JPH0643319B2 - Blood component separation method and device thereof - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 Ｉ．発明の背景 技術分野 本発明は、血液成分分離方法およびその器具に関するも
のである。詳しく述べると、全血より赤血球、白血球、
血小板等の血液成分を効率よく分離するための方法およ
びその器具に関するものである。Detailed Description of the Invention I. BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a method for separating blood components and a device therefor. In detail, red blood cells, white blood cells,
The present invention relates to a method for efficiently separating blood components such as platelets and an instrument therefor.

先行技術 血友病は先天的に血液に血液凝固第VIII因子または第IX
因子活性が欠乏しているため、出血性素因をきたす遺伝
性疾患で、第VIII因子欠乏に基づくものは血友病Ａ（第
VIII因子欠乏症、古典的血友病）、また第IX因子欠乏に
基づくものを血友病Ｂ（第IX欠乏症、Chiristmas病）と
呼ばれている。しかるに、現在血友病の根治療法はな
く、必要に応じて血友病Ａに対しては第VIII因子を、ま
た血友病Ｂに対しては第IX因子の補助療法が行なわれて
いる。すなわち、出血の際にはできる限り速やかに欠乏
凝固因子の補充を開始し、手術や抜歯をするのであれば
予め補充しておく。第VIII因子は不安定で、保存により
活性が失われるので新鮮血を使用する必要があり、一
方、第IX因子は安定であるので保存血を用いてもよい。
しかし、全血や血漿をそのまま使用したのでは充分な量
の凝固因子を補充するのは難しく、第VIII因子について
はクリオプレシピテート、コーン(Cohn)分画Ｉ、あるい
は第VIII因子濃縮製剤または第IX因子については精製プ
ロトロンビン複合体等濃縮製剤の静脈内注射が広く行な
われている。Prior Art Hemophilia is congenital to blood by blood coagulation factor VIII or IX
Due to the lack of factor activity, inherited diseases that cause a hemorrhagic diathesis, which are based on factor VIII deficiency, are hemophilia A (No.
Factor VIII deficiency, classical hemophilia) and those based on factor IX deficiency are called hemophilia B (factor IX deficiency, Chiristmas disease). However, there is currently no cure for hemophilia, and if necessary, adjuvant therapy with factor VIII for hemophilia A and factor IX for hemophilia B is performed. That is, in the case of bleeding, supplementation of the deficient coagulation factor is started as soon as possible, and is supplemented in advance if surgery or tooth extraction is performed. Fresh blood must be used because Factor VIII is unstable and loses activity upon storage, whereas Factor IX is stable and stored blood may be used.
However, it is difficult to replenish a sufficient amount of coagulation factor if whole blood or plasma is used as it is, and for factor VIII, cryoprecipitate, Cohn fraction I, or factor VIII concentrated preparation or For factor IX, intravenous injection of concentrated preparations such as purified prothrombin complex is widely performed.

しかして、前記第VIII因子製剤のうち第VIII因子濃縮製
剤は第VIII因子を高濃縮するため、製造工程において第
VIII因子凝固活性が失活し、回収率は約２０％と低値で
ある。また、多人数の血漿を原料として製造されるた
め、肝炎等のウイルスの混入確率が高い。一方、クリオ
プレシピテートは、少人数由来の血漿から簡便な方法で
調製されるため、ウイルスの混入確率は低く、第VIII因
子凝固活性の回収率も高値を示す。しかし、低濃縮型の
製剤であるため、液量が多く、フィブリノゲン等の夾雑
タンパク質を多量に含有し、大量輸注の際、循環血漿量
の増加、ファブリノゲン濃度の上昇、溶血といった副作
用を起すことがある。Therefore, among the factor VIII preparations, the factor VIII concentrated preparation concentrates factor VIII at a high concentration, so that
The factor VIII coagulation activity is inactivated, and the recovery rate is as low as about 20%. In addition, since it is produced from plasma of a large number of people, there is a high probability that viruses such as hepatitis will be mixed. On the other hand, since cryoprecipitate is prepared from plasma derived from a small number of people by a simple method, the probability of virus contamination is low and the recovery rate of factor VIII coagulation activity is high. However, since it is a low-concentration type formulation, it has a large amount of liquid and contains a large amount of contaminating proteins such as fibrinogen, and it may cause side effects such as an increase in circulating plasma volume, an increase in fabrinogen concentration, and hemolysis during mass infusion. is there.

しかして、従来、採血した血液を赤血球、白血球、血小
板、その他種々の成分等に分離するには、第１０図に示
すような血液成分分離用器具を用い、種々の操作により
各種成分の分離を行なっている。この血液分離用器具
は、先端にびん針１が接続されている血液導入用管状部
材２を備えた採血バッグ（親バッグ）３には、血液成分
移送用管状体４が取付けられ、該管状体４は第３の子バ
ッグ５に接続するとともに、該管状体４から第１の分岐
管６を介し第１の分液管７を経て第１の子バッグ８に、
また第２の分岐管９を介し第２の分液管１０を経て第２
の子バッグ１１に接続している。Therefore, conventionally, in order to separate the collected blood into red blood cells, white blood cells, platelets, and various other components, a blood component separation instrument as shown in FIG. 10 is used, and various components are separated by various operations. I am doing it. In this blood separation instrument, a blood component transfer tubular body 4 is attached to a blood collecting bag (parent bag) 3 having a blood introducing tubular member 2 to which a bottle needle 1 is connected at the tip thereof. 4 is connected to the third child bag 5, and from the tubular body 4 to the first child bag 8 via the first branch pipe 6 and the first liquid separating pipe 7.
In addition, the second branch pipe 9 is passed through the second separation pipe 10 and the second
It is connected to the child bag 11.

このような血液成分分離用器具を使用して血液を各成分
に分離する場合、血管、例えば静脈より採血した採血バ
ッグ３内の全血を弱遠心分離に供すると、多血小板血漿
（ＰＲＰ）の層と、白血球（ＬＣ）と濃厚赤血球（ＣＲ
Ｃ）との混合層とに分離する。上層のＰＲＰを第１の子
バッグ８に移送したのち、血液成分移送用管状体４を分
離し、採血バッグ内に残る前記混合層は、ＬＣを分離せ
ずにそのまま輸血に使用する。第１の子バッグ８内のＰ
ＲＰは強遠心分離に供することにより、上層の乏血小板
血漿（ＰＰＰ）を第２の子バック１１に移送し、第１の
子バッグ８内に残る血小板濃厚液（ＰＣ）は凝集させ、
ペレット化したのち、血漿中に再浮遊させて血小板製剤
とする。第２の子バッグ１１に移送されたＰＰＰは、凍
結、解凍および遠心を行なって、クリオプレシピテート
（ＡＨＧ）を得、これをさらに遠心処理して上澄みであ
る乏クリオ血漿（ＣＲＰ）を第３の子バッグ５に移送し
ている。When blood is separated into each component using such a blood component separation device, if whole blood in a blood collection bag 3 collected from a blood vessel, for example, a vein, is subjected to weak centrifugation, platelet rich plasma (PRP) Layers, white blood cells (LC) and concentrated red blood cells (CR
C) and mixed layer. After the upper layer PRP is transferred to the first child bag 8, the blood component transfer tubular body 4 is separated, and the mixed layer remaining in the blood collection bag is directly used for blood transfusion without separating LC. P in the first child bag 8
By subjecting RP to strong centrifugation, platelet-poor plasma (PPP) in the upper layer is transferred to the second child bag 11, and the platelet concentrate (PC) remaining in the first child bag 8 is aggregated,
After pelletizing, it is resuspended in plasma to obtain a platelet preparation. The PPP transferred to the second child bag 11 is frozen, thawed and centrifuged to obtain cryoprecipitate (AHG), which is further subjected to centrifugal treatment to remove the supernatant of cryo-poor plasma (CRP). 3 is transferred to child bag 5.

しかしながら、前記方法においては、白血球は特に分離
されていないので、赤血球を輸血する際には１００％含
まれている白血球も同時に輸血されることになる。しか
して、この白血球（リンパ球）中に成人Ｔ細胞由来血友
病抗体（ＡＴＬＡ）が含まれている場合には、患者を感
染させる虞れがあった。特に、このＡＴＬＡは潜伏期が
長く、保持していても発現しない限り自覚症状がなく、
わからないので、知らずに献血すると前記のごとき感染
の心配が多かった。However, in the above method, white blood cells are not particularly separated, so that when red blood cells are transfused, 100% contained white blood cells are also transfused at the same time. If the white blood cells (lymphocytes) contain the adult T cell-derived hemophilia antibody (ATLA), there is a risk of infecting the patient. In particular, this ATLA has a long incubation period, and there is no subjective symptom unless it develops even if it is retained,
I don't know, so if I donate blood without knowing it, I was often worried about the infection.

II．発明の目的 したがって、本発明の目的は、新規な血液成分分離方法
およびその器具を提供することにある。本発明の他の目
的は、ＡＴＬＡ感染の恐れのない血液成分分離方法およ
びその器具を提供することにある。本発明のさらに他の
目的は、クローズド系で各種の単一成分に分離できる血
液成分分離方法およびその器具を提供することにある。II. OBJECT OF THE INVENTION Accordingly, it is an object of the present invention to provide a novel method for separating blood components and a device therefor. Another object of the present invention is to provide a method for separating blood components and a device therefor which are free from the risk of ATLA infection. Still another object of the present invention is to provide a blood component separation method and a device therefor capable of separating various single components in a closed system.

これらの諸目的は、血液を強遠心処理して上層の（Ａ）
乏血小板血漿（ＰＰＰ）と、中間層の（Ｂ）血小板（Ｐ
Ｃ）および白血球（ＬＣ）よりなる混合液と、下層の
（Ｃ）赤血球濃厚液（ＰＲＣ）とに分画し、該（Ｃ）に
示す赤血球濃厚液を（Ａ）に示す該乏血小板血漿の一部
分で希釈して該赤血球濃厚液のヘマトクリット（Ｈｔ）
値を８０％以下に補正し、さらに（Ｂ）に示す混合液を
弱遠心処理して下層の白血球と上層の血小板濃縮液とに
分画することを特徴とする血液成分分離方法により達成
される。The purpose of these is to centrifuge the blood and subject it to the upper layer (A).
Platelet poor plasma (PPP) and intermediate layer (B) platelets (P
C) and white blood cells (LC) and a lower layer (C) red blood cell concentrate (PRC) are fractionated, and the red blood cell concentrate shown in (C) is separated from the platelet poor plasma shown in (A). Hematocrit (Ht) of the red blood cell concentrate diluted with a part
The value is corrected to 80% or less, and the mixed solution shown in (B) is subjected to mild centrifugation to fractionate into lower layer white blood cells and upper layer platelet concentrate, which is achieved by a blood component separation method. .

前記諸目的はまた、血液を強遠心処理して上層の（Ａ）
乏血小板血漿（ＰＰＰ）と、中間層の（Ｂ）血小板（Ｐ
Ｃ）および白血球（ＬＣ）よりなる混合液と、下層の
（Ｃ）赤血球濃厚液（ＰＲＣ）とに分画し、該（Ｃ）に
示す赤血球濃厚液を（Ａ）に示す該乏血小板血漿の一部
分で希釈して該赤血球濃厚液のヘマトクリット（Ｈｔ）
値を８０％以下に補正し、さらに（Ｂ）に示す混合液を
弱遠心処理して下層の白血球と上層の血小板濃縮液とに
分画し、かつ残りの乏血小板血漿を凍結、解凍および遠
心分離処理に供することによりクリオプレシピテートと
乏クリオプレシピテート血漿とに分画することを特徴と
する血液成分分離方法により達成される。The above-mentioned various purposes are also obtained by subjecting blood to a strong centrifugation treatment to obtain an upper layer (A)
Platelet poor plasma (PPP) and intermediate layer (B) platelets (P
C) and white blood cells (LC) and a lower layer (C) red blood cell concentrate (PRC) are fractionated, and the red blood cell concentrate shown in (C) is separated from the platelet poor plasma shown in (A). Hematocrit (Ht) of the red blood cell concentrate diluted with a part
The value was corrected to 80% or less, and the mixed solution shown in (B) was subjected to weak centrifugation to fractionate into lower leukocytes and upper layer platelet concentrate, and the remaining platelet poor plasma was frozen, thawed and centrifuged. It is achieved by a method for separating blood components, which is characterized by fractionating into cryoprecipitate and poor cryoprecipitate plasma by being subjected to a separation treatment.

また、本発明は、強遠心処理が１７００Ｇ〜５５００Ｇ
で４〜１０分間行なわれてなる血液成分分離方法であ
る。さらに、本発明は、弱遠心処理が７０Ｇ〜６００Ｇ
で４〜１０分間行なわれてなる血液成分分離方法であ
る。Further, in the present invention, the strong centrifugal treatment is 1700G to 5500G.
The blood component separation method is performed for 4 to 10 minutes. Furthermore, the present invention uses a weak centrifugal treatment of 70G to 600G.
The blood component separation method is performed for 4 to 10 minutes.

前記諸目的はまた、血液導入用管状体を介して採血針に
連結された採血用容器と、該採血用容器と第１の血液成
分流通手段を介して連結された乏血小板血漿用容器と、
該採血用容器と第２の血液成分流通手段を介して連結さ
れるとともに該乏血小板血漿用容器と第３の血液成分流
通手段を介して連結された白血球用容器と、該白血球用
容器と第４の血液成分流通手段を介して連結された血小
板濃縮液用容器よりなる血液成分分離用器具により達成
される。The above-mentioned objects also include a blood collecting container connected to a blood collecting needle via a blood introducing tubular body, and a platelet-poor plasma container connected to the blood collecting container via a first blood component circulating means.
A white blood cell container connected to the blood collection container via a second blood component circulating means and connected to the platelet poor plasma container via a third blood component circulating means; This is achieved by an instrument for separating blood components, which is composed of a container for platelet concentrate, which is connected via the blood component circulating means of No. 4.

前記諸目的はまた、血液導入用管状体を介して採血針に
連結された採血用容器と、該採血用容器と第１の血液成
分流通手段を介して連結された乏血小板血漿用容器と、
該採血用容器と第２の血液成分流通手段を介して連結さ
れるとともに該乏血小板血漿用容器と第３の血液成分流
通手段を介して連結された白血球用容器と、該白血球用
容器と第４の血液成分流通手段を介して連結された血小
板濃縮用容器と、該乏血小板血漿用容器と第４の血液成
分流通手段を介して連結された乏クリオプレシピテート
血漿用容器よりなる血液成分分離用器具により達成され
る。The above-mentioned objects also include a blood collecting container connected to a blood collecting needle via a blood introducing tubular body, and a platelet-poor plasma container connected to the blood collecting container via a first blood component circulating means.
A white blood cell container connected to the blood collection container via a second blood component circulating means and connected to the platelet poor plasma container via a third blood component circulating means; 4. A blood component comprising a container for platelet concentration connected via a blood component flow means of No. 4, and a container for poor platelet plasma and a container for poor cryoprecipitate plasma connected via a fourth blood component flow unit Achieved by a separating device.

本発明はまた第４の血液成分流通手段の連通可能な流路
閉鎖手段を備えてなる血液成分分離用器具を示すもので
ある。The present invention also shows a blood component separating device comprising a flow path closing means capable of communicating with the fourth blood component circulating means.

III．発明の具体的構成 つぎに、図面を参照しながら本発明を具体的に説明す
る。すなわち、第１図は、本発明による血液成分分離用
器具の一実施例を示すもので、血液導入用管状体（採血
チューブ）２２の一端には採血針２１が接続され、かつ
必要によりキャップ３６が被嵌されており、他端は採血
用容器（採血用バッグ）２３が接続されている。この採
血用容器２３は、連結チューブ２４、連結具２５および
連結チューブ２６により形成される第１の血液成分流通
手段を介して乏血小板血漿用容器２９に接続されてい
る。一方、前記採血用容器２３は、連結チューブ２４、
連結具２５および連結チューブ３０により形成される第
２の血液成分流通手段を介して白血球用容器３１に接続
されるとともに、該白血球用容器３１は、連結チューブ
３０、連結具２５、連結チューブ２６および連結チュー
ブ２８により形成される第３の血液成分流通手段を介し
て乏血小板血漿用容器２９に接続されている。また、前
記白血球用容器３１は、連結チューブ３２により形成さ
れる第４の血液成分流通手段を介して血小板濃縮用容器
３３に接続されている。III. Specific Configuration of the Invention Next, the present invention will be specifically described with reference to the drawings. That is, FIG. 1 shows an embodiment of the blood component separating instrument according to the present invention, in which a blood collecting needle 21 is connected to one end of a blood introducing tubular body (blood collecting tube) 22 and, if necessary, a cap 36. Is attached, and a blood collection container (blood collection bag) 23 is connected to the other end. The blood collecting container 23 is connected to the platelet poor plasma container 29 via a first blood component circulating means formed by a connecting tube 24, a connecting tool 25 and a connecting tube 26. On the other hand, the blood collecting container 23 includes a connecting tube 24,
It is connected to the white blood cell container 31 via the second blood component flow means formed by the connecting tool 25 and the connecting tube 30, and the white blood cell container 31 includes the connecting tube 30, the connecting tool 25, the connecting tube 26, and It is connected to a platelet-poor plasma container 29 via a third blood component circulating means formed by a connecting tube 28. The white blood cell container 31 is connected to a platelet concentration container 33 via a fourth blood component circulating means formed by a connecting tube 32.

第２図は、本発明の他の実施例を示すもので、第１図に
示すものと同様な血液成分分離器具において第１の血液
成分流通手段が連結チューブ２４、連結具２５および連
結チューブ３７により形成され、また第３の血液成分流
通手段が連結チューブ３０、連結具２５および連結チュ
ーブ３７により形成されている以外は同様な構成であ
る。FIG. 2 shows another embodiment of the present invention. In a blood component separating device similar to that shown in FIG. 1, the first blood component circulating means has a connecting tube 24, a connecting member 25 and a connecting tube 37. And the third blood component circulating means is formed of the connecting tube 30, the connecting tool 25, and the connecting tube 37, and has the same configuration.

第３図は、本発明のさらに他の実施例を示すもので、第
２図に示すものと同様な血液成分分離器具において、第
１の血液成分流通手段が連結チューブ３９により形成さ
れている以外は、同様な構成である。FIG. 3 shows still another embodiment of the present invention. In a blood component separating device similar to that shown in FIG. 2, except that the first blood component circulating means is formed by the connecting tube 39. Has a similar configuration.

第４図は、本発明による血液成分分離用器具の別の一実
施例を示すもので、血液導入用管状体（採血チューブ）
２２の一端には採血針２１が接続され、かつ必要により
キャップ３６が被嵌されており、他端は採血用容器（採
血用バッグ）２３が接続されている。この採血用容器２
３は、連結チューブ２４、連結具２５、連結チューブ２
６および連結チューブ２８により形成される第１の血液
成分流通手段を介して乏血小板血漿用容器２９に接続さ
れている。一方、前記採血用容器２３は、連結チューブ
２４、連結具２５および連結チューブ３０により形成さ
れる第２の血液成分流通手段を介して白血球用容器３１
に接続されるとともに、該白血球用容器３１は、連結チ
ューブ３０、連結具２５、連結チューブ２６および連結
チューブ２８により形成される第３の血液成分流通手段
を介して乏血小板血漿用容器２９に接続されている。ま
た該乏血小板血漿用容器２９は、連結チューブ２８、連
結具２７および連結チューブ３４により形成される第５
の血液成分流通手段を介して乏クリオプレシピテート血
漿用容器３５に接続されている。さらに、前記白血球用
容器３１は、連結チューブ３２により形成される第４の
血液成分流通手段を介して血小板濃縮用容器３３に接続
されている。FIG. 4 shows another embodiment of the device for separating blood components according to the present invention, which is a tubular body for introducing blood (blood collection tube).
A blood collection needle 21 is connected to one end of 22, and a cap 36 is fitted as necessary, and a blood collection container (blood collection bag) 23 is connected to the other end. This blood collection container 2
3 is a connecting tube 24, a connecting tool 25, a connecting tube 2
6 and a connecting tube 28 are connected to a platelet-poor plasma container 29 via a first blood component flow means. On the other hand, the blood collection container 23 is a white blood cell container 31 via a second blood component circulating means formed by the connection tube 24, the connection tool 25, and the connection tube 30.
And the white blood cell container 31 is connected to the platelet poor plasma container 29 via a third blood component circulating means formed by the connecting tube 30, the connecting tool 25, the connecting tube 26 and the connecting tube 28. Has been done. Further, the platelet-poor plasma container 29 is formed by a connecting tube 28, a connecting member 27 and a connecting tube 34.
It is connected to the poor cryoprecipitate plasma container 35 via the blood component circulating means. Further, the white blood cell container 31 is connected to a platelet concentration container 33 via a fourth blood component circulating means formed by a connecting tube 32.

第５図は、本発明の他の実施例を示すもので、第４図に
示すものと同様な血液成分分離器具において第１の血液
成分流通手段が連結チューブ２４、連結具２５および連
結チューブ３７により形成され、また第３の血液成分流
通手段が連結チューブ３０、連結具２５および連結チュ
ーブ３７により形成されている以外は同様な構成であ
る。FIG. 5 shows another embodiment of the present invention. In the blood component separating device similar to that shown in FIG. 4, the first blood component circulating means has a connecting tube 24, a connecting member 25 and a connecting tube 37. And the third blood component circulating means is formed of the connecting tube 30, the connecting tool 25, and the connecting tube 37, and has the same configuration.

第６図は、本発明のさらに他の実施例を示すもので、第
５図に示すものと同様な血液成分分離器具において、第
１の血液成分流通手段が連結チューブ３９により形成さ
れている以外は、同様な構成である。FIG. 6 shows still another embodiment of the present invention. In a blood component separation device similar to that shown in FIG. 5, except that the first blood component flow means is formed by the connecting tube 39. Has a similar configuration.

第７図は、本発明の別の実施例を示すもので、第６図に
示すものと同様な血液成分分離器具おいて、第２の血液
成分流通手段が連結チューブ４０により形成され、また
第３の血液成分流通手段が連結チューブ４１により形成
されている以外は、同様な構成である。FIG. 7 shows another embodiment of the present invention. In a blood component separation instrument similar to that shown in FIG. 6, the second blood component flow means is formed by the connecting tube 40, and It has the same configuration except that the blood component circulation means 3 is formed by the connecting tube 41.

上記血液成分分離器において、各容器は、通常軟質塩化
ビニル樹脂、エチレン−酢酸ビニル共重合体等の軟質熱
可塑性樹脂で形成されているとはいえ、これらに限定さ
れるものではない。また、各血液成分流通手段を形成す
る各連結チューブ、連結具等も軟質塩化ビニル樹脂、エ
チレン−酢酸ビニル共重合体、ポリカーボネート、ポリ
エチレンテレフタレート等の熱可塑性樹脂で通常形成さ
れているとはいえ、これらに限定されるものではない。
また、各容器には、必要によりびん針を穿刺して内部と
連通可能とする混注ポートが設けられており破断可能な
密封部材４２で覆われている。Although each container in the blood component separator is usually formed of a soft thermoplastic resin such as a soft vinyl chloride resin or an ethylene-vinyl acetate copolymer, it is not limited to these. Further, although each connecting tube forming each blood component circulation means, the connecting tool and the like are also usually formed of a thermoplastic resin such as soft vinyl chloride resin, ethylene-vinyl acetate copolymer, polycarbonate, polyethylene terephthalate, It is not limited to these.
In addition, each container is provided with a mixed injection port that can be pierced with a bottle needle to communicate with the inside, if necessary, and is covered with a breakable sealing member 42.

また、各連結チューブには、必要により連通可能な流路
閉鎖手段が設けられている。流通可能な流路閉鎖手段と
しては、常時は流路を閉鎖しているが、必要時には閉鎖
部材が開いて流体の流通が可能となる手段であればいず
れも適用できる。このような流路閉鎖手段として、好ま
しくは流路閉鎖手段が、破断により流路を開放可能にす
る被破断部を備えてなるものがある。一例を挙げると、
例えば第８図に示すように、それぞれ硬質合成樹脂、例
えば硬質塩化ビニル樹脂で形成された外径が通液ポート
の内径とほぼ等しくその外端部が細くなった中空チュー
ブ４７とその先端部に一体的に設けられた通液ポートの
内径より小さくかつ管状体（例えば２４）の内径よりも
大きな外径を有する中実柱状体４３よりなり、該通液ポ
ート４１の内壁に固着されている。そして、中空チュー
ブ４７と柱状体４３との境界近傍であって中空チューブ
４７側に切欠部４４が設けられている。使用前にあって
は中実柱状体４３によって容器（例えば２３）と管状体
（例えば２４）との連通は阻止される。そして、使用時
には外部から指等で切欠部４４において中実柱状体４３
を切断し、中空チューブ４７内部を介して容器と管状体
との連通をはかる。必要により中実柱状体の端面にはそ
の外径長に相当する平板状突出部４５が形成されていて
切断後中実柱状体４３片が連通チューブを閉塞しないよ
うにしている。Further, each connection tube is provided with a flow path closing means capable of communicating with each other as necessary. As the flow passage closing means that can flow, the flow passage is normally closed, but any means can be applied as long as it can open the closing member to allow the flow of fluid. As such a flow path closing means, there is preferably one in which the flow path closing means is provided with a ruptured portion capable of opening the flow path by breaking. To give an example,
For example, as shown in FIG. 8, a hollow tube 47 and its tip end, each of which is made of a hard synthetic resin, for example, a hard vinyl chloride resin, has an outer diameter substantially equal to the inner diameter of the liquid passage port and has a thin outer end. The solid columnar body 43 has an inner diameter smaller than the inner diameter of the liquid passage port and an outer diameter larger than the inner diameter of the tubular body (for example, 24), and is fixed to the inner wall of the liquid passage port 41. A notch 44 is provided on the hollow tube 47 side near the boundary between the hollow tube 47 and the columnar body 43. Before use, the solid columnar body 43 prevents communication between the container (for example, 23) and the tubular body (for example, 24). Then, at the time of use, the solid columnar body 43 is cut in the notch 44 with a finger or the like from the outside.
Then, the container and the tubular body are communicated with each other through the inside of the hollow tube 47. If necessary, a flat plate-shaped protruding portion 45 corresponding to the outer diameter length is formed on the end surface of the solid columnar body so that the solid columnar body 43 piece does not block the communication tube after cutting.

また混注ポート４９は、第９図に示すようにその中間を
隔壁５０により遮蔽されているが、その先端に設けられ
ているゴム部材５１を覆っているカバー５２を外してゴ
ム部材５１よりびん針を刺通して前記隔壁５０に挿通す
ることにより、必要な液体を流通させることができ、び
ん針を抜けばゴム部材５１により逆流が阻止される。ま
た、前記ゴム部材５１を設けずにカバー５２のかわりに
破断可能な密封部材により被覆してもよい。As shown in FIG. 9, the mixed injection port 49 has its middle part shielded by a partition wall 50, but the cover 52 covering the rubber member 51 provided at the tip thereof is removed to remove the bottle needle from the rubber member 51. A necessary liquid can be circulated by piercing through the partition wall 50 and inserting it into the partition wall 50, and back flow is prevented by the rubber member 51 when the bottle needle is removed. Further, instead of providing the rubber member 51, the cover 52 may be covered with a rupturable sealing member.

IV．発明の具体的作用 つぎに、第１図に示す血液成分分離器具を用いてその本
発明による分離方法について具体的に説明する。IV. Specific Action of the Invention Next, the separation method according to the present invention will be specifically described by using the blood component separation device shown in FIG.

採血針２１および採血チューブ２２を介して採血用容器
２３内に採取された血液（全血）を、該容器ごと遠心分
離機にかけて強遠心処理に供する。この強遠心処理は１
７００Ｇ〜５５００Ｇ（Ｇは重力加速度を示す）で４〜
１０分間、好ましくは２５００Ｇ〜５５００Ｇで行なわ
れる。この強遠心処理により上層に乏血小板血漿（ＰＰ
Ｐ）と第１中間層の血小板濃厚液（ＰＣ）と、第２中間
層の白血球（ＬＣ）と、下層の赤血球濃厚液（ＰＲＣ）
とに分離する。第１中間層の上部には少量の乏血漿板血
漿が残るが実質的には血小板の層からなる。また、第２
中間層の下部には少量の赤血球が存在することがある
が、実質的には白血球の層からなる。連結チューブ３０
をクレンメ（図示せず）で止め、中間層の混入を避け、
かつ、血小板濃縮液中の血漿を確保するために上層の乏
血小板血漿を少量残して連結チューブ２４、連結具２
５、連結チューブ２６および連結チューブ２８により形
成される第１の血液成分流通手段を経て乏血小板血漿用
容器２９に分離し、また、連結チューブ２６をクレンメ
（図示せず）で止め、連結チューブ３０のクレンメ（図
示せず）を開き第１および第２中間層の成分は前記少量
の、乏血小板血漿および少量の赤血球とともに連結チュ
ーブ２４、連結具２５および連結チューブ３０により形
成される第２の血液成分流通手段を経て白血球用容器３
１に混合物として分離し、下層の赤血球濃厚液は採血用
容器２３に残す。The blood (whole blood) collected in the blood collecting container 23 via the blood collecting needle 21 and the blood collecting tube 22 is subjected to a strong centrifugal treatment by applying a centrifugal separator to the blood together with the container. This strong centrifugation process is 1
4 to 700 G to 5500 G (G indicates gravitational acceleration)
It is carried out for 10 minutes, preferably 2500G to 5500G. Platelet-poor plasma (PP
P), the first intermediate layer platelet concentrate (PC), the second intermediate layer white blood cells (LC), and the lower layer red blood cell concentrate (PRC)
And separate. A small amount of plasma-poor plasma remains on the upper part of the first intermediate layer, but is substantially composed of a layer of platelets. Also, the second
A small amount of red blood cells may be present in the lower part of the middle layer, but it is essentially composed of a layer of white blood cells. Connection tube 30
With a clamp (not shown) to avoid mixing of the intermediate layer,
Moreover, in order to secure the plasma in the platelet concentrate, a small amount of the platelet poor plasma in the upper layer is left, and the connecting tube 24 and the connecting tool 2
5, through the first blood component flow means formed by the connecting tube 26 and the connecting tube 28, and separated into the platelet-poor plasma container 29, and the connecting tube 26 is stopped by a clamp (not shown), and the connecting tube 30. Of the second blood formed by the connecting tube 24, the connecting device 25 and the connecting tube 30 together with the small amount of platelet poor plasma and a small amount of red blood cells. Leukocyte container 3 via component distribution means
No. 1 as a mixture, and the lower layer red blood cell concentrate is left in the blood collection container 23.

ついで、連結チューブ３０をクレンメで止め、赤血球濃
厚液のヘマトクリット値（Ｈｔ）８０％以下、好ましく
は５０〜８０％になるように前記乏血小板血漿用容器２
９内の乏血小板血漿の一部を前記第１の血液成分流通手
段を経て採血用容器２３に戻して赤血球濃縮液を希釈す
ることにより血漿を赤血球の栄養源とし、白血球として
は約６０％以上、そのうちリンパ球が約８０％以上除去
された赤血球製剤を得る。Then, the connecting tube 30 is stopped with a clamp so that the hematocrit value (Ht) of the concentrated red blood cell liquid is 80% or less, preferably 50 to 80%.
A part of the platelet poor plasma in 9 is returned to the blood collection container 23 via the first blood component circulating means to dilute the red blood cell concentrate to use plasma as a nutrient source for red blood cells, and about 60% or more as white blood cells. , To obtain a red blood cell preparation in which about 80% or more of lymphocytes are removed.

一方、連結チューブ２６において、採血用容器２３と、
乏血小板血漿用容器２９とに切断し、また、連結チュー
ブ３０において、採血用容器２３と、白血球用容器３１
および血小板濃縮用容器３３とに切離す。On the other hand, in the connecting tube 26, the blood collection container 23,
It is cut into a platelet-poor plasma container 29, and in the connecting tube 30, a blood collection container 23 and a white blood cell container 31.
And a container 33 for platelet concentration.

白血球用容器３１および血小板濃縮用容器３３を弱遠心
処理に供する。この弱遠心処理は７０Ｇ〜６００Ｇで４
〜１０分間行なわれる。この弱遠心処理により上層に血
小板濃縮液、また下層に白血球とが分離するので、上層
を血小板濃縮液用容器３３に移送する。この白血球容器
３１には、連通可能な流路閉鎖手段４７があるので、分
離中や分離後に不用意に液が血小板濃縮液用容器３３に
移動したりすることがない。両容器３１および３３を切
離したのち、容器３３内の血小板濃縮液は血小板製剤と
される。The white blood cell container 31 and the platelet concentration container 33 are subjected to weak centrifugation. This weak centrifuge process is 70G-600G
It takes 10 minutes. This weak centrifugation separates the platelet concentrate into the upper layer and the white blood cells into the lower layer, so that the upper layer is transferred to the platelet concentrate container 33. Since the white blood cell container 31 has the flow path closing means 47 that can communicate with each other, the liquid does not accidentally move to the platelet concentrate container 33 during or after the separation. After separating both the containers 31 and 33, the platelet concentrate in the container 33 is made into a platelet preparation.

さらに、第４図に示す血液成分分離器具を用いて、本発
明による分離方法について具体的に説明する。Furthermore, the separation method according to the present invention will be specifically described by using the blood component separation device shown in FIG.

採血針２１および採血チューブ２２を介して採血用容器
２３内に採取された血液（全血）を、該容器ごと遠心分
離機にかけて強遠心処理に供する。この強遠心処理は１
７００Ｇ〜５５００Ｇ（Ｇは重力加速度を示す）で４〜
１０分間、好ましくは２５００Ｇ〜５５００Ｇで行なわ
れる。この強遠心処理により上層に乏血小板血漿（ＰＰ
Ｐ）と第１中間層の血小板濃厚液（ＰＣ）と、第２中間
層の白血球（ＬＣ）と、下層の赤血球濃厚液（ＰＲＣ）
とに分離する。第１中間層の上部には少量の乏血漿板血
漿が残るが実質的には血小板の層からなる。また、第２
中間層の下部には少量の赤血球が存在することがある
が、実質的には白血球の層からなる。連結チューブ３０
および３４をそれぞれクレンメ（図示せず）で止め、中
間層の混入を避け、かつ、血小板濃縮液中の血漿を確保
するために上層の乏血小板血漿を少量残して連結チュー
ブ２４、連結具２５、連結チューブ２６、連結具２７お
よび連結チューブ２８により形成される第１の血液成分
流通手段を経て乏血小板血漿用容器２９に分離し、ま
た、連結チューブ２６をクレンメ（図示せず）で止め、
連結チューブ３０のクレンメ（図示せず）を開き第１お
よび第２中間層の成分は前記少量の、乏血小板血漿およ
び少量の赤血球とともに連結チューブ２４、連結具２５
および連結チューブ３０により形成される第２の血液成
分流通手段を経て白血球用容器３１に混合物として分離
し、下層の赤血球濃厚液は採血用容器２３に残す。The blood (whole blood) collected in the blood collecting container 23 via the blood collecting needle 21 and the blood collecting tube 22 is subjected to a strong centrifugal treatment by applying a centrifugal separator to the blood together with the container. This strong centrifugation process is 1
4 to 700 G to 5500 G (G indicates gravitational acceleration)
It is carried out for 10 minutes, preferably 2500G to 5500G. Platelet-poor plasma (PP
P), the first intermediate layer platelet concentrate (PC), the second intermediate layer white blood cells (LC), and the lower layer red blood cell concentrate (PRC)
And separate. A small amount of plasma-poor plasma remains on the upper part of the first intermediate layer, but is substantially composed of a layer of platelets. Also, the second
A small amount of red blood cells may be present in the lower part of the middle layer, but it is essentially composed of a layer of white blood cells. Connection tube 30
And 34 by a clamp (not shown) to avoid mixing of the intermediate layer and to leave a small amount of platelet poor plasma in the upper layer in order to secure the plasma in the platelet concentrate, the connecting tube 24, the connecting tool 25, The first blood component flow means formed by the connecting tube 26, the connecting tool 27 and the connecting tube 28 separates into the platelet poor plasma container 29, and the connecting tube 26 is stopped by a clamp (not shown).
Open the clamp (not shown) of the connecting tube 30 and the components of the first and second intermediate layers together with the small amount of platelet poor plasma and a small amount of red blood cells are connected to the connecting tube 24 and the connecting device 25.
And the second blood component flow means formed by the connecting tube 30 to separate the mixture into the white blood cell container 31 as a mixture, and the lower layer red blood cell concentrated liquid remains in the blood collection container 23.

ついで、連結チューブ３０をクレンメで止め、赤血球濃
厚液のヘマトクリット値（Ｈｔ値）８０％以下、好まし
くは５０〜８０％になるように前記乏血小板血漿用容器
２９内の乏血小板血漿の一部を前記第１の血液成分流通
手段を経て採血用容器２３に戻して赤血球濃縮液を希釈
することにより血漿を赤血球の栄養源とし、白血球とし
ては約６０％以上、そのうちリンパ球が約８０％以上除
去された赤血球製剤を得る。Then, the connecting tube 30 is stopped with a clamp, and a portion of the platelet poor plasma in the platelet poor plasma container 29 is adjusted so that the hematocrit value (Ht value) of the concentrated red blood cell liquid is 80% or less, preferably 50 to 80%. It is returned to the blood collection container 23 through the first blood component circulating means and the red blood cell concentrate is diluted to use plasma as a nutrient source for red blood cells, and about 60% or more of white blood cells, of which about 80% or more of lymphocytes are removed. To obtain the prepared red blood cell preparation.

一方、連結チューブ２６において、採血用容器２３と、
乏血小板血漿用容器２９および乏クリオプレシピテート
血漿用容器３５とに切断し、また、連結チューブ３０に
おいて、採血用容器２３と、白血球用容器３１および血
小板濃縮用容器３３とに切離す。On the other hand, in the connecting tube 26, the blood collection container 23,
The container 29 for platelet poor plasma and the container 35 for poor cryoprecipitate plasma 35 are cut, and the connecting tube 30 is separated into the blood collection container 23, the white blood cell container 31, and the platelet concentration container 33.

乏血小板血漿用容器２９および乏クリオプレシピテート
血漿用容器３３を連結（例えば−２０〜−８０℃、好ま
しくは−４０〜−８０℃）したのち、解凍し、２５００
Ｇ〜５５００Ｇで１５〜２０分間遠心処理に供すると二
層に分離するので上層の乏クリオプレシピテート血漿を
乏クリオプレシピテート血漿用容器３５に移し、クリオ
プレシピテートを乏血小板血漿用容器に残す。両容器２
９および３５を連結チューブ２８または３４において切
離すことにより、容器２９内のクリオプレシピテートは
抗血友病薬製剤原料として使用される。After connecting the container 29 for platelet poor plasma and the container 33 for poor cryoprecipitate plasma (for example, -20 to -80 ° C, preferably -40 to -80 ° C), it is thawed and 2500
When subjected to centrifugation at G to 5500 G for 15 to 20 minutes, it is separated into two layers. Therefore, the upper cryoprecipitate plasma is transferred to the poor cryoprecipitate plasma container 35, and the cryoprecipitate is transferred to the platelet poor plasma container. Leave on. Both containers 2
By disconnecting 9 and 35 in the connecting tube 28 or 34, the cryoprecipitate in the container 29 is used as an anti-hemophilia drug material.

白血球用容器３１および血小板濃縮用容器３３を弱遠心
処理に供する。この弱遠心処理は７０Ｇ〜６００Ｇで４
〜１０分間行なわれる。この弱遠心処理により上層に血
小板濃縮液、また下層に白血球とが分離するので、上層
を血小板濃縮液用容器３３に移送する。この白血球容器
３１には、連通可能な流路閉鎖手段４７があるので、分
離中や分離後に不用意に血小板濃縮液用容器３３に移動
したりすることがない。両容器３１および３３を切離し
たのち、容器３３内の血小板濃縮液は血小板製剤とされ
る。The white blood cell container 31 and the platelet concentration container 33 are subjected to weak centrifugation. This weak centrifuge process is 70G-600G
It takes 10 minutes. This weak centrifugation separates the platelet concentrate into the upper layer and the white blood cells into the lower layer, so that the upper layer is transferred to the platelet concentrate container 33. Since the white blood cell container 31 has the flow path closing means 47 that can communicate with each other, it does not accidentally move to the platelet concentrate container 33 during or after the separation. After separating both the containers 31 and 33, the platelet concentrate in the container 33 is made into a platelet preparation.

なお、前記方法においては、乏血小板血漿用容器２９内
の乏血小板血漿を採血用容器内に戻して赤血球の栄養源
とする操作が行なわれているが、その分だけ乏血小板血
漿の量が減少することになるので、予め乏クリオプレシ
ピテート血漿用容器３５に赤血球保存液を収納してお
き、強遠心処理後に各成分に分離したのちに、採血用容
器２３にこの赤血球保存液を移送して混合してもよい。
この場合には、乏クリオプレシピテート血漿用容器３５
にも連通可能な流路閉鎖手段４７を設けることが好まし
い。In the above method, the operation of returning the platelet-poor plasma in the platelet-poor plasma container 29 to the blood-collecting container to serve as a nutrient source for red blood cells is performed, but the amount of platelet-poor plasma is reduced accordingly. Therefore, the red blood cell preservative solution is stored in the poor cryoprecipitate plasma container 35 in advance, separated into each component after the strong centrifugation treatment, and then the red blood cell preservative solution is transferred to the blood sampling container 23. You may mix by mixing.
In this case, the poor cryoprecipitate plasma container 35
It is preferable to provide the flow path closing means 47 that can communicate with the above.

赤血球保存液としては、グルコース、アデニンおよびコ
ロイド浸透圧調整剤（マンニット）を含有する生理食塩
水等がある。Examples of the red blood cell preservation solution include physiological saline containing glucose, adenine, and a colloid osmotic pressure adjusting agent (mannite).

以上は、第１図および第４図に示す血液成分分離用器具
について説明したが、第２〜３図および第５〜７図に示
す器具についても同様な操作を行なって血液成分が分離
される。Although the blood component separation device shown in FIGS. 1 and 4 has been described above, the blood components are separated by performing similar operations on the devices shown in FIGS. 2 to 3 and 5 to 7. .

次に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。Next, the present invention will be described in more detail with reference to examples.

実施例１ 第１図に示すような血液成分分離用器具を軟質塩化ビニ
ル樹脂で作製した。この器具において５６ｍのＣＰＤ
液を収納している容量４００ｍの採血用容器２３にヒ
トの血液（全血）４００ｍを採取したのち、３，５０
０Ｇで５分間強遠心処理に供したところ、上から順に乏
血小板血漿層、血小板濃厚液層、白血球層および赤血球
濃厚液層の各層に分離した。ついで、乏血小板血漿中に
二層目以下の他の部分が混入しないように乏血小板血漿
の少量を残して第１の血液成分流通手段を経て容量３０
０ｍの乏血小板血漿用容器２９に移送し（約２００ｍ
）、また第２および第３層の血小板濃厚液および白血
球および赤血球濃厚液の一部を第２の血液成分流通手段
を経て容量８０ｍの白血球用容器３１に移送（約８０
ｍ）、これにより採血用容器２３に約１８０ｍの赤
血球濃厚液が残存した。Example 1 An instrument for separating blood components as shown in FIG. 1 was made of soft vinyl chloride resin. 56m CPD in this device
After collecting 400 m of human blood (whole blood) in a blood collecting container 23 having a capacity of 400 m containing liquid, 3,50
When subjected to a strong centrifugation treatment at 0 G for 5 minutes, the layers were separated into a platelet poor plasma layer, a platelet concentrated liquid layer, a white blood cell layer and an erythrocyte concentrated liquid layer in this order from the top. Then, a small amount of platelet-poor plasma is left in the platelet-poor plasma so that other parts of the second and lower layers are not mixed into the platelet-poor plasma, and the volume of 30 is passed through the first blood component flow means.
Transfer to 0m platelet poor plasma container 29 (about 200m
), And a part of the platelet concentrated liquid and the white blood cells and red blood cell concentrated liquids of the second and third layers are transferred to the leukocyte container 31 having a capacity of 80 m (about 80%) through the second blood component circulating means.
m), whereby approximately 180 m of red blood cell concentrate remained in the blood collection container 23.

この赤血球濃厚液に乏血小板血漿用容器２９内の乏血小
板血漿約３０ｍを加えてヘマトクリット値を８０％以
下にした。ついで、乏血小板血漿用容器２９を採血用容
器２３と切離した。一方、白血球用容器３１および血小
板濃縮液用容器３３を採血用容器２３から切離し、約１
７０Ｇで５分間弱遠心処理に供したところ、上層に血小
板濃縮液、また下層に白血球が分離したので、上層を血
小板濃縮液用容器３５に移送した。About 30 m of platelet-poor plasma in the container 29 for platelet-poor plasma was added to this red blood cell concentrate to make the hematocrit value 80% or less. Then, the platelet-poor plasma container 29 was separated from the blood collection container 23. On the other hand, the white blood cell container 31 and the platelet concentrate container 33 are separated from the blood collection container 23, and about 1
When subjected to mild centrifugation at 70 G for 5 minutes, platelet concentrate was separated in the upper layer and white blood cells were separated in the lower layer. Therefore, the upper layer was transferred to the platelet concentrate container 35.

このようにして分離された血液の各成分中白血球、赤血
球および血小板の割合は第１表のとおりであった。The proportions of white blood cells, red blood cells and platelets in each component of the blood thus separated are shown in Table 1.

比較例は、従来行なわれている分離方法として、まず全
血を１１００Ｇで約５分間遠心処理し、赤血球濃縮液と
多血小板血漿に分離し、次に多血小板血漿を３５００Ｇ
で約５分間の遠心処理して血小板濃縮液と血漿とに分離
した場合の結果を示す。表中、本発明／比較例として値
を示す。In the comparative example, as a conventional separation method, whole blood was first centrifuged at 1100 G for about 5 minutes to separate the red blood cell concentrate and platelet-rich plasma, and then the platelet-rich plasma at 3500 G.
The results obtained when the platelet concentrate and plasma were separated by centrifugation for about 5 minutes. In the table, values are shown as the present invention / comparative example.

実施例２ 第４図に示すような血液成分分離用器具を軟質塩化ビニ
ル樹脂で作製した。この器具において５６ｍのＣＰＤ
液を収納している容量４００ｍの採血用容器２３にヒ
トの血液（全血）４００ｍを採取したのち、３，５０
０Ｇで５分間強遠心処理に供したところ、上から順に乏
血小板血漿層、血小板濃厚液層、白血球層および赤血球
濃厚液層の各層に分離した。ついで、乏血小板血漿中に
二層目以下の他の成分が混入しないように乏血小板血漿
の少量を残して第１の血液成分流通手段を経て容量３０
０ｍの乏血小板血漿用容器２９に移送し（約２００ｍ
）、また第２および第３層の血小板濃縮液および白血
球および赤血球濃厚液の一部を第２の血液成分流通手段
を経て容量８０ｍの白血球用容器３１に移送（約８０
ｍ）、これにより採血用容器２３内に約１８０ｍの
赤血球濃厚液が残存した。 Example 2 An instrument for separating blood components as shown in FIG. 4 was made of soft vinyl chloride resin. 56m CPD in this device
After collecting 400 m of human blood (whole blood) in a blood collecting container 23 having a capacity of 400 m containing liquid, 3,50
When subjected to a strong centrifugation treatment at 0 G for 5 minutes, the layers were separated into a platelet poor plasma layer, a platelet concentrated liquid layer, a white blood cell layer and an erythrocyte concentrated liquid layer in this order from the top. Then, a small volume of platelet poor plasma is left so as not to mix other components of the second layer and below into the platelet poor plasma, and the volume of 30 is passed through the first blood component circulating means.
Transfer to 0m platelet poor plasma container 29 (about 200m
), And a part of the second and third layers of platelet concentrate and white blood cells and red blood cell concentrate is transferred to the white blood cell container 31 having a capacity of 80 m (about 80%) through the second blood component circulating means.
m), whereby about 180 m of red blood cell concentrate remained in the blood collection container 23.

この赤血球濃厚液に乏血小板血漿用容器２９内の乏血小
板血漿約３０ｍを加えてヘマトクリット値を８０％以
下にした。ついで、乏血小板血漿用容器２９および乏ク
リオプレシピテート血漿用容器３５を採血用容器２３と
切離し、−６０℃に凍結したのち解凍し、約２５００Ｇ
で約２０分間遠心処理したところ、上層に乏クリオプレ
シピテート血漿が、また下層にクリオプレシピテートが
分離したので上層を乏クリオプレシピテート血漿用容器
３５に移送して約１９０ｍを得、乏血小板血漿用容器
２９内には約１０ｍが残存した。一方、白血球用容器
３１および血小板濃縮液用容器３３を採血用容器２３か
ら切離し、約１７０Ｇで５分間弱遠心処理に供したとこ
ろ、上層に血小板濃縮液、また下層に白血球が分離した
ので、上層を血小板濃縮液用容器３３に移送した。About 30 m of platelet-poor plasma in the container 29 for platelet-poor plasma was added to this red blood cell concentrate to make the hematocrit value 80% or less. Then, the container 29 for poor platelet plasma and the container 35 for poor cryoprecipitate plasma are separated from the blood collecting container 23, frozen at -60 ° C., and then thawed to about 2500 G.
After centrifuging for about 20 minutes, the poor cryoprecipitate plasma was separated in the upper layer and the cryoprecipitate was separated in the lower layer. Therefore, the upper layer was transferred to the poor cryoprecipitate plasma container 35 to obtain about 190 m, About 10 m remained in the container 29 for platelet poor plasma. On the other hand, when the white blood cell container 31 and the platelet concentrate container 33 were separated from the blood collection container 23 and subjected to weak centrifugation at about 170 G for 5 minutes, the platelet concentrate was separated in the upper layer and the white blood cells were separated in the lower layer. Were transferred to the platelet concentrate container 33.

このようにして分離された血液の各成分中白血球、赤血
球および血小板の割合は第２表のとおりであった。The proportions of white blood cells, red blood cells and platelets in each component of the blood thus separated are shown in Table 2.

比較例は、従来行なわれている分離方法として、まず全
血を１１００Ｇで約５分間遠心処理し、赤血球濃縮液と
多血小板血漿に分離し、次に多血小板血漿を３５００Ｇ
で約５分間遠心処理して血小板濃縮液と血漿とに分離し
た場合の結果を示す。表中、本発明／比較例として値を
示す。In the comparative example, as a conventional separation method, whole blood was first centrifuged at 1100 G for about 5 minutes to separate the red blood cell concentrate and platelet-rich plasma, and then the platelet-rich plasma at 3500 G.
The results are shown when the platelet concentrate and plasma were separated by centrifugation for about 5 minutes. In the table, values are shown as the present invention / comparative example.

実施例３ 実施例２と同様の器具を用い、乏クリオプレシピテート
血漿用容器３３に赤血球保存液としてグルコース、アデ
ニンおよびコロイド浸透圧調整剤（マンニット）を含有
する生理的食塩水を８０ｍ予め収納しておき、実施例
２と同様な操作を行ない、強遠心処理後、この生理的食
塩水８０ｍを採血用容器に移送して赤血球濃厚液を希
釈した以外は同様の方法を行なった。 Example 3 Using a device similar to that in Example 2, 80 m of physiological saline containing glucose, adenine, and a colloid osmotic pressure adjusting agent (mannit) as a red blood cell preservation solution was previously stored in a container 33 for poor cryoprecipitated plasma. The container was stored, the same operation as in Example 2 was performed, and after the strong centrifugation treatment, 80 m of this physiological saline was transferred to a blood collection container to dilute the concentrated red blood cell liquid, and the same method was performed.

その結果、実施例２と同様の結果が得られた。As a result, the same result as in Example 2 was obtained.

Ｖ．発明の具体的効果 以上述べたように、本発明は、血液を強遠心処理して上
層の（Ａ）乏血小板血漿と、中間層の（Ｂ）血小板およ
び白血球よりなる混合液と、下層の（Ｃ）赤血球濃厚液
とに分画し、該（Ｃ）に示す赤血球濃厚液を（Ａ）に示
す該乏血小板血漿の一部分で希釈して該赤血球濃厚液の
ヘマトクリット値を８０％以下に補正し、さらに（Ｂ）
に示す混合液を弱遠心処理して下層の白血球と上層の血
小板濃縮液とに分画することを特徴とする血液成分分離
方法であるから、強遠心処理により上から順に乏血小板
血漿層、血小板層、白血球層および赤血球濃厚液層に分
離し、血小板は白血球層のクッション性のために強遠心
処理によっても衝撃が加わらず凝集することがない。ま
た、血小板は同一容器内に含まれている血漿中に浮遊で
きるので弱遠心処理により白血球と容易に分離できる。
このため、従来法で必要であったアジテーション操作が
不要になり、活性の損なわれない血小板による製剤が得
られる。また、従来法のように血小板をペレット化する
必要がないので、血小板の損傷が軽減され、採血後、一
昼夜おいてからでも安定な製剤が得られる。したがっ
て、保存期間の延長が可能となる。また、強遠心処理に
より白血球が除去された赤血球濃厚液中には白血球、特
に原因となるリンパ球が極めて少ないので、ＡＴＬＡ感
染が未然に予防できる可能性がある。V. Specific Effects of the Invention As described above, according to the present invention, the blood is subjected to the strong centrifugation treatment, and the upper layer (A) platelet-poor plasma, the intermediate layer (B) a mixture of platelets and leukocytes, and the lower layer ( C) Fractionation into erythrocyte concentrate and diluting the erythrocyte concentrate shown in (C) with a portion of the platelet poor plasma shown in (A) to correct the hematocrit value of the erythrocyte concentrate to 80% or less. , Further (B)
Since it is a blood component separation method characterized by fractionating into a lower layer leukocyte and an upper layer platelet concentrate by weak centrifugation of the mixed solution shown in Fig. 7, the platelet-rich plasma layer, platelets in order from the top by strong centrifugation. Layer, white blood cell layer and erythrocyte concentrated liquid layer are separated, and platelets do not agglomerate due to the cushioning property of the white blood cell layer even if they are subjected to a strong centrifugal treatment without being impacted. In addition, since platelets can float in the plasma contained in the same container, they can be easily separated from white blood cells by weak centrifugation.
Therefore, the agitation operation, which was necessary in the conventional method, is unnecessary, and a preparation of platelets whose activity is not impaired can be obtained. In addition, since it is not necessary to pelletize platelets as in the conventional method, damage to platelets is reduced, and a stable preparation can be obtained even after one day and night after blood collection. Therefore, the storage period can be extended. In addition, since the white blood cells, especially the causative lymphocytes, are extremely small in the red blood cell concentrate from which the white blood cells have been removed by the strong centrifugation treatment, there is a possibility that ATLA infection can be prevented.

また、本発明は、血液を強遠心処理して上層の（Ａ）乏
血小板血漿と、中間層の（Ｂ）血小板および白血球より
なる混合液と、下層の（Ｃ）赤血球濃厚液とに分画し、
該（Ｃ）に示す赤血球濃厚液を（Ａ）に示す該乏血小板
血漿の一部分で希釈して該赤血球濃厚液のヘマトクリッ
ト値を８０％以下に補正し、さらに（Ｂ）に示す混合液
を弱遠心処理して下層の白血球と上層の血小板濃縮液と
に分画し、かつ残りの乏血小板血漿を凍結、解凍および
遠心分離処理に供することによりクリオプレシピテート
と乏クリオプレシピテート血漿とに分画することを特徴
とする血液成分分離方法であるから、前記効果の他に第
VIII因子を極めて高い回収率で得ることができる。しか
も、高濃縮型の製剤として得られるので、副作用等も少
ないという利点がある。In the present invention, blood is subjected to strong centrifugation to fractionate it into an upper layer (A) platelet-poor plasma, an intermediate layer (B) a mixture of platelets and white blood cells, and a lower layer (C) red blood cell concentrate. Then
The red blood cell concentrate shown in (C) is diluted with a part of the platelet poor plasma shown in (A) to correct the hematocrit value of the red blood cell concentrate to 80% or less, and the mixed solution shown in (B) is weakened. Centrifuge to separate into lower layer leukocytes and upper layer platelet concentrate, and freeze, thaw and centrifuge the remaining platelet poor plasma to obtain cryoprecipitate and poor cryoprecipitate plasma. Since it is a blood component separation method characterized by fractionation, in addition to the above effects,
Factor VIII can be obtained with a very high recovery rate. Moreover, since it is obtained as a highly concentrated preparation, there is an advantage that there are few side effects.

また、本発明は、血液導入用管状体を介して採血針に凍
結された採血用容器と、該採血用容器と第１の血液成分
流通手段を介して連結された乏血小板血漿用容器と、該
採血用容器と第２の血液成分流通手段を介して連結され
るとともに該乏血小板血漿用容器と第３の血液成分流通
手段を介して連結された白血球用容器と、該白血球用容
器と第４の血液成分流通手段を介して連結された血小板
濃縮液用容器よりなる血液成分分離用器具であるから、
クローズシステムで血液の多成分を分離することができ
るだけでなく、白血球の混入がなくこのためＡＴＬＡ感
染の心配のない赤血球濃厚液の製造を可能にし、また、
アジテーションやペレット化の必要がないために血小板
の損傷が低くかつ安定した活性を有する血小板製剤の製
造を可能にする。Further, the present invention, a blood collecting container frozen to a blood collecting needle via a blood introducing tubular body, and a platelet poor plasma container connected to the blood collecting container via a first blood component circulating means, A white blood cell container connected to the blood collection container via a second blood component circulating means and connected to the platelet poor plasma container via a third blood component circulating means; Since it is a blood component separation instrument consisting of a container for platelet concentrate, which is connected via the blood component circulation means of 4,
Not only can the multi-components of blood be separated by the closed system, but there is no leukocyte contamination, which makes it possible to produce a concentrated red blood cell that is free from ATLA infection.
It enables the production of platelet preparations with low platelet damage and stable activity because there is no need for agitation or pelletization.

また、本発明は、血液導入用管状体を介して採血針に連
結された採血用容器と、該採血用容器と第１の血液成分
流通手段を介して連結された乏血小板血漿用容器と、該
採血用容器と第２の血液成分流通手段を介して連結され
るとともに該乏血小板血漿用容器と第３の血液成分流通
手段を介して連結された白血球用容器と、該白血球用容
器と第４の血液成分流通手段を介して連結された血小板
濃縮液用容器と、該乏血小板血漿用容器と第５の血液成
分流通手段を介して連結された血小板濃縮液用容器より
なる血液成分分離用器具であるから、前記効果の他に第
VIII因子を極めて高い回収率でかつ高濃度で回収できる
という利点がある。Further, the present invention is a blood collecting container connected to a blood collecting needle via a blood introducing tubular body, and a platelet poor plasma container connected to the blood collecting container via a first blood component circulating means, A white blood cell container connected to the blood collection container via a second blood component circulating means and connected to the platelet poor plasma container via a third blood component circulating means; For separating blood components, the container for platelet concentrates connected via the blood component flow means of No. 4, and the container for platelet poor plasma and the container for platelet concentrates connected via the fifth blood component flow means Since it is a device, in addition to the above effects,
There is an advantage that factor VIII can be recovered with extremely high recovery rate and high concentration.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

第１〜７図は本発明による血液成分分離用器具の各実施
態様を示す正面図、第８図は連通可能な流路閉鎖手段の
一例を示す断面図、第９図は混注ポートの一例を示す断
面図であり、また第１０図は従来の血液成分分離用器具
の一例を示す正面図である。 ２１……採血針、２２……血液導入用管状体 ２３……採血用容器、 ２４，２６，２８，３０，３２，３４，３７，３８，３
９，４……連結チューブ、 ２５，２７……連結具、 ２９……乏血小板血漿用容器、 ３３……血小板濃縮液用容器、 ３１……白血球用容器、 ３５……乏クリオプレシピテート血漿用容器。1 to 7 are front views showing respective embodiments of the blood component separating instrument according to the present invention, FIG. 8 is a sectional view showing an example of a flow path closing means capable of communicating, and FIG. 9 is an example of a mixed injection port. FIG. 10 is a cross-sectional view, and FIG. 10 is a front view showing an example of a conventional blood component separation device. 21 ... Blood collecting needle, 22 ... Blood introducing tubular body 23 ... Blood collecting container, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 37, 38, 3
9,4 ... Connection tube, 25, 27 ... Connection device, 29 ... Platelet-poor plasma container, 33 ... Platelet concentrate container, 31 ... Leukocyte container, 35 ... Poor cryoprecipitate plasma Container.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 川岡 達彦 静岡県富士宮市星山237番地の97 (72)発明者 大中 幸浩 静岡県富士市広見東本町14番地の15 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (72) Inventor Tatsuhiko Kawaoka 237, Hoshiyama, Fujinomiya-shi, Shizuoka 97 (72) Inventor Yukihiro Onaka 15 14, Hiromi Higashihonmachi, Fuji-shi, Shizuoka

Claims (10)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】血液を強遠心処理して上層の（Ａ）乏血小
板血漿と、中間層の（Ｂ）血小板および白血球よりなる
混合液と、下層の（Ｃ）赤血球濃厚液とに分画し、該
（Ｃ）に示す赤血球濃厚液を（Ａ）に示す該乏血小板血
漿の一部分で希釈して該赤血球濃厚液のヘマトクリット
値を８０％以下に補正し、さらに（Ｂ）に示す混合液を
弱遠心処理して下層の白血球と上層の血小板濃縮液とに
分画することを特徴とする血液成分分離方法。1. Blood is subjected to strong centrifugation to be fractionated into an upper layer (A) platelet-poor plasma, an intermediate layer (B) a mixture of platelets and white blood cells, and a lower layer (C) red blood cell concentrate. The red blood cell concentrate shown in (C) is diluted with a part of the platelet poor plasma shown in (A) to correct the hematocrit value of the red blood cell concentrate to 80% or less, and the mixed solution shown in (B) is added. A method for separating blood components, characterized by performing weak centrifugation to separate into white blood cells in the lower layer and platelet concentrate in the upper layer. 【請求項２】強遠心処理は１７００Ｇ〜５５００Ｇで４
〜１０分間行なわれてなる特許請求の範囲第１項記載の
方法。2. Strong centrifugal treatment is performed at 1700G to 5500G.
The method according to claim 1, which is carried out for 10 minutes. 【請求項３】弱遠心処理は７００Ｇ〜６００Ｇで４〜１
０分間行なわれてなる特許請求の範囲第１項または第２
項に記載の方法。3. The weak centrifugal treatment is 700G to 600G and 4-1.
Claim 1 or 2 which is carried out for 0 minutes
The method described in the section. 【請求項４】血液を強遠心処理して上層の（Ａ）乏血小
板血漿と、中間層の（Ｂ）血小板および白血球よりなる
混合液と、下層の（Ｃ）赤血球濃厚液とに分画し、該
（Ｃ）に示す赤血球濃厚液を（Ａ）に示す該乏血小板血
漿の一部分で希釈して該赤血球濃厚液のヘマトクリット
値を８０％以下に補正し、さらに（Ｂ）に示す混合液を
弱遠心処理して下層の白血球と上層の血小板濃縮液とに
分画し、かつ残りの乏血小板血漿を凍結、解凍および遠
心分離処理に供することによりクリオプレシピテートと
乏クリオプレシピテート血漿とに分画することを特徴と
する血液成分分離方法。4. Blood is subjected to strong centrifugation to fractionate into an upper layer (A) platelet-poor plasma, an intermediate layer (B) a mixture of platelets and white blood cells, and a lower layer (C) red blood cell concentrate. The red blood cell concentrate shown in (C) is diluted with a part of the platelet poor plasma shown in (A) to correct the hematocrit value of the red blood cell concentrate to 80% or less, and the mixed solution shown in (B) is added. Weakly centrifuge to fractionate into lower layer leukocytes and upper layer platelet concentrate, and freeze, thaw and centrifuge the remaining platelet poor plasma to obtain cryoprecipitate and cryoprecipitate plasma. A method for separating blood components, which comprises fractionating into 【請求項５】強遠心処理は１７００Ｇ〜５５００Ｇで４
〜１０分間行なわれてなる特許請求の範囲第４項に記載
の方法。5. Strong centrifugal treatment is performed at 1700G to 5500G.
The method according to claim 4, which is performed for 10 minutes. 【請求項６】弱遠心処理は７００Ｇ〜６００Ｇで４〜１
０分間行なわれてなる特許請求の範囲第４項または第５
項に記載の方法。6. The weak centrifugal treatment is 700G to 600G and 4-1.
Claim 4 or 5 which is performed for 0 minutes
The method described in the section. 【請求項７】血液導入用管状体を介して採血針に連結さ
れた採血用容器と、該採血用容器と第１の血液成分流通
手段を介して連結された乏血小板血漿用容器と、該採血
用容器と第２の血液成分流通手段を介して連結されると
ともに該乏血小板血漿用容器と第３の血液成分流通手段
を介して連結された白血球用容器と、該白血球用容器と
第４の血液成分流通手段を介して連結された血小板濃縮
液用容器よりなる血液成分分離用器具。7. A blood collecting container connected to a blood collecting needle via a blood introducing tubular body, a platelet poor plasma container connected to the blood collecting container via a first blood component circulating means, A leukocyte container connected to the blood collection container via the second blood component circulating means and connected to the platelet poor plasma container via the third blood component circulating means; Blood component separating device comprising a container for platelet concentrate, which is connected via the blood component circulating means of. 【請求項８】第４の血液成分流通手段が連通可能な流路
閉鎖手段を備えてなる特許請求の範囲第７項記載の血液
成分分離用器具。8. The blood component separating device according to claim 7, further comprising a flow path closing means capable of communicating with the fourth blood component circulating means. 【請求項９】血液導入用管状体を介して採血針に連結さ
れた採血用容器と、該採血用容器と第１の血液成分流通
手段を介して連結された乏血小板血漿用容器と、該採血
用容器と第２の血液成分流通手段を介して連結されると
ともに該乏血小板血漿用容器と第３の血液成分流通手段
を介して連結された白血球用容器と、該白血球用容器と
第４の血液成分流通手段を介して連結された血小板濃縮
液用容器と、該乏血小板血漿用容器と第５の血液成分流
通手段を介して連結された乏クリオプレシピテート血漿
用容器よりなる血液成分分離用器具。9. A blood collecting container connected to a blood collecting needle via a blood introducing tubular body; a platelet poor plasma container connected to the blood collecting container via a first blood component circulating means; A leukocyte container connected to the blood collection container via the second blood component circulating means and connected to the platelet poor plasma container via the third blood component circulating means; And a blood component comprising a platelet concentrate container connected via the blood component circulating means, and a platelet poor plasma container and a poor cryoprecipitate plasma container connected via a fifth blood component circulating means Separation equipment. 【請求項１０】第４の血液成分流通手段が連通可能な流
路閉鎖手段を備えてなる特許請求の範囲第９項記載の血
液成分分離用器具。10. The blood component separating device according to claim 9, further comprising a flow path closing means capable of communicating with the fourth blood component circulating means.