JPH05211894A - 血清コリンエステラーゼ活性についてのアッセイ方法及び分析要素 - Google Patents
血清コリンエステラーゼ活性についてのアッセイ方法及び分析要素Info
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- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 希釈されていない水性液体中の血清コリンエ
ステラーゼ（ＣＨＥ）活性を測定するための乾式分析要
素を提供する。 【構成】 血清コリンエステラーゼ（ＣＨＥ）活性を測
定するための乾式分析要素が開示される。上記要素は、
希釈されていない体液を分析し、ＣＨＥの基質としてブ
チリルチオコリンを使用する。ブチリルチオコリンは血
清コリンエステラーゼにより加水分解され、そして酪酸
及びチオコリンを遊離する。次いで遊離したチオコリン
は、フェリシアニドを還元してフェロシアニドを生成
し、そして反射濃度測定法により変化速度が測定され
る。
ステラーゼ（ＣＨＥ）活性を測定するための乾式分析要
素を提供する。 【構成】 血清コリンエステラーゼ（ＣＨＥ）活性を測
定するための乾式分析要素が開示される。上記要素は、
希釈されていない体液を分析し、ＣＨＥの基質としてブ
チリルチオコリンを使用する。ブチリルチオコリンは血
清コリンエステラーゼにより加水分解され、そして酪酸
及びチオコリンを遊離する。次いで遊離したチオコリン
は、フェリシアニドを還元してフェロシアニドを生成
し、そして反射濃度測定法により変化速度が測定され
る。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、一般的には血清コリン
エステラーゼの活性を測定するための診断試験に関す
る。より詳細には、本発明は、希釈されていない水性液
体中の血清コリンエステラーゼ活性を測定するための乾
式要素及び測定方法に関する。
エステラーゼの活性を測定するための診断試験に関す
る。より詳細には、本発明は、希釈されていない水性液
体中の血清コリンエステラーゼ活性を測定するための乾
式要素及び測定方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】血清コリンエステラーゼ（ＣＨＥ）の活
性の測定は、例えば、変性肝障害類及び毒剤類（例え
ば、カルバメート類もしくは有機リン酸エステル類を含
有する殺虫剤類及び除草剤類）により引き起こされる中
毒を初めとする各種の疾病状態の早期診断において重要
である。これらの化合物はＣＨＥを阻害し、従って患者
の血清中におけるＣＨＥ活性のレベルの低減は、化学性
中毒の特殊症状であるといってもよい。カルバメート系
の農薬の場合には、例えば、患者の血清が希釈され、そ
して被検体中の毒剤の濃度が低減される場合、これらの
毒剤の阻害的効果は逆になり、コリンエステラーゼ活性
が回復するかもしれない。このような場合には、希釈さ
れた試料中におけるＣＨＥ活性の試験管内測度は、生体
内状態の過酷さを正しく反映しないかもしれない。
性の測定は、例えば、変性肝障害類及び毒剤類（例え
ば、カルバメート類もしくは有機リン酸エステル類を含
有する殺虫剤類及び除草剤類）により引き起こされる中
毒を初めとする各種の疾病状態の早期診断において重要
である。これらの化合物はＣＨＥを阻害し、従って患者
の血清中におけるＣＨＥ活性のレベルの低減は、化学性
中毒の特殊症状であるといってもよい。カルバメート系
の農薬の場合には、例えば、患者の血清が希釈され、そ
して被検体中の毒剤の濃度が低減される場合、これらの
毒剤の阻害的効果は逆になり、コリンエステラーゼ活性
が回復するかもしれない。このような場合には、希釈さ
れた試料中におけるＣＨＥ活性の試験管内測度は、生体
内状態の過酷さを正しく反映しないかもしれない。
【０００３】通常ヒト血清中に存在するＣＨＥ活性のレ
ベルは非常に高いので、血清中におけるＣＨＥの活性を
測定する際に、試験血清試料をあらかじめ希釈すること
が通例である。このような希釈が毒剤類によるＣＨＥ阻
害を消去できるので、あらかじめ試験試料を希釈するこ
となくＣＨＥ活性の範囲を測定できる方法を使用するこ
とが好ましいであろう。このような方法の１つが、Thom
sen, Kewitz 及び Pleul, J. Clin. Chem. Clin. Bioch
em, vol.26／No.7, 469 〜475 ページ(1988)に公表され
ている。しかしながら、この方法は、湿式溶液で試薬を
使用するので、従って自動化方法もしくは乾式分析要素
を用いる方法ほど便利であるわけでもなく又は再現性が
あるわけではない手動法を使用する。更に、これらの試
薬は放射性標識アセチルコリンを含み、それによって若
干の既知危険が存在する。
ベルは非常に高いので、血清中におけるＣＨＥの活性を
測定する際に、試験血清試料をあらかじめ希釈すること
が通例である。このような希釈が毒剤類によるＣＨＥ阻
害を消去できるので、あらかじめ試験試料を希釈するこ
となくＣＨＥ活性の範囲を測定できる方法を使用するこ
とが好ましいであろう。このような方法の１つが、Thom
sen, Kewitz 及び Pleul, J. Clin. Chem. Clin. Bioch
em, vol.26／No.7, 469 〜475 ページ(1988)に公表され
ている。しかしながら、この方法は、湿式溶液で試薬を
使用するので、従って自動化方法もしくは乾式分析要素
を用いる方法ほど便利であるわけでもなく又は再現性が
あるわけではない手動法を使用する。更に、これらの試
薬は放射性標識アセチルコリンを含み、それによって若
干の既知危険が存在する。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】希釈されていない水性
液体（例えば、生物学的流体）中の血清コリンエステラ
ーゼ活性を測定するための乾式分析要素を提供すること
は、望ましいであろう。
液体（例えば、生物学的流体）中の血清コリンエステラ
ーゼ活性を測定するための乾式分析要素を提供すること
は、望ましいであろう。
【０００５】
【課題を解決するための手段】従って、本発明の目的
は、希釈された及び希釈されていない水性液体（例え
ば、体液）のＣＨＥアッセイ用乾式分析要素を提供する
ことである。簡単に要約すれば、本発明の一観点に従っ
て、下記工程を含んで成る水性液体中の血清コリンエス
テラーゼ活性のアッセイ方法を提供する。 Ａ）水性液体の試料を、表面上に少なくとも１つの層を
担持する支持体を含んで成る血清コリンエステラーゼ活
性をアッセイするための分析要素と接触させる工程であ
って、また、上記要素が、 ａ）ブチリルチオコリン、 ｂ）フェリシアニド 付着量０．０２〜２．０ｇ／m2、 ｃ）バインダー材料 付着量３〜１２ｇ／m2、及び ｄ）緩衝剤 pＨを７．０〜８．５の範囲内に確立、 を含んで成ることを特徴とする工程、並びに Ｂ）反射濃度における変化速度をモニターして試料中の
血清コリンエステラーゼの活性をアッセイする工程。
は、希釈された及び希釈されていない水性液体（例え
ば、体液）のＣＨＥアッセイ用乾式分析要素を提供する
ことである。簡単に要約すれば、本発明の一観点に従っ
て、下記工程を含んで成る水性液体中の血清コリンエス
テラーゼ活性のアッセイ方法を提供する。 Ａ）水性液体の試料を、表面上に少なくとも１つの層を
担持する支持体を含んで成る血清コリンエステラーゼ活
性をアッセイするための分析要素と接触させる工程であ
って、また、上記要素が、 ａ）ブチリルチオコリン、 ｂ）フェリシアニド 付着量０．０２〜２．０ｇ／m2、 ｃ）バインダー材料 付着量３〜１２ｇ／m2、及び ｄ）緩衝剤 pＨを７．０〜８．５の範囲内に確立、 を含んで成ることを特徴とする工程、並びに Ｂ）反射濃度における変化速度をモニターして試料中の
血清コリンエステラーゼの活性をアッセイする工程。
【０００６】本発明の別の観点では、上記血清コリンエ
ステラーゼ活性のアッセイ方法に記載される分析要素を
提供する。
ステラーゼ活性のアッセイ方法に記載される分析要素を
提供する。
【０００７】本発明の優れた特徴は、試験が希釈されて
いない血清を用いて実施でき、それによって希釈による
酵素活性の回復を避けることである。
いない血清を用いて実施でき、それによって希釈による
酵素活性の回復を避けることである。
【０００８】別の優れた特徴は、本発明の要素が自動化
分析器に有用であり、それによって誤差もしくは矛盾の
危険性を最小限にすることである。
分析器に有用であり、それによって誤差もしくは矛盾の
危険性を最小限にすることである。
【０００９】本発明の更に別の利点は、化学性が「乾
式」であり、そして「湿式」方法よりも多大な取扱い及
び貯蔵の便宜を提供することである。
式」であり、そして「湿式」方法よりも多大な取扱い及
び貯蔵の便宜を提供することである。
【００１０】本発明により提供されるアッセイは、非酵
素的であり、従って、比較可能な酵素的試験よりも良好
な試薬安定性及び都合の良い経費を提供する。「非酵素
的」とは試料中にＣＨＥが存在すべきであるとはいえ、
本発明に従う要素中に酵素が存在しないことを意味す
る。
素的であり、従って、比較可能な酵素的試験よりも良好
な試薬安定性及び都合の良い経費を提供する。「非酵素
的」とは試料中にＣＨＥが存在すべきであるとはいえ、
本発明に従う要素中に酵素が存在しないことを意味す
る。
【００１１】希釈されていない水性液体中のＣＨＥをア
ッセイするための乾式分析要素を提供するために、幾つ
かの問題を解決せねばならなかった。非常に広範なＣＨ
Ｅが希釈されていないヒト血清中に見い出されるため、
本発明の乾式要素中に組み入れられるフェリシアニドの
量を規定することが、特に困難であった。多量のフェリ
シアニドがウェブ(web) 中に存在する場合、初濃度が高
くなりすぎて、判読不可能になるため、フェリシアニド
の量は臨界的である。存在するフェリシアニドがあまり
にも少量である場合には、反応の終点に達する前にフェ
リシアニドが消耗されて、また正確な判読が不可能とな
るであろう。従来技術の方法は、試料を非常に高いＣＨ
Ｅレベルのものを用いて希釈することにより、この問題
を解決しているが、上述のような希釈に伴う問題が存在
する。
ッセイするための乾式分析要素を提供するために、幾つ
かの問題を解決せねばならなかった。非常に広範なＣＨ
Ｅが希釈されていないヒト血清中に見い出されるため、
本発明の乾式要素中に組み入れられるフェリシアニドの
量を規定することが、特に困難であった。多量のフェリ
シアニドがウェブ(web) 中に存在する場合、初濃度が高
くなりすぎて、判読不可能になるため、フェリシアニド
の量は臨界的である。存在するフェリシアニドがあまり
にも少量である場合には、反応の終点に達する前にフェ
リシアニドが消耗されて、また正確な判読が不可能とな
るであろう。従来技術の方法は、試料を非常に高いＣＨ
Ｅレベルのものを用いて希釈することにより、この問題
を解決しているが、上述のような希釈に伴う問題が存在
する。
【００１２】本発明者らは、乾式要素中のＣＨＥ活性の
指示薬として最適に作用するフェリシアニドの範囲が、
ウェブ中の別の成分、特にバインダー材料（例えば、ゼ
ラチン）の濃度に依存することを、研究を通して見い出
した。本発明者らは、要素中のフェリシアニドの有用な
範囲が０．２〜２．０ｇ／m2であり、上記フェリシアニ
ドの範囲で実施可能なバインダー材料の有用な範囲が３
〜１２ｇ／m2であることを見い出している。当業者は、
特定のアッセイに適するこれらの範囲内の最適濃度に達
することができるであろう。本発明者らは、ウェブ中の
バインダー材料の量が上記問題を解決することを、何の
教示もなく気付いた。乾式要素を用いて希釈されていな
いヒト血清中の非常に広範なＣＨＥ活性を測定できるこ
とは予期されていなかった。
指示薬として最適に作用するフェリシアニドの範囲が、
ウェブ中の別の成分、特にバインダー材料（例えば、ゼ
ラチン）の濃度に依存することを、研究を通して見い出
した。本発明者らは、要素中のフェリシアニドの有用な
範囲が０．２〜２．０ｇ／m2であり、上記フェリシアニ
ドの範囲で実施可能なバインダー材料の有用な範囲が３
〜１２ｇ／m2であることを見い出している。当業者は、
特定のアッセイに適するこれらの範囲内の最適濃度に達
することができるであろう。本発明者らは、ウェブ中の
バインダー材料の量が上記問題を解決することを、何の
教示もなく気付いた。乾式要素を用いて希釈されていな
いヒト血清中の非常に広範なＣＨＥ活性を測定できるこ
とは予期されていなかった。
【００１３】本発明により予期せずに解決された別の問
題は、血清の天然成分であるビリルビンによる干渉であ
る。ビリルビン中の天然イエロー色素は、濃度判読にお
いて偏りを引き起こす。本発明が希釈されていない血清
をアッセイするため、この方法はまさにビリルビン干渉
の矢面に立つことになる。本発明者らはこの問題を解決
し、ゲル架橋の量を低減することにより、正確な結果を
得た。本発明者らは、少量の硬化剤（例えば、ＢＶＳＭ
Ｅ ０．０２〜２ｇ／m2）を用いた。若干の架橋が必要
であったが、しかしながら、ＢＶＳＭＥは、すっかり取
り除くことはできなかった。
題は、血清の天然成分であるビリルビンによる干渉であ
る。ビリルビン中の天然イエロー色素は、濃度判読にお
いて偏りを引き起こす。本発明が希釈されていない血清
をアッセイするため、この方法はまさにビリルビン干渉
の矢面に立つことになる。本発明者らはこの問題を解決
し、ゲル架橋の量を低減することにより、正確な結果を
得た。本発明者らは、少量の硬化剤（例えば、ＢＶＳＭ
Ｅ ０．０２〜２ｇ／m2）を用いた。若干の架橋が必要
であったが、しかしながら、ＢＶＳＭＥは、すっかり取
り除くことはできなかった。
【００１４】本発明により得られた別の予期されなかっ
た結果は、アニオン性界面活性剤、好ましくはオリン(O
lin)１０Ｇ（商標）（下記）が、試薬類を含有する層に
組み入れられる場合に、塗膜対塗膜の再現性が多いに改
良されることである。
た結果は、アニオン性界面活性剤、好ましくはオリン(O
lin)１０Ｇ（商標）（下記）が、試薬類を含有する層に
組み入れられる場合に、塗膜対塗膜の再現性が多いに改
良されることである。
【００１５】
【具体的な態様】本明細書で用いられる「流体接触」の
語及び同様の語は、使用の条件下、ある意味では流体
（液状もしくは気体状のどちらか）が要素中でこれらの
層もしくは帯域間を通過できる程度に、互いに組み合わ
さっている要素の帯域もしくは層を称する。従って、こ
のような流体接触は、「流体接触」状態であると言及さ
れる要素の帯域もしくは層間における、少なくとも若干
の流体試料の成分の通過を可能にする要素の能力を称す
る。流体接触状態である帯域は相接できるが、またそれ
らは介在性帯域もしくは層により分離されていてもよ
い。しかしながら、またこのような介在性帯域もしくは
層は、この場合に流体接触状態であるであろうし、そし
て流体接触性層もしくは帯域間の流体の通過を妨げない
であろう。
語及び同様の語は、使用の条件下、ある意味では流体
（液状もしくは気体状のどちらか）が要素中でこれらの
層もしくは帯域間を通過できる程度に、互いに組み合わ
さっている要素の帯域もしくは層を称する。従って、こ
のような流体接触は、「流体接触」状態であると言及さ
れる要素の帯域もしくは層間における、少なくとも若干
の流体試料の成分の通過を可能にする要素の能力を称す
る。流体接触状態である帯域は相接できるが、またそれ
らは介在性帯域もしくは層により分離されていてもよ
い。しかしながら、またこのような介在性帯域もしくは
層は、この場合に流体接触状態であるであろうし、そし
て流体接触性層もしくは帯域間の流体の通過を妨げない
であろう。
【００１６】分析方法を述べるために本明細書で用いら
れる「乾式」の語は、各種の「乾式対接触（dry-to-the
-touch) 」試験要素（例えば、「浸漬及び判読」試験ス
トリップ類及び多層試験要素類など）に含有される化学
試薬類を用いて実施される分析方法及び技術を称する。
「乾式」方法は再現もしくは分析に全く液体を必要とし
ない。
れる「乾式」の語は、各種の「乾式対接触（dry-to-the
-touch) 」試験要素（例えば、「浸漬及び判読」試験ス
トリップ類及び多層試験要素類など）に含有される化学
試薬類を用いて実施される分析方法及び技術を称する。
「乾式」方法は再現もしくは分析に全く液体を必要とし
ない。
【００１７】本明細書で用いられる「乾式付着量」の語
は、塗布付着量が、通常の塗布及び乾燥処理工程後に
「乾燥重量」として測定されることを示す。
は、塗布付着量が、通常の塗布及び乾燥処理工程後に
「乾燥重量」として測定されることを示す。
【００１８】本明細書で用いられる「孔質」の語は、流
体が毛管現象により吸収され、そして孔質層と流体接触
状態である別の層に通過できるような多数の孔が存在す
ることを意味する。
体が毛管現象により吸収され、そして孔質層と流体接触
状態である別の層に通過できるような多数の孔が存在す
ることを意味する。
【００１９】本明細書で用いられる「反射性」の語は、
要素に照射される入射光が、要素を通して透過しない
が、しかし反射される濃度が測定できる光検出器に対し
て反射されるであろうことを意味する。
要素に照射される入射光が、要素を通して透過しない
が、しかし反射される濃度が測定できる光検出器に対し
て反射されるであろうことを意味する。
【００２０】このアッセイに関する化学的原理は、ブチ
リルチオコリンがＣＨＥにより加水分解され、そして酪
酸及びチオコリンを遊離させることである。次いで遊離
したチオコリンがフェリシアニドを還元してフェロシア
ニドにし、そしてフェリシアニドからフェロシアニドへ
の変化速度が反射濃度測定法により測定される。フェリ
シアニドは４０５nmで吸収極大であるが、フェロシアニ
ドはこの波長でほとんど吸収を示さないので、測定が可
能である。次いでコリンエステラーゼ活性のレベルが、
吸光度における変化速度に直接関係づけられる。
リルチオコリンがＣＨＥにより加水分解され、そして酪
酸及びチオコリンを遊離させることである。次いで遊離
したチオコリンがフェリシアニドを還元してフェロシア
ニドにし、そしてフェリシアニドからフェロシアニドへ
の変化速度が反射濃度測定法により測定される。フェリ
シアニドは４０５nmで吸収極大であるが、フェロシアニ
ドはこの波長でほとんど吸収を示さないので、測定が可
能である。次いでコリンエステラーゼ活性のレベルが、
吸光度における変化速度に直接関係づけられる。
【００２１】上記一連の化学反応は、ＣＨＥ活性につい
てアッセイしようとする試料をスポットされた本発明の
乾式分析要素を用いて、自動分析器、例えば、エクタケ
ム（EKTACHEM）（商標）分析器で実施できる。液体のア
ッセイに有用な乾式分析要素は、米国特許第３，９９
２，１５８号及び同第４，３５７，３６３号明細書の教
示に従って製造でき、これらの内容は、すべて本明細書
に組み入れられる。
てアッセイしようとする試料をスポットされた本発明の
乾式分析要素を用いて、自動分析器、例えば、エクタケ
ム（EKTACHEM）（商標）分析器で実施できる。液体のア
ッセイに有用な乾式分析要素は、米国特許第３，９９
２，１５８号及び同第４，３５７，３６３号明細書の教
示に従って製造でき、これらの内容は、すべて本明細書
に組み入れられる。
【００２２】簡単に記載すると、本発明の分析要素は、
適当な支持体上に塗布された１つ以上の層を含んで成
る。要素が１つ以上の層を含む場合には（多層要素）、
支持体に最も隣接する層が試薬層であり、その上に更な
る１つ以上の試薬層を重ねてもよい。いずれか又はすべ
ての試薬層が成分、ブチリルチオコリンもしくはフェリ
シアニドを含有してもよい。これらの成分の両者が同一
試薬層に存在してもしなくてもよい。上記タイプの多層
要素では、支持体から最も離れた層は、ＣＨＥについて
アッセイしようとする水性液体を受容及び分配する展開
層である。また、展開層は、成分、ブチリルチオコリン
もしくはフェリシアニド又は両者を含有してもよい。緩
衝剤は要素に必須であり、そして要素のいずれか又はす
べての層に包含されうる。要素のすべての成分は、単一
層に存在してもしなくてもよい。要素の同一もしくは異
なる層に含有されるすべての成分は、互いに流体接触状
態であるべきであり、それは、試薬及び反応生成物が層
内で及び隣接する層の重なった領域間で通過できること
を意味する。
適当な支持体上に塗布された１つ以上の層を含んで成
る。要素が１つ以上の層を含む場合には（多層要素）、
支持体に最も隣接する層が試薬層であり、その上に更な
る１つ以上の試薬層を重ねてもよい。いずれか又はすべ
ての試薬層が成分、ブチリルチオコリンもしくはフェリ
シアニドを含有してもよい。これらの成分の両者が同一
試薬層に存在してもしなくてもよい。上記タイプの多層
要素では、支持体から最も離れた層は、ＣＨＥについて
アッセイしようとする水性液体を受容及び分配する展開
層である。また、展開層は、成分、ブチリルチオコリン
もしくはフェリシアニド又は両者を含有してもよい。緩
衝剤は要素に必須であり、そして要素のいずれか又はす
べての層に包含されうる。要素のすべての成分は、単一
層に存在してもしなくてもよい。要素の同一もしくは異
なる層に含有されるすべての成分は、互いに流体接触状
態であるべきであり、それは、試薬及び反応生成物が層
内で及び隣接する層の重なった領域間で通過できること
を意味する。
【００２３】支持体は、いずれか適する寸法安定性であ
ることができ、好ましくは、２００〜９００nm間の波長
の電磁輻射線を透過する、非孔質及び透明な（すなわ
ち、輻射線透過性である）材料であることができる。輻
射線透過性支持体は、各種の輻射線検出方法の使用によ
り、これらの要素に生じる検出可能な変化の測定を高め
かつ促進するので特に好ましい。特定の要素についての
支持体の選択は、意図した検出モード（反射、透過もし
くは蛍光顕微鏡）と適合すべきである。有用な支持体材
料としては、ポリスチレン、ポリエステル類〔例えば、
ポリ（エチレンテレフタレート）〕、ポリカーボネート
類及びセルロースエステル類（例えば、酢酸セルロー
ス）などが挙げられる。
ることができ、好ましくは、２００〜９００nm間の波長
の電磁輻射線を透過する、非孔質及び透明な（すなわ
ち、輻射線透過性である）材料であることができる。輻
射線透過性支持体は、各種の輻射線検出方法の使用によ
り、これらの要素に生じる検出可能な変化の測定を高め
かつ促進するので特に好ましい。特定の要素についての
支持体の選択は、意図した検出モード（反射、透過もし
くは蛍光顕微鏡）と適合すべきである。有用な支持体材
料としては、ポリスチレン、ポリエステル類〔例えば、
ポリ（エチレンテレフタレート）〕、ポリカーボネート
類及びセルロースエステル類（例えば、酢酸セルロー
ス）などが挙げられる。
【００２４】試薬層は支持体上に塗布される。試薬層
は、１つ以上の合成もしくは天然のバインダー材料、例
えば、ゼラチンもしくは別の天然産コロイド類並びに別
の合成親水性ポリマー類〔例えば、ポリ（アクリルアミ
ド）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（アクリルアミ
ド−コ−Ｎ−ビニル−２−ピロリドン）、上記のコポリ
マー類及び架橋可能なモノマー類が添加されたポリマー
類もしくはコポリマー類〕に分散させた１つ以上の試薬
類（例えば、フェリシアニドもしくはフェリシアニド及
びブチリルチオコリン）を含んで成る指示組成物を含有
できる。
は、１つ以上の合成もしくは天然のバインダー材料、例
えば、ゼラチンもしくは別の天然産コロイド類並びに別
の合成親水性ポリマー類〔例えば、ポリ（アクリルアミ
ド）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（アクリルアミ
ド−コ−Ｎ−ビニル−２−ピロリドン）、上記のコポリ
マー類及び架橋可能なモノマー類が添加されたポリマー
類もしくはコポリマー類〕に分散させた１つ以上の試薬
類（例えば、フェリシアニドもしくはフェリシアニド及
びブチリルチオコリン）を含んで成る指示組成物を含有
できる。
【００２５】試薬層は、本発明に必須の緩衝剤を含有で
きる。有用な緩衝剤としては、リン酸塩、ピロリン酸
塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩ
Ｓ）、２｛〔トリス（ヒドロキシメチル）メチル〕アミ
ノ｝−１−エタンスルホン酸（ＴＥＳ）及び pＨ７．０
〜８．５の範囲内の別の緩衝剤が挙げられる。緩衝剤
は、上記のいずれかもしくはすべての層に含まれてもよ
く、又はそれがフェリシアニド及びブチリルチオコリン
を欠く別個の層に存在してもよい。
きる。有用な緩衝剤としては、リン酸塩、ピロリン酸
塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩ
Ｓ）、２｛〔トリス（ヒドロキシメチル）メチル〕アミ
ノ｝−１−エタンスルホン酸（ＴＥＳ）及び pＨ７．０
〜８．５の範囲内の別の緩衝剤が挙げられる。緩衝剤
は、上記のいずれかもしくはすべての層に含まれてもよ
く、又はそれがフェリシアニド及びブチリルチオコリン
を欠く別個の層に存在してもよい。
【００２６】数種のアニオン性界面活性剤、例えば、オ
リン（Olin）１０Ｇ（商標）、ＴＸ−４０５（商標）及
びゾニル(Zonyl) ＦＳＮ（商標）(Rohm and Haas市販の
オクチルフェノキシポリエトキシエタノール非イオン性
界面活性剤の系列である）などは、試薬層に含まれてい
ても含まれていなくてもよい。また、幾つかの異なる架
橋剤、例えば、ビスビニルスルホニルメタン及びグルタ
ルアルデヒドなどが任意である。
リン（Olin）１０Ｇ（商標）、ＴＸ−４０５（商標）及
びゾニル(Zonyl) ＦＳＮ（商標）(Rohm and Haas市販の
オクチルフェノキシポリエトキシエタノール非イオン性
界面活性剤の系列である）などは、試薬層に含まれてい
ても含まれていなくてもよい。また、幾つかの異なる架
橋剤、例えば、ビスビニルスルホニルメタン及びグルタ
ルアルデヒドなどが任意である。
【００２７】展開層は要素上に液状試験試料を均一に分
配する孔質反射性層である。展開層は、成分、ブチリル
チオコリンもしくはフェリシアニド又は両者を含有して
もよい。展開層に用いられる材料は、例えば、米国特許
第４，２５８，００１号明細書及び上記特許に開示され
るような乾式分析要素を製造する技術分野で周知であ
る。
配する孔質反射性層である。展開層は、成分、ブチリル
チオコリンもしくはフェリシアニド又は両者を含有して
もよい。展開層に用いられる材料は、例えば、米国特許
第４，２５８，００１号明細書及び上記特許に開示され
るような乾式分析要素を製造する技術分野で周知であ
る。
【００２８】具体的な展開層は、下記第１表に挙げられ
たものである。硫酸バリウム以外の顔料、例えば、二酸
化チタンが使用できる。酢酸セルロース以外のバインダ
ー、例えば、各種のポリウレタン及び別のポリマーが使
用できる。ＴＸ−４０５（商標）以外の界面活性剤、例
えば、ＴＸ−１００（商標）が使用できる。ヨウ化物以
外のハロゲン化物イオン、例えば、塩化ブチリルチオコ
リンが使用できる。更に、別のチオコリン、例えば、ア
セチルもしくはプロピオニルチオコリンが、ブチリルチ
オコリンの代わりに使用できる。
たものである。硫酸バリウム以外の顔料、例えば、二酸
化チタンが使用できる。酢酸セルロース以外のバインダ
ー、例えば、各種のポリウレタン及び別のポリマーが使
用できる。ＴＸ−４０５（商標）以外の界面活性剤、例
えば、ＴＸ−１００（商標）が使用できる。ヨウ化物以
外のハロゲン化物イオン、例えば、塩化ブチリルチオコ
リンが使用できる。更に、別のチオコリン、例えば、ア
セチルもしくはプロピオニルチオコリンが、ブチリルチ
オコリンの代わりに使用できる。
【００２９】別の任意の層、例えば、下塗り層及び輻射
線遮断層などは、所望であれば包含できる。要素の層
は、界面活性剤類、増粘剤類、緩衝剤類、硬化剤類、抗
酸化剤類及びカプラー溶剤類並びに当該技術分野で既知
である別の材料を含む、各種の別の望ましいが任意の成
分を含有できる。また、これらの成分の量は、当業者の
技術範囲内である。
線遮断層などは、所望であれば包含できる。要素の層
は、界面活性剤類、増粘剤類、緩衝剤類、硬化剤類、抗
酸化剤類及びカプラー溶剤類並びに当該技術分野で既知
である別の材料を含む、各種の別の望ましいが任意の成
分を含有できる。また、これらの成分の量は、当業者の
技術範囲内である。
【００３０】要素における変化は、例えば、米国特許第
３，９９２，１５８号明細書Cols.１４〜１５及び米国
特許第４，３５７，３６３号明細書Cols. ２７に開示さ
れる一般的に既知である方法を用いて、適当な分光光度
計、通常反射計を用いて検出できる。酵素反応では、例
えば、アッセイ試料と接触させた本発明の要素の限定さ
れた領域における反射もしくは透過濃度の変化速度を測
定することにより、得られた生成物が測定される。測定
される領域は、一般的には、５mmまでである。
３，９９２，１５８号明細書Cols.１４〜１５及び米国
特許第４，３５７，３６３号明細書Cols. ２７に開示さ
れる一般的に既知である方法を用いて、適当な分光光度
計、通常反射計を用いて検出できる。酵素反応では、例
えば、アッセイ試料と接触させた本発明の要素の限定さ
れた領域における反射もしくは透過濃度の変化速度を測
定することにより、得られた生成物が測定される。測定
される領域は、一般的には、５mmまでである。
【００３１】本発明の代表的な要素は下記に挙げるもの
である。本発明の原理が、この場合に提供される方法を
使用するいずれかの分析要素に都合良く組み入れること
ができることは、当業者らに理解されるであろう。ま
た、この要素を用いて血清以外の別の試料中のＣＨＥ活
性をアッセイできることが、理解されるであろう。
である。本発明の原理が、この場合に提供される方法を
使用するいずれかの分析要素に都合良く組み入れること
ができることは、当業者らに理解されるであろう。ま
た、この要素を用いて血清以外の別の試料中のＣＨＥ活
性をアッセイできることが、理解されるであろう。
【００３２】
【表１】
【００３３】上記要素及び本文中で使用された名称及び
記号は、以下の意味を有する。 Zonyl FSN （商標）：E.I. du Pont de Nemours 市販の
非イオン性フッ素化界面活性剤。 ＴＸ−１００（商標） ＴＸ−４０５（商標） Olin−１０Ｇ（商標）：Rohm and Haas 市販のオクチル
フェノキシポリエトキシエタノール非イオン性界面活性
剤の系列。 ＢＶＳＭＥ：ビス（ビニルスルホニルメチル）エーテル
ゼラチン硬化剤。
記号は、以下の意味を有する。 Zonyl FSN （商標）：E.I. du Pont de Nemours 市販の
非イオン性フッ素化界面活性剤。 ＴＸ−１００（商標） ＴＸ−４０５（商標） Olin−１０Ｇ（商標）：Rohm and Haas 市販のオクチル
フェノキシポリエトキシエタノール非イオン性界面活性
剤の系列。 ＢＶＳＭＥ：ビス（ビニルスルホニルメチル）エーテル
ゼラチン硬化剤。
【００３４】試薬層は、下塗りゼラチン洗浄処理ポリ
（エチレンテレフタレート）支持体上に塗布し、そして
展開層は試薬層上に塗布した。すべての前記層は、米国
特許第４，３５７，３６３号及び米国特許第３，９２
２，１５８号明細書に開示されるものを初めとする上記
乾式アッセイ要素を製造するための当該技術分野で既知
である伝統的な塗布技術を用いて塗布した。
（エチレンテレフタレート）支持体上に塗布し、そして
展開層は試薬層上に塗布した。すべての前記層は、米国
特許第４，３５７，３６３号及び米国特許第３，９２
２，１５８号明細書に開示されるものを初めとする上記
乾式アッセイ要素を製造するための当該技術分野で既知
である伝統的な塗布技術を用いて塗布した。
【００３５】本発明の要素は、血清もしくは血漿試料で
の使用を目的とするが、また、血清によく類似したいず
れかの流体が使用できる。これらは、典型的な対照流体
及び調整流体を包含する。
の使用を目的とするが、また、血清によく類似したいず
れかの流体が使用できる。これらは、典型的な対照流体
及び調整流体を包含する。
【００３６】全血由来の血清もしくは血漿の製造以外
は、何も特定の試料製造を必要としない。希釈は必要と
されないが、希釈された活性が十分に読み取れることを
条件とする。試料は、冷凍して長期間活性を維持するこ
とができる。それらは、アッセイする前に解凍して室温
にするべきである。
は、何も特定の試料製造を必要としない。希釈は必要と
されないが、希釈された活性が十分に読み取れることを
条件とする。試料は、冷凍して長期間活性を維持するこ
とができる。それらは、アッセイする前に解凍して室温
にするべきである。
【００３７】本発明のアッセイは、５〜２０μL の試料
を利用する。本発明が、多種多様な量で試料を塗布でき
るとはいえ、１１μL が好ましい。異なる試料容量につ
いて異なる較正曲線が必要とされる。分析用液状試料と
分析要素の間に物理的接触が存在する。このような接触
は、いずれか適する方法で、好ましくは手又は機械によ
り試料の一滴を適当な分配手段を備えた展開層上にスポ
ットすることにより、達成できる。
を利用する。本発明が、多種多様な量で試料を塗布でき
るとはいえ、１１μL が好ましい。異なる試料容量につ
いて異なる較正曲線が必要とされる。分析用液状試料と
分析要素の間に物理的接触が存在する。このような接触
は、いずれか適する方法で、好ましくは手又は機械によ
り試料の一滴を適当な分配手段を備えた展開層上にスポ
ットすることにより、達成できる。
【００３８】試料塗布後、要素は、いずれかの調整、例
えば、インキュベーション加熱などにかけられるが、こ
れは、化学反応を迅速に又は促進するのに望ましいだろ
う。このような調整としては、２５〜４０℃が好まし
く、３７℃が最も好ましい。要素は、調整期間中、変化
は２０〜２５秒間の短時間、又は長くて３０〜６０分間
で生じるとはいえ、一般的には３〜７分間、好ましくは
５分間、反射濃度におけるいずれかの変化についてモニ
ターされる。
えば、インキュベーション加熱などにかけられるが、こ
れは、化学反応を迅速に又は促進するのに望ましいだろ
う。このような調整としては、２５〜４０℃が好まし
く、３７℃が最も好ましい。要素は、調整期間中、変化
は２０〜２５秒間の短時間、又は長くて３０〜６０分間
で生じるとはいえ、一般的には３〜７分間、好ましくは
５分間、反射濃度におけるいずれかの変化についてモニ
ターされる。
【００３９】ＣＨＥ活性の検出方法は、以下の例に具体
的に示されている。すべての例で使用された分析要素
は、本明細書の第１表に記載のものである。
的に示されている。すべての例で使用された分析要素
は、本明細書の第１表に記載のものである。
【００４０】
例１：既知濃度のＣＨＥを有する試料を用いた変化速度
（Ｄr ／分）の計算 ＣＨＥ活性の試験における本発明の実施可能性を、以下
に具体的に示す。ヒト血清のプールを酸で処理して内因
性ＣＨＥ活性を破壊し、次いでウマＣＨＥを添加して５
３２、３３８８、５９３５、８３０３、１１２５９、１
３４５３及び１５９６８ｕ／ＬのＣＨＥ活性を有する一
連の流体を提供した。上記７種の試料のＣＨＥ活性をブ
チリルチオコリン／エルマンズ（Ellman′ｓ）試薬方法
により測定した。この方法は、参照方法として British
Association of Clinical Biochemistsに明示されてい
る。〔血清中の数種の酵素の検出について提案された方
法（Proposed Methods for Determination of Some Enz
yme in Blood Serum）。News Sheet Assoc. Clin. Bioc
hem. 202, 31s (1980)〕。
（Ｄr ／分）の計算 ＣＨＥ活性の試験における本発明の実施可能性を、以下
に具体的に示す。ヒト血清のプールを酸で処理して内因
性ＣＨＥ活性を破壊し、次いでウマＣＨＥを添加して５
３２、３３８８、５９３５、８３０３、１１２５９、１
３４５３及び１５９６８ｕ／ＬのＣＨＥ活性を有する一
連の流体を提供した。上記７種の試料のＣＨＥ活性をブ
チリルチオコリン／エルマンズ（Ellman′ｓ）試薬方法
により測定した。この方法は、参照方法として British
Association of Clinical Biochemistsに明示されてい
る。〔血清中の数種の酵素の検出について提案された方
法（Proposed Methods for Determination of Some Enz
yme in Blood Serum）。News Sheet Assoc. Clin. Bioc
hem. 202, 31s (1980)〕。
【００４１】上記流体及び水を、第１表の要素上にすべ
てスポットし、上記方法に従ってEKTACHEM（商標）７０
０分析器でＣＨＥ活性についてアッセイした。４００nm
での反射濃度（Ｄr ）を３７℃で５分間インキュベーシ
ョンする間中モニターし、そしてＤr における変化速度
を分析器により測定した。適する分析装置及び方法は、
当該技術分野で既知である。
てスポットし、上記方法に従ってEKTACHEM（商標）７０
０分析器でＣＨＥ活性についてアッセイした。４００nm
での反射濃度（Ｄr ）を３７℃で５分間インキュベーシ
ョンする間中モニターし、そしてＤr における変化速度
を分析器により測定した。適する分析装置及び方法は、
当該技術分野で既知である。
【００４２】時間に対する反射濃度のキネティック・ト
レース(Kinetic trace）を図１に示す。これは、キネテ
ィック・トレース（Ｄr ／分）の負の勾配が、ＣＨＥ活
性増強に伴って増強されることを示している。
レース(Kinetic trace）を図１に示す。これは、キネテ
ィック・トレース（Ｄr ／分）の負の勾配が、ＣＨＥ活
性増強に伴って増強されることを示している。
【００４３】速度（Ｄr ／分）は、濃度曲線の直線領域
を介する直線回帰により求めた。
を介する直線回帰により求めた。
【００４４】例２：本発明の要素における試験試料のア
ッセイ ３５人分の患者の試料を得た。１５人分は明らかに健康
な人由来であり、１０人分は肝機能不全の徴候（高ビリ
ルビン）を示す人由来であり、そして１０人分は農薬服
用者由来であった。これらの試料のすべてを、上記エル
マンズ試薬方法によりＣＨＥ活性についてアッセイし
た。次いでそれらを本発明の要素上にスポットし、そし
てEKTACHEM（商標）７００分析器を用いてアッセイし
た。キネティック曲線の直線の直線領域の勾配を上記の
ように計算した（Ｄr ／分）。参照方法により報告され
ているように、これを濃度（活性）に対してプロットし
た。結果を図２に示す。
ッセイ ３５人分の患者の試料を得た。１５人分は明らかに健康
な人由来であり、１０人分は肝機能不全の徴候（高ビリ
ルビン）を示す人由来であり、そして１０人分は農薬服
用者由来であった。これらの試料のすべてを、上記エル
マンズ試薬方法によりＣＨＥ活性についてアッセイし
た。次いでそれらを本発明の要素上にスポットし、そし
てEKTACHEM（商標）７００分析器を用いてアッセイし
た。キネティック曲線の直線の直線領域の勾配を上記の
ように計算した（Ｄr ／分）。参照方法により報告され
ているように、これを濃度（活性）に対してプロットし
た。結果を図２に示す。
【００４５】一般的には、これらの試料は１つの曲線上
におかれるので、本発明者らは、この方法が上記参照方
法（ブチリルチオコリン／エルマンズ試薬方法）に相関
し、さらにそれによって較正できることを見い出した。
におかれるので、本発明者らは、この方法が上記参照方
法（ブチリルチオコリン／エルマンズ試薬方法）に相関
し、さらにそれによって較正できることを見い出した。
【００４６】
【発明の効果】本発明は、希釈されていない水性液体
（例えば、体液）中の血清コリンエステラーゼをアッセ
イするための乾式分析要素を提供する。乾式型の要素は
より便利であり、そして希釈されていない液体の使用は
より正確な結果を提供する。
（例えば、体液）中の血清コリンエステラーゼをアッセ
イするための乾式分析要素を提供する。乾式型の要素は
より便利であり、そして希釈されていない液体の使用は
より正確な結果を提供する。
【図１】図１は、時間に対する濃度のキネティック・ト
レースのグラフであり、キネティック・トレースの負の
勾配はＣＨＥ活性の増強に伴って増強することを示して
いる。
レースのグラフであり、キネティック・トレースの負の
勾配はＣＨＥ活性の増強に伴って増強することを示して
いる。
【図２】図２は、EKTACHEM（商標）７００臨床化学分析
器を用いた患者血清試料のアッセイの結果を示すグラフ
である。これは、本発明方法を用いて得られた結果が、
ＣＨＥ活性をアッセイするための参照方法を用いて得ら
れた結果と十分に対応することを示している。
器を用いた患者血清試料のアッセイの結果を示すグラフ
である。これは、本発明方法を用いて得られた結果が、
ＣＨＥ活性をアッセイするための参照方法を用いて得ら
れた結果と十分に対応することを示している。
Claims (2)
- 【請求項１】 Ａ）水性液体の試料を、表面上に少なく
とも１つの層を担持する支持体を含んで成る血清コリン
エステラーゼ活性をアッセイするための分析要素と接触
させる工程であって、また、上記要素が、 ａ）ブチリルチオコリン、 ｂ）フェリシアニド 付着量０．０２〜２．０ｇ／m2、 ｃ）バインダー材料 付着量３〜１２ｇ／m2、及び ｄ）緩衝剤 pＨを７．０〜８．５の範囲内に確立、 を含んで成ることを特徴とする工程、 Ｂ）反射濃度における変化速度をモニターして試料中の
血清コリンエステラーゼの活性をアッセイする工程、を
含んで成る水性液体中の血清コリンエステラーゼ活性の
アッセイ方法。 - 【請求項２】 表面上に少なくとも１つの層を担持する
支持体を含んで成る血清コリンエステラーゼ活性をアッ
セイするための分析要素であって、また上記要素が、 ａ）ブチリルチオコリン、 ｂ）フェリシアニド 付着量０．０２〜２．０ｇ／m2 ｃ）バインダー材料 付着量３〜１２ｇ／m2、及び ｄ）緩衝剤 pＨを７．０〜８．５の範囲内に確立、 を含んで成る分析要素。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US763383 | 1991-09-20 | ||
| US07/763,383 US5272061A (en) | 1991-09-20 | 1991-09-20 | Assay for serum cholinesterase activity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05211894A true JPH05211894A (ja) | 1993-08-24 |
| JP3129850B2 JP3129850B2 (ja) | 2001-01-31 |
Family
ID=25067700
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP04249110A Expired - Fee Related JP3129850B2 (ja) | 1991-09-20 | 1992-09-18 | 血清コリンエステラーゼ活性についてのアッセイ方法及び分析要素 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5272061A (ja) |
| EP (1) | EP0533283B1 (ja) |
| JP (1) | JP3129850B2 (ja) |
| AT (1) | ATE146225T1 (ja) |
| CA (1) | CA2076210C (ja) |
| DE (1) | DE69215808T2 (ja) |
| ES (1) | ES2096020T3 (ja) |
| HK (1) | HK41797A (ja) |
| SG (1) | SG81856A1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3114017A1 (de) * | 1980-04-07 | 1982-02-04 | Rockwell International Corp., 90245 El Segundo, Calif. | Vorrichtung zur leistungsverstaerkung eines laserstrahls |
| JP2006053165A (ja) * | 2005-11-02 | 2006-02-23 | Fuji Photo Film Co Ltd | 吸光度計測に供される多層フィルム |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2351877C (en) | 1998-11-23 | 2012-01-24 | Proteome Sciences, Inc. | Methods and compositions for pain management |
| US6291200B1 (en) * | 1999-11-17 | 2001-09-18 | Agentase, Llc | Enzyme-containing polymeric sensors |
| US6750033B2 (en) | 2001-05-07 | 2004-06-15 | Agentase, Llc | Positive response biosensors and other sensors |
| US7604985B2 (en) * | 2004-11-10 | 2009-10-20 | Becton, Dickinson And Company | System and method for determining fill volume in a container |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3992158A (en) * | 1973-08-16 | 1976-11-16 | Eastman Kodak Company | Integral analytical element |
| US4042335A (en) * | 1975-07-23 | 1977-08-16 | Eastman Kodak Company | Integral element for analysis of liquids |
| CA1095819A (en) * | 1977-01-14 | 1981-02-17 | Eastman Kodak Company | Element for analysis of liquids |
| US4258001A (en) * | 1978-12-27 | 1981-03-24 | Eastman Kodak Company | Element, structure and method for the analysis or transport of liquids |
| US4357363A (en) * | 1978-12-27 | 1982-11-02 | Eastman Kodak Company | Element, structure and method for the analysis or transport of liquids |
| JPS60217900A (ja) * | 1984-04-13 | 1985-10-31 | Kyowa Medetsukusu Kk | メルカプト基含有化合物の定量方法 |
| US4929545A (en) * | 1989-04-14 | 1990-05-29 | Boehringer Mannheim Corporation | Method and reagent for determination of an analyte via enzymatic means using a ferricyanide/ferric compound system |
| CA2037562A1 (en) * | 1990-06-18 | 1991-12-19 | Robert P. Hatch | Detection assays having chromogenic and nonchromogenic, hypochromogenic, bathochromogenic or hypsochromogenic substrates |
-
1991
- 1991-09-20 US US07/763,383 patent/US5272061A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-08-14 CA CA002076210A patent/CA2076210C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-16 EP EP92202841A patent/EP0533283B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-16 SG SG9601549A patent/SG81856A1/en unknown
- 1992-09-16 DE DE69215808T patent/DE69215808T2/de not_active Expired - Lifetime
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- 1992-09-16 ES ES92202841T patent/ES2096020T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-18 JP JP04249110A patent/JP3129850B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-04-03 HK HK41797A patent/HK41797A/xx not_active IP Right Cessation
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3114017A1 (de) * | 1980-04-07 | 1982-02-04 | Rockwell International Corp., 90245 El Segundo, Calif. | Vorrichtung zur leistungsverstaerkung eines laserstrahls |
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