JPH06508140A

JPH06508140A - 骨誘導用治療組成物

Info

Publication number: JPH06508140A
Application number: JP5500485A
Authority: JP
Inventors: ストーン，ロジャー　リー
Original assignee: ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー
Priority date: 1991-06-05
Filing date: 1992-05-26
Publication date: 1994-09-14
Also published as: NO934381L; AU2145492A; CA2110410C; NO934381D0; CA2110410A1; NZ243018A; CZ282231B6; WO1992021365A1; CZ262493A3; SK136693A3; EP0587751A1; RU2107512C1; BR9206110A; PT100567A; AU667815B2; IE921812A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】骨誘導用治療組成物技術分野本発明は骨誘導（骨成長）の分野に関する。詳しくは、本発明は骨形態形成タンパク質及びビタミンＤ化合物を投与して相乗的骨成長を得ることからなる新規治療処方健康な個体において骨成長は通常正常に進行し、骨折は薬理的介入の必要性なしに治療する。それにもかかわらず、ある場合において骨は弱くなるか又は適正に治癒しなくなる。例えば、治癒は年長者と移植患者及び慢性肺疾患治療中の患者のようなコルチコステロイド治療中の患者においてゆっくり進行する。もう１つの例は骨粗髭症である。骨粗髭症は閉経後女性及び年長男性でよく起きる骨組織の異常喪失である。その障害は骨、特にを椎で起きる小さな骨折のリスクを増加させる。現在、骨粗髭症はカルシウム、ビタミンＤ１エストロゲン又はカルシウムの体内使用をコントロールするホルモン、カルシトニンの補給により主に治療されている。残念ながら、これらの治療はこれ以上の骨の喪失に対する単なる予防である。骨喪失の予防よりも進んで骨形成を促進する及び／又は骨喪失を逆転させる治療に関する必要性が当業界にある。

（１９８９）”Ｂｏｎｅ　Ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｉｃ　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｎｄ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ”（骨形態形成タンパク質及びビタミンＤ　）、Ｎｕｔｒ［ｔｉｏｎＲｅｖｉｅｗｓ、Ｖｏｌ、４７．ｐｐ、３６４−３８６は飲食物中のビタミンＤが骨基質の骨誘導活性の喪失を防止すると結論付けている。

Ｔｕｒｎｅｒ、　Ｒ，Ｔ、　、　Ｊ　、Ｆａｒｌｅｙ、　Ｊ　、Ｊ　Ｊａｎｄｅｒｓｔｅｅｎｈｏｖｅｎ、　Ｓ　。

Ｅｐｓｔｅｉｎ、Ｎ、Ｈ，Ｂｅ１ｌ及びり、Ｊ、Ｂａｙｌｌｎｋ、　（１９８８）＋Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ’　Ｒｅｄｕｃｅｄ　Ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ　ａｎｄＯｓｔｅｏｉｎｄｕｃｔｉｖｅ　Ａｃｔｉｖｔｔｔｅｓ　ｉｎ　ＤｅｍｉｎｅｒａｌｉｚｅｄＡＩｌｏｇｅｎｅｉｃ　Ｂｏｎｅ　Ｍａｔｒｉｘ　ｒｒｏｉ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ−ｄｅｆ’１ｃｉｅｎｔＲａｔｓ“　（ビタミンＤ欠乏ラットからの脱ミネラル化同種異系骨基質における低***促進及び骨誘導活性に関する証明）、Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌ１ｎｉｃａｌ　Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ、Ｉｎｃ−Ｖｏ１１１２．ｐｐ、２Ｌ２−２１７はビタミンＤ欠乏ラットから正常ラットへの脱ミネラル化骨基質の移植について開示している。ビタミンＤ欠乏ラットからの脱ミネラル化骨基質は正常ラットからの脱ミネラル化骨基質はど有効に骨誘導を促進しなかった。

Ｓａｍｐａｔｈ、Ｔ、に、　、Ｓ、Ｗｅｉｎｔｒａｕｂ及びＡ、１１．Ｒｅｄｄ（、（１９８４）”Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｍａｔｒｉｘ　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ　Ｉｎｖｏｌｖｅｓ　ｉｎ　ｂｏｎｅＩｎｄｕｃｔｉｏｎ　ａｒｅ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ”　（骨誘導に関与する細胞外基質タンパク質はビタミンＤ依存性である）。

Ｂｌｏｃｈｅｍｌｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｌｏｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＣｏａｖｕｎｉｃａｔ１ｏｎｓ、Ｖｏｌ、１２４．ｐｐ、８２９−８３５は正常ラットからの脱ミネラル化骨基質及びくる病ラットからの脱ミネラル化骨基質を移植する研究について開示し、その場合にくる病骨基質は骨成長を誘導しなかったが、一方正常置基質は誘導した。その研究はビタミンＤが生存ラットの骨基質で骨誘導性タンパク質を産生ずるために必須であることをこれらの結果が証明していると結論付けた。

カリフォルニア大学の評議員に譲渡されて１９８８年８月２日付で発行されたＵｒｉｓｔの米国特許第４，７６１゜４７１号明細書は３４，０００ドルトンの分子量を有するＢＭＰ因子及びＢＭＰ会合タンパク質を含む骨形態形底タンパク質組成物について開示している。哺乳動物で骨形成を誘導するためにこのような因子及び組成物の使用についても開示されている。

カリフォルニア大学の評議員に譲渡されて１９８４年６月１９日付で発行されたＵｒｉｓｔの米国特許第４，４５５．２５６号明細書は１０００〜１００，０００ドルトン範囲内の分子量を有する骨形態形成タンパク質について開示している。

様々な他の骨形態形酸タンパク質／因子、骨誘導因子、骨形成因子及び骨成長に関係する他のタンパク質／因子が下記文献で開示されている：１９９０１９９０年１１月６日付れたＫｕｂｅｒｓａｌＩｐａｔｈ及びＲｕｅｇｅｒの米国特許第４゜９６８．５９０号、１９８７年１０月６日付で発行されたＮｅｅｒ、Ｐｏｔｔｓ及び５ｌｏｖｉｋの米国特許第４，６９８．３２８号、１９８９年１０月３１日付で発行されたＷａｎｇ　。

Ｖｏｚｎｅｙ及びＲｏｓｅｎの米国特許第４，８７７．８６４号；１９８９年８月２９日付で発行されたＡｎｔＯｎｉａｄｅＳ　、Ｌｙｎｃｈ及びＶｉ　ｌ　Ｉ　１ａｆｆｌｓの米国特許第４，８６１，７５７号；１９８９年３月７日付で発行された５ｅｙｅｄｉｎ、Ｔｈｏｍａｓ。

Ｂｅｎｔｚ、Ｅｌｌｌｎｇｓｖｏｒｔｈ　及びＡｒｍｓｔｒｏｎｇの米国特許第４゜８１０．６９１号；１９８９年２月１４日付で発行されたＳｅｎの米国特許第４，８０４，７４４号；１９８９年１月３日付で発行されたＵｒｉｓｔの米国特許第４，７９５゜８０４号、１９８８年１２月６日付で発行されたｗａｌｌａｃｅ、５ｓｅｓｔａｄ、ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ、Ｐｉｅｚ及びＲｏｓｓの米国特許第４．７８９．６６３号、１９８８年１２月６日付で発行されたＵｒｉｓｔの米国特許第４，７８９．７３２号；１９８８年９月２７日付で発行された５ｅｙｅｄｉｎ、Ｔｈｏｍａｓ。

Ｂｅｎｔｚ、Ｅｌｌｉｎｇｓｖｏｒｔｈ及びＡＡｒｌｌＳｔｒＯｎの米国特許第４．　７７４．３２２号；１９８７年１０月６日付で発行されたＮｅｅｒ及び５ｌｏｖｉｋの米国特許第４，６９８，３２８号；１９８６年１２月９日付で発行された５ｅｙｄｉｎ及びＴｈｏｍａｓの米国特許第４，６２７．９８２号；１９８６年１０月２８日付で発行されたＵｒｉｓｔの米国特許第４，６１９゜９８９号、１９８６年６月２４日付で発行されたＵｒｉｓｔの米国特許第４，５９６．５７４号；１９８６年１月７日付で発行されたＵｒｉｓｔの米国特許第４，５６３．４８９号、１９８６年１月７日付で発行されたＮａｔｈａｎ。

５ｅｙｅｄ　ｉ　ｎ及びＢｅｎｔｚの米国特許第４，５６３，３５０号；１９８５年７月２日付で発行されたｔｉｒｉｓｔの米国特許第４．５２６，９０９号；１９８４年２月２３日付で発行された５ｅｙｅｄｉｎ及びＴｈｏｍａｓの米国特許第４．４３４，８９４号、１９８１年１０月１３日付で発行されたＵｒｉｓｔの米国特許第４，２９４．７５３号；１９９０年１月３日付で公開されたＢａｂ　、　Ｍｕｈ　ｌ　ｒａｄ　、　Ｇａｚ　ｉ　を及び５ｈｔｅｙｅｒの欧州特許出願第３４９．０４８号；１９８９年３月２９日付で公開されたＣｈｕ、Ｎａｔｈａｎ及び５ｅｙｅｄｉｎの欧州特許出願第３０９，２４１号、１９８９年１０月１１日付で公開されたＢｅｎｔｚ、Ｎａｔｈａｎ、Ｒｏｓｅｎ、Ｄａｓｃｈ及び５ｅｙｅｄ　ｉ　ｎの欧州特許出願第３３６，７６０号、１９８５年７月１０日付で公開されたＳｅｎの欧州特許出願第１４５．１５５号；１９８９年１１月１６日付で公開されたＲｏｏｓ　、　Ｂｕｒｎｓ　、　Ｇｕｙ及びＭｃＫｎｉｇｈｔの国際特許出願第８９／１０９３４号；１９８９年１０月１９日付で公開された０ｐｐｅｒ＊ａｎｎ。

Ｋｕｂｅｒｓａｍｐａｔｈ、Ｒｕｅｇｅｒ及び０ｚｋａｙｎａｋの国際特許出願第８９１０９７８７号及び第８９１０９７８８号；１９８８年１月１４日付で公開された警ａｎｇ　、　Ｗｏｚｎｅｙ及びＲｏｓｅｎの国際特許出願第８８１００２０５号明細書。

発明の目的本発明の目的は哺乳動物で新たな骨成長を生じさせるための方法を提供することである。

本発明のもう１つの目的は哺乳動物で新たな骨成長を生じさせるために使用できる医薬組成物を提供すること本発明は安全有効量のビタミンＤ化合物と安全有効量の１種以上のＢ　Ｍ　Ｐ又は１種以上のＢＭＰを含む骨誘導性抽出物の組合せを哺乳動物に投与することからなる哺乳動物で新たな骨成長を生じさせるための方法に関する。

本発明は安全有効量のビタミンＤ化合物；安全有効量のＢＭＰ又は１種以上のＢＭＰを含む骨誘導性抽出物；及び薬学上許容されるキャリアを含む哺乳動物で新たな骨成長を生じさせるための組成物に更に関する。

発明の詳細な説明本発明は安全有効量のビタミンＤ化合物と安全有効量の１種以上のＢＭＰ又は１種以上のＢＭＰを含む骨誘導性抽出物の組合せの哺乳動物への投与からなる。ビタミンＤ化合物、ＢＭＰ又は骨誘導性抽出物単独による治療は骨成長を増加させることがわかった。意外にも、骨誘導性抽出物又は少くとも１種のＢ　Ｍ　Ｐと組合されたビタミンＤ化合物による治療はＢ　Ｍ　Ｐ　、骨誘導性抽出物又はビタミンＤ化合物単独の投与で得られる場合よりも大きな新たな骨成長のレベルを示すことが更にわかった。このような治療の必要な主体は格別限定されないが、骨折（閉鎖及び開放）、非癒着性骨折、先天性欠陥、形成外科、腫瘍切除処置で補助として、骨粗髭症、リウマチ様関節炎、骨関節炎、敗血性関節炎、くる病、補綴関節及び歯科インブラントの組織的組込み、歯周疾患及び欠陥と骨欠乏及び骨軟化症状及び疾患として分類されるすべての疾患を含めてこの処置で治療される様々な病気にがかっている。

ここで用いられる“安全有効量”とは健全な医療判断の範囲内で（妥当な利益／危険比で）治療される症状について有意にポジティブな変更を誘導する上で十分だが、但し重篤な副作用を避ける上で十分に低い量の化合物又は組成物を意味する。その化合物又は組成物の安全有効量は治療される具体的な症状、治療される患者の年齢及び身体条件、症状の重篤塵、治療期間、併用療法の性質用いられる具体的な化合物又は組成物、利用される具体的な薬学上許容されるキャリアと担当医の知識及び専門技術内に属する同様のファクターに応じて変動する。

ここで用いられる“骨折整復”とはその正常な解剖学的関係への外科又は手技手段による骨折の修復をき味する。

ここで用いられる“Ｂ〜ＩＰ”とは骨形態形酸タンパク質を意味する。

ここで用いられる“ｑ、ｓ、”とは適量を意味する。

ここで用いられるすべてのパーセンテージは他で指摘されないかぎり重量による。

ここで用いられる“局所治療”には骨折（非観血的（ｃｌｏｓｅｄ）及び観血的（ｏｐｅｎ））治療、偽関節（ｎｏｎ−ｕｎｉｏｎ）骨折治療、先天性欠陥治療、形成外科の補助治療として、腫瘍切除処置、補綴関節の組織的組込み、歯科インブラントの組織的組込みと歯周疾患及び欠陥の治療を含む。

ここで用いられる“全身治療”には骨粗義症、リウマチ様関節炎、骨関節炎、敗血性関節炎、くる病と骨欠乏症状及び疾患として分類される疾患の治療を含む。

ここで用いられる全身治療用のすべての用量範囲は哺乳動物の体重ｋｇ当たりの活性剤の乾燥重量として示される。

ここで用いられる局所治療用のすべての用量範囲は治療されるミネラル化組織の表面積Ｃ−当たりの活性剤の乾燥重量として示される。

ここで用いられる“ミネラル化組織”とは骨及び歯を意味する。

ビタミンＤ化合物本発明の方法に要する１つの成分はビタミンＤ化合物である。ここで用いられる “ビタミンＤ化合物゛１こ（よビタミンＤ１エルコ゛カルシフニロール（ビタミンＤ２）、コレカルシフェロール（ビタミンＤ　３　）とそれらの生物学的に活性な代謝産物及び前駆体がある。好まし０ビタミンＤ化合物としては格別限定されず、ビタミンＤ２〔シグマ（ＳｉｇＩｌａ）、セントルイス、ＭＯ）　、ビタミンＤ３（シグマ、セントルイス、ＭＯ）、１α−ヒドロキシビタミンＤ　］］ α−フルオロビタミンＤ　３−デオキ３ゝ　３゛シー１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ　２５−ヒト３ゝフキシー５．６−トランスビタミンＤ　２５−ヒドロ３ゝキシビタミンＤ　２５−ヒドロキシビタミンＤ３〔ホ２ゝフマン・ラロシュ（Ｈｏｒｆ’ｍａｎ　ＬａＲｏｃｈｅ））　、１　、　２５− ジヒドロキシビタミンＤ　２４．２５−ジヒドロキシビ２ゝタミンＤ　２４．２５−ジヒドロキシビタミンＤ３２ゝ（ホフマン・ラロシュ）及び１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３〔デユワ７− 　（Ｄｕｐｈａｒ）、ビーネンダール、オランダ〕がある。好ましくはビタミンＤ化合物は２５−ヒドロキシビタミンＤ　２５−ヒドロキシビタミン２ゝＤ　１．２５−ジヒドロキシビタミンＤ　２４゜３・　２゛２５−ジヒドロキシビタミンＤ　２４．２５−ジヒド２ゝロキシビタミンＤ３及び１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３から選択され、更に好ましくは１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である。本発明で有用な他のビタミンＤ化合物は当業者に周知であり、格別限定されないが、各々参考のためここに組込まれる下記米国特許明細書により開示されたものがある：１９９０年１１月１３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ及びＫｗｊｅｃｉｎｓｋｉの米国特許第４，９７０．２０３号；１９９０年５月２２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｋｕｔｎｅｒ、Ｐｅｒｌｍａｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４゜９２７．８１５号；１９８９年８月１５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｉｋｅｋａｗａ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，８５７゜５１８号、１９８９年７月２５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｋｕｔｎｅｒ、Ｐｅｒｌｓａｎ　及びＳｅｔ＋ｒ＋ｏｅｓの米国特許第４，８５１゜４０１号、１９８９年７月２５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｉｋｅｋａｗａ及びＴａｎａｋａの米国特許第４．８５１，４００号；１９８９年７月１１日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｋｕｔｎｅｒ。

Ｐｅｒｌｉａｎ、Ｐｈｅｌｐｓ、５ｃｈｎｏｅｓ及び５ｌｃｊｎｓｋｊの米国特許第４゜８４７．０１２号；１９８９年３月２８日付で発行されたＤａａｅ、　ＤｅＬｕｃａ及びＰｉｅｒｃｅの米国特許第４，８１６，４１７号；１９８８年９月６日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　。

５ｃｈｎｏｅｓ、５ｉｃｉｎｓｋｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，７６９゜１８１号；１９８８年７月５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｌｅｅ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，７５５，３２９号：１９８８年１月１２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、５ｃｈｎｏｅｓ。

５ｉｃｉｎｓｋｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，７１９，２０５号；１９８８年１月１２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、５ｃｈｎｏｅｓ。

５ｉｃｉｎｓｋｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，７１９，２０４号；１９８８年１月５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｉ　ｋｅｋａｗａ　。

Ｏｓ　ｔ　ｒｅｍ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，７１７，７２１号；１９８７年８月２５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、５ｃｈｎｏｅｓ。

５ｉｅｊｎｓｋｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，６８９，１８０号：１９８６年１０月２８日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　ｌｋｅｋａｗａ。

Ｋｏｂａｙａｓｈｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，６１９，９２０号；１９８６年６月１０日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　。

ｌｋｅｋａｗａ、　Ｋｏｂａｙａｓｈｌ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，５９４゜１９２号、１９８６年５月１３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，５８８，７１６号；１９８６年５月１３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｉｋｅｋａｖａ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，５８８，５２８号；１９８６年１月１４日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｉｋｅｋａｖａ、　Ｋｏｂａｙａｓｈｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，５６４，４７４号；１９８５年１１月２６日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｌｅｅ　。

Ｐｈｅｌｐｓ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，５５５，３６４号；１９８５年１１月１９日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｌｅｅ　。

Ｐｈｅｌｐｓ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，５５４，１０６号；１９８５年１１月１１日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｉｋｅｋａｗａ。

ＫＯｂａｙａｓｈ　を及びＴａｎａｋａの米国特許第４，５５２．６９８号、１９８５年４月２３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｌｅｅ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，５１２，９２５号；１９８５年３月１９日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　５ｃｈｎｏｅｓ　。

５ｉｃｉｎｓｋｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，５０５，９０６号；１９８５年３月５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｉ　ｋｅｋａｖａ　。

Ｋｏｂａｙａｓｈ　ｌ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，５０２．９９１号、１９８５年２月１９日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｉｋｅｋａｖａ、　Ｋｏｂａｙａｓｈｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，５００゜４６０号、１９８４年１１月６日付で発行されたＣｈｕ　。

ＤｅＬｕｃａ、Ｋａｂａｋｏｆｒ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，４８１゜１９８号；１９８４年７月２４日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｈａｒｔ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，４６１．７６６号；１９８４年５月１５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｐａａｒｅｎ。

５ｃｈｎｏｅｓ及び５ａｉｔｈの米国特許第４，４４８，７２６号；１９８４年５月１５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｍｏｒｚｙｃｋｉ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４．’４４８，７２１号；１９８４年１月３１日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，４２８，９４６号；１９８３年１０月２５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｉｋｅｋａｗａ。

Ｋｏｂａｙａｓｈｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，４１１，８３３号；１９８３年１月４日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、５ｃｈｎｏｅｓ及びＷｉｃｈｗａｎの米国特許第４，３６７．１７７号；１９８２年１１月９日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｉｋｅｋａｖａ。

Ｋｏｂａｙａｓｈｆ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，３５８．４０６号；１９８２年７月６日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，３３８，３１２号；１９８２年７月６日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｈａｍｅｒ。

Ｐａａｒｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，３３８，２５０号；１９８２年６月２２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｆｉｖｉｚｚａｎｆ。

Ｐａａｒｅｎ　、　５ｃｈｎｏｅｓ及びＷｌｃｈｌｌａｎｎの米国特許第４．３３６゜１９３号；１９８２年２月２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　。

Ｆｒａｎｋ　、　Ｐａａｒｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，３１３．９４２号；１９８１年１２月２２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｐａａｒｅｎ、５ｃｈｎｏｅｓ、Ｔａｎａｋａ及びＷｉｃｈｍａｎｎの米国特許第４１３０７．２３１号；１９８１年１２月２２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｉｋｅｋａｗａ、Ｍｏｒｉｓａｋｉ、０ｓｈｉｄａ、５ｃｈｎｏｅｓ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，３０７，０２５号；１９８１年１２月１５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｉｋｅｋａｖａ、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，３０５，８８０号：１９８１年１０月２７日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｆｉｖｉｚｚａｎｉ　、　Ｐａａｒｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２９７゜２８９号；１９８１年９月２９日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｌｅｖａｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２９２，２５０号；１９８１年５月５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｈａｍｅｒ。

Ｐａａｒｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２６５，８２２号；１９８１年４月２８日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｆｌｖｉｚｚａｎｉ。

Ｎａｐｏｌｉ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２６４，５１３号；１９８１年４月２１日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｎａｐｏ　Ｉ　ｆ　。

０ｎｆｓｋｏ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２６３，２１４号：１９８１年４月７日付で発行されたＤｅＬＬＩＣａ、ＥＳｖｅｌｔ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２６０，８０４号、１９８１年４月７日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｈａｔａｅｒ、Ｐａａｒｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２６０，５４９号；１９８１年３月３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｉｋｅｋａｗａ、Ｍｏｒｉｓａｋｊ　。

０ｓｈｌｄａ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，２５４，０４５号：１９８１年３月３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｌａｍ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国再発行特許第３０，５３８号；１９８１年２月３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｉ　ｋｅｋａｖａ　、　Ｋｏｂａｙａｓ旧及びＴａｎａｋａの米国特許！４，２４８．７９１号、１９８０年１１月１８日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｈａｍｅｒ、Ｐａａｒｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２３４，４９５号；１９８０年１０月２８日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｎａｐｏ　ｌ　ｉ　。

０ｎｉｓｋｏ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２３０，６２７号：１９８０年１０月２１日付で発行されたＡｌｐｅｒ、ＤｅＬｕｃａ。

５ｃｈｎｏｅｓ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，２２９，３５９号：１９８０年１０月２１日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｎａｐｏ　ｌ　ｉ　。

０ｎｉｓｋｏ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２２９．３５８号；１９８０年１０月２１日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｎａｐｏ　Ｉ　ｆ　。

０ｎｌｓｋｏ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２２９，３５７号；１９８０年１０月７日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｉ　ｋｅｋａｗａ　。

Ｋｏｂａｙａｓｈｉ　、５ｃｈｎｏｅｓ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，２２６゜７８８号；１９８０年１０月７日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｎａｐｏｌｉ、０ｎｉｓｋｏ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２２６゜７８７号；１９８０年９月２３日付で発行されたＡｌｐｅｒ。

ＤｅＬｕｃａ、５ｃｈｎｏｅｓ及びＴａｎａｋａの米国特許第４，２２４，２３１号、１９８０年９月２３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｎａｐｏｌ　ｉ　、０ｎｊｓｋｏ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２２４゜２３０号；１９８０年９月１６日付で発行されたＤｅＬｕｃａ。

Ｓ　ｃ　ｈ　ｎ　ｏ　ｅ　ｓ及びＷｉｃｈ＋＋ａｎの米国特許第４，２２３．１３１号、１９８０年８月１２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　。

０ｎｉｓｋｏ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４．２１７，２８８号：１９８０年６月２４日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、　Ｅｓｖｅｌ　を及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２０９，６３４号；１９８０年５月１３日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｈａｍｅｒ。

Ｐａａｒｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４，２０２．８２９号：１９８０年５月６日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｉ　ｋｅｋａｗａ。

Ｋｏｂａｙａｓｈｉ、５ｃｈｎｏｅｓ及びＴａｎａｋａの米国特許第４．２０１゜８８１号；１９８０年４月１日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　。

Ｉｋｅｋａｖａ、　Ｋｏｂａｙａｓｈｉ　、５ｃｈｎｏｅｓ及びＴａｎａｋａの米国特許第４゜１９６．１３３号；１９８０年３月２５日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｈａｍｅｒ、Ｐａａｒｅｎ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４゜１９５．０２７号；１９８０年２月１２日付で発行されたＤｅＬｕｃａ、Ｎａｐｏｉｔ、０ｎｉｓｋｉ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第４゜１８８．３４５号；１９７５年９月１６日付で発行されたＤｅＬｕｃａ　、　Ｌａｗ及び５ｃｈｎｏｅｓの米国特許第３．９０６．０１４号明細書。本発明で有用な及びこれらの参考文献で開示された他のビタミンＤ化合物としては格別限定されず、ヒドロキシル化２４−ホモビタミンＤ；シクロペンタノビタミンＤ：ヒドロキシル化２６−ホモビタミンＤ；１α−ヒドロキシビタミンＤ：１−ヒドロキシビタミンＤ：１α−ヒドロキシビタミンＤっ；１α、２５−ジヒドロキシ−２２２−デヒドロキシビタミンＤ；２６゜２６．２６，２７．２７−ペ／タフルオロ−１α−ヒドロキシ− ２７−メドキシビタミンＤ　；２α−フルオロビタミンＤ３；１，２４−ジヒドロキシ−Δ２２−ビタミンＤ　；２３．２３−ジフルオロ−２５−ヒドロキシビタミンＤ３：１−ヒドロキシ−３，５−シクロビタミンＤ；２３．２３−ジフルオロ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ；１，２３−ジヒドロキシビタミンＤ；ヒドロキシビタミンＤ　；２３，２３−ジフルオロ−１α、２５−ジヒドロキシビクシビタミンＤ２３，２３−ジフルオロ−２５−ヒドロキシビタミンＤ　；２６，２６゜２６．２７，２７．２７−ヘキサフルオロ−１α、２５−ジヒドロキシコＩ／ステロール；２３，２５−ジヒドロキシビタミンＤ　；２６，２６，２６，２７，２７゜２７−ヘキサフルオロ−１α、２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール；１α、２５−ジヒドロキシ−２β−フルオロビタミンＤ　、２４−フルオロ−２５−ヒドロキシコレカルシフェロール：５，６〜トランスビタミンＤ、１α−ヒドロキシ−２５−ケト−２７−ノルコレカルシフェロール；フルオロビタミンＤ；ｌα−ヒドロキシ−２β−フルオロコレカルシフェロール；３−デオキシ−１α−ヒドロキシコレカルシフェロール；２５−ヒドロキシ−２６，２６，２６，２７，２７，２７−ヘキサフルオロコレカルシフェロール；α −ヒドロキシ−３゜５−シクロビタミンＤ；２５−ヒドロキシコレカルシフェロール；２４，２４−ジフルオロ−１α、２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール：カルシフニロール；２５−ヒドロキシコレカルシフェロール−２６．２３−ラクトン、２４．２４−ジフルオロ−１α，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール；２４、２４−ジフルオロ−２５−ヒドロキシコレカルシフェロール；３，５ −シクロビタミンＤ；３−デオキシ−α−ヒドロキシコレカルシフェロールがある。本発明で有用な他のビタミンＤ化合物には参考のためここに組込まれるＴｈｅ　Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｒＶｉｔａｌｌｉｎｓ，Ｌ．Ｊ．Ｍａｃｈｌｉｎ，Ｅｄ．。

Ｍｅｒｃｅｌ　Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．（１９ｇ４）　で開示されたものを更に含む。この参考文献で開示された本発明で有用なビタミンＤ化合物としては格別限定されず、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ，３−デオキシ−１．２５−ジヒドロキシビタミンＤ１２７−ツルー２５−ヒドロキシビタミンＤ３、２６．２７−ピスノルー２５−ヒドロキシビタミンＤ３、２４−ツルー２５−ヒドロキシビタミンＤ３、２５−ヒドロキシビタミンＤ，１．２５−ジヒドロキシビタミンＤ，１α−ヒドロキシビタミンＤ３及び２５−フルオロ−１α−ヒドロキシビタミンＤ３がある。

安全有効量のビタミンＤ化合物は少くとも１種のＢＭＰと組合せて又は少くとも１種のＢＭＰを含む骨誘導性抽出物と組合せて投与される。

全身治療の場合にビタミンＤ化合物の投与に関して好ましい用量範囲は約１ｎｇ〜約ＩＢ、好ましくは約１０ｎｇ〜約５００μｇ１更に好ましくは約２０ｎｇ〜約１０μｇである。

局所治療の目的の場合、ビタミンＤ化合物の用量範囲は約１ｎｇ〜約Ｉ　Ｂ，好マシクハ約１０〜約５　０　０　ｎｇ，更に好ましくは約１０〜約５０ｎｇ、最も好ましくは約２０〜約３０ｎｇであることが好ましい。

好ましくは、投与は１日〜６月間、更に好ましくは約１週間〜約１月間にわたり行われる。好ましくは、投与は約１回／月〜約５回／日、更に好ましくは約１回／週〜約１回／日で行われる。

骨形態形成タンパク質本発明の１態様において、ビタミンＤ化合物は哺乳動物で新たな骨成長を生じさせるために１種以上のＢ　Ｍ　Ｐと組合せて投与される。これらのＢＭＰはＢＭＰ−１、ＢＭＰ　−２、ＢＭＰ　−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ　−６及びＢ　ｌｖｌ　Ｐ　−７からなる群より選択されることが好ましい。

好ましくはＢ　Ｍ　Ｐ　−１、ＢＭＰ　−２、ＢＭＰ　−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ　−５、ＢＭＰ−６及びＢＭＰ　−７からなる群より選択されるＢ　Ｍ　Ｐの安全有効量がビタミンＤ化合物と組合せて投与される。

全身治療の場合にＢＭＰの投与に関して好ましい用量範囲は約１　ｐｇ〜約１００μｇ、好ましくは約１ｎｇ〜約１０μｇ、更に好ましくは約Ｌｏｎｇ〜約２．５μｇである。

局所治療の目的の場合、Ｂ〜ＩＰに関して好ましい用量範囲は約１ｐｇ〜約１００μｇ、更に好ましくは約１．５〜約９０μｇ、好ましくは約１．８〜約７５μ ｇ、更に好ましくは約２．０〜約５０μｇ１更に一層好ましくは約２．２〜約２５μｇ１更に好ましくは約２．３〜約１０μｇ１最も好ましくは約２，５〜約５ μｇである。

好ましくは、その用量範囲は少くとも約２．５μｇである。

好ましくは、投与は１日〜６月間、更に好ましくは約１週間〜約１月間にわたり行われる。好ましくは、投与は約１回／月〜約５回７日、更に好ましくは約１回／週〜約１回／日で行われる。

ここで用いられる“ＢＭＰ−１”とはＳＥＱ　１０　ＮＯ：ＬからなるＤＮＡ配列によりコードされるペプチドを意味する。

ここで用いられる“ＢＭＰ　−２０とはＳＥＱ　１０　ＮＯ：２からなるＤＮＡ配列によりコードされるペプチドを意味する。

ここで用いられる’ＢＭＰ−３”とはＳＥＱ　１０　ＮＯ：３からなるＤＮＡ配列によりコードされるペプチドを意味する。

ここで用いられる“ＢＭＰ−４”とはＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４からなるＤＮＡ配列によりコードされるペプチドを意味する。

ここで用いられる“ＢＭＰ−５”とはＳＥＱ　１０　ＮＯ：５からなるＤＮＡ配列によりコードされるペプチドを意味する。

ここで用いられる“Ｂ　Ｍ　Ｐ　−６”　とはＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６からなるＤＮＡ配列によりコードされるペプチドを意味する。

ここで用いられる“Ｂ〜ＩＰ　−７”とはＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯニアからなるＤＮＡ配列によりコードされるペプチドを意味する。

ここで用いられる′Ａ”、“Ｔｏ、“Ｇ”及び′Ｃ“は各々アデニン、チミン、グアニン及びシトシンを含むヌクレオチドに関する。

骨誘導性抽出物本発明のもう１つの成分は骨誘導性抽出物である。ここで用いられる“骨誘導性抽出物′とは格別限定されないがＢＭＰ−１、ＢＭＰ　−２、ＢＭＰ　−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ　−５、ＢＭＰ　−６及びＢＭＰ　−７を含めて１種以上の様々な骨形態形成タンパク質を含む骨の化学抽出物を意味し、その場合に各Ｂ　Ｍ　Ｐは約２８，０００〜約４０，０００ドルトンの分子量を仔する。

２８．０００〜４０，０００ドルトン分子量範囲はＢ　Ｍ　Ｐダイマー重量に関する。好ましくは、ダイマーの分子量は約３０，０００〜約３４．０００ドルトンである。Ｂ　Ｍ　Ｐダイマーは２つのモノマーからなり、各々は約１４，０００〜約２０，０００ドルトン、好ましくは約１５．０００〜約１７．０００ドルトンの分子量を有する。

骨誘導性抽出物を得る好ましい方法は下記のとおりであるニア〜８週齢ロング−エバンス（Ｌｏｎｇ−Ｅｖａｎｓ）ラット〔チャールズリバー・ラボラトリーズ（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）　、ウイルミントン、ＭＡ）の足首で皮膚を切取る。双方の脛骨を摘出し、冷水にいれる。その骨を蒸留水ですすいで非骨組織（骨量外の組織）を除く。

骨を風乾させる。オステライザ−（０ｓｔｅｒｉｚｅｒ）　（オスターコマーシャル（Ｏｓｔｅｒ　Ｃｏｏｍｅｒｃｉａｌ）、ミルウォーキー。

Ｗｌ）ブレングー中に水及び氷と共にいれることで骨を粉砕する。ブレンターで “液化”スピードにセットし、骨を加え続ける。ブレンドされた物質を数分間かけて沈降させる。液層をデカントする。攪拌プレート上に固体層をおき、蒸留水を加えて洗浄する。蒸留水で透明に洗えるまで洗浄を続ける。蒸留水が透明になると、氷を加え、攪拌する。１ｍＭフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）１ｍｌを加える。氷を頻繁に加えて１時間洗浄する。２回目の水洗浄を繰返す。攪拌プレート上の氷水浴中にサンプルをいれる。無水エタノールで脱脂し、しかる後エチルエーテルで２回脱脂する。ガラスベトリ皿上に骨物質を広げる。骨片を一夜風乾させる。

−夜乾燥後にその骨片を秤量する。篩（ＵＳＡスタンダード拳シーブ・シリーズ、ニューアーク・ワイア・クロス社（Ｎｅｗａｒｋ　Ｗｉｒｅ　Ｃ１ｏｔｈ　Ｃｏ、）　、　：、−アーク、Ｎに＃４０篩は４２５μｍ以上の粒子を留め、＃１７０篩は９０μｍ以上の粒子を留める〕を用いて９０〜４２５μｍ範囲の骨粒子を単離する。ドライアイスを骨粒子に加えてその物質を冷たく保ちながら１分間かけてマイクロミル（ＭｉｃｒｏＭｉｌｌ）　［サイエンスウェア・ベルアート・プロダクツ（Ｓｃｉｅｎｃｅｗａｒｅ　Ｂｅ１−Ａｒｔ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、ベクアノック、ＮＪ）で４２５μｍ以上の粒子を粉砕する。全回収量が骨の初期重量の２／３以上になるまで４２５μｍ以上の粒子の篩分は及びマイクロミル粉砕ステ・ノブを繰返す。次のステップまで４℃で粒子を貯蔵する。これまでに単離された粒子を秤量する。粒子１グラムにつき、０．６Ｎ　ＨＣＩ　２５ｉｌを加える。４℃で２時間激しく攪拌する。２時間後に攪拌を止め、粒子を沈降させる。

ＨＣＩをデカントする。新鮮な０．６ＮＩ（Ｃ１を加え、再び２時間攪拌する。

ＨＣＩをデカントし、３回目として新鮮な０．６ＮＨＣ１を加え、２時間攪拌する。

ＭＣＩをデカントし、蒸留水ですすぐ。リドマス紙を用いてＨＣＩの存在に関して水のｐＨを調べる。ｐＨが約５〜５．５になるまで蒸留水によるすすぎを続ける。骨粒子をエタノールで３回すすぐ。かきまぜ、沈降させ、上澄を除去する。

上記のように骨粒子をエチルエーテルで３回すすぐ。ガラスプレートで一夜乾燥させる。乾燥された骨粒子は“酸膜ミネラル化性粒子゛と呼ばれる。

酸膜ミネラル化性粒子を下記のように脱タン／＜り質化するニー夜乾燥後にその物質を秤量する。物質１グラム１こつき、ｐＨ６，４の４ＭグアニジンＭＣＩ、１０厘Ｍトリス及び１．０■ＭＰＭＳＦの溶液３０１をビーカー内の骨物質に加える。激しく攪拌しながら４℃で１６時間にわたり抽出する。１６時間抽出後に攪拌を止め、物質を沈降させる。グアニジン溶液を注ぎ出して、蓄える。新鮮なグアニジンＭＣＩ溶液を用いて６〜７時間かけて２回目としてその物質を抽出する。抽出後に溶液を注ぎ出し、先に蓄えられた溶液と合わせる。次いで骨粒子を脱ミネラル化及び脱タンパク質化する。

５Ｃ１＋ｍ透析チューブ（３５００分子量カットオフ）を用いて４℃で蒸留水に対して蓄えられたグアニジンＭＣＩ溶液を透析する。透析後に物質を凍結乾燥し、凍結乾燥物質をｐＨ７，４の４Ｍ尿素−０，０５Ｍトリス−０，１Ｍ　ＮａＣ１に再溶解させる。溶解された物質を円錐形遠心管中でヘパリン−アガロースとミックスし、４℃においてローチーターで一夜ミックスする。ヘパリン−アガローススラリーをカラムに注ぐ。ｐＨ７，４の４Ｍ尿素、０．０５Ｍトリス、０．１Ｍ　ＮａＣ１緩衝液１カラム容量で洗浄する。フラクションを集める。

ｐＨ７，４の４Ｍ尿素、０．０５Ｍトリス、０．２ＭＮａＣ１緩衝液３カラム容量で洗浄する。ｐＨ７，４の４Ｍ尿素、０．０５Ｍトリス、０．７５Ｍ　ＮａＣｌ３カラム容量でその物質を段階的に取出す。二のサンプ／ｌ／　ラフイルター（１０，０００分子量カットオフ）装備５０１アミコン濃縮器〔アミコン社（Ａｍｉｃｏｎ　Ｃｏｒｐ、）、ダンバース、ＭＡ）で約４＝５＋ｎｌに濃縮する。

ＢＣＡ　Ｃビシンコニン酸）タンパク質アッセイ試薬〔ピアース（Ｐｉｅｒｅｅ）、ロックフォード、ＩＬ）を用いてタン／くり質濃度について調べ、ｐＨ７，４の４Ｍグアニジン−０，０１Ｍトリス（３５００分子量力・ノドオフ透析チューブ）で透析する。セファクリル（Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ）　Ｓ　−２００カラムに物質をいれ、フラクションを集める。主タンパク質ピーク含有フラクションを１Ｍ酢酸に対して透析し、活性に関して調べる。

ゲル濾過からの活性フラクションを合わせ、ｐＨ４，６の６Ｍ尿素、２５ｍＭ酢酸ナトリウムに対して３交換して透析する。透析物を同緩衝液で平衡化されたカルボキシメチルセファ０−ス（ＣＭ−セファロース）のカラムにいれる。カラムをｐＨ４，６の６Ｍ尿素、２５ｍＭ酢酸ナトリウムで洗浄し、０〜０．５ＭＮａＣ１勾配を用いて活性を溶出させる。フラクションをタンパク質濃度に関して分析し、ドデシル硫酸ナトリウムゲル電気泳動に付す。主タンノ々り質ビーク開始前後の７フラクシヨンに存在する活性を更に精製のためにプールする。

プールされたＣ　Ｍ−セファロースフラクションを１％酢酸に対して３回各々２４時間かけて透析する。透析物を凍結乾燥させ、タンパク質ベレットをｐＨ７，４の６Ｍ尿素、０．５Ｍ　ＮａＣ１，２５ａＭリン酸ナトリウム３０１に溶解させる。サンプルを亜鉛で荷電されたキレート化セファロースのカラムに適用し、上記緩衝液で平衡化させる。カラムを上記緩衝液で洗浄し、しかる後ｐＨ７，４の６　Ｍ尿素、０．５ｋｉ　ＮａＣ１，２５ｍＭリン酸ナトリウムから９Ｈ４，６の６Ｍ尿素、０．５ＭＮａＣ１，２５１Ｍ酢酸ナトリウムまでの勾配で溶出させる。各フラクションの一部を　Ｉで標識し、ＳＤＳゲル電気泳動により分析する。各フラクションの一部（１００μｇ）を溶出緩衝液４００μｇと合わせ、１％酢酸に対して透析し、活性に関して調べる。高精製分子量範囲（Ｍｒ）２５〜４０ｋＤペプチドを骨誘導アッセイで調べる。

安全有効量の骨誘導性抽出物がビタミンＤ化合物と組合せて投与される。全身治療の目的の場Ｐ、には、投与される骨誘導性抽出物は約１ｐｇ〜約１０Ｍｇ、好ましくは約１ｎｇ〜約１０μｇ、更に好末しくは約１０ｎｇ〜約２．５μｇの量で少くとも１種のＢ　Ｍ　Ｐを含むことが好ましい。

局所治療の目的の場合、投与される骨誘導性抽出物は約１ｐｇ〜約１００μｇ、更に好ましくは約１．５〜約９０μｇ１好ましくは約］、８〜約７５μｇ１更に好ましくは約２，０〜約５０μｇ５更に一層好ましくは約２．２〜約２５μｇ、更に好ましくは約２．３〜約１０μｇ、最も好ましくは約２．５〜約５μｇの量で少くとも１種のＢＭＰを含むことが好ましい。好ましくは、その用量範囲は少くとも約２．５μｇである。

薬学上許容されるキャリアビタミンＤ化合物、骨誘導性抽出物又はＢＭＰは薬学上許容されるキャリアにより投与してもよい。ここで用いられる“薬学上許容されるキャリア”という用語はヒト又はそれより下等の動物への投与に適した１種以上の適合性固体又は液体フィラー希釈剤又は封入物質を意味する。ここで用いられる“適合性゛という用語は通常の使用状況下で医薬組成物の薬学的効力を実質上減少させる相互作用がないように医薬組成物の諸成分か本発明の化合物と及び互いに混合しうることを意味する。薬学上許容されるキャリアは勿論治療されるヒト又はそれより下等の動物への投与にそれらを適させる上で十分（こ高０純度かつ十分に低い毒性でなければならない。

薬学上許容されるキャリアとして役立つ物質の一部の例はラクトース、グルコース及びスクロースのような糖；コーンスターチ及びポテトスターチのようなデンプン；セルロース及びカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロースのようなその誘導体：粉末トラガカント；麦芽：ゼラチン：タルク：ステアリン酸；ステアリン酸マグネシウム；硫酸カルシウム、ピーナツ油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油及びテオブロマ油のような植物油：プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコールのようなポリオール；糖；アルギン酸：無発熱物質水−等張液：リン酸緩衝液−カカオ脂（坐薬基剤）；ツイーンズ（Ｔνｅｅｎｓ■）のような乳化剤；医薬処方で用いられる他の無毒性の適合性物質である。ラウリル硫酸ナトリウムのような湿潤剤及び滑沢剤と着色剤、香味剤、賦形剤、打錠剤、安定剤、酸化防止剤及び保存剤も存在できる。他の適合性医薬添加剤及び活性剤（例えば、ＮＳＡ　Ｉ薬物；鎮痛剤；筋肉弛緩剤）も本発明の組成物で使用上薬学上許容されるキャリアに含めてよい。

例えば、業界公知の局所麻酔剤〔例えば、ベンジルアルコール；ノボカイン（Ｎｏｖｏｃａｉｎｅｏ）；リドカイン〕は薬学上許容されるキャリアに含めてよい。

キャリアの追加例としてはコラーゲン、脱ミネラル化性粒子、セラミック及びメタリックインブラント物質、コラーゲン膜と骨移植片（同種同系又は同種異系）がある。

本発明の化合物と併用される薬学上許容されるキャリアの選択はその化合物が投与される方式により決定される。本発明の化合物を投与する好ましい様式は注射、経口投与、局所経口投与及び鼻咽頭投与又は様式の組合せ（即ち、注射で骨誘導性抽出物及び経口投与でビタミンＤ化合物）による。化合物か注射されるならば、好ましい薬学上許容されるキャリアは無菌の生理塩水である。

経口投与用に適した薬学上許容されるキャリアとしては錠剤及びカプセルに適したものかある。局所経口投与用に適した薬学上許容されるキャリアとしてはパスタ、ゲル及び液剤に適したものかある。鼻咽頭投与に適した薬学上許容されるキャリアとしては層剤、スプレー、ミスト及び散剤に適したものがある。

別々の薬学上許容されるキャリアが本発明の各活性成分と併用されても又は単一の薬学上許容されるキャリアが本発明の活性成分の混合物と併用されてもよい。

いずれのケースにおいても、薬学上許容されるキャリアは実用的なサイズ対投与二関係を形成するために十分な濃度でで用いられる。薬学上許容されるキャリアは全体として本発明の医薬組成物の重量で約０．１〜約９９．９９９９９％、好ましくは約５０〜約９９．９９９％、最も好ましくは約７５〜約９９．９％である。

本発明で有用な具体的な経口及び注射用キャリアはすべて参考のためここに組込まれる下記米国特許明細書で記載されている＋１９８３年８月３０日付で発行されたＢｕｃｋｖａｌｔｅｒらの米国特許第４，４０１，６６３号：１９８４年１月３１日付で発行されたＬａＨａｎｎらの米国特許第４．４２４．２０５号；１９８４年４月１２日付で発行されたＢｕｃｋｖａｌ　ｔｅｒらの米国特許第４，４４３，４７３号；１９８４年１月１５日付で発行されたＬａＨａｎｎらの米国特許第４，４９３，８４８号明細書。本発明の代表的医薬組成物は後記の例で示されている。

経口投与、局所経口投与、鼻咽頭投与及び注射用単位剤形の製造に適した薬学上許容されるキャリアは当業界で周知である。それらの選択は本発明の目的にとり重要でない味、コスト及び／又は貯蔵安定性のような二次的考慮事項に依存しており、当業者により困難せずに行える。本発明の組成物で有用な薬学上許容されるキャリアは後記で更に詳細に記載されている。

Ａ、経口剤形好ましくは、ビタミンＤ化合物は経口剤形で投与される。薬物の錠剤、カプセル、顆粒、バルク散剤及びマイクロカプセルのような固体形を含めて様々な経口剤形が使用できる。これらの経口形は安全有効量、通常少くとも約０．５％、好ましくは約１〜約１０％の本発明の化合物を含む。錠剤は適切な結合剤、滑沢剤、界面活性剤、希釈剤、崩壊剤、着色剤、香味剤、保存剤、流動化剤及び溶融剤を含有させて圧縮、腸溶性コート、糖衣化又はフィルムコートすることができる。

液体経口剤形としては適切な溶媒、保存剤、乳化剤、懸濁化剤、希釈剤、甘味剤、溶融剤、着色剤及び香味剤を含有した水性及び非水性溶液、乳濁液、懸濁液、非沸騰顆粒から再調製される溶液及び／又は懸濁液がある。経口投与上好ましいキャリアとしてはゼラチン及びプロピし・ングリコールがある。本発明の化合物を含有した経口剤形を処方する上で用いてよい薬学上許容されるキャリア及び賦形剤の具体例は参考のためここに組込まれる１９７５年９月２日付で発行されたＲｏｂｅｒｔの米国特許第３，９０３，２９７号明細書で記載されている。固体経口剤形を製造する技術及び組成物は参考のためここに組込まれるＭａｒｓｈａｌ　ｌ　。

”５ｏｌｉｄ　０ｒａｌ　Ｄｏｓａｇｅ　Ｆｏｒｉｓ−（固体経口剤形）。

Ｍｏｄｅｒｎ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、Ｖｏｌ、７（Ｂａｎｋｅｒ及びＲｈｏｄｅｓ編集）。

３５９−４２７（１９７９）で記載されている。錠剤（圧縮、処方及び成形）、カプセル（硬及び軟ゼラチン）及び丸薬を製造する技術及び組成物は参考のためここに組込まれるＲｅｌＩｉｎｇｔｏｎ’ｓ　ＰｈａｒｒＡａｃｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　（Ａｒｔｈｕｒ　０ｓｏ１編集）、１５５３−１５９３（１９８０）で記載されている。

Ｂ８局所経口剤形ここで用いられる“局所経口キャリア゛とは関心ある成分用のキャリアを表し、口腔に局所投与され、そこでしばらく保たれ、しかる後嘆下されるよりもむしろ大部分吐出される組成物を形成する。このような組成物としては練歯磨、歯磨ゲル、歯磨粉、洗口液、マウススプレー、予防ペースト、歯科処置溶液、バイオゲル又は他の徐放性製品等がある。

局所経口キャリアの成分はヒト又はそれより下等の動物の口腔への投与に適し、互いに及び他の成分、特に本発明の経口組成物で用いられるビタミンＤ化合物及び骨誘導性抽出物又はＢＭＰと適合する。このため好ましい局所経口キャリアは練歯磨、歯磨ゲル、歯磨粉、洗口液、マウススプレー、予防ペースト、歯科処置溶液等のために望ましい特徴を与える。本発明の局所経口キャリアには熟練業者に周知であるこのような組成物で典型的に用いられる成分を含む。このような成分としては格別限定されず、抗虫歯剤、抗歯垢剤、抗歯石剤、歯研磨剤、界面活性剤、香味剤、甘味剤、結合剤、保湿剤、増粘剤、緩衝剤、保存剤、着色剤及び顔料、エタノールと水がある。

本発明の好ましい組成物は１ａ歯磨の形である。このような′ａ歯磨の成分には通常歯研磨剤（約１０〜約５０％）、界面活性剤（約０．５〜約１０％）、増粘剤（約０．１〜約５％）、保湿剤（約１０〜約５５％）、香味剤（約０．０４〜約２％）、甘味剤（約０．１〜約３％）、着色剤（約０．０１〜約０．５％）及び水（約２〜約４５％）がある。このような練歯磨は１種以上の抗虫歯剤（フッ化物イオンとして約０．０５〜約０．３％）、抗歯石剤（約０．１〜約１３％）及び抗歯垢剤（約０．１〜約５％）も含有してよい。

本発明の他の好ましい組成物は洗口液及びマウススプレーである。このような洗口液及びマウススプレーの成分には水（約４５〜約９５％）、エタノール（約０〜約２５％）、保湿剤（約０〜約５０％）、界面活硅剤（約０．０１〜約７％）、香味剤（約０．０４〜約２％）、甘味剤（約０．１〜約３％）及び着色剤（約０．００１〜約０．５９６）かある。このような洗口液及びマウススプレーは１種以上の抗虫歯剤（フッ化物イオンとして約０．０５〜約０．３％）、抗歯石剤（約０．０１〜約３％）及び抗歯垢剤（約０．１〜約５％）も含有してよい。

本発明の他の好ましい組成物は歯科溶液である。このような歯科溶液の成分には通常水（約９０〜約９９％）、保存剤（約０．０１〜約０．５％）、増粘剤（約０〜約５％）、香味剤（約０．０４〜約２９６）、甘味剤（約０．１〜約３９６）及び界面活性剤（約０〜約５％）がある。

ここで用いられる“局所経口キャリア゛は本発明の活性成分で含浸されて歯周ポケット中に挿入又は埋め込まれるファイバー、ストリップ又はチューブも表す。

本発明のこのような組成物は既に開示された指示、参考のためここに組み込まれた下記参考文献及び関連周知技術に従い当業者により容易に得ることができる：１９８７年５月１９日付で発行されたＧｏｌｕｂ、ＭｃＮａｍａｒａ　＆ＲａｍａＩ！ｕｒｔｈｙの米国特許第４，６６６．８９７号：１９８７年１１月４日付で公開されたＢａｋｅｒの欧州特許出願第２４４，１１８Ａ１号；１９８８年１０月１９日付で公開されたＫａｍｅｔａｋａ、Ｍｉｙａｚａｋｉ、Ｈａｙａｓｈｉ、Ｈａｎｄａ　＆Ｋａｉｅｄａの欧州特許出願第２８６，８０２Ａ２号；Ａｄｄｙ、Ｍ、Ｌ、Ｒａｗｌｅ、Ｒ，Ｈａｎｄｌｅｙ、Ｈ，Ｎｅｖｉａｎ　＆　Ｊ、Ｃｏｖｅｎｔｒｙ。

”Ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｃｅｎｔ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏ「ａｃｒｙｌｆｃ　５ｔｒｉｐｓ　ａｎｄ　ｄｉａｌｙｓｉｓ　ｔｕｂｉｎｇ　ｒｏｒ　１ｏｃａｌ　ｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙ”　（局所薬物送達用アクリルストリップ及び透析チューブの開発及びインビトロ評価）、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ’Ｐｅｒｊｏｄｏｎ　ｔｏ　ｌ　ｏｇｙ　、　Ｖｏ　Ｉ　、　５３　（１９８２）　、　ｐｐ、　６９３−６９８　ＨＧｏｏｄｓｏｎ　。

Ｊ、Ｍ、、Ａ、Ｄ、Ｈａｆ’ｌ’ａｊｅｅ　＆　Ｓ、Ｓ、５ｏｃｒａｎｓｋｙ、 ”Ｐｅｒｌｏｄｏｎｔａｌｔｈｅｒａｐｙ　ｂｙ　１ｏｃａｌ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ−（テトラサイクリンの局所送達による歯周療法）、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ’Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ、６（１９７９）、ｐｐ、８３−９２；Ｇｏｏｄｓｏｎ、Ｊ、、Ｄ、Ｈｏ１ｂｏｒｏｖ、Ｒ，Ｄｕｎｎ、Ｐ、Ｈｏｇａｎ　＆　Ｓ、Ｄｕｎｈａｍ。

”Ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ　ｔｅｔｒａｃｙｃｌｆｎｅ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｆｉｂｅｒｓ　ｆｏｒｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｔｏ　Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ　ｐｏｃｋｅｔｓ”　（歯周ポケットへの制御的送達用にモノリシックテトラサイクリンを含有したファイバー）、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｒＰｅｒｔ　ｏｄｏｎｔｏ　ｌｏｇｙ、Ｖｏ　ｌ　、　５４　（１９Ｈ）　、　Ｉ）Ｌ　５７５−５７９　；Ｄｕｎｎ、Ｒ，、Ｊ　。

Ｇｉｂｓｏｎ、Ｂ、Ｐｅｒｋｉｎｓ、Ｊ、Ｇｏｏｄｓｏｎ　＆　Ｌ、Ｌａｕｆｅ、−Ｆｉｂｒｏｕｓｄｅｌｉｖｅｒｙ　５ｙｓｔｅＩＩｓ　ｆ’ｏｒ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ！ａｔ　ａｇｅｎｔｓ−（抗菌剤用の繊維送達系）、Ｐｏｌｙｍｅｒ　５ｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ。

３２（１９８５）、ｐｐ、４７−５９；Ｄｕｎｎ、Ｒ，、Ｊ、Ｇｉｂｓｏｎ、Ｂ、Ｐｅｒｋｉｎｓ、Ｊ。

Ｇｏｏｄｓｏｎ　＆　Ｌ、Ｌａｕｆｅ、−Ｆｉｂｒｏｕｓ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｓｙｓｔｅｍｓ　ｆｏｒａｎｔｉｓ＋１ｃｒｏｂｉａｌ　ａｇｅｎｔｓ”（抗菌剤用の繊維送達系）。

Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｍａｔｅｒｆａｌ　５ｃｉｅｎｃｅ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｖｏｌ、５１（１９８４）。

ｐｐ、２８−３１；０１ａｎｏｆ’ｆ、Ｌ、＆　Ｊ、Ａｎｄｅｒｓｏｎ、−Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｒｅｌｅａｓｅ　ｏｒ　ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ−ＩＩＩ：　Ａ　ｐｈｙｓｆｏｌｏｇｊｃａ！ｐｈａｒｓａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ　ｍｏｄｅｌ　ｏｒｔｈｅ　ｐｒｅｇｎａｎｔ　ｒａｔ”　（テトラサイクリンの制御的放出−１１１＝妊娠ラツトの生理学的薬物動態モデル）、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ’ 　Ｐｈａｒｍａｃｏｋｔｎｅｔｊｃｓ　ａｎｄＢｉｏｐｈａｒｓａｃｅｕｔ　ｉｃｓ　、　Ｖｏｌ　、　８　（１９８０）　、　ｐｐ、　５９９−８２０　；Ｅ　Ｉ　ｋａｙａｉ　、　ＲC。

Ｍ、Ｆｒｉｅｄｍａｎ、＾、５ｔａｂｈｏｌｚ、Ａ、５ｏｓｋｏｌｎｅ、Ｍ、５ｅｌａ　＆　Ｌ、Ｇｏｌｕｂ。

”５ｕｓｔａｉｎｅｄ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｄｅｖｉｃｅ　ｃｏｎｔａｔｎ＋ｎｇ　５ｊｎｏｃｙｃｌｉｎｅｒｏｒ　１ｏｃａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ’　ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ旧５ｅａｓｅ”（歯周疾患の局所治療用にミノサイクリンを含有した徐放性装置）、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｒＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅ１ｅａｓｅ、Ｖｏｌ、７（１９８ｇ＞、ｐｐ。

２３１−２３６；Ｇｏｏｄｓｏｎ、Ｊ、、Ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ　ｒｉｂｅｒ　ｔｈｅｒａｐｙ、１．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｄｅｓｉｇｎ”（テトラサイクリンファイバー療法のマルチセンター評価、１．実験的デザイン）Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｄｅｎｔａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ。

Ｖｏｌ、８ｇ（１９８９）、ｐ、Ｌ９７：そこで引用された参考文献Ｃ８注射剤形本発明の活性成分は注射する場合にも有用である。骨成長活性を示す上で安全かつ有効である本発明の活性成分の用量は治療される具体的な症状、症状の重篤度、治療期間、用いられる化合物の具体的な混合物及びその使用濃度と担当医の特殊な知識及び専門技術内に属する同様のファクターに応じて、あらゆる薬物化合物の使用に伴う妥当な利益／危険比と釣り合って変動する。加えて、それより少い用量でも局所的な又はわずかな骨成長が望まれるだけである場合に利用され、一方それより多い用量も全身的な又はかなりの骨成長が望まれる場合に利用される。

注射剤を製造する方法及び物質はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’５Ｐｈａｒａａｃｅｕｔｊｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ、１７ｅｄ、、１９８５．Ｃｈａｐｔｅｒ　８５．ｐ。

１５１８でみられ、その開示は参考のためそれら全体としてここに組み込まれる。好ましくは、注射用組成物は水溶液である。

水溶液は水（好ましくは約８０〜約９９．９９９％）、適切な可溶化剤、様々なタイプの酸及び抗菌剤からなることが好ましい。いくつかの可溶化剤が知られている。

このような可溶化剤の例は下記のとおりである：尿素化合物（例えば、尿素、ウレタン）；界面活性剤〔例えば、ツイーン、スパン、デオキシコール酸ナトリウム及びプルロニクス（Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ））　；セルロース剤（例えば、カルボキシメチルセルロース）：炭水化物（例えば、ソルビトール、マンニトール）；ビタミンＢ（例えば、ニコチンアミド）；キサンチン誘導体；アルコール（例えば、ベンジルアルコール）。用いられる酸の例として（よ以下があるニゲルクロン酸、ガラクツロン酸、フマル酸、ケ゛ンチシン酸、酢酸、クエン酸及びラクトヒ゛オン酸。使用できる抗菌剤のタイプは以下である：硝酸フェニル水銀、チメロサール、塩化ペンセトニラム、塩化ベンザルコニウム、フェノール、クレゾール及びクロロブタノール。

業界公知の局所麻酔剤（例えば、ベンジルアルコールノボカイン■、リドカイン）も含有させてよｔ）。

好ましくは、骨誘導性抽出物及びＢ　Ｍ　Ｐは注射剤形で投与される。

下記例は本発明の範囲内に属する好ましくＡ態様（二つ（１て更に記載及び説明する。例は説明目的で単１こ示されており、本発明の制限として解釈されるべきでなく、その多くのバリエーションがその精神及び範囲力１ら逸脱せずに可能である。

笠ユ骨折修復用に骨誘導性抽出物を含む注射組成物及び１。

２５−ジヒドロキシビタミンＤ３を含む経口組成物（よ慣用的ミキシング技術を利用して下記成分を混ぜる二と１こより製造する。

Ｂ　Ｍ　Ｐ組成物ＢＭＰ−１　０．０４１、２５−ジヒドロキシビタミンＤ　３０．０１コーンスターチ　１８．４９ラクトース　６３．ＱＯＢＭＰ組成物０．１ｃｃを骨折整復時とその後１日１回骨折部位に注射する。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３組成物１００μｇを骨折整復の２４時間前にその後１日１回経口投与する。ＢＭＰ及び１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ　は望ましい修復が果たされるまで、好ましくは７日間にわたり投与する。

肚骨折修復用の注射組成物は慣用的ミキシング技術を利用して下記成分を混ぜることにより製造する。

成分　組成物の重量％ＢＭＰ−２０，０４２５−ヒドロキシビタミンＤ　２０．０１ＮａＣＩ　Ｏ、０９注射用無菌水　ｑ、ｓ。

１００．００組成物０．１ｃｃを骨折整復時とその後望ましい修復が果たされるまで１日１回骨折部位に注射する。

例ＩＩ＋再成形手術後に骨成長を誘導するための組成物は慣用的ミキシング技術を利用して下記成分を混ぜることにより製造する。

成分　組成物の重量％ＢＭＰ−３０，０４１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ　２０．０ＬＮａＣｌ　０　、９０無菌水　ｑ、ｓ・１００．００外科的に再成形された骨の表面積Ｃ−当たり組成物０．１ｃＣを骨表面上に直接沈着させる。

例ＩＶ治癒を促進して自然骨と人工補綴物とでより強い結合を形成させるための組成物は慣用的ミキシング技術を利用して下記成分を混ぜることにより製造する。

炙至　組成物の重量％２４．２５−ジヒドロキシビタミンＤ　３０．０＋補綴物にすぐ近い自然骨の表面積Ｃ−当たり組成物０．１ｃｃを自然骨上に直接沈着させる。

煕ヱ歯周療法用の局所経口キャリア組成物は慣用的ミキシング技術を利用して下記成分を混ぜることにより製造する。

１００．００患者が慣用的な歯周外科療法を用いて処置された後、露出歯当たり組成物０．１ｃｃを手術部位に沈着させる。

次いで軟質組織弁を縫合して手術部位を閉じる。この治療は疾患により失われた歯周組織で歯槽及び支持骨を修復するために有用である。

例■１骨粗壓症の治療用にＢＭＰ　−２，３，４及び５を含む注射組成物と１．２５− ジヒドロキシビタミンＤ３を含む経口組成物は慣用的ミキシング技術を利用して下記成分を混ぜることにより製造する。

ＢＭＰ−２０，００１８ＭＰ−３０，００１８ＭＰ−４０，００１８ＭＰ−５０，００１Ｎａｉｌ　Ｏ，９００無菌水　ｑ、ｓ。

１００．０００１．２５−ジヒドロキシビタミンＤ　３０．０１コーンスターチ　１８．４９ラクトース　６３．００タルク　１ｇ、００ステアリン酸　０．５０１００．００ＢＭＰ組成物１ｃｃを１日１回静脈注射する。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３組成物５０ｍｇを骨誘導性抽出物注射の１時間以内にその後１日１回経口授与する。

骨誘導性抽出物及び１．２５−ジヒドロキシビタミンＤ３は７日間にわたり投与する。

例Ｖｌ＋偽関節骨折の骨成長を誘導するための組成物は慣用的ミキシング技術を利用して下記成分を混ぜることにより製造する。ここで用いられる“偽関節骨折”とは正常に治癒しなかった骨折を意味する。

成分　組成物の重量％ＢＭＰ−４０，００４１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ　３０．０１酸脱ミネラル化骨粒子　９０．００ＯＮａＣ１Ｏ，９００注射用無菌水　ｑ、ｓ。

ｔｏｏ、ｏｏ。

骨折整復時に十分量の上記組成物を偽関節部位に直接沈着させ、それにより骨欠損を補う。

配列リスト（１）一般情報：（ｉ）出願人：　５ＴＯＮＥ、ＲＯＧＥＲＬ。

（１、発明の名称：骨誘導用治療処方物（ｆｉｔ）配列の数ニア（ｌｖ）通信住所：（Ａ）宛名：ザ、ブロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー（Ｂ）通り：Ｌ１８１０イースト・マイアミ・リバー・ロード（Ｃ）市ニシンシナティ（Ｄ）州ニオバイオ（Ｅ）国：　Ｕ、Ｓ、Ａ。

（Ｆ）ＺＩＰ：４５２３９−８７０７（Ｖ＞コンピューター判読形：（＾）媒体タイプ：フロッピーディスク（Ｂ）コンピューター：　ＩＢＮ　ＰＣ適合（Ｃ）操作システム：　ＰＣ−ＤＯ８／ＭＳ−Ｄ６Ｓ（Ｄ）ソフトウェア：パテントイン・リリースｓｉ、ｏ。

バージョン＄１．２５（ｖｊ）現出願データ：（Ａ）出願数：（Ｂ）圧願日：（Ｃ）分類：（ｖｉｉｉ）代理人情報：（Ａ）名称：　Ｃｏｒｓｔａｎｊｅ、ＢｒａｈＩＩＩＪ。

（Ｂ）登録番号：　３４，８０４（ｉｘ）電気通信情報：（Ａ）電話＋　５１３−２４５−２８５８（Ｂ）ファックス：　５１３−７４１ −３０１２（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：ｌに関する情報：（１）配列特徴：（Ａ）長さ：　２４８７塩基対（Ｂ）タイプ：核酸（Ｃ）鎖性：二本（Ｄ）トポロジー：直鎖（１１）分子タイプ：　ｃＤＮＡ（ｘｔ）　配列記ｆｉ　：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１：ＡＣＣＧＣＣＡＣＣＴ　ｎＣＣＡＴＣＧｎ　ＣＧ丁ＱＡＧＡＡＣＡ　ＴＣＣＡＧＣＣＡＧＧ　ＧＣＡＧＧＡＧＴＡＴ　ＭＣＴＴＣＣＴＧＡ　V８０ＡＧＡＴＧＧＡＧＣＣＴＣＡＧ（、ＡＧＧＴＧ　ＧＡＧＴＣＣＣＴＧＧ　ＧＧＧＡＧＡＣＣＴＡ　ＴＧＡＣＴＴＣＧＡＣＡＧＣＡＴＣＡＴＧb８４０ＴＧＣＡＧＴＴＴＧＡ　ＣＴＴＣｍＱＡＧ　ＡＣＡ（＆ＡＧＧＧＣＡ　ＡＴＧＡＴＧＴＧＴＧ　ＣＭＧＴＡＣ（、ＡＣＴＴＣＧＴＧ［、ＡＧf　１９８０ＴＧＣＧＣＡＧＴＧＧ　ＡＣＴＣＡＣＡＧＣＴ　ＧＡＣＴＣＣＡＡＧＣＴＧＣＡＴＧＧＣＡＡ　ＧＴＴＣＴＧＴＧＧＴ　ＴＣＴＧＡＧＡＡＧb２Ｑ４゜ＡＧＴＡＡＡＡＱＡＧ　ＧＧＡＣＣＣＣＴＣＣＧＴＣＣＴＧＣ２４８７（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２に関する情報：（１）配列特徴：（Ａ）長さ：　１５４７塩基対（Ｂ）タイプ：核酸（Ｃ）錆性：二本（Ｄ）トポロジー：直鎖（１１）分子タイプ：　ｃＤＮＡ（ｘｌ）配列記載：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２：ＧＡＧＡＡＧＧＡＧＧ　ＡＧＧＣＡＡＡＧＡＡ　ＡＭ；ＧＡＡＣＧＧＡ　ＣＡＴｒＣＧＧＴＣＣＴＴＧＣＧＣＣＡＧＧ　ＴＣＣＴＴＭＡＣＣQ４０ＡｃＡＧＴｍＴＣＣＡＴＧＴＣＧＡＣＣｉ　ＣＴＣｍＣＡＡＴ　ＧＧＡＣＧＴＧＴＣＣＣＣＧＣＧＴＧＣＴＴ　ＣＴｒＡＧＡＣＧＧＡ　３０O ＡＣＴＣＴＭＧＡＴ　ＴＣＣＴＡＡＧＧＣＡ　Ｔｌｌ；ＣＴＧＴＧＴＣＣＣＧＡＣＡＧＡＡＣ丁　ＣＡＧＴＧＣＴＡＴＣＴＣにＡＴＧＣＴＧs　１４４０ＡＣＣＴＴＧＡＣｃＡＧＡＡＴＧＡＡＡＡＧ　ＧＴＴＧＴＡＴＴＡＡ　ＡＧＡＡＣＴＡＴＣＡ　ＧＧＡＣＡＴＧＧＴｒ　ＧＴＧＧ＾ＧＧＧＴs　Ｉ　５ｏＯ（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３に関する情報：（ｉ）配列特徴：（Ａ）長さ：　１７７４塩基対（Ｂ）タイプ：核酸（Ｃ）錆性：二本（Ｄ）トポロジー：直鎖（１１）分子タイプ：　ｃＤＮＡ（ｘｌ）配列記ｇ　：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３：ＧＣＭＣＡＣＧＧＴ　ＴＣＧＣＡＧＣｍ　ＣＧＧＧＣＧＣＣＡＱ　ＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＴＣＴｒＧＡＡＡＧＡ　ＡＭＧＧＡＣＴＧＴ　６６K ＡＴＡＴＣＴＴＣＡＡ　ＴＣＴＧＡＣＡＴＣＧ　ＣＴＡＡＣＣＡＡＧＴ　ＣＴＧＡＡＡＡＣＡＴ　ｍＧＴｃＴＧｃｃ　ＡＣＡＣＴＧＴＡＴｒ@７２０Ｃ丁ＧＧＣＡＡＡＧＡ　ＡＣＴＣＡｍＧＡ　ＡＴＧＣｎＡＡ丁Ｔ　ＣＡＡＴ　１７７４（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４に関する情報：（ｉ）配列特徴：（Ａ）長さ：　１７５１塩基対（Ｂ）タイプ：核酸（Ｃ）鎖性：二本（Ｄ）トポロジー：直鎖（ｉｔ）分子タイプ：　ｃＤＮＡ（ｘｉ）配列記載：　ＳＥＱ　ＩＤＮ０：４：ＣＣＣＡＧＧ＋ＩＡＣＣＡＧＴＧＡＡＡＡＣＴ　ＣＴＧＣＴｒＴｒＣＧ　ＴｒＴＣＣＴＣＴｒｒ　ＡＡＣＣＴＣＡＧＣＡ　ＧＣＡＴＣＣＣＴfＡ　８４０ＱＡＡＣＧＡＧＧＴＧ　ＡＴＣＴＣＣＴＣＴＧ　ＣＡＱＡＧＣＴＴＣＧ　ＧＣＴＣＴＴＣＣＧＧ　ＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧ　ＡＣＣＡＧＧＧＣbＣ９００ｃＡＣＴＴＴＴＡＴＴ　Ｔ　１７５１（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５に関する情報：（１）配列特徴：（＾）長さ＋　２１５３塩基対（Ｂ）タイプ・核酸（Ｃ）鎖性：二本（Ｄ）トポロジー・直鎖（ＩＩ）分子タイプ・ｃＤＮＡ（Ｘｉ）配列記載：　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：訃ＣＴＧＧＴＡＴＡＴＴ　ＴＧＴＧＣＣＴＧＣＴ　ＧＧＡＧＧＴＧＧＡＡ　ＴＴＡＡＣＡＧＴＡＡ　ＧＡＡＧＧＡＧＡＭ　ＧＧＧＡＴＴＧＡＡs　６０ＧＧＡＣＡＧＡＴＡＴ　ＡＴＡＴＴＣＣＭＣＡＣＣＭＧＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＴ　ＡＧＡＴＣＴＧＴＧＡ　ＴＴＣＡＧＡＡＡＴＣ２４O ＴＧＡＣＣＡＡＴＧＡ　ＡＧＡＡＡＡＴＣＣＴ　ＧＭＧＡＧＴＣＧＧ　ＡＧＴＡＣＴＣＡＧＴ　ＭＧＣＧＣＡＴＣＣＴＴＧＧＣＡＧＭＧ　１O２０ＡＧＡＣＣＡＣＡＧＧ　ＧＧＣＡＡＧＡＡＡＧ　ＧＧＡＴＡＣＣＣＡＧ　ＣＣＴＣＴＣＣＣＡＡ　ＴＧＧＣＴＡＴＣＣＴ　ＣＧＴＣＧＣＡＴ`Ｃ１０８０ＴＡＡＧＧＴＴＴＡＴ　ＧＧＣＴＧＣＡＡＴＡ　ＡＡＡＡＧＣＡＴＡＣＴＴＴＣＡＱＡＣＡＡ　ＡＣＡ（ａＡＡＡＡＡＡ　ＡＭ　２１５３（２）ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎ０ＸＳに関する情報：（１）配列特徴：（Ａ）長さ：　２９２３塩基対ＣＢ）タイプ：核酸（Ｃ）鎖性：二本（Ｄ）トポロジー：直鎖（１１）分子タイプ：　ｃＤＮＡ（ｘｌ）配列記載：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：Ｂ：ｎｃｃＴｃＭｃＧ　ＡＣＧＣＧＧＡＣＡＴ　ＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＴＴＧＴＧＡＡＣＣＴＧＧＴＧｃＡＧＴＡ　ＣＧＡＣＭＧＧＡＧ　８４O ＴｒＣＴＣＣＣＣＴＣＧＴＣＡＧＣＧＡＣＡ　ＣＣＡＣＭＡＧＡＧ　ＴＴＣＡＡＣＴｒＣＡ＾ＣＴＴＡＴＣＣＣＡ　ＧＡＴＴＣＣＴＱＡＧ　X００ＧＴＣＣＡＣＧＴＧＣＧＣＡＣＣＡＣＣＡＧ　ＧＴＣＡＧＣＣＴＣＣＡＧＣＣＧＧＣＣＣＣＱＡＣＡＡＣＡＧＡＧ　ＴＣＧＴＡＡＴＣＧＣ’@１３２０ＴＴＧＴＴＡＧＴＡＡ　ＡＴＡＧＧＱＡＡＡＡ　ＴＭＴＣＴＣＡＡＡ　ＧＧＡＧＴＴＡＡＡＴ　ＧＴＡＴＴＣＴＴＧＧ　ＣＴＡＪμＧＧＡＴb２１００（２）ＳＥＱ　１０　ＮＯニアに関する情報：（１）配列特徴：（Ａ）長さ：　１４４８塩基対（Ｂ）タイプ：核酸（Ｃ）鎖性：二本（Ｄ）トポロジー：直鎖（１１）分子タイプ：　ｃＤＮＡ（ｘｌ）配列記載：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯニア：ＧＴＧＡＣＣＣＡＧＣＧＧＣＧＣＧＧＡＣＧ　ＧＣＣＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＴＧＣＣＡ　ＣＣＴＧＧＧＧＣＧＧ　ＴＧＣＧＧＧＣＣＣＧ@６０ＧＣＣＴＧＴＭＧＡ　ＡＧＣＡＣｃＡＣＣＴ　ＧＴＡＴＧＴＣＡＧＣＴＴＣＣｃＡＧＡＣＣＴＧＧＨＣＴＧＨＣＡ　ＧＧＡＣＴＧＱ＾ＴＣ１P４０ＡＴＣＧＣ（ＩｃｃＴＧ　ＭＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＣＣＴＡＣＴＡＣＴＧＴＱＡＧＧＧＧＧ　ＡＧＴＧＴＧＣＣＴＴ　ＣＣＣＴＣＴＧＡＡＣP２００本発明はある好ましい態様及び例に関してここでは記載されてぎた。明白なバリエーションは当業者にとり明らかである。したがって、本発明はそれにではなく下記国際調査報告 ―・ＤａｇｍａｒＦＲＡＮＫ国際調査報告フロントページの続き（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＳＥ）、０Ａ（ＢＦ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、ＧＮ、ＭＬ、ＭＲ，ＳＮ、ＴＤ、ＴＧ）、ＡＵ、　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　Ｃ３，ＦＩ、　ＨＵ、ＪＰ。

ＫＰ、　ＫＲ，ＬＫ、　ＭＧ、　ＭＮ、　ＭＷ、　Ｎｏ、　ＰＬ、　ＲＯ，ＲＵ、ＳＤ

Claims

【特許請求の範囲】

１．ａ．安全有効量のビタミンＤ化合物：ｂ．ＢＭＰ−１、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ −３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６及びＢＭＰ−７からなる群より選択される安全有効量のＢＭＰ；及びｃ．安全有効量の薬学上許容されるキャリア；を含む治療の必要な哺乳動物において新たに骨成長を生じさせるための組成物。
２．ビタミンＤ化合物の安全有効量が約３０ｎｇ〜約１０μｇ、ＢＭＰが少くとも約２．５μｇである、請求項１に記載の組成物。
３．ビタミンＤ化合物がビタミンＤ２、ビタミンＤ３、１ａ−ヒドロキシビクミンＤ３、１ａ−フルオロビタミンＤ３、３−デオキシ−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、２５−ヒドロキシ−５，６−トランスビタミンＤ３、２５−ヒドロキシビタミンＤ２、２５−ヒドロキシビタミンＤ３、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ２、２４，２５−ジヒドロキシビタミンＤ２、２４，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３及び１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３からなる群より選択される、請求項２に記載の組成物。
４．ビタミンＤ化合物が１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項３に記載の組成物。
５．薬学上許容されるキャリアが注射用キャリアである、請求項４に記載の組成物。
６．薬学上許容されるキャリアが局所経口用キャリアである、請求項４に記載の組成物。
７．ＢＭＰが骨誘導性抽出物の成分であり、骨誘導性抽出物がＢＭＰ−１、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６及びＢＭＰ−７からなる群より選択される１種以上のＢＭＰを含む、請求項２〜７のいずれか一項に記載の組成物。
８．安全有効量のビタミンＤ化合物をＢＭＰ−１、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６及びＢＭＰ−７からなる群より選択される安全有効量のＢＭＰと組合せて哺乳動物に投与することからなる治療の必要な哺乳動物において新たに骨成長を生じさせるための方法。
９．ビタミンＤ化合物の安全有効量が約１ｎｇ〜約１ｍｇ、ＢＭＰの安全有効量が約１ｐｇ〜約１００μｇである、請求項８に記載の方法。
１０．ビタミンＤ化合物の安全有効量が約３０ｎｇ〜約１０μｇ、ＢＭＰの安全有効量が少くとも約２．５μｇである、請求項９に記載の方法。
１１．ビタミンＤ化合物がビタミンＤ２、ビタミンＤ３、１ａ−ヒドロキシビタミンＤ３、１ａ−フルオロビタミンＤ３、３−デオキシ−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３、２５−ヒドロキシ−５，６−トランスビタミンＤ３、２５−ヒドロキシビタミンＤ２、２５−ヒドロキシビタミンＤ３、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ２、２４，２５−ジヒドロキシビタミンＤ２、２４，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３及び１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３からなる群より選択される、請求項１０に記載の方法。
１２．ビタミンＤ化合物が１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である、請求項１１に記載の方法。
１３．ビタミンＤ化合物及びＢＭＰの投与が注射による、請求項１１に記載の方法。
１４．ビタミンＤ化合物及びＢＭＰの投与が局所経口である、請求項１１に記載の方法。
１５．ビタミンＤ化合物の投与が経口、ＢＭＰの投与が注射による、請求項１１に記載の方法。
１６．ＢＭＰが骨誘導性抽出物の成分であり、骨誘導性抽出物がＢＭＰ−１、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６及びＢＭＰ−７からなる群より選択される１種以上のＢＭＰを含む、請求項８〜１５のいずれか一項に記載の方法。