JPH0614797A - 光学活性２−アリールプロピオン酸及びそのエステルの製造方法 - Google Patents
光学活性２−アリールプロピオン酸及びそのエステルの製造方法Info
- Publication number
- JPH0614797A JPH0614797A JP4197899A JP19789992A JPH0614797A JP H0614797 A JPH0614797 A JP H0614797A JP 4197899 A JP4197899 A JP 4197899A JP 19789992 A JP19789992 A JP 19789992A JP H0614797 A JPH0614797 A JP H0614797A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- optically active
- enzyme
- ester
- acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 高い光学純度を持つ光学活性２−アリールプ
ロピオン酸化合物を効率よく製造する。 【構成】 光学活性２−アリールプロピオン酸エステル
又はその塩の両鏡像体の混合物にクレブシエラ属の微生
物由来の酵素を作用させて光学選択的に加水分解させ
る。
ロピオン酸化合物を効率よく製造する。 【構成】 光学活性２−アリールプロピオン酸エステル
又はその塩の両鏡像体の混合物にクレブシエラ属の微生
物由来の酵素を作用させて光学選択的に加水分解させ
る。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、光学活性な２−アリー
ルプロピオン酸及びその対掌体エステルの製造方法に関
するものである。
ルプロピオン酸及びその対掌体エステルの製造方法に関
するものである。
【０００２】
【従来の技術】従来、数多くの薬理作用を有する化合物
が立体異性体の混合物として実用に供されてきている。
しかし、多くの場合、望ましい活性は、一方の立体異性
体のみに存在し、さらに、不必要な方の立体異性体が、
しばしば毒性を有することが知られてきている。したが
って、有効かつ安全な医薬の提供のために、立体化学的
に純粋な化合物の提供が強く望まれている。２−アリー
ルプロピオン酸系の化合物は広く消炎鎮痛剤として用い
られているが、多くはラセミ混合物として供給されてお
り、上記の理由により、光学的に純粋な化合物及びその
製造のための光学活性な原料の供給が強く望まれること
となった。従来、光学活性な２−アリールプロピオン酸
又はそのエステルの製造方法としては、不斉合成による
方法や、ラセミ体よりジアステレオマー塩を経て分割す
る方法が知られているが、近年、酵素の立体選択的触媒
反応を利用した合成又は分割方法が開発されている。こ
れらの方法としては、２−アリールプロピオン酸のエス
テルをバチルス属、シュードモナス属、アースロバクタ
ー属、ムコール属等の微生物由来の酵素で光学選択的に
加水分解することにより相当する光学活性な酸を得る方
法（特開昭６３−４５２３４号公報）等が知られてい
る。しかし、従来用いられている酵素は当該基質にたい
して充分な光学選択性及び活性を持たないため、実際
的、工業的に応用する際、有利な方法とは言えなかっ
た。
が立体異性体の混合物として実用に供されてきている。
しかし、多くの場合、望ましい活性は、一方の立体異性
体のみに存在し、さらに、不必要な方の立体異性体が、
しばしば毒性を有することが知られてきている。したが
って、有効かつ安全な医薬の提供のために、立体化学的
に純粋な化合物の提供が強く望まれている。２−アリー
ルプロピオン酸系の化合物は広く消炎鎮痛剤として用い
られているが、多くはラセミ混合物として供給されてお
り、上記の理由により、光学的に純粋な化合物及びその
製造のための光学活性な原料の供給が強く望まれること
となった。従来、光学活性な２−アリールプロピオン酸
又はそのエステルの製造方法としては、不斉合成による
方法や、ラセミ体よりジアステレオマー塩を経て分割す
る方法が知られているが、近年、酵素の立体選択的触媒
反応を利用した合成又は分割方法が開発されている。こ
れらの方法としては、２−アリールプロピオン酸のエス
テルをバチルス属、シュードモナス属、アースロバクタ
ー属、ムコール属等の微生物由来の酵素で光学選択的に
加水分解することにより相当する光学活性な酸を得る方
法（特開昭６３−４５２３４号公報）等が知られてい
る。しかし、従来用いられている酵素は当該基質にたい
して充分な光学選択性及び活性を持たないため、実際
的、工業的に応用する際、有利な方法とは言えなかっ
た。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、２−アリー
ルプロピオン酸系の化合物に対して高い活性と、高い光
学選択性を合わせ持つ酵素を用い、効率良く光学活性な
２−アリールプロピオン酸又はそのエステルを得る、実
際的かつ工業的製法を提供することを目的とする。
ルプロピオン酸系の化合物に対して高い活性と、高い光
学選択性を合わせ持つ酵素を用い、効率良く光学活性な
２−アリールプロピオン酸又はそのエステルを得る、実
際的かつ工業的製法を提供することを目的とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、酵素とし
てクレブシエラ属、特にクレブシエラ・オキシトカに属
する微生物に由来する酵素が、２−アリールプロピオン
酸系のエステル化合物群に対し、高い加水分解反応性と
高い光学選択性を有する事を見いだし、本発明を完成す
るに至った。
てクレブシエラ属、特にクレブシエラ・オキシトカに属
する微生物に由来する酵素が、２−アリールプロピオン
酸系のエステル化合物群に対し、高い加水分解反応性と
高い光学選択性を有する事を見いだし、本発明を完成す
るに至った。
【０００５】すなわち、本発明は一般式Ｉ
【０００６】
【化３】
【０００７】（式中Ｒ1 はハロゲン、直鎖又は分枝低級
アルキル基、アミノ基、ニトロ基もしくは置換基として
低級アルキル基を有するか有しないチエニル基を表わ
し、Ｒ2は置換基として４級アミノ基又はその塩、低級
アルコキシ基、オキシスルフォニル基又はその塩及びハ
ロゲンからなる群から選ばれた基を有するか有しない低
級アルキル基を表わし、＊は活性中心を表わす）で表わ
される光学活性２−アリールプロピオン酸エステル又は
その塩の両鏡像体の混合物にクレブシエラ属に属する微
生物由来の酵素を作用させ、光学選択的に加水分解させ
る事を特徴とする一般式II
アルキル基、アミノ基、ニトロ基もしくは置換基として
低級アルキル基を有するか有しないチエニル基を表わ
し、Ｒ2は置換基として４級アミノ基又はその塩、低級
アルコキシ基、オキシスルフォニル基又はその塩及びハ
ロゲンからなる群から選ばれた基を有するか有しない低
級アルキル基を表わし、＊は活性中心を表わす）で表わ
される光学活性２−アリールプロピオン酸エステル又は
その塩の両鏡像体の混合物にクレブシエラ属に属する微
生物由来の酵素を作用させ、光学選択的に加水分解させ
る事を特徴とする一般式II
【０００８】
【化４】
【０００９】（式中Ｒ1 は前記と同意義を有し、＊は活
性中心を表わす）で表わされる光学活性２−アリールプ
ロピオン酸及びその対掌体エステルの製造法である。
性中心を表わす）で表わされる光学活性２−アリールプ
ロピオン酸及びその対掌体エステルの製造法である。
【００１０】なお、本発明方法の実施にあたり使用され
る酵素はクレブシエラ属に属する微生物由来の上記の光
学選択的加水分解活性を有する酵素であれば任意のもの
でよいが、特にクレブシエラ・オキシトカ（Klebsiella
oxytoca ）に属する微生物、就中、クレブシエラ・オ
キシトカSNSM−８７株（微工研菌寄第１２９５３号）の
生産するエステル分解酵素を用いるのが好ましい。な
お、かかるエステル分解酵素及びその製造方法の詳細は
同一出願人の同日付の「新規エステル分解酵素Ａおよび
その製造方法」なる名称の特許出願（整理番号１００９
２０２９）明細書に記載のとおりである。なお、本発明
方法の実施にあたっては該酵素は、前記微生物の菌体又
はその培養物に含まれた形で、又は培養物より採取した
酵素として用いることができる。
る酵素はクレブシエラ属に属する微生物由来の上記の光
学選択的加水分解活性を有する酵素であれば任意のもの
でよいが、特にクレブシエラ・オキシトカ（Klebsiella
oxytoca ）に属する微生物、就中、クレブシエラ・オ
キシトカSNSM−８７株（微工研菌寄第１２９５３号）の
生産するエステル分解酵素を用いるのが好ましい。な
お、かかるエステル分解酵素及びその製造方法の詳細は
同一出願人の同日付の「新規エステル分解酵素Ａおよび
その製造方法」なる名称の特許出願（整理番号１００９
２０２９）明細書に記載のとおりである。なお、本発明
方法の実施にあたっては該酵素は、前記微生物の菌体又
はその培養物に含まれた形で、又は培養物より採取した
酵素として用いることができる。
【００１１】本発明における酵素反応の基質となる前記
一般式Ｉで示される光学活性２−アリールプロピオン酸
エステル又はその塩の両鏡像体の混合物は、公知の方法
により容易に合成することができる。例えば、光学活性
２−アリールプロピオン酸のラセミ混合物にチオニルハ
ライドを作用させ、酸ハライドとした後、塩基触媒の存
在下、アルコールを作用させエステル化する方法、ラセ
ミ酸とアルコールを濃硫酸、Ｄ．Ｃ．Ｃ．（１，３−ジ
シクロヘキシルカルボジイミド）などの脱水縮合剤の存
在下、脱水縮合させる方法、コリン等のアミノアルコー
ルとラセミ酸を酸触媒存在下脱水縮合させる方法、ラセ
ミ酸のグリコールエステルにクロルスルホン酸等のスル
ホン化剤を作用させ、末端スルホキシ基を有するアルキ
ルエステルを得る方法等を例示することができる。
一般式Ｉで示される光学活性２−アリールプロピオン酸
エステル又はその塩の両鏡像体の混合物は、公知の方法
により容易に合成することができる。例えば、光学活性
２−アリールプロピオン酸のラセミ混合物にチオニルハ
ライドを作用させ、酸ハライドとした後、塩基触媒の存
在下、アルコールを作用させエステル化する方法、ラセ
ミ酸とアルコールを濃硫酸、Ｄ．Ｃ．Ｃ．（１，３−ジ
シクロヘキシルカルボジイミド）などの脱水縮合剤の存
在下、脱水縮合させる方法、コリン等のアミノアルコー
ルとラセミ酸を酸触媒存在下脱水縮合させる方法、ラセ
ミ酸のグリコールエステルにクロルスルホン酸等のスル
ホン化剤を作用させ、末端スルホキシ基を有するアルキ
ルエステルを得る方法等を例示することができる。
【００１２】本発明の反応は該２−アリールプロピオン
酸エステル又はその塩の両鏡像体混合物を前記酵素を含
む菌体またはその培養物、又は培養物より採取した酵素
を含有する水又は緩衝液に添加し、撹拌することによっ
て行う。このときの反応液のｐＨは３〜１１、好ましく
は６〜１０である。反応進行中にアルカリを適宜滴下
し、生成した酸を中和することでｐＨを一定に保つこと
もできる。反応温度は１０℃〜１００℃、好ましくは２
０℃〜９０℃が適当である。反応終了後、生成した光学
活性２−アリールプロピオン酸と未反応２−アリールプ
ロピオン酸エステルとを溶媒抽出法、結晶析出法、カラ
ムクロマトグラフ法などの通常用いられる分離操作で分
取する。分取した光学活性２−アリールプロピオン酸
は、再結晶などの通常の精製工程をへて、さらに高化学
純度、高光学純度品とすることもできる。また分取した
未反応光学活性２−アリールプロピオン酸エステルは常
法による加水分解で、上記酸の対掌体である光学活性２
−アリールプロピオン酸とすることができる。さらに上
記のエステル及び酸は強塩基等を作用させることによっ
て、容易にラセミ化させることができ、本発明方法の原
料としても再使用が可能である。
酸エステル又はその塩の両鏡像体混合物を前記酵素を含
む菌体またはその培養物、又は培養物より採取した酵素
を含有する水又は緩衝液に添加し、撹拌することによっ
て行う。このときの反応液のｐＨは３〜１１、好ましく
は６〜１０である。反応進行中にアルカリを適宜滴下
し、生成した酸を中和することでｐＨを一定に保つこと
もできる。反応温度は１０℃〜１００℃、好ましくは２
０℃〜９０℃が適当である。反応終了後、生成した光学
活性２−アリールプロピオン酸と未反応２−アリールプ
ロピオン酸エステルとを溶媒抽出法、結晶析出法、カラ
ムクロマトグラフ法などの通常用いられる分離操作で分
取する。分取した光学活性２−アリールプロピオン酸
は、再結晶などの通常の精製工程をへて、さらに高化学
純度、高光学純度品とすることもできる。また分取した
未反応光学活性２−アリールプロピオン酸エステルは常
法による加水分解で、上記酸の対掌体である光学活性２
−アリールプロピオン酸とすることができる。さらに上
記のエステル及び酸は強塩基等を作用させることによっ
て、容易にラセミ化させることができ、本発明方法の原
料としても再使用が可能である。
【００１３】以下、参考例および実施例で本発明を更に
詳しく説明する。
詳しく説明する。
【００１４】参考例 １ 菌体培養液の調製 可溶性澱粉１．０％、ポリペプトン０．５％、酵母エキ
ス０．５％、塩化ナトリウム０．５％、硫酸マグネシウ
ム０．０５％、塩化マンガン０．００１％、塩化カルシ
ウム０．０５％、リン酸１カリウム０．２％、硫酸アン
モニウム０．２％、ｐＨ６．０からなる培地２．５リッ
トルを含む３リットル容ジャーファーメンターに、クレ
ブシエラ・オキシトカSNSM−８７株（微工研菌寄第１２
９５３号）を植菌し、３７℃、１２０時間通気撹拌（４
００ｒｐｍ）培養し、培養液を得た。
ス０．５％、塩化ナトリウム０．５％、硫酸マグネシウ
ム０．０５％、塩化マンガン０．００１％、塩化カルシ
ウム０．０５％、リン酸１カリウム０．２％、硫酸アン
モニウム０．２％、ｐＨ６．０からなる培地２．５リッ
トルを含む３リットル容ジャーファーメンターに、クレ
ブシエラ・オキシトカSNSM−８７株（微工研菌寄第１２
９５３号）を植菌し、３７℃、１２０時間通気撹拌（４
００ｒｐｍ）培養し、培養液を得た。
【００１５】参考例 ２ 菌体の採取 参考例１と同様の操作で得た菌体培養液から遠心分離に
よって菌体を集め、菌体湿物３６ｇを得た。
よって菌体を集め、菌体湿物３６ｇを得た。
【００１６】参考例 ３ 酵素の採取 参考例１と同様の培地２０リットルを含む３０リットル
容ジャーファーメンターに、クレブシエラ・オキシトカ
SNSM−８７株（微工研菌寄第１２９５３号）を植菌し、
３７℃、９２時間通気撹拌（３００ｒｐｍ）培養後、培
養液から遠心分離によって菌体を集め、得られた菌体湿
物３９３ｇをリン酸１カリウム５４ｇ、ＥＤＴＡ・２Ｎ
ａ １．５ｇ、TritonX −１００ ２．８ｍｌ、塩化リ
ゾチーム１．２ｇを含む液３．９リットルに分散し、３
７℃、２４時間放置することにより溶菌し、不溶物を遠
心分離によって除去し、上澄に３５（ｗ／ｖ）％硫酸ア
ンモニウムを添加、溶解し、４℃で一夜放置後、遠心分
離によって塩析物を集め、５ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐ
Ｈ８．０）に塩析物を溶解し、同緩衝液に対して一夜透
析することにより脱塩後、真空凍結乾燥し、酵素粉末１
０．８ｇを得た。
容ジャーファーメンターに、クレブシエラ・オキシトカ
SNSM−８７株（微工研菌寄第１２９５３号）を植菌し、
３７℃、９２時間通気撹拌（３００ｒｐｍ）培養後、培
養液から遠心分離によって菌体を集め、得られた菌体湿
物３９３ｇをリン酸１カリウム５４ｇ、ＥＤＴＡ・２Ｎ
ａ １．５ｇ、TritonX −１００ ２．８ｍｌ、塩化リ
ゾチーム１．２ｇを含む液３．９リットルに分散し、３
７℃、２４時間放置することにより溶菌し、不溶物を遠
心分離によって除去し、上澄に３５（ｗ／ｖ）％硫酸ア
ンモニウムを添加、溶解し、４℃で一夜放置後、遠心分
離によって塩析物を集め、５ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐ
Ｈ８．０）に塩析物を溶解し、同緩衝液に対して一夜透
析することにより脱塩後、真空凍結乾燥し、酵素粉末１
０．８ｇを得た。
【００１７】実施例 １ （Ｓ）−２−（４−ヨードフ
ェニル）プロピオン酸（以下ＩＰＰと略記する）の製造 （Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨードフェニル）プロピオン酸
メチル２９．０１ｇ（１００ｍｍｏｌ）、上記参考例３
で調製した酵素２．０ｇを０．３Ｍ リン酸カリ緩衝液
１００ｍｌに加えた（ｐＨ８）。反応液を３５℃で、２
４時間振とう撹拌した後、遠心分離し、エステルと生成
した酸の混合物を反応液から採取した。これに、トルエ
ン２０ｍｌ、１５（ｗ／ｖ）％炭酸ナトリウム水溶液２
０ｍｌを加え、撹拌、分液した。水相を塩酸で酸性にし
（ｐＨ２〜５）、析出した結晶をろ取、乾燥し光学活性
（Ｓ）−ＩＰＰ １１．６ｇを得た（収率４３％）。Ｈ
ＰＬＣによる光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：OPTIPAC TA （ウオーターズ社製） 移動相：ヘキサン／ＩＰＡ＝９７．５／２．５ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２３５ｎｍ
ェニル）プロピオン酸（以下ＩＰＰと略記する）の製造 （Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨードフェニル）プロピオン酸
メチル２９．０１ｇ（１００ｍｍｏｌ）、上記参考例３
で調製した酵素２．０ｇを０．３Ｍ リン酸カリ緩衝液
１００ｍｌに加えた（ｐＨ８）。反応液を３５℃で、２
４時間振とう撹拌した後、遠心分離し、エステルと生成
した酸の混合物を反応液から採取した。これに、トルエ
ン２０ｍｌ、１５（ｗ／ｖ）％炭酸ナトリウム水溶液２
０ｍｌを加え、撹拌、分液した。水相を塩酸で酸性にし
（ｐＨ２〜５）、析出した結晶をろ取、乾燥し光学活性
（Ｓ）−ＩＰＰ １１．６ｇを得た（収率４３％）。Ｈ
ＰＬＣによる光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：OPTIPAC TA （ウオーターズ社製） 移動相：ヘキサン／ＩＰＡ＝９７．５／２．５ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２３５ｎｍ
【００１８】実施例 ２ （Ｓ）−２−（４−ヨードフ
ェニル）プロピオン酸の製造 参考例２で得た菌体湿物０．６ｇを０．３Ｍ リン酸カ
リ緩衝液１０ｍｌに懸濁し、基質として（Ｒ，Ｓ）−２
−（４−ヨードフェニル）プロピオン酸エチルを０．３
１ｇ（１ｍｍｏｌ）加え、３５℃で２４時間撹拌した
（ｐＨ８．０）。後、実施例１と同様な操作で（Ｓ）−
ＩＰＰ ０．１ｇ（収率３６％）を得た。ＨＰＬＣによ
る光学純度は９９％以上であった。
ェニル）プロピオン酸の製造 参考例２で得た菌体湿物０．６ｇを０．３Ｍ リン酸カ
リ緩衝液１０ｍｌに懸濁し、基質として（Ｒ，Ｓ）−２
−（４−ヨードフェニル）プロピオン酸エチルを０．３
１ｇ（１ｍｍｏｌ）加え、３５℃で２４時間撹拌した
（ｐＨ８．０）。後、実施例１と同様な操作で（Ｓ）−
ＩＰＰ ０．１ｇ（収率３６％）を得た。ＨＰＬＣによ
る光学純度は９９％以上であった。
【００１９】実施例 ３ （Ｓ）−２−（４−ヨードフ
ェニル）プロピオン酸の製造 基質として（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨードフェニル）プ
ロピオン酸メチルに代え、（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨー
ドフェニル）プロピオン酸メトキシエチル３３．４ｇ
（１００ｍｍｏｌ）を用いた他は実施例１と全く同様に
して（Ｓ）−ＩＰＰ１３．８ｇ（収率５０％）を得た。
ＨＰＬＣによる光学純度は９９％以上であった。さらに
有機相を乾固し、オイル状の（Ｒ）−２−（４−ヨード
フェニル）プロピオン酸メトキシエチル１６．５ｇ（収
率４９％）光学純度９９％を得た。
ェニル）プロピオン酸の製造 基質として（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨードフェニル）プ
ロピオン酸メチルに代え、（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨー
ドフェニル）プロピオン酸メトキシエチル３３．４ｇ
（１００ｍｍｏｌ）を用いた他は実施例１と全く同様に
して（Ｓ）−ＩＰＰ１３．８ｇ（収率５０％）を得た。
ＨＰＬＣによる光学純度は９９％以上であった。さらに
有機相を乾固し、オイル状の（Ｒ）−２−（４−ヨード
フェニル）プロピオン酸メトキシエチル１６．５ｇ（収
率４９％）光学純度９９％を得た。
【００２０】実施例 ４ （Ｓ）−２−（４−ヨードフ
ェニル）プロピオン酸の製造 基質として（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨードフェニル）プ
ロピオン酸メチルに代え、（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨー
ドフェニル）プロピオン酸２−クロルエチル３３．９ｇ
（１００ｍｍｏｌ）を用いた他は実施例１と全く同様に
して（Ｓ）−ＩＰＰ１２．４ｇ（収率４５％）を得た。
ＨＰＬＣによる光学純度は９９％以上であった。
ェニル）プロピオン酸の製造 基質として（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨードフェニル）プ
ロピオン酸メチルに代え、（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨー
ドフェニル）プロピオン酸２−クロルエチル３３．９ｇ
（１００ｍｍｏｌ）を用いた他は実施例１と全く同様に
して（Ｓ）−ＩＰＰ１２．４ｇ（収率４５％）を得た。
ＨＰＬＣによる光学純度は９９％以上であった。
【００２１】実施例 ５ （Ｓ）−２−（４−ヨードフ
ェニル）プロピオン酸の製造 （Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨードフェニル）プロピオン酸
Ｎ，Ｎ，Ｎ，トリメチルアンモニウムエチルの塩化物塩
３９．８ｇ（１００ｍｍｏｌ）と参考例３で調製した酵
素２．０ｇを０．３Ｍ リン酸カリ緩衝液１００ｍｌに
加えた（ｐＨ８）。反応液を３５℃で、２４時間振とう
撹拌したのち濃塩酸で酸性にし（ｐＨ２〜５）、１００
ｍｌの水を加え、エーテルで抽出した（２００ｍｌ、２
回）。得られたエーテル相をあわせ、水および飽和食塩
水で洗浄、硫酸マグネシュウムで乾燥後、エーテルを留
去し、光学活性（Ｓ）−ＩＰＰ ８．０ｇを得た（収率
２９％）。ＨＰＬＣによる光学純度は９９％以上であっ
た。
ェニル）プロピオン酸の製造 （Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨードフェニル）プロピオン酸
Ｎ，Ｎ，Ｎ，トリメチルアンモニウムエチルの塩化物塩
３９．８ｇ（１００ｍｍｏｌ）と参考例３で調製した酵
素２．０ｇを０．３Ｍ リン酸カリ緩衝液１００ｍｌに
加えた（ｐＨ８）。反応液を３５℃で、２４時間振とう
撹拌したのち濃塩酸で酸性にし（ｐＨ２〜５）、１００
ｍｌの水を加え、エーテルで抽出した（２００ｍｌ、２
回）。得られたエーテル相をあわせ、水および飽和食塩
水で洗浄、硫酸マグネシュウムで乾燥後、エーテルを留
去し、光学活性（Ｓ）−ＩＰＰ ８．０ｇを得た（収率
２９％）。ＨＰＬＣによる光学純度は９９％以上であっ
た。
【００２２】実施例 ６ （Ｓ）−２−｛４−［２−
（３−メチル）チエニル］フェニル｝プロピオン酸（以
下ＴＰＰと略記する）の製造 （Ｒ，Ｓ）−２−｛４−［２−（３−メチル）チエニ
ル］フェニル｝プロピオン酸メチル２．６ｇ（１０ｍｍ
ｏｌ）に参考例２で得た菌体湿物６ｇを０．３Ｍリン酸
カリ緩衝液１００ｍｌに加えた（ｐＨ８）。反応液を３
５℃で、２４時間振とう撹拌した後、遠心分離し、エス
テルと生成した酸の混合物を反応液から採取した。これ
に、トルエン２０ｍｌ、１５（ｗ／ｖ）％炭酸ナトリウ
ム水溶液２０ｍｌを加え、撹拌、分液した。水相を塩酸
で酸性にし（ｐＨ２〜５）、析出した結晶をろ取、乾燥
し光学活性（Ｓ）−ＴＰＰ １．０ｇを得た（収率４１
％）。ＨＰＬＣによる光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：Chiralcel OD（ダイセル化学工業社製） 移動相：ヘキサン／ＩＰＡ＝９４／６ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２７２ｎｍ
（３−メチル）チエニル］フェニル｝プロピオン酸（以
下ＴＰＰと略記する）の製造 （Ｒ，Ｓ）−２−｛４−［２−（３−メチル）チエニ
ル］フェニル｝プロピオン酸メチル２．６ｇ（１０ｍｍ
ｏｌ）に参考例２で得た菌体湿物６ｇを０．３Ｍリン酸
カリ緩衝液１００ｍｌに加えた（ｐＨ８）。反応液を３
５℃で、２４時間振とう撹拌した後、遠心分離し、エス
テルと生成した酸の混合物を反応液から採取した。これ
に、トルエン２０ｍｌ、１５（ｗ／ｖ）％炭酸ナトリウ
ム水溶液２０ｍｌを加え、撹拌、分液した。水相を塩酸
で酸性にし（ｐＨ２〜５）、析出した結晶をろ取、乾燥
し光学活性（Ｓ）−ＴＰＰ １．０ｇを得た（収率４１
％）。ＨＰＬＣによる光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：Chiralcel OD（ダイセル化学工業社製） 移動相：ヘキサン／ＩＰＡ＝９４／６ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２７２ｎｍ
【００２３】実施例 ７ （Ｓ）−２−（４−イソブチ
ルフェニル）プロピオン酸（以下ＩＢＵと略記する）の
製造 ０．３Ｍ リン酸カリ緩衝液１００ｍｌに参考例１で得
た菌体培養液１００ｍｌ及び（Ｒ，Ｓ）−２−（４−イ
ソブチルフェニル）プロピオン酸エチル０．２３ｇ（１
ｍｍｏｌ）を加え（ｐＨ８．０）、３５℃で、２４時間
振とう撹拌した。反応液を遠心分離し、エステルと生成
した酸の混合物を反応液から採取した。これに、トルエ
ン２ｍｌ、１５（ｗ／ｖ）％炭酸ナトリウム水溶液２ｍ
ｌを加え、撹拌、分液した。水相を塩酸で酸性にし（ｐ
Ｈ２〜５）、析出した結晶をろ取、乾燥し光学活性
（Ｓ）−ＩＢＵ ４１ｍｇを得た（収率２０％）。ＨＰ
ＬＣによる光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：ULTRON EV−OVM （信和化工社製） 移動相：０．０２Ｍ リン酸カリ緩衝液（ｐＨ３）／ア
セトニトリル＝９５／５ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２２０ｎｍ
ルフェニル）プロピオン酸（以下ＩＢＵと略記する）の
製造 ０．３Ｍ リン酸カリ緩衝液１００ｍｌに参考例１で得
た菌体培養液１００ｍｌ及び（Ｒ，Ｓ）−２−（４−イ
ソブチルフェニル）プロピオン酸エチル０．２３ｇ（１
ｍｍｏｌ）を加え（ｐＨ８．０）、３５℃で、２４時間
振とう撹拌した。反応液を遠心分離し、エステルと生成
した酸の混合物を反応液から採取した。これに、トルエ
ン２ｍｌ、１５（ｗ／ｖ）％炭酸ナトリウム水溶液２ｍ
ｌを加え、撹拌、分液した。水相を塩酸で酸性にし（ｐ
Ｈ２〜５）、析出した結晶をろ取、乾燥し光学活性
（Ｓ）−ＩＢＵ ４１ｍｇを得た（収率２０％）。ＨＰ
ＬＣによる光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：ULTRON EV−OVM （信和化工社製） 移動相：０．０２Ｍ リン酸カリ緩衝液（ｐＨ３）／ア
セトニトリル＝９５／５ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２２０ｎｍ
【００２４】実施例 ８ （Ｓ）−２−（４−ヨードフ
ェニル）プロピオン酸の製造 ０．３Ｍ リン酸カリ緩衝液１００ｍｌに参考例１で得
た菌体培養液１００ｍｌ及び（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨ
ードフェニル）プロピオン酸スルホオキエチルのカリウ
ム塩０．４４ｇ、１ｍｍｏｌを加え（ｐＨ８．０）、３
５℃で、２４時間振とう撹拌した。反応液を濃塩酸で酸
性にし（ｐＨ２〜５）、１００ｍｌの水を加え、エーテ
ルで抽出した（２００ｍｌ、２回）。得られたエーテル
相をあわせ、水および飽和食塩水で洗浄、硫酸マグネシ
ュウムで乾燥後、エーテルを留去し、光学活性（Ｓ）−
ＩＰＰ ５５ｍｇを得た（収率２０％）。ＨＰＬＣによ
る光学純度は９９％以上であった。
ェニル）プロピオン酸の製造 ０．３Ｍ リン酸カリ緩衝液１００ｍｌに参考例１で得
た菌体培養液１００ｍｌ及び（Ｒ，Ｓ）−２−（４−ヨ
ードフェニル）プロピオン酸スルホオキエチルのカリウ
ム塩０．４４ｇ、１ｍｍｏｌを加え（ｐＨ８．０）、３
５℃で、２４時間振とう撹拌した。反応液を濃塩酸で酸
性にし（ｐＨ２〜５）、１００ｍｌの水を加え、エーテ
ルで抽出した（２００ｍｌ、２回）。得られたエーテル
相をあわせ、水および飽和食塩水で洗浄、硫酸マグネシ
ュウムで乾燥後、エーテルを留去し、光学活性（Ｓ）−
ＩＰＰ ５５ｍｇを得た（収率２０％）。ＨＰＬＣによ
る光学純度は９９％以上であった。
【００２５】実施例 ９ （Ｓ）−４−ニトロフェニル
−２−プロピオン酸（以下ＮＰＰと略記する）の製造 基質を（Ｒ，Ｓ）−４−ニトロフェニル−２−プロピオ
ン酸メトキシエチル２５．３ｇ（１００ｍｍｏｌ）に代
えた以外は実施例１と同様にして、光学活性（Ｓ）−Ｎ
ＰＰ ３．９ｇを得た（収率２０％）。ＨＰＬＣによる
光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：OPTIPAC TA （ウオーターズ社製） 移動相：ヘキサン／ＩＰＡ＝９７．５／２．５ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２７２ｎｍ
−２−プロピオン酸（以下ＮＰＰと略記する）の製造 基質を（Ｒ，Ｓ）−４−ニトロフェニル−２−プロピオ
ン酸メトキシエチル２５．３ｇ（１００ｍｍｏｌ）に代
えた以外は実施例１と同様にして、光学活性（Ｓ）−Ｎ
ＰＰ ３．９ｇを得た（収率２０％）。ＨＰＬＣによる
光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：OPTIPAC TA （ウオーターズ社製） 移動相：ヘキサン／ＩＰＡ＝９７．５／２．５ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２７２ｎｍ
【００２６】実施例 １０ （Ｓ）−２−（４−アミノ
フェニル）プロピオン酸（以下ＡＰＰと略記する）の製
造 （Ｒ，Ｓ）−２−（４−アミノフェニル）プロピオン酸
２−クロルエチル２２．８ｇ（１００ｍｍｏｌ）及び参
考例３で調製した酵素２．０ｇを０．３Ｍ リン酸カリ
緩衝液１００ｍｌに加えた（ｐＨ８）。反応液を３５℃
で、５０時間振とう撹拌した後、遠心分離し、エステル
と生成した酸の混合物を反応液から採取した。得た混合
物をクロマトグラフ（カラム：シリカゲル、移動相：ヘ
キサン／酢酸エチル）により分離し、光学活性（Ｓ）−
ＡＰＰ ３．３ｇを得た（収率２０％）。ＨＰＬＣによ
る光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：ULTRON EV−OVM （信和化工社製） 移動相：０．０２Ｍ リン酸カリ緩衝液（ｐＨ＝５）／
アセトニトリル＝９０／１０ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２５５ｎｍ
フェニル）プロピオン酸（以下ＡＰＰと略記する）の製
造 （Ｒ，Ｓ）−２−（４−アミノフェニル）プロピオン酸
２−クロルエチル２２．８ｇ（１００ｍｍｏｌ）及び参
考例３で調製した酵素２．０ｇを０．３Ｍ リン酸カリ
緩衝液１００ｍｌに加えた（ｐＨ８）。反応液を３５℃
で、５０時間振とう撹拌した後、遠心分離し、エステル
と生成した酸の混合物を反応液から採取した。得た混合
物をクロマトグラフ（カラム：シリカゲル、移動相：ヘ
キサン／酢酸エチル）により分離し、光学活性（Ｓ）−
ＡＰＰ ３．３ｇを得た（収率２０％）。ＨＰＬＣによ
る光学純度は９９％以上であった。 ＨＰＬＣ分析条件 カラム：ULTRON EV−OVM （信和化工社製） 移動相：０．０２Ｍ リン酸カリ緩衝液（ｐＨ＝５）／
アセトニトリル＝９０／１０ 流速：１ｍｌ／ｍｉｎ． 検出：ＵＶ，２５５ｎｍ
【００２７】
【発明の効果】以上説明したように、本発明によれば、
高い光学純度を持つ光学活性２−アリールプロピオン酸
化合物を効率よく得ることができる。
高い光学純度を持つ光学活性２−アリールプロピオン酸
化合物を効率よく得ることができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 豊田 和俊 兵庫県神戸市西区室谷２丁目２番３号 長 瀬産業株式会社内 (72)発明者 卯津羅 健作 兵庫県神戸市西区室谷２丁目２番３号 長 瀬産業株式会社内 (72)発明者 大西 敏聖 兵庫県神戸市西区室谷２丁目２番３号 長 瀬産業株式会社内
Claims (3)
- 【請求項１】 一般式Ｉ 【化１】 （式中Ｒ1 はハロゲン、直鎖又は分枝低級アルキル基、
アミノ基、ニトロ基もしくは置換基として低級アルキル
基を有するか有しないチエニル基を表わし、Ｒ2は置換
基として４級アミノ基又はその塩、低級アルコキシ基、
オキシスルフォニル基は又はその塩及びハロゲンからな
る群から選ばれた基を有するか有しない低級アルキル基
を表わし、＊は活性中心を表わす）で表わされる光学活
性２−アリールプロピオン酸エステル又はその塩の両鏡
像体の混合物にクレブシエラ属に属する微生物由来の酵
素を作用させ、光学選択的に加水分解させる事を特徴と
する一般式II 【化２】 （式中Ｒ1 は前記と同意義を有し、＊は活性中心を表わ
す）で表わされる光学活性２−アリールプロピオン酸及
びその対掌体エステルの製造法。 - 【請求項２】 酵素がクレブシエラ・オキシトカに属す
る微生物由来の酵素である請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 酵素がクレブシエラ・オキシトカSNSM−
８７株（微工研菌寄第１２９５３号）由来の酵素である
請求項１又は２記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4197899A JPH0614797A (ja) | 1992-06-30 | 1992-06-30 | 光学活性２−アリールプロピオン酸及びそのエステルの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4197899A JPH0614797A (ja) | 1992-06-30 | 1992-06-30 | 光学活性２−アリールプロピオン酸及びそのエステルの製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0614797A true JPH0614797A (ja) | 1994-01-25 |
Family
ID=16382136
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4197899A Pending JPH0614797A (ja) | 1992-06-30 | 1992-06-30 | 光学活性２−アリールプロピオン酸及びそのエステルの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0614797A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996018607A1 (fr) * | 1994-12-12 | 1996-06-20 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Derive d'aniline inhibant la synthase du monoxyde d'azote |
-
1992
- 1992-06-30 JP JP4197899A patent/JPH0614797A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996018607A1 (fr) * | 1994-12-12 | 1996-06-20 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Derive d'aniline inhibant la synthase du monoxyde d'azote |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS61239899A (ja) | 光学活性アルフア‐アリールアルカン酸の生物工学的製造方法 | |
| EP0808308B1 (fr) | Procede de separation de carbinols | |
| JP3142627B2 (ja) | ２‐アミノ‐３‐ヒドロキシ‐３‐フェニルプロピオン酸の立体異性富化 | |
| JP3140549B2 (ja) | α−置換カルボン酸の光学異性体の分離法 | |
| WO2004108944A1 (ja) | 光学活性クロマンカルボン酸エステルの製造方法 | |
| JPH0614797A (ja) | 光学活性２−アリールプロピオン酸及びそのエステルの製造方法 | |
| JP2939342B2 (ja) | ３，３−ジエチル−４−［（４−カルボキシ）フェノキシ］−２−アゼチジノンエステルの酵素加水分解 | |
| JP3161000B2 (ja) | 光学活性なニトリルおよび光学活性なアミドの製造方法 | |
| US5322791A (en) | Process for preparing (S)-α-methylarylacetic acids | |
| JPH06256278A (ja) | 光学活性α−カルバモイルアルカン酸誘導体およびその製法 | |
| JPH0739391A (ja) | α−第３カルボン酸エステルの酵素的分解方法 | |
| JP2002171994A (ja) | 光学活性なテトラヒドロフラン−２−カルボン酸またはその対掌体エステルの製造方法 | |
| JP2005520552A (ja) | ラセミのＮ−アシル化β−アミノカルボン酸からの光学的活性β−アミノカルボン酸の製造方法 | |
| JP2579766B2 (ja) | 光学活性なビフェニル誘導体およびその製造法 | |
| JPH01281098A (ja) | 光学活性カルボン酸及び光学活性カルボン酸エステルの製造方法 | |
| JP2639651B2 (ja) | 光学活性カルボン酸及びその対掌体エステルの製造法 | |
| JPH0678B2 (ja) | 光学活性３―フェニルグリシッド酸エステル類化合物の製法 | |
| JPH10210997A (ja) | 光学活性３−キヌクリジノールの製法 | |
| JPH01247100A (ja) | 光学活性カルボン酸誘導体の製造方法 | |
| JP3007461B2 (ja) | 光学活性２−シクロヘキセニル酢酸及びそのエステルの製造方法 | |
| JP2928612B2 (ja) | 光学活性アミン類の製造方法 | |
| JP2005278401A (ja) | 光学活性−エリスロ−３−シクロヘキシルセリンの製造方法 | |
| JPS6363396A (ja) | ｄ−２−（６−メトキシ−２−ナフチル）プロピオン酸の製造方法 | |
| JPH10316607A (ja) | 光学活性２−ヒドロキシ−１−インダノン及びその誘導体の製造方法 | |
| JPH0319698A (ja) | 光学活性な３―アシルオキシ―２―メチルプロパノール製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Effective date: 20060113 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20080827 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Effective date: 20080902 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Effective date: 20090106 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 |