JPH05286995A - 小細胞及び上皮細胞肺癌細胞の増殖を阻害する小ペプチド及びプソイドペプチドアミド - Google Patents
小細胞及び上皮細胞肺癌細胞の増殖を阻害する小ペプチド及びプソイドペプチドアミドInfo
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- JPH05286995A JPH05286995A JP5022595A JP2259593A JPH05286995A JP H05286995 A JPH05286995 A JP H05286995A JP 5022595 A JP5022595 A JP 5022595A JP 2259593 A JP2259593 A JP 2259593A JP H05286995 A JPH05286995 A JP H05286995A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 新規の治療的に活性なペプチドアミド及びプ
ソイドペプチドアミド並びにそれらの酸付加塩に関す
る。 【構成】 下記式（１）〜（６）： 【化１】 〔式中、ｐ−ＨＯＰＡはｐ−ヒドロキシフェニル酢酸で
あり、Ｄ−ＭｅＰｈｅはＤ−Ｎ−メチルフェニルアラニ
ンを表わし、ＭＰＡは２−アミノ−３−メチルペンタン
を表わし、そしてΨ（ＣＨ2 ＮＨ）はペプチド結合の代
わりに存在するメチレンアミノ基である〕で表わされる
新規ペプチドアミド及びプソイドペプチドアミド並びに
それらの医薬的に許容できる酸付加塩に関する。
ソイドペプチドアミド並びにそれらの酸付加塩に関す
る。 【構成】 下記式（１）〜（６）： 【化１】 〔式中、ｐ−ＨＯＰＡはｐ−ヒドロキシフェニル酢酸で
あり、Ｄ−ＭｅＰｈｅはＤ−Ｎ−メチルフェニルアラニ
ンを表わし、ＭＰＡは２−アミノ−３−メチルペンタン
を表わし、そしてΨ（ＣＨ2 ＮＨ）はペプチド結合の代
わりに存在するメチレンアミノ基である〕で表わされる
新規ペプチドアミド及びプソイドペプチドアミド並びに
それらの医薬的に許容できる酸付加塩に関する。
Description
【０００１】本発明は、下記式（１）〜（６）： ｐ−ＨＯＰＡ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （１） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （２） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＭＰＡ （３） Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （４） Ｄ−Ｔｙｒ（Ｅｔ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （５） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （６） 〔式中、ｐ−ＨＯＰＡはｐ−ヒドロキシフェニル酢酸で
あり、Ｄ−ＭｅＰｈｅはＤ−Ｎ−メチルフェニルアラニ
ンを表わし、ＭＰＡは２−アミノ−３−メチルペンタン
を表わし、そしてΨ（ＣＨ2 ＮＨ）はペプチド結合の代
わりに存在するメチレンアミノ基である〕で表わされる
新規の治療的に活性なペプチドアミド及びプソイドペプ
チドアミド並びにそれらの医薬的に許容できる酸付加塩
及びそれらの化合物を含む医薬組成物に関する。
あり、Ｄ−ＭｅＰｈｅはＤ−Ｎ−メチルフェニルアラニ
ンを表わし、ＭＰＡは２−アミノ−３−メチルペンタン
を表わし、そしてΨ（ＣＨ2 ＮＨ）はペプチド結合の代
わりに存在するメチレンアミノ基である〕で表わされる
新規の治療的に活性なペプチドアミド及びプソイドペプ
チドアミド並びにそれらの医薬的に許容できる酸付加塩
及びそれらの化合物を含む医薬組成物に関する。
【０００２】さらに、本発明は、上記化合物及び組成物
の調製にも関する。本発明の式（１）〜（６）の化合物
は新規であり、そして価値ある薬理学的活性を有する。
より詳しくは、それらは小細胞及び上皮細胞肺癌の細胞
の増殖を阻害する。
の調製にも関する。本発明の式（１）〜（６）の化合物
は新規であり、そして価値ある薬理学的活性を有する。
より詳しくは、それらは小細胞及び上皮細胞肺癌の細胞
の増殖を阻害する。
【０００３】両性類に存在するボンベシン（ＢＮ）及び
構造的にボンベシンにひじょうに関連し、そして哺乳類
に存在するガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）の両者
は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）において自己分泌増殖因子
として作用することが知られている（Ｎａｔｕｒｅ ３
１６，８２３（１９８５）〕。ボンベシンの式は、Ｇｌ
ｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ
−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ2 であり、そしてＧＲＰのフラグメント１
４〜２７は、次の式：Ｍｅｔ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2により表わさ
れる。
構造的にボンベシンにひじょうに関連し、そして哺乳類
に存在するガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）の両者
は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）において自己分泌増殖因子
として作用することが知られている（Ｎａｔｕｒｅ ３
１６，８２３（１９８５）〕。ボンベシンの式は、Ｇｌ
ｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ
−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｍｅｔ−ＮＨ2 であり、そしてＧＲＰのフラグメント１
４〜２７は、次の式：Ｍｅｔ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ2により表わさ
れる。
【０００４】ＢＮ又はＧＲＰ（ＢＮ拮抗剤）の構造的類
似体は、Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３細胞上に存在するＢＮレセ
プターへの〔 125Ｉ−Ｔｙｒ4 〕−ボンベシンの結合を
阻害し、そして小細胞肺癌細胞系の増殖を妨害すること
もまた知られている〔Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２５
２，６４３９（１９８７）；ＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＰｅ
ｐｔｉｄｅｓ １９，１０５（１９８７）；並びにＥｕ
ｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９０，３１（１９９
０）〕；前記増殖は 3Ｈ−チミジンの組込みにより測定
され得る。
似体は、Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３細胞上に存在するＢＮレセ
プターへの〔 125Ｉ−Ｔｙｒ4 〕−ボンベシンの結合を
阻害し、そして小細胞肺癌細胞系の増殖を妨害すること
もまた知られている〔Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２５
２，６４３９（１９８７）；ＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＰｅ
ｐｔｉｄｅｓ １９，１０５（１９８７）；並びにＥｕ
ｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９０，３１（１９９
０）〕；前記増殖は 3Ｈ−チミジンの組込みにより測定
され得る。
【０００５】式Ｄ−Ａｒｇ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒ
ｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ
−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＮＨ2 のペプチド〔（スパンチデ）
（Ｓｐａｎｔｉｄｅ）〕，すなわち″物質Ｐ″（ＳＰ）
に対する拮抗剤は、Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３マウス胚繊維芽
細胞に対してＢＮ拮抗剤として作用し、そして小細胞肺
癌の細胞の増殖を阻害することが観察された〔Ｐｒｕ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２，７６
１６（１９８５）；Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ５７，５
７９（１９８８）〕。
ｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ
−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＮＨ2 のペプチド〔（スパンチデ）
（Ｓｐａｎｔｉｄｅ）〕，すなわち″物質Ｐ″（ＳＰ）
に対する拮抗剤は、Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３マウス胚繊維芽
細胞に対してＢＮ拮抗剤として作用し、そして小細胞肺
癌の細胞の増殖を阻害することが観察された〔Ｐｒｕ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２，７６
１６（１９８５）；Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ５７，５
７９（１９８８）〕。
【０００６】さらに、下記式：ＨＯＰＡ−Ｄ−Ｔｒｐ−
Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＮＨ2 （Ｉ）で
表わされるＮ−アシル化ペンタペプチドは、ＳＰの平滑
筋収縮効果を阻害する比較的強いＳＰ拮抗剤（テンジク
ネズミの回腸に対して５．７３のｐＡ2 値を有する）で
あることが記載されている〔Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐ
ｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５６，３２３（１９
８８）〕。
Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＮＨ2 （Ｉ）で
表わされるＮ−アシル化ペンタペプチドは、ＳＰの平滑
筋収縮効果を阻害する比較的強いＳＰ拮抗剤（テンジク
ネズミの回腸に対して５．７３のｐＡ2 値を有する）で
あることが記載されている〔Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐ
ｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５６，３２３（１９
８８）〕。
【０００７】スパンチデのＣ−末端ペンタペプチド類似
体に向けられる本発明者の研究は、Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３
細胞へのラベルされた〔 125Ｉ−Ｔｙｒ4 〕−ボンベシ
ンの結合を阻害し、そしてＢＮレセプターを有さないＮ
ＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌細胞系の増殖を妨害するため
に、式（Ｉ）の低分子量ＳＰ拮抗剤を示した。
体に向けられる本発明者の研究は、Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３
細胞へのラベルされた〔 125Ｉ−Ｔｙｒ4 〕−ボンベシ
ンの結合を阻害し、そしてＢＮレセプターを有さないＮ
ＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌細胞系の増殖を妨害するため
に、式（Ｉ）の低分子量ＳＰ拮抗剤を示した。
【０００８】従って、本発明の目的は、〔 125Ｉ−Ｔｙ
ｒ4 〕−ＢＮのＳｗｉｓｓ ３Ｔ３細胞への結合を阻害
しない類似体、すなわち、従ってＢＮ拮抗剤ではない
が、しかし小細胞及び上皮細胞肺癌の細胞の増殖に対し
て強い阻害作用を付与する類似体を調製することであ
る。そのような化合物は、肺癌の治療においてひじょう
に有用であり得る。変性された、主に還元されたペプチ
ド結合を含む式（１）〜（６）の類似体はそのような効
果を示すことが見出された。
ｒ4 〕−ＢＮのＳｗｉｓｓ ３Ｔ３細胞への結合を阻害
しない類似体、すなわち、従ってＢＮ拮抗剤ではない
が、しかし小細胞及び上皮細胞肺癌の細胞の増殖に対し
て強い阻害作用を付与する類似体を調製することであ
る。そのような化合物は、肺癌の治療においてひじょう
に有用であり得る。変性された、主に還元されたペプチ
ド結合を含む式（１）〜（６）の類似体はそのような効
果を示すことが見出された。
【０００９】本明細書に使用される略語は次の通りであ
る： ＦＣＳ ：ウシ胎児血清 Ｄ−ＭＥＭ：ダルベッコ最少必須培地 ＢＳＡ ：ウシ血清アルブミン ＨＥＰＥＳ：Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン
−Ｎ′−（２−エタンスルホン酸） ＰＢＳ ：リン酸緩衝溶液 ＳＤＳ ：ドデシル硫酸ナトリウム ＴＣＡ ：トリクロロ酢酸。
る： ＦＣＳ ：ウシ胎児血清 Ｄ−ＭＥＭ：ダルベッコ最少必須培地 ＢＳＡ ：ウシ血清アルブミン ＨＥＰＥＳ：Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン
−Ｎ′−（２−エタンスルホン酸） ＰＢＳ ：リン酸緩衝溶液 ＳＤＳ ：ドデシル硫酸ナトリウム ＴＣＡ ：トリクロロ酢酸。
【００１０】他の略語は、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ Ｊｏｉ
ｎｔ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎＢｉｏｃｈｅｍｉｃ
ａｌ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ（ＪＣＢＮ）の″Ｎｏ
ｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ａｎｄ Ｓｙｍｂｏｌｉｓｍ
ｆｏｒ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ ａｎｄ Ｐｅｐｔｉ
ｄｅｓ，Ｒｅｃｏｍｍｅｎｃｌａｔｉｏｎｓ １９８
３″に記載されるものと一致する〔Ｂｉｏｃｈｅｍ．
Ｊ．２１９，３４５（１９８４）〕。
ｎｔ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎＢｉｏｃｈｅｍｉｃ
ａｌ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ（ＪＣＢＮ）の″Ｎｏ
ｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ａｎｄ Ｓｙｍｂｏｌｉｓｍ
ｆｏｒ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ ａｎｄ Ｐｅｐｔｉ
ｄｅｓ，Ｒｅｃｏｍｍｅｎｃｌａｔｉｏｎｓ １９８
３″に記載されるものと一致する〔Ｂｉｏｃｈｅｍ．
Ｊ．２１９，３４５（１９８４）〕。
【００１１】式（１）〜（６）の新規化合物及びそれら
の酸付加塩は、出発物質としてＬｅｕ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌ
ｅｕ−ＮＨ2 又はＬｅｕ−ＭＰＡを用いることによっ
て、式（１）のペプチド、又はＮ−末端ベンジルオキシ
カルボニル又はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を
含む式（２）〜（６）のペプチドの誘導体が、好ましく
はα−ＮＨ2 基の反応性エステルカップリング及び保護
解除の段階の連続的使用により構築され、次に、保護基
が触媒的水素化又はアシドリシスにより除去され、そし
て所望により、得られた生成物が医薬的に許容できる酸
付加塩に転換され、又は遊離塩基がそのような塩から遊
離されるような手段で調製され得る。
の酸付加塩は、出発物質としてＬｅｕ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌ
ｅｕ−ＮＨ2 又はＬｅｕ−ＭＰＡを用いることによっ
て、式（１）のペプチド、又はＮ−末端ベンジルオキシ
カルボニル又はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を
含む式（２）〜（６）のペプチドの誘導体が、好ましく
はα−ＮＨ2 基の反応性エステルカップリング及び保護
解除の段階の連続的使用により構築され、次に、保護基
が触媒的水素化又はアシドリシスにより除去され、そし
て所望により、得られた生成物が医薬的に許容できる酸
付加塩に転換され、又は遊離塩基がそのような塩から遊
離されるような手段で調製され得る。
【００１２】式（１）の化合物の場合、Ｎ−末端 Ｐ−
ＨＯＰＡは、ペプチド鎖を構築することによって最終生
成物を得るために、いづれの保護基をも伴わないで分子
中に組込まれる。
ＨＯＰＡは、ペプチド鎖を構築することによって最終生
成物を得るために、いづれの保護基をも伴わないで分子
中に組込まれる。
【００１３】出発物質として使用されるプソイドペプチ
ドＬｅｕ−Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 のメチレン
アミノ（還元ペプチド）結合は、既知の態様で行なわれ
る還元性アルキル化により形成され得る〔たとえば、Ｎ
ａｔｕｒｅ ２９９，５５５（１９８２）を参照のこ
と〕。従って、Ｌｅｕ−ＮＨ2 塩酸塩はＺ−Ｌｅｕ−Ｈ
（Ｚ−Ｌｅｕ−アルデヒド）によりアルキル化され、そ
して得られるシッフ塩基は、ナトリウムシアノボーロ水
素化合物により現場還元される。保護されたプソイドジ
ペプチドＺ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 の
Ｎ−末端ベンジルオキシカルボニル保護基が、触媒的水
素化により除去される。
ドＬｅｕ−Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 のメチレン
アミノ（還元ペプチド）結合は、既知の態様で行なわれ
る還元性アルキル化により形成され得る〔たとえば、Ｎ
ａｔｕｒｅ ２９９，５５５（１９８２）を参照のこ
と〕。従って、Ｌｅｕ−ＮＨ2 塩酸塩はＺ−Ｌｅｕ−Ｈ
（Ｚ−Ｌｅｕ−アルデヒド）によりアルキル化され、そ
して得られるシッフ塩基は、ナトリウムシアノボーロ水
素化合物により現場還元される。保護されたプソイドジ
ペプチドＺ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 の
Ｎ−末端ベンジルオキシカルボニル保護基が、触媒的水
素化により除去される。
【００１４】Ｌｅｕ−ＭＰＡは次の通りにして調製され
得る。第１の段階において、２−アミノ−３−メチルペ
ンタンが、Ｚ−Ｌｅｕ−ＯＨ及び塩化ビバロイルから形
成される混合された無水物によりアシル化され、次にベ
ンジルオキシカルボニル保護基が触媒的水素化により除
去され、そしてＬｅｕ−ＭＰＡ異性体の混合物がシリカ
ゲルカラム上でのクロマトグラフィー処理により分離さ
れる。その後、実験部分に記載されるＬｅｕ−ＭＰＡ異
性体が使用される。
得る。第１の段階において、２−アミノ−３−メチルペ
ンタンが、Ｚ−Ｌｅｕ−ＯＨ及び塩化ビバロイルから形
成される混合された無水物によりアシル化され、次にベ
ンジルオキシカルボニル保護基が触媒的水素化により除
去され、そしてＬｅｕ−ＭＰＡ異性体の混合物がシリカ
ゲルカラム上でのクロマトグラフィー処理により分離さ
れる。その後、実験部分に記載されるＬｅｕ−ＭＰＡ異
性体が使用される。
【００１５】合成の完結の後、本発明の得られた粗ペン
タペプチドアミドがシリカゲルカラム上でのクロマトグ
ラフィー処理により精製される。
タペプチドアミドがシリカゲルカラム上でのクロマトグ
ラフィー処理により精製される。
【００１６】本発明の新規化合物の生物学的研究が４つ
の試験で実施された。問題の化合物のＢＮ−拮抗効果
が、Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３マウス繊維芽細胞上に存在する
ＢＮレセプターからのラベルされた〔 125Ｉ−Ｔｙ
ｒ4 〕−ＢＮの置換を測定することに基づいて、試験１
において決定された。試験２及び試験３は、ＮＣＩ−Ｈ
６９小細胞肺癌細胞の増殖及び成長に対する本発明の化
合物の阻害効果を研究するために使用された。非小細胞
肺癌細胞及び上皮細胞肺癌細胞に対する本発明の化合物
の阻害効果が試験４において研究された。
の試験で実施された。問題の化合物のＢＮ−拮抗効果
が、Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３マウス繊維芽細胞上に存在する
ＢＮレセプターからのラベルされた〔 125Ｉ−Ｔｙ
ｒ4 〕−ＢＮの置換を測定することに基づいて、試験１
において決定された。試験２及び試験３は、ＮＣＩ−Ｈ
６９小細胞肺癌細胞の増殖及び成長に対する本発明の化
合物の阻害効果を研究するために使用された。非小細胞
肺癌細胞及び上皮細胞肺癌細胞に対する本発明の化合物
の阻害効果が試験４において研究された。
【００１７】試験１ Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３マウス繊維芽細胞系上のＢＮレセプ
ターへの標的化合物の結合の研究 Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３マウス繊維芽細胞を、１０％のＦＣ
Ｓを含むＤ−ＭＥＭ培養培地において２４個の穴を含む
組織培養プレート上で、集密的及び休止状態まで（３×
１０5 個の細胞／穴）増殖した。細胞を、pH７．４のＤ
−ＭＥＭ０．５ml（０．２％のＢＳＡ及び２４ｍモルの
ＨＥＰＥＳを含み、そして４℃に冷却された）、すなわ
ちインキュベーション混合物により３度洗浄した。続い
て、細胞を、一定濃度（１ｎモル）での〔 125Ｉ−Ｔｙ
ｒ4 〕−ＢＮ及び１．１８〜７５Ｍモルの量での試験さ
れるべき化合物を含むインキュベーション混合物と共に
４℃で３時間、２５０μｌの最終体積でインキュベート
した。反応の最後で、細胞を、インキュベーション混合
物により２度及び次にＰＢＳ（pH＝７．４）により３
度、洗浄した。
ターへの標的化合物の結合の研究 Ｓｗｉｓｓ ３Ｔ３マウス繊維芽細胞を、１０％のＦＣ
Ｓを含むＤ−ＭＥＭ培養培地において２４個の穴を含む
組織培養プレート上で、集密的及び休止状態まで（３×
１０5 個の細胞／穴）増殖した。細胞を、pH７．４のＤ
−ＭＥＭ０．５ml（０．２％のＢＳＡ及び２４ｍモルの
ＨＥＰＥＳを含み、そして４℃に冷却された）、すなわ
ちインキュベーション混合物により３度洗浄した。続い
て、細胞を、一定濃度（１ｎモル）での〔 125Ｉ−Ｔｙ
ｒ4 〕−ＢＮ及び１．１８〜７５Ｍモルの量での試験さ
れるべき化合物を含むインキュベーション混合物と共に
４℃で３時間、２５０μｌの最終体積でインキュベート
した。反応の最後で、細胞を、インキュベーション混合
物により２度及び次にＰＢＳ（pH＝７．４）により３
度、洗浄した。
【００１８】前記洗浄を、それぞれ氷冷却された液体７
５０μｌの体積により行なった。細胞を、０．５Ｍの水
酸化ナトリウム溶液７５０μｌを添加することによって
溶解し、ピペットにより試験管中に運び、そして細胞に
結合される放射性活性を測定した。特異的結合の度合い
を、高濃度の冷たい〔Ｔｙｒ4 〕−ＢＮの存在下で決定
した。特異的に結合された、ラベル化ホルモンの量を、
最大結合、すなわち表１に示されるように、試験される
べき化合物の存在における特異的結合の百分率として表
わした。
５０μｌの体積により行なった。細胞を、０．５Ｍの水
酸化ナトリウム溶液７５０μｌを添加することによって
溶解し、ピペットにより試験管中に運び、そして細胞に
結合される放射性活性を測定した。特異的結合の度合い
を、高濃度の冷たい〔Ｔｙｒ4 〕−ＢＮの存在下で決定
した。特異的に結合された、ラベル化ホルモンの量を、
最大結合、すなわち表１に示されるように、試験される
べき化合物の存在における特異的結合の百分率として表
わした。
【００１９】
【表１】
【００２０】表１のデータは、ＳＰ拮抗剤の特徴である
ＢＮ拮抗効果がＳＰ拮抗剤中にメチレンアミノ結合を組
込むことによって〔式（１），（２），（４）及び
（５）の化合物〕又はＳＰ拮抗剤のＣ−末端アミノ酸と
脂肪族アミンとを置換することによって〔化合物
（３）〕撤廃されることを示す。
ＢＮ拮抗効果がＳＰ拮抗剤中にメチレンアミノ結合を組
込むことによって〔式（１），（２），（４）及び
（５）の化合物〕又はＳＰ拮抗剤のＣ−末端アミノ酸と
脂肪族アミンとを置換することによって〔化合物
（３）〕撤廃されることを示す。
【００２１】試験２3 Ｈ−チミジンの組込みを測定することによっての、Ｂ
Ｎレセプターを有さないＮＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌細胞
系の増殖に対する標的化合物の阻害効果の研究 懸濁液、すなわち１０％のＦＣＳにより補充されたＲＰ
ＭＩ−１６４０培養培地（ＤＩＦＣＯ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）
で増殖された細胞を、４℃で１２００rpm での遠心分離
により集めた。上清液をデカントした後、細胞をＲＰＭ
Ｉ−１６４０ＨＩＴＥＳ培地（１×１０-8モル／ｌのヒ
ドロコルチゾン、５mg／ｌのインシュリン、１０mg／ｌ
のトランスフェリン、１×１０-8モル／ｌのエストラジ
オール及び３×１０-8モル／ｌのナトリウムセレニドを
含む）に懸濁した。細胞数を５×１０5 個の細胞／mlに
調整し；この細胞懸濁液９０μｌを、９６の穴を含む組
織培養プレートの個々の穴に添加した。種々の濃度で標
的化合物をそれぞれ含む溶液１０μｌを、前記細胞に添
加した。細胞を、５体積％の二酸化炭素を含む空気下で
７２時間、増殖し、次に培養培地１０μｌに溶解された
３７KBq （１μCi）の 3Ｈ−チミジンを穴に添加し、そ
してインキュベーションをさらに２４時間続けた。続い
て、細胞を２０％のＳＤＳ溶液１０μｌに溶解した。個
々の穴からの溶液２５μｌをＷｈａｔｍａｎ３フィルタ
ー紙上に滴下した。乾燥の後、フィルター紙を、５％水
性冷トリクロロ酢酸溶液により３度及び次に９６％エタ
ノールにより洗浄し、それを脱水し、そして残留するト
リクロロ酢酸を除去した。
Ｎレセプターを有さないＮＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌細胞
系の増殖に対する標的化合物の阻害効果の研究 懸濁液、すなわち１０％のＦＣＳにより補充されたＲＰ
ＭＩ−１６４０培養培地（ＤＩＦＣＯ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）
で増殖された細胞を、４℃で１２００rpm での遠心分離
により集めた。上清液をデカントした後、細胞をＲＰＭ
Ｉ−１６４０ＨＩＴＥＳ培地（１×１０-8モル／ｌのヒ
ドロコルチゾン、５mg／ｌのインシュリン、１０mg／ｌ
のトランスフェリン、１×１０-8モル／ｌのエストラジ
オール及び３×１０-8モル／ｌのナトリウムセレニドを
含む）に懸濁した。細胞数を５×１０5 個の細胞／mlに
調整し；この細胞懸濁液９０μｌを、９６の穴を含む組
織培養プレートの個々の穴に添加した。種々の濃度で標
的化合物をそれぞれ含む溶液１０μｌを、前記細胞に添
加した。細胞を、５体積％の二酸化炭素を含む空気下で
７２時間、増殖し、次に培養培地１０μｌに溶解された
３７KBq （１μCi）の 3Ｈ−チミジンを穴に添加し、そ
してインキュベーションをさらに２４時間続けた。続い
て、細胞を２０％のＳＤＳ溶液１０μｌに溶解した。個
々の穴からの溶液２５μｌをＷｈａｔｍａｎ３フィルタ
ー紙上に滴下した。乾燥の後、フィルター紙を、５％水
性冷トリクロロ酢酸溶液により３度及び次に９６％エタ
ノールにより洗浄し、それを脱水し、そして残留するト
リクロロ酢酸を除去した。
【００２２】乾燥の後、フィルター紙片をシンチレーシ
ョン管に置き、そして５mlのシンチレーションカクテル
〔１０００mlのトルエン、４００mlの無水エタノール、
１０mlのジオキサン、６ｇの２．５−ジフェニルオキサ
ゾール及び０．１５ｇの１．４−ビス（５−フェニル−
２−オキサゾリル）ベンゼンを含む混合物〕を個々に添
加した。サンプルの活性を、ＬＫＢ Ｗａｌｌａｃ １
２１１β−カウンターを用いて測定した。データは対照
の百分率として表わされ、ここで化合物により処理され
ていないＮＣＩ−Ｈ６９細胞の 3Ｈ−チミジン摂取は１
００％（対照）であるとみなされた（表２を参照のこ
と）。
ョン管に置き、そして５mlのシンチレーションカクテル
〔１０００mlのトルエン、４００mlの無水エタノール、
１０mlのジオキサン、６ｇの２．５−ジフェニルオキサ
ゾール及び０．１５ｇの１．４−ビス（５−フェニル−
２−オキサゾリル）ベンゼンを含む混合物〕を個々に添
加した。サンプルの活性を、ＬＫＢ Ｗａｌｌａｃ １
２１１β−カウンターを用いて測定した。データは対照
の百分率として表わされ、ここで化合物により処理され
ていないＮＣＩ−Ｈ６９細胞の 3Ｈ−チミジン摂取は１
００％（対照）であるとみなされた（表２を参照のこ
と）。
【００２３】
【表２】
【００２４】試験３ ＮＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌細胞の増殖に対する標的化合
物の阻害効果の研究 懸濁液、すなわち１０％のＦＣＳにより補充されたＲＰ
ＭＩ−１６４０培養培地で増殖されたＮＣＩ−Ｈ６９細
胞を、４℃で１５００rpm での遠心分離により集めた。
上清液のデカントの後、細胞を新鮮な培地に懸濁し、そ
して細胞数を１×１０5 個の細胞／mlに調整した。細胞
懸濁液それぞれ５mlを、２５cm2 の大きさの組織−培養
容器中に適用した。試験されるべき化合物を、それぞれ
１０及び５０μモル／ｌの最終濃度で使用した。細胞数
を、個々の定義された間隔で２×２００μｌの細胞懸濁
液から決定した。取られ体積のサンプルを、それぞれ１
０又は５０μモル／ｌの濃度で標的化合物を含む培地に
より置き換えた。得られた細胞希釈物を計算により訂正
した。データは、出発細胞数の百分率として表わされた
（１×１０5 個の細胞／mlが１００％であるとして見な
された）。化合物により処理されていない細胞の数の変
化がまた対照として示された（表３を参照のこと）。
物の阻害効果の研究 懸濁液、すなわち１０％のＦＣＳにより補充されたＲＰ
ＭＩ−１６４０培養培地で増殖されたＮＣＩ−Ｈ６９細
胞を、４℃で１５００rpm での遠心分離により集めた。
上清液のデカントの後、細胞を新鮮な培地に懸濁し、そ
して細胞数を１×１０5 個の細胞／mlに調整した。細胞
懸濁液それぞれ５mlを、２５cm2 の大きさの組織−培養
容器中に適用した。試験されるべき化合物を、それぞれ
１０及び５０μモル／ｌの最終濃度で使用した。細胞数
を、個々の定義された間隔で２×２００μｌの細胞懸濁
液から決定した。取られ体積のサンプルを、それぞれ１
０又は５０μモル／ｌの濃度で標的化合物を含む培地に
より置き換えた。得られた細胞希釈物を計算により訂正
した。データは、出発細胞数の百分率として表わされた
（１×１０5 個の細胞／mlが１００％であるとして見な
された）。化合物により処理されていない細胞の数の変
化がまた対照として示された（表３を参照のこと）。
【００２５】
【表３】
【００２６】標的化合物は、ＳＰ拮抗剤の特徴である、
ＮＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌細胞の成熟及び増殖に対する
阻害効果を保持することが表２及び３のデータから見出
され；式（２）の化合物の阻害効果は式（Ｉ）の対照物
質の効果よりも強い。
ＮＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌細胞の成熟及び増殖に対する
阻害効果を保持することが表２及び３のデータから見出
され；式（２）の化合物の阻害効果は式（Ｉ）の対照物
質の効果よりも強い。
【００２７】試験４3 Ｈ−チミジンの組込みを決定することによっての、Ｓ
Ｋ−ＭＥＳ−１上皮細胞肺癌細胞系の増殖に対する標的
化合物の効果試験 １０％のＦＣＳにより補充されたＤ−ＭＥＭ培地におい
て単層培養物として培養された細胞を、０．２５％のト
リプシンによる処理により懸濁し、そして細胞濃度を、
新鮮な培養培地を添加することによって５×１０5 個の
細胞／mlに調整した。
Ｋ−ＭＥＳ−１上皮細胞肺癌細胞系の増殖に対する標的
化合物の効果試験 １０％のＦＣＳにより補充されたＤ−ＭＥＭ培地におい
て単層培養物として培養された細胞を、０．２５％のト
リプシンによる処理により懸濁し、そして細胞濃度を、
新鮮な培養培地を添加することによって５×１０5 個の
細胞／mlに調整した。
【００２８】細胞懸濁液１００μｌを、組織培養プレー
トの個々の９６個の穴中に適用した。５体積％の二酸化
炭素を含む空気下で３７℃で４８時間のインキュベーシ
ョンした後、付着された細胞上の培養培地を、９０／μ
ｌのＤ−ＭＥＭ−ＨＩＴＥＳ−０．１％ＢＳＡにより変
換した。種々の濃度で標的化合物を含む個々の溶液１０
／μｌを細胞に添加し、そして２４時間後、３７KBq
（１μCi）の 3Ｈ−チミジンを個々の穴に添加し、次に
インキュベーションをさらに２４時間続けた。
トの個々の９６個の穴中に適用した。５体積％の二酸化
炭素を含む空気下で３７℃で４８時間のインキュベーシ
ョンした後、付着された細胞上の培養培地を、９０／μ
ｌのＤ−ＭＥＭ−ＨＩＴＥＳ−０．１％ＢＳＡにより変
換した。種々の濃度で標的化合物を含む個々の溶液１０
／μｌを細胞に添加し、そして２４時間後、３７KBq
（１μCi）の 3Ｈ−チミジンを個々の穴に添加し、次に
インキュベーションをさらに２４時間続けた。
【００２９】サンプルを取り、そして試験２に記載され
ているようにして測定した。データは、対照の百分率と
して表わされた。化合物により処理されていないＳＫ−
ＭＥＳ−１細胞の 3Ｈ−チミジン摂取は１００％（対
照）として見なされた。
ているようにして測定した。データは、対照の百分率と
して表わされた。化合物により処理されていないＳＫ−
ＭＥＳ−１細胞の 3Ｈ−チミジン摂取は１００％（対
照）として見なされた。
【００３０】
【表４】
【００３１】表４のデータは、肺癌細胞の増殖に対する
本発明の化合物の阻害効果の範囲が既知のＳＰ拮抗剤の
効果よりも広いことを示す〔化合物（Ｉ）の対照物質を
参照のこと〕。本発明の化合物はまた、ＳＫ−ＭＥＳ−
１上皮細胞肺癌細胞系の増殖を妨げる。さらに本発明の
観点によれば、適切な不活性医薬キャリヤーと共に、本
発明の式（１）〜（６）のペプチド又はプソイドペプチ
ドアミド又はそれらの酸付加塩の少なくとも１種を活性
成分として含んで成る医薬組成物が供給される。本発明
の医薬組成物は、小細胞及び上皮細胞肺癌細胞の増殖を
阻害するための治療において使用され得る。
本発明の化合物の阻害効果の範囲が既知のＳＰ拮抗剤の
効果よりも広いことを示す〔化合物（Ｉ）の対照物質を
参照のこと〕。本発明の化合物はまた、ＳＫ−ＭＥＳ−
１上皮細胞肺癌細胞系の増殖を妨げる。さらに本発明の
観点によれば、適切な不活性医薬キャリヤーと共に、本
発明の式（１）〜（６）のペプチド又はプソイドペプチ
ドアミド又はそれらの酸付加塩の少なくとも１種を活性
成分として含んで成る医薬組成物が供給される。本発明
の医薬組成物は、小細胞及び上皮細胞肺癌細胞の増殖を
阻害するための治療において使用され得る。
【００３２】式（１）〜（６）のペプチド及びプソイド
ペプチドアミド及びそれらの塩は、それ自体既知の医薬
産業の方法により治療において一般的に使用される形に
配合される。本発明の医薬組成物は、固体、液体又は半
液体形で配合され、そして１又は複数の一般的に使用さ
れる従来のキャリヤー、希釈剤、補充剤、助剤（たとえ
ば安定剤、浸透圧を変性するための塩）、pH値を調整す
るための物質及び追加の添加剤を含むことができる。
ペプチドアミド及びそれらの塩は、それ自体既知の医薬
産業の方法により治療において一般的に使用される形に
配合される。本発明の医薬組成物は、固体、液体又は半
液体形で配合され、そして１又は複数の一般的に使用さ
れる従来のキャリヤー、希釈剤、補充剤、助剤（たとえ
ば安定剤、浸透圧を変性するための塩）、pH値を調整す
るための物質及び追加の添加剤を含むことができる。
【００３３】固体医薬組成物は、たとえば錠剤、糖剤、
カプセル、オブラート又は注射の調製において有用な粉
末アンプルであり得る。液体組成物は、注射剤、浸剤、
スプーン一杯分の液状物（Ｓｐｏｏｎｆｕｌｓ）、湿潤
包装物又はドロップであり得る。半液体組成物は、たと
えばクリーム、軟膏、香膏、振盪混合物又は坐剤であり
得る。
カプセル、オブラート又は注射の調製において有用な粉
末アンプルであり得る。液体組成物は、注射剤、浸剤、
スプーン一杯分の液状物（Ｓｐｏｏｎｆｕｌｓ）、湿潤
包装物又はドロップであり得る。半液体組成物は、たと
えばクリーム、軟膏、香膏、振盪混合物又は坐剤であり
得る。
【００３４】本発明の医薬組成物は、所望する効果を示
すために十分な活性成分を含む量で投与される。前記用
量は、疾病のタイプ及び重症度、患者の体重及び活性成
分に対する患者の感受性、適用の態様、処理の毎日の回
数、等に依存する。適用されるべき用量は、定えられた
患者のすべての環境に基づいて医者により安全に決定さ
れ得る。
すために十分な活性成分を含む量で投与される。前記用
量は、疾病のタイプ及び重症度、患者の体重及び活性成
分に対する患者の感受性、適用の態様、処理の毎日の回
数、等に依存する。適用されるべき用量は、定えられた
患者のすべての環境に基づいて医者により安全に決定さ
れ得る。
【００３５】単純な投与を可能にするためには、活性成
分は好ましくは、投与されるべき量で活性成分を含む投
薬単位又はその一部（たとえば半分，１／３，１／４部
分）の形で仕上げられる。そのような投薬単位は、錠剤
を２又は４つの部分に分割するためにみぞを供給され得
る錠剤である。
分は好ましくは、投与されるべき量で活性成分を含む投
薬単位又はその一部（たとえば半分，１／３，１／４部
分）の形で仕上げられる。そのような投薬単位は、錠剤
を２又は４つの部分に分割するためにみぞを供給され得
る錠剤である。
【００３６】活性成分の下腹部吸収を確かめるために、
錠剤は、酸性媒体に不溶性であるコーチングを付与され
得；すなわち錠剤は腸溶解性にされ得る。類似する効果
が、活性成分を封入することによって達成され得る。
錠剤は、酸性媒体に不溶性であるコーチングを付与され
得；すなわち錠剤は腸溶解性にされ得る。類似する効果
が、活性成分を封入することによって達成され得る。
【００３７】本発明の医薬組成物は一般的に、投薬単位
当たり約１mg〜約１００mgの活性成分を含むことができ
る。上記値は、単に例示的な特徴のものであり、そして
実際の活性成分含有量は、前記限界よりも少なく又は多
くても良い。
当たり約１mg〜約１００mgの活性成分を含むことができ
る。上記値は、単に例示的な特徴のものであり、そして
実際の活性成分含有量は、前記限界よりも少なく又は多
くても良い。
【００３８】本発明は、次の非制限的な例の助けにより
詳細に例示される。融点は、Ｔｏｔｔｏｌｉの装置（Ｂ
ｕｃｈｉ，スイス）に基づいて決定された。
詳細に例示される。融点は、Ｔｏｔｔｏｌｉの装置（Ｂ
ｕｃｈｉ，スイス）に基づいて決定された。
【００３９】薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）試験
を、次の溶媒系を用いることによって、予備加工された
シリカゲル吸着剤層（ＤＣ−Ｆｅｒｔｉｇｐｌａｔｔｅ
ｎ，Ｍｅｒｃｋ）上で行なった： １．酢酸エチル：原液＝１９：１（ｓｉｇｎ1 ） ２．酢酸エチル：原液＝４：１（ｓｉｇｎ2 ） ３．酢酸エチル：原液＝３９：１（ｓｉｇｎ3 ） ４．酢酸エチル：メタノール：ｎ−ヘキサン＝６：１：
３（ｓｉｇｎ4 ）。 原液は、ピリジン／酢酸／水の２０：６：１１混合液で
あった。上記係数は体積比である。
を、次の溶媒系を用いることによって、予備加工された
シリカゲル吸着剤層（ＤＣ−Ｆｅｒｔｉｇｐｌａｔｔｅ
ｎ，Ｍｅｒｃｋ）上で行なった： １．酢酸エチル：原液＝１９：１（ｓｉｇｎ1 ） ２．酢酸エチル：原液＝４：１（ｓｉｇｎ2 ） ３．酢酸エチル：原液＝３９：１（ｓｉｇｎ3 ） ４．酢酸エチル：メタノール：ｎ−ヘキサン＝６：１：
３（ｓｉｇｎ4 ）。 原液は、ピリジン／酢酸／水の２０：６：１１混合液で
あった。上記係数は体積比である。
【００４０】クロマトグラムを、塩素化の後、ニンヒド
リンにより又はＫＩ／Ｏ−トルエン試薬を用いることに
よって検出した。高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬ
Ｃ）試験を、ＢＳＴ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ ３００ Ｃ
１８ ５μｍカラム上で行なった。Ｇｉｌｓｏｎポンプ
により連結されたＧｉｌｓｏｎ３０５検出器を、それら
の試験に使用した。溶離剤として、０．１％のトリフル
オロ酢酸を含むアセトントリル／水の２：３混合物を、
１．２ml／分の流速で使用した。このシステムで研究さ
れる場合、本発明の純度は少なくとも９５％であること
が見出された。
リンにより又はＫＩ／Ｏ−トルエン試薬を用いることに
よって検出した。高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬ
Ｃ）試験を、ＢＳＴ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ ３００ Ｃ
１８ ５μｍカラム上で行なった。Ｇｉｌｓｏｎポンプ
により連結されたＧｉｌｓｏｎ３０５検出器を、それら
の試験に使用した。溶離剤として、０．１％のトリフル
オロ酢酸を含むアセトントリル／水の２：３混合物を、
１．２ml／分の流速で使用した。このシステムで研究さ
れる場合、本発明の純度は少なくとも９５％であること
が見出された。
【００４１】アミノ酸分析のために、サンプルを、窒素
下で１１０℃で２４時間、６モル／ｌの塩酸及びメルカ
プト硫酸において平行加水分解した。加水分解物を、Ｂ
ｉｏｆｒｏｎｉｋ ＬＣ ５０００アミノ酸分析機で試
験した。通常のアミノ酸の他に、ＭｅＰｈｅ及びＬｅｕ
Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕプソイドジペプチドがまた、前
記加水分解物に検出された。
下で１１０℃で２４時間、６モル／ｌの塩酸及びメルカ
プト硫酸において平行加水分解した。加水分解物を、Ｂ
ｉｏｆｒｏｎｉｋ ＬＣ ５０００アミノ酸分析機で試
験した。通常のアミノ酸の他に、ＭｅＰｈｅ及びＬｅｕ
Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕプソイドジペプチドがまた、前
記加水分解物に検出された。
【００４２】新規化合物のＮＭＲスペクトルを、ジュウ
テリウム置換されたジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−
ｄ6 ）溶液において室温で、内部標準としてテトラメチ
ルシラン（ＴＭＳ）を用いることによって、Ｖａｒｉａ
ｎ ＶＸＲ−３００タイプのＮＭＲスペクトロメーター
上で取った。メチレンアミノ基のＣＨ2 成分のシグナル
は、２．４ppm に近いマルチプレットとして 1Ｈ−ＮＭ
Ｒスペクトルに出現し；そしてトリプレット多重性を示
すＣＨ2 成分のシグナルは、13Ｃ−ＮＭＲスペクトルに
おいて５２ppm に隣接して見出され、そして同様に、ペ
プチド結合のＣ＝０成分における炭素原子のシグナルは
不在であった。
テリウム置換されたジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−
ｄ6 ）溶液において室温で、内部標準としてテトラメチ
ルシラン（ＴＭＳ）を用いることによって、Ｖａｒｉａ
ｎ ＶＸＲ−３００タイプのＮＭＲスペクトロメーター
上で取った。メチレンアミノ基のＣＨ2 成分のシグナル
は、２．４ppm に近いマルチプレットとして 1Ｈ−ＮＭ
Ｒスペクトルに出現し；そしてトリプレット多重性を示
すＣＨ2 成分のシグナルは、13Ｃ−ＮＭＲスペクトルに
おいて５２ppm に隣接して見出され、そして同様に、ペ
プチド結合のＣ＝０成分における炭素原子のシグナルは
不在であった。
【００４３】
例１Ｚ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌ
ｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 の調製 （１）（ａ）Ｚ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ
2 ０℃に冷却されたテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）３０ml
に水素化リチウムアルミニウム３．６ｇ（１００ｍモ
ル）を懸濁した後、ｎ−ヘキサン５０ml中、ジエチルア
ミン１４．６ｇ（２００ｍモル）の溶液を０℃でそれに
滴下する。０℃で１０分間、前記懸濁液を撹拌した後、
ｎ−ヘキサン１２０mlに溶解された２１．３ｇ（７６ｍ
モル）のＺ−Ｌｅｕ−ＯＣＨ3 を一部づつ添加する。０
℃で９０分間、撹拌した後、反応混合物を酢酸エチル７
０mlにより希釈し、そして強い冷却下で、６モル／ｌの
塩酸溶液を添加することによってpH２に酸性化する。２
相の分離の後、水性層を酢酸エチルにより抽出し、次に
組合された有機相を冷水により洗浄する。その酢酸エチ
ル溶液を無水硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そして蒸
発する。
ｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 の調製 （１）（ａ）Ｚ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ
2 ０℃に冷却されたテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）３０ml
に水素化リチウムアルミニウム３．６ｇ（１００ｍモ
ル）を懸濁した後、ｎ−ヘキサン５０ml中、ジエチルア
ミン１４．６ｇ（２００ｍモル）の溶液を０℃でそれに
滴下する。０℃で１０分間、前記懸濁液を撹拌した後、
ｎ−ヘキサン１２０mlに溶解された２１．３ｇ（７６ｍ
モル）のＺ−Ｌｅｕ−ＯＣＨ3 を一部づつ添加する。０
℃で９０分間、撹拌した後、反応混合物を酢酸エチル７
０mlにより希釈し、そして強い冷却下で、６モル／ｌの
塩酸溶液を添加することによってpH２に酸性化する。２
相の分離の後、水性層を酢酸エチルにより抽出し、次に
組合された有機相を冷水により洗浄する。その酢酸エチ
ル溶液を無水硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そして蒸
発する。
【００４４】得られたＺ−Ｌｅｕ−Ｈアルギヒド（１８
ｇ，６９ｍモル）を、０℃に冷却されたメタノール／酢
酸の９９：１混合物３００mlに溶解し、そして８ｇ（５
０ｍモル）のＬｅｕ−ＮＨ2 ・ＨＣｌを添加する。その
得られた溶液に、無水テトラヒドロフラン１００mlに溶
解されたナトリウムシアノボーロ水素化物４．８ｇ（８
０ｍモル）を０℃で滴下する。その反応混合物を０℃で
３０分間、及び次に室温で２時間、撹拌する。
ｇ，６９ｍモル）を、０℃に冷却されたメタノール／酢
酸の９９：１混合物３００mlに溶解し、そして８ｇ（５
０ｍモル）のＬｅｕ−ＮＨ2 ・ＨＣｌを添加する。その
得られた溶液に、無水テトラヒドロフラン１００mlに溶
解されたナトリウムシアノボーロ水素化物４．８ｇ（８
０ｍモル）を０℃で滴下する。その反応混合物を０℃で
３０分間、及び次に室温で２時間、撹拌する。
【００４５】溶媒の蒸発の後、残渣を酢酸エチル３００
mlに溶解し、５％炭酸水素ナトリウム溶液１００mlによ
りそれぞれ２度及び水により２度洗浄する。乾燥の後、
その溶液を蒸発し、そして残渣を、５０mlのｎ−ヘキサ
ンの添加により固化する。その粗生成物を、酢酸エチル
２０mlから再結晶化し、７ｇ（Ｌｅｕ−ＮＨ2 ・ＨＣｌ
について計算されて３８％の収率）のＺ−ＬｅｕΨ（Ｃ
Ｈ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （ｍ．ｐ．：１０８〜１１０
℃）を得る。
mlに溶解し、５％炭酸水素ナトリウム溶液１００mlによ
りそれぞれ２度及び水により２度洗浄する。乾燥の後、
その溶液を蒸発し、そして残渣を、５０mlのｎ−ヘキサ
ンの添加により固化する。その粗生成物を、酢酸エチル
２０mlから再結晶化し、７ｇ（Ｌｅｕ−ＮＨ2 ・ＨＣｌ
について計算されて３８％の収率）のＺ−ＬｅｕΨ（Ｃ
Ｈ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （ｍ．ｐ．：１０８〜１１０
℃）を得る。
【００４６】（１）（ｂ）Ｈ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）
Ｌｅｕ−ＮＨ2 ・２ＨＣｌ メタノール１００mlに５．０ｇ（１３．７ｍモル）のＺ
−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を含む溶液
に、ジオキサン中、５．３モル／ｌの塩化水素溶液５ml
及び次に、炭素上１０％パラジウム溶媒０．５ｇを添加
し、次に水素をその懸濁液を通して吹込む。
Ｌｅｕ−ＮＨ2 ・２ＨＣｌ メタノール１００mlに５．０ｇ（１３．７ｍモル）のＺ
−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を含む溶液
に、ジオキサン中、５．３モル／ｌの塩化水素溶液５ml
及び次に、炭素上１０％パラジウム溶媒０．５ｇを添加
し、次に水素をその懸濁液を通して吹込む。
【００４７】反応は２時間以内で完結する。触媒を濾過
した後、濾液を減圧下で蒸発し、残渣をエーテル５０ml
の添加により固化し、そして得られた粗生成物を、エタ
ノール及びエーテルの１：５混合液から再結晶化し、目
的生成物３．４ｇ（８２％）を得る；〔α〕D ＝＋７．
３°（ｃ＝２，メタノール），ｍ．ｐ．：１１０℃（分
解）。
した後、濾液を減圧下で蒸発し、残渣をエーテル５０ml
の添加により固化し、そして得られた粗生成物を、エタ
ノール及びエーテルの１：５混合液から再結晶化し、目
的生成物３．４ｇ（８２％）を得る；〔α〕D ＝＋７．
３°（ｃ＝２，メタノール），ｍ．ｐ．：１１０℃（分
解）。
【００４８】（１）（ｃ）Ｚ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ
−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ
−ＮＨ2 トリエチルアミン１．１２ml（８ｍモル）及びＢｏｃ−
Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＰｆｐ（ＯＰｆｐはペンタフルオロフェ
ノキシ基で意味する）４．０ｇ（８．５ｍモル）を、ジ
メチルホルムアミド３０ml中、ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）
Ｌｅｕ−ＮＨ2・２ＨＣｌ２．４ｇ（８ｍモル）の溶液
に０℃で添加する。その反応混合物を室温で９０分間撹
拌した後（その間に、トリエチルアミン１．５mlを添加
する）、その反応混合物を蒸発し、そして残渣を酢酸エ
チル１００mlに溶解する。その溶液を、１モル／ｌの塩
酸３０ml及び次に水３０mlによりそれぞれ２度抽出す
る。組合された水性相を、炭酸ナトリウムの添加により
半和し、そして酢酸エチル３０mlにより２度抽出する。
無水硫酸ナトリウム上での乾燥の後、酢酸エチル溶液を
蒸発する。保護されたトリペプチドを、エーテルの添加
により固化し、３．２ｇ（７７％）の生成物を得る；
ｍ．ｐ．：１８０〜１８２℃。Ｒｆ1 ＝０．３（１は、
溶媒システム１を意味し、２は、溶媒システム２を意味
する）。
−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ
−ＮＨ2 トリエチルアミン１．１２ml（８ｍモル）及びＢｏｃ−
Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＰｆｐ（ＯＰｆｐはペンタフルオロフェ
ノキシ基で意味する）４．０ｇ（８．５ｍモル）を、ジ
メチルホルムアミド３０ml中、ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）
Ｌｅｕ−ＮＨ2・２ＨＣｌ２．４ｇ（８ｍモル）の溶液
に０℃で添加する。その反応混合物を室温で９０分間撹
拌した後（その間に、トリエチルアミン１．５mlを添加
する）、その反応混合物を蒸発し、そして残渣を酢酸エ
チル１００mlに溶解する。その溶液を、１モル／ｌの塩
酸３０ml及び次に水３０mlによりそれぞれ２度抽出す
る。組合された水性相を、炭酸ナトリウムの添加により
半和し、そして酢酸エチル３０mlにより２度抽出する。
無水硫酸ナトリウム上での乾燥の後、酢酸エチル溶液を
蒸発する。保護されたトリペプチドを、エーテルの添加
により固化し、３．２ｇ（７７％）の生成物を得る；
ｍ．ｐ．：１８０〜１８２℃。Ｒｆ1 ＝０．３（１は、
溶媒システム１を意味し、２は、溶媒システム２を意味
する）。
【００４９】ジオキサン中、５．３モル／ｌの塩化水素
溶液１５mlに３．０ｇ（５．８ｍモル）のＢｏｃ−Ｄ−
Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を溶解
した後、その溶液を、２０分後、エーテル１００mlによ
り希釈する。沈殿物を濾過し、そしてエーテルにより洗
浄し、生成物（ｍ．ｐ．：１７０℃；分解）２．８ｇ
（９８％）を得る；Ｒｆ2 ＝０．１。
溶液１５mlに３．０ｇ（５．８ｍモル）のＢｏｃ−Ｄ−
Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を溶解
した後、その溶液を、２０分後、エーテル１００mlによ
り希釈する。沈殿物を濾過し、そしてエーテルにより洗
浄し、生成物（ｍ．ｐ．：１７０℃；分解）２．８ｇ
（９８％）を得る；Ｒｆ2 ＝０．１。
【００５０】ジメチルホルムアミド３０ml中、２．４５
ｇ（５ｍモル）のＨ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 Ｎ
Ｈ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 ・２ＨＣｌの溶液に、トリエチルア
ミン１．４ml（１０ｍモル）及びＢｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＰ
ｆｐ２．３ｇ（５．３ｍモル）を添加した後、その反応
混合物を室温で１時間撹拌し、次にジメチルホルムアミ
ドを蒸留し、そして残渣を、水５０mlの添加により固化
する。得られた沈殿物を濾過し、水５０ml及びエタノー
ル３０mlにより洗浄し、２．７３ｇ（８２％）の収量で
プソイドテトラペプチドＢｏｃ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−
ＬｅｕΨ（ＣＨ 2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を得る；ｍ．
ｐ．：２１２〜２１４℃（分解）；Ｒｆ2＝０．７。
ｇ（５ｍモル）のＨ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 Ｎ
Ｈ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 ・２ＨＣｌの溶液に、トリエチルア
ミン１．４ml（１０ｍモル）及びＢｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＰ
ｆｐ２．３ｇ（５．３ｍモル）を添加した後、その反応
混合物を室温で１時間撹拌し、次にジメチルホルムアミ
ドを蒸留し、そして残渣を、水５０mlの添加により固化
する。得られた沈殿物を濾過し、水５０ml及びエタノー
ル３０mlにより洗浄し、２．７３ｇ（８２％）の収量で
プソイドテトラペプチドＢｏｃ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−
ＬｅｕΨ（ＣＨ 2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を得る；ｍ．
ｐ．：２１２〜２１４℃（分解）；Ｒｆ2＝０．７。
【００５１】２．５ｇ（３．７ｍモル）のプソイドテト
ラペプチドＢｏｃ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（Ｃ
Ｈ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を、シオキサン中、５．３モ
ル／ｌの塩化水素溶液３０mlに溶解し、そして３０分
後、その混合物を、エーテル１００mlにより希釈する。
濾過し、そしてエーテル２５mlにより洗浄した後、沈殿
物をジメチルホルムアミド２５mlに溶解する。この溶液
に、トリエチルアミン１．３ml及びＢｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ
−ＯＰｆｐ１．９ｇ（４ｍモル）を添加し、その反応混
合物を室温で一晩撹拌し、次にジメチルホルムアミドを
蒸留する。残渣を酢酸エチル５０mlに溶解し、そしてそ
の溶液を１モル／ｌの塩酸溶液２０ml及び水２０mlと共
に２度振盪する。水性相を、酢酸エチル２０mlにより抽
出する。組合された有機溶液を無水硫酸ナトリウム上で
乾燥せしめ、そして蒸発する。残渣を、エーテルの添加
により固化し、プソイドペンタペプチド（ｍ．ｐ．：１
３３℃；分解）を２．８３ｇ（９０％）の収量で得る；
Ｒｆ2 ＝０．７。
ラペプチドＢｏｃ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（Ｃ
Ｈ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を、シオキサン中、５．３モ
ル／ｌの塩化水素溶液３０mlに溶解し、そして３０分
後、その混合物を、エーテル１００mlにより希釈する。
濾過し、そしてエーテル２５mlにより洗浄した後、沈殿
物をジメチルホルムアミド２５mlに溶解する。この溶液
に、トリエチルアミン１．３ml及びＢｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ
−ＯＰｆｐ１．９ｇ（４ｍモル）を添加し、その反応混
合物を室温で一晩撹拌し、次にジメチルホルムアミドを
蒸留する。残渣を酢酸エチル５０mlに溶解し、そしてそ
の溶液を１モル／ｌの塩酸溶液２０ml及び水２０mlと共
に２度振盪する。水性相を、酢酸エチル２０mlにより抽
出する。組合された有機溶液を無水硫酸ナトリウム上で
乾燥せしめ、そして蒸発する。残渣を、エーテルの添加
により固化し、プソイドペンタペプチド（ｍ．ｐ．：１
３３℃；分解）を２．８３ｇ（９０％）の収量で得る；
Ｒｆ2 ＝０．７。
【００５２】２．６ｇ（３ｍモル）のＢｏｃ−Ｄ−Ｔｒ
ｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅ
ｕ−ＮＨ2 を、シオキサン中、５．３モル／ｌの塩酸溶
液２０mlにより処理し、そして３０分後、その溶液を、
エーテル１００mlにより希釈する。沈殿物を濾過し、そ
してエーテルにより洗浄した後、遊離プソイドペンタペ
プチドジヒドロクロリド（ｍ．ｐ．：１６７℃；分解）
を２．４ｇ（９２％）の収量で得る；Ｒｆ2 ＝０．１
５。
ｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅ
ｕ−ＮＨ2 を、シオキサン中、５．３モル／ｌの塩酸溶
液２０mlにより処理し、そして３０分後、その溶液を、
エーテル１００mlにより希釈する。沈殿物を濾過し、そ
してエーテルにより洗浄した後、遊離プソイドペンタペ
プチドジヒドロクロリド（ｍ．ｐ．：１６７℃；分解）
を２．４ｇ（９２％）の収量で得る；Ｒｆ2 ＝０．１
５。
【００５３】ジメチルホルムアミド２０mlにＨ−Ｄ−Ｔ
ｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌ
ｅｕ−ＮＨ2 ・２ＨＣｌ１．２３ｇ（１．４８ｍモル）
を溶解した後、Ｚ−Ｄ−ＭｅＰｈｅ−ＯＰｆｐ０．９６
ｇ（２ｍモル）及びトリエチルアミン０．７ml（５ｍモ
ル）を上記溶液に添加する。室温で１時間、前記混合物
を撹拌し、そして蒸発した後、残渣をクロロホルム３０
mlに溶解する。そのクロロホルム溶液を水１０mlにより
それぞれ２度洗浄する。有機溶液を無水硫酸ナトリウム
上で乾燥せしめ、そして次に蒸発せしめる。最終生成物
を、エーテル５０mlの添加により固化し、Ｚ−ＭｅＰｈ
ｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ
2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （ｍ．ｐ．：８８℃；分解）を
１．３２ｇ（８５％）の収量で得る；〔α〕D 20＝＋
５．７°（ｃ＝１，メタノール）。
ｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌ
ｅｕ−ＮＨ2 ・２ＨＣｌ１．２３ｇ（１．４８ｍモル）
を溶解した後、Ｚ−Ｄ−ＭｅＰｈｅ−ＯＰｆｐ０．９６
ｇ（２ｍモル）及びトリエチルアミン０．７ml（５ｍモ
ル）を上記溶液に添加する。室温で１時間、前記混合物
を撹拌し、そして蒸発した後、残渣をクロロホルム３０
mlに溶解する。そのクロロホルム溶液を水１０mlにより
それぞれ２度洗浄する。有機溶液を無水硫酸ナトリウム
上で乾燥せしめ、そして次に蒸発せしめる。最終生成物
を、エーテル５０mlの添加により固化し、Ｚ−ＭｅＰｈ
ｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＬｅｕΨ（ＣＨ
2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （ｍ．ｐ．：８８℃；分解）を
１．３２ｇ（８５％）の収量で得る；〔α〕D 20＝＋
５．７°（ｃ＝１，メタノール）。
【００５４】例２Ｈ−Ｌｅｕ−ＭＰＡの調製 酢酸エチル３００mlにＺ−Ｌｅｕ−ＯＨジシクロヘキシ
ルアミン塩２６．７ｇ（６０ｍモル）を懸濁した後、そ
の塩を１モル／ｌの硫酸溶液１５０mlにより分解する。
その酢酸エチル溶液を無水硫酸ナトリウム上で乾燥せし
め、そして蒸発する。得られたＺ−Ｌｅｕ−ＯＨの残渣
を、無水テトラヒドロフラン１６０mlに溶解する。その
溶液を−１０℃に冷却した後、トリエチルアミン９．４
ml（６７ｍモル）を添加し、そして次に、塩化ピバロイ
ル９．０ml（７３ｍモル）を、温度を−１０℃で維持し
ながら、滴下する。その反応混合物を−１０℃で１５分
間、撹拌した後、テトラヒドロフラン２０mlに２−アミ
ノ−３−メチルペンタン６．７ｇ（７４ｍモル）を含む
溶液を一部づつ添加する。その反応混合物を０℃で３０
分間、及び室温で３時間撹拌し、そして蒸発する。残渣
を酢酸エチル３００mlに溶解し、そしてその溶液を、１
モル／ｌの塩酸溶液１２０mlにより２度、５％炭酸水素
ナトリウム溶液により２度及び最後に、水１２０mlによ
り１度、連続的に洗浄する。乾燥及び蒸発の後、Ｚ−Ｌ
ｅｕ−メチルペンチルアミドを、２０．５ｇ（９８％）
の収量で油状物として得る；Ｒｆ3 ＝０．３。
ルアミン塩２６．７ｇ（６０ｍモル）を懸濁した後、そ
の塩を１モル／ｌの硫酸溶液１５０mlにより分解する。
その酢酸エチル溶液を無水硫酸ナトリウム上で乾燥せし
め、そして蒸発する。得られたＺ−Ｌｅｕ−ＯＨの残渣
を、無水テトラヒドロフラン１６０mlに溶解する。その
溶液を−１０℃に冷却した後、トリエチルアミン９．４
ml（６７ｍモル）を添加し、そして次に、塩化ピバロイ
ル９．０ml（７３ｍモル）を、温度を−１０℃で維持し
ながら、滴下する。その反応混合物を−１０℃で１５分
間、撹拌した後、テトラヒドロフラン２０mlに２−アミ
ノ−３−メチルペンタン６．７ｇ（７４ｍモル）を含む
溶液を一部づつ添加する。その反応混合物を０℃で３０
分間、及び室温で３時間撹拌し、そして蒸発する。残渣
を酢酸エチル３００mlに溶解し、そしてその溶液を、１
モル／ｌの塩酸溶液１２０mlにより２度、５％炭酸水素
ナトリウム溶液により２度及び最後に、水１２０mlによ
り１度、連続的に洗浄する。乾燥及び蒸発の後、Ｚ−Ｌ
ｅｕ−メチルペンチルアミドを、２０．５ｇ（９８％）
の収量で油状物として得る；Ｒｆ3 ＝０．３。
【００５５】得られた油状生成物を、メタノール２００
mlに溶解し、そして炭素上１０％パラジウム触媒２．５
ｇの存在下で水素化する。その反応は９０分以内で完結
する。続いて、触媒を濾過し、そしてメタノールを蒸発
した後、油状残渣をシリカゲルカラム（８０×２．５cm
の大きさ；シリカゲル２５０ｇ；溶離剤：酢酸エチル／
メタノール／ｎ−ヘキサンの６：１：３混合液；流速：
４０ml／時）上で２つの成分に分離し、そして集められ
た画分を蒸発する。このようにして得られたＨ−Ｌｅｕ
−ＭＰＡの収量は４．２ｇ（１９．５ｍモル）がある；
Ｒｆ4 ＝０．３，〔α〕D 24＝＋１１．６°（ｃ＝１，
メタノール）；〔α〕D 24＝−２０．４°（ｃ＝１，酢
酸エチル）。
mlに溶解し、そして炭素上１０％パラジウム触媒２．５
ｇの存在下で水素化する。その反応は９０分以内で完結
する。続いて、触媒を濾過し、そしてメタノールを蒸発
した後、油状残渣をシリカゲルカラム（８０×２．５cm
の大きさ；シリカゲル２５０ｇ；溶離剤：酢酸エチル／
メタノール／ｎ−ヘキサンの６：１：３混合液；流速：
４０ml／時）上で２つの成分に分離し、そして集められ
た画分を蒸発する。このようにして得られたＨ−Ｌｅｕ
−ＭＰＡの収量は４．２ｇ（１９．５ｍモル）がある；
Ｒｆ4 ＝０．３，〔α〕D 24＝＋１１．６°（ｃ＝１，
メタノール）；〔α〕D 24＝−２０．４°（ｃ＝１，酢
酸エチル）。
【００５６】次に、この異性体を、例１に記載されるよ
うにして使用する。この合成において得られた、保護さ
れたペプチドアミド及びプソイドペプチドアミドの特徴
は、表５に示される。
うにして使用する。この合成において得られた、保護さ
れたペプチドアミド及びプソイドペプチドアミドの特徴
は、表５に示される。
【００５７】例３Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌ
ｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 の調製 メタノール２５mlに１．０ｇ（０．９６ｍモル）のＺ−
Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌ
ｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を含む溶液を、炭
素上パラジウム触媒０．３ｇの存在下で３．５時間、水
素化する。触媒の濾過及び溶液の蒸発の後、残渣を、エ
ーテルの添加により固化し、標記の粗生成物を０．７３
ｇの収量で得る。
ｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 の調製 メタノール２５mlに１．０ｇ（０．９６ｍモル）のＺ−
Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌ
ｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 を含む溶液を、炭
素上パラジウム触媒０．３ｇの存在下で３．５時間、水
素化する。触媒の濾過及び溶液の蒸発の後、残渣を、エ
ーテルの添加により固化し、標記の粗生成物を０．７３
ｇの収量で得る。
【００５８】最終の粗生成物を、溶離剤として、ピリジ
ン／酢酸／水の２０：６：１１混合液と酢酸エチルとの
４：１混合液を用いることによって２０ml／時の流速で
シリカゲルカラム上で精製する。それぞれ１０mlの画分
を集め；画分の純度を薄層クロマトグラフィーにより観
察する。純粋な最終生成物を含む画分を蒸発した後、水
１０ml及びエタノール１０mlを前記蒸発残渣に添加し、
追加量の液体の添加の前、前もって添加された液体の量
を蒸留する。最終蒸発残渣を、エーテルの添加により固
化し、そして濾過の後、沈殿物をエーテルにより洗浄
し、標記の無水生成物を０．３２ｇの収量で得る；
〔α〕D 20＝−２２．８°（ｃ＝０．５，１０％酢
酸）。 アミノ酸分析：Ｐｈｅ１．０（１），Ｔｒｐ１．７
（２），ＭｅＰｈｅ，ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ。 新規化合物の特徴は下記表６に要約される。
ン／酢酸／水の２０：６：１１混合液と酢酸エチルとの
４：１混合液を用いることによって２０ml／時の流速で
シリカゲルカラム上で精製する。それぞれ１０mlの画分
を集め；画分の純度を薄層クロマトグラフィーにより観
察する。純粋な最終生成物を含む画分を蒸発した後、水
１０ml及びエタノール１０mlを前記蒸発残渣に添加し、
追加量の液体の添加の前、前もって添加された液体の量
を蒸留する。最終蒸発残渣を、エーテルの添加により固
化し、そして濾過の後、沈殿物をエーテルにより洗浄
し、標記の無水生成物を０．３２ｇの収量で得る；
〔α〕D 20＝−２２．８°（ｃ＝０．５，１０％酢
酸）。 アミノ酸分析：Ｐｈｅ１．０（１），Ｔｒｐ１．７
（２），ＭｅＰｈｅ，ＬｅｕΨ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ。 新規化合物の特徴は下記表６に要約される。
【００５９】
【表５】
【００６０】
【表６】
【００６１】例４注射目的のための粉末アンプル 活性成分５００mg及びラクトース９．５ｇを、注射目的
のために適切な蒸留水８０mlに溶解する。０．１ｇのメ
チルｐ−ヒドロキシベンゾエートを前記溶液に添加し、
次にこの溶液の体積を、注射用蒸留水を用いることによ
って１００mlに調整する。その均質溶液を濾過し、滅菌
し、ガムキャップにより固定されたバイアル中にそれぞ
れ１mlの体積を充填し、凍結乾燥にゆだね、そして最後
に、バイアルをガム栓を付与する。活性成分５mgをそれ
ぞれ含む粉末アンプルを得る。
のために適切な蒸留水８０mlに溶解する。０．１ｇのメ
チルｐ−ヒドロキシベンゾエートを前記溶液に添加し、
次にこの溶液の体積を、注射用蒸留水を用いることによ
って１００mlに調整する。その均質溶液を濾過し、滅菌
し、ガムキャップにより固定されたバイアル中にそれぞ
れ１mlの体積を充填し、凍結乾燥にゆだね、そして最後
に、バイアルをガム栓を付与する。活性成分５mgをそれ
ぞれ含む粉末アンプルを得る。
【００６２】異なった活性成分含有量を有するアンプル
を得る場合、ラクトースの量が選択され、そのような場
合、１００mlの溶液に基づいて、活性成分の通常の重量
及びラクトースは約１０ｇである。ラクトースの代わり
に同じ量のマンニトールを使用することができる。注射
液を投与する場合、それらのアンプルの粉末は、等張溶
液の獲得を可能にするような濃度の塩化ナトリウム水溶
液に溶解される。
を得る場合、ラクトースの量が選択され、そのような場
合、１００mlの溶液に基づいて、活性成分の通常の重量
及びラクトースは約１０ｇである。ラクトースの代わり
に同じ量のマンニトールを使用することができる。注射
液を投与する場合、それらのアンプルの粉末は、等張溶
液の獲得を可能にするような濃度の塩化ナトリウム水溶
液に溶解される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ０７Ｋ 99:00 (72)発明者 イストバーン シォーン ハンガリー国，1142 ブダペスト，ラース カイ レア ウッツァ 86 (72)発明者 ラヨス キスファルディ ハンガリー国，1026 ブダペスト，リアド ー ウッツァ ６／エ (72)発明者 ヤノス シュレット ハンガリー国，1028 ブダペスト，ハルマ トチェップ ウッツァ 41 (72)発明者 ラースロー バルツァ ハンガリー国，1134 ブダペスト，チャー ンゴー ウッツァ 22／ア (72)発明者 ヨージェフ ナギ ハンガリー国，1181 ブダペスト，バロッ ス ウッツァ 54 (72)発明者 アッティラ リル ハンガリー国，1122 ブダペスト，バーロ シュ マヨル ウッツァ 31／ベー (72)発明者 ガーボル バロジュ ハンガリー国，1181 ブダペスト，チョン トバーリ カー．テー．ウッツァ 18
Claims (10)
- 【請求項１】 下記式（１）〜（６）： ｐ−ＨＯＰＡ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （１） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （２） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＭＰＡ （３） Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （４） Ｄ−Ｔｙｒ（Ｅｔ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （５） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （６） 〔式中、ｐ−ＨＯＰＡはｐ−ヒドロキシフェニル酢酸で
あり、Ｄ−ＭｅＰｈｅはＤ−Ｎ−メチルフェニルアラニ
ンを表わし、ＭＰＡは２−アミノ−３−メチルペンタン
を表わし、そしてΨ（ＣＨ2 ＮＨ）はペプチド結合の代
わりに存在するメチレンアミノ基である〕で表わされる
新規ペプチドアミド及びプソイドペプチドアミド並びに
それらの医薬的に許容できる酸付加塩。 - 【請求項２】 一般式（１）〜（６）〔式中、ｐ−ＨＯ
ＰＡ，Ｄ−ＭｅＰｈｅ，ＭＰＡ及びΨ（ＣＨ2 ＮＨ）は
請求項１に記載される通りである〕のいづれかで表わさ
れるペプチドアミド又はプソイドペプチドアミド又は医
薬的に許容できるその酸付加塩の治療的有効量を活性成
分として含んで成る医薬組成物。 - 【請求項３】 下記式（１）〜（６）： ｐ−ＨＯＰＡ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （１） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （２） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−ＭＰＡ （３） Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （４） Ｄ−Ｔｙｒ（Ｅｔ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （５） Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ Ψ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ2 （６） 〔式中、ｐ−ＨＯＰＡはｐ−ヒドロキシフェニル酢酸で
あり、Ｄ−ＭｅＰｈｅはＤ−Ｎ−メチルフェニルアラニ
ンを表わし、ＭＰＡは２−アミノ−３−メチルペンタン
を表わし、そしてΨ（ＣＨ2 ＮＨ）はペプチド結合の代
わりに存在するメチレンアミノ基である〕で表わされる
新規ペプチドアミド及びプソイドペプチドアミド並びに
それらの医薬的に許容できる酸付加塩の調製方法であっ
て、出発物質としてＬｅｕ（ＣＨ2 ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ
2 又はＬｅｕ−ＭＰＡを用いることによって、式（１）
のペプチド、又はＮ−末端ベンジルオキシカルボニル又
はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を含む式（２）
〜（６）のペプチドの誘導体が、好ましくはα−ＮＨ2
基の反応性エステルカップリング及び保護解除の段階の
連続的使用により構築され、次に、保護基が触媒的水素
化又はアシドリシスにより除去され、そして所望によ
り、得られた生成物が医薬的に許容できる酸付加塩に転
換され、又は遊離塩基がそのような塩から遊離されるこ
とを含んで成る方法。 - 【請求項４】 組込まれるべき保護アミノ酸のペンタフ
ルオロフェニルエステルを用いることによって、反応性
エステルカップリングの段階を実施することを含んで成
る請求項３記載の方法。 - 【請求項５】 ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基に
より保護されたアミノ酸の反応性エステル誘導体を用い
ることによって、反応性エステルカップリングの段階を
実施することを含んで成る請求項３又は４記載の方法。 - 【請求項６】 ベンジルオキシカルボニル保護基により
保護されたアミノ酸の反応性エステル誘導体を用いるこ
とによって、反応性エステルカップリングの段階を実施
することを含んで成る請求項３又は４記載の方法。 - 【請求項７】 アシドリシスにより保護基を除去するこ
とを含んで成る請求項３〜５のいづれか１項記載の方
法。 - 【請求項８】 触媒的水素化により保護基を除去するこ
とを含んで成る請求項３，４又は６のいづれか１項記載
の方法。 - 【請求項９】 医薬組成物の調製方法であって、活性成
分として、一般式（１）〜（６）〔式中、ｐ−ＨＯＰ
Ａ，Ｄ−ＭｅＰｈｅ，ＭＰＡ及びΨ（ＣＨ2 ＮＨ）は請
求項１に記載される通りである〕のいづれかで表わされ
るペプチドアミド又はプソイドペプチドアミド又は医薬
的に許容できるその酸付加塩の治療的有効量と医薬産業
において通常使用される１又は複数の助剤とを混合し、
そしてその混合物を医薬組成物に転換することを含んで
成る方法。 - 【請求項１０】 ヒトを含む哺乳類の小細胞及び上皮細
胞肺癌の細胞の増殖を阻害するための方法であって、一
般式（１）〜（６）〔式中、ｐ−ＨＯＰＡ，Ｄ−ＭｅＰ
ｈｅ，ＭＰＡ及びΨ（ＣＨ2 ＮＨ）は請求項１に記載さ
れる通りである〕のいづれかで表わされるペプチドアミ
ド又はプソイドペプチドアミド又は医薬的に許容できる
その酸付加塩の治療的有効量を処理されるべき哺乳類に
単独で又は医薬組成物の形で投与することを特徴とする
方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU9200406A HU209312B (en) | 1992-02-11 | 1992-02-11 | Process for producing short peptide and pseudopeptide amides inhibiting the proliferation of the cells of small cellular and epithelial lung cancer, as well as pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient |
| HU9200406 | 1992-02-11 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05286995A true JPH05286995A (ja) | 1993-11-02 |
Family
ID=10981320
Family Applications (1)
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| JP5022595A Pending JPH05286995A (ja) | 1992-02-11 | 1993-02-10 | 小細胞及び上皮細胞肺癌細胞の増殖を阻害する小ペプチド及びプソイドペプチドアミド |
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| Country | Link |
|---|---|
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| JP (1) | JPH05286995A (ja) |
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| IL (1) | IL104676A0 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09123504A (ja) * | 1995-08-30 | 1997-05-13 | Alps Electric Co Ltd | サーマルヘッドおよびサーマルヘッドの製造方法 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU765809B2 (en) * | 1998-02-12 | 2003-10-02 | Emory University | Sphingolipid derivatives and their methods of use |
| HUP0500270A2 (en) * | 2005-03-03 | 2006-11-28 | Antal Dr Orosz | Pharmacologically active peptide derivatives, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing the same |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09123504A (ja) * | 1995-08-30 | 1997-05-13 | Alps Electric Co Ltd | サーマルヘッドおよびサーマルヘッドの製造方法 |
Also Published As
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| HU9200406D0 (en) | 1992-04-28 |
| CA2089247A1 (en) | 1993-08-12 |
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| IL104676A0 (en) | 1993-06-10 |
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