JPH0599899A - 生体物質の分離精製法 - Google Patents
生体物質の分離精製法Info
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- JPH0599899A JPH0599899A JP3237832A JP23783291A JPH0599899A JP H0599899 A JPH0599899 A JP H0599899A JP 3237832 A JP3237832 A JP 3237832A JP 23783291 A JP23783291 A JP 23783291A JP H0599899 A JPH0599899 A JP H0599899A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】本発明は、生体物質の無担体電気泳動法による
分離精製効果を向上する方法を提供する。 【構成】無担体電気泳動工程の直前または途中に、分離
対象物質と異なる電気泳動度を有し、分離対象物質と反
応しうる物質を加える工程を設ける。 【効果】生体物質の活性や機能にもとづく無担体電気泳
動分離が可能になり、より高機能性の分離対象物質が大
量に得られる。
分離精製効果を向上する方法を提供する。 【構成】無担体電気泳動工程の直前または途中に、分離
対象物質と異なる電気泳動度を有し、分離対象物質と反
応しうる物質を加える工程を設ける。 【効果】生体物質の活性や機能にもとづく無担体電気泳
動分離が可能になり、より高機能性の分離対象物質が大
量に得られる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は生体物質の分離精製法に
関するもので、特に医薬品やファインケミカル，食品等
の製造過程に好適な分離精製方法に関するものである。
関するもので、特に医薬品やファインケミカル，食品等
の製造過程に好適な分離精製方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】生体物質の分離精製法として、無担体電
気泳動法は、分離後の処理が容易である、大量の連続精
製が可能である，他の分離手段との接続が可能である，
担体を調製する必要が無い，巨大分子でも分離可能、等
の特長があるが、生体物質の機能にもとづく分離は困難
であった。例えば、クルト・ハンニック、ハンス、ジ
ー、ハイドリッヒ等『フリーフロー・エレクトロフォレ
ーシス』（ＧＩＴ Verlag（Darmstadt，Germany)刊
行、１９９０年)（Kurt Hannig and Hans−G.Heidric
h；Free−flow Electrophoresis）の第１頁から第１９
頁までにおいて論じられているように、無担体電気泳動
法はもっぱら生体物質の電荷の大きさに基づいて分離を
行なっている。
気泳動法は、分離後の処理が容易である、大量の連続精
製が可能である，他の分離手段との接続が可能である，
担体を調製する必要が無い，巨大分子でも分離可能、等
の特長があるが、生体物質の機能にもとづく分離は困難
であった。例えば、クルト・ハンニック、ハンス、ジ
ー、ハイドリッヒ等『フリーフロー・エレクトロフォレ
ーシス』（ＧＩＴ Verlag（Darmstadt，Germany)刊
行、１９９０年)（Kurt Hannig and Hans−G.Heidric
h；Free−flow Electrophoresis）の第１頁から第１９
頁までにおいて論じられているように、無担体電気泳動
法はもっぱら生体物質の電荷の大きさに基づいて分離を
行なっている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】上記従来技術は生体物
質の活性や機能にもとづく分離が困難なので、精製した
物質の活性や機能が損なわれている場合があり、精製度
は上がっても有用性はなくなってしまう場合があった。
また試料に電気泳動度の類似した成分が多く含まれる場
合には、分離対象物質を電気泳動度だけで分離するのは
極めて困難である。無担体電気泳動法の有用性をさらに
高めるには、生体物質の活性や機能に対応する分離補助
手法が必要である。
質の活性や機能にもとづく分離が困難なので、精製した
物質の活性や機能が損なわれている場合があり、精製度
は上がっても有用性はなくなってしまう場合があった。
また試料に電気泳動度の類似した成分が多く含まれる場
合には、分離対象物質を電気泳動度だけで分離するのは
極めて困難である。無担体電気泳動法の有用性をさらに
高めるには、生体物質の活性や機能に対応する分離補助
手法が必要である。
【０００４】本発明の目的は、無担体電気泳動法を用い
る生体物質の分離精製法において、生体物質の活性や機
能に対応する分離補助手法を組み入れることにより、よ
り高純度の生体物質が得られるようにすることにある。
る生体物質の分離精製法において、生体物質の活性や機
能に対応する分離補助手法を組み入れることにより、よ
り高純度の生体物質が得られるようにすることにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】無担体電気泳動工程の直
前または途中で、試料を含む流体に、分離対象物質と異
なる電気泳動度を有し、かつ分離対象物質と反応しうる
特性を有する電気泳動可能な物質を添加すれば、分離対
象物質とこの反応性物質との反応複合体は、電気泳動度
が元の電気泳動度と異なり、別の分取画分に分離できる
ようになり、また活性や機能の失われた分離対象物質と
は区別できるようになる。分離対象物質としては、電荷
を有する生体物質で有用な機能をもつものなら何でもよ
いが、特に抗原，抗体，酸素，ホルモン，受容体，サイ
トカイン，オルガネラ，ポリヌクレオチド，血球，微生
物細胞，動植物細胞などがこのような反応性を有するの
で適している。したがって、これらと反応する物質を添
加させることで、上記の分離が可能になる。すなわち、
抗原や抗体，受容体，相補性ヌクレオチドなどを用意
し、添加するのである。また電気泳動度を変えるため
に、これらに電荷の大きい物質を結合させた後用するこ
とも可能である。
前または途中で、試料を含む流体に、分離対象物質と異
なる電気泳動度を有し、かつ分離対象物質と反応しうる
特性を有する電気泳動可能な物質を添加すれば、分離対
象物質とこの反応性物質との反応複合体は、電気泳動度
が元の電気泳動度と異なり、別の分取画分に分離できる
ようになり、また活性や機能の失われた分離対象物質と
は区別できるようになる。分離対象物質としては、電荷
を有する生体物質で有用な機能をもつものなら何でもよ
いが、特に抗原，抗体，酸素，ホルモン，受容体，サイ
トカイン，オルガネラ，ポリヌクレオチド，血球，微生
物細胞，動植物細胞などがこのような反応性を有するの
で適している。したがって、これらと反応する物質を添
加させることで、上記の分離が可能になる。すなわち、
抗原や抗体，受容体，相補性ヌクレオチドなどを用意
し、添加するのである。また電気泳動度を変えるため
に、これらに電荷の大きい物質を結合させた後用するこ
とも可能である。
【０００６】
【作用】無担体電気泳動法は分離用流体に電場をかけ、
物質を移動させ、目的成分を分取するが、電気泳動度の
差が分離能を左右する。流体中で電気泳動を行なうの
で、分子量が大きなものでもゲル電気泳動法と異なり、
分離可能である。機能を有する生体物質と反応する物質
が、分離対象物質の電気泳動度を大きく変化させるよう
にしておけば、機能を有する生体物質だけを取り出すこ
とができるようになる。そこで等電点が分離対象物質か
ら０.５ 以上異なる抗原や抗体，受容体，相補性ヌクレ
オチドなどを用意して分離できるようにした。また陽イ
オンや陰イオン性の物質をこれらの蛋白質やヌクレオチ
ドに結合させて等電点を変えることも可能であった。こ
れらの反応性物質は分離対象物質と非常に速く反応し、
可逆的に結合するので、無担体電気泳動工程の直前また
は途中で反応を行なわせることが可能であった。また分
離した後反応複合体から分離対象物質を分けることも通
常の分離法で容易に行なえた。
物質を移動させ、目的成分を分取するが、電気泳動度の
差が分離能を左右する。流体中で電気泳動を行なうの
で、分子量が大きなものでもゲル電気泳動法と異なり、
分離可能である。機能を有する生体物質と反応する物質
が、分離対象物質の電気泳動度を大きく変化させるよう
にしておけば、機能を有する生体物質だけを取り出すこ
とができるようになる。そこで等電点が分離対象物質か
ら０.５ 以上異なる抗原や抗体，受容体，相補性ヌクレ
オチドなどを用意して分離できるようにした。また陽イ
オンや陰イオン性の物質をこれらの蛋白質やヌクレオチ
ドに結合させて等電点を変えることも可能であった。こ
れらの反応性物質は分離対象物質と非常に速く反応し、
可逆的に結合するので、無担体電気泳動工程の直前また
は途中で反応を行なわせることが可能であった。また分
離した後反応複合体から分離対象物質を分けることも通
常の分離法で容易に行なえた。
【０００７】本発明の原理を図１を用いて説明する。通
常の無担体電気泳動工程は図１(Ａ)に示すように、電気
泳動セル１に、キャリア流体２を電場の方向に対して直
角の方向に流す。このキャリア流体２の流れに分離対象
物質５を含む試料を注入シリンジ４より添加する。試料
中の分離対象物質５および共存成分６は電極３から電圧
を印加した電場の中で分かれて移動する。本発明では、
図１（Ｂ）に示すように、試料の注入時に反応性泳動物
質７を同時に加える対象物質５と泳動物質７は反応複合
体を形成し、対象物質５の分離画分よりも陽極寄りに泳
動分離される。このようにして反応性のある分離対象物
質５だけを得ることができる。活性や機能性を持たない
分離対象物質５は別の分離画分に分離される。したがっ
て本発明は従来の電荷だけにもとづく無担体電気泳動と
は異なり、活性や機能性を持つ物質を泳動分離できるこ
とになる。
常の無担体電気泳動工程は図１(Ａ)に示すように、電気
泳動セル１に、キャリア流体２を電場の方向に対して直
角の方向に流す。このキャリア流体２の流れに分離対象
物質５を含む試料を注入シリンジ４より添加する。試料
中の分離対象物質５および共存成分６は電極３から電圧
を印加した電場の中で分かれて移動する。本発明では、
図１（Ｂ）に示すように、試料の注入時に反応性泳動物
質７を同時に加える対象物質５と泳動物質７は反応複合
体を形成し、対象物質５の分離画分よりも陽極寄りに泳
動分離される。このようにして反応性のある分離対象物
質５だけを得ることができる。活性や機能性を持たない
分離対象物質５は別の分離画分に分離される。したがっ
て本発明は従来の電荷だけにもとづく無担体電気泳動と
は異なり、活性や機能性を持つ物質を泳動分離できるこ
とになる。
【０００８】
【実施例】以下に本発明を実施例にもとづいて説明す
る。
る。
【０００９】（実施例１）抗ヒトα−フェトプロテイン
（ＡＦＰ）を含むウサギの抗血清５ｍｌをウサギの腹水
から得た後、図２に示す無担体電気泳動セルに導入し
た。セルにはあらかじめ１０ｍＭ，ｐＨ７.９ のリン酸
ナトリウム緩衝液を、２ｍｌ／min の流速で各導入チュ
ーブに流しておいた。セル両端の白金電極３には直流電
圧で５００Ｖを印加しておき、分離できるようにした。
抗血清５ｍｌを注入シリンジから１０秒かけて導入し
た。
（ＡＦＰ）を含むウサギの抗血清５ｍｌをウサギの腹水
から得た後、図２に示す無担体電気泳動セルに導入し
た。セルにはあらかじめ１０ｍＭ，ｐＨ７.９ のリン酸
ナトリウム緩衝液を、２ｍｌ／min の流速で各導入チュ
ーブに流しておいた。セル両端の白金電極３には直流電
圧で５００Ｖを印加しておき、分離できるようにした。
抗血清５ｍｌを注入シリンジから１０秒かけて導入し
た。
【００１０】注入シリンジ４の先端にこれと接続した別
の注入シリンジ８を用意しておき、ヒトα−フェトプロ
テイン（ＡＦＰ）を０.０５mg／ｍｌ の濃度で含有する
１０ｍＭ，ｐＨ７.９ のリン酸ナトリウム緩衝液１０ｍ
ｌを抗血清の注入開始１秒前に注入を始めた。高さ２０
cmの無担体電気泳動セルを流下する間に、ＡＦＰと抗Ａ
ＦＰ抗体の反応複合体が、抗体やＡＦＰ単独の分取画分
とは異なる分取画分に分離されてきたことが、分取画分
の吸光度およびゲル等電点電気泳動法による分析から分
かった。
の注入シリンジ８を用意しておき、ヒトα−フェトプロ
テイン（ＡＦＰ）を０.０５mg／ｍｌ の濃度で含有する
１０ｍＭ，ｐＨ７.９ のリン酸ナトリウム緩衝液１０ｍ
ｌを抗血清の注入開始１秒前に注入を始めた。高さ２０
cmの無担体電気泳動セルを流下する間に、ＡＦＰと抗Ａ
ＦＰ抗体の反応複合体が、抗体やＡＦＰ単独の分取画分
とは異なる分取画分に分離されてきたことが、分取画分
の吸光度およびゲル等電点電気泳動法による分析から分
かった。
【００１１】各分取画分の吸光度およびゲル等電点電気
泳動法の結果を図３及び図４に示す。このようにして得
たＡＦＰと抗ＡＦＰ抗体の反応複合体を含む分取画分に
ｐＨ２.２ のグリシン−塩酸緩衝液を加え、ＡＦＰと抗
ＡＦＰ抗体を解離させた。抗ＡＦＰ抗体はプロティンＡ
−Sepharose ＣＬ−４Ｂ（Pharmacia Biosystems社)の
カラムによりＡＦＰから分離できた。本発明により活性
のある抗ＡＦＰ抗体を無担体電気泳動で分離できること
が確かめられた。
泳動法の結果を図３及び図４に示す。このようにして得
たＡＦＰと抗ＡＦＰ抗体の反応複合体を含む分取画分に
ｐＨ２.２ のグリシン−塩酸緩衝液を加え、ＡＦＰと抗
ＡＦＰ抗体を解離させた。抗ＡＦＰ抗体はプロティンＡ
−Sepharose ＣＬ−４Ｂ（Pharmacia Biosystems社)の
カラムによりＡＦＰから分離できた。本発明により活性
のある抗ＡＦＰ抗体を無担体電気泳動で分離できること
が確かめられた。
【００１２】（実施例２）実施例１と同様の試料を分離
した。図２に示す無担体電気泳動セルを２台用意し、上
下に接続した。ここで上のセルの分離流出チューブと下
のセルの注入チューブとをつないだ。そして実施例１と
同様に、抗ヒトα−フェトプロテイン（ＡＦＰ）を含む
ウサギの抗血清を、上側の無担体電気泳動セルに導入し
た。上側の無担体電気泳動セルの分離流出チューブのう
ち抗ＡＦＰ抗体を含む分離流出画分がでてくるチューブ
に、ヒトα−フェトプロテイン（ＡＦＰ）を０.０５mg
／ｍｌの濃度で含有する１０ｍＭ，ｐＨ７.９ のリン酸
ナトリウム緩衝液１０ｍｌを注入バルブを介して導入で
きるようにし、下側の無担体電気泳動セルで反応複合分
の分離を行なった。この方法により実施例１よりも不純
物の少ない反応複合体を含む分取画分が得られた。
した。図２に示す無担体電気泳動セルを２台用意し、上
下に接続した。ここで上のセルの分離流出チューブと下
のセルの注入チューブとをつないだ。そして実施例１と
同様に、抗ヒトα−フェトプロテイン（ＡＦＰ）を含む
ウサギの抗血清を、上側の無担体電気泳動セルに導入し
た。上側の無担体電気泳動セルの分離流出チューブのう
ち抗ＡＦＰ抗体を含む分離流出画分がでてくるチューブ
に、ヒトα−フェトプロテイン（ＡＦＰ）を０.０５mg
／ｍｌの濃度で含有する１０ｍＭ，ｐＨ７.９ のリン酸
ナトリウム緩衝液１０ｍｌを注入バルブを介して導入で
きるようにし、下側の無担体電気泳動セルで反応複合分
の分離を行なった。この方法により実施例１よりも不純
物の少ない反応複合体を含む分取画分が得られた。
【００１３】（実施例３）実施例１と同様の試料を分離
した。操作は実施例１と全く同様に行なった。本実施例
では、添加したヒトα−フェトプロテイン（ＡＦＰ）を
フルオレセイン・イソチオシアン酸塩（ＦＩＴＣ）であ
らかじめ標識しておいた（ＦＩＴＣ：AFP分子＝２：１
とした）。ＦＩＴＣはキャリア流体緩衝液中で陰イオン
性を示すので、標識したＡＦＰは無標識のＡＦＰにくら
べて、より負の電荷を有することになる。したがって標
識ＡＦＰと抗ＡＦＰ抗体の反応複合体は移動度が大きく
なった。このように反応性物質にイオン性の標識物質を
付与することで、より純度の高い分離が可能となること
が確認できた。
した。操作は実施例１と全く同様に行なった。本実施例
では、添加したヒトα−フェトプロテイン（ＡＦＰ）を
フルオレセイン・イソチオシアン酸塩（ＦＩＴＣ）であ
らかじめ標識しておいた（ＦＩＴＣ：AFP分子＝２：１
とした）。ＦＩＴＣはキャリア流体緩衝液中で陰イオン
性を示すので、標識したＡＦＰは無標識のＡＦＰにくら
べて、より負の電荷を有することになる。したがって標
識ＡＦＰと抗ＡＦＰ抗体の反応複合体は移動度が大きく
なった。このように反応性物質にイオン性の標識物質を
付与することで、より純度の高い分離が可能となること
が確認できた。
【００１４】（実施例４）ポリデオキシヌクレオチドの
ことつであるpoly(ｄＡ)の２０mer のｐＨ８.７，１０
ｍＭ Tris−ホウ酸緩衝溶液（poly(ｄＡ)を３０μｇ／
ｍｌ、NaCl ５０ｍＭ含有）２ｍｌを、無担体電気泳動
セルに注入して、ｐＨ８.７ ，１０ｍＭTris−ホウ酸緩
衝溶液（NaCl ５０ｍＭ含有）を流下させながら電気泳
動を行なった。ここでpoly（ｄＴ）の２０merのｐＨ８.
７，１０ｍＭ Tris−ホウ酸緩衝溶液（poly（ｄＴ）を
３０μｇ／ｍｌ，NaCl ５０ｍＭ含有）２ｍｌをpoly
（ｄＡ）に添加して４２℃に１２０分置いておいてから
セルに注入して電気泳動を行なったところ、poly（ｄ
Ａ）単独時よりも陽極側の分画位置にポリデオキシヌク
レオチドが分離されてきた。これにはpoly（ｄＡ）とpo
ly（ｄＴ）のハイブリッド二本鎖が含まれていたことが
紫外吸光分析から確認できた。ｍＲＮＡにはpoly（Ａ）
鎖が３′末端に付属しているので、poly（Ｔ）鎖を用い
ることでmRNAを他のＲＭＡから分離するにも本法を適用
することが可能である。一本鎖ＤＮＡについても相補型
ポリヌクレオチド鎖を用いることで同様な分離が可能で
ある。 （実施例５）健常者の新鮮静脈血２５ｍｌからリンパ球
を分離し、無担体電気泳動セルを導入した。１０ｍＭ，
ｐＨ６.２ のリン酸ナトリウム緩衝生理的食塩水をキャ
リア流体として本発明にもどづく分離を行なった。ここ
で反応性物質としてリンパ球表面抗原ＣＤ４と反応する
ＦＩＴＣ結合抗ＣＤ４抗体液を用いた。無担体電気泳動
分離の結果、ＦＩＴＣの蛍光が強いリンパ球画分にＴ４
リンパ球が集中していることが判明した。このリンパ球
画分は他のリンパ球画分と容易に区別できた。
ことつであるpoly(ｄＡ)の２０mer のｐＨ８.７，１０
ｍＭ Tris−ホウ酸緩衝溶液（poly(ｄＡ)を３０μｇ／
ｍｌ、NaCl ５０ｍＭ含有）２ｍｌを、無担体電気泳動
セルに注入して、ｐＨ８.７ ，１０ｍＭTris−ホウ酸緩
衝溶液（NaCl ５０ｍＭ含有）を流下させながら電気泳
動を行なった。ここでpoly（ｄＴ）の２０merのｐＨ８.
７，１０ｍＭ Tris−ホウ酸緩衝溶液（poly（ｄＴ）を
３０μｇ／ｍｌ，NaCl ５０ｍＭ含有）２ｍｌをpoly
（ｄＡ）に添加して４２℃に１２０分置いておいてから
セルに注入して電気泳動を行なったところ、poly（ｄ
Ａ）単独時よりも陽極側の分画位置にポリデオキシヌク
レオチドが分離されてきた。これにはpoly（ｄＡ）とpo
ly（ｄＴ）のハイブリッド二本鎖が含まれていたことが
紫外吸光分析から確認できた。ｍＲＮＡにはpoly（Ａ）
鎖が３′末端に付属しているので、poly（Ｔ）鎖を用い
ることでmRNAを他のＲＭＡから分離するにも本法を適用
することが可能である。一本鎖ＤＮＡについても相補型
ポリヌクレオチド鎖を用いることで同様な分離が可能で
ある。 （実施例５）健常者の新鮮静脈血２５ｍｌからリンパ球
を分離し、無担体電気泳動セルを導入した。１０ｍＭ，
ｐＨ６.２ のリン酸ナトリウム緩衝生理的食塩水をキャ
リア流体として本発明にもどづく分離を行なった。ここ
で反応性物質としてリンパ球表面抗原ＣＤ４と反応する
ＦＩＴＣ結合抗ＣＤ４抗体液を用いた。無担体電気泳動
分離の結果、ＦＩＴＣの蛍光が強いリンパ球画分にＴ４
リンパ球が集中していることが判明した。このリンパ球
画分は他のリンパ球画分と容易に区別できた。
【００１５】
【発明の効果】本発明によれば、無担体電気泳動法を用
いる生体物質の精製法において、生体物質の活性や機能
にもとづく分離が可能になり、より高機能性の分離対象
物質が得られるようになる。これにより従来クロマトグ
ラフィーでしか分離できなかった成分にも無担体電気泳
動法を適用することができるようになる。また無担体電
気泳動法の特長である大量分取や連続分取がこれらの成
分にも応用でき、生産コストを大幅に下げることが可能
になる。
いる生体物質の精製法において、生体物質の活性や機能
にもとづく分離が可能になり、より高機能性の分離対象
物質が得られるようになる。これにより従来クロマトグ
ラフィーでしか分離できなかった成分にも無担体電気泳
動法を適用することができるようになる。また無担体電
気泳動法の特長である大量分取や連続分取がこれらの成
分にも応用でき、生産コストを大幅に下げることが可能
になる。
【図１】本発明にもとづく分離方法の原理図。
【図２】本発明にもとづく電気泳動セルの例を示す図。
【図３】分取した電気泳動分離画分の吸光度を示す図。
【図４】分取した電気泳動分離画分のゲル電気泳動プロ
ファイルを示す図。
ファイルを示す図。
１…電気泳動セル、２…キャリア緩衝液、３…電極、４
…試料注入用シリンジ、５…分離対象物質、６…共存成
分、７…反応性泳動物質、８…反応性泳動物質注入用シ
リンジ、９…イオン交換膜、１０…混合用コネクタ、１
１…キャリア液分配器。
…試料注入用シリンジ、５…分離対象物質、６…共存成
分、７…反応性泳動物質、８…反応性泳動物質注入用シ
リンジ、９…イオン交換膜、１０…混合用コネクタ、１
１…キャリア液分配器。
フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ２５Ｄ 13/04 7179−4Ｋ
Claims (4)
- 【請求項１】無担体電気泳動工程を有する分離精製法に
おいて、電気泳動による分離工程の直前または途中で、
分離対象物質と異なる電気泳動度を有し、かつ上記分離
対象物質と反応しうる特性を有する電気泳動可能な物質
を、上記分離対象物質を含む流体中に添加することによ
り、上記分離対象物質を選択的に分離することを特徴と
する生体物質の分離精製法。 - 【請求項２】上記分離対象物質が、蛋白質，核酸，オル
ガネラ，生体膜、及び細胞の内のいずれかであることを
特徴とする、請求項１に記載の生体物質の分離精製法。 - 【請求項３】上記電気泳動可能な物質が、抗原または抗
体であることを特徴とする、請求項１に記載の生体物質
の分離精製法。 - 【請求項４】上記電気泳動可能な物質は、上記分離対象
物質と異なる電気泳動度を付与できる物質を反応性物質
に結合させることにより調製されることを特徴とする、
請求項１に記載の生体物質の分離精製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3237832A JPH0599899A (ja) | 1991-09-18 | 1991-09-18 | 生体物質の分離精製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3237832A JPH0599899A (ja) | 1991-09-18 | 1991-09-18 | 生体物質の分離精製法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0599899A true JPH0599899A (ja) | 1993-04-23 |
Family
ID=17021070
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3237832A Pending JPH0599899A (ja) | 1991-09-18 | 1991-09-18 | 生体物質の分離精製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0599899A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003008958A1 (fr) * | 2001-07-11 | 2003-01-30 | Olympus Corporation | Element d'electrophorese a flux libre et procede d'electrophorese a flux libre |
| WO2005045023A1 (ja) * | 2003-11-10 | 2005-05-19 | Arkray Inc. | 核酸の濃縮精製方法および装置 |
| JPWO2004048398A1 (ja) * | 2002-11-28 | 2006-03-23 | アークレイ株式会社 | 核酸の濃縮精製方法および装置 |
| CN1332972C (zh) * | 2002-11-28 | 2007-08-22 | 爱科来株式会社 | 浓缩和纯化核酸的方法和装置 |
-
1991
- 1991-09-18 JP JP3237832A patent/JPH0599899A/ja active Pending
Cited By (5)
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