JPH06504115A - Automatic tissue staining for immunohistochemistry - Google Patents
Automatic tissue staining for immunohistochemistryInfo
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Classifications
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。 (57) [Summary] This bulletin contains application data before electronic filing, so abstract data is not recorded.
Description
【発明の詳細な説明】 免疫組織化学のための自動的組織染色 本発明は免疫組織化学に関するものであり、より詳細にいうならば、組織切片又 は細胞標本の自動染色装置に関するものである。[Detailed description of the invention] Automatic tissue staining for immunohistochemistry The present invention relates to immunohistochemistry, and more specifically, to tissue sections or relates to an automatic staining device for cell specimens.
組織化学は動物及び植物組織の化学組成及び構造を研究する生化学の一分野であ る。それは顕微鏡、Ｘ線回折及び放射性トレサー法を使用して骨、血液、筋肉及 びその他の動物及び植物組織の細胞組成及び構造を研究することを含む。Histochemistry is a branch of biochemistry that studies the chemical composition and structure of animal and plant tissues. Ru. It uses microscopy, X-ray diffraction and radiotracer methods to analyze bones, blood, muscles and and the study of the cellular composition and structure of other animal and plant tissues.
免疫組織化学は、標識抗体及びその他のリガンド（核酸プローブを含む）を用い て分子（マーカー）の細胞内分布を直接見るために有用である。標識は酵素、ラ ジオアイソトープ、および蛍光物質を含む。この方法を全細胞に適用して例えば リンパ腫（白血球癌）を確認することができ、又はこの方法を組織切片に適用し て例えば癌診断をすることかできる。Immunohistochemistry uses labeled antibodies and other ligands (including nucleic acid probes). This is useful for directly observing the intracellular distribution of molecules (markers). Labels are enzymes, Contains geoisotopes and fluorescent substances. Applying this method to whole cells, e.g. Lymphoma (white blood cell carcinoma) can be confirmed or this method can be applied to tissue sections. For example, it can be used to diagnose cancer.
特異的（又は−次）抗体は直接標識できる。別法として、そしてよりしばしば、 標識をつけた二次抗体用いて第一の抗体に特異的に結合させる。また、問題の（ 酵素的）マーカーを発現させ、又は非特異的効果を除去するために、組織の前処 理か必１ 要であることもある。Specific (or secondary) antibodies can be directly labeled. Alternatively, and more often, A labeled secondary antibody is used to specifically bind to the first antibody. Also, the problem ( preconditioning of tissues to express enzymatic) markers or eliminate nonspecific effects; Sometimes it is logical or necessary.
目に見えるシグナルを増幅するために多数の方法か開発されたが、増幅には方法 の工程か増加することか多い。結局、酵素標識の場合には、標識部位に着色生成 物を生じる基質が使用される。その後周囲組織を逆染色してコントラストをつけ る。そこで、染色を行うための大部分のプロトコルは、種々の時間のインキュベ ーションを多数含み、その間には使用ずみの試薬を除去するための洗浄段階かあ る。Numerous methods have been developed to amplify visible signals; There are many cases where the process increases. After all, in the case of enzyme labeling, color is generated at the labeled site. A substance producing substrate is used. The surrounding tissue is then reverse stained to provide contrast. Ru. Therefore, most protocols for performing staining involve incubation for various times. The process includes multiple analytes, with multiple wash steps in between to remove used reagents. Ru.
少量の試薬（５０〜２００マイクロリツター）を適用して組織を十分に覆うよう に、また洗浄段階には使用ずみの試薬を完全に除去し、しかもスライドから組織 がたまたま失われるのを防ぐように、各操作にはかなりの注意が必要である。こ うして、手順中に多数のスライドが含まれる場合には、この方法は大きな労力並 びに長時間を要し、再現性が欠如することもある。Apply a small amount of reagent (50-200 microliters) to ensure sufficient tissue coverage. Additionally, the washing step completely removes used reagents and removes tissue from the slides. Considerable care must be taken with each operation to prevent accidental loss. child Therefore, this method requires a lot of effort when a large number of slides are involved in the procedure. It takes a long time and may lack reproducibility.
組織染色のために現在用いられている手動的方法は、すべての操作を手で行う熟 練技術者を必要とする。The manual methods currently used for tissue staining are difficult to perform, with all operations performed by hand. Requires a trained engineer.
先ず第一に、ガラス標本スライドをトレー上に担持せしめる。染色が周囲温度よ り高い温度で行われる場合には、特殊にデザインされた、高湿度を保持する温度 制御されたテンプレートを用いて加熱するのか普通である。First of all, a glass specimen slide is supported on a tray. dyeing at ambient temperature Specially designed, high-humidity temperature Heating is typically done using a controlled template.
スライドを、手動計量分配ボトルからの緩衝液流て洗う。その後スライドを垂直 に置いて液体をしたたらせて液体を切り、試料周囲をペーパータオル材料で拭く 。Flush the slides with buffer from a manual dispensing bottle. Then slide vertically Drain the liquid and wipe the area around the sample with paper towel material. .
液体が組織サンプルを覆って広がるように、目で見て配置した手動的ピペッタ− から、生化学的作用物質か供給される。短い有効寿命をもつ化学試薬は標準ピペ ッタ−によってバイアル中で手動的に混合される。Manual pipettor visually positioned to spread the liquid over the tissue sample The biochemical agents are supplied by Chemical reagents with a short useful life should be treated with standard pipettes. Mix manually in the vial with a filter.
これらの操作の順序及び時間のコントロールはストップウォッチとノートバット を用いて手動で行われる。The order and time of these operations can be controlled using a stopwatch and a notepad. This is done manually using .
このような手動プロセスは本来不正確で時間がかかり、高価につくことは明らか である。このようなプロセスを自動化する試みがこれまでに行われた。このよう な試みの詳細を以下に記す。It is clear that such manual processes are inherently inaccurate, time-consuming, and expensive. It is. Attempts have been made to automate such processes. like this The details of this attempt are described below.
（１）ストロス（５ｔｒｏｓｓ、 Ｗ、 Ｐ、 ）、ジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ、 Ｍ、 ）、メイソン（Ｍａｓｏｎ、Ｄ、Ｙ、） Ｊ、 Ｃｌ１ｎ、 Ｐａｔｈｏｌ、 Ｊａｎ １９８９４２巻（１）、１０６〜 １１２ページこれらの著者は現存の組織処理機器［Ｈｉｓｔｏｋｉｎｅｔｔｅ Ｅ７３２６ ：ブリティッシュ アメリカンオプティカル コーポレーション（ Ｂｒｉｔｉｓｃｈ Ａｍｅｒｉｃａｎ ０ｐｔｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏ ｎ）］を改良し、組織の免疫組織化学的染色を半自動的に行えるようにした。ス ライドをラックに置き、それを試薬タンクに浸す。試薬タンクは４力月まで繰り 返し用いられる。この方法は（ＡＰＰＡＡＰ）アルカリ性ホスファターゼ染色法 のみに適用され、−次抗体又は基質の適用を自動化してはいない。(1) Stross (5 tross, W, P, ), Jones (Jones, M,), Mason (D, Y,) J, Cl1n, Pathol, Jan 198942 (1), 106~ Page 112 These authors describe existing tissue processing equipment [Histokinette] E7326: British American Optical Corporation ( Britisch American 0ptical Corporation n)] has been improved to enable semi-automatic immunohistochemical staining of tissues. vinegar Place the ride on a rack and submerge it into the reagent tank. The reagent tank can be used up to 4 months. used in return. This method is (APPAAP) alkaline phosphatase staining method. It does not automate the application of antibodies or substrates.
（２）ブリがティ（Ｂｒｉｇａｔｉ、Ｄ、Ｊ、） 、バジョン（Ｂｕｄｇｅｏｎ 。(2) Brigati, D, J, Budgeon .
し、Ｒ，）、アンガー（Ｕｎｇｅｒ、 Ｅ、 ） 、ケブラー（Ｋｏｅｂｌｅｒ 、Ｄ、） 、りごｔＰ権ｆ−聞誼を陀杓出す新短のカバースリ・ツブ装置を報告 才モ（Ｃｕｏｍｏ、 Ｃ，） 、ケネディ（Ｋｅｎｎｅｄｙ、Ｔ、） 、ペルト モ（Ｐｅｒｄｏｍｏ、 Ｊ、 Ｍ、 ） Ｊ、 Ｈｉｓｔｏｔｅｃｈｎｏｌ、 １１巻（３）、１９８８．１６５〜１８３ ページこれらの著者は免疫細胞化学のための最初の自動的方法を開発したと主張 している。その方法は三軸ロボット スライドシステムを用いて、スライドのラ ックを試薬間を移動させるものである。スライドは対になっていて、試薬が毛細 管作用によってそのスライド間の隙間を充填する。そのシステムは完全な免疫染 色法並びに現場ハイブリダイゼーションを行うことかできると主張され、Ｆｉｓ ｃｈｅｒ ５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃｏ、 （Ｕ、Ｓ、Ａ、）から売り出されて いる。Unger, E,), Koebler , D, ), report on a new short cover slip device that releases the RigotP right f-listening. Cuomo (C,), Kennedy (T,), Pelt Mo (Perdomo, J, M,) J, Histotechnol, Volume 11 (3), 1988.165-183 Page These authors claim to have developed the first automatic method for immunocytochemistry are doing. The method uses a three-axis robot slide system to This is used to move the rack between reagents. The slides are paired so that the reagents are Tube action fills the gaps between the slides. The system is completely immunosuppressed. It is claimed that color methods as well as in-situ hybridization can be carried out, and Fischer et al. Sold by cher 5 scientific Co, (U, S, A,) There is.
（３）スターク（５ｔａｒｋ、 Ｅ、 ） 、ファルティナート（Ｆａｌｔｉｎ ａｔ、Ｄ） 、フオンデルフエヒト（Ｖａｎ ｄｅｒ Ｆｅｃｈｔ、Ｒ，）Ｊ、 ［ｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ １０７巻（１９８８） 、８９ 〜９２ページこれらの著者は、３０ものスライドか円形トレー上に置かれ、円形 トレーは急速回転して試薬を除去することができるという装置を記載している。(3) Stark (5tark, E, ), Faltinato (Faltin) at, D), Van der Fecht (R,) J, [mmunological Methods Volume 107 (1988), 89 ~92 pages These authors have 30 slides placed on a circular tray and a circular A device is described in which the tray can be rapidly rotated to remove reagents.
抗体又はその他の溶液は標準プラスチック注射器によってスライド上に滴下され る。Antibodies or other solutions are dropped onto slides by standard plastic syringes. Ru.
この方法は、それか高価な試薬を多量用い、−次抗体段階を自動化しないという 大きな欠点をもっている。This method uses large amounts of expensive reagents and does not automate the antibody step. It has major drawbacks.
（４）メーヴエン（Ｍｅｈｖｅｎ、Ｌ、） （Ｍｅｄ、 Ｌａｂ、 Ｗｏｒｌｄ １９８９年２月号、４５〜４６ページ）は、スライドとカバースリップとの間 ＾マ二ノロ′え＃婢す２マニｌＶ實稗キ懇−ｔ−プ 開虹マ化＾智−を辿Ｓ問弾 −Ｃ＋ヒソ 山 ソ 栢ｆｉＸ ｖノ／−″ 八 ノ ノ ノ 武Ｉ Ｃ惟口し た。試薬は、自動ピペット及びＸ−スライド デバイスを用いて円形トレー上の バイアルからカバースリップの漏斗部分へ移される。１０の基礎的方法プログラ ムを用いて、種々の（９まて）−次抗体て２０のスライドを自動的に試験するこ とかできる。この機器はシャントン サイエンティフイク（５ｈａｎｄｏｎＳｃ ｉｅｎｔｉｆｉｃ） （英国）から“カデンザ（Ｃａｄｅｎｚａ） ”という商 品名で売り出されている。(4) Mehven (Mehven, L,) (Med, Lab, World (February 1989 issue, pages 45-46) between the slide and the coverslip. ^ Maninoro'e # slut 2 Mani l V Jiaeki kon-t-pu Opening Rainbow Massification ^ Chi- is followed by S question bullet -C + Hiso Yama So Maki fiX vノ/-″ Eight no no no Take I C Ta. Reagents are transferred onto a circular tray using an automatic pipette and an X-slide device. Transfer from the vial to the funnel part of the coverslip. 10 basic method programs Automatically test 20 slides with a variety of antibodies using You can do something like that. This device is a Shanton Scientific (5handonSc) ientific) (UK) to the trade name “Cadenza”. It is sold under the product name.
（５）最近リブショウ（Ｌｉｐｓｈａｗ） （米国）は、パーオキシド法によっ てスライドのバッチを自動染色する機器を発表した。(5) Recently, Lipshaw (USA) has developed a method using peroxide method. announced a device that automatically stains batches of slides.
そのシステムは、ロボットのアームによってスライドのラックを試薬浴の間を移 動せしめるというものである。その機器の使用は同一方法を受けるスライドに限 られ、その機器は一次抗体を加えるためには作用でなく、その他の試薬を大量に 使用する。The system uses a robotic arm to move racks of slides between reagent baths. It is meant to move. Use of the device is limited to slides undergoing the same method. The device is not designed to add primary antibodies, but rather large amounts of other reagents. use.
本発明の目的は、組織又は細胞標本の免疫組織化学的染色のための改良装置を提 供することである。The object of the present invention is to provide an improved apparatus for immunohistochemical staining of tissue or cell specimens. It is to provide.
本発明は、サンプル支持手段、洗浄液を上記サンプル上に供給するための洗浄手 段、上記サンプルをクリーニングするための清浄化（ｃｌｅａｒｉｎｇ）手段、 及び作用物質を上記サンプル上に供給するための作用物質供給手段を含んで成る 、免疫組織化学的サンプル処理用装置を提供する。本発明は、少なくとも１枚円 形トレーによって構成されるスライド支持手段と、上記スライド支持手段に対し て動くようになっており、液体を上記支持手段上のスライドに供給するようにな っているヘッドアセンブリ一手段とを含んで成る、組織サンプルを免疫組織化学 的に処理するための装置をも提供する。The present invention includes a sample support means, a cleaning device for supplying a cleaning liquid onto the sample. a clearing means for cleaning said sample; and an agent supply means for supplying an agent onto said sample. , provides an apparatus for immunohistochemical sample processing. The present invention provides at least one yen A slide support means constituted by a shaped tray, and for the slide support means described above. and is adapted to supply liquid to the slide on said support means. A head assembly comprising a means for immunohistochemistry of tissue samples. The present invention also provides an apparatus for processing the same.
本発明はさらに、表面に液体を噴霧するためのデバイスを提供し、上記デバイス は上記液体か通過するための孔をもったボディーと、上記ボディーに位置し、上 記液の流れを概して上記孔に沿った方向から概して環状の流れに変える手段とを 含み、そこには液体出口の近くに位置する渦巻室かあり、渦巻室は、液体が上記 液体出口を通って上記室を去る前に、概して環状の流れを概して同心的な流れに 変えるようになっている。The invention further provides a device for spraying a liquid onto a surface, is a body with a hole through which the liquid passes, and is located in the body and has a hole on the top. means for changing the flow of the liquid from a direction generally along the hole to a generally circular flow; There is a vortex chamber located close to the liquid outlet, which is a vortex chamber where the liquid is converting the generally annular flow into a generally concentric flow before leaving the chamber through the liquid outlet. It is supposed to change.
本発明の好適実施態様を以下に添付の図を参照して詳細に説明する。図において ： 図１は自動組織染色装置の斜視図である：図２は、概ね図１に類似の装置の細部 の斜視図である。Preferred embodiments of the invention will be described in detail below with reference to the accompanying drawings. In the figure : FIG. 1 is a perspective view of an automatic tissue staining device; FIG. 2 is a detail of the device generally similar to FIG. FIG.
図３は、クリアノズルの正面図である：図４は、図３のノズルの側面図である； 図５は、図３のノズルの一部分の背面図である：図６は、図３のノズルの底面図 である：図７は、図３の線Ａ−Ａに沿った断面図である：図８は、噴霧ノズルの 側面図である。FIG. 3 is a front view of the clear nozzle; FIG. 4 is a side view of the nozzle of FIG. 3; 5 is a rear view of a portion of the nozzle of FIG. 3; FIG. 6 is a bottom view of the nozzle of FIG. 3; 7 is a cross-sectional view along line A-A in FIG. 3; FIG. 8 is a cross-sectional view of the spray nozzle. FIG.
図９は、噴霧ノズルボディの端面図である：図１０は、図９の線Ａ−Ａに沿った 断面図である；図１１は、図１０の線Ｂ−Ｂに沿った断面図である：図１２は、 噴霧ノズル末端キャップの斜視図である；図１３は、図１３のキャップの正面図 である：図１４は、図１３のキャップの部分断面側面図である：図１５は、図１ ３のキャップの背面図である；図１６は、プラグの端面図である； 図１７は、図１６のプラグの側面図である。9 is an end view of the atomizing nozzle body: FIG. 10 is an end view of the atomizing nozzle body; FIG. FIG. 11 is a cross-sectional view along line B-B in FIG. 10; FIG. FIG. 13 is a perspective view of a spray nozzle end cap; FIG. 13 is a front view of the cap of FIG. 13; 14 is a partial cross-sectional side view of the cap of FIG. 13; FIG. 15 is a side view of the cap of FIG. FIG. 16 is a rear view of the cap of No. 3; FIG. 16 is an end view of the plug; FIG. 17 is a side view of the plug of FIG. 16.
先ず最初に図１及び図２を参照すると、自動組織染色機（１０）は、水平円形ト レー（１６）を示す開いた位置に蝶番で開く部分（１４）を有するボディー（１ ２）と、供給ヘッドアセンブリー（１８）と、クリアノズル（２０）と、噴霧ノ ズル（２２）とを有する。Referring first to FIGS. 1 and 2, the automatic tissue staining machine (10) has a horizontal circular tray. a body (1) having a hinged portion (14) in an open position showing a relay (16); 2), a supply head assembly (18), a clear nozzle (20), and a spray nozzle. It has a screw (22).
図１に示したものと少し異なるモデルである図２に示されるように、円形トレー （１６）は、概ね垂直の軸の周囲に回転するように作られ、さらに、スライド（ ２４）を単一水平面上の外周近くに担持し、試薬などを入れた容器を円形トレー （１６）の軸に向けて担持するように作られている。A circular tray is shown in Figure 2, which is a slightly different model than that shown in Figure 1. (16) is made to rotate about a generally vertical axis, and furthermore, the slide ( 24) is carried near the outer periphery on a single horizontal surface, and containers containing reagents etc. are placed in a circular tray. It is made to be carried towards the axis of (16).
供給ヘッドアセンブリー（１８）はレール（２８）、（３０）上を、円形トレー の直径を横切るように移動するようになっており、円形トレーの回転運動とヘッ ド（１８）の並進移動との組み合わせによりノズル（２０）、（２２）が材料を スライド（２４）のどの部分にでも、又はどの容器（２６）にでも向けることか できる。第三（洗浄液配給）ノズルもヘッドアセンブリー（１８）に取り付けら れるのが好適である。各ノズルがアセンブリーに対して垂直運動可能であるのが 好適である。The feed head assembly (18) runs over the rails (28), (30) into a circular tray. The rotary motion of the circular tray and the head The nozzles (20) and (22), in combination with the translational movement of the door (18), To any part of the slide (24) or to any container (26)? can. A third (cleaning liquid distribution) nozzle is also attached to the head assembly (18). It is preferable that the Each nozzle is movable perpendicular to the assembly. suitable.
装置（ｌＯ）は、種々のエレクトロメカニカル システム（図示されていない） を用いて、自動的制御されたシーケンスを行わしめることができる。装置（ｌＯ ）はキーバッド（３２）及びディスプレイ（３４）によって運転され制御される 。The apparatus (IO) includes various electromechanical systems (not shown). can be used to perform automatically controlled sequences. Equipment (lO ) is operated and controlled by the keypad (32) and display (34) .
円形トレー（１６）は、多分熱空気を用いて、好適には下から加熱されるように なっている。好適には、支持台上にあって、スライドの下に位置する熱水か利用 される。好適には水の自動温度調節機能がついている。The circular tray (16) is preferably heated from below, possibly using hot air. It has become. Preferably, hot water is provided on the support and located below the slide. be done. Preferably, it has an automatic water temperature control function.
ヘッドアセンブリー（１８）はまたスライド洗浄設備（図示されていない）を有 する。それはディスペンサーからの緩衝液又は洗浄液を、コントロールされた仕 方で上記第三ノズルから、ディスペンサー下に位置する円形トレー（１６）上の スライド（２４）に供給する。好適にはヘッド（１８）はスライド軸に沿って動 き、液体をスライド上に均一に分配する。好適には緩衝液は加圧された保存ボト ルからバルブ−オン−オフ−コントロールで供給される。The head assembly (18) also includes slide cleaning equipment (not shown). do. It dispenses buffer or wash solutions from a dispenser in a controlled manner. On the other hand, from the third nozzle, on the circular tray (16) located below the dispenser. Supply the slide (24). Preferably the head (18) moves along the slide axis. and distribute the liquid evenly over the slide. Preferably the buffer is stored in a pressurized storage bottle. Supplied with valve-on-off-control from the valve.
ヘッドアセンブリー（１８）はスライド清浄（ｃｌｅａｒ）設備も含む。それは 前に述べたようにスライド（２４）から不要になった液体を除去するために用い られる。このようにスライドを清浄にするためには、図３から図７までに記載さ れているノズル（３６）が用いられる。このノズル（３６）は図１の一般的ノズ ル（２０）の場所にある。The head assembly (18) also includes slide clear equipment. it is used to remove unwanted liquid from the slide (24) as previously described. It will be done. To clean the slides in this way, follow the procedures described in Figures 3 through 7. A nozzle (36) is used. This nozzle (36) is the general nozzle shown in Figure 1. It is located at Le (20).
クリアノズル（３６）のボディ（３８）は、広がった供給末端（４０）を有すし 、その上方にはプレート（４２）がある。The body (38) of the clear nozzle (36) has a flared feed end (40). , above which is a plate (42).
ボディ（３８）内の孔（４４）は、末端（４０）の空間（４６）とつながってい る。出口孔（４８）からはエアー“カーテン”がスライド（２４）に向かって出 ている。好適には加圧されたマニホルドからの空気がノズル（３６）に供給され る。The hole (44) in the body (38) communicates with the space (46) in the distal end (40). Ru. An air “curtain” exits from the exit hole (48) towards the slide (24). ing. Air is preferably supplied to the nozzle (36) from a pressurized manifold. Ru.
ノズル（３６）はヘッド（１８）によってスライド（２４）の軸にそって移動し 、出口孔（４８）からの空気流又はエアカーテンかスライド（２４）表面の液を スライド軸に沿って押し流し、スライド末端から押し出す。The nozzle (36) is moved along the axis of the slide (24) by the head (18). , the air flow from the outlet hole (48) or the liquid on the surface of the air curtain or slide (24). Flow along the slide axis and push out from the end of the slide.
ヘット（１８）はまた図８から図１７までの噴霧ノズル（５０）を用いる生化学 的作用物質供給設備を有する。このノズル（５０）は図１の一般的ノズル（２２ ）の場所にある。The head (18) is also used for biochemistry using the spray nozzle (50) of FIGS. 8 to 17. Equipped with active substance supply equipment. This nozzle (50) is the general nozzle (22) shown in FIG. ) location.
噴霧ノズル（５０）は主部（ｍａｉｎ ｂｏｄｙ） （５２）と末端キャップ’ （５４）とプラグ（５６）とを有する。主部（５２）には、主部（５２）を末 端キャップ（５４）に固定するために用いられるｏ −レット付き部分（５８） がある。主部（５２）にはフロー分割チャンネル（６０）及びフェルール シー ル（６２）もあり、後者は噴霧ノズルを作動させるための真空源、ピペッタ−な どに接続するためのものである。The spray nozzle (50) has a main body (52) and an end cap. (54) and a plug (56). The main part (52) includes the main part (52) at the end. o-let portion (58) used to secure to end cap (54) There is. The main part (52) has a flow division channel (60) and a ferrule seam. There is also a vacuum source (62) for operating the spray nozzle, such as a pipettor. It is for connecting to.
末端キャップ（５４）は内部円周唇（６４）をもち、これは主部（５２）とぴっ たり合っている。キャップは軸方向に位置する出口孔をもち、その後に渦巻室（ ６８）がある。The end cap (54) has an internal circumferential lip (64) that fits snugly against the main portion (52). They meet each other. The cap has an axially located outlet hole followed by a vortex chamber ( 68).
図１３（背面図）には、液体を渦巻室（６８）に向かわせ（矢印を見よ）、その 流れが確実に室軸と同軸になるように働く構造体（７０）か示される。Figure 13 (rear view) shows that the liquid is directed into the vortex chamber (68) (see arrow) and A structure (70) is shown that serves to ensure that the flow is coaxial with the chamber axis.
プラグ（５６）にはスピゴット（７２）と位置決め突起（７４）がある。The plug (56) has a spigot (72) and a positioning projection (74).
図８の組み立てられたノズル（５０）では、液流の方向は矢印で示される。ノズ ル（５０）は小旋回噴射室効果をもち、ここでは流れが軸に同心的になるような 仕方で、液体が加圧下で円形室（６８）に押し出される。スプレー（噴霧液）は 中央出口（６６）を通って出る。In the assembled nozzle (50) of Figure 8, the direction of liquid flow is indicated by an arrow. Noz (50) has a small swirl injection chamber effect, where the flow is concentric with the axis. In this way, liquid is forced under pressure into the circular chamber (68). Spray (atomized liquid) Exit through the central exit (66).
噴霧ノズル（５０）の構造及び操作は、抗体（試薬サブグループとしての）が活 性を喪失せずに表面に噴霧されるようになっている。The structure and operation of the spray nozzle (50) allows antibodies (as a reagent subgroup) to be activated. It is designed to be sprayed onto surfaces without loss of properties.
抗体の蛋白質は従来の噴霧ノズルには普通よく起こる剪断力に感じ易い。この結 果抗体は変性し、したがって活性を失う。Antibody proteins are sensitive to shear forces that are common with conventional spray nozzles. This conclusion The fruit antibodies denature and therefore lose their activity.
その理由で、抗体の噴霧は不可能と考えられてきた。For that reason, nebulization of antibodies has been considered impossible.
この噴霧ノズル（５０）を用いる場合には、抗体か出口（６６）から無傷で出て いくように流体の通路ができているように見える。When using this spray nozzle (50), the antibody should exit intact from the outlet (66). It appears that a fluid passage is formed as it moves forward.
スプレーヘッドの“デッドスペース”を最小にすること、及び液体の速度及び流 れを最適にして、供給位置からスライド（２４）の成る面積をおおうために正し い噴霧範囲及び噴霧パターンか得られるようにするのか好適である。好適にはそ の面積はスライドの総面積より小さく、総スライド面積の４／１ないし４／３ま での範囲がより好適であり、総スライド面積の３／ｌかより好適である。ノズル （５０）はスライド（２４）から１０ないし１００ｍｍ上方に位置するのか好適 であり、スライド（２４）から約３０ｍｍ上方に位置するのかより好適である。Minimizing “dead space” in the spray head and controlling liquid velocity and flow. Correct the area to cover the area of the slide (24) from the feeding position, optimizing the It is preferable to obtain a wide spray range and spray pattern. Preferably The area is smaller than the total slide area, and is between 4/1 and 4/3 of the total slide area. 3/l of the total slide area is more preferred. nozzle (50) is preferably located 10 to 100 mm above the slide (24) Therefore, it is more preferable to position it approximately 30 mm above the slide (24).
さらに、ノズル（５０）の１回のスプレーの総液量か５０ないし２００マイクロ リツトルであるのか好適である。このような少量を選ぶのは、スライド面積を均 一な液層でおおうためである。Furthermore, the total liquid volume of one spray from the nozzle (50) is 50 to 200 microns. It is suitable if it is a little. The reason for choosing such a small amount is to even out the slide area. This is to cover it with a uniform liquid layer.
ノズル（５０）の種々の部分（５２，５４，５６）は、好適には射出成形プラス チック材料から形成され、ノズルはフェルール（６２）を経てピペッタ−供給ヘ ッドの供給導管に連結するのか好適である。好適にはピペッタ−は電気／電子ビ ペツターンステムであって（図示されていない）、注射器に作動して液体を容器 （２６） （保存バイアル）から引き出し、その液体をノズル（５０）からスラ イド（２４）に供給する。The various parts (52, 54, 56) of the nozzle (50) are preferably injection molded. The nozzle connects to the pipettor supply via the ferrule (62). It is preferable to connect it to the supply conduit of the head. Preferably the pipettor is an electric/electronic pipettor. a stem (not shown) that actuates into a syringe to dispense liquid into a container; (26) Pull out the liquid from the (storage vial) and slurry the liquid through the nozzle (50). (24).
ピペッタ−はコントロールされた垂直運動によって液体を容易に獲得てきる；す なわちそれは、注射器か液体保存バイアル（２６）内に入るように下がる：それ から必要量の液体をシステム内に引き込むように作動する：注射器はコントロー ルされた仕方で上方に動き、保存バイアル（２６）から引き上げられる。Pipetters easily acquire liquid by controlled vertical motion; i.e. it lowers into a syringe or liquid storage vial (26): it The syringe is actuated to draw the required amount of liquid into the system from the controller. It moves upward in a locked manner and is pulled out of the storage vial (26).
いくつかの化学的作用物質は使用直前に混合する必要かある：それらは混合後の 有効寿命は短いためである。これらの物質を混合するためにはピペッタ−システ ムを利用し、１作用物質をその保存バイアルから引き出し、それを第二の作用物 質を入れた保存バイアルに供給する。その後混合溶液を引き上げ、既述のように スライド上に供給する。Some chemical agents need to be mixed immediately before use; they This is because the effective life is short. A pipettor system is used to mix these substances. using a system to draw one agent from its storage vial and transfer it to the second agent. Supplied in a storage vial containing quality material. Then pull up the mixed solution and proceed as described above. Feeding onto the slide.
前述のように、装置（ｌＯ）は自動的組織染色プロセス又はスライド洗浄／乾燥 コーティングプロセスを提供する。As previously mentioned, the device (lO) can perform automatic tissue staining processes or slide cleaning/drying. Provide coating process.
好適には６つの運転モードがある： プロセスモード・ユニットは自動的にプログラムを行う。There are six preferred operating modes: Process mode units program automatically.
ロードモード：運転者はスライド／試薬を速やかにユニットに積み込む。Load Mode: Operator quickly loads slides/reagents into the unit.
プログラムモード：運転者はプロセスモードに使用する特殊なプロトコールプロ グラムを決める。Program mode: The operator can program special protocols for use in process mode. Decide on grams.
アンロードモード サイクルか完了したとき、運転者は処理したスライドを取り 出す。Unload Mode When the cycle is complete, the driver removes the processed slide. put out.
セルフクリーンモード・ユニットは作業面を自動的に洗い流す。Self-clean mode unit automatically rinses the work surface.
セルフテストモード ユニットは試験前チェックを行う。Self-test mode: The unit performs a pre-test check.
装置は、プログラムされたプロトコルの組み合わせを最高ＩＯまで遂行すること かてきる。その装置は２０枚までのスライドを処理することかできる。The device shall perform the programmed protocol combination up to maximum IO. It comes. The device can process up to 20 slides.
装置は電源バッテリーバックアップ機能をもち、処理か適切な段階でうまく切れ るようになっていることか好ましい。The device has a power battery backup function and can be shut off at an appropriate stage during processing. It is preferable that the
本発明は古い手動的方法に代わって、あまり熟練していない運転者でも運転でき る自動操作を行うことかできる装置を提供するものと考えることができる。The invention replaces old manual methods and can be operated even by less experienced drivers. It can be thought of as providing a device that is capable of automatic operation.
１大− 補正音の写しく翻訳分）提出書（特許法第１８４条の８）平成０５年０１月１４ 日1 big Copy and translation of corrected sound) Submission form (Article 184-8 of the Patent Law) January 14, 1993 Day
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