JPH05139980A - Sustainable antiviral liquid agent - Google Patents

Abstract

PURPOSE:To provide the title highly low toxic liquid agent giving high antiviral activity on a wide range of virus, esp. AIDS virus, also having remarkable in-body sustainability, containing, as an active ingredient, a specific sulfated alkyloligosaccharide or its salt. CONSTITUTION:The objective liquid agent containing, as an active ingredient, a sulfated alkyloligosaccharide or its salt. This oligosaccharide can be obtained by (1) substitution with a <=2C chain alkyl group of the hydrogen atom of 1-site hydroxyl groups at the terminal saccharide of an oligosaccharide made up of, as constituent, the identical monosaccharide selected from 2 to 30 glucose, galactose, mannose, talose, idose, altrose, allose, gulose, xylose, arabinose, rhamnose, fucose, and fructose with these monosaccharides bound through glycoside linkage and (2) sulfating >=14.3% of the remaining hydroxyl groups in the saccharide region (e.g. sulfated-hexyl-beta-D-glucopyranosyl(1 -3)-beta-D- glucopyranoside).

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】この発明は、エイズウイルス（Ｈ
ＩＶ；Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ
Ｖｉｒｕｓ）をはじめ広い範囲のウイルスに対して抗
ウイルス活性を有する硫酸化アルキルオリゴ糖を有効成
分とする持続性抗ウイルス液剤に関する。This invention relates to the AIDS virus (H
IV; Human Immunodeficiency
The present invention relates to a persistent antiviral liquid agent containing a sulfated alkyl oligosaccharide as an active ingredient, which has antiviral activity against a wide range of viruses including Virus).

【０００２】[0002]

【従来の技術】抗ウイルス作用を有する化合物に関して
は、硫酸化多糖がエイズ（後天性免疫不全症候群）の治
療薬剤として有用であるという多くの研究報告がなさ
れ、日本特許公開公報昭６２−２１５５２９号公報；Ｈ
ｉｄｅｋｉ Ｎａｋａｓｈｉｍａｅｔ ａｌ Ｊｐｎ．
Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（Ｇａｎｎ）７８，１１６
４（１９８７）；Ｏｓａｍｕ Ｙｏｓｈｉｄａ ｅｔ
ａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏ
ｇｙ，３７，２８８７〜２８９１（１９８８）；日本特
許公開公報平１−１０３６０１号公報等の多数の報告が
ある。2. Description of the Related Art Regarding compounds having antiviral activity, many research reports have been made that a sulfated polysaccharide is useful as a therapeutic drug for AIDS (acquired immunodeficiency syndrome), and Japanese Patent Publication No. 62-21529. Bulletin; H
ideaki Nakashima et al Jpn.
J. Cancer Res. (Gann) 78,116
4 (1987); Osamu Yoshida et.
al Biochemical Pharmacolo
gy, 37, 2887-2891 (1988); Japanese Patent Laid-Open Publication No. 1-103601.

【０００３】しかし、多糖の硫酸化物は分子量が数万以
上と大きいために生体への吸収性が悪く、抗原性を有す
る事、抗凝血作用が大きい事等の種々の問題点を有して
いることが明らかにされ、また抗エイズ剤として広く使
用されている核酸系化合物のＡＺＴ（ジデオキシアジド
チミジン）も副作用が強いため、低毒性の新しい薬剤の
開発が望まれている。それらの課題を解決する為に、本
発明者らは鋭意研究を行った結果、硫酸化アルキルオリ
ゴ糖が抗ウイルス剤として優れていることを見い出し、
特願平３−２１１８３３号「抗ウイルス剤」として特許
出願した。However, since the sulfated substance of polysaccharide has a large molecular weight of tens of thousands or more, it is poor in absorbability into the living body and has various problems such as having antigenicity and great anticoagulant action. Since AZT (dideoxyazidothymidine), which is a nucleic acid compound widely used as an anti-AIDS agent, has strong side effects, it is desired to develop a new drug having low toxicity. In order to solve these problems, as a result of intensive studies by the present inventors, they found that sulfated alkyl oligosaccharides were excellent as antiviral agents,
Patent application was filed as Japanese Patent Application No. 3-213833 "antiviral agent".

【０００４】[0004]

【発明が解決しようとする課題】エイズ疾患は、短期間
の治療により完治するものではない為、用いる治療剤は
出来るだけ生体内に長く留まり、作用を発揮するロング
ライフの薬剤が望ましいが、多糖類の硫酸化物は、生体
内で速やかに分解・代謝され、活性を失うことが明らか
にされつつあり、生体内で長時間作用が持続する新しい
薬剤の開発が望まれていた。本発明は、低毒性で、エイ
ズウイルス（ＨＩＶ）をはじめとして広い範囲のウイル
スに対して長時間活性が持続する抗ウイルス剤の提供を
目的とする。Since AIDS disease is not completely cured by short-term treatment, it is desirable that the therapeutic agent to be used be a long-life drug that stays in the body as long as possible and exerts its action. It is becoming clear that sulphates of sugars are rapidly decomposed and metabolized in vivo and lose their activity, and it has been desired to develop a new drug having a long-lasting action in vivo. An object of the present invention is to provide an antiviral agent having low toxicity and long-term activity against a wide range of viruses including AIDS virus (HIV).

【０００５】[0005]

【課題を解決するための手段】本研究者らは、先に硫酸
化アルキルオリゴ糖が抗ウイルス剤として優れているこ
とを見い出し、特願平３−２１１８３３号「抗ウイルス
剤」として特許出願したが、更に鋭意研究を進めた結
果、生体内で驚くほど長時間活性を持続できる硫酸化ア
ルキルオリゴ糖を有効成分とする液剤を見い出し、本発
明を完成した。[Means for Solving the Problems] The present inventors have previously found that sulfated alkyl oligosaccharides are excellent as antiviral agents, and applied for a patent as Japanese Patent Application No. 3-213833 "Antiviral Agent". However, as a result of further earnest research, a liquid agent containing a sulfated alkyl oligosaccharide as an active ingredient, which can maintain the activity in vivo for a surprisingly long time, was found, and the present invention was completed.

【０００６】[0006]

【構成】本発明の持続性抗ウイルス液剤は、オリゴ糖の
構成糖が２以上３０以下のグルコース、ガラクトース、
マンノース、タロース、イドース、アルトロース、アロ
ース、グロース、キシロース、アラビノース、ラムノー
ス、フコース、フラクトースよりなる群から選ばれる同
一もしくは異なる単糖を構成成分として、それらがグリ
コシド結合してなるオリゴ糖の末端糖の１位の水酸基の
水素が直鎖状または分岐状の炭素数２２以下の直鎖状も
しくは分岐状のアルキル基であるアルキル基により置換
され、かつ糖部分の残りの水酸基の１４．３％以上が硫
酸化された硫酸化アルキルオリゴ糖またはその生理学的
に許容される塩を有効成分とする持続性抗ウイルス液剤
である。[Structure] The persistent antiviral liquid composition of the present invention comprises glucose, galactose, and oligosaccharides each having 2 to 30 constituent sugars.
Terminal sugars of oligosaccharides formed by glycosidic bonds with the same or different monosaccharides selected from the group consisting of mannose, talose, idose, altrose, allose, gulose, xylose, arabinose, rhamnose, fucose and fructose as constituent components. Hydrogen of the 1-position hydroxyl group is substituted with an alkyl group which is a linear or branched linear or branched alkyl group having 22 or less carbon atoms, and 14.3% or more of the remaining hydroxyl groups of the sugar moiety Is a long-acting antiviral liquid agent containing a sulfated sulfated alkyl oligosaccharide or a physiologically acceptable salt thereof as an active ingredient.

【０００７】本発明の抗ウイルス液剤は、静脈内投与、
注射等の非経口投与を行った場合でも、従来の硫酸化多
糖類を有効成分とするものよりも生体内で失活されにく
く、驚異的な長時間生体内において優れた抗ウイルス活
性を持続する。このように長時間活性が持続する抗ウイ
ルス液剤、特に抗エイズ液剤は従来全く知られていなか
った。The antiviral solution of the present invention is administered intravenously,
Even when administered parenterally such as by injection, it is less inactivated in vivo than conventional ones containing sulfated polysaccharides as the active ingredient, and continues to maintain excellent antiviral activity in vivo for a surprisingly long time. . As described above, no antiviral liquid agent, particularly an anti-AIDS liquid agent, whose activity lasts for a long time has been known at all.

【０００８】以下、この発明を詳しく説明する。本発明
の硫酸化アルキルオリゴ糖のオリゴ糖部分を構成する糖
としては、グルコース、ガラクトース、マンノース、タ
ロース、イドース、アルトロース、アロース、グロー
ス、キシロース、アラビノース、ラムノース、フコー
ス、フラクトースよりなる群から選ばれる同一の単糖ま
たは異なった単糖が用いられる。The present invention will be described in detail below. The sugar constituting the oligosaccharide moiety of the sulfated alkyl oligosaccharide of the present invention is selected from the group consisting of glucose, galactose, mannose, talose, idose, altrose, allose, gulose, xylose, arabinose, rhamnose, fucose and fructose. The same or different monosaccharides used may be used.

【０００９】本発明の硫酸化アルキルオリゴ糖のオリゴ
糖部分を構成する単糖数は、抗ウイルス活性の観点から
は、使用する糖の種類によっても異なるが、硫酸化多糖
の場合に見られる抗凝血作用、生体への適合性等から通
常３０以下が好ましい。従って、本発明の硫酸化アルキ
ルオリゴ糖のオリゴ糖部分には構成単糖数２〜３０から
なるオリゴ糖が用いられる。From the viewpoint of antiviral activity, the number of monosaccharides constituting the oligosaccharide moiety of the sulfated alkyl oligosaccharide of the present invention varies depending on the type of sugar used, but the number of monosaccharides found in the case of sulfated polysaccharides is high. Usually, it is preferably 30 or less from the viewpoint of blood coagulation action, compatibility with living body and the like. Therefore, an oligosaccharide having a constituent monosaccharide number of 2 to 30 is used for the oligosaccharide portion of the sulfated alkyl oligosaccharide of the present invention.

【００１０】本発明の硫酸化アルキルオリゴ糖のアルキ
ル部分については、アルキル基はオリゴ糖の末端還元糖
の１位の位置に導入することが好ましい。また、本発明
の硫酸化アルキルオリゴ糖に導入されるアルキル基は直
鎖状、分岐状のいずれでもよいが、一般に長鎖のアルキ
ル基を導入すると、反応収率が低下する。このため炭素
数が通常２２以下、好ましくは８〜１８のものが用いら
れる。Regarding the alkyl moiety of the sulfated alkyl oligosaccharide of the present invention, the alkyl group is preferably introduced at the 1-position of the terminal reducing sugar of the oligosaccharide. Further, the alkyl group introduced into the sulfated alkyl oligosaccharide of the present invention may be linear or branched, but generally when a long chain alkyl group is introduced, the reaction yield decreases. For this reason, those having 22 or less carbon atoms, preferably 8 to 18 carbon atoms are used.

【００１１】尚、アルキル基をオリゴ糖の末端還元糖の
１位に導入する方法としては、糖類を配糖体化する通常
の方法をそのまま使用する事ができる。即ち、糖のパー
アセテートを酸性条件下でアルコール類と反応させる方
法、糖のパーアセテートをケーニッヒ・クノール（Ｋｏ
ｅｎｉｇｓ・Ｋｎｏｒｒ）法で臭化グリコシルとした
後、銀塩または水銀塩を用いてアルコール類と反応させ
る方法、臭化グリコシルをテトラエチルアンモニウムブ
ロミドの存在下にアルコール類と反応させる方法、ま
た、糖イミデートをアルコールと反応させる方法等いず
れの方法も用いることができる。これらの中で、酸性条
件下でアルコール類を反応させる方法が最も簡便であ
る。そして、得られる配糖体パーアセテートを、常法に
よりナトリウムメトキシドやアンモニア等を用いて脱ア
セチル化することによってアルキルオリゴ糖（アルキル
配糖体）が得られる。As a method for introducing an alkyl group into the 1-position of the terminal reducing sugar of an oligosaccharide, the usual method for glycosylation of a saccharide can be used as it is. That is, a method in which sugar peracetate is reacted with alcohols under acidic conditions, and sugar peracetate is mixed with Koenig-Knol (Ko
enigs.Knorr) method to make glycosyl bromide and then react with alcohol using silver salt or mercury salt, method of reacting glycosyl bromide with alcohol in the presence of tetraethylammonium bromide, and sugar imidate Any method can be used, such as a method of reacting with alcohol. Of these, the method of reacting alcohols under acidic conditions is the simplest. Then, the obtained glycoside peracetate is deacetylated with sodium methoxide, ammonia or the like by a conventional method to obtain an alkyl oligosaccharide (alkyl glycoside).

【００１２】ここでアルキル化反応に使用できるアルコ
ール類は、直鎖状、分岐状のアルコール類であり、中で
も第一級アルコールが反応性の上から好ましい。さらに
アルキル化オリゴ糖を硫酸化剤で硫酸エステルとし、最
終的には生理的に許容できるナトリウム塩、カリウム
塩、マグネシウム塩などの塩の形で取り出すことができ
る。Alcohols that can be used in the alkylation reaction are linear and branched alcohols, and primary alcohols are preferred from the viewpoint of reactivity. Further, the alkylated oligosaccharide can be converted into a sulfuric acid ester with a sulfating agent and finally taken out in the form of a physiologically acceptable salt such as sodium salt, potassium salt or magnesium salt.

【００１３】ここで硫酸化剤として、三酸化硫黄ピリジ
ン錯体、ピペリジン硫酸（１−ピペリジンスルホン
酸）、クロルスルホン酸等の硫酸化剤を用いることがで
き、この硫酸化剤を非プロトン性溶媒中でアルキルオリ
ゴ糖の水酸基と反応させた後、金属水酸化物水溶液で処
理することによって目的物を得る事ができる。As the sulfating agent, a sulfating agent such as sulfur trioxide pyridine complex, piperidine sulfuric acid (1-piperidinesulfonic acid), and chlorosulfonic acid can be used. The sulfating agent is used in an aprotic solvent. The desired product can be obtained by reacting with the hydroxyl group of the alkyl oligosaccharide with and then treating with an aqueous metal hydroxide solution.

【００１４】硫酸化の程度を表す指標として硫酸化率が
ある。硫酸化率は硫酸化された水酸基の数を置換可能な
全水酸基の数で割り、硫酸化の程度を百分率で表す方法
である。この方法によれば、六炭糖５個よりなるアルキ
ル化オリゴ糖の場合、硫酸化可能な水酸基が全て硫酸化
された場合は、硫酸化率は１００％となる。The sulfation rate is an index showing the degree of sulfation. The sulfation rate is a method of dividing the number of sulfated hydroxyl groups by the number of all replaceable hydroxyl groups and expressing the degree of sulfation as a percentage. According to this method, in the case of an alkylated oligosaccharide consisting of 5 hexoses, the sulfation rate becomes 100% when all the sulfatable hydroxyl groups are sulfated.

【００１５】また、ここで２個の水酸基のみが硫酸化さ
れたと仮定すれば、硫酸化率は１２．５％である。If it is assumed here that only two hydroxyl groups are sulfated, the sulfation rate is 12.5%.

【００１６】以下、本発明の硫酸化アルキルオリゴ糖の
例を挙げる。尚、化合物中に硫酸化と記載したのは、硫
酸化率が１４．３％以上である硫酸化物を意味する。硫
酸化 ヘキシル β−Ｄ−グルコピラノシル（１→３）
−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ヘプチル β−
Ｄ−グルコピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド、硫酸化 オクチル β−Ｄ−グルコピラノシル
（１→３）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ノニ
ル β−Ｄ−グルコピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド、硫酸化 デシル β−Ｄ−グルコピラ
ノシル（１→３）−β−Ｄ−グルコピラノシド、Hereinafter, examples of the sulfated alkyl oligosaccharide of the present invention will be given. The term "sulfated" in the compound means a sulfated product having a sulfation ratio of 14.3% or more. Sulfated hexyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3)
-Β-D-glucopyranoside, sulfated heptyl β-
D-glucopyranosyl (1 → 3) -β-D-glucopyranoside, sulfated octyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3) -β-D-glucopyranoside, sulfated nonyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3) -β -D-glucopyranoside, sulfated decyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3) -β-D-glucopyranoside,

【００１７】硫酸化 ドデシル β−Ｄ−グルコピラノ
シル（１→３）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
ヘキサデシル β−Ｄ−グルコピラノシル（１→３）−
β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 オクタデシル β
−Ｄ−グルコピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド、硫酸化 エイコサニル β−Ｄ−グルコピラ
ノシル（１→３）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
ドコサニル β−Ｄ−グルコピラノシル（１→３）−
β−Ｄ−グルコピラノシド、Sulfated dodecyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3) -β-D-glucopyranoside, sulfated
Hexadecyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3)-
β-D-glucopyranoside, sulfated octadecyl β
-D-glucopyranosyl (1 → 3) -β-D-glucopyranoside, sulfated eicosanyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3) -β-D-glucopyranoside, sulfated docosanyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3)-
β-D-glucopyranoside,

【００１８】硫酸化 ２−エチルヘキシル β−Ｄ−グ
ルコピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド、硫酸化 ３−メチルペンチル β−Ｄ−グルコピラ
ノシル（１→３）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
ヘキシル β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）
｛−β−Ｄ−グルコピラノル（１→３）｝_n−β−Ｄ−
グルコピラノシド、硫酸化 ヘプチル β−Ｄ−グルコ
ピラノシル−（１→３）｛−β−Ｄ−グルコピラノル
（１→３）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
オクチル β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）｛−
β−Ｄ−グルコピラノル（１→３）｝_n−β−Ｄ−グル
コピラノシド、硫酸化 ノニル β−Ｄ−グルコピラノ
シル−（１→３）｛−β−Ｄ−グルコピラノル（１→
３）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 デシル
β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）｛−β−Ｄ−
グルコピラノル（１→３）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノ
シド、硫酸化 ドデシル β−Ｄ−グルコピラノシル−
（１→３）｛−β−Ｄ−グルコピラノル（１→３）｝_n
−β−Ｄ−グルコピラノシド、Sulfated 2-ethylhexyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3) -β-D-glucopyranoside, sulfated 3-methylpentyl β-D-glucopyranosyl (1 → 3) -β-D-glucopyranoside, sulfated Hexyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3)
{-Β-D-glucopyranor (1 → 3)} _n -β-D-
Glucopyranoside, sulfated heptyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3) {-β-D-glucopyranol (1 → 3)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated
Octyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3) {-
β-D-glucopyranor (1 → 3)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated nonyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3) {-β-D-glucopyranor (1 → 3)
3)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated decyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3) {-β-D-
Glucopyranol (1 → 3)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated dodecyl β-D-glucopyranosyl-
(1 → 3) {-β-D-glucopyranol (1 → 3)} _n
-Β-D-glucopyranoside,

【００１９】硫酸化 ヘキサデシル β−Ｄ−グルコピ
ラノシル−（１→３）｛−β−Ｄ−グルコピラノル（１
→３）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 オク
タデシル β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）｛−
β−Ｄ−グルコピラノル（１→３）｝_n−β−Ｄ−グル
コピラノシド、硫酸化 エイコサニル β−Ｄ−グルコ
ピラノシル−（１→３）｛−β−Ｄ−グルコピラノル
（１→３）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
ドコサニルβ−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）｛−
β−Ｄ−グルコピラノル（１→３）｝_n−β−Ｄ−グル
コピラノシド、硫酸化 ２−エチルヘキシル β−Ｄ−
グルコピラノシル−（１→３）｛−β−Ｄ−グルコピラ
ノル（１→３）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸
化 ３−メチルペンチル β−Ｄ−グルコピラノシル−
（１→３）｛−β−Ｄ−グルコピラノル（１→３）｝_n
−β−Ｄ−グルコピラノシド、尚、ここでｎは１〜２８
の自然数を表す。Sulfated hexadecyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3) {-β-D-glucopyranol (1
→ 3)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated octadecyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3) {-
β-D-glucopyranor (1 → 3)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated eicosanyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3) {-β-D-glucopyranor (1 → 3)} _n -β- D-glucopyranoside, sulfated
Docosanyl β-D-glucopyranosyl- (1 → 3) {-
β-D-glucopyranol (1 → 3)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated 2-ethylhexyl β-D-
Glucopyranosyl- (1 → 3) {-β-D-glucopyranor (1 → 3)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated 3-methylpentyl β-D-glucopyranosyl-
(1 → 3) {-β-D-glucopyranol (1 → 3)} _n
-Β-D-glucopyranoside, where n is 1 to 28
Represents the natural number of.

【００２０】硫酸化 ヘキシル β−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１
→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ヘプチル
β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−
ガラクトピラノシル（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド、硫酸化 オクチル β−Ｄ−ガラクトピラノシル
−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）
−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ノニル β−Ｄ
−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクト
ピラノシル（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫
酸化デシル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド、硫酸化 ドデシル β−Ｄ−ガラクト
ピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル
（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ヘキ
サデシル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−
β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）−β−Ｄ−グル
コピラノシド、Sulfated hexyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4) -β-D-galactopyranosyl (1
→ 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated heptyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4) -β-D-
Galactopyranosyl (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated octyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4) -β-D-galactopyranosyl (1 → 4)
-Β-D-glucopyranoside, sulfated nonyl β-D
-Galactopyranosyl- (1 → 4) -β-D-galactopyranosyl (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated decyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)
-Β-D-galactopyranosyl (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated dodecyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4) -β-D-galactopyranosyl (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated hexadecyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-
β-D-galactopyranosyl (1 → 4) -β-D-glucopyranoside,

【００２１】硫酸化 オクタデシル β−Ｄ−ガラクト
ピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル
（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化エイコ
サニル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β
−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド、硫酸化 ドコサニル β−Ｄ−ガラクトピ
ラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル
（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ２−
エチルヘキシル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→
４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）−β−Ｄ
−グルコピラノシド、硫酸化 ３−メチルペンチル β
−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラ
クトピラノシル（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド、硫酸化 ヘキシル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−
（１→４）−｛β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→
４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化ヘキシル
β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−｛β−Ｄ
−ガラクトピラノシル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド、Sulfated octadecyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4) -β-D-galactopyranosyl (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated eicosanyl β-D-galactopyra Nosyl- (1 → 4) -β
-D-galactopyranosyl (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated docosanyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4) -β-D-galactopyranosyl (1 → 4) -Β-D-glucopyranoside, sulfated 2-
Ethylhexyl β-D-galactopyranosyl- (1 →
4) -β-D-galactopyranosyl (1 → 4) -β-D
-Glucopyranoside, sulfated 3-methylpentyl β
-D-galactopyranosyl- (1 → 4) -β-D-galactopyranosyl (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated hexyl β-D-galactopyranosyl-
(1 → 4)-{β-D-galactopyranosyl (1 →
4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated hexyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-{β-D
-Galactopyranosyl (1 → 4)} _n -β-D-glucopyranoside,

【００２２】硫酸化 ヘプチル β−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル−（１→４）−｛β−Ｄ−ガラクトピラノシル
（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
オクチル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−
｛β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）｝_n−β−Ｄ
−グルコピラノシド、硫酸化 ノニル β−Ｄ−ガラク
トピラノシル−（１→４）−｛β−Ｄ−ガラクトピラノ
シル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸
化 デシルβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−
｛β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）｝_n−β−Ｄ
−グルコピラノシド、硫酸化 ドデシル β−Ｄ−ガラ
クトピラノシル−（１→４）−｛β−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫
酸化 ヘキサデシル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−
（１→４）−｛β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→
４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 オクタ
デシル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−
｛β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）｝_n−β−Ｄ
−グルコピラノシド、Sulfated heptyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-{β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated
Octyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-
{Β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n -β-D
-Glucopyranoside, sulfated nonyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-{β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated decyl β-D -Galactopyranosyl- (1 → 4)-
{Β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n -β-D
-Glucopyranoside, sulfated dodecyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-{β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated hexadecyl β-D -Galactopyranosyl-
(1 → 4)-{β-D-galactopyranosyl (1 →
4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated octadecyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-
{Β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n -β-D
-Glucopyranoside,

【００２３】硫酸化 エイコサニル β−Ｄ−ガラクト
ピラノシル−（１→４）−｛β−Ｄ−ガラクトピラノシ
ル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
ドコサニル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→
４）−｛β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）｝_n−
β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ２−エチルヘキシ
ル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−｛β−
Ｄ−ガラクトピラノシル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グル
コピラノシド、硫酸化 ３−メチルペンチル β−Ｄ−
ガラクトピラノシル−（１→４）−｛β−Ｄ−ガラクト
ピラノシル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド、尚、ここでｎは１〜２８の自然数を表す。Sulfated eicosanyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-{β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated docosanyl β-D -Galactopyranosyl- (1 →
4)-{β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n −
β-D-glucopyranoside, sulfated 2-ethylhexyl β-D-galactopyranosyl- (1 → 4)-{β-
D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated 3-methylpentyl β-D-
Galactopyranosyl- (1 → 4)-{β-D-galactopyranosyl (1 → 4)} _n -β-D-glucopyranoside, where n represents a natural number from 1 to 28.

【００２４】硫酸化 ヘキシル α−Ｄ−グルコピラノ
シル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
ヘプチル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−
β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 オクチル α−Ｄ
−グルコピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド、硫酸化 ノニル α−Ｄ−グルコピラノシル−
（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 デシ
ル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−
グルコピラノシド、硫酸化 ドデシル α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、
硫酸化 ヘキサデシル α−Ｄ−グルコピラノシル−
（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、Sulfated hexyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated heptyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4)-
β-D-glucopyranoside, sulfated octyl α-D
-Glucopyranosyl- (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated nonyl α-D-glucopyranosyl-
(1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated decyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4) -β-D-
Glucopyranoside, sulfated dodecyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4) -β-D-glucopyranoside,
Sulfated hexadecyl α-D-glucopyranosyl-
(1 → 4) -β-D-glucopyranoside,

【００２５】硫酸化 オクタデシル α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫
酸化 エイコサニル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１
→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ドコサニ
ル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−
グルコピラノシド、硫酸化 ２−エチルヘキシル α−
Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド、硫酸化 ３−メチルペンチル α−Ｄ−グル
コピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド、硫酸化 オクタデシル α−Ｄ−グルコピラノシル
−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ヘ
キシル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−｛α
−Ｄ−グルコピラノル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド、Sulfated octadecyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated eicosanyl α-D-glucopyranosyl- (1
→ 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated docosanyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4) -β-D-
Glucopyranoside, sulfated 2-ethylhexyl α-
D-glucopyranosyl- (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated 3-methylpentyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated octadecyl α-D-glucopyranosyl- ( 1 → 4) -β-D-glucopyranoside, sulfated hexyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4)-{α
-D-glucopyranol (1 → 4)} _n -β-D-glucopyranoside,

【００２６】硫酸化 ヘプチル α−Ｄ−グルコピラノ
シル−（１→４）−｛α−Ｄ−グルコピラノル（１→
４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 オクチ
ル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−｛α−Ｄ
−グルコピラノル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド、硫酸化 ノニル α−Ｄ−グルコピラノシル−
（１→４）−｛α−Ｄ−グルコピラノル（１→４）｝_n
−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 デシル α−Ｄ
−グルコピラノシル−（１→４）−｛α−Ｄ−グルコピ
ラノル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫
酸化 ドデシル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→
４）−｛α−Ｄ−グルコピラノル（１→４）｝_n−β−
Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ヘキサデシル α−Ｄ
−グルコピラノシル−（１→４）−｛α−Ｄ−グルコピ
ラノル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、Sulfated heptyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4)-{α-D-glucopyranol (1 →
4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated octyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4)-{α-D
-Glucopyranol (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated nonyl α-D-glucopyranosyl-
(1 → 4)-{α-D-glucopyranor (1 → 4)} _n
-Β-D-glucopyranoside, sulfated decyl α-D
-Glucopyranosyl- (1 → 4)-{α-D-glucopyranol (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated dodecyl α-D-glucopyranosyl- (1 →
4)-{α-D-glucopyranor (1 → 4)} _n -β-
D-glucopyranoside, sulfated hexadecyl α-D
-Glucopyranosyl- (1 → 4)-{α-D-glucopyranor (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside,

【００２７】硫酸化 オクタデシル α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−（１→４）−｛α−Ｄ−グルコピラノル（１
→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 エイ
コサニル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−
｛α−Ｄ−グルコピラノル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド、硫酸化 ドコサニル α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−（１→４）−｛α−Ｄ−グルコピラノル
（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化
２−エチルヘキシル α−Ｄ−グルコピラノシル−（１
→４）−｛α−Ｄ−グルコピラノル（１→４）｝_n−β
−Ｄ−グルコピラノシド、硫酸化 ３−メチルペンチル
α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−｛α−Ｄ−
グルコピラノル（１→４）｝_n−β−Ｄ−グルコピラノ
シド、尚、ここでｎは１〜２８の自然数を表す。Sulfated octadecyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4)-{α-D-glucopyranol (1
→ 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated eicosanyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4)-
{Α-D-glucopyranor (1 → 4)} _n- β-D-glucopyranoside, sulfated docosanyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4)-{α-D-glucopyranor (1 → 4)} _n- β -D-glucopyranoside, sulfated
2-ethylhexyl α-D-glucopyranosyl- (1
→ 4)-{α-D-glucopyranor (1 → 4)} _n -β
-D-glucopyranoside, sulfated 3-methylpentyl α-D-glucopyranosyl- (1 → 4)-{α-D-
Glucopyranol (1 → 4)} _n -β-D-glucopyranoside, where n represents a natural number of 1 to 28.

【００２８】次に、硫酸化アルキルオリゴ糖の製造方法
を更に詳しく説明する。以下に示す製造方法はオリゴ糖
を出発原料として４工程からなるものであるが、この方
法に限られるものではない。Next, the method for producing the sulfated alkyl oligosaccharide will be described in more detail. The production method shown below comprises four steps using an oligosaccharide as a starting material, but is not limited to this method.

【００２９】（第１工程）オリゴ糖のアセチル化 常法によりオリゴ糖の水酸基をアセチル化する。オリゴ
糖をピリジンに溶解させ、無水酢酸を加え、室温下で１
０〜２０時間攪拌させ反応を完了させる。あるいは、オ
リゴ糖を酢酸ソーダと無水酢酸によってアセチル化する
こともできる。その他、塩化アセチルを用いてアセチル
化する方法も使用できる。(Step 1) Acetylation of oligosaccharides The hydroxyl groups of oligosaccharides are acetylated by a conventional method. Dissolve oligosaccharides in pyridine, add acetic anhydride, and add 1 at room temperature.
The reaction is completed by stirring for 0 to 20 hours. Alternatively, the oligosaccharide can be acetylated with sodium acetate and acetic anhydride. In addition, a method of acetylating with acetyl chloride can also be used.

【００３０】（第２工程）アルキル化（グリコシデーシ
ョン） 各種の方法があるが、最も簡便な方法は酸触媒存在下に
アルコールと反応させる方法である。例えば、第１工程
でオリゴ糖糖をアセチル化して得られたオリゴ糖パーア
セテートをトルエン、塩化メチレン、１，２−ジクロロ
エチレン等の溶媒中で、例えば塩化鉄、塩化亜鉛、塩化
錫、三フッ化ほう素エーテルなどの単独もしくは混合し
たルイス酸触媒の存在下、アルコールと反応させる。
尚、このときのオリゴ糖パーアセテートとルイス酸触媒
とアルコールの混合比は、オリゴ糖パーアセテートに対
し、ルイス酸触媒を０．１〜２．０モル当量、好ましく
は０．１〜１．０モル当量を加え、更にアルコールを
１．０〜５．０モル当量、好ましくは１．０〜３．０モ
ル当量を加える。(Step 2) Alkylation (Glycosidation) There are various methods, but the simplest method is to react with alcohol in the presence of an acid catalyst. For example, the oligosaccharide peracetate obtained by acetylating the oligosaccharide sugar in the first step is treated with a solvent such as toluene, methylene chloride, 1,2-dichloroethylene, for example, iron chloride, zinc chloride, tin chloride, trifluoride. The reaction is performed with an alcohol in the presence of a Lewis acid catalyst such as boron ether, either alone or mixed.
The mixing ratio of the oligosaccharide peracetate, the Lewis acid catalyst and the alcohol at this time is 0.1 to 2.0 molar equivalents of the Lewis acid catalyst to the oligosaccharide peracetate, preferably 0.1 to 1.0. A molar equivalent is added, and further, an alcohol is added in an amount of 1.0 to 5.0 molar equivalent, preferably 1.0 to 3.0 molar equivalent.

【００３１】これらのオリゴ糖パーアセテート、ルイス
酸触媒、アルコールの混合物の反応は、不活性ガス中、
室温から溶媒の沸点、好ましくは２０〜８０℃にて行
う。尚、反応時間は反応に用いるオリゴ糖、アルコール
によって異なるが、一般には２〜３０時間、通常は３〜
１５時間である。反応後の後処理は、反応液を氷水中に
注ぎ、抽出、洗浄、脱水操作を経て粗生成物を得る。粗
生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精
製し、必要に応じ、更に再沈澱、再結晶させて、精製物
を製造する。このようなルイス酸による製造方法では、
主としてβ型アノマー（β型配糖体）を得る事ができ
る。また製造方法及び触媒の選択、あるいは精製工程の
操作により、α、βのアノマー比を調整することができ
る。The reaction of a mixture of these oligosaccharide peracetates, a Lewis acid catalyst and an alcohol is carried out in an inert gas,
The reaction is performed at room temperature to the boiling point of the solvent, preferably 20 to 80 ° C. Although the reaction time varies depending on the oligosaccharide and alcohol used in the reaction, it is generally 2 to 30 hours, usually 3 to
15 hours. In the post-treatment after the reaction, the reaction solution is poured into ice water, and extraction, washing and dehydration operations are performed to obtain a crude product. The crude product is purified by silica gel column chromatography and, if necessary, reprecipitated and recrystallized to produce a purified product. In such a production method using Lewis acid,
A β-type anomer (β-type glycoside) can be mainly obtained. Further, the anomer ratio of α and β can be adjusted by selecting the production method and the catalyst or operating the purification step.

【００３２】（第３工程）脱アセチル化 第２工程で製造したアルキル化オリゴ糖を、メタノール
等のアルコールに溶解させ、これにナトリウムメトキシ
ド／メタノール溶液を加え、一般に１〜５０時間、通常
１〜２４時間、室温で攪拌し、脱アセチル化反応を行
う。ここで注意を要することは、アルキル基の長さによ
っても異なるが、本法において用いるオリゴ糖の糖鎖の
長さが、概ね６〜７糖を越えると反応液中に沈澱を生じ
る事がある。この沈澱は、多くは脱アセチル化したアル
キル化オリゴ糖であるが、この沈澱の中には、時には完
全に脱アセチル化されずにアセチル基が１〜数個糖鎖に
残存した化合物が混入されている事がある。(Third step) Deacetylation The alkylated oligosaccharide produced in the second step is dissolved in an alcohol such as methanol, and a sodium methoxide / methanol solution is added thereto, and generally 1 to 50 hours, usually 1 Stir at room temperature for ~ 24 hours to perform the deacetylation reaction. What should be noted here depends on the length of the alkyl group, but if the sugar chain length of the oligosaccharide used in this method exceeds 6 to 7 sugars, precipitation may occur in the reaction solution. . This precipitate is mostly deacetylated alkylated oligosaccharides, but sometimes this precipitate is mixed with a compound in which one to several acetyl groups remained in the sugar chain without being completely deacetylated. There is something.

【００３３】したがって、アルキル化オリゴ糖を完全に
脱アセチル化させるには、ナトリウムメトキシド／メタ
ノール溶液のナトリウムメトキシドの量をアセチル基の
量に対し０．１〜１．０当量として、十分に反応させる
事が望ましい。反応後は水素イオンタイプの陽イオン交
換樹脂を用い、ナトリウムイオンを水素イオンに置き換
え、目的のアルキル化オリゴ糖を得る。更に、必要に応
じ再結晶、再沈澱等で精製する事もできる。またここ
で、ナトリウムメトキシドの代わりにアンモニアガスを
メタノールに飽和させた溶液を用いる事もできる。Therefore, in order to completely deacetylate the alkylated oligosaccharide, the amount of sodium methoxide in the sodium methoxide / methanol solution should be 0.1 to 1.0 equivalent with respect to the amount of acetyl groups. It is desirable to react. After the reaction, a hydrogen ion type cation exchange resin is used to replace sodium ions with hydrogen ions to obtain the desired alkylated oligosaccharide. Further, it can be purified by recrystallization, reprecipitation, etc., if necessary. Further, here, instead of sodium methoxide, a solution in which ammonia gas is saturated with methanol can be used.

【００３４】（第４工程）硫酸化 硫酸化法は種々の方法が知られており、いずれの方法を
用いてもよいが、ここでは三酸化硫黄ピリジン錯体法に
ついて説明する。(Step 4) Sulfation Various methods are known as the sulfation method, and any method may be used. Here, the sulfur trioxide pyridine complex method will be described.

【００３５】アルキル化オリゴ糖をピリジンに溶解し、
ここに三酸化硫黄ピリジン錯体を糖水酸基に対し必要当
量加える。完全に硫酸化させる場合は糖水酸基に対し、
１．２〜３当量の三酸化硫黄ピリジン錯体を用いるのが
好ましい。反応は、不活性ガス中で、室温〜１００℃、
好ましくは５０〜８５℃にて、０．５〜５時間、好まし
くは０．５〜２時間行い、生じた沈澱をピリジンから分
離する。分離した沈澱を更にピリジンで洗浄後、沈澱を
室温にて適量のイオン交換水に溶解させ、さらに水酸化
バリウム水溶液を加えてこの溶液のｐＨを７〜８に調整
する。このとき生じた沈澱を遠心分離して除去する。沈
澱物除去後の溶液をナトリウムイオン型イオン交換樹脂
（アンバーライトＩＲ−１２０Ｂ）カラムに通し、カラ
ム溶出液を濃縮、乾固後、イオン交換水に溶解させる。Dissolving the alkylated oligosaccharide in pyridine,
A required amount of sulfur trioxide pyridine complex is added to the sugar hydroxyl group. To completely sulphate the sugar hydroxyl groups,
It is preferred to use 1.2 to 3 equivalents of sulfur trioxide pyridine complex. The reaction is carried out in an inert gas at room temperature to 100 ° C,
It is preferably carried out at 50 to 85 ° C. for 0.5 to 5 hours, preferably 0.5 to 2 hours, and the formed precipitate is separated from pyridine. After washing the separated precipitate with pyridine, the precipitate is dissolved in a suitable amount of ion-exchanged water at room temperature, and an aqueous barium hydroxide solution is added to adjust the pH of the solution to 7 to 8. The precipitate formed at this time is removed by centrifugation. The solution after the precipitate is removed is passed through a sodium ion type ion exchange resin (Amberlite IR-120B) column, the column eluate is concentrated and dried, and then dissolved in ion exchange water.

【００３６】これにアセトンなどの有機溶媒を添加し
て、生じた沈澱を分離した後、濃縮乾燥させて目的とす
る硫酸化アルキルオリゴ糖を得る。また、水酸化バリウ
ムを加える代わりに、苛性ソーダ水溶液を加えてｐＨ９
〜１０とした後、減圧下に４０℃以下で濃縮乾固した
後、再度水溶液とし、限外ろ過、半透膜法、マイクロア
シライザー（旭化成（株）製電気式イオン交換膜）、イ
オン交換樹脂カラム等を用い、余剰の無機塩を分離する
事もできる。ここで得られた水溶液にメタノール、アセ
トン等を加えて、目的の硫酸化アルキルオリゴ糖ナトリ
ウム塩を沈澱させ、取得する。ピペリジン硫酸の場合で
もほぼ同様の処理にて目的物を得る事ができる。An organic solvent such as acetone is added to this, and the resulting precipitate is separated and concentrated and dried to obtain the desired sulfated alkyl oligosaccharide. Also, instead of adding barium hydroxide, a caustic soda solution was added to adjust the pH to 9
After setting to 10, after concentrating to dryness under reduced pressure at 40 ℃ or less, to make an aqueous solution again, ultrafiltration, semipermeable membrane method, micro acylizer (Electric ion exchange membrane manufactured by Asahi Kasei Co., Ltd.), ion exchange A resin column or the like can be used to separate the excess inorganic salt. Methanol, acetone, etc. are added to the aqueous solution obtained here to precipitate and obtain the target sodium sulfated alkyl oligosaccharide salt. Even in the case of piperidine sulfate, the target product can be obtained by almost the same treatment.

【００３７】本発明による持続性抗ウイルス液剤は、極
めて広い抗ウイルス活性を有し、遺伝情報としてＤＮＡ
を有するＤＮＡウイルス、例えば、アデノウイルス（Ａ
ｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）、ヘルペスウイルス（Ｈｅｒｐｅ
ｓｖｉｒｕｓ）、ポックスウイルス（Ｐｏｘｖｉｒｕ
ｓ）に有効であり、また、遺伝情報としてＲＮＡを有す
るＲＮＡウイルスであるピコルナウイルス（Ｐｉｃｏｒ
ｎａｖｉｒｕｓ）、トーガウイルス（Ｔｏｇａｖｉｒｕ
ｓ）、オルソミキソウイルス（Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉ
ｒｕｓ）、パラミキソウイルス（Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉ
ｒｕｓ）、レトロウイルス（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ）、
コロナウイルス（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）にも有効で
ある。The persistent antiviral liquid agent according to the present invention has an extremely broad antiviral activity, and uses DNA as the genetic information.
DNA virus having, for example, adenovirus (A
denovirus), herpes virus (Herpe)
svirus), poxvirus (Poxviru)
s) and is an RNA virus that has RNA as genetic information, Picornavirus (Picornavirus)
navirus), Togavirus (Togaviru)
s), orthomyxovirus (Orthomyxovir)
rus), paramyxovirus (Paramyxovi)
rus), retrovirus (Retrovirus),
It is also effective against coronavirus.

【００３８】また本発明による持続性抗ウイルス液剤
は、エンベロープを有するウイルス、例えば、ヘルペス
ウイルス（Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ）、ポックスウイル
ス（Ｐｏｘｖｉｒｕｓ）、トーガウイルス（Ｔｏｇａｖ
ｉｒｕｓ）、オルソミキソウイルス（Ｏｒｔｈｏｍｙｘ
ｏｖｉｒｕｓ）、パラミキソウイルス（Ｐａｒａｍｙｘ
ｏｖｉｒｕｓ）、レトロウイルス（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕ
ｓ）、コロナウイルス（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）に有
効であり、かつエンベロープを有しないウイルスである
アデノウイルス（Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）、ピコルナウ
イルス（Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｕｓ）にも有効である。
さらに、これらウイルスの複合感染症にも有効である。The persistent antiviral solution according to the present invention is a virus having an envelope, for example, herpesvirus (Herpesvirus), poxvirus (Poxvirus), togavirus (Togav).
irus), orthomyxovirus (Orthomyx)
ovirus), paramyxovirus (Paramyx)
ovirus), retrovirus (Retroviru)
s), coronavirus (Coronavirus), and adenovirus (Adenovirus) and picornavirus (Picornavirus), which are viruses without envelopes.
Furthermore, it is also effective against complex infections of these viruses.

【００３９】更に詳しくは、本発明による持続性抗ウイ
ルス液剤は、例えば以下に挙げる疾患の予防・治療に有
用である。即ち、エンベロープを有しないＤＮＡウイル
スであるアデノウイルス（Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）によ
り発症する咽頭炎、感冒症、結膜炎、下痢症。エンベロ
ープを有するＤＮＡウイルスであるヘルペスウイルス
（Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ）により発症する角膜炎、水
痘、帯状，***，性器ヘルペス。More specifically, the persistent antiviral solution according to the present invention is useful, for example, in the prevention and treatment of the diseases listed below. That is, pharyngitis, common cold, conjunctivitis, diarrhea caused by adenovirus (Adenovirus), which is a DNA virus having no envelope. Keratitis, chickenpox, cingulate, lip, genital herpes caused by herpesvirus (Herpesvirus) which is an enveloped DNA virus.

【００４０】エンベロープを有しないＲＮＡウイルスで
あるピコルナウイルス（Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｕｓ）の
ポリオウイルス（Ｐｏｌｉｏｖｉｒｕｓ）により発症す
る小児麻痺や、コキサッキウイルス（Ｃｏｘｓａｃｋｉ
ｅｖｉｒｕｓ）により発症する手足口病、心筋炎、心膜
炎、発疹、上気道炎や、ライノウイルス（Ｒｈｉｎｏｖ
ｉｒｕｓ）により発症する風邪。Pediatric paralysis caused by Poliovirus of Picornavirus, which is an RNA virus having no envelope, and Coxsacki virus (Coxacki)
hand-foot-and-mouth disease, myocarditis, pericarditis, rash, upper respiratory inflammation and rhinovirus (Rhinov)
A cold caused by irus).

【００４１】エンベロープを有するＤＮＡウイルスであ
るポックスウイルス（Ｐｏｘｖｉｒｕｓ）により発症す
る痘蒼。エンベロープを有するＲＮＡウイルスであるト
ーガウイルス（Ｔｏｇａｖｉｒｕｓ）により発症する日
本脳炎や風疹。エンベロープを有するＲＮＡウイルスで
あるオルソミキソウイルス（Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒ
ｕｓ）により発症するインフルエンザ。Smallpox developed by Poxvirus, which is an enveloped DNA virus. Japanese encephalitis and rubella caused by Toga virus which is an RNA virus having an envelope. Orthomyxovirus (Orthomyxovirus) which is an RNA virus having an envelope
Influenza caused by us).

【００４２】エンベロープを有するＲＮＡウイルスであ
るパラミキソウイルス（Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｕｓ）
により発症する気管支炎、麻疹、肺炎。エンベロープを
有するＲＮＡウイルスであるレトロウイルス（Ｒｅｔｒ
ｏｖｉｒｕｓ）のＨＩＶにより発症するエイズ。エンベ
ロープを有するＲＮＡウイルスであるコロナウイルス
（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）により発症する風邪。Paramyxovirus which is an RNA virus having an envelope
Bronchitis, measles, pneumonia caused by. A retrovirus (Retr) that is an RNA virus having an envelope
AIDS caused by HIV). A cold caused by coronavirus, which is an RNA virus having an envelope.

【００４３】本発明による持続性抗ウイルス液剤は、上
述したように広範囲なウイルスに対して抗ウイルス活性
を有しており、これらのウイルスを病原ウイルスとして
生じる上記の疾患またはそれらの複合感染症の治療に有
用である。更に詳しくは、本発明による抗ウイルス剤
は、特にエイズウイルスに対して優れた抗ウイルス活性
を有する。The persistent antiviral solution according to the present invention has antiviral activity against a wide range of viruses as described above, and is effective against the above-mentioned diseases caused by these viruses as pathogenic viruses or their complex infections. Useful for treatment. More specifically, the antiviral agent according to the present invention has excellent antiviral activity especially against AIDS virus.

【００４４】また、本発明の抗ウイルス剤のマウスにお
ける経口単回投与による急性毒性試験の結果では、いず
れも１．０ｇ／ｋｇの投与で全例とも生存していた。し
たがって、本発明による化合物の経口投与によるＬＤ₅₀
（５０％致死量）は、いずれも１ｇ／ｋｇ以上である。
また、マウス静脈内投与のＬＤ₅₀はいずれも０．７ｇ／
ｋｇ以上であり、本発明による抗ウイルス剤は、極めて
低毒性である。Further, the results of the acute toxicity test of the antiviral agent of the present invention in mice by single oral administration showed that all of them survived at the dose of 1.0 g / kg. Therefore, LD ₅₀ by oral administration of the compounds according to the invention
(50% lethal dose) is 1 g / kg or more.
The LD _{50 for} intravenous administration to mice was 0.7 g /
Since it is more than kg, the antiviral agent according to the present invention has extremely low toxicity.

【００４５】本発明による抗ウイルス液剤は、経口的ま
たは非経口的に投与することができる。液剤製造のため
の手段として、医薬品を製造するために用いる慣用の添
加剤を用いることができる。慣用の添加剤としては、例
えば水、生理食塩水、アルコール、ポリエチレングリコ
ール、グリセロールエステル、緩衝剤、等張化剤、防腐
剤、減菌剤、乳化剤、着色剤等があげられる。これら液
剤はアンプルまたはバイエル瓶に封入し、通常の保存状
態で安定であるが、更に有効成分の保存安定性を高める
上で、粉体のみをアンプルまたはバイエル瓶に封入し、
用時に注射用蒸留水をそれら容器内に注入、溶解して液
剤として用いることもできる。The antiviral solution according to the present invention can be administered orally or parenterally. As a means for producing a liquid agent, a conventional additive used for producing a drug can be used. Examples of conventional additives include water, physiological saline, alcohol, polyethylene glycol, glycerol ester, buffers, isotonicity agents, preservatives, sterilizing agents, emulsifiers, colorants and the like. These liquids are sealed in ampoules or Bayer bottles and are stable under normal storage conditions, but in order to further increase the storage stability of the active ingredient, only powders are sealed in ampoules or Bayer bottles.
At the time of use, distilled water for injection may be poured into these containers and dissolved to be used as a liquid preparation.

【００４６】本発明による抗ウイルス液剤の投与量は、
静脈内投与または皮下投与等の投与方法、投与回数、患
者の体重、病気の軽重により変化するが、投与量は体重
１Ｋｇ当たり０．１ｍｇから１００ｍｇ、好ましくは
０．５ｍｇから５０ｍｇを、一日に数回に分けて投与す
るか、連続静脈内滴注により投与することができる。The dose of the antiviral liquid agent according to the present invention is
It varies depending on the administration method such as intravenous administration or subcutaneous administration, the number of administrations, the body weight of the patient, the severity of the disease, but the dose is 0.1 mg to 100 mg, preferably 0.5 mg to 50 mg per kg body weight per day. It can be administered in several divided doses or by continuous intravenous infusion.

【００４７】以下に本発明の化合物を参考例により詳細
に説明する。 （参考合成例１）ドデシル β−D−マルトペンタオシ
ドの合成 ０．５５ｇの酢酸ソーダと１０ｍｌの無水酢酸を１００
ｍｌのフラスコにて加熱し、１．００３ｇのD−マルト
ペンタオースを少量ずつ加え、２時間加熱還流した。反
応液を１００ｇの氷に注ぎ、反応生成物を酢酸エチルで
抽出した。酢酸エチル層を芒硝で脱水後濃縮し、１．９
４ｇのシロップ状物を得た。酢酸エチル／ヘキサンより
結晶化して、パーアセチルマルトペンタオースを８２％
の収率で得た。核磁気共鳴スペクトルの結果α／β比は
１９／８１であった。The compounds of the present invention will be described in detail below with reference to Reference Examples. (Reference Synthesis Example 1) Synthesis of dodecyl β-D-maltopentaoside 0.55 g of sodium acetate and 10 ml of acetic anhydride were added to 100 parts.
The mixture was heated in a ml flask, 1.003 g of D-maltopentaose was added little by little, and the mixture was heated under reflux for 2 hours. The reaction solution was poured into 100 g of ice, and the reaction product was extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate layer was dehydrated with Glauber's salt and then concentrated to obtain 1.9.
4 g of syrup was obtained. Crystallized from ethyl acetate / hexane to give 82% of peracetylmaltopentaose
It was obtained in a yield of. As a result of the nuclear magnetic resonance spectrum, the α / β ratio was 19/81.

【００４８】次に、５０ｍｌの３口フラスコ内で、上記
のパーアセチルマルトペンタオース５００ｍｇと６０ｍ
ｇのｎ−ドデカノールを塩化メチレン２０ｍｌに溶解さ
せ、ここに四塩化錫１ｍｍｏｌを加え、窒素気流下室温
で４０時間反応させた。反応液を重曹水にあけ、セライ
トコートしたロートでろ過後、塩化メチレンで抽出し、
芒硝で脱水後濃縮した。さらにカラムクロマトグラフィ
ー（シリカゲル、ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、シ
リカゲル薄層クロマトグラフィーによる分析（酢酸エチ
ル／ヘキサン＝３／１（体積比））でＲｆ値０．７２の
留分を集め濃縮した。収量０．２６５ｇ、収率４９％、
融点８６〜９０℃であった。Next, in a 50 ml three-necked flask, 500 mg of the above-mentioned peracetylmaltopentaose and 60 m
g of n-dodecanol was dissolved in 20 ml of methylene chloride, 1 mmol of tin tetrachloride was added thereto, and the mixture was reacted at room temperature under a nitrogen stream for 40 hours. The reaction solution was poured into sodium bicarbonate water, filtered through a Celite-coated funnel, and extracted with methylene chloride.
It was dehydrated with Glauber's salt and then concentrated. Further purification by column chromatography (silica gel, hexane / ethyl acetate), and analysis by silica gel thin layer chromatography (ethyl acetate / hexane = 3/1 (volume ratio)) collected and concentrated a fraction having an Rf value of 0.72. . Yield 0.265 g, yield 49%,
The melting point was 86 to 90 ° C.

【００４９】この化合物は以下に示す核磁気共鳴スペク
トルよりドデシル パーアセチル−β−D−マルトペン
タオシドであると確認された。 核磁気共鳴スペクトル（プロトン） アルコールと結合している糖の環プロトン１、２位のケ
ミカルシフト値と結合定数 １位 ４．５１ｐｐｍ、Ｊ１，２＝８．０Ｈｚ ２位 ４．８０ｐｐｍ、Ｊ２，３＝９．６Ｈｚ 比旋光度 [α]_D＝＋１０６．３°（ｃ＝１．０／クロ
ロホルム）（２５℃） 次に、ここで得られたアルコール配糖体パーアセテート
の２３８ｍｇをメタノール１０ｍｌに溶解し、４．３ｍ
ｌの０．１Ｎナトリウムメトキシドメタノール溶液を室
温で添加し、２．５時間撹拌した後、イオン交換樹脂に
よってナトリウムイオンを除去した。イオン交換樹脂を
濾別後メタノールを濃縮乾固し、１３８ｍｇの目的物を
得た。 比旋光度 [α]_D＝＋１０８．０°（ｃ＝１．０／メタ
ノール）（２５℃） 融点１９７．４〜２１２．７℃This compound was confirmed to be dodecyl peracetyl-β-D-maltopentaoside from the nuclear magnetic resonance spectrum shown below. Nuclear Magnetic Resonance Spectra (Protons) Ring protons of sugar bound to alcohol Chemical shift values at 1st and 2nd positions and binding constants 1st position 4.51ppm, J1,2 = 8.0Hz 2nd position 4.80ppm, J2,3 = 9.6 Hz Specific rotation [α] _D = + 106.3 ° (c = 1.0 / chloroform) (25 ° C.) Next, 238 mg of the alcohol glycoside peracetate obtained here was dissolved in 10 ml of methanol. And 4.3m
l 0.1N sodium methoxide methanol solution was added at room temperature and stirred for 2.5 hours, and then sodium ions were removed by an ion exchange resin. After the ion exchange resin was filtered off, methanol was concentrated to dryness to obtain 138 mg of the desired product. Specific rotation [α] _D = + 108.0 ° (c = 1.0 / methanol) (25 ° C) Melting point 197.4 to 212.7 ° C

【００５０】（参考化合物例１） ドデシル β−D−マ
ルトペンタオシドの硫酸化（サンプルＭＰＳ−１） 参考合成例１と同様な方法で得られたドデシル β−D
−マルトペンタオシドの７９ｍｇを１０ｍｌの脱水した
ジメチルスルホキシドに溶解させ、ここに６３９ｍｇの
ピペリジン硫酸を加え、８０℃にて１．５時間撹拌し
た。その後、室温まで冷却後、脱イオン水３．３ｍｌを
加え３０分撹拌した。これを水酸化バリウムによってｐ
Ｈを７〜８とし、遠心分離によって固形物を分離し、ナ
トリウムイオン型のイオン交換樹脂カラムを通してナト
リウム塩とし、留出液を１１ｇに濃縮した。これを３５
０ｍｌのアセトンに注ぎ、生じた沈澱を遠心分離によっ
て集めアセトンで３回洗浄後、水より凍結乾燥し、目的
物１６３ｍｇを得た。分析の結果、硫酸化度は１．８
（硫酸化率 ５６．３％）であった。 比旋光度 [α]_D＝＋３４．１゜（Ｃ＝１．０／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 核磁気共鳴スペクトル（プロトン）（Ｄ₂Ｏ）（ｐｐ
ｍ） ０．８５ アルキルメチル １．１〜１．８ アルキルメチレン ３．５〜５．４ 糖骨格水素原子、酸素末端メチレン、
ＤＯＨ(Reference Compound Example 1) Sulfation of dodecyl β-D-maltopentaoside (Sample MPS-1) Dodecyl β-D obtained by the same method as in Reference Synthesis Example 1
-79 mg of maltopentaoside was dissolved in 10 ml of dehydrated dimethylsulfoxide, 639 mg of piperidine sulfate was added thereto, and the mixture was stirred at 80 ° C for 1.5 hours. Then, after cooling to room temperature, 3.3 ml of deionized water was added and stirred for 30 minutes. P with this by barium hydroxide
The H was adjusted to 7 to 8, the solid matter was separated by centrifugation, passed through a sodium ion type ion exchange resin column to give a sodium salt, and the distillate was concentrated to 11 g. 35 this
The mixture was poured into 0 ml of acetone, the resulting precipitate was collected by centrifugation, washed with acetone three times, and then freeze-dried from water to obtain 163 mg of the desired product. As a result of the analysis, the sulfation degree is 1.8.
(Sulfation rate 56.3%). Specific rotation [α] _D = + 34.1 ° (C = 1.0 / H ₂ O)
(27 ° C.) Nuclear magnetic resonance spectrum (proton) (D ₂ O) (pp
m) 0.85 alkylmethyl 1.1-1.8 alkylmethylene 3.5-5.4 sugar skeleton hydrogen atom, oxygen-terminated methylene,
DOH

【００５１】（参考化合物例２） ドデシル β−D−マ
ルトペンタオシドの硫酸化（サンプルＭＰＳ−２） 参考化合物例１と同様な方法で得られたドデシル β−
D−マルトペンタ オシドの１００ｍｇを５ｍｌの脱水ジ
メチルスルホキシドに溶解させ、ここに２６５ｍｇのピ
ペリジン硫酸を加え、８０℃にて１．５時間撹拌した。
その後、室温まで冷却後、脱イオン水４．０ｍｌを加え
３０分撹拌した。これを水酸化バリウムによってｐＨを
７〜８とし、遠心分離によって固形物を分離し、ナトリ
ウムイオン型のイオン交換樹脂カラムを通してナトリウ
ム塩とし、留出液を約７ｇに濃縮した。これを３５０ｍ
ｌのアセトンに注ぎ、生じた沈澱を遠心分離によって集
め、アセトンで３回洗浄後、水より凍結乾燥し目的物１
５３ｍｇを得た。分析の結果、硫酸化度は２．１（硫酸
化率 ６５．６％）であった。(Reference compound example 2) Sulfation of dodecyl β-D-maltopentaoside (sample MPS-2) Dodecyl β-obtained by the same method as in reference compound example 1
100 mg of D-maltopentaoside was dissolved in 5 ml of dehydrated dimethyl sulfoxide, 265 mg of piperidine sulfuric acid was added thereto, and the mixture was stirred at 80 ° C. for 1.5 hours.
Then, after cooling to room temperature, 4.0 ml of deionized water was added and stirred for 30 minutes. The pH of this was adjusted to 7 to 8 with barium hydroxide, the solid was separated by centrifugation, passed through a sodium ion type ion exchange resin column to give a sodium salt, and the distillate was concentrated to about 7 g. This is 350m
The resulting precipitate was collected by centrifugation, washed with acetone three times, and then freeze-dried from water to give the desired product 1.
53 mg was obtained. As a result of the analysis, the sulfation degree was 2.1 (sulfation rate 65.6%).

【００５２】（参考合成例２） ドデシル α−D−マ
ルトペンタオシドの合成 参考合成例１におけるドデシル パーアセチル−β−D
−マルトペンタオシドのシリカゲルカラムにおいて、薄
層クロマトグラフィーのＲｆ値が０．５４の成分を集め
濃縮した。収量８９ｍｇ、収率１７％であった。 融点８２．１〜９３．５℃ 核磁気共鳴スペクトル アルコールと結合している糖の環プロトン１位のケミカ
ルシフト値と結合定数 １位 ４．８３ｐｐｍ、Ｊ１，２＝４．０Ｈｚ 比旋光度 [α]_D＝＋１２３．２°（ｃ＝１．０／クロ
ロホルム）（２５℃） 次に、４．５ｇのD-マルトペンタオースから参考合成例
１と同様の方法で、ドデシル D−マルトペンタオシド
を合成し、更にカラムクロマトグラフィーによる分離精
製により、α体４００ｍｇを得た。その１９４ｍｇをメ
タノール３０ｍｌに溶解し、３．６ｍｌの０．１Ｎナト
リウムメトキシドメタノール溶液を室温で添加し、２．
５時間撹拌した後、イオン交換樹脂によってナトリウム
イオンを除去した。イオン交換樹脂を濾別後、メタノー
ルを濃縮し十分乾燥後 １１６ｍｇの粗生成物を得た。
これをメタノール／アセトンから再沈澱させ目的物８４
ｍｇを得た。 比旋光度 [α]_D＝＋１３０．４°（ｃ＝１．０／メタ
ノール）（２５℃） 融点１７６〜１９４℃Reference Synthesis Example 2 Synthesis of dodecyl α-D-maltopentaoside Dodecyl peracetyl-β-D in Reference Synthesis Example 1
-On a silica gel column of maltopentaoside, components having an Rf value of 0.54 in thin layer chromatography were collected and concentrated. The yield was 89 mg and the yield was 17%. Melting point 82.1-93.5 ° C Nuclear magnetic resonance spectrum Chemical shift value of 1st position of ring proton of sugar bound to alcohol and binding constant 1st position of 4.83ppm, J1,2 = 4.0Hz Specific optical rotation [α ] _D = + 123.2 ° (c = 1.0 / chloroform) (25 ° C.) Next, dodecyl D-maltopentaoside was prepared from 4.5 g of D-maltopentaose in the same manner as in Reference Synthesis Example 1. Was synthesized and further purified by column chromatography to obtain 400 mg of α-form. 194 mg thereof was dissolved in 30 ml of methanol, 3.6 ml of 0.1N sodium methoxide methanol solution was added at room temperature, and 2.
After stirring for 5 hours, sodium ions were removed by an ion exchange resin. After filtering off the ion exchange resin, methanol was concentrated and sufficiently dried to obtain 116 mg of a crude product.
This was reprecipitated from methanol / acetone to obtain the target compound 84.
mg was obtained. Specific rotation [α] _D = + 130.4 ° (c = 1.0 / methanol) (25 ° C) Melting point 176-194 ° C

【００５３】（参考化合物例３） ドデシル α−D−マ
ルトペンタオシドの硫酸化（サンプルＭＰＳ−３） 参考合成実施例２と同様にして得られたドデシル α−
D−マルトペンタオシドの１０８ｍｇを２０ｍｌの脱水
ジメチルスルホキシドに溶解させ、ここに８５９ｍｇの
ピペリジン硫酸を加え、８０℃にて１．５時間撹拌し
た。その後室温まで冷却後、脱イオン水５．５ｍｌを加
え３０分撹拌した。これを水酸化バリウムによってｐＨ
を７〜８とし、遠心分離によって固形物を分離し、ナト
リウムイオン型のイオン交換樹脂カラムを通してナトリ
ウム塩とし、留出液を１８ｇに濃縮した。これを３５０
ｍｌのアセトンに注ぎ、生じた沈澱を遠心分離によって
集め、アセトンで３回洗浄後、水より凍結乾燥し目的物
２２８ｍｇを得た。分析の結果、硫酸化度は２．８（硫
酸化率 ８７．５％）であった。 比旋光度 [α]_D＝＋５３．０゜（ｃ＝１．０／Ｈ₂Ｏ）
（２５℃） 核磁気共鳴スペクトル（プロトン）（Ｄ₂Ｏ）（ｐｐ
ｍ） ０．８５ アルキルメチル １．１〜１．８ アルキルメチレン ３．５〜５．５ 糖骨格水素原子、酸素末端メチレン、
ＤＯＨ(Reference Compound Example 3) Sulfation of dodecyl α-D-maltopentaoside (Sample MPS-3) Dodecyl α-obtained in the same manner as in Reference Synthesis Example 2
108 mg of D-maltopentaoside was dissolved in 20 ml of dehydrated dimethylsulfoxide, 859 mg of piperidine sulfuric acid was added thereto, and the mixture was stirred at 80 ° C. for 1.5 hours. Then, after cooling to room temperature, 5.5 ml of deionized water was added and stirred for 30 minutes. PH with barium hydroxide
Was 7 to 8 and the solid was separated by centrifugation, passed through a sodium ion type ion exchange resin column to give a sodium salt, and the distillate was concentrated to 18 g. 350 this
The mixture was poured into ml of acetone, the resulting precipitate was collected by centrifugation, washed with acetone three times, and then freeze-dried from water to obtain 228 mg of the desired product. As a result of the analysis, the sulfation degree was 2.8 (sulfation rate 87.5%). Specific rotation [α] _D = + 53.0 ° (c = 1.0 / H ₂ O)
(25 ° C.) Nuclear magnetic resonance spectrum (proton) (D ₂ O) (pp
m) 0.85 alkylmethyl 1.1-1.8 alkylmethylene 3.5-5.5 sugar skeleton hydrogen atom, oxygen-terminated methylene,
DOH

【００５４】（参考合成例３） ドデシル β−D−ラ
ミナリペンタオシドの合成 無水酢酸ソーダ２．３６ｇと無水酢酸８０ｍｌを冷却
管、温度計及び固体投入口付きの１００ｍｌ三口フラス
コに入れ沸点近くまで加熱した。(Reference Synthesis Example 3) Synthesis of dodecyl β-D-laminaripentaoside 2.36 g of sodium acetate anhydrous and 80 ml of acetic anhydride were placed in a 100 ml three-necked flask equipped with a cooling tube, a thermometer and a solid inlet, and the boiling point was close to the boiling point. Heated up.

【００５５】ここにラミナリペンタオース４．０ｇを少
量ずつ添加した後、１時間加熱還流させた。その後、反
応液を氷２５０ｇに注ぎ、３時間撹拌した。これをクロ
ロホルムで抽出し、重曹水及び飽和食塩水で洗浄し、溶
媒留去後、得られたシロップをエタノールに溶解し、活
性炭で脱色後、結晶化させエタノールから再結晶して
５．５２ｇの結晶を得た。参考合成実施例１と同様に核
磁気共鳴スペクトルからα／β比は２２／７８であっ
た。Laminaripentaose (4.0 g) was added thereto little by little, and the mixture was heated under reflux for 1 hour. Then, the reaction solution was poured into 250 g of ice and stirred for 3 hours. This was extracted with chloroform, washed with aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated brine, the solvent was distilled off, the obtained syrup was dissolved in ethanol, decolorized with activated carbon, crystallized and recrystallized from ethanol to give 5.52 g. Crystals were obtained. The α / β ratio was 22/78 from the nuclear magnetic resonance spectrum as in Reference Synthesis Example 1.

【００５６】参考合成例１と同様に、５０ｍｌの３口フ
ラスコ内で、得られたパーアセチルラミナリペンタオー
ス５６８ｍｇと８３ｍｇのｎ−ドデカノールを塩化メチ
レン２０ｍｌに溶解させ、ここに四塩化錫０．０４３ｍ
ｌを加え、窒素気流下室温で４時間反応させた。反応液
を、重曹水にあけ、セライトコートしたロートでろ過
後、塩化メチレンで抽出し、芒硝で脱水後濃縮した。さ
らにカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン
／酢酸エチル）で精製し、シリカゲル薄層クロマトグラ
フィーによる分析（酢酸エチル／ヘキサン＝３／１（体
積比））でＲｆ値０．７２の留分を集め濃縮した。収量
２２９ｍｇ、収率３７％であった。 比旋光度 [α]_D
＝−５２．９°（ｃ＝１．０／クロロホルム）（２５
℃） 融点９４．１〜１０１．３℃ 次に参考合成例１と同様にナトリウムメトキシド／メタ
ノール溶液を用いて脱アセチルを行い、１６４ｍｇのア
セテートから９４ｍｇの目的物を得た。 比旋光度 [α]_D＝−１２．５°（ｃ＝１，０／メタノ
ール）（４０℃） 融点１８０〜１９５℃In the same manner as in Reference Synthesis Example 1, in a 50 ml three-necked flask, the obtained peracetyllaminaripentaose 568 mg and 83 mg of n-dodecanol were dissolved in 20 ml of methylene chloride, and tin tetrachloride (0.2 ml) was added thereto. 043m
1 was added and the reaction was carried out at room temperature for 4 hours under a nitrogen stream. The reaction mixture was poured into aqueous sodium hydrogen carbonate, filtered through a Celite-coated funnel, extracted with methylene chloride, dehydrated with sodium sulfate and concentrated. Further purification by column chromatography (silica gel, hexane / ethyl acetate), and analysis by silica gel thin layer chromatography (ethyl acetate / hexane = 3/1 (volume ratio)) collected and concentrated a fraction having an Rf value of 0.72. . The yield was 229 mg and the yield was 37%. Specific rotation [α] _D
= -52.9 ° (c = 1.0 / chloroform) (25
C.) Melting point 94.1 to 101.3 [deg.] C. Then, deacetylation was performed using a sodium methoxide / methanol solution in the same manner as in Reference Synthesis Example 1 to obtain 94 mg of the desired product from 164 mg of acetate. Specific rotation [α] _D = -12.5 ° (c = 1,0 / methanol) (40 ° C) Melting point 180-195 ° C

【００５７】（参考化合物例４） ドデシル β−D−
ラミナリペンタオシドの硫酸エステルナトリウム塩の合
成（サンプルＬＰＳ−１） 参考化合物例１と同様に参考合成例３で得られたドデシ
ル β−D−ラミナリペンタオシド１０２ｍｇ、ピペリ
ジン硫酸８７７ｍｇ、ジメチルスルホキシド１０ｍｌか
ら１８５ｍｇの目的物を得た。分析の結果、硫酸化度は
２．５（硫酸化率 ７８．１％）であった。 比旋光度 [α]_D＝−７．９゜ （ｃ＝１．０／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 核磁気共鳴スペクトル（プロトン）（Ｄ₂Ｏ）（ｐｐ
ｍ） ０．８５ アルキルメチル １．１〜１．８ アルキルメチレン ３．５〜５．５ 糖骨格水素原子、酸素末端メチレン、
ＤＯＨ(Reference compound example 4) Dodecyl β-D-
Synthesis of Laminaripentaoside Sulfate Ester Sodium Salt (Sample LPS-1) Dodecyl β-D-laminaripentaoside 102 mg, piperidine sulfate 877 mg, dimethyl obtained in Reference Synthesis Example 3 in the same manner as in Reference Compound Example 1. 185 mg of the desired product was obtained from 10 ml of sulfoxide. As a result of the analysis, the sulfation degree was 2.5 (sulfation rate 78.1%). Specific rotation [α] _D = -7.9 ° (c = 1.0 / H ₂ O)
(27 ° C.) Nuclear magnetic resonance spectrum (proton) (D ₂ O) (pp
m) 0.85 alkylmethyl 1.1-1.8 alkylmethylene 3.5-5.5 sugar skeleton hydrogen atom, oxygen-terminated methylene,
DOH

【００５８】（参考化合物例５） ドデシル β−D−
ラミナリペンタオシドの硫酸エステルナトリウム塩の合
成（サンプルＬＰＳ−１−１） 参考合成例３と同様に合成したドデシル β−D−ラミ
ナリペンタオシド１００ｍｇを脱水ピリジン１０ｍｌに
溶解させ、三酸化硫黄ピリジン錯体３０６ｍｇを加え、
１時間７０℃にて攪拌した。その後、放冷し、沈澱と上
澄みのピリジン層をデカンテーシヨンにより分離し、沈
澱を更にピリジンで洗浄し、乾燥後３２７ｍｇの残渣を
得た。これを水に溶解し、２．５規定苛性ソーダ水溶液
によりｐＨ９．５とした後、マイクロアシライザー（旭
化成（株）製、卓上脱塩装置、ＡＣ１１０−１０膜使
用）により無機塩を除去精製した。マイクロアシライザ
ー処理後の水溶液をアセトンから再沈澱させ、この沈澱
を小量の純水に溶解させた後、凍結乾燥させ２５４ｍｇ
の目的物を得た。 分析の結果、硫酸化度は３．０（硫
酸化率 ９３．８％）であった。 比旋光度 [α]_D＝−６．２゜ （ｃ＝１．０／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 核磁気共鳴スペクトル（プロトン）（Ｄ₂Ｏ）（ｐｐ
ｍ） ０．８５ アルキルメチル １．１〜１．８ アルキルメチレン ３．５〜５．５ 糖骨格水素原子、酸素末端メチレン、
ＤＯＨ 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ）（ｃｍ^-1）主要吸収値 ２９６０，１６４０，１２４０，１１５０，１０００，
８１０，６３０(Reference compound example 5) Dodecyl β-D-
Synthesis of Sulfate Sodium Salt of Laminaripentaoside (Sample LPS-1-1) 100 mg of dodecyl β-D-laminaripentaoside synthesized in the same manner as in Reference Synthesis Example 3 was dissolved in 10 ml of dehydrated pyridine, and trioxidation was performed. 306 mg of sulfur pyridine complex was added,
The mixture was stirred for 1 hour at 70 ° C. Then, the mixture was allowed to cool, the precipitate and the supernatant pyridine layer were separated by decantation, and the precipitate was further washed with pyridine and dried to obtain a residue of 327 mg. This was dissolved in water and adjusted to pH 9.5 with a 2.5N caustic soda aqueous solution, and then an inorganic salt was removed and purified by a microacylizer (manufactured by Asahi Kasei Co., Ltd., a desktop desalting device, using AC110-10 membrane). The aqueous solution after the micro-acylizer treatment was reprecipitated from acetone, the precipitate was dissolved in a small amount of pure water, and then freeze-dried to give 254 mg.
I got the object. As a result of the analysis, the degree of sulfation was 3.0 (sulfation rate 93.8%). Specific rotation [α] _D = -6.2 ° (c = 1.0 / H ₂ O)
(27 ° C.) Nuclear magnetic resonance spectrum (proton) (D ₂ O) (pp
m) 0.85 alkylmethyl 1.1-1.8 alkylmethylene 3.5-5.5 sugar skeleton hydrogen atom, oxygen-terminated methylene,
DOH infrared absorption spectrum (KBr) (cm ^-1 ) main absorption value 2960, 1640, 1240, 1150, 1000,
810,630

【００５９】（参考化合物例６） ｎ−ヘキサデシル
β−ラミナリペンタオシドの硫酸エステルナトリウム塩
の合成（サンプルＬＰＳ−２） 参考合成例１と同様の方法を用い、β−ラミナリペンタ
オースを、アルコールとしてｎ−ヘキサデカノールを用
いてエーテル化、脱アセチル化してｎ−ヘキサデシル
β−ラミナリペンタオシドを合成した。続いて参考化合
物例４と同様に硫酸化し、目的物を得た。分析の結果、
硫酸化度は２．０（硫酸化率 ６２．５％）であった。
比旋光度 [α]_D＝−５．４゜（ｃ＝０．２５／Ｈ₂Ｏ）
（２５℃）(Reference compound example 6) n-hexadecyl
Synthesis of Sulfate Ester Sodium Salt of β-Laminaripentaoside (Sample LPS-2) Using the same method as in Reference Synthesis Example 1, β-laminaripentaose was ethered with n-hexadecanol as an alcohol. N-hexadecyl
β-laminaripentaoside was synthesized. Subsequently, it was sulphated in the same manner as in Reference Compound Example 4 to obtain the desired product. The result of the analysis,
The degree of sulfation was 2.0 (sulfation rate 62.5%).
Specific rotation [α] _D = -5.4 ° (c = 0.25 / H ₂ O)
(25 ° C)

【００６０】（参考化合物例７）ｎ−デシル β−ラミ
ナリペンタオシドの硫酸エステルナトリウム塩の合成
（サンプルＬＰＳ−３） 参考化合物例６と同様の方法で、アルコールとしてｎ−
デカノールを用いてエーテル化、脱アセチル化、硫酸化
して目的物を得た。分析の結果、硫酸化度は１．８（硫
酸化率 ５６．３％）であった。 比旋光度 [α]_D＝−６．２゜（ｃ＝０．２５／Ｈ₂Ｏ）
（２５℃）(Reference compound example 7) Synthesis of sulfuric acid sodium salt of n-decyl β-laminaripentaoside (sample LPS-3) In the same manner as in reference compound example 6, n-as alcohol was used.
Etherification, deacetylation and sulfation with decanol gave the desired product. As a result of the analysis, the sulfation degree was 1.8 (sulfation rate 56.3%). Specific rotation [α] _D = -6.2 ° (c = 0.25 / H ₂ O)
(25 ° C)

【００６１】（参考化合物例８） ドデシル ４−ガラ
クトシル−β−D−ラクトシドの硫酸エステルナトリウ
ム塩の合成（サンプルＧＴＳ−１） 参考合成例１と同様の方法を用いて、４−ガラクトシル
−β−D−ラクトースから合成したドデシル ４−ガラ
クトシル−β−D−ラクトシド０．５５１ｇをピリジン
３８ｍｌに溶解させ８１℃に加熱した。三酸化硫黄ピリ
ジン錯体３．６４ｇを加え、１．５時間反応させ、室温
に冷却後、イオン交換水１１ｍｌを添加し、更に１．５
時間攪拌した。水酸化バリウム水溶液を加え、液のｐＨ
を７．８〜８．０に調製した。この溶液を遠心分離し沈
澱物を除去後、ナトリウムイオンタイプのイオン交換樹
脂（アンバーライトＩＲ−１２０Ｂ）カラムを通した。
カラム流出液を減圧下でほぼ完全に濃縮し、溶媒を留去
した後、イオン交換水約１０ｇに溶解後、アセトン２５
０ｍｌ中に注ぎ硫酸化物を沈澱させた。沈澱物は遠心分
離によって分離し、アセトン洗浄後、減圧下で乾燥し、
０．７２ｇの目的物を得た。分析の結果、硫酸化度は
２．６（硫酸化率 ７８．０％）であった。 比旋光度[α]_D＝＋２６．９゜（ｃ＝０．５８／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ）主要吸収値（ｃｍ^-1） ３４６０，２９３０，１６４０，１２４０，１０２０，
８２０，５８０Reference Compound Example 8 Synthesis of Sulfate Sodium Salt of Dodecyl 4-galactosyl-β-D-lactoside (Sample GTS-1) Using the same method as in Reference Synthesis Example 1, 4-galactosyl-β- 0.551 g of dodecyl 4-galactosyl-β-D-lactoside synthesized from D-lactose was dissolved in 38 ml of pyridine and heated to 81 ° C. 3.64 g of sulfur trioxide pyridine complex was added and reacted for 1.5 hours. After cooling to room temperature, 11 ml of ion-exchanged water was added, and further 1.5
Stir for hours. Add a barium hydroxide aqueous solution to adjust the pH of the solution.
Was prepared to 7.8-8.0. The solution was centrifuged to remove the precipitate, and then passed through a sodium ion type ion exchange resin (Amberlite IR-120B) column.
The column effluent was almost completely concentrated under reduced pressure, the solvent was distilled off, the residue was dissolved in about 10 g of ion-exchanged water, and then the acetone 25
Pour into 0 ml to precipitate the sulphate. The precipitate is separated by centrifugation, washed with acetone and dried under reduced pressure.
0.72 g of the desired product was obtained. As a result of the analysis, the degree of sulfation was 2.6 (sulfation rate 78.0%). Specific rotation [α] _D = + 26.9 ° (c = 0.58 / H ₂ O)
(27 ° C.) Infrared absorption spectrum (KBr) Main absorption value (cm ⁻¹ ) 3460, 2930, 1640, 1240, 1020,
820,580

【００６２】（参考化合物例９） ドデシル ４−ガラ
クトシル−β−D−ラクトシドの硫酸エステルナトリウ
ム塩の合成（サンプルＧＴＳ−２） 参考化合物例８と同様にして、ドデシル ４−ガラクト
シル−β−D−ラクトシド０．５０ｇをピリジン３８ｍ
ｌに溶解させ８１℃に加熱した。以下参考化合物例８と
全く同様に反応、後処理して目的物を０．６８ｇ得た。
分析の結果、硫酸化度は２．８（硫酸化率 ８４．０
％）であった。 比旋光度[α]_D＝＋２４．５゜（ｃ＝０．５１／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃）(Reference compound example 9) Synthesis of sulfate sodium salt of dodecyl 4-galactosyl-β-D-lactoside (sample GTS-2) In the same manner as in reference compound example 8, dodecyl 4-galactosyl-β-D- 0.50 g of lactoside to 38 m of pyridine
It was dissolved in 1 and heated to 81 ° C. Thereafter, the reaction and post-treatment were carried out in exactly the same manner as in Reference Compound Example 8 to obtain 0.68 g of the desired product.
As a result of the analysis, the degree of sulfation was 2.8 (sulfation rate 84.0
%)Met. Specific rotation [α] _D = + 24.5 ° (c = 0.51 / H ₂ O)
(27 ° C)

【００６３】（参考化合物例１０） ドデシル オリゴ
ガラクトシル−β（１→４）グルコシドの硫酸エステル
ナトリウム塩の合成（サンプルＧＴＳ−３） β（１→４）タイプのガラクトオリゴ糖（糖鎖３〜４）
の還元末端にグルコースの４位がβ結合したオリゴ糖を
参考合成例１と同様の方法でパーアセチル化し、ドデカ
ノールを用いて、配糖体化した後、ナトリウムメトキシ
ド／メタノールで脱アセチル化（収率９０％）した。 比旋光度[α]_D=＋４６．８゜（ｃ＝０．５２／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） これを参考化合物例８と同様に硫酸化して、０．５１ｇ
の原料から０．６１ｇの目的物を得た。分析の結果、硫
酸化度は３．０（硫酸化率 ９３．１％）であった。 比旋光度[α]_D=＋２４．５゜（ｃ＝０．５２／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 核磁気共鳴スペクトル（プロトン）（Ｄ₂Ｏ）（ｐｐ
ｍ） ０．８５ アルキルメチル １．１〜１．８ アルキルメチレン ３．３〜５．３ 糖水素原子、アルコキシ末端メチレ
ン、ＤＯＨ 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ）主要吸収値（ｃｍ^-1） ３４６０，２９３０，１６３０，１２４０，１０１０，
８２０，５８０Reference Example 10 Synthesis of sulfate sodium salt of dodecyl oligogalactosyl-β (1 → 4) glucoside (Sample GTS-3) β (1 → 4) type galactooligosaccharide (sugar chain 3 to 4)
An oligosaccharide in which the 4-position of glucose was β-bonded to the reducing end of was peracetylated in the same manner as in Reference Synthesis Example 1, glycosided with dodecanol, and then deacetylated with sodium methoxide / methanol ( The yield was 90%). Specific rotation [α] _D = + 46.8 ° (c = 0.52 / H ₂ O)
(27 ° C) This was sulphated in the same manner as in Reference Compound Example 8 to give 0.51 g.
From this raw material, 0.61 g of the desired product was obtained. As a result of the analysis, the sulfation degree was 3.0 (sulfation rate 93.1%). Specific rotation [α] _D = + 24.5 ° (c = 0.52 / H ₂ O)
(27 ° C.) Nuclear magnetic resonance spectrum (proton) (D ₂ O) (pp
m) 0.85 alkylmethyl 1.1 to 1.8 alkylmethylene 3.3 to 5.3 sugar hydrogen atom, alkoxy terminal methylene, DOH infrared absorption spectrum (KBr) main absorption value (cm ⁻¹ ) 3460, 2930, 1630, 1240, 1010,
820,580

【００６４】（参考化合物例１１） オクタデシル オ
リゴガラクトシル−β（１→４）グルコシドの硫酸エス
テルナトリウム塩の合成（サンプルＧＴＳ−４） β（１→４）結合したガラクトオリゴ糖（糖鎖３〜４）
の末端還元糖にグルコースの４位がβ結合したオリゴ糖
に、アルコールとしてオクタデカノールを用い、他は参
考化合物例１０と全く同様に反応処理してオクタデカノ
ール配糖体を得た。 比旋光度[α]_D=＋４９．９゜（ｃ＝０．５０／ＭｅＯ
Ｈ）（２７℃） 引き続き参考化合物例１０と同様に硫酸化を実施して
０．５２ｇの原料から０．４４ｇの目的物を得た。(Reference compound example 11) Synthesis of sodium sulfate of octadecyl oligogalactosyl-β (1 → 4) glucoside (sample GTS-4) β (1 → 4) -linked galactooligosaccharide (sugar chains 3 to 4)
Octadecanol glycoside was obtained by the same reaction treatment as in Reference Compound Example 10 except that octadecanol was used as the alcohol in the oligosaccharide in which the 4-position of glucose was β-bonded to the terminal reducing sugar of. Specific rotation [α] _D = + 49.9 ° (c = 0.50 / MeO
H) (27 ° C.) Subsequently, sulfation was carried out in the same manner as in Reference Compound Example 10 to obtain 0.44 g of the desired product from 0.52 g of the raw material.

【００６５】分析の結果、硫酸化度は２．２（硫酸化率
６８．３％）であった。 比旋光度[α]_D=＋２３．１゜（ｃ＝０．５８／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 核磁気共鳴スペクトル（プロトン）（Ｄ₂Ｏ）（ｐｐ
ｍ） ０．８５ アルキルメチル １．１〜１．８ アルキルメチレン ３．３〜５．３ 糖水素原子、アルコキシ末端メチレ
ン、ＤＯＨ 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ）主要吸収値（ｃｍ^-1） ３４６０，２９３０，１６３０，１２４０，１０１０，
８２０，５８０As a result of the analysis, the degree of sulfation was 2.2 (sulfation rate 68.3%). Specific rotation [α] _D = + 23.1 ° (c = 0.58 / H ₂ O)
(27 ° C.) Nuclear magnetic resonance spectrum (proton) (D ₂ O) (pp
m) 0.85 alkylmethyl 1.1 to 1.8 alkylmethylene 3.3 to 5.3 sugar hydrogen atom, alkoxy terminal methylene, DOH infrared absorption spectrum (KBr) main absorption value (cm ⁻¹ ) 3460, 2930, 1630, 1240, 1010,
820,580

【００６６】（参考化合物例１２） ラミナリオリゴ糖
ドデカノールの硫酸エステルナトリウム塩の合成（サン
プルＬＭＳ−１） β（１→３）オリゴ糖（平均分子量１８００）の３．１
７ｇを常法により無水酢酸、酢酸ソーダでアセチル化し
て４．３２ｇのパーアセチル体を得た。このパーアセチ
ル体の２．０２ｇを、反応触媒としてりんタングステン
酸０．０５ｇを用い、１０２℃で反応させた。その他
は、参考合成例３と同様に処理して１．７ｇのドデシル
エーテル体（ドデカノール配糖体アセチル化物）を得
た。引き続きナトリウムメトキシド／メタノールにて脱
アセチル化を行って、０．９ｇのドデカノール配糖体を
得た。 比旋光度[α]_D=＋２６．５゜（ｃ＝０．５２／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 引き続き参考化合物例８と同様に硫酸化を行い、０．３
１５ｇの原料から０．４０ｇの目的物を得た。Reference Compound Example 12 Synthesis of Sulfate Ester Sodium Salt of Laminari Oligosaccharide Dodecanol (Sample LMS-1) 3.1 of β (1 → 3) Oligosaccharide (Average Molecular Weight 1800)
7 g was acetylated with acetic anhydride and sodium acetate by a conventional method to obtain 4.32 g of peracetylated product. 2.02 g of this peracetylated product was reacted at 102 ° C. using 0.05 g of phosphotungstic acid as a reaction catalyst. Otherwise, the same treatment as in Reference Synthesis Example 3 was carried out to obtain 1.7 g of a dodecyl ether form (dodecanol glycoside acetylated product). Subsequent deacetylation with sodium methoxide / methanol gave 0.9 g of dodecanol glycoside. Specific rotation [α] _D = + 26.5 ° (c = 0.52 / H ₂ O)
(27 ° C.) Subsequently, sulfation was carried out in the same manner as in Reference Compound Example 8 to give 0.3
0.40 g of the desired product was obtained from 15 g of the raw material.

【００６７】分析の結果、硫酸化度は２．６（硫酸化率
８４．１％）であった。 比旋光度[α]_D=＋９．９゜ （ｃ＝０．５１／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 核磁気共鳴スペクトル（プロトン）（Ｄ2Ｏ）（ｐｐ
ｍ） ０．８５ アルキルメチル １．１〜１．８ アルキルメチレン ３．３〜５．４ 糖水素原子、アルコキシ末端メチレ
ン、ＤＯＨ 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ）主要吸収値（ｃｍ^-1） ３４６０，２９３０，１６３０，１２４０，１０００，
８００，５９０As a result of the analysis, the degree of sulfation was 2.6 (sulfation rate 84.1%). Specific rotation [α] _D = + 9.9 ° (c = 0.51 / H ₂ O)
(27 ° C) Nuclear magnetic resonance spectrum (proton) (D2O) (pp
m) 0.85 alkylmethyl 1.1-1.8 alkylmethylene 3.3-5.4 sugar hydrogen atom, alkoxy-terminated methylene, DOH infrared absorption spectrum (KBr) main absorption value (cm ⁻¹ ) 3460, 2930, 1630, 1240, 1000,
800,590

【００６８】（参考化合物例１３） オクタデシル マ
ルトトリオシドの硫酸エステルナトリウム塩の合成（サ
ンプルＭＴＳ−１） 参考合成例１と同様の方法を用いて、マルトトリオース
からオクタデシルマルトトリオシドを合成した。 比旋光度[α]_D=＋８５．７゜（ｃ＝１．０／ＭｅＯＨ）
（２７℃） 引き続きピペリジン硫酸／ジメチルスルオキシドによっ
て硫酸化し０．０９８ｇの原料から１２３ｍｇの目的物
を得た。 比旋光度[α]_D=＋５０．３゜ （ｃ＝１．０／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 分析の結果、硫酸化度は２．０（硫酸化率 ６０．０
％）であった。(Reference Compound Example 13) Synthesis of octadecyl maltotrioside sulfate sodium salt (Sample MTS-1) By the same method as in Reference Synthesis Example 1, octadecyl maltotrioside was synthesized from maltotriose. Specific rotation [α] _D = + 85.7 ° (c = 1.0 / MeOH)
(27 ° C.) Subsequently, it was sulfated with piperidine sulfuric acid / dimethylsulfoxide to obtain 123 mg of the desired product from 0.098 g of the raw material. Specific rotation [α] _D = + 50.3 ° (c = 1.0 / H ₂ O)
(27 ° C) As a result of the analysis, the degree of sulfation was 2.0 (sulfation rate 60.0
%)Met.

【００６９】（参考化合物例１４） オクタデシル マ
ルトヘプタオシドの硫酸エステルナトリウム塩の合成
（サンプルＭＨＳ−１） 参考合成例１と同様の方法を用いて、マルトヘプタオー
スからオクタデシルマルトヘプタオシドを合成した。 比旋光度[α]_D=＋１４１．７゜（ｃ＝１．０／ＭｅＯ
Ｈ）（２７℃） 引き続きピペリジン硫酸／ジメチルスルオキシドによっ
て硫酸化し０．０８０ｇの原料から１１５ｍｇの目的物
を得た。 比旋光度[α]_D=＋７８．８゜ （ｃ＝１．０／Ｈ₂Ｏ）
（２７℃） 分析の結果、硫酸化度は１．０（硫酸化率 ３１．８
％）であった。(Reference Compound Example 14) Synthesis of octadecyl maltoheptaoside sulfate sodium salt (Sample MHS-1) By the same method as in Reference Synthesis Example 1, octadecyl maltoheptaoside was synthesized from maltoheptaose. did. Specific rotation [α] _D = + 141.7 ° (c = 1.0 / MeO
H) (27 ° C.) Subsequently, it was sulfated with piperidine sulfuric acid / dimethylsulfoxide to obtain 115 mg of the desired product from 0.080 g of the raw material. Specific rotation [α] _D = + 78.8 ° (c = 1.0 / H ₂ O)
(27 ° C) As a result of the analysis, the degree of sulfation was 1.0 (sulfation rate 31.8).
%)Met.

【００７０】（参考化合物例１５） ドデシル マルト
ヘキサオシドの硫酸エステルナトリウム塩の合成（サン
プルＭＨＳ−２） 参考合成例１と同様の方法を用いて、マルトヘキサオー
スからドデシル マルトヘキサオシドを合成した。(Reference Compound Example 15) Synthesis of dodecylmaltohexaside sulfate sodium salt (Sample MHS-2) Using the same method as in Reference Synthesis Example 1, dodecylmaltohexaside was synthesized from maltohexaose. did.

【００７１】引き続きピペリジン硫酸／ジメチルスルオ
キシドによって硫酸化し８０ｍｇの原料から１１８ｍｇ
の目的物を得た。分析の結果、硫酸化度は２．８（硫酸
化率 ８８．４％）であった。Subsequently, 118 mg was obtained from 80 mg of raw material which was sulfated with piperidine sulfate / dimethylsulfoxide.
I got the object. As a result of the analysis, the sulfation degree was 2.8 (sulfation rate 88.4%).

【００７２】（参考化合物例１６） オクタデシル マ
ルトヘキサオシドの硫酸エステルナトリウム塩の合成
（サンプルＭＨＳ−３） 参考合成例１と同様の方法を用いて、マルトヘキサオー
スからオクタデシルマルトヘキサオシドを合成した。(Reference Compound Example 16) Synthesis of octadecyl maltohexaside sulfate sodium salt (Sample MHS-3) Using the same method as in Reference Synthesis Example 1, octadecyl maltohexaside was synthesized from maltohexaose. did.

【００７３】引き続きピペリジン硫酸／ジメチルスルオ
キシドによって硫酸化し７５ｍｇの原料から１１０ｍｇ
の目的物を得た。分析の結果、硫酸化度は２．９（硫酸
化率 ９１．６％）であった。Subsequently, it was sulfated with piperidine sulfuric acid / dimethylsulfoxide to obtain 110 mg from 75 mg of raw material.
I got the object. As a result of the analysis, the sulfation degree was 2.9 (sulfation rate 91.6%).

【００７４】（比較例１）参考合成例３で用いたラミナ
リペンタオースを直接、三酸化硫黄ピリジン錯体を用い
参考化合物例５と同様に硫酸化した。硫酸化度は２．９
（硫酸化率 ８５．３％）であった。Comparative Example 1 Laminaripentaose used in Reference Synthesis Example 3 was directly sulfated in the same manner as in Reference Compound Example 5 using a sulfur trioxide pyridine complex. Sulfation degree is 2.9
(Sulfation rate was 85.3%).

【００７５】（比較例２）参考化合物例８で用いた４−
ガラクトシル−β−Ｄ−ラクトースを直接、三酸化硫黄
ピリジン錯体を用い参考化合物例５と同様に硫酸化し
た。硫酸化度は２．９（硫酸化率 ７９．１％）であっ
た。Comparative Example 2 4-Used in Reference Compound Example 8
Galactosyl-β-D-lactose was directly sulfated in the same manner as in Reference Compound Example 5 using a sulfur trioxide pyridine complex. The degree of sulfation was 2.9 (sulfation rate 79.1%).

【００７６】（比較例３）参考化合物例８で用いた４−
ガラクトシル−β−Ｄ−ラクトース５００ｍｇを１０ｍ
ｌの無水ジメチルスルホキシドに溶解し、１−ヨードオ
クタン０．４３ｍｌ（原料糖の水酸基に対し０．２２等
量）、粉末状水酸化カリウム８８ｍｇを加え、窒素気流
下５０℃で、８時間反応させた。引き続き、更に、三酸
化硫黄ピリジン錯体２．８１ｇを加え、３時間硫酸化し
た。次に溶媒を減圧下に濃縮し、残留物を水に溶解さ
せ、２規定苛性ソーダ水溶液にて中和後、限外ろ過によ
り精製した。得られた化合物は褐色であった。収量１．
１０ｇ。核磁気共鳴法でアルキルメチル基と糖のプロト
ンの比から水酸基のアルキル化率を１０．９％と算出し
た。また分析の結果、硫酸化度は２．５（硫酸化率 ７
５．０％）であった。Comparative Example 3 4-Used in Reference Compound Example 8
Galactosyl-β-D-lactose 500 mg for 10 m
It was dissolved in 1 liter of anhydrous dimethyl sulfoxide, 0.43 ml of 1-iodooctane (0.22 equivalent to the hydroxyl group of the starting sugar) and 88 mg of powdered potassium hydroxide were added, and the mixture was reacted at 50 ° C. for 8 hours under a nitrogen stream. It was Subsequently, a sulfur trioxide pyridine complex (2.81 g) was further added, and the mixture was sulfated for 3 hours. Next, the solvent was concentrated under reduced pressure, the residue was dissolved in water, neutralized with a 2N aqueous sodium hydroxide solution, and then purified by ultrafiltration. The obtained compound was brown. Yield 1.
10 g. The alkylation ratio of the hydroxyl group was calculated to be 10.9% from the ratio of the alkylmethyl group and the proton of the sugar by the nuclear magnetic resonance method. As a result of analysis, the degree of sulfation is 2.5 (sulfation rate 7
It was 5.0%).

【００７７】この方法によって合成されたアルキル基
は、その合成方法から明らかなように糖水酸基中の還元
末端以外の水酸基に結合しており、複数個のアルキル基
の導入が認められた。As is clear from the synthetic method, the alkyl group synthesized by this method was bonded to hydroxyl groups other than the reducing end in the sugar hydroxyl group, and introduction of a plurality of alkyl groups was confirmed.

【００７８】以下、上記参考例で得られた化合物の抗ウ
イルス試験例を示す。 （抗ウイルス活性試験例１） 試料：ＭＰＳ−１，ＭＰＳ−２，ＭＰＳ−３，ＬＰＳ−
１ 細胞及びウイルス：ＭＴ−４細胞（ＨＴＬＶ−１感染ヒ
トＴ４抗原陽性細胞株），ＭＯＬＴ−４細胞 ＨＩＶ株の一種であるＨＴＬＶはＨＩＶが感染した細胞
の上清より調製した。ウイルス調製（６×１０⁵ プラー
ク生成単位／ｍｌ）のタイターはＭＴ−４細胞を使用し
たプラークアッセイ法により測定した。The following is an example of antiviral test of the compound obtained in the above reference example. (Antiviral activity test example 1) Samples: MPS-1, MPS-2, MPS-3, LPS-
1 cell and virus: MT-4 cell (HTLV-1 infected human T4 antigen positive cell line), MOLT-4 cell HTLV which is one kind of HIV strain was prepared from the supernatant of cells infected with HIV. The titer of virus preparation (6 × 10 ⁵ plaque forming units / ml) was measured by plaque assay using MT-4 cells.

【００７９】（抗−ＨＩＶ活性の測定）試料の抗ＨＩＶ
活性は、ＨＩＶ−誘導細胞毒性効果（ＣＰＥ）及びウイ
ルス特異性抗原の発現により確認した。(Measurement of anti-HIV activity) Anti-HIV of sample
The activity was confirmed by HIV-induced cytotoxic effect (CPE) and expression of virus-specific antigen.

【００８０】ＭＴ−４細胞を０．００２ＭＯＩ（Ｍｕｌ
ｔｉｐｌｉｃｉｔｙ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）でＨ
ＩＶに混合し、３７℃、６０分間培養した。ウイルスの
吸着後、細胞を洗浄して３×１０⁵ Ｃｅｌｌ／ｍｌに調
製した（１０％牛胎児血清と抗生物質を添加したＲＰＭ
Ｉ１６４０培地使用）。この感染細胞懸濁液を試料の存
在下に培養した後、炭酸ガス培養器内で培養した。培養
３日後、同量の試料を含む培地と培地交換を行った。生
存細胞数とウイルス抗原陽性細胞の百分率をそれぞれ色
素排除法と間接蛍光抗体法（ＩＦ法）により測定した。MT-4 cells were treated with 0.002 MOI (Mul
H in the strictness of Infection)
It was mixed with IV and incubated at 37 ° C. for 60 minutes. After adsorbing the virus, the cells were washed and adjusted to 3 × 10 ⁵ cells / ml (RPM supplemented with 10% fetal bovine serum and antibiotics).
I1640 medium used). The infected cell suspension was cultured in the presence of the sample, and then cultured in a carbon dioxide incubator. After 3 days of culture, the medium was replaced with a medium containing the same amount of sample. The number of viable cells and the percentage of virus antigen positive cells were measured by the dye exclusion method and the indirect fluorescent antibody method (IF method), respectively.

【００８１】この結果を、下記の第１〜８表に示す。
尚、第１〜８表において濃度はμｇ／ｍｌ単位、非感染
細胞数は×１０⁴ cell／ｍｌ単位、感染細胞数は×１０
⁴ cell／ｍｌ単位、抗原陽性率は％で示す。The results are shown in Tables 1 to 8 below.
In Tables 1 to 8, the concentration is μg / ml, the number of non-infected cells is × 10 ⁴ cells / ml, and the number of infected cells is × 10.
⁴ cell / ml unit, antigen positive rate is shown in%.

【００８２】第１表（ＭＰＳ−１の３日目の結果）およ
び第２表（ＭＰＳ−１の６日目の結果）より、１００μ
ｇの濃度で感染細胞と非感染細胞がほぼ同程度の数値を
示し、このとき抗原陽性率が１％以下となっている事が
認められる。第３表（ＭＰＳ−２の３日目の結果）およ
び第４表（ＭＰＳ−２の６日目の結果）においても，第
１表、第２表と同様な結果であった。第５表（ＭＰＳ−
３の３日目の結果）、第６表（ＭＰＳ−３の６日目の結
果）、第７表（ＬＰＳ−１の３日目の結果）および第８
表（ＬＰＳ−１の６日目の結果）においても同様の結果
であり、これらの化合物が抗ＨＩＶ剤として有効に作用
していることが認められた。From Table 1 (results on day 3 of MPS-1) and Table 2 (results on day 6 of MPS-1), 100 μ
At the concentration of g, infected cells and non-infected cells show almost the same numerical values, and it is recognized that the antigen positive rate is 1% or less at this time. In Table 3 (results on the 3rd day of MPS-2) and Table 4 (results on the 6th day of MPS-2), the results were similar to those in Tables 1 and 2. Table 5 (MPS-
3 (day 3 results), Table 6 (MPS-3 day 6 results), Table 7 (LPS-1 day 3 results) and 8
The same results are shown in the table (results obtained on day 6 of LPS-1), and it was confirmed that these compounds act effectively as anti-HIV agents.

【００８３】[0083]

【表１】 [Table 1]

【００８４】[0084]

【表２】 [Table 2]

【００８５】[0085]

【表３】 [Table 3]

【００８６】[0086]

【表４】 [Table 4]

【００８７】[0087]

【表５】 [Table 5]

【００８８】[0088]

【表６】 [Table 6]

【００８９】[0089]

【表７】 [Table 7]

【００９０】[0090]

【表８】 [Table 8]

【００９１】（抗ウイルス活性試験例２） 試験方法：ＭＴＴ（テトラゾリウム）法 細胞：ＭＴ−４細胞 ウイルス：ＨＴＬＶ−ＩＩＩ_B（感染価：３×１０⁵プラ
ークホーミングユニット（ＰＦＵ）／ｍｌ） 以下に試験法の概略を述べる。(Antiviral activity test example 2) Test method: MTT (tetrazolium) method Cell: MT-4 cell Virus: HTLV-III _B (infectious titer: 3 × 10 ⁵ plaque homing unit (PFU) / ml) The outline of the test method will be described.

【００９２】９６穴のマイクロタイタープレートに、種
々の濃度の試験物質と共にＨＩＶ感染ＭＴ−４細胞
（２．５×１０⁴／ｗｅｌｌ、ＭＯＩ：０．０１）を感
染直後に加える。これとともに、試験物質のＭＴ−４細
胞に対する細胞毒性を知るために、同様にしてウイルス
非感染細胞を試験物質と共に培養する。炭酸ガスインキ
ュベーターで３７℃、５日間培養した後、ＭＴＴ法で、
生存細胞数を測定する。抗ウイルス活性は、ＨＩＶ感染
による細胞障害を５０％防御する濃度（ＥＣ₅₀；５０％
有効濃度）、細胞毒性は試験物質による５０％細胞障害
濃度（ＣＣ₅₀；５０％細胞毒性濃度）でそれぞれ表現し
ている。また、選択指数（ＳＩ）は、ウイルスに対する
選択性の指標としてＣＣ₅₀／ＥＣ₅₀として計算した（パ
ウエルス等（Ｒ．Ｐａｕｗｅｌｓ，ｅｔ ａｌ）ジャー
ナル バイオロジカル メソッド２０巻（１９８８）３
０９〜３２１参照）。HIV-infected MT-4 cells (2.5 × 10 ^{4 / well,} MOI: 0.01) with varying concentrations of test substances are added to 96-well microtiter plates immediately after infection. Along with this, in order to know the cytotoxicity of the test substance on MT-4 cells, virus-uninfected cells are similarly cultured with the test substance. After culturing at 37 ° C. for 5 days in a carbon dioxide gas incubator, the MTT method was used.
The number of viable cells is measured. Antiviral activity is a concentration (EC ₅₀ ; 50%) that protects against 50% of cell damage caused by HIV infection.
Effective concentration) and cytotoxicity are expressed as 50% cytotoxicity concentration (CC ₅₀ ; 50% cytotoxicity concentration) of the test substance, respectively. In addition, the selection index (SI) was calculated as CC ₅₀ / EC ₅₀ as an index of the selectivity for viruses (R. Pauwels, et al) Journal, Biological Method, Vol. 20 (1988) 3
09-321).

【００９３】このような方法により、ＬＰＳ−２、ＬＰ
Ｓ−３の各サンプルについて、抗ＨＩＶ活性測定試験を
実施した。その結果を第９表に示す。By such a method, LPS-2, LP
An anti-HIV activity measurement test was carried out for each S-3 sample. The results are shown in Table 9.

【００９４】また同様の方法により、ＧＴＳ−１、ＧＴ
Ｓ−２、ＧＴＳ−３、ＧＴＳ−４、ＬＭＳ−１、ＭＴＳ
−１、ＭＨＳ−１の各サンプルについて抗ＨＩＶ活性測
定試験を実施した。その結果を第１０表に示す。尚、第
１０表には、既存の抗エイズ剤３’−アジド−２’，
３’−ジデオキシチミジン（ＡＺＴ）の試験結果につい
ても比較データとして付記した。By the same method, GTS-1, GT
S-2, GTS-3, GTS-4, LMS-1, MTS
-1, The anti-HIV activity measurement test was implemented about each sample of MHS-1. The results are shown in Table 10. In addition, in Table 10, the existing anti-AIDS agent 3'-azide-2 ',
The test results of 3'-dideoxythymidine (AZT) are also shown as comparative data.

【００９５】また第１１表に、この方法によるＬＰＳ−
１−１、ＭＨＳ−２、ＭＨＳ−３、比較例１〜３の各サ
ンプルについての試験結果を示した。これらの試験結果
から、本発明による化合物はいずれも抗エイズウイルス
剤として有用であり、特にＧＴＳ−３、ＧＴＳ−４、Ｌ
ＭＳ−１はＡＺＴに比べて著しく選択性が高く、優れた
特性を有していることが認められた。Table 11 also shows LPS-by this method.
The test results of the samples 1-1, MHS-2, MHS-3, and Comparative Examples 1 to 3 are shown. From these test results, all the compounds according to the present invention are useful as anti-AIDS virus agents, and especially GTS-3, GTS-4, L
It was confirmed that MS-1 has remarkably high selectivity as compared with AZT and has excellent characteristics.

【００９６】[0096]

【表９】 [Table 9]

【００９７】[0097]

【表１０】 [Table 10]

【００９８】[0098]

【表１１】 [Table 11]

【００９９】（抗ウイルス活性試験例３）ヘルペスウイ
ルス（ＨＳＶ）（Ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉ
ｒｕｓ）タイプ１に対する活性を測定した。 試験細胞：Ｖｅｒｏ細胞 試験法： プラーク減少法 試験は同様の条件の試験（試験１、試験２）を行い、そ
れらの結果の平均値を求めた。結果を第１２表に示す。(Example 3 of Antiviral Activity Test) Herpes virus (HSV) (Herpes simplex vi)
rus) type 1 activity was measured. Test cell: Vero cell Test method: Plaque reduction method Tests were carried out under the same conditions (Test 1 and Test 2), and the average value of the results was obtained. The results are shown in Table 12.

【０１００】第１２表より、サンプルとして用いたＧＴ
Ｓ−３、ＬＭＳ−１のＥＣ₅₀はそれぞれ１８．８μｇ／
ｍｌ、１６．７μｇ／ｍｌであった。From Table 12, GT used as a sample
EC ₅₀ of S-3 and LMS-1 is 18.8 μg /
ml, 16.7 μg / ml.

【０１０１】[0101]

【表１２】 [Table 12]

【０１０２】（抗ウイルス活性試験例４）アデノウイル
ス（Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）タイプ３に対する活性を測
定した。 試験細胞：ＭＫＣ−５細胞 試験法： モノレーヤーになった２４穴プレートにウイ
ルスを１００〜２００ＣＣＩＤ５０／ｗｅｌｌで感染さ
せ、種々の濃度の薬剤を直ちにいれて３７℃で培養し
た。１週間後顕微鏡下でＣＰＥを観察した。結果を第１
３表に示す。(Test Example 4 of Antiviral Activity) The activity against adenovirus (Adenovirus) type 3 was measured. Test cells: MKC-5 cells Test method: Monolayer 24-well plates were infected with virus at 100 to 200 CCID50 / well, and various concentrations of drugs were immediately added and cultured at 37 ° C. After 1 week, CPE was observed under a microscope. First result
It is shown in Table 3.

【０１０３】第１３表より、サンプルとして用いたＧＴ
Ｓ−３、ＬＭＳ−１のＥＣ₅₀はそれぞれ２０μｇ／ｍ
ｌ、２０〜１００μｇ／ｍｌであった。From Table 13, GT used as a sample
EC ₅₀ of S-3 and LMS-1 is 20 μg / m
1, 20 to 100 μg / ml.

【０１０４】[0104]

【表１３】 [Table 13]

【０１０５】（抗ウイルス活性試験例５）コクサキーウ
イルス（Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ ｖｉｒｕｓ） Ｂ−
３：Ｎａｎｃｙ株に対する活性を測定した。 試験細胞：Ｖｅｒｏ細胞 試験法： ウイルス接種後、４８時間後の細胞変性の状
態、ウイルス産生量を測定した。(Test Example 5 of Antiviral Activity) Coxsackie virus B-
3: Activity against Nancy strain was measured. Test cells: Vero cells Test method: 48 hours after virus inoculation, the state of cell degeneration and virus production were measured.

【０１０６】結果を第１４〜１７表に示す。ここで細胞
対照の状態は、いずれも（−）であった。この結果より
ＬＭＳ−１のＥＣ₅₀は７．５μｇ／ｍｌ、ＧＴＳ−３の
ＥＣ₅₀は３．８μｇ／ｍｌと判定された。The results are shown in Tables 14-17. Here, the cell control states were all (-). From these results, the EC _{50 of} LMS-1 was determined to be 7.5 μg / ml, and the EC _{50 of} GTS-3 was determined to be 3.8 μg / ml.

【０１０７】[0107]

【表１４】 [Table 14]

【０１０８】[0108]

【表１５】 [Table 15]

【０１０９】[0109]

【表１６】 [Table 16]

【０１１０】[0110]

【表１７】 [Table 17]

【０１１１】[0111]

【実施例】以下に本発明による化合物液剤の血中持続活
性評価試験の結果を示す。 （１）サンプル液の調製方法 各被験物質とも注射用生理食塩液に溶解させ、投与被験
物質量が１６ｍｇ／１０ｍｌ／Ｋｇとなるように調製し
た。 （２）投与方法 マウス尾静脈より１６ｍｇ／１０ｍｌ／Ｋｇ量の薬剤を
１ｍｌ／分の速度で静注し、投与の一定時間後に、エー
テル麻酔下で開腹し、後大静脈より採血を行い、血液を
遠心分離し血清を採取した。血清は、１０％濃度に蒸留
水により希釈後サンプル液とした。[Examples] The results of the blood continuous activity evaluation test of the compound solution according to the present invention are shown below. (1) Method for preparing sample liquid Each test substance was dissolved in a physiological saline solution for injection to prepare a test substance dose of 16 mg / 10 ml / Kg. (2) Administration method 16 mg / 10 ml / Kg amount of drug was intravenously injected at a rate of 1 ml / min from the tail vein of the mouse, and after a certain period of administration, the abdomen was opened under ether anesthesia, and blood was collected from the posterior vena cava to obtain blood. Was centrifuged and serum was collected. Serum was used as a sample solution after being diluted with distilled water to a concentration of 10%.

【０１１２】（３）活性評価方法 ９６穴マイクロタイタープレートに、種々の濃度のサン
プル液と共にＨＩＶ感染ＭＴ−４細胞（２．５ｘ１０⁴
／ｗｅｌｌ、ＭＯＩ：０．０１）を感染直後に加えた。
サンプル液のＭＴ−４細胞に対する毒性を知るために、
ウイルス非感染細胞を同様に種々の濃度のサンプルと共
に培養を行った。炭酸ガスインキュベーターで３７℃５
日間培養した後、ＭＴＴ法で生存細胞数を測定した。抗
ウイルス活性は、ＨＩＶ感染による細胞障害を５０％防
御する濃度（有効率５０％の時の血清濃度）（ＥＣ₅₀：
５０％ Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉ
ｏｎ）、９０％防御する濃度（５０％の時と同様に）で
計算した。 （参照文献）（Ｐａｕｗｅｌｓ ｅｔ ａｌ.，Ｊ．Ｖｉ
ｒｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２０（１９８８）３０９−３２
１）(3) Activity evaluation method HIV-infected MT-4 cells (2.5 × 10 ⁴ ) were mixed with sample solutions of various concentrations in a 96-well microtiter plate.
/ Well, MOI: 0.01) was added immediately after infection.
To know the toxicity of the sample solution to MT-4 cells,
Non-virus-infected cells were similarly cultured with various concentrations of samples. Carbon dioxide incubator at 37 ℃ 5
After culturing for one day, the number of surviving cells was measured by the MTT method. The antiviral activity is the concentration at which 50% of cell damage caused by HIV infection is protected (serum concentration at an efficacy rate of 50%) (EC ₅₀ :
50% Effective Concentrati
on), calculated at 90% protective concentration (as at 50%). (References) (Pauwels et al., J. Vi.
roll. Methods 20 (1988) 309-32
1)

【０１１３】（４）血中活性評価方法 予め、３の活性評価方法で被験物質の有効濃度（Ｅ
Ｃ₅₀）、（ＥＣ₉₀）を評価しておき、経時的にサンプリ
ングした血清の有効濃度（マウスの血液量を３ｍｌ／
匹、１匹＝３０ｇと想定した。）との関係から残存する
薬剤量を算出した。(4) Method for evaluating blood activity In advance, the effective concentration of the test substance (E
C ₅₀ ) and (EC ₉₀ ) were evaluated, and the effective concentration of serum sampled over time (the blood volume of the mouse was 3 ml /
It was assumed that one animal = 30 g. The amount of the remaining drug was calculated from the relationship with.

【０１１４】（血中持続活性評価試験比較例）マウスに
抗エイズ剤として有効であることが知られている硫酸デ
キストラン（分子量５０００）１６ｍｇ／Ｋｇを投与し
た。１、２、４、６時間後の血液を抜き取り後、血清を
分離し、これを各種濃度に希釈後抗ＨＩＶ活性を評価し
た。(Comparative Example for Evaluation Test of Sustained Activity in Blood) 16 mg / Kg of dextran sulfate (molecular weight 5000) known to be effective as an anti-AIDS agent was administered to mice. Blood was drawn after 1, 2, 4, 6 hours, serum was separated, and diluted with various concentrations to evaluate anti-HIV activity.

【０１１５】尚、この薬剤の試験管試験におけるＥＣ₅₀
値，ＥＣ₉₀値は次の通りであった。 ＥＣ₅₀値＝１．４２μｇ／ｍｌ ＥＣ₉₀値＝１５．４μｇ／ｍｌ 硫酸デキストランは初めの１時間後の評価でも全く抗エ
イズ活性を示さず、２時間以後も活性を全く示さなかっ
た。これから硫酸デキストランが血液中で分解、代謝等
の何らかの作用を受け、速やかに活性を失ったことが明
らかになった。The EC ₅₀ in the test tube test of this drug
Values and EC ₉₀ values were as follows. EC ₅₀ value = 1.42 μg / ml EC ₉₀ value = 15.4 μg / ml Dextran sulphate showed no anti-AIDS activity in the evaluation 1 hour after the beginning and no activity after 2 hours. From this, it was revealed that dextran sulfate was rapidly decomposed in blood by some action such as decomposition and metabolism.

【０１１６】（血中持続活性評価試験実施例１）マウス
に本発明の代表的薬剤ＬＰＳ−１−１、１６ｍｇ／Ｋｇ
を投与した。１、２、４、６時間後の血液を抜き取り
後、血清を分離し、これを各種濃度に希釈後抗ＨＩＶ活
性を評価した。尚、この薬剤の試験管試験におけるＥＣ
₅₀値，ＥＣ ₉₀値は次の通りである。 ＥＣ₅₀値＝０．６８μｇ／ｍｌ ＥＣ₉₀値＝２．６９μｇ／ｍｌ これらの結果から各時間毎のマウス血中の薬剤濃度を算
出すると、表１８のようになる。(Blood Sustained Activity Evaluation Test Example 1) Mouse
Representative drug LPS-1-1 of the present invention, 16 mg / Kg
Was administered. Blood sampling after 1, 2, 4, 6 hours
After that, the serum is separated, diluted with various concentrations, and the anti-HIV activity is determined.
The sex was evaluated. EC in the test tube test of this drug
₅₀Value, EC ₉₀The values are as follows: EC₅₀Value = 0.68 μg / ml EC₉₀Value = 2.69 μg / ml From these results, the drug concentration in mouse blood at each time was calculated.
When it is taken out, it becomes like Table 18.

【０１１７】 [0117]

【０１１８】尚、０時間の血中薬剤濃度は次式から算出
した。 １６ｍｇ／Ｋｇ×３０ｇ／３ｍｌ＝１６０μｇ／ｍｌ 図１に薬剤ＬＰＳ−１−１の投与後の時間（時間）と血
中薬剤濃度（μｇ／ｍｌ）の関係を示す。The blood drug concentration at 0 hours was calculated from the following equation. 16 mg / Kg × 30 g / 3 ml = 160 μg / ml FIG. 1 shows the relationship between the time (hour) after administration of the drug LPS-1-1 and the blood drug concentration (μg / ml).

【０１１９】本薬剤のＥＣ₉₀値は２．６９μｇ／ｍｌで
あり、投与後６時間でも有効濃度の１０倍近い薬剤濃度
が保たれている事が明らかになった。The EC ₉₀ value of this drug was 2.69 μg / ml, and it was revealed that the drug concentration was maintained at about 10 times the effective concentration even 6 hours after administration.

【０１２０】（血中持続活性評価試験実施例２）実施例
１と同様にマウスに薬剤ＧＴＳ−３、１６ｍｇ／Ｋｇを
投与した。以下、実施例１と同様に、試験管試験におけ
るＥＣ₅₀値、ＥＣ₉₀値及び１〜６時間後のＥＣ₅₀となる
血清濃度を測定とした。(Blood Sustained Activity Evaluation Test Example 2) In the same manner as in Example 1, the drug GTS-3, 16 mg / Kg, was administered to mice. Hereinafter, in the same manner as in Example 1, the EC ₅₀ value in the test tube test, the EC ₉₀ value, and the serum concentration to be the EC ₅₀ value after 1 to 6 hours were measured.

【０１２１】この薬剤の試験管試験におけるＥＣ₅₀値，
ＥＣ₉₀値は次の通りである。 ＥＣ₅₀値＝０．１９μｇ／ｍｌ ＥＣ₉₀値＝１．６１μｇ／ｍｌEC ₅₀ value in a test tube test of this drug,
EC ₉₀ values are as follows. EC ₅₀ value = 0.19 μg / ml EC ₉₀ value = 1.61 μg / ml

【０１２２】これらの結果から各時間毎のマウス血中の
薬剤濃度を算出すると、表１９のようになる。 Table 19 shows the concentration of the drug in the blood of the mouse calculated for each time from these results.

【０１２３】図２に薬剤ＧＴＳ−３の投与後の時間（時
間）と血中薬剤濃度（μｇ／ｍｌ）の関係を示す。本薬
剤のＥＣ₉₀値は１．６１μｇ／ｍｌであり、実施例１と
同様に、投与後６時間でも有効濃度の１０倍近い薬剤濃
度が保たれている事が明らかになった。FIG. 2 shows the relationship between the time (hour) after administration of the drug GTS-3 and the blood drug concentration (μg / ml). The EC ₉₀ value of this drug was 1.61 μg / ml, and as in Example 1, it was revealed that the drug concentration was maintained at about 10 times the effective concentration even 6 hours after administration.

【０１２４】以下に本発明の抗ウイルス剤の薬剤製造実
施例を示す。The following are examples of drug production of the antiviral agent of the present invention.

【０１２５】（薬剤製造実施例１）乾熱滅菌したアンプ
ル瓶に乳鉢でよく粉砕混合したＧＴＳ−３（参考化合物
例１０の化合物）５００ｍｇ、マンニトール１０００ｍ
ｇ、リン酸二ナトリウム４００ｍｇを封入し、１０ｍｌ
用のアンプルを製造した。(Drug Production Example 1) GTS-3 (Compound of Reference Compound Example 10) 500 mg and mannitol 1000 m well ground and mixed in a dry heat sterilized ampoule bottle in a mortar.
g, disodium phosphate 400 mg, and 10 ml
Made an ampoule for.

【０１２６】（薬剤製造例２）薬剤製造例１と同様に、
乾熱滅菌したアンプル瓶に粉砕混合したＬＭＳ−１（参
考化合物例１２の化合物）５００ｍｇ、マンニトール１
０００ｍｇ、リン酸二ナトリウム４００ｍｇを封入し、
１０ｍｌ用のアンプルを製造した。(Drug Production Example 2) Similar to the Drug Production Example 1,
500 mg of LMS-1 (compound of Reference Compound Example 12) crushed and mixed in a dry heat sterilized ampoule bottle, mannitol 1
000mg, disodium phosphate 400mg is enclosed,
An ampoule for 10 ml was produced.

【０１２７】（薬剤製造例３）乾熱滅菌したバイアル瓶
に粉砕混合したＧＴＳ−３（参考化合物例１０の化合
物）５ｇ、リン酸二ナトリウム４ｇを封入し、点滴用の
バイアル瓶を製造した。(Drug Production Example 3) 5 g of GTS-3 (compound of Reference Compound Example 10) pulverized and mixed and 4 g of disodium phosphate were sealed in a vial bottle sterilized by dry heat to prepare a vial bottle for drip.

【０１２８】（薬剤製造例４）薬剤製造例３と同様に、
乾熱滅菌したバイアル瓶に粉砕混合したＬＰＳ−１（参
考化合物例４の化合物）６ｇ、リン酸二ナトリウム５ｇ
を封入し、点滴用のバイアル瓶を製造した。(Pharmaceutical Production Example 4) Similar to the pharmaceutical production example 3,
6 g of LPS-1 (compound of Reference Compound Example 4) crushed and mixed in a vial bottle sterilized by dry heat and 5 g of disodium phosphate
Was sealed and a vial for infusion was manufactured.

【０１２９】（薬剤製造例５）薬剤製造例３と同様に、
乾熱滅菌したバイアル瓶に粉砕混合したＬＰＳ−１−１
（参考化合物例５）６ｇ、リン酸二ナトリウム５ｇを封
入し、点滴用のバイアル瓶を製造した。(Drug Production Example 5) As in the Drug Production Example 3,
LPS-1-1 pulverized and mixed in a vial bottle sterilized by dry heat
(Reference compound example 5) 6 g and disodium phosphate 5 g were enclosed, and the vial bottle for infusion was manufactured.

【０１３０】（薬剤製造例６）薬剤製造例３と同様に、
乾熱滅菌したバイアル瓶に粉砕混合したＬＭＳ−１（参
考化合物例１２の化合物）５００ｍｇ、マンニトール１
０００ｍｇ、リン酸二ナトリウム４００ｍｇを封入し、
注射剤用のバイアル瓶を製造した。(Drug Production Example 6) As in the Drug Production Example 3,
500 mg of LMS-1 (Compound of Reference Compound Example 12) crushed and mixed in a vial bottle sterilized by dry heat and mannitol 1
000mg, disodium phosphate 400mg is enclosed,
A vial for injection was manufactured.

【０１３１】[0131]

【発明の効果】本発明の硫酸化アルキルオリゴ糖または
その生理学的に許容される塩を有効成分とする抗ウイル
ス剤は、極めて低毒性で、ウイルスのエンベロープの有
無にかかわらず広範囲なＤＮＡウイルスおよびＲＮＡウ
イルスに対して抗ウイルス活性を有するとともに、特に
エイズウイルスに対して優れた抗ウイルス活性を有し、
従来の薬剤に比べ驚異的な生体内持続性を有する抗ウイ
ルス液剤を提供することができる。INDUSTRIAL APPLICABILITY The antiviral agent containing the sulfated alkyl oligosaccharide or a physiologically acceptable salt thereof of the present invention as an active ingredient has extremely low toxicity and can be used for a wide range of DNA viruses regardless of the presence or absence of the viral envelope. It has antiviral activity against RNA viruses, and particularly excellent antiviral activity against AIDS virus,
It is possible to provide an antiviral liquid agent having a remarkable in vivo persistence as compared with conventional agents.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図１】マウスに静脈内投与した薬剤ＬＰＳ−１−１の
投与後の時間（時間）と血中薬剤濃度（μｇ／ｍｌ）の
関係を示す。FIG. 1 shows the relationship between the time (hour) after administration of the drug LPS-1-1 intravenously administered to mice and the blood drug concentration (μg / ml).

【図２】マウスに静脈内投与した薬剤ＧＴＳ−３の投与
後の時間（時間）と血中薬剤濃度（μｇ／ｍｌ）の関係
を示す。FIG. 2 shows the relationship between the time (hour) after administration of the drug GTS-3 intravenously administered to mice and the blood drug concentration (μg / ml).

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 西橋 秀治 千葉県佐倉市大崎台２−23−９ (72)発明者 瓜生 敏之 東京都足立区青井３−５−26−519 (72)発明者 吉田 孝 東京都大田区西馬込２−16−13 (72)発明者 山本 直樹 東京都渋谷区恵比寿南３−11−17原町住宅 501 (72)発明者 中島 秀喜 東京都武蔵村山市学園４−３武蔵野住宅16 −405 (72)発明者 茂田 士郎 福島県福島市大森字久保内147−28 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (72) Inventor Shuji Nishihashi 2-23-9 Osakidai, Sakura City, Chiba Prefecture (72) Inventor Toshiyuki Uryu 3-5-26-519 Aoi, Adachi-ku, Tokyo (72) Inventor Yoshida Takashi 2-16-13 Nishimagome, Ota-ku, Tokyo (72) Inventor Naoki Yamamoto 3-11-17 Haramachi House, Ebisu Minami, Shibuya-ku, Tokyo 501 (72) Hideki Nakajima 4-3 Musashinoyama City, Tokyo 4-3 Musashino Housing 16-405 (72) Inventor Shirou Shigeta Kubouchi, Omori, Fukushima City, Fukushima Prefecture 147-28

Claims (3)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 オリゴ糖の構成糖が２以上３０以下のグ
ルコース、ガラクトース、マンノース、タロース、イド
ース、アルトロース、アロース、グロース、キシロー
ス、アラビノース、ラムノース、フコース、フラクトー
スよりなる群から選ばれる同一の単糖を構成成分とし
て、それらがグリコシド結合してなるオリゴ糖の末端糖
の１位の水酸基の水素が直鎖状または分岐状の炭素数２
２以下の直鎖状もしくは分岐状のアルキル基であるアル
キル基により置換され、かつ糖部分の残りの水酸基の１
４．３％以上が硫酸化された硫酸化アルキルオリゴ糖ま
たはその生理学的に許容される塩を有効成分とする持続
性抗ウイルス液剤。。1. An identical sugar selected from the group consisting of glucose, galactose, mannose, talose, idose, altrose, allose, gulose, xylose, arabinose, rhamnose, fucose, and fructose having 2 to 30 constituent oligosaccharides. The oligosaccharide having a monosaccharide as a constituent component and having a glycosidic bond has a linear or branched carbon atom with a hydrogen atom at the 1-position hydroxyl group of the terminal sugar having 2 carbon atoms.
1 of the remaining hydroxyl groups of the sugar moiety, which is substituted by an alkyl group which is a linear or branched alkyl group of 2 or less
A long-acting antiviral liquid preparation containing, as an active ingredient, a sulfated alkyl oligosaccharide having a sulfation of 4.3% or more or a physiologically acceptable salt thereof. . 【請求項２】 オリゴ糖の構成単糖が２以上３０以下の
グルコース、ガラクトース、マンノース、タロース、イ
ドース、アルトロース、アロース、グロース、キシロー
ス、アラビノース、ラムノース、フコース、フラクトー
スよりなる群から選ばれる異なる単糖をその構成成分と
して、それらがグリコシド結合してなるオリゴ糖の末端
糖の１位の水酸基の水素が直鎖状または分岐状の炭素数
２２以下の直鎖状もしくは分岐状のアルキル基であるア
ルキル基により置換され、かつ糖部分の残りの水酸基の
１４．３％以上が硫酸化された硫酸化アルキルオリゴ糖
またはその生理学的に許容される塩を有効成分とする持
続性抗ウイルス液剤。2. Different oligosaccharides having a monosaccharide composition of 2 or more and 30 or less selected from the group consisting of glucose, galactose, mannose, talose, idose, altrose, allose, gulose, xylose, arabinose, rhamnose, fucose and fructose. The hydrogen of the hydroxyl group at the 1-position of the terminal sugar of the oligosaccharide, which is composed of monosaccharides as its constituents and is glycosidically bonded, is a linear or branched alkyl group having 22 or less carbon atoms. A long-acting antiviral liquid agent comprising, as an active ingredient, a sulfated alkyl oligosaccharide or a physiologically acceptable salt thereof, which is substituted with a certain alkyl group and 14.3% or more of the remaining hydroxyl groups of the sugar moiety are sulfated. 【請求項３】 ウイルスがエイズウイルスである請求項
１または２記載の持続性抗ウイルス液剤。 【００００】3. The persistent antiviral liquid preparation according to claim 1, wherein the virus is AIDS virus. [0000]