JPH06271477A - Treating agent for noninsulin-dependent diabetes - Google Patents

Abstract

PURPOSE:To obtain the subject treating agent effective for curing hyperglycemia and preventing various complications by using a cytotoxic cytokine as an active component. CONSTITUTION:The objective treating agent contains a cytotoxic cytokine (preferably sugar chain-bonded lymphotoxin or tumor necrosis factor) as an active component. It can be produced in purified state from body fluid, cultivation supernatant of human B cell, product of E.coli, etc.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】細胞障害性サイトカイン類を有効
成分とするインスリン非依存型糖尿病治療剤に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a therapeutic agent for non-insulin-dependent diabetes mellitus containing cytotoxic cytokines as active ingredients.

【０００２】[0002]

【従来の技術】糖尿病は臨床的には主として２つの型、
すなわちインスリン依存型糖尿病（ＩＤＤＭ）とインス
リン非依存型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）に分類される（小坂
樹徳、糖尿病の概念との病型分類、日本臨床１９９０年
増刊、糖尿病、１６１〜１６８頁、日本臨床社、大阪
（１９９０）参照）。インスリン依存型糖尿病は主とし
て小児に多尿、多飲を主症状として突然発症し、インス
リンの絶対的不足があるためインスリンを補充しないか
ぎりケトーシスで死亡する重症型である。一方、インス
リン非依存型糖尿病は、肥満型の成人に緩徐に発症する
比較的軽症の糖尿病であるが、患者数が多く、日本では
糖尿病の９０％以上をしめ、２００万人以上の患者がい
るといわれている。BACKGROUND OF THE INVENTION Diabetes mellitus is clinically classified into two main types,
That is, it is classified into insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM) and non-insulin-dependent diabetes mellitus (NIDDM) (Kisunori Kosaka, Classification of Diabetes with the Concept of Diabetes, Japan Clinical 1990 Special Issue, Diabetes, 161-168, Japanese Clinical Company, Osaka (1990)). Insulin-dependent diabetes mellitus is a severe type that develops suddenly in children, mainly due to polyuria and polydipsia, and due to absolute insulin deficiency, death occurs due to ketosis unless insulin is replaced. On the other hand, non-insulin-dependent diabetes mellitus is a relatively mild diabetes that slowly develops in obese adults, but the number of patients is large, and in Japan it accounts for 90% or more of diabetes and more than 2 million patients. It is said that.

【０００３】インスリン依存型糖尿病とインスリン非依
存型糖尿病は成因的にも異なる。インスリン依存型糖尿
病では自己免疫によってインスリンを産生する膵臓β細
胞が選択的に破壊されることが、ＮＯＤマウスやＢＢラ
ットなどのインスリン依存型糖尿病モデル動物を用いた
研究で明らかになっている（佐藤 譲、糖尿病と免疫、
ダイアビーティス フロンティア(Diabetes Frontier)
１、９〜２２頁（１９９０）参照）。これらの動物で
は、正常なクラスII組織適合性抗原遺伝子の導入、胸腺
摘出、正常骨髄の移植、Ｔリンパ球に対する各種抗体投
与、非特異的免疫抑制剤投与など、免疫反応の経路に介
入する各種の免疫療法が糖尿病発症を抑制することが報
告されており、一部はヒトインスリン依存型糖尿病への
応用研究も進んでいる（サトー ジェイ(Satoh J.)ら、
カレント ステイタス オブ プリベンション アンド
トリートメント オブ ダイアベティック コンプリ
ケイションズ (Current status of prevention and tre
atment of diabetic complications) 、エルセビア サ
イエンス パブリッシャーズ ビーブイ(Elsevier Scie
nce Publishers BV)アムステルダム、６５８〜６６１頁
（１９９０）参照）。これらに加えて、本発明者らは、
免疫賦活剤投与による非特異的免疫刺激（トヨタ ティ
ー(Toyota T.) ら、ダイアビーティス(Diabetes)３５、
４９６〜４９９頁（１９８６）およびサトー ジェイ
ら、ダイアビーティス３７、１１８８〜１１９４頁（１
９８８）参照）や、サイトカインであるリンフォトキシ
ン（ＬＴ）（佐藤 譲ら、特開平４−１１２８３５およ
びセイノ エイチ（Seino H.）ら、ダイヤビーティス
（インプレス）参照）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）（サト
ー ジェイ ら、ジャーナル オブ クリニカル イン
ベスティゲーション(J. Clin.Invest.) ８４、１３４５
〜１３４８頁（１９８９）、サトー ジェイら、ジャー
ナル オブ イムノロジー（J. Immunol）１４５、１３
９５〜１３９９頁（１９９０）およびセイノ エイチ
ら、クリニカル アンド エクスペリメンタル イムノ
ロジー（Clin.Exp. Immunol.）８６、４１３〜４１８頁
（１９９１）参照）の投与が膵臓β細胞障害性リンパ球
の誘導を抑制して（シンタニ エス(Shintani S)ら、ジ
ャーナル オブ イムノロジー １４４、１３６〜１４
１頁（１９９０）参照）ＮＯＤマウスやＢＢラットの糖
尿病発症を予防しうることを見出している。Insulin-dependent diabetes and non-insulin dependence
Persistent diabetes is also genetically different. Insulin-dependent diabetes
In the disease, pancreatic β-cells that produce insulin by autoimmunity
That the cells are selectively destroyed is due to NOD mouse and BB
Using insulin-dependent diabetes mellitus model animals such as
Research has revealed (Joe Sato, diabetes and immunity,
Diabetes Frontier
1, Pages 9-22 (1990)). In these animals
Is a normal class II histocompatibility antigen gene transfer, thymus
Excision, transplantation of normal bone marrow, injection of various antibodies against T lymphocytes
Via the pathway of immune response, such as administration of non-specific immunosuppressants
It is reported that various immunotherapies to enter suppress the development of diabetes
Have been reported, and in part to human insulin-dependent diabetes mellitus
Applied research is also progressing (Satoh J. et al.
Current Status of Prevention and
 Treatment of Diabetics Compliment
Nations (Current status of prevention and tre)
atment of diabetic complications), El Seviasa
Jens Publishers Beevey (Elsevier Scie
nce Publishers BV) Amsterdam, pages 658-661.
(1990)). In addition to these, we have
Non-specific immune stimulation by administration of immunostimulants
-(Toyota T.) et al., Diabetes35,
Pp. 496-499 (1986) and Sato J.
Et al, diavitis37, Pp. 1188-1194 (1
988)), and the cytokine phosphorophoxy.
(LT) (Joe Sato et al., Japanese Patent Laid-Open No. 4-112835 and
And Seino H. et al., Diabeatis
(See Impress), Tumor Necrosis Factor (TNF) (Sato
-Jay et al., Journal of Clinical Inn
Vestigation (J. Clin. Invest.)84, 1345
~ 1348 (1989), Sato Jay et al., Jar
Null of Immunology (J. Immunol)145, 13
95-1399 (1990) and Seino H
Et al, Clinical and Experimental Immuno
Logi (Clin.Exp. Immunol.)86Pp. 413-418
(See 1991)) is a pancreatic β-cytotoxic lymphocyte
Inhibition of the induction of
Journal of Immunology144136-14
Page 1 (1990)) Sugars from NOD mice and BB rats
It has been found that the onset of urinary disease can be prevented.

【０００４】一方、インスリン非依存型糖尿病は、イン
スリン産生・分泌障害、インスリン作用抑制物質の存
在、インスリン受容体障害、インスリンの働く場所とそ
の働く機転障害などによるインスリンの相対的不足、す
なわちインスリン感受性の低下を特徴とするが、遺伝因
子と環境因子が共に係わっておりその成因は複雑であ
る。肥満や加齢は、インスリン感受性の低下（インスリ
ン抵抗性）をもたらす重要な要因の一つと考えられてい
る。このインスリン感受性の低下の機序に関し、インス
リンが細胞膜のインスリン受容体に結合してから細胞内
に情報が伝達され、インスリン作用を発揮するまでの経
路の種々の異常が明らかになりつつある（清川裕朗ら、
日本臨床１９９０年増刊、糖尿病、１９６〜２０２頁、
日本臨床社、大阪（１９９０）参照）。このインスリン
非依存型糖尿病治療剤としては、インスリン産生・分泌
障害に対しインスリン合成促進剤や分泌調節剤、高血糖
是正剤として吸収抑制剤、糖利用促進剤、グルコースト
ランスポーター作用剤、肝臓糖新生抑制剤あるいは筋・
脂肪利用剤、また、高血糖の障害抑制剤としてインスリ
ン作用促進剤や抗グリケーション剤、さらには種々の抗
合併症剤などが開発されているが、現在、決め手となる
ような有効な治療法はない。On the other hand, non-insulin-dependent diabetes mellitus is a relative lack of insulin due to impaired insulin production / secretion, presence of insulin action-inhibiting substances, impaired insulin receptor, impaired place of insulin and impaired mechanism of action, ie insulin sensitivity. It is characterized by a decrease in, but its origin is complicated because both genetic factors and environmental factors are involved. Obesity and aging are considered to be one of the important factors that cause a decrease in insulin sensitivity (insulin resistance). Regarding the mechanism of this decrease in insulin sensitivity, various abnormalities in the pathway from the binding of insulin to the insulin receptor on the cell membrane to the intracellular transmission of information to exert insulin action are becoming clear (Kiyokawa Yuro,
Japanese clinical 1990 special edition, diabetes, pages 196-202,
See Nippon Clinic, Osaka (1990)). This non-insulin-dependent diabetes therapeutic agent is an insulin synthesis promoter or secretion regulator for insulin production / secretion disorders, an absorption inhibitor as a hyperglycemia correction agent, a sugar utilization promoter, a glucose transporter agent, and hepatic gluconeogenesis. Inhibitor or muscle
Insulin action accelerators, anti-glycation agents, and various anti-complication agents have been developed as fat utilization agents and hyperglycemia disorder inhibitors. Currently, effective and decisive treatment methods There is no.

【０００５】[0005]

【発明が解決しようとする課題】前記のように、インス
リン非依存型糖尿病の発症のメカニズムは複雑で、確立
した知見はいまだえられていないのが現状であり、有効
な予防または治療法は確立されるまでにいたっていな
い。As described above, the mechanism of onset of non-insulin-dependent diabetes mellitus is complicated, and the established knowledge has not yet been established. Therefore, an effective preventive or therapeutic method is established. It isn't good enough to be done.

【０００６】ところが、最近、正常マウスからインスリ
ン依存型糖尿病モデル動物であるＮＯＤマウスへの同種
骨髄移植が免疫異常を是正して膵島炎やインスリン依存
型糖尿病の発症を予防することができるのと同様に、イ
ンスリン非依存型糖尿病のモデル動物であるＫＫ−Ａｙ
マウス（ナカムラ エム(Nakamura M.) ら、ダイアビー
トロジア(Diabetologia)３、２１２〜２２１頁（１９６
７）およびイワツカエイチ(Iwatsuka H.) ら、ダイアビ
ートロジア １０、６１１〜６１６頁（１９７４）参
照）が正常マウスからの骨髄移植を受けることにより、
高血糖が正常化されることが見出された（サン エス(T
han S.) ら、ジャーナル オブ エクスペリメンタル
メディスン（J.Exp.Med.）１７６、１２３３〜１２３８
頁（１９９２）参照）。そこで、本発明者らはインスリ
ン非依存型糖尿病の高血糖の是正に免疫機序が働いてい
ること、あるいは、何らかの免疫療法剤がインスリン非
依存型糖尿病に有効性を示しうると考え鋭意検討を重ね
た。その結果、腫瘍細胞にたいして広い細胞障害活性を
有するバイオロジカル ファクターとして見出されたリ
ンフォトキシン（以下、ＬＴと称する）（ルッドル エ
ヌ エイチ(RuddleN.H.) 、ワックスマン ビー エイ
チ(Waksman B.H.)、サイエンス(Science) 、１５
（７）、１０６０頁（１９６７）参照）や腫瘍壊死因子
（以下、ＴＮＦと称する）（カースウェル イー エイ
（Carswell E.A.)ら、プロシーディング オブ ナショ
ナル アカデミー オブ サイエンス オブ ユナイテ
ッド ステイト オブ アメリカ(Proc. Nat. Acad. Sc
i. U.S.A.)７２、３６６６〜３６７０頁（１９７５）参
照）を始めとする細胞障害性サイトカイン類が、当初考
えられていた機能（細胞障害性）からはとても推測でき
ないインスリン非依存型糖尿病の予防および治療に有効
であることを見出し、本発明を完成するにいたった。Recently, however, the normal mouse has been installed.
Homologous to NOD mouse, which is a model animal for diabetes-dependent diabetes
Bone marrow transplant corrects immune disorders and results in isletitis and insulin dependence
As well as being able to prevent the onset of type 2 diabetes,
KK-Ay, a model animal for non-insulin-dependent diabetes mellitus
Mouse (Nakamura M.) et al.
Tolzia (Diabetologia)Three, 212-221 (196
7) and Iwatsuka H. et al.
Loggia10, Pp. 611-616 (1974)
By receiving a bone marrow transplant from a normal mouse,
It was found that hyperglycemia was normalized (Sans (T
han S.) et al., Journal of Experimental
Medicine (J.Exp.Med.)176, 1233-1238
Page (1992)). Therefore, the present inventors
Immune mechanism works to correct hyperglycemia in non-dependent diabetes mellitus
Or some immunotherapeutic agent
Considered that it could be effective for dependent diabetes mellitus
It was As a result, it has a broad cytotoxic activity against tumor cells.
That was found as a biological factor
Phototoxin (hereinafter referred to as LT) (Ruddle et
Nu H (Ruddle N.H.), Waxman B.A.
Chi (Waksman B.H.), Science (Science),15
(7), page 1060 (1967)) and tumor necrosis factor
(Hereafter referred to as TNF) (Carswell EIA
(Carswell E.A.) et al., Proceedings of National
Naru Academy of Science of United
Dead State of America (Proc. Nat. Acad. Sc
i.U.S.A.)72, Pp. 3666-3670 (1975)
Initially considered cytotoxic cytokines such as
It can be inferred from the obtained function (cytotoxicity)
Effective in the prevention and treatment of non-insulin dependent diabetes mellitus
Therefore, the present invention has been completed.

【０００７】また、本発明に用いる細胞障害性サイトカ
インは、高血糖症を是正することにより、糖の蛋白への
結合を阻止し、インスリン非依存型糖尿病を原因とする
各種合併症を予防し、かつ高血糖症に基づく高インスリ
ン血症を是正することにより、インスリンによる血管の
Ｎａ^＋の再吸収を緩和し、高インスリン血症を原因とし
た高血圧を予防しうることを見出した。The cytotoxic cytokine used in the present invention corrects hyperglycemia to prevent the binding of sugars to proteins and prevent various complications caused by non-insulin-dependent diabetes mellitus. It was also found that by correcting hyperinsulinemia due to hyperglycemia, reabsorption of vascular Na ⁺ by insulin can be alleviated, and hypertension caused by hyperinsulinemia can be prevented.

【０００８】[0008]

【課題を解決するための手段】本発明は細胞障害性サイ
トカイン類を有効成分とするインスリン非依存型糖尿病
の予防および治療剤に関する。The present invention relates to a prophylactic and therapeutic agent for non-insulin-dependent diabetes mellitus containing cytotoxic cytokines as active ingredients.

【０００９】[0009]

【実施例】本発明で言う細胞障害性サイトカイン類と
は、前記の単離可能なＬＴやＴＮＦばかりでなく、種々
の未同定物質も含み、免疫担当細胞と呼ばれるリンパ
球、単球、マクロファージ、ＮＫ細胞、ＬＡＫ細胞など
が産生するサイトカインと呼ばれる蛋白質、糖蛋白質の
うち、これら免疫細胞のアポプトーシスを含めた細胞障
害活性を有する生理活性物質を意味する。Examples The cytotoxic cytokines referred to in the present invention include not only the above-mentioned isolatable LT and TNF but also various unidentified substances, and are called immunocompetent cells such as lymphocytes, monocytes, macrophages, Among proteins and glycoproteins called cytokines produced by NK cells, LAK cells and the like, it means a physiologically active substance having a cytotoxic activity including apoptosis of these immune cells.

【００１０】さらに、前記細胞障害性サイトカイン類に
は前述した天然のサイトカインのほかに、遺伝子工学的
に動物細胞に産生させることによりえられる天然型サイ
トカイン、天然型サイトカインの蛋白質部分の遺伝子を
大腸菌に組み込み大腸菌からえるリコンビナントサイト
カイン、天然型サイトカインおよび／またはリコンビナ
ントサイトカインを会合または架橋してえられる多量体
サイトカイン、活性部位サイトカインまたは活性部位を
会合または架橋して多量体としてえられる活性部位サイ
トカインもまた含まれる。In addition to the above-mentioned natural cytokines, the above-mentioned cytotoxic cytokines include a natural cytokine obtained by genetically engineering animal cells, and a gene of the protein portion of the natural cytokine in E. coli. Also included are recombinant cytokines derived from integrated Escherichia coli, natural cytokines and / or multimeric cytokines obtained by associating or cross-linking recombinant cytokines, active site cytokines, or active site cytokines obtained as multimers by associating or cross-linking active sites. Be done.

【００１１】また、ここでいう細胞障害性サイトカイン
には糖鎖結合型および糖鎖の結合していないもの、さら
に遺伝子組換えなどにより修飾されたものもまた含まれ
る。さらに、細胞障害性サイトカインで誘導された体液
もまた含まれる。Further, the cytotoxic cytokines referred to herein include sugar chain-bound and unbound sugar chains, and those modified by gene recombination and the like. In addition, body fluids induced with cytotoxic cytokines are also included.

【００１２】この細胞障害性サイトカイン類は、高血糖
時においては同サイトカイン誘導剤に比べ即効性があ
り、また、持続性がないため低血糖症などの副作用を引
き起こす可能性が少ないなどの利点を有する。[0012] The cytotoxic cytokines have an immediate effect as compared with the cytokine inducer at the time of hyperglycemia, and because they are not persistent, they are less likely to cause side effects such as hypoglycemia. Have.

【００１３】かかる細胞障害性サイトカイン類の具体例
としては、リンフォトキシン（ＬＴ）、腫瘍壊死因子
（ＴＮＦ）などがあげられる。Specific examples of such cytotoxic cytokines include lymphotoxin (LT) and tumor necrosis factor (TNF).

【００１４】これらのうち、ＬＴ（佐藤 譲ら、特開平
４−１１２８３５およびセイノ エイチ（Seino H.）
ら、ダイヤビーティス（インプレス）参照）およびＴＮ
Ｆ（サトー ジェイ ら、ジャーナル オブ クリニカ
ル インベスティゲーション(J. Clin.Invest.) ８４、
１３４５〜１３４８頁（１９８９）、サトー ジェイ
ら、ジャーナル オブ イムノロジー（J. Immunol）１
４５、１３９５〜１３９９頁（１９９０）およびセイノ
エイチら、クリニカル アンド エクスペリメンタル
イムノロジー（Clin.Exp. Immunol.）８６、４１３〜
４１８頁（１９９１）参照）の使用は、インスリン非依
存型糖尿病のみならずインスリン依存型糖尿病にたいし
ても有効性を示しうることから、とくに好ましい。Among these, LT (Joe Sato et al., Japanese Patent Laid-Open No. 4-112835 and Seino H.)
Et al., Diabeattis (see Impress)) and TN
F (Sato Jay et al., Journal of Clinical Investigation (J. Clin.Invest.) 84 ,
Pp.1354-1348 (1989), Sato J et al., Journal of Immunology (J. Immunol) 1
45 , 1395-1399 (1990) and Seino H et al., Clinical and Experimental Immunology (Clin.Exp. Immunol.) 86 , 413-.
The use of (see page 418 (1991)) is particularly preferable because it can be effective not only for non-insulin-dependent diabetes but also for insulin-dependent diabetes.

【００１５】本発明における細胞障害性サイトカイン
は、具体的には、たとえばＬＴやＴＮＦのばあい、体液
から精製する方法、チャイニーズハムスター卵母細胞培
養上清から精製する方法（特開昭６２−１１０９５号公
報参照）、ＥＢウイルスで形質転換したヒトＢ細胞の培
養上清から精製する方法（アガワル(Aggarwal)ら、ジャ
ーナル オブ バイオロジカル ケミストリー(J.Biol.
Chem.)２５９、６８６頁（１９８４）参照）または蛋白
質部分を大腸菌産生物から精製し糖鎖部分を化学反応に
より結合させる方法などがあるがいずれの方法でもよ
い。なお、本発明において体液とは血液、血漿、血清、
腹水、リンパ液、関節内液およびこれらからえられた分
画成分ならびにその他の生体由来の液性成分をいう。The cytotoxic cytokine of the present invention is specifically purified from body fluids such as LT and TNF, and purified from Chinese hamster oocyte culture supernatant (JP-A-62-11095). No.), a method for purifying the culture supernatant of human B cells transformed with EB virus (Aggarwal et al., Journal of Biological Chemistry (J. Biol.
Chem.) 259 , 686 (1984)) or a method in which the protein portion is purified from an E. coli product and the sugar chain portion is bound by a chemical reaction, but any method may be used. In the present invention, body fluid means blood, plasma, serum,
Ascites, lymph, synovial fluid, fractionated components obtained from these, and other biologically derived liquid components.

【００１６】前記ＬＴおよびＴＮＦの蛋白質としての性
質についてはアガワルらによって報告されている（ジャ
ーナル オブ バイオロジカル ケミストリー ２６
０、２４５頁（１９８５）および同誌、２５９、６８６
頁（１９８４）参照）。The protein properties of LT and TNF have been reported by Agawar et al. (Journal of Biological Chemistry 26.
0 , 245 (1985) and ibid, 259 , 686.
Pp. (1984)).

【００１７】本発明のインスリン非依存型糖尿病予防治
療剤は、細胞障害性サイトカイン類を各種剤形で使用す
ることができる。かかる剤形の具体例としては、たとえ
ば、注射剤、経口剤などがあげられる。これらの各種剤
形の製剤は常法にしたがい、治療目的に応じて、賦形
剤、結合剤、溶解剤、溶解補助剤、乳化剤、懸濁化剤な
どの製剤技術分野において通常使用することができる担
体を用いて調製することができる。このような担体とし
ては、たとえば、乳糖、白糖、ブドウ糖、デンプン、結
晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、
カルボキシメチルセルロース、アラビアゴム、ゼラチ
ン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水リン酸カ
ルシウム、クエン酸、クエン酸ナトリウム、ヒドロキシ
プロピルセルロース、ソルビトール、ソルビタン脂肪酸
エステル、ポリビニルピロリドン、植物油（落花生油、
オリーブ油など）、ベンジルアルコール、プロピレング
リコール、水などがあげられる。The non-insulin-dependent diabetes preventive / therapeutic agent of the present invention can use cytotoxic cytokines in various dosage forms. Specific examples of such dosage forms include injections and oral preparations. According to the usual method, the preparations of these various dosage forms are usually used in the technical field of preparation such as excipients, binders, solubilizers, solubilizers, emulsifiers, suspending agents, etc. according to the therapeutic purpose. It can be prepared using any carrier. Examples of such a carrier include lactose, sucrose, glucose, starch, crystalline cellulose, hydroxypropylmethyl cellulose,
Carboxymethyl cellulose, gum arabic, gelatin, magnesium aluminometasilicate, anhydrous calcium phosphate, citric acid, sodium citrate, hydroxypropyl cellulose, sorbitol, sorbitan fatty acid ester, polyvinylpyrrolidone, vegetable oil (peanut oil,
Olive oil, etc.), benzyl alcohol, propylene glycol, water and the like.

【００１８】細胞障害性サイトカイン類としてＬＴまた
はＴＮＦを用いる際の投与方法としては、既知の投与方
法のいずれを用いてもよいが、とくに静脈内投与または
経口投与が好ましい。ＬＴまたはＴＮＦは、液体、たと
えば、生理食塩水、リンゲル液などに溶解し、体内に投
与する。なお、肝臓へのターゲッチングを目的とした処
理としては、たとえばアシアロＧＭ１などを表面に有す
るリポソームを使用し、液体、たとえば生理食塩水、リ
ンゲル液などに溶解し、体内に投与する方法があげられ
る。As the administration method when LT or TNF is used as the cytotoxic cytokine, any known administration method may be used, but intravenous administration or oral administration is particularly preferable. LT or TNF is dissolved in a liquid, such as physiological saline or Ringer's solution, and administered into the body. As a treatment for the purpose of targeting to the liver, for example, a method in which a liposome having asialo GM1 or the like on its surface is used, dissolved in a liquid such as physiological saline or Ringer's solution, and administered into the body, can be mentioned.

【００１９】細胞障害性サイトカインのヒトに対する投
与量は１０⁴ 〜１０⁹ 単位／日である。The human dose of the cytotoxic cytokine is 10 ⁴ to 10 ⁹ units / day.

【００２０】ＬＴまたはＴＮＦのばあい、ヒトに静脈注
射剤として投与する際には、有効成分量１０⁴ 〜１０⁸
単位／日の範囲から選ばれる。ＬＴおよびＴＮＦの単位
については、山崎ら（ヤマザキ エス(Yamazakai, S.)
、オーニシ イーら（Onishi,E, et al.) 、ジャパニ
ーズ ジャーナル オブ メディカル サイエンス ア
ンド バイオロジー(Japanese Journal of Medical Sci
ence & Biology) ３９、１０５頁（１９８６）参照）の
方法によった。なお、ＬＴおよびＴＮＦのＬＤ５０値
は、マウスに静脈注射剤として投与するばあい、それぞ
れ１００，０００単位／匹である。In the case of LT or TNF, when administered to humans as an intravenous injection, the amount of active ingredient is 10 ⁴ to 10 ⁸
It is selected from the unit / day range. For the units of LT and TNF, see Yamazaki et al. (Yamazakai, S.)
, Onishi, E, et al., Japanese Journal of Medical Sci
ence & Biology) 39 , 105 (1986)). The LD50 values of LT and TNF are 100,000 units / mouse when administered as an intravenous injection to mice.

【００２１】以下、実施例により本発明をさらに具体的
に説明するが、本発明はその要旨を超えない限りかかる
実施例にのみ限定されるものではない。Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples, but the present invention is not limited to such Examples as long as the gist thereof is not exceeded.

【００２２】サイトカインの調製例 以下のそれぞれの処方にしたがって細胞障害性サイトカ
インを含有する注射用溶液を調製した。Preparation Example of Cytokine An injectable solution containing a cytotoxic cytokine was prepared according to the following respective formulations.

【００２３】 調製例１ 糖鎖結合型ＬＴ ２５，０００ 単位 局方生理食塩水 １ ｍｌ 計 １ ｍｌ 調製例２ ＴＮＦ ２５，０００ 単位 局方生理食塩水 １ ｍｌ 計 １ ｍｌ 参考調製例１ インターロイキン ５，０００ 単位 ５０，０００ 単位 （ＩＬ）−２ 局方生理食塩水 １ ｍｌ １ ｍｌ 計 １ ｍｌ １ ｍｌ 参考調製例２ マウスインター フェロン(IFN) −γ ５，０００ 単位 ５０，０００ 単位 局方生理食塩水 １ ｍｌ １ ｍｌ 計 １ ｍｌ １ ｍｌ 参考調製例３ インスリン ４０ 単位／ｍｌ ０．１５ｍｌ 局方生理食塩水 ２．８５ｍｌ 計 ３．００ｍｌ ここで、各サイトカインは糖鎖結合型ＬＴ（鐘淵化学工
業（株）製）、ＴＮＦ（林原生物化学研究所製）、イン
ターロイキン−２およびマウスインターフェロン−γ
（塩野義製薬（株）製）およびインスリン（レンテ エ
ムシー）（ノボ(Nobo.) 社製）を用いた。Preparation Example 1 Sugar chain binding type LT 25,000 Unit pharmacopoeial saline 1 ml Total 1 ml Preparation example 2 TNF 25,000 Unit pharmacopoeial saline 1 ml Total 1 ml Reference Preparation Example 1 Interleukin 5 , 000 units to 50,000 units (IL) -2 pharmacopoeial physiological saline 1 ml 1 ml total 1 ml 1 ml reference preparation example 2 mouse interferon (IFN) -γ 5,000 units 50,000 units pharmacopoeial physiological saline Water 1 ml 1 ml Total 1 ml 1 ml Reference Preparation Example 3 Insulin 40 units / ml 0.15 ml Pharmacopoeial saline 2.85 ml Total 3.00 ml where each cytokine is a sugar chain-bonded LT ( Kanebuchi Kagaku Kogyo) Co., Ltd.), TNF (manufactured by Hayashibara Institute of Biochemistry), interleukin-2 and mouse interferon-γ.
(Shionogi Pharmaceutical Co., Ltd.) and insulin (Lente EMC) (Nobo.) Were used.

【００２４】実施例１ ブドウ糖負荷試験とサイトカイン投与後の血糖値 雄性ＫＫ−Ａｙ／Ｔａｋｃｌマウス（日本クレア製、８
〜２０週令、投与開始時の体重２５〜３０ｇ）に、調製
例１〜２および参考調製例１〜２にしたがって調製した
サイトカイン類の注射溶液各０．２ｍｌまたは生理食塩
水０．２ｍｌを、一回腹腔内に投与した。その後絶食さ
せ、５時間後に２０％ブドウ糖液２ｇ／ｋｇ体重を同じ
マウスの腹腔内に投与した。血糖測定は、各サイトカイ
ンまたは生理食塩水の投与直前ならびに２０％ブドウ糖
液投与直前および１時間後に、尾部に注射針で傷をつ
け、毛細血２０μｌをとって検量線から血糖値が導き出
せるように希釈したものを用いてグルコース酸化酵素法
により、血糖測定機（レフロラックス、ベーリンガー−
マンハイム(Behringer-Mannheim)社製）にて測定した。
この測定機の感度は血糖１０〜５００ｍｇ／ｄｌの範囲
であった。結果を表１に示す。なお、データはそれぞれ
５匹の平均と標準偏差を示す。Example 1 Glucose tolerance test and blood glucose level after cytokine administration Male KK-Ay / Takcl mouse (CLEA Japan, 8
-20 weeks old, body weight 25 to 30 g at the start of administration, 0.2 ml each of the injectable solution of cytokines prepared according to Preparation Examples 1-2 and Reference Preparation Examples 1-2 or 0.2 ml of physiological saline, It was administered once intraperitoneally. Then, the mice were fasted, and 5 hours later, 2 g / kg body weight of 20% glucose solution was intraperitoneally administered to the same mouse. Blood glucose was measured just before the administration of each cytokine or physiological saline, and immediately before and 1 hour after the administration of 20% glucose solution, the tail was injured with an injection needle, and 20 μl of capillary blood was taken to dilute the blood glucose level from the calibration curve. The glucose oxidase method is used to measure blood glucose (reflorax, Boehringer-
Mannheim (manufactured by Behringer-Mannheim)).
The sensitivity of this measuring instrument was in the range of blood glucose of 10 to 500 mg / dl. The results are shown in Table 1. The data show the average and standard deviation of 5 animals, respectively.

【００２５】[0025]

【表１】 [Table 1]

【００２６】ＫＫ−Ａｙマウスはインスリン抵抗性を有
し、９週令から１６週令まで高血糖（通常、正常マウス
の血糖値に比べ３〜４倍高い）が継続する肥満と高イン
スリン血症を特徴とするインスリン非依存型糖尿病モデ
ル動物であるが、表１に示したように、ＬＴの投与は絶
食後の血糖値の低下を引き起こすのみならず、ブドウ糖
負荷時の血糖の上昇を抑制した。なお、ＬＴと同様、Ｔ
ＮＦにも明らかなＬＴ様の作用が観察されたが、ＩＬ−
２およびマウスＩＦＮ−γには同様な作用が認められな
かった。さらに、これらＬＴおよびＴＮＦの耐糖能改善
作用はＫＫ−Ａｙマウスに対して特有なものではなく、
他のインスリン非依存型糖尿病動物モデル、たとえば、
インスリン分泌不全とインスリン感受性低下を特徴とす
るＧＫラットでも認められた。KK-Ay mice have insulin resistance, and hyperglycemia (usually 3 to 4 times higher than the blood glucose level of normal mice) continues from 9 weeks to 16 weeks of age. Obesity and hyperinsulinemia. As shown in Table 1, administration of LT not only causes a decrease in blood glucose level after fasting but also suppresses an increase in blood glucose during glucose load as shown in Table 1. . In addition, like LT, T
A clear LT-like effect was also observed in NF, but IL-
2 and mouse IFN-γ had no similar effect. Furthermore, the glucose tolerance improving effects of these LT and TNF are not unique to KK-Ay mice,
Other non-insulin dependent diabetic animal models, such as
It was also observed in GK rats characterized by defective insulin secretion and reduced insulin sensitivity.

【００２７】前記のごとく、ＬＴおよびＴＮＦで代表さ
れる細胞障害性サイトカインを有効成分とする本発明の
治療剤は、各種の要因で生じるインスリン非依存型糖尿
病治療剤として有効であることがわかった。As described above, the therapeutic agent of the present invention containing a cytotoxic cytokine represented by LT and TNF as an active ingredient was found to be effective as a therapeutic agent for non-insulin-dependent diabetes caused by various factors. .

【００２８】実施例２ ブドウ糖負荷試験とＬＴ投与後の血糖値 （インスリン非依存型糖尿病モデルマウスと正常マウス
との比較）雄性ＫＫ−Ａｙ／Ｔａｋｃｌマウス（日本ク
レア製、９週令、投与開始時の体重２５〜３０ｇ）およ
びＢＡＬＢ／ｃマウス（ＳＬＣ製、９週令、投与開始時
の体重２０〜２５ｇ）に、調製例１にしたがって調製し
たＬＴの注射溶液０．２ｍｌまたは生理食塩水０．２ｍ
ｌを、それぞれに一回腹腔内に投与した。その後絶食さ
せ、５時間後に２０％ブドウ糖液２ｇ／ｋｇ体重を同じ
マウスの腹腔内に投与した。血糖測定は、ＬＴまたは生
理食塩水の投与直前ならびに２０％ブドウ糖液投与直
前、１および１９時間後に、尾部に注射針で傷をつけ、
毛細血２０μｌをとって検量線から血糖値が導き出せる
ように希釈したものを用いてグルコース酸化酵素法によ
り、血糖測定機（レフロラックス、ベーリンガー−マン
ハイム社製）にて測定した。この測定機の感度は血糖１
０〜５００ｍｇ／ｄｌの範囲であった。結果を表２およ
び図１に示す。なお、データはＫＫ−Ａｙ／Ｔａｋｃｌ
マウス群については３匹、ＢＡＬＢ／ｃマウス群につい
ては６匹の平均と標準偏差を示す。Example 2 Glucose tolerance test and blood glucose level after LT administration (comparison between insulin-independent diabetes model mouse and normal mouse) Male KK-Ay / Takcl mouse (CLEA Japan, 9 weeks old, at the start of administration) Body weight of 25 to 30 g) and BALB / c mice (manufactured by SLC, 9 weeks old, body weight of 20 to 25 g at the start of administration) of 0.2 ml of the injection solution of LT prepared according to Preparation Example 1 or physiological saline. 2m
1 was administered intraperitoneally once for each. Then, the mice were fasted, and 5 hours later, 2 g / kg body weight of 20% glucose solution was intraperitoneally administered to the same mouse. Blood glucose was measured just before administration of LT or physiological saline and immediately before administration of 20% glucose solution, and 1 and 19 hours later, by injuring the tail with an injection needle,
The blood glucose was measured by a glucose oxidase method (Leflorax, Boehringer-Mannheim) by the glucose oxidase method using 20 μl of capillary blood and diluted so that the blood glucose level could be derived from the calibration curve. Blood glucose 1
It was in the range of 0 to 500 mg / dl. The results are shown in Table 2 and FIG. The data is KK-Ay / Takcl.
The mean and standard deviation of 3 mice for the mouse group and 6 for the BALB / c mouse group are shown.

【００２９】[0029]

【表２】 [Table 2]

【００３０】表２および図１より、５０単位／匹のＬＴ
を投与したばあいの効果は明らかではないが、５００、
５０００単位／匹のＬＴを投与したばあいには有意な効
果がえられることがわかる。From Table 2 and FIG. 1, 50 units / animal LT
, The effect of administration is not clear, but 500,
It can be seen that a significant effect can be obtained when 5000 units / mouse of LT is administered.

【００３１】実施例３ ブドウ糖負荷試験とＬＴ投与後の血糖値 雄性ＫＫ−Ａｙ／Ｔａｋｃｌマウス（日本クレア製、９
または１６週令、投与開始時の体重２５〜３０ｇ）に、
調製例１にしたがって調製したＬＴの注射溶液０．２ｍ
ｌまたは生理食塩水０．２ｍｌを、それぞれ一回腹腔内
に投与した。その後絶食させ、５時間後に２０％ブドウ
糖液２ｇ／ｋｇ体重を同じマウスの腹腔内に投与した。
血糖測定は、ＬＴまたは生理食塩水の投与直前ならびに
２０％ブドウ糖液投与直前および１時間後に、尾部に注
射針で傷をつけ、毛細血２０μｌをとって検量線から血
糖値が導き出せるように希釈したものを用いてグルコー
ス酸化酵素法により、血糖測定機（レフロラックス、ベ
ーリンガー−マンハイム社製）にて測定した。この測定
機の感度は血糖１０〜５００ｍｇ／ｄｌの範囲であっ
た。結果を表３および図２に示す。ここで図２は９週令
のマウス群と１６週令のマウス群についての各血糖値の
経時的変化を示す。なお、データは９週令のマウス群に
ついては３匹、１６週令のマウス群については５匹の平
均と標準偏差を示す。Example 3 Glucose tolerance test and blood glucose level after LT administration Male KK-Ay / Takcl mouse (CLEA Japan, 9
Or 16 weeks old, body weight at the start of administration 25-30 g),
0.2 m of injection solution of LT prepared according to Preparation Example 1
1 or 0.2 ml of physiological saline was intraperitoneally administered once each. Then, the mice were fasted, and 5 hours later, 2 g / kg body weight of 20% glucose solution was intraperitoneally administered to the same mouse.
Blood glucose was measured just before administration of LT or physiological saline, and immediately before and 1 hour after administration of 20% glucose solution, the tail was injured with an injection needle, and 20 μl of capillary blood was taken and diluted so that the blood glucose level could be derived from the calibration curve. The glucose oxidase method was used to measure with a blood glucose meter (Leflorax, manufactured by Boehringer-Mannheim). The sensitivity of this measuring instrument was in the range of blood glucose of 10 to 500 mg / dl. The results are shown in Table 3 and FIG. Here, FIG. 2 shows changes with time of each blood glucose level in the 9-week-old mouse group and the 16-week-old mouse group. The data show the average and standard deviation of 3 mice for the 9-week-old group and 5 mice for the 16-week-old group.

【００３２】[0032]

【表３】 [Table 3]

【００３３】表３および図２より、ＬＴは１６週令マウ
ス群に対しても９週令マウス群と同様の効果を示すこと
がわかる。From Table 3 and FIG. 2, it can be seen that LT exhibits the same effect on the 16-week-old mouse group as on the 9-week-old mouse group.

【００３４】実施例４ ＬＴ投与後の血糖値 雄性ＫＫ−Ａｙ／Ｔａｋｃｌマウス（日本クレア製、９
週令、投与開始時の体重２５〜３０ｇ）に、調製例１に
したがって調製したＬＴの注射溶液０．２ｍｌまたは生
理食塩水０．２ｍｌを、一回腹腔内に投与した。また参
考調製例３にしたがって調製したインスリン注射溶液
０．２５ｍｌを一回皮下に投与した。その後、餌を自由
摂取させたマウス群と２４時間絶食させたマウス群の血
糖値を測定した。血糖測定は、ＬＴ、インスリンまたは
生理食塩水の投与直前、投与後１、２、３、５、７およ
び２４時間後に尾部に注射針で傷をつけ、毛細血２０μ
ｌをとって検量線から血糖値が導き出せるように希釈し
たものを用いてグルコース酸化酵素法により、血糖測定
機（レフロラックス、（ベーリンガー−マンハイム社
製）にて測定した。この測定機の感度は血糖１０〜５０
０ｍｇ／ｄｌの範囲であった。結果を表４および図３に
示す。Example 4 Blood glucose level after LT administration Male KK-Ay / Takcl mouse (Nippon Clea, 9
At the age of week, body weight 25 to 30 g at the start of administration, 0.2 ml of the injection solution of LT prepared according to Preparation Example 1 or 0.2 ml of physiological saline was intraperitoneally administered once. In addition, 0.25 ml of the insulin injection solution prepared according to Reference Preparation Example 3 was subcutaneously administered once. Then, the blood glucose level of the group of mice that freely ingested the food and the group of mice that fasted for 24 hours were measured. Blood glucose was measured just before administration of LT, insulin or physiological saline, 1, 2, 3, 5, 7 and 24 hours after administration by injuring the tail with an injection needle,
The blood glucose level was measured by a glucose oxidase method (reflorax, manufactured by Boehringer-Mannheim Co.) by using the one obtained by diluting l so that the blood glucose level could be derived from the calibration curve. The sensitivity of this measurement instrument was blood glucose. 10-50
It was in the range of 0 mg / dl. The results are shown in Table 4 and FIG.

【００３５】ここで、表４および図３は餌を自由摂取さ
せたマウス群と絶食させたマウス群についての各血糖値
の経時的変化を示す。なおデータはそれぞれ３匹の平均
と標準偏差を示す。Here, Table 4 and FIG. 3 show changes with time of each blood glucose level in the group of mice in which the food was freely ingested and the group of mice in which the food was fasted. The data show the average and standard deviation of 3 animals.

【００３６】[0036]

【表４】 [Table 4]

【００３７】図３より、ＬＴ投与後餌を自由摂取させる
ばあいも絶食させるばあいも両者とも７時間以内に血糖
値が正常マウスであるＢＡＬＢ／Ｃマウスの血糖値レベ
ル（表２参照）に達することがわかる。さらに、ＬＴ投
与後に自由摂取させたマウス群に対するＬＴの効果は少
なくとも２４時間持続すると考えられ、一方、ＬＴ投与
後に絶食させたマウス群に対するＬＴの効果は７時間以
内ではインスリンの０．５単位（致死量の１／２）に相
当することがわかる（絶食状態では生理食塩水を投与し
た対照群でも２４時間経過すると血糖値が正常域まで低
下するため、ＬＴの持続効果は評価できない）。From FIG. 3, it can be seen that the blood glucose level of BALB / C mice, which are normal mice, was within 7 hours both when the food was freely taken after LT administration and when it was fasted (see Table 2). I know you will reach. Furthermore, it is considered that the effect of LT on the group of mice that were allowed to freely ingest after LT administration was sustained for at least 24 hours, while the effect of LT on the group of mice that were fasted after LT administration was 0.5 unit of insulin ( It is found to be equivalent to 1/2 of the lethal dose (in the fasted state, the sustained effect of LT cannot be evaluated because the blood glucose level falls to the normal range even after 24 hours even in the control group administered with physiological saline).

【００３８】また、同様に血中脂質に関するＬＴの効果
を調べたところ、ＬＴ投与２４時間後におけるトリグリ
セライドの軽度な増加を除き、トリグリセライドおよび
遊離脂肪酸の変化は認められなかった。Similarly, when the effect of LT on blood lipids was examined, changes in triglyceride and free fatty acid were not observed except for a slight increase in triglyceride 24 hours after LT administration.

【００３９】さらに、トリグリセライドに関するインス
リンの効果を調べたところ、効果は認められなかった。Furthermore, when the effect of insulin on triglyceride was examined, no effect was observed.

【００４０】実施例５ サイトカイン投与後の血中インスリン濃度 雄性ＫＫ−Ａｙ／Ｔａｋｃｌマウス（日本クレア製、９
週令、投与開始時の体重２５〜３０ｇ）に、調製例１に
したがって調製したＬＴの注射溶液０．２ｍｌまたは生
理食塩水０．２ｍｌを、一回腹腔内に投与した。その
後、餌を自由摂取させたマウス群と２４時間絶食させた
マウス群の血中インスリン濃度を測定した。血中インス
リン濃度の測定は、ＬＴまたは生理食塩水の投与直前、
投与後１、２、３、５、７時間後に、尾部に注射針で傷
をつけ、毛細血２０μｌを採取し、酵素標識免疫吸着測
定法（ＥＬＩＳＡ）により、イムノボール・ＩＲＩネオ
（東洋紡／小野薬品工業（株）製）を用いて測定した。
この測定法の感度は血中インスリン１０〜３２０μＵ／
ｍｌの範囲であり、検量線からインスリン濃度を導き出
せるように血液を適時希釈し、測定した。結果を表５、
表６および図４に示す。表５は餌を自由摂取させたマウ
ス群についての血中インスリン濃度の経時的変化を、表
６は絶食させたマウス群についての血中インスリン濃度
の経時的変化を示し、図６はこれらをグラフ化したもの
である。なお、データはそれぞれ５匹の平均と標準偏差
を示す。Example 5 Insulin concentration in blood after administration of cytokine Male KK-Ay / Takcl mouse (manufactured by CLEA Japan, 9
At the age of week, body weight 25 to 30 g at the start of administration, 0.2 ml of the injection solution of LT prepared according to Preparation Example 1 or 0.2 ml of physiological saline was intraperitoneally administered once. After that, the blood insulin concentration was measured in the group of mice that freely ingested the food and the group of mice that fasted for 24 hours. Blood insulin concentration can be measured immediately before administration of LT or physiological saline,
At 1, 2, 3, 5, and 7 hours after administration, the tail was injured with an injection needle, 20 μl of capillary blood was collected, and immunoball IRI Neo (Toyobo / Ono) was analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). It was measured using Yakuhin Kogyo Co., Ltd.
The sensitivity of this assay is 10-320 μU /
It was in the range of ml, and blood was diluted and measured at appropriate times so that the insulin concentration could be derived from the calibration curve. The results are shown in Table 5,
It is shown in Table 6 and FIG. Table 5 shows the time-dependent changes in blood insulin concentration for the group of mice ingesting the food ad libitum, and Table 6 shows the time-dependent change in blood insulin concentration for the fasted mouse group. It has been transformed. The data show the average and standard deviation of 5 animals, respectively.

【００４１】[0041]

【表５】 [Table 5]

【００４２】[0042]

【表６】 [Table 6]

【００４３】生理食塩水投与後絶食した対照マウス群で
は血中インスリン濃度が著しく低下するのに対し、ＬＴ
投与後絶食したマウス群は多少のラグタイムはあるが、
絶食前と同レベルの血中インスリン濃度を維持させる。
自由摂取時ではグルコース刺激が加わるため、生理食塩
水投与群の血中インスリン濃度は、絶食時のそれほどの
低下は認められず、ＬＴ投与群では少なくともＬＴ投与
３時間以降には対照群のそれに比べて高値を示す。この
ように生理食塩水を投与した対照マウスでは血中インス
リン濃度は絶食したばあいと自由摂取したばあいとでは
異なるが、ＬＴを投与したマウスでは条件にかかわらず
同じ効果がえられることがわかる。In the control mouse group which was fasted after the administration of physiological saline, the blood insulin concentration was remarkably lowered, while in the LT
The group of mice that fasted after administration had some lag time,
Maintain blood insulin levels at the same levels as before fasting.
Since glucose stimulation is added during free intake, the blood insulin concentration in the physiological saline administration group did not decrease so much during fasting, and in the LT administration group, at least 3 hours after LT administration, compared to that in the control group. Indicates a high price. As described above, in the control mice administered with physiological saline, the blood insulin concentration is different between the case of fasting and the case of free intake, but it can be seen that the same effect can be obtained in the mice administered with LT regardless of the conditions. .

【００４４】[0044]

【発明の効果】本発明により、各種の要因で生じるイン
スリン非依存型糖尿病に対する有効な治療剤が提供され
る。The present invention provides an effective therapeutic agent for non-insulin-dependent diabetes caused by various factors.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図１】インスリン非依存型糖尿病モデルマウスおよび
正常マウスの糖負荷試験においてＬＴを投与したばあい
の血糖値の経時的変化を示すグラフである。FIG. 1 is a graph showing changes over time in blood glucose levels when LT was administered in a glucose tolerance test in non-insulin-dependent diabetic model mice and normal mice.

【図２】９週令および１６週令のインスリン非依存型糖
尿病モデルマウスの糖負荷試験においてＬＴを投与した
ばあいの血糖値の経時的変化を示すグラフである。FIG. 2 is a graph showing changes over time in blood glucose level when LT was administered in a glucose tolerance test in 9-week-old and 16-week-old non-insulin-dependent diabetic model mice.

【図３】インスリン非依存型糖尿病モデルマウスにＬＴ
を投与したのち、餌を自由摂取させたばあいおよび２４
時間絶食させたばあいの血糖値の経時的変化を示すグラ
フである。FIG. 3 shows LT in a non-insulin-dependent diabetic model mouse.
If the patient was given free food after administration of
It is a graph which shows the time-dependent change of the blood-sugar level at the time of making it fast for a long time.

【図４】インスリン非依存型糖尿病モデルマウスにＬＴ
を投与したのち、餌を自由摂取させたばあいおよび２４
時間絶食させたばあいの血中インスリン濃度の経時的変
化を示すグラフである。FIG. 4 shows LT in a non-insulin-dependent diabetic model mouse.
If the patient was given free food after administration of
It is a graph which shows the time-dependent change of the blood insulin level when fasting for a long time.

Claims (3)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 細胞障害性サイトカイン類を有効成分と
するインスリン非依存型糖尿病治療剤。1. A therapeutic agent for non-insulin-dependent diabetes mellitus, which comprises a cytotoxic cytokine as an active ingredient. 【請求項２】 細胞障害性サイトカイン類がリンフォト
キシンまたは腫瘍壊死因子であることを特徴とする請求
項１記載のインスリン非依存型糖尿病治療剤。2. The therapeutic agent for non-insulin-dependent diabetes mellitus according to claim 1, wherein the cytotoxic cytokine is lymphotoxin or tumor necrosis factor. 【請求項３】 細胞障害性サイトカイン類が糖鎖結合型
リンフォトキシンであることを特徴とする請求項１記載
のインスリン非依存型糖尿病治療剤。3. The therapeutic agent for non-insulin-dependent diabetes mellitus according to claim 1, wherein the cytotoxic cytokines are sugar chain-binding lymphotoxins.