dry enzymes as a hydrophilic organic flocculent material, bilde mixing agent or mixture conditioner to form particles of the desired size and shape. The enzyme-containing The manufacturing method is claimed as a patent.

別の種類の顆粒状酵素配合物が米国特許第４，００９゜０７６号に記載されてい る。この配合物は、乾燥酵素を固体の非刺激性物質および所望により結合剤とし て凝集性の有機物質と混合し、酵素的に活性なコアを形成することすることによ り製造される。この凝集性有機物質を含む酵素スラリーを例えばトリポリリン酸 ナトリウム上にスプレーし、その上にスプレーされた凝集性有機物質を続いてダ イスを通して押出すことができる。酵素含有顆粒には、可塑化した有機樹脂を含 む水溶液を噴霧し、次いで乾燥させる。Another type of granular enzyme formulation is described in U.S. Pat. No. 4,009°076. Ru. This formulation uses dry enzyme as a solid non-irritating substance and optionally as a binder. by mixing with cohesive organic material to form an enzymatically active core. manufactured by The enzyme slurry containing this flocculating organic substance is mixed with tripolyphosphate, for example. Spray onto the sodium and subsequently dab the flocculating organic material sprayed onto it. Can be pushed through chairs. The enzyme-containing granules contain plasticized organic resin. spray the aqueous solution and then dry.

ＧＤＲ特許第０１５１５９８号には、トリポリリン酸ナトリウムに水性発酵ブロ スをスプレーし、サイクロン装置中で凝集させる方法が開示されている。その凝 集物はまだ湿っている間にサイクロンから取り出し、乾燥性洗剤配合物と共に機 械的混合機中に入れ、強力に混合する。GDR Patent No. 0151598 describes the use of sodium tripolyphosphate in an aqueous fermentation broth. A method of spraying and agglomerating in a cyclone apparatus is disclosed. That stiffness The collection is removed from the cyclone while still wet and machined with the drying detergent formulation. Place in a mechanical mixer and mix vigorously.

英国特許第１，４８３．５９１号には、流動床反応器を使用する、酵素粒子を始 めとする水溶性または水分散性粒子の被覆方法が開示されている。この文献は、 プリリングまたは球形化のような他の方法により造粒された酵素粒子のための無 粉塵被覆技術に関する。British Patent No. 1,483.591 describes the use of a fluidized bed reactor to initiate A method of coating water-soluble or water-dispersible particles is disclosed. This document is Free for enzyme particles granulated by other methods such as prilling or spheronization. Regarding dust coating technology.

米国特許第４，６８９．２９７号には、乾燥酵素を溶液に溶解または分散させて 総固形分が１５〜３０％で、その固形分の少なくとも３０％Ｗ／Ｗが酵素である スラリーを形成し、それを水和可能なコア上に噴霧し、次いでそれを高分子材料 で被覆し、コアの乾燥重量を２５〜５５％増加させる、無粉塵酵素の製造方法が 記載されている。U.S. Pat. No. 4,689.297 teaches that dry enzymes are dissolved or dispersed in a solution. The total solid content is 15-30%, and at least 30% W/W of the solid content is enzyme. Form a slurry and spray it onto the hydratable core, then apply it to the polymeric material A method for producing dust-free enzymes is disclosed in which the dry weight of the core is increased by 25-55%. Are listed.

酵素技術の進歩および選択により、一定重量ベースで活性が非常に高い酵素が開 発され、それによって有効な顆粒製品の製造に必要な酵素ブロス固体の総添加百 分率が著しく低下した。その上、コアおよび被覆材料の適切な選択により、十分 な被覆および粉塵抑制に必要な被覆剤の量が著しく低下する。Advances in enzyme technology and selection have led to the development of highly active enzymes on a constant weight basis. The total addition of enzyme broth solids produced and thereby required for the production of an effective granulated product The fraction decreased significantly. Moreover, with proper selection of core and cladding materials, The amount of coating material required for effective coating and dust control is significantly reduced.

総重量に対して比較的低い百分率の酵素、特に比活性度の高い酵素で、乾燥した 無粉塵製品を製造できることが望ましい。A relatively low percentage of the total weight of enzymes, especially enzymes with high specific activity, and dry It is desirable to be able to produce dust-free products.

これらのより活性な酵素で、スプレーコーターに固体濃度の非常に高い酵素溶液 を供給することが望ましい場合がある。これには次のような理由がある。（１） 比活性度の高いプロテアーゼは自己分解を受け易いことが多（、高い工程収率を 達成するには、大量の固体安定剤化合物の添加が必要になることがあり、（２） 一般的に、限外濾過のような方法により、スプレーコーティングの前に酵素溶液 からできるだけ多くの水を除去し、それによってスプレーコーター中のバッチサ イクルを短縮するのが最も経済的であり、（３）製品の粉塵発生を低減させる、 または顆粒の過剰な凝集を防止し易くするために、結合剤または粉体のような処 理助剤を酵素濃縮物に加えるのが望ましい場合があしてポンプ輸送するのに粘度 が高すぎない限り、乾燥重量ベースで約３１％〜５５％の固体を含む発酵ブロス を得るのが望ましいといえる。With these more active enzymes, the spray coater is equipped with an enzyme solution with a very high solids concentration. It may be desirable to provide The reasons for this are as follows. (1) Proteases with high specific activity are often susceptible to autolysis (which can lead to high process yields). The addition of large amounts of solid stabilizer compounds may be necessary to achieve (2) Typically, the enzyme solution is removed prior to spray coating by methods such as ultrafiltration. remove as much water as possible from the batch sample in the spray coater. It is most economical to shorten the cycle, and (3) reduce product dust generation. or a treatment such as a binder or powder to help prevent excessive agglomeration of the granules. It may be desirable to add a detergent to the enzyme concentrate to reduce the viscosity for pumping. Fermentation broth containing about 31% to 55% solids on a dry weight basis, unless the It is desirable to obtain the following.

本発明は、これらの、および他の望ましい目的を、コスト的に有利で、効率的で 、安全な方法で達成する。The present invention accomplishes these and other desirable objectives in a cost-effective, efficient manner. , achieved in a safe manner.

発明の概要 驚くべきことに、下記の方法により発酵ブロスから無粉塵酵素粒子を製造できる ことが分かった。Summary of the invention Surprisingly, dust-free enzyme particles can be produced from fermentation broth by the method described below. That's what I found out.

ａ）粒子状の水和性コア材料を流動床スプレーコーター中に入れ、コア粒子を反 応室中で浮遊状態に維持し、所望により、流動床スプレーコーター中でコア粒子 を製造、構築、あるいは変性し、コア粒子を反応室中で浮遊状態に維持し、ｂ） 総固体成分の約５％〜約１００％ｗ／ｗの、発酵ブロス中で生産された水溶性ま たは分散性の酵素、およびブロスの粘度が室温で１０〜５．０００ｃｐｓになる ように、発酵ブロスの４〜３１％ｗ／ｗの総固体成分を含む発酵ブロスを用意し Ｃ）ブロスをコア上に噴霧し、コアに加えられた発酵ブロス固体成分により、総 乾燥重量増加がコアの初期重量に対して１％〜１９％ｗ／ｗになるように、液体 を蒸発させてコア上に被覆された固体を残し、さらに所望によりｄ）工程Ｃ）の 製品上に被覆剤を噴霧し、発酵ブロス固体成分ならびにコアに加えられた被覆剤 からなる総固体成分により、総乾燥重量増加がコアの初期重量に対して１％〜２ ４％ｗ／ｗになるように、液体を蒸発させてＣ）の固体成分上に被覆剤を残す。a) Place the particulate hydratable core material in a fluidized bed spray coater, The core particles are maintained in suspension in a reaction chamber and optionally in a fluidized bed spray coater. manufacturing, constructing or modifying the core particles and maintaining the core particles in suspension in the reaction chamber; b) About 5% to about 100% w/w of the total solids content is water-soluble or or dispersible enzymes, and the viscosity of the broth is between 10 and 5,000 cps at room temperature. Prepare a fermentation broth with a total solids content of 4-31% w/w of the fermentation broth, as follows: C) The broth is sprayed onto the cores and the fermentation broth solid components added to the cores cause total Add liquid so that the dry weight gain is 1% to 19% w/w relative to the initial weight of the core. is evaporated to leave a coated solid on the core, and optionally d) step C). Spray the coating onto the product and add the coating to the fermentation broth solid components as well as the core The total solids content of Evaporate the liquid to leave a coating on the solid component of C) to 4% w/w.

また、発酵ブロスが３１％〜５５％ｖ／ｗの総固体成分を含む、類似の方法も開 示する。この方法では、コア粒子の総乾燥重量増加は１％〜１００％ｗ／ｗであ る。これらの方法により製造される酵素含有粒子も本発明に含まれる。Similar methods have also been developed in which the fermentation broth contains a total solids content of 31% to 55% v/w. Show. In this method, the total dry weight gain of the core particles is between 1% and 100% w/w. Ru. Enzyme-containing particles produced by these methods are also included in the present invention.

発明の詳細な説明 本発明の方法は、流動床スプレーコーター中で行われる。Detailed description of the invention The process of the invention is carried out in a fluidized bed spray coater.

一般的に、そのような装置は、底部に多孔質の格子を有する円錐形の生成物室（ ｐｒｏｄｕｃｔ　ｃｈａｍｂｅｒ）からなる流動床乾燥機を含み、その生成物室 は、生成物室よりも大きな直径を有する円筒形または円錐形の膨張室に接続する ように上部が開いており、粉塵を集め、空気を流動させるフィルターが膨張室の 遠い末端に配置され、溶液をコアに塗布するための１個以上のスプレーノズルが 室内に配置されている。Generally, such devices consist of a conical product chamber with a porous lattice at the bottom ( a fluidized bed dryer consisting of a product chamber; connects to a cylindrical or conical expansion chamber with a larger diameter than the product chamber The top is open, and a filter that collects dust and circulates air is located in the expansion chamber. one or more spray nozzles located at the distal end for applying the solution to the core; It is placed indoors.

運転中、室を通過する空気の速度が増加すると、多孔質格子上に置かれた粒子が 空気流中に流体として浮遊する点に達するので、「流動化」または「流動床乾燥 機」と呼ばれる。生成物室から膨張質に入る空気の上方向の力により粒子が持ち 上げられ、膨張質で空気は膨張し、単位面積あたりの上方向の力が低下する。こ れによって、粒子は生成物室中に戻り、そのサイクルを繰り返す。During operation, as the velocity of air passing through the chamber increases, particles placed on the porous grid "Fluidization" or "Fluidized Bed Drying" occurs as it reaches a point where it suspends as a fluid in the air stream. It is called "machine". The upward force of the air entering the expansive material from the product chamber causes the particles to hold together. When the air is raised, the air expands and the upward force per unit area decreases. child This causes the particles to return to the product chamber and repeat the cycle.

本方法の最初の工程では、粒子上の、水和性コア材料を流動床乾燥機の反応室に 入れ、粒子を空気流中に浮遊させる。コア粒子は水和性の高い材料、すなわち水 中に容易に分散または溶解する材料からなるのが好ましい。コア材料は、分散す る（一体性を失って崩壊する）か、または溶解して完全な溶液になるべきである 。クレー（ベントナイト、カオリン）、ノンパレイユ、および凝集したジャガイ モデンプンは分散性と考えられる。ノンパレイユは、回転する球状容器中で種結 晶を形成し、粉体および結晶化した溶質、一般的にデンプンおよび糖、の層を核 に結合させることにより球形に丸めた、固体核からなる球状粒子であり、好まし い。ノンパレイユ粒子は「シード」と呼ばれることが多い。In the first step of the method, the hydratable core material on the particles is placed in the reaction chamber of a fluidized bed dryer. to suspend the particles in the air stream. The core particle is a highly hydratable material, i.e. water. Preferably, it is made of a material that is easily dispersed or dissolved therein. The core material is dispersed It should either dissolve (lose its integrity and collapse) or dissolve into a complete solution. . Clay (bentonite, kaolin), nonpareil, and agglomerated potatoes Modern starches are considered dispersible. Nonpareil is seeded in a rotating spherical container. Nucleate a layer of powder and crystallized solutes, typically starches and sugars, to form crystals A spherical particle consisting of a solid core, which is rounded into a spherical shape by bonding to stomach. Nonpareil particles are often called "seeds."

塩粒子（ＮａＣ１結晶、ＮａＣ１岩塩、Ｎ　ａ　ＨＣ０３）は可溶と考えられる 。また、凝集したクエン酸三ナトリウム、パン結晶化ＮａＣ１フレーク、ベント ナイト顆粒およびプリル、ベントナイト／カオリン／ケイソウ土のディスク−ペ レット化した顆粒、およびクエン酸ナトリウム結晶も好適である。コア材料は、 後に続くスプレー工程中に溶解しない、好ましくはその最も長い寸法が１５０〜 ２，０００ミクロン（米国標準篩シリーズで１００メツシユ〜１０メツシユ）の 粒子径を有するのが好ましい。Salt particles (NaC1 crystal, NaC1 rock salt, NaHC03) are considered to be soluble . Also, aggregated trisodium citrate, pan crystallized NaCl flakes, vent Night granules and prills, bentonite/kaolin/diatomaceous earth disc-pe Retted granules and sodium citrate crystals are also suitable. The core material is does not dissolve during the subsequent spraying process, preferably its longest dimension 2,000 microns (US standard sieve series: 100 to 10 mesh) It is preferable to have a particle size.

発酵ブロスとは、中で微生物の発酵により酵素が生産される液体を意味する。ブ ロスは、物質を除去または追加することにより、例えば細胞固体の濾過または結 合剤、塩、顔料、可塑剤、および香料を加えることにより変性することができる が、それでもなお酵素を含む。またブロスは、限外濾過、抽出、およびクロマト グラフィーのような処理により、液体物質の一部を除去または置き換えることに より濃縮することもできる。Fermentation broth means a liquid in which enzymes are produced by microbial fermentation. Bu Loss is achieved by removing or adding substances, e.g. by filtration or condensation of cellular solids. Can be modified by adding mixtures, salts, pigments, plasticizers, and fragrances However, it still contains enzymes. Broths can also be processed by ultrafiltration, extraction, and chromatography. removing or replacing a portion of the liquid substance by a process such as It can also be more concentrated.

本方法に好適な酵素は、それらが生産される発酵ブロスに可溶または分散性であ り、発酵ブロスの揮発性成分を除去してコア材料の表面上に酵素の残留層を残す ことができる酵素である。好適な酵素には、例えばプロテアーゼ（細菌性、菌類 性、酸性、中性、またはアルカリ性）、アミラーゼ（アルファおよびベータ）、 リパーゼ、およびセルラーゼがある。酵素はブロス中に総固体成分の約５％〜約 １００％ｗ／ｖの量で存在し、発酵ブロス固体成分は、発酵ブロス中の総固体成 分の約０．５％〜９５．５％ｖ／ｗであり、残りの固体成分は、総固体成分が発 酵ブロスの４％〜３１％ｖ／ｗになるように、添加された金属塩、糖、顔料、結 合剤、安定剤、可塑剤、および香料を含む。所望により使用する金属塩、糖、顔 料、結合剤、安定剤、可塑剤、および香料を含むブロスは、ポンプ輸送し、噴霧 して効果的にスプレーコーティングするために粘度が十分に低くなければならな い（一般的に室温で１０〜５．　０００　ｃｐｓ）。Enzymes suitable for this method are soluble or dispersible in the fermentation broth in which they are produced. removes the volatile components of the fermentation broth and leaves a residual layer of enzymes on the surface of the core material. It is an enzyme that can Suitable enzymes include, for example, proteases (bacterial, fungal acidic, neutral, or alkaline), amylase (alpha and beta), There are lipases and cellulases. Enzymes account for about 5% of the total solids in the broth to about Present in an amount of 100% w/v, the fermentation broth solids component accounts for the total solids component in the fermentation broth. The remaining solids are approximately 0.5% to 95.5% v/w of the total solids emitted. Added metal salts, sugars, pigments, and crystals to 4% to 31% v/w of fermentation broth. Contains combination agents, stabilizers, plasticizers, and fragrances. Metal salts, sugars, and salts used as desired Broths containing additives, binders, stabilizers, plasticizers, and fragrances are pumped and atomized. The viscosity must be low enough for effective spray coating. (typically 10-5.000 cps at room temperature).

空気流中でコア粒子を流動化させ、次いで酵素および他の固体成分を含むブロス をスプレーコーターの膨張質の中に噴霧およびスプレーすることにより、ブロス 固体成分および酵素をコア材料の表面に塗布する。噴霧された小滴はコアの表面 に接触し、水および他の揮発性成分を蒸発させた後、粒子の表面に付着した固体 成分のフィルムが残る。Fluidize the core particles in a stream of air, then add to the broth containing enzymes and other solid ingredients Broth by atomizing and spraying into the expanded substance of the spray coater Solid components and enzymes are applied to the surface of the core material. The sprayed droplets are on the surface of the core. solids that adhere to the surface of particles after contact with and evaporate water and other volatile components A film of ingredients remains.

空気流は上方向に維持され、膨張室の上部からフィルターを通して排出される。The airflow is maintained upward and exits through the filter from the top of the expansion chamber.

フィルターは装置の内側または外側に配置することができ、あるいはスフラッパ ーまたはすイクロンで置き換えることができる。このフィルターは粉塵となる細 かい乾燥粒子を捕獲する。このフィルターを有する流動床スプレーコーターは一 般的に、フィルターを振動させて空気流の過剰抑制を防止する自動シェーカーを 有する。好ましい実施態様では、シェーカー装置は運転の最後の５分間はスイッ チを切り、フィルター内に捕獲された微粒子の放出による製品の粉塵含有量を下 げる。もう一つの好ましい実施態様では、フィルターを装置の外側に配置するか 、あるいはスフラッパーまたはサイクロンで置き換える。Filters can be placed inside or outside the device, or with a flapper - or Suicron. This filter Capture dry particles. A fluidized bed spray coater with this filter is Typically, an automatic shaker is used that vibrates the filter to prevent over-suppression of airflow. have In a preferred embodiment, the shaker device is switched off for the last 5 minutes of operation. reduce the dust content of the product due to the release of particulates trapped within the filter. Geru. In another preferred embodiment, the filter is placed outside the device or , or replace with a flapper or cyclone.

発酵ブロス酵素を回収する場合、ブロスを様々な方法で処理し、所望の結果を達 成することができる。例えば、ブロスは濾過により細胞および細胞の残骸を除去 し、あるいは微生物を除去し、無菌の生成物を得ることができる。ブロスは濃縮 により、ブロスの約４％〜約３１％Ｗ／Ｗの望ましい総固体成分を達成すること もできる。さらに、上に述べたように、塩、安定剤、等も所望により加えること ができ、酵素を所望により濃縮または精製することができる。When recovering fermentation broth enzymes, the broth can be processed in various ways to achieve the desired result. can be achieved. For example, the broth is filtered to remove cells and cell debris. Alternatively, microorganisms can be removed to obtain a sterile product. Broth is concentrated to achieve a desired total solids content of the broth of about 4% to about 31% W/W. You can also do it. Furthermore, as mentioned above, salts, stabilizers, etc. may be added as desired. The enzyme can be concentrated or purified as desired.

本発明のさらに別の実施態様では、コアに塗布されたブロス中の固体成分による 、コアの初期乾燥重量に対する重量増加は約１％〜約１９％ｗ／ｗである。In yet another embodiment of the invention, by solid components in the broth applied to the core. , the weight increase relative to the initial dry weight of the core is about 1% to about 19% w/w.

もう一つの好ましい実施態様では、望ましい総置体成分濃度は、ブロスの約３１ ％〜約５５％Ｗ／Ｗである。この実施態様では、コアに塗布されたブロス中の固 体成分による、コアの初期乾燥重量に対する重量増加は約１％〜約１００％Ｗ／ Ｗである。In another preferred embodiment, the desired total body component concentration is about 31% of the broth. % to about 55% W/W. In this embodiment, the solids in the broth applied to the core Depending on the body composition, the weight increase relative to the initial dry weight of the core is about 1% to about 100% W/ It is W.

酵素を発酵ブロス中で液体の形態で取り扱うことには、粉塵発生による皮膚接触 の可能性が低下し、無粉塵製品が製造され、乾燥工程が単一の十分に制御された 反応器に限られるので、別の乾燥工程による損失が最小限に抑えられるという利 点がある。Handling enzymes in liquid form in fermentation broth has the potential for skin contact due to dust generation. The possibility of drying is reduced, a dust-free product is produced, and the drying process is Since it is limited to the reactor, it has the advantage that losses due to separate drying steps are minimized. There is a point.

所望の酵素活性を与えるために十分な酵素をコア粒子に塗布したら、酵素被覆し た粒子は、コーターの反応室中にまだ浮遊している間に、またはその中に再導入 した時に、水溶性または水分散性の被覆剤の層で被覆する。これは、酵素／固体 成分の塗布に使用したのと同様の方法で達成される。好適な被覆剤には、例えば 脂肪酸エステル、アラビアゴムおよび他の天然ガム、アルコキシル化アルコール 、ポリビニルアルコール、エトキシル化アルキルフェノール、より詳しくはポリ エチレングリコール（ＰＥＧ）（分子量（ＭＷ）３００〜２０．０００）　、直 鎖アルコールのアルコキシル化物（ＭＷｌ、４５０〜２．６７０）、ポリ酢酸フ タル酸ビニル（ＰＶＡＰ）　、重合体エトキシル化ノニルフェニル（ＭＷＩ、９ ７５〜４．３１５）、エトキシル化ジノニルフェニル（平均ＭＷ６．９００）、 ヒドロキシプロピルメチルセルロース、および他の変性セルロースがある。他の 被覆剤には、糖、デンプン、塩、二酸化チタン、および他のシーラント、安定剤 、リリース剤、結合剤または顔料がある。本方法により、所望の無粉塵酵素含有 粒子を与えるための、表面に被覆剤の層を有する酵素被覆コア粒子が得られる。Once enough enzyme has been applied to the core particles to provide the desired enzyme activity, enzyme coating is performed. The particles are reintroduced while still suspended in or into the reaction chamber of the coater. When done, it is coated with a layer of water-soluble or water-dispersible coating material. This is an enzyme/solid This is achieved using a method similar to that used for the application of the ingredients. Suitable coatings include, for example: Fatty acid esters, gum arabic and other natural gums, alkoxylated alcohols , polyvinyl alcohol, ethoxylated alkylphenols, more specifically polyvinyl alcohol, Ethylene glycol (PEG) (molecular weight (MW) 300-20.000), direct Alkoxylated chain alcohol (MWl, 450-2.670), polyacetic acid fluoride Vinyl tarnate (PVAP), polymeric ethoxylated nonylphenyl (MWI, 9 75-4.315), ethoxylated dinonylphenyl (average MW 6.900), Hydroxypropyl methylcellulose, and other modified celluloses. other Coatings include sugars, starches, salts, titanium dioxide, and other sealants and stabilizers. , release agents, binders or pigments. By this method, the desired dust-free enzyme-containing Enzyme-coated core particles are obtained with a layer of coating agent on the surface to give particles.

約４％〜約３１％ｖ／ｗの総固体成分を含む発酵ブロスを使用する場合、初期コ アに対する固体の層重量増加は、コーティングを使用する場合、好ましくは約１ ％〜約２４％ｗ／ｗであり、コーティングを使用しない場合、好ましくは約１％ 〜約１９％ｗ／ｗである。約３１％〜約５５％ｗ／ｗの総固体成分を含む発酵ブ ロスを使用する場合、初期コアに対する固体の層重量増加は、コーティングを使 用してもしなくても、約１％〜約１００％Ｗ／Ｗである。When using a fermentation broth with a total solids content of about 4% to about 31% v/w, the initial The layer weight increase of solids relative to A is preferably about 1 when using a coating. % to about 24% w/w, preferably about 1% if no coating is used. ~19% w/w. A fermentation broth containing about 31% to about 55% w/w total solids content. When using loss, the layer weight increase of solids relative to the initial core is Whether or not it is used, it is about 1% to about 100% W/W.

本発明の無粉塵酵素粒子は、乾燥系で酵素が必要とされるところならどこでも使 用できる。これらの酵素粒子は乾式洗剤配合物に対する添加剤として、写真フィ ルム上のゼラチンコーティングを除去し、銀の回収を容易にするため、タンパク 質に結合した汚れを除去するための義歯洗浄剤に、食品製造に、および廃水処理 における処理助剤として使用することができる。The dust-free enzyme particles of the present invention can be used wherever enzymes are needed in dry systems. Can be used. These enzyme particles can be used as additives to dry detergent formulations in photographic films. protein to remove the gelatin coating on the column and facilitate silver recovery. in denture cleaners to remove stains bound to teeth, in food production, and in wastewater treatment. It can be used as a processing aid in

下記の実施例は本発明を例示するためであって、制限するものではない。当業者 は、ここに開示する成分の比率ニ基づいて、他の酵素、ブロス、コア、および被 覆剤を使用することができる。The following examples are intended to illustrate, but not limit, the invention. person skilled in the art other enzymes, broths, cores, and coatings based on the ratios of ingredients disclosed herein. A covering agent can be used.

共に、ノンパレイユ上に実験室規模でスプレーコーティングする ＷＳＧ−５流動床造粒装置に一３５／＋４０メツシュのノンパレイユコア、つま りシード３８００グラムを入れ、６０℃に加熱し、流動化した。３．８％ｗ／ｗ 酵素および１０．５％ＷＯＷ総固体成分（総固体成分の３６．２％ｗ／ｗが酵素 である）を含む水性プロテアーゼ限外濾過濃縮物２リツトルを浮遊しているコア に、入口温度９５℃および出口温度４０〜５０℃で噴霧した。スプレー速度は約 ４５ｍ１／分であり、酵素被覆は３７分間かかり、推定重量増加は２１０グラム 、つまり５．５％Ｗ／Ｗであった。この時点で、後に続く分析のために、材料２ ３０グラムを採取し、酵素被覆した活性コア３７８０グラムを残した。水６００ ｍ１中にアラビアゴム６０グラムを含む被覆剤溶液を４０ｍ１／分で塗布したが 、造粒または被覆全体は５６分間続いた。最終生成物の重量は約３８４０グラム で、酵素被覆したコアに対して１．６％増加、初期コア重量に対して７゜２％の 正味重量増加になる。Both are spray coated on non-pareils at laboratory scale. A 35/+40 mesh non-pareil core, 3,800 grams of seeds were added and heated to 60°C to fluidize. 3.8%w/w Enzymes and 10.5% WOW total solids (36.2% w/w of total solids are enzymes) core suspended in 2 liters of aqueous protease ultrafiltration concentrate containing It was sprayed at an inlet temperature of 95°C and an outlet temperature of 40-50°C. Spray speed is approx. 45 m1/min, enzyme coating takes 37 minutes, estimated weight gain is 210 grams , that is, 5.5% W/W. At this point, for subsequent analysis, the material 2 30 grams were taken, leaving 3780 grams of enzyme-coated active core. water 600 A coating solution containing 60 grams of gum arabic per ml was applied at a rate of 40 ml/min. , the entire granulation or coating lasted 56 minutes. The weight of the final product is approximately 3840 grams , an increase of 1.6% relative to the enzyme-coated core and 7°2% relative to the initial core weight. There will be a net weight increase.

実施例２−ＦＮＡプロテアーゼを、ＰＥＧ　８０００およびＴｉＯ２被覆剤と共 に、ノンパレイユ上に実験室規模でスプレーコーティングする ＷＳＧ−５流動床造粒装置に一２０／＋４０メツシュのノンパレイユコア、つま りシード５０００グラムを入れ、流動化した。３．８％ｗ／ｗ酵素および１０． ５％ｗ／ｗ総固体成分（実施例１と同じ）を含む水性プロテアーゼ濃縮物１７８ ６＋１をコアに、入口温度約７０℃および出口温度４０〜５０℃で噴霧した。プ ロテアーゼによる重量増加は１８８グラム、つまり３．８％Ｗ／Ｗであった。水 １リットル中に１５０グラムのＰＥＧ　８０００および２５０グラムのＴｉＯ２ を含む被覆剤溶液を酵素被覆したノンパレイユ上にスプレーし、乾燥させた。最 終生成物の重量は５５６０グラムで、初期コア重量に対して１１．２％の増加に なる。Example 2 - FNA protease with PEG 8000 and TiO2 coating spray coating on non-pareils on a laboratory scale. A 20/+40 mesh non-pareil core, 5000 grams of seeds were added and fluidized. 3.8% w/w enzyme and 10. Aqueous protease concentrate 178 containing 5% w/w total solids content (same as Example 1) 6+1 was sprayed onto the core at an inlet temperature of about 70<0>C and an outlet temperature of 40-50<0>C. P The weight gain due to rotease was 188 grams, or 3.8% W/W. water 150 grams of PEG 8000 and 250 grams of TiO2 in 1 liter A coating solution containing the following was sprayed onto the enzyme-coated nonpareil and allowed to dry. most The weight of the final product is 5560 grams, an increase of 11.2% over the initial core weight. Become.

実施例３−リパーゼをヒドロキシプロピルメチルセルロース（Ｏｐａｄｒｙ　Ｗ ｈｉｔｅ）被覆剤と共にノンパレイユ上にスプレーコーティングする Ｕｎｉ−Ｇｌａｔｔ実験室用流動床スプレーコーターに一２０／＋４０メツシュ のノンパレイユコア、つまりシード９６０グラムを入れ、流動化した。６．９グ ラム／リツトルのリパーゼおよび４．９％総固体成分を含む水性リパーゼ濃縮物 １７００ｍ１をノンパレイユコアに、入口温度５０〜６６℃および出口温度３８ 〜４２℃および噴霧圧２．５　ｂａｒで噴霧した。酵素は総固体成分の１４．１ ％であった。酵素被覆したコアの重量は９６２グラム、つまり５．０％Ｗ／Ｗ増 加であった。酵素被覆および反応器洗浄の後、０ｐａｄｒｙ　Ｗｈｉｔｅ　（ヒ ドロキシプロピルメチルセルロースの商品名）７０グラムおよび水４００グラム を含む被覆剤溶液を酵素被覆した活性コア上にスプレーし、被覆生成物重量１０ ３２グラム、正味増加１２．７％を得た。この生成物は、原料濃縮物中の本来の 活性リパーゼの７８％を含んでいた。Example 3 - Lipase was added to hydroxypropyl methylcellulose (Opadry W spray coating on nonpareil with coating material Uni-Glatt laboratory fluid bed spray coater with 120/+40 mesh 960 grams of non-pareil cores, or seeds, were added and fluidized. 6.9g Aqueous lipase concentrate containing rum/liter lipase and 4.9% total solids content 1700m1 in non-pareil core, inlet temperature 50-66℃ and outlet temperature 38℃ It was sprayed at ~42°C and a spray pressure of 2.5 bar. Enzymes account for 14.1 of the total solids component. %Met. The weight of the enzyme-coated core is 962 grams, or 5.0% W/W increase. It was Canada. After enzyme coating and reactor cleaning, use 0 padry White. 70 grams (trade name of droxypropyl methylcellulose) and 400 grams of water onto the enzyme-coated active cores, coating product weight 10 32 grams, net gain of 12.7%. This product is the original product in the feed concentrate. It contained 78% of active lipase.

この顆粒製品は、２６．７℃、８０％相対湿度で２週間熟成した後でも活性を失 わなかった。This granulated product loses its activity even after aging for 2 weeks at 26.7°C and 80% relative humidity. I didn't.

実施例４−洗剤セルラーゼを、被覆剤なしに、ノンパレイユ上にスプレーコーテ ィングする Ｕｎｉ−Ｇｌａｔｔ実験室用流動床スプレーコーターに一２０／＋４０メツシュ のノンパレイユコア、つまりシード１０００グラムを入れ、流動化した。１７２ グラム／リツトルの酵素および２４．７％総固体成分を含む水性セルラーゼ濃縮 物８４０ｍ１を、入口温度５０〜６４℃、出口温度３８〜４６℃、噴霧速度約１ ０ｍ１／分で分霧した。酵素は総ブロス固体成分の６９．６％であった。運転後 、１１４３グラムの製品が回収され、ノンパレイユコアに対して１４．３％Ｗ／ Ｗ増加となった。活性酵素の回収は、ｂＦＰＵ装置で測定して、限外濾過濃縮物 原料の９８．８％であった。Example 4 - Spray coat detergent cellulase onto nonpareil without coating. signing Uni-Glatt laboratory fluid bed spray coater with 120/+40 mesh 1000 grams of non-pareil cores, or seeds, were added and fluidized. 172 Aqueous cellulase concentrate containing grams/liter of enzyme and 24.7% total solids content 840ml of material, inlet temperature 50-64℃, outlet temperature 38-46℃, spray rate about 1 Atomization was carried out at a rate of 0 m1/min. Enzyme was 69.6% of the total broth solids content. After driving , 1143 grams of product was recovered, 14.3% W/ on nonpareil core. W increased. Recovery of active enzyme was measured with a bFPU instrument and the ultrafiltration concentrate It was 98.8% of the raw material.

実施例５−ＦＮＡプロテアーゼを、ＰＥＧ　８０００およびＴｉＯ２と共に、ノ ンパレイユ上に大規模スプレーコーティングする 大規模スプレーコーティング運転には、改良したＡｅｒｏｍａｔｉｃ　Ｓ−８流 動床造粒装置を使用した。このコーターに一２０／＋４０メツシュのノンパレイ ユ６８１．８ｋｇ（１５００１ｂｓ）を入れた。容器を所定の位置に引上げ、６ ５℃の入口空気で、出口温度が４５℃に達するまでコアを流動化した。１．８ｍ ｍ多ヘッド５ｃｈｌｉｃｋノズルを使用し、噴霧空気圧４　ｂａｒで、活性酵素 ５．９４％Ｗ／ＩＩおよび総固体成分２１．３％ｗ／ｗを含む水性プロテアーゼ 酵素濃縮物１００゜４ｋｇをコア上にスプレーした。出口空気温度は４０〜５０ ℃に維持した。酵素は総原料固体成分の２７．９％ｗ／ｗであった。酵素被覆、 つまり層形成は、容器中の生成物を被覆の一様性に関して検査するための１５分 間停止を除いて、約８０分間行った。塗布速度は約１．２リットル／分であった 。計算により、これはコアに対して３．１％Ｗ／Ｗの重量増加になった。容器を 一時的に取り外し、機械を清掃した。次いで、同じ乾燥機／コーター装置中で、 酵素顆粒に外側被覆を施した。被覆剤溶液として、水道水１２３．６ｋｇを５０ ℃に加熱し、その中に６７．４ｋｇのＰＥＧ　８０００および３３．７ｋｇのＴ 　ｉＯ２を溶解または浮遊させ、１５０リツトルの溶液を得た。酵素被覆した顆 粒を前と同様に流動化させ、４５℃に加熱した。噴霧空気圧は４　ｂａｒに保持 し、出口空気温度は４０〜５０℃であった。塗布速度的１．１リットル／分で、 総被覆処理時間は１３６分間であった。Example 5 - FNA protease was combined with PEG 8000 and TiO2 Large-scale spray coating on impareil For large-scale spray coating operations, the improved Aeromatic S-8 flow A moving bed granulation device was used. This coater has a non-parallel layer of 120/+40 mesh. I put in 681.8kg (15001bs) of Yu. Pull the container into place, 6 The core was fluidized with inlet air at 5°C until the outlet temperature reached 45°C. 1.8m Using a multi-head 5 click nozzle, the active enzyme was sprayed at a spray air pressure of 4 bar. Aqueous protease containing 5.94% W/II and total solids content 21.3% w/w 4 kg of 100° enzyme concentrate was sprayed onto the core. Outlet air temperature is 40-50 It was maintained at ℃. Enzyme was 27.9% w/w of the total raw solids content. enzyme coating, That is, layer formation takes 15 minutes to inspect the product in the container for uniformity of coating. The test was carried out for about 80 minutes, excluding a pause. The application speed was approximately 1.2 liters/min. . By calculation, this resulted in a weight increase of 3.1% W/W relative to the core. container I removed it temporarily and cleaned the machine. Then in the same dryer/coater equipment, The enzyme granules were provided with an outer coating. As a coating solution, 123.6 kg of tap water was added to 50 ℃ and 67.4 kg of PEG 8000 and 33.7 kg of T 150 liters of solution was obtained by dissolving or suspending iO2. Enzyme coated condyle The grains were fluidized as before and heated to 45°C. Spray air pressure maintained at 4 bar However, the outlet air temperature was 40-50°C. At a coating speed of 1.1 liters/min, Total coating time was 136 minutes.

被覆後、出口温度が４８℃に達するまで、生成物を４分間乾燥させ、次いで出口 温度が３２℃に達するまで、さらに１４分間冷却させた。容器を取り外し、生成 物を一１６／＋４０画分に篩分けした。物質収支を表１に示す。最終製品は、実 際の製品重量を使用すると、コア重量に対して１３．０％ｗ／ｗの正味増加とな る、あるいは原料重量の理論的合計を使用すると、コア重量に対して１７．９％ Ｗ／Ｗの正味増加となる。製品の粉塵は極めて少なかった。この製品顆粒は、４ ０分間の標準水ひ試験にかけたところ、総粉塵が０．３ミリグラムで、試料６０ グラムあたりのプロテアーゼ粉塵が２．４２マイクログラムであった。After coating, the product is dried for 4 minutes until the outlet temperature reaches 48 °C, then the outlet Allowed to cool for an additional 14 minutes until the temperature reached 32°C. Remove container and generate The material was sieved into 16/+40 fractions. Table 1 shows the material balance. The final product is Using the actual product weight, there is a net increase of 13.0% w/w relative to the core weight. or using the theoretical sum of raw material weights, 17.9% of the core weight. This will be a net increase in W/W. The dust of the product was extremely low. This product granule consists of 4 When subjected to a standard water soak test for 0 minutes, the total dust was 0.3 milligrams, and the sample 60 Protease dust per gram was 2.42 micrograms.

表１ 乾燥　供給　純粋　供給 重量　原料　酵素　原料 原料　（ｋｇ）　の％　（ｋｇ）　の％コア　６８１．８　８４．８　−−　− −酵素溶液　２１．４　２．７　５．９６　１００．０（５，９４％Ｗ／Ｗ酵素 ） ＰＥＧ８０００　６７．４　８．４　−−　−−Ｔ　ｓ　Ｏ２３３−７４−２− −−− 合計　８０４．３　１００．０　５．９６　１００．０最終製品 （０，６８％ｗ／ｗ酵素） 製品（＋４０メツシユ）　７６９．７　９５．７　５．２４　８７．９微粒子（ −４０メツシユ）　２．０　０．２　０．０１　０．２合計　７７１．７　９５ ．９　５．２５　８８．１実施例６−アルカリ性プロテアーゼを、ヒドロキシプ ロピルメチルセルロースおよびＴ　Ｉ　Ｏ２被覆剤と共に、ノン、＜レイユ上に 大規模スプレーコーティングするＷＳＧ３００造粒装置に一２０／＋４０メツシ ュのノンパレイユ、つまりコア７００ｋｇを入れ、コアを流動化した。Table 1 Dry supply Pure supply Weight Raw material Enzyme Raw material % of raw material (kg) % core of (kg) 681.8 84.8 --- -Enzyme solution 21.4 2.7 5.96 100.0 (5.94% W/W enzyme ) PEG8000 67.4 8.4 --- --Ts O233-74-2- --- Total 804.3 100.0 5.96 100.0 Final product (0.68% w/w enzyme) Product (+40 mesh) 769.7 95.7 5.24 87.9 fine particles ( -40 mesh) 2.0 0.2 0.01 0.2 Total 771.7 95 ．． 9 5.25 88.1 Example 6 - Alkaline protease With lopyl methyl cellulose and TI O2 coating, on non-, -20/+40 mesh for WSG300 granulation equipment for large-scale spray coating 700 kg of non-pareil, that is, core, was put in and the core was fluidized.

１０％ｗ／ｗプロテアーゼおよび２９％ＷＯＷ総固体成分を含み、酵素が総置体 成分の３４．５％ｗ／ｗである濃縮水溶液３６ｋｇを流動化したコア上に噴霧し た。装填物の総重量が７１０．４ｋｇになるまでスプレーを続けたが、これは初 期コア重量に対して１．４９％Ｗ／Ｗの重量増加であった。ヒドロキシプロピル メチルセルロース３　、　５　ｋｇＳＴ　ｉＯ２３−５ｋｇおよび水３０ｋｇか らなる被覆剤溶液を、流動化した酵素被覆コア上にスプレーした。総製品重量は ７１７．４ｋｇで、これは２．４９％ｗ／ｗの重量増加にあたる。Contains 10% w/w protease and 29% WOW total solids; 36 kg of a concentrated aqueous solution of 34.5% w/w of the ingredients was sprayed onto the fluidized core. Ta. I continued spraying until the total weight of the charge was 710.4 kg, which was the first time The weight increased by 1.49% W/W compared to the initial core weight. hydroxypropyl Methyl cellulose 3, 5 kg ST iO23-5 kg and water 30 kg A coating solution consisting of: Total product weight is 717.4 kg, which corresponds to a weight increase of 2.49% w/w.

実施例７−セルラーゼを、ＰＥＧ　２０．０００およびＴｉＯ２被覆剤と共に、 ノンパレイユ上に大規模スプレーコーティングする ＷＳＧ３００造粒装置に一２０／＋４０メツシュのノンパレイユシード７００ｋ ｇを入れ、シードを流動化した。２６％Ｗ／Ｗセルラーゼおよび３９％ｗ／ｖ総 固体成分を含み、酵素が総置体成分の６６．７％ｗ／ｗである濃縮セルラーゼ水 溶液３３４ｋｇを流動化したコア上に噴霧した。装填物の総重量が８３０．３ｋ ｇになるまでスプレーを続けたが、これは初期コア重量に対して１８．６％ｗ／ ｗの重量増加であった。１８．５ｋｇのＰＥＧ　２０．０００．１８．５ｋｇの Ｔ　ｉ　Ｏ２および１００ｋｇの水からなる被覆剤溶液を、流動化した酵素被覆 コア上にスプレーした。総製品重量は８６７．３ｋｇで、これは２３．９％Ｗ／ Ｗの重量増加にあたる。Example 7 - Cellulase with PEG 20.000 and TiO2 coating Large scale spray coating on nonpareil 700k of nonpareil seeds of 120/+40 mesh in WSG300 granulator g to fluidize the seeds. 26% w/w cellulase and 39% w/v total Concentrated cellulase water containing solid components, with enzymes accounting for 66.7% w/w of the total body components 334 kg of solution was sprayed onto the fluidized core. The total weight of the load is 830.3k. The spraying was continued until the weight reached 18.6% w/ of the initial core weight. The weight increased by 2. 18.5kg PEG 20.000.18.5kg Ti Enzyme coating made by fluidizing a coating solution consisting of O2 and 100 kg of water. Sprayed on core. The total product weight is 867.3 kg, which is 23.9%W/ This corresponds to an increase in the weight of W.

実施例８−ハイソリッドプロテアーゼを、ＰＥＧ　８０００およびＴ　１０２被 覆剤と共に、ノンパレイユ上にスプレーコーティングする Ｇｌａｔｔ　ＧＰＣＧ−５流動床造粒装置にノンパレイユシード１０゜０ｋｇを 入れる。２０％ｗ／ｗ酵素固体および３２％ｗ／ｗ総固体成分を含み、酵素が総 置体成分の６３％ｗ／ｗである水性Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｌｉｃｈｅｎｆｏｒｍｉ ｓスブチリシン限外濾過濃縮液４７６６グラムを流動化したコア上に、比率８５ ｇ／分および噴霧空気圧２．　５　ｂａｒで噴霧する。入口空気温度は約７０℃ で、出口温度は約４８℃である。次いで、１０リツトルの水に懸濁させた２００ ０グラムのＰＥＧ　８０００および５００グラムのＴｉＯ２の被覆剤溶液を、同 じ条件下で酵素被覆コア上にスプレーする。最小被覆製品は、重量１４．０ｋｇ 。Example 8 - High solids protease was coated with PEG 8000 and T102. Spray coat on nonpareil with reversible agent Add 10゜0kg of nonpareil seeds to Glatt GPCG-5 fluidized bed granulator. put in. Contains 20% w/w enzyme solids and 32% w/w total solids content; Aqueous Bacillus lichenformi which is 63% w/w of the body component s subtilisin ultrafiltration concentrate onto a fluidized core with a ratio of 85 g/min and atomizing air pressure2. Spray at 5 bar. Inlet air temperature is approximately 70℃ The outlet temperature is approximately 48°C. Then 200 liters of water was suspended in 10 liters of water. A coating solution of 0 grams of PEG 8000 and 500 grams of TiO2 was added to the same Spray onto the enzyme-coated cores under the same conditions. Minimum coated product weighs 14.0 kg .

重量増加４０％ｍｌ／Ｗである。The weight increase is 40% ml/W.

実施例９−ハイソリッドセルラーゼ濃縮液を、ＰＥＧ　８０００およびＴ　ｉＯ ２被覆剤と共に、ノンパレイユ上にスプレーコーティングする Ｕｎｉ−Ｇｌａｔｔ実験室用スプレーコーターにノンパレイユシード６００グラ ムを入れる。入口温度６０℃、出口温度４２℃、および噴霧圧３　ｂａｒで、３ ０．３％Ｗ／Ｗ酵素および３９．５％ｗ／ｗ総固体成分を含み、酵素が総置体成 分の７７％ｗ／ｗである水性セルラーゼ濃縮液４５５グラムを流動化したコア上 に噴霧し、コア重量を７８０グラムに、つまり２９．７％ｗ／ｗ増加させる。１ ．５リツトルの水中に２００グラムのＰＥＧ　８０００および２００グラムのＴ ｉＯ２を含む被覆剤溶液を、同じ条件下でコア上にスプレーする。得られた製品 は、重量１１８０グラム、正味重量増加は元のコアに対して９７％である。Example 9 - High solids cellulase concentrate was mixed with PEG 8000 and TiO 2 Spray coat on the nonpareil with the coating material. Uni-Glatt laboratory spray coater with 600 grams of non-pareil seeds Insert the music. 3 with an inlet temperature of 60 °C, an outlet temperature of 42 °C, and a spray pressure of 3 bar. Contains 0.3% w/w enzyme and 39.5% w/w total solids; 455 grams of aqueous cellulase concentrate at 77% w/w of and increase the core weight to 780 grams, or 29.7% w/w. 1 ．． 200 grams of PEG 8000 and 200 grams of T in 5 liters of water A coating solution containing iO2 is sprayed onto the core under the same conditions. obtained product weighs 1180 grams, a net weight increase of 97% over the original core.

実施例１〇−塩を添加したプロテアーゼ濃縮液を、アラビアコムおよびＴｉＯ２ 被覆剤と共に、ノンパレイユ上にスプレーコーティングする Ｕｎｉ−Ｇｌａｔｔ実験室用スプレーコーターにノンパレイユシード８００グラ ムを入れる。重量５２０グラムで、プロテアーゼ８％ＷＯＷおよび総置体成分２ ４％ｖ／ｗを含む水性プロテアーゼ濃縮液５００ｍ１を、その濃縮物に安定剤塩 １００グラムを溶解することにより変性する。これらの添加により溶液の体積が ５４０ｍ１に増加し、溶液の重量は６２０グラムになる。この、酵素固体６．７ ％ｗ／ｖおよび総置体成分３６．３％ｗ／ｗを含む変性濃縮物を、入口温度５０ ℃、出口温度４０℃、および噴霧空気圧３．　５　ｂａｒで、流動化したコア上 に噴霧する。これによって製品重量は１０２５グラムに、つまりコア重量に対し て２８．１％ｗ／ｖ増加する。次いでアラビアゴム１２０グラムおよびＴ　ｉＯ ２６０グラムを含む被覆剤溶液をこれらのコア上にスプレーし、最終製品重量１ ２０５グラム、正味増加５０．６％ｗ／ｗを得る。Example 1 - Salt-added protease concentrate was added to arabicum and TiO2 Spray coat on nonpareil with coating material Uni-Glatt laboratory spray coater with 800 grams of non-pareil seeds Insert the music. Weight 520 grams, Protease 8% WOW and Total Body Ingredients 2 500 ml of aqueous protease concentrate containing 4% v/w was added to the concentrate with stabilizer salts. Denature by dissolving 100 grams. These additions increase the volume of the solution The volume increases to 540 ml and the weight of the solution is 620 grams. This enzyme solid 6.7 % w/v and total body components 36.3% w/w at an inlet temperature of 50 ℃, outlet temperature 40℃, and atomizing air pressure3. On the fluidized core at 5 bar Spray on. This brings the product weight to 1025 grams, i.e. relative to the core weight. increases by 28.1% w/v. Then 120 grams of gum arabic and TiO A coating solution containing 260 grams was sprayed onto these cores to give a final product weight of 1 205 grams, net gain of 50.6% w/w.

国際調査報告 ’　”−−”Ｐｅｒ／ｌｌｓ９１１０７６７５international search report ’　”--”Per/lls91107675

Claims (15)

【特許請求の範囲】[Claims] １．酵素が生産された発酵ブロスから乾燥した無粉塵粒子を製造する方法であっ て、 ａ）水和性コアを流動床スプレーコーター中に入れるか、あるいは、水和性コア を流動床スプレーコーター中で構築し、コアをスプレーコーターの反応室中で浮 遊状態に維持する工程、 ｂ）総固体成分の約５％〜約１００％ｗ／ｗの、発酵ブロス中で生産された水溶 性または分散性の酵素、およびブロスの粘度が室温で１０〜５，０００ｃｐｓに なるように、発酵ブロスの４％〜３１％ｗ／ｗの総固体成分を含む発酵ブロスを 用意する工程、およびｃ）ブロスをコア粒子上に噴霧し、コア粒子に加えられた ブロス固体成分により、総乾燥重量増加が１％〜１９％ｗ／ｗになるように、液 体を蒸発させてコア粒子上に塗布されたブロス固体成分を残す工程を含むことを 特徴とする方法。1. A method for producing dry, dust-free particles from the fermentation broth in which enzymes are produced. hand, a) Place the hydratable core in a fluid bed spray coater or is constructed in a fluidized bed spray coater, and the core is floated in the reaction chamber of the spray coater. a process of maintaining it in an idle state; b) from about 5% to about 100% w/w of the total solids content produced in the fermentation broth; Dispersible or dispersible enzymes, and broth viscosity between 10 and 5,000 cps at room temperature. A fermentation broth containing a total solids content of 4% to 31% w/w of the fermentation broth, such that and c) spraying the broth onto the core particles and adding the broth to the core particles. Depending on the broth solids content, the total dry weight gain is between 1% and 19% w/w. evaporating the body to leave the broth solid components coated on the core particles. How to characterize it. ２．さらに、 ｄ）液体中に溶解した被覆剤を工程ｃ）の製品上に噴霧し、コア粒子に加えられ た総ブロス固体成分および被覆剤により、総乾燥重量増加がコア粒子の初期重量 に対して１％〜２４％ｗ／ｗになるように、液体を蒸発させて工程ｃ）の固体成 分上に被覆剤を残す工程を含むことを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。2. moreover, d) Spraying the coating dissolved in the liquid onto the product of step c) and adding it to the core particles. The total dry weight increase is due to the total broth solids components and coatings added to the initial weight of the core particles. evaporate the liquid to 1% to 24% w/w to form a solid in step c). 2. The method of claim 1, further comprising the step of leaving a coating on the surface. ３．酵素が生産された発酵ブロスから乾燥した無粉塵粒子を製造する方法であっ て、 ａ）水和性コアを流動床スプレーコーター中に入れるか、あるいは、水和性コア を流動床スプレーコーター中で構築し、コアをスプレーコーターの反応室中で浮 遊状態に維持する工程、 ｂ）総固体成分の約５％〜約１００％ｗ／ｗの、発酵ブロス中で生産された水溶 性または分散性の酵素、およびブロスの粘度が室温で１０〜５，０００ｃｐｓに なるように、発酵ブロスの３１％〜５５％ｗ／ｗの総固体成分を含む発酵ブロス を用意する工程、およびｃ）ブロスをコア粒子上に噴霧し、コア粒子に加えられ たブロス固体成分により、総乾燥重量増加が１％〜１００％ｗ／ｗになるように 、液体を蒸発させてコア粒子上に塗布されたブロス固体成分を残す工程を含むこ とを特徴とする方法。3. A method for producing dry, dust-free particles from the fermentation broth in which enzymes are produced. hand, a) Place the hydratable core in a fluid bed spray coater or is constructed in a fluidized bed spray coater, and the core is floated in the reaction chamber of the spray coater. a process of maintaining it in an idle state; b) from about 5% to about 100% w/w of the total solids content produced in the fermentation broth; Dispersible or dispersible enzymes, and broth viscosity between 10 and 5,000 cps at room temperature. Fermentation broth containing 31% to 55% w/w total solids content of the fermentation broth, such that and c) spraying the broth onto the core particles and adding the broth to the core particles. The total dry weight gain ranges from 1% to 100% w/w depending on the broth solids content. , evaporating the liquid to leave a broth solid component coated on the core particles. A method characterized by: ４．さらに、 ｄ）液体中に溶解した被覆剤を工程ｃ）の製品上に噴霧し、コア粒子に加えられ た総ブロス固体成分および被覆剤により、総乾燥重量増加がコア粒子の初期重量 に対して１％〜１００％ｗ／ｗになるように、液体を蒸発させて工程ｃ）の固体 成分上に被覆剤を残す工程を含むことを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法 。4. moreover, d) Spraying the coating dissolved in the liquid onto the product of step c) and adding it to the core particles. The total dry weight increase is due to the total broth solids components and coatings added to the initial weight of the core particles. Evaporate the liquid to 1% to 100% w/w of the solid in step c) A method according to claim 1, characterized in that the method comprises the step of leaving a coating on the component. . ５．徴生物の細胞または細胞残骸を除去するために、発酵ブロスが濾過されてい ることを特徴とする、請求の範囲第１項または第３項記載の方法。5. Fermentation broth is filtered to remove symptomatic cells or cell debris. 4. A method according to claim 1 or 3, characterized in that: ６．発酵ブロスがタンパク質精製または濃縮技術により処理されていることを特 徴とする、請求の範囲第１項または第３項記載の方法。6. Specify that the fermentation broth has been processed by protein purification or enrichment techniques. 4. The method according to claim 1 or 3, wherein the method comprises: ７．発酵ブロスに、金属塩、糖、顔料、結合剤、安定剤、可塑剤または香料が添 加されていることを特徴とする、請求の範囲第１項または第３項記載の方法。7. No metal salts, sugars, pigments, binders, stabilizers, plasticizers or flavorings are added to the fermentation broth. 4. A method as claimed in claim 1 or 3, characterized in that the method is characterized in that: ８．酵素がプロテアーゼであることを特徴とする、請求の範囲第１項または第３ 項記載の方法。8. Claim 1 or 3, characterized in that the enzyme is a protease. The method described in section. ９．酵素がリパーゼであることを特徴とする、請求の範囲第１項または第３項記 載の方法。9. Claim 1 or 3, characterized in that the enzyme is lipase. How to put it on. １０．酵素がセルラーゼであることを特徴とする、請求の範囲第１項または第３ 項記載の方法。10. Claim 1 or 3, characterized in that the enzyme is cellulase. The method described in section. １１．酵素がアルカリ性プロテアーゼであることを特徴とする、請求の範囲第１ 項または第３項記載の方法。11. Claim 1, characterized in that the enzyme is alkaline protease. The method described in Section 3 or Section 3. １２．酵素がアミラーゼであることを特徴とする、請求の範囲第１項または第３ 項記載の方法。12. Claim 1 or 3, characterized in that the enzyme is amylase. The method described in section. １３．さらに、スプレーコーター反応室の外側に配置されたフィルターまたはス クラッバーを備えたスプレーコーターを使用する工程を含むことを特徴とする、 請求の範囲第１項または第３項記載の方法。13. In addition, a filter or screen placed outside the spray coater reaction chamber using a spray coater equipped with a clubber; A method according to claim 1 or 3. １４．スプレーコーターが自動フィルター振動装置を有することを特徴とする、 請求の範囲第１３項記載の方法。14. characterized in that the spray coater has an automatic filter vibration device, The method according to claim 13. １５．さらに、コーティング工程の最後の５分間の間、前記自動フィルター振動 装置のスイッチを切ることを特徴とする、請求の範囲第１３項記載の方法。15. Additionally, during the last 5 minutes of the coating process, the automatic filter vibration 14. Method according to claim 13, characterized in that the device is switched off.