JPH0634014B2 - 免疫診断用着色粒子 - Google Patents
免疫診断用着色粒子Info
- Publication number
- JPH0634014B2 JPH0634014B2 JP59097466A JP9746684A JPH0634014B2 JP H0634014 B2 JPH0634014 B2 JP H0634014B2 JP 59097466 A JP59097466 A JP 59097466A JP 9746684 A JP9746684 A JP 9746684A JP H0634014 B2 JPH0634014 B2 JP H0634014B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- particles
- immunodiagnosis
- dye
- colored
- serum
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
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Description
【発明の詳細な説明】 [技術分野] 本発明は診断精度の低下をきたすことなく着色された免
疫診断用着色粒子に関するものである。
疫診断用着色粒子に関するものである。
[従来の技術] 免疫診断用粒子としては、従来、ポリスチレンなどの合
成ポリマーの粒子が用いられてきたが、合成ポリマーは
本質的に無色ないし淡色であり、近年の診断用途別に粒
子を着色して用いたり、あるいは着色することにより診
断の精度を向上させるという要請に応えられるものでは
ない。そのために、免疫診断用粒子を着色する試みが種
々なされてきたが、大抵の場合に診断精度の著しい低下
をきたしていた。
成ポリマーの粒子が用いられてきたが、合成ポリマーは
本質的に無色ないし淡色であり、近年の診断用途別に粒
子を着色して用いたり、あるいは着色することにより診
断の精度を向上させるという要請に応えられるものでは
ない。そのために、免疫診断用粒子を着色する試みが種
々なされてきたが、大抵の場合に診断精度の著しい低下
をきたしていた。
[目的] そこで、本発明の目的は、診断精度の低下をきたすこと
なく着色のなされた免疫診断用粒子を提供することにあ
る。
なく着色のなされた免疫診断用粒子を提供することにあ
る。
[発明の構成] 本発明者らは、上述したような要請と問題点に鑑みて免
疫診断用粒子の着色法を種々検討してきた結果、特定の
染料により粒子を着色すれば、診断精度は低下せずに、
むしろ、向上することを見出し、その認識の下に本発明
を完成した。
疫診断用粒子の着色法を種々検討してきた結果、特定の
染料により粒子を着色すれば、診断精度は低下せずに、
むしろ、向上することを見出し、その認識の下に本発明
を完成した。
すなわち、本発明の免疫診断用粒子は、アゾ系またはキ
ノン系の油溶染料から選ばれた少なくとも一つの染料溶
液と混合することにより粒径が0.05〜100 μmのス
チレンの単独重合体または共重合体からなる免疫診断用
粒子を着色してなることを特徴とするものである。
ノン系の油溶染料から選ばれた少なくとも一つの染料溶
液と混合することにより粒径が0.05〜100 μmのス
チレンの単独重合体または共重合体からなる免疫診断用
粒子を着色してなることを特徴とするものである。
本発明において用いられる免疫診断用粒子は、粒径が
0.05〜100 μmであって、水に分散した状態で用い
られるものである。
0.05〜100 μmであって、水に分散した状態で用い
られるものである。
ここで、粒径0.05〜100 μmの免疫診断用粒子は乳
化重合法、シード重合法、沈澱重合法、懸濁重合法、再
分散法などによって製造することができる。染料による
着色は、染料溶液と粒子を混合することにより行う。
化重合法、シード重合法、沈澱重合法、懸濁重合法、再
分散法などによって製造することができる。染料による
着色は、染料溶液と粒子を混合することにより行う。
かかる粒子の材料は、スチレンの単独重合体および共重
合体が使用でき、ポリスチレン,スチレンとこれに共重
合可能なポリマーであってカルボキシル基,水酸基,ア
ミノ基,アルデヒド基,スルホン酸基などを有するモノ
マーとの共重合体、ポリスチレンにカルボキシル基,水
酸基,アミノ基,アルデヒド基,スルホン酸基などを化
学反応、プラズマ処理により導入したものであってもよ
い。
合体が使用でき、ポリスチレン,スチレンとこれに共重
合可能なポリマーであってカルボキシル基,水酸基,ア
ミノ基,アルデヒド基,スルホン酸基などを有するモノ
マーとの共重合体、ポリスチレンにカルボキシル基,水
酸基,アミノ基,アルデヒド基,スルホン酸基などを化
学反応、プラズマ処理により導入したものであってもよ
い。
染料としては、アゾ系またはキノン系の油溶染料を用い
る。具体的には、ソルベントイエロー2、ソルベントイ
エロー14、ソルベントオレンジ1、ソルベントレッド2
3、ソルベントレッド1などのアゾ系油溶染料、オイル
レッド9、ソルベントバイオレット13、ソルベントブル
ー12などのキノン系油溶染料が挙げられる。これらの染
料は、ポリマー粒子を溶解ないし膨潤させる溶媒には溶
解するものの、水には溶解しない。これにより、粒子の
水性分散液、すなわちラテックスと染料溶液とを混合す
ることによって、粒子を染色することができる。
る。具体的には、ソルベントイエロー2、ソルベントイ
エロー14、ソルベントオレンジ1、ソルベントレッド2
3、ソルベントレッド1などのアゾ系油溶染料、オイル
レッド9、ソルベントバイオレット13、ソルベントブル
ー12などのキノン系油溶染料が挙げられる。これらの染
料は、ポリマー粒子を溶解ないし膨潤させる溶媒には溶
解するものの、水には溶解しない。これにより、粒子の
水性分散液、すなわちラテックスと染料溶液とを混合す
ることによって、粒子を染色することができる。
この他の染料によっても染料は可能であるが、粒子の凝
集、染料の脱色あるいは診断精度の低下をもたらすこと
が多い。好ましい染料としては、ソルベントイエロー1
4、ソルベントレッド1、ソルベントブルー12、および
これらの混合物が挙げられる。
集、染料の脱色あるいは診断精度の低下をもたらすこと
が多い。好ましい染料としては、ソルベントイエロー1
4、ソルベントレッド1、ソルベントブルー12、および
これらの混合物が挙げられる。
染料の使用量はポリマーの0.1〜100ppm程度である。
以上のように着色された免疫診断用着色粒子を血清また
は血清タンパク質で処理することにより、診断精度をさ
らに向上させることができる血清または血清タンパク質
の処理は、粒子に抗体または抗原を感作する前であって
も、感作した後であってもよい。
は血清タンパク質で処理することにより、診断精度をさ
らに向上させることができる血清または血清タンパク質
の処理は、粒子に抗体または抗原を感作する前であって
も、感作した後であってもよい。
血清としては、牛血清、子牛血清、うさぎ血清、羊血
清、にわとり血清、人血清などが用いられ、通常リン酸
緩衝液で2〜20倍に希釈して使用する。血清タンパク質
としては、アルブミン、グロブリン、フィブロインなど
が挙げられるが、アルブミンが好ましい。血清タンパク
質は0.1〜10重量%リン酸緩衝液溶液として使用され
る。
清、にわとり血清、人血清などが用いられ、通常リン酸
緩衝液で2〜20倍に希釈して使用する。血清タンパク質
としては、アルブミン、グロブリン、フィブロインなど
が挙げられるが、アルブミンが好ましい。血清タンパク
質は0.1〜10重量%リン酸緩衝液溶液として使用され
る。
処理方法としては、粒子または粒子の水性分散液と、血
清希釈液または血清タンパク質溶液とを例えば室温で2
時間混合した後、上澄液を捨て、リン酸緩衝液で洗浄す
ることができる。
清希釈液または血清タンパク質溶液とを例えば室温で2
時間混合した後、上澄液を捨て、リン酸緩衝液で洗浄す
ることができる。
また、本発明による免疫診断用着色粒子に担持される免
疫反応性物質としては、B型肝炎ウィルス表面抗原(H
Bs抗原)、抗HBs抗体、人絨毛正ゴナドトロピン
(HCG抗原)、抗HCG抗体、イムノグロブリンG、
マイコプラズマ抗原、核酸、核タンパク、エストロゲ
ン、抗エストロゲン抗体などを挙げることができる。
疫反応性物質としては、B型肝炎ウィルス表面抗原(H
Bs抗原)、抗HBs抗体、人絨毛正ゴナドトロピン
(HCG抗原)、抗HCG抗体、イムノグロブリンG、
マイコプラズマ抗原、核酸、核タンパク、エストロゲ
ン、抗エストロゲン抗体などを挙げることができる。
[実施例] 次に、実施例に従って本発明をより詳細に説明するが、
これらにより限定されないこと勿論である。
これらにより限定されないこと勿論である。
実施例1 固形分濃度10%、平均粒径0.7μmのスチレンメタク
リル酸共重合体のラテックス100 gに、室温で染料の
0.1%トルエン溶液2mlをかきまぜながら徐々に添
加し、添加終了後に35℃で2時間かきまぜた。スチーム
蒸留によりトルエンを除去したところ、着色された粒子
のラテックスが得られた。染料としてはソルベントイエ
ロー14(アゾ系油溶染料)、ソルベントレッド1(アゾ
系油溶染料)、ソルベントブルー12(キノン系油溶染
料)、オイルレッド9(キノン系油溶染料)を使用し
た。得られた着色ラテックスにリウマチ因子の抗原を感
作し、スライドテスト法によるリウマチ因子の検出感度
を求めた結果、いずれも無着色ラテックスと同様であっ
た。
リル酸共重合体のラテックス100 gに、室温で染料の
0.1%トルエン溶液2mlをかきまぜながら徐々に添
加し、添加終了後に35℃で2時間かきまぜた。スチーム
蒸留によりトルエンを除去したところ、着色された粒子
のラテックスが得られた。染料としてはソルベントイエ
ロー14(アゾ系油溶染料)、ソルベントレッド1(アゾ
系油溶染料)、ソルベントブルー12(キノン系油溶染
料)、オイルレッド9(キノン系油溶染料)を使用し
た。得られた着色ラテックスにリウマチ因子の抗原を感
作し、スライドテスト法によるリウマチ因子の検出感度
を求めた結果、いずれも無着色ラテックスと同様であっ
た。
実施例2 固形分濃度10%、平均粒径1.4μmのスチレン−トリ
ブロモフェニルアクリレート−メタクリル酸共重合体の
ラテックス100 gに、室温で表1に示す染料の0.01
%クロロフォルム溶液5mlをかきまぜながら徐々に添
加し、添加終了後、50℃で2時間かきまぜた。スチーム
を吹き込んでクロロフォルムを除去すると、分散してい
る粒子が着色されたラテックスが得られた。
ブロモフェニルアクリレート−メタクリル酸共重合体の
ラテックス100 gに、室温で表1に示す染料の0.01
%クロロフォルム溶液5mlをかきまぜながら徐々に添
加し、添加終了後、50℃で2時間かきまぜた。スチーム
を吹き込んでクロロフォルムを除去すると、分散してい
る粒子が着色されたラテックスが得られた。
得られた着色ラテックスにリウマチ因子の抗原を感作
し、マイクロタイター法によりリウマチ因子の検出感度
を測定した。結果を表1に示す。
し、マイクロタイター法によりリウマチ因子の検出感度
を測定した。結果を表1に示す。
比較例1 実施例1において、染料としてパラニルルミナスレッド
G(メチン系染料)、ミケレンブリリアントピンクR
(インジゴ系染料)、銅フタロシアニン(フタロシアニ
ン系染料)またはローズベンガルメチレンブルー(キサ
ンテン系染料)を用いた以外は実施例1と同様に操作し
た。
G(メチン系染料)、ミケレンブリリアントピンクR
(インジゴ系染料)、銅フタロシアニン(フタロシアニ
ン系染料)またはローズベンガルメチレンブルー(キサ
ンテン系染料)を用いた以外は実施例1と同様に操作し
た。
この結果いずれの染料を用いた場合も無着色ラテックス
よりも凝集像が弱く、検出感度が劣るものであった。
よりも凝集像が弱く、検出感度が劣るものであった。
[効 果] 以上説明したように、本発明によれば、アゾ系またはキ
ノン系の油溶染料から選ばれた少なくとも一つの染料溶
液を用いてスチレンの単独重合体または共重合体からな
る免疫診断用粒子を着色することにより、診断精度の低
下をきたすことがなく、むしろ診断精度を向上させるこ
とができる利点がある。
ノン系の油溶染料から選ばれた少なくとも一つの染料溶
液を用いてスチレンの単独重合体または共重合体からな
る免疫診断用粒子を着色することにより、診断精度の低
下をきたすことがなく、むしろ診断精度を向上させるこ
とができる利点がある。
Claims (1)
- 【請求項1】アゾ系またはキノン系の油溶染料から選ば
れた少なくとも一つの染料溶液と混合することにより粒
径が0.05〜100μmのスチレンの単独重合体また
は共重合体からなる免疫診断用粒子を着色してなること
を特徴とする免疫診断用着色粒子。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP59097466A JPH0634014B2 (ja) | 1984-05-17 | 1984-05-17 | 免疫診断用着色粒子 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP59097466A JPH0634014B2 (ja) | 1984-05-17 | 1984-05-17 | 免疫診断用着色粒子 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS60242370A JPS60242370A (ja) | 1985-12-02 |
JPH0634014B2 true JPH0634014B2 (ja) | 1994-05-02 |
Family
ID=14193074
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP59097466A Expired - Lifetime JPH0634014B2 (ja) | 1984-05-17 | 1984-05-17 | 免疫診断用着色粒子 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0634014B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4847199A (en) * | 1987-02-27 | 1989-07-11 | Eastman Kodak Company | Agglutination immunoassay and kit for determination of a multivalent immune species using a buffered salt wash solution |
EP0281327B1 (en) * | 1987-02-27 | 1993-06-30 | EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) | Immunoreactive reagent, method of preparation and its use to determine an immunoreactive species |
JPS63238462A (ja) * | 1987-03-27 | 1988-10-04 | Eiken Kagaku Kk | 特異結合分析法 |
JPH01214760A (ja) * | 1988-02-23 | 1989-08-29 | Teikoku Hormone Mfg Co Ltd | 免疫学的簡易測定方法 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4108974A (en) * | 1976-08-27 | 1978-08-22 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Radioimmunoassay for thyroid hormone |
NL8000173A (nl) * | 1980-01-11 | 1981-08-03 | Akzo Nv | Toepassing van in water dispergeerbare, hydrofobe kleurstoffen als label in immunochemische testen. |
JPS6058420B2 (ja) * | 1980-07-09 | 1985-12-19 | 富士写真フイルム株式会社 | 免疫反応用マイクロカプセル群及びそれを用いた判別方法 |
US4419453A (en) * | 1981-09-28 | 1983-12-06 | The Dow Chemical Company | Immunological agglutination assays with dyed or colored latex and kits |
-
1984
- 1984-05-17 JP JP59097466A patent/JPH0634014B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS60242370A (ja) | 1985-12-02 |
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