JPH04502148A - Ａｉｄｓ伝播阻止組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ＡＩＤＳ伝播阻止組成物 発明の背景 本発明は、後天性免疫不全症候群（エイズ）の伝播を阻止するための組成物に関 する。

エイズは、現在、世界中に１００万人に及ぶ感染者がいる致命的な悲劇的疾患で ある。初期には中央アフリカに、またリスクの高いある種のグループはアメリカ 合衆国を含む他の地域に集中していたが、現在ではエイズは、他の地域にも、ま た認識されていた危険グループのメンバー以外にも広がりつつある。その結果、 エイズの伝播の阻止方法、一旦罹患したエイズの治癒方法、およびエイズの症状 を緩和する方法の開発に、大きな努力が払われてきた。しかしながら、現在では エイズは、治療または予防がきわめて難しいものであることがわかってきた。

エイズはウィルスによって惹起される。このウィルスは、文献上では様々な名称 で呼ばれてきた。たとえば、ＨＩＶ（ヒト免疫不全症ウィルス）、ＬＡＶ（リン パ節疾患ウィルス）　、ＡＲＶ　（エイズ関連ウィルス）およびＨＴＬＶ−１［ （ヒトＴ細胞白血病ウィルス皿型）と呼ばれてきた。本明細書では簡単に、エイ ズを起こすウィルスはエイズウィルスと呼ぶことにする。

ウィルスは、ウィルスの遺伝子材料の性質に基づいて２群に分類できることは、 一般的に知られている。一部のウィルスは、遺伝子材料がデオキシリボ核酸であ るＤＮＡウィルスであり、一方、他はＲＡＮ　（リポ核酸）ウィルスである。Ｒ ＮＡウィルスはさらに２群に分類できる。ウィルスゲノムの複製がＲＮＡゲノム から直接ＲＮＡコピーを作ることによって進行する群と、ＤＮＡ中間体が関与す る群である。後者のタイプのＲＮＡウィルスはレトロウィルスと呼ばれる。

エイズウィルスはレトロウィルスである。したがって、他のレトロウィルスと同 様に、ウィルスＲＮＡを二重らせんＤＮＡへの転写を触媒する、逆転写酵素（ま たはＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼ）と呼ばれる酵素を有する。このＤＮＡ配 列は感染細胞のゲノム中に統合され、ここではそれはプロウィルスとして知られ ている。このプロウィルスが感染細胞の転写機構によってその後転写されると、 新たなウィルス粒子内にパッケージされる新たなウィルスＲＮＡが生成する。

エイズウィルスは、長期間にわたり、プロウィルスの形で感染細胞において休眠 状態にあるため、エイズが蔓延した正確な経路を確定することは困難であった。

しかしながら、エイズは、エイズウィルスを含む血液をヒトに輸血することによ って伝播されることが知られている。

エイズはまた、エイズウィルスに感染したパートナ−との同性間または異性間交 渉によってもヒトに伝播できる。

エイズウィルスの伝播は、エイズ以外の性行為感染疾患（ＳＴＤ）たとえば淋病 がすでにあると、促進される。

さらに、化学音速は、エイズウィルスの血流への進入を助ける組織の裂傷により 、エイズウィルスは***渉時に容易に広がるものと考えている。

エイズ伝播の驚異が増大するのに呼応して、***渉時のコンドームの使用が、エ イズウィルスの伝播を阻止する手段として示唆されてきた。しかし、コンドーム の不適切な使用、またその交渉時における穿孔は、コンドームの有効性を不十分 なものとしている。したがって、***渉時、また感染患者の手術時におけるヒト でのエイズ伝播を阻止するためのより有効な方法が強くめられている。このよう な方法の提供が本発明の目的である。

発明の要約 本発明、たとえば***渉の結果としてのヒトでのエイズウィルスの伝播を阻止す るための、安価な、使用の容易な、簡便な組成物を提供する。本発明は、数分間 内での急速な殺減作用を生じる特定の化合物およびその組成物の二重の作用様式 に基づくものである。これらの化合物は、エイズの感染性を低下させると同時に 、多くの他のＳＴＤの病因生物を短時間の曝露で殺滅するのに有効である。した がって、本発明の方法は、エイズ伝播のその時点での危険を低減させるのに有用 である。それはまた、エイズの危険を増大させるＳＴＤＴ因生物を除去すること により、エイズへの将来の危険も低下させる。

銀サルファダイアジン（Ａ　ｇ　Ｓ　Ｄ）のような銀塩がとくに、エイズウィル スを含めたレトロウィルスに対して有効な抗ウィルス剤であることが明らかにさ れた。このような物質は、以前から、ヒトおよび動物の火傷の処置に有用な抗細 菌剤として認められていたものである（Ｃ，Ｌ。

Ｆｏｘ、Ｊｒ、：米国特許第３．７６１．５９０号）。

Ａｇ５Ｄはまた、ある種のウィルスたとえば単純ヘルペスや帯状庖疹、またＣａ ｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍおよび淋 病を含めた多くのＳＴＤの病因生物に対して有効であることも明らかにされてい た。Ｗｙｓｏｒの米国特許第４．４１５．ｆｆｅｓ号にはさらに、ある種のＲＮ Ａウィルスに対する抗ウィルス活性が示されているが、これらはいずれもレトロ ウィルスではない。すなわち、Ａｇ５Ｄはよく研究された物質ではあるが、それ が、阻害または破壊の困難なことが明らかにされているエイズに対して活性を有 することを予期させる根拠は全くなかった。

クロルヘキシジンのようなビグアニドも、十分高レベルで用いた場合には、エイ ズウィルスの阻害剤として有効であることが明らかにされた。

本発明者らはまた、これらの化合物を互いにまた他の抗細菌剤と混合すると、Ａ ｇ５Ｄの抗ウィルス活性、さらに急速な殺減作用に、予期し得ない増強を招くこ とを見いだした。とくに、Ａｇ５Ｄは、広い抗菌スペクトルを存するクロルヘキ シジンと配合すると、Ａｇ５Ｄ単独よりも有効なエイズウィルスの感染低下作用 を示す。同じ条件で、クロルヘキシジン単独ではエイズウィルスの感染性に対し て全く作用を示さないという事実かあるにもかかわらずである。有効性の増大は Ａｇ５Ｄをデオキシコール酸のような界面活性剤と配合した場合にも認められた 。

これらの所見に鑑み、本発明は、抗ウイルス有効量のビグアニドまたは銀塩たと えば銀サルファダイアジンを、単独でまたは配合して局所的に適用することから なる、エイズの伝播阻止を意図するものである。他の薬剤たとえばデオキシコー ル酸も使用できる。この組成物は、***渉前または***渉時に、ヒトの性器腔部 に投与するのが存利である。この適用は、性器腔部内にクリ−・ムまたはフオー ムを導入するか、またはコンドームもしくは性器腔部内に挿入される他のデバイ ス上を阻止組成物で被覆することによって行うことかできる。

図面の簡単な記載 図１は、Ｂ型肝炎ウィルスをＡｇ５Ｄ単独またその他の薬剤との配合物に曝露し た後の、そのウィルスの放射標識チミジンの取り込み速度のグラフである。

発明の詳細な記載 上述のように、本発明の組成物は、抗ウイルス有効量を局所的に適用すると、ヒ トまたは他の動物において、エイズウィルスの伝播の阻止に有効である。この組 成物は、ビグアナイド単独またはその他の活性成分との配合物からなる。

本願において用いられる性器腔部の語は、膣または肛門腔部のいずれかを指す。

本発明の方法に用いられる抗ウイルス組成物は、ビグアニドたとえばクロルヘキ シジンまたはその塩からなる。

この組成物には銀塩も包含させることかできる。以下の例には１種の特定の銀塩 、Ａｇ５Ｄを使用するが、他の銀塩も使用できる。他の適当な銀塩には、酢酸銀 、安息香酸銀、炭酸銀、塩化銀、ヨウ化銀、ヨウ素酸銀、乳酸銀、ラウリル酸銀 、硝酸銀、酸化銀、バルミチン酸銀、およびタンパク質の銀塩が包含される。

本発明の抗ウイルス組成物はまた、銀塩の抗ウィルス有効性を増大させる１種ま たは２種以上の付加成分を添加することも好ましい。すなわち、抗ウイルス組成 物は、界面活性剤たとえばデオキシコール酸塩または塩化ベンザルコニウムを含 有してもよい。これらの物質の適当な塩も使用できる。

抗ウイルス組成物はまた、ＳＴＤ病因生物に対して有効で、エイズ感染の長期に わたる危険を低減する他の物質を包含してもよい。このような物質の例には、淋 病に対して有効なノノキシノール、多くのＳＴＤ病因生物に有効なキノロンがあ る。クロルヘキシジンおよび上述の界面活性剤はまた、単純ヘルペスウィルス（ ＨＳＶ）およびＣａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓを含めた様々なＳＴＤ病因生 物に対しても有効であることを 本発明に使用される抗ウイルス組成物は、（ａ）水分散性親水性担体申分散液、 （ｂ）実質的に水不溶性の担体中の分散液、（Ｃ）半固体もしくはクリーム様水 分散性もしくは水溶解性水中油型エマルジョン担体中分散液、または（ｄ）水性 スクロース担体たとえば約２５〜５０血１％の水性スクロース溶液中分散液とし て適用できる。

様々な担体中に銀サルファダイアジンを処方した特定の例は、米国特許第３，７ ６１．５９０号に記載されている。この記載を参考として本明細書に導入する。

担体は約０．１〜約１０重量％の銀塩と、２％までの他の活性物質を含有するの が好ましい。

本発明の方法に有用な抗ウイルス組成物は、適当なノズルを有する絞り出しチュ ーブ中に含有させることができる。これは、交渉前にノズルを性器腔部内に挿入 し、チューブを絞って抗ウイルス組成物を性器腔部内に押し出すことにより、組 成物の性器腔部への局所適用を容易にする。また、抗ウィルス剤は、性器腔部へ の薬剤への薬剤の送達用として知られている様々なアプリケーターによって適用 することもできる。抗ウイルス組成物はまた、***渉時に陰茎自体に塗布するこ とにより、また、銀塩を含有させた潤滑剤、たとえばに−Ｙシェリー（Ｊｏｈｎ ｓｏｎ　＆　Ｊｏｈｎｓｏｎ）を、コンドームに塗布して局所適用することもで きる。

本発明の抗ウイルス組成物は、性器腔部への挿入が意図されたデバイス上の被覆 として性器腔部内へ導入することもできる。このようなデバイスの例には、コン ドーム、医用手袋、およびペッサリーが包含される。このようなデバイスは、抗 ウイルス組成物を完成品にスプレーするか、または製造時に抗ウイルス組成物を 導入することによって、抗ウイルス組成物を被覆または浸透させることができる 。デバイス作成のための特定の技術は米国特許出願第１５４，９２０号（１９８ ８年２月１１日出願）およびその一部継続出願（１９８８年ｌＯ月１４日提出） に記載されている。両記載は参考として、本明細書に導入する。

請求された方法の有効性を示す実験結果を以下に記載する。これらの試験には、 エイズウィルス、エイズウィルスについて認められたモデル系、または認められ たＳＴＤ生物に関するものである。さらに、エイズウィルス自体についての試験 は、エイズの悲劇的結末からして、に相関する。したがって、これらは、ビグア ナイドを含有し、銀塩を含むかまたは含まない組成物が、***渉の結果としての エイズの伝播の阻止に使用できるという驚くべき所見を支持するものである。

例１ エイズウィルスＪ１に対するＡｇ５Ｄのｉｎ　ＶｉｔｒＯにおける有効性を、Ｈ ９細胞におけるＨＴＬＶ−Ｈのサンプルの感染性をＡｇ５Ｄに１０分間曝露した 後試験することによって評価した。エイズウィルスで達成可能な力価は比較的に 低いため、大部分のＡｇ５Ｄを検定すべきウィルスから分離するためのデバイス 手段が必要であった。

何回もの予備実験の後、検討した方法中最善の方法は、Ａｇ５Ｄ／ｘイズウイル ス混合物を５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ　−２５カラムに急速に通過させ、エイズウィ ルスを含む空隙容量を回収し、ついでポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を用い てウィルスを沈殿させる方法であることを見いだした。

この方法を用いてウィルスの回収を測定するためには、ウィルスは含むがＡｇ５ Ｄは含まない対照プレバレージョンについても同様に操作を行った。

この操作がＡｇ５Ｄのすべてを除去するのに有効であることの確認も必要であっ た。これは、「停止対照」を用いて行われた。これはＡｇ５Ｄ単独をカラムに通 過させ、同じ分画をＰＥＧで沈殿させ、ついで沈殿に活性なエイズウィルスを添 加するものとした。停止対照の力価が、ウィルスは含むがＡｇ５Ｄは含まない対 照プレバレージョンと同様であれば、沈殿中にはＡｇ５Ｄはほとんどまたは全く 存在しなかったことを示すことになる筈である。しかしながら、実際には、停止 対照（サンプル４および６）の力価は、銀サルファダイアジンを含まない相当す る試験サンプル（サンプル１および２）に比べて、実質的に低かった。これは、 一部の銀サルファダイアジンが分離されていないことを示している。これは、ウ ィルスの段滅が１０分間の接触時間よりも長期にわたって起こったことを意味す るが、また、殺ウイルス活性は、低いレベルでもかなり強力に維持されることを 示唆している。

実施した特定の試験は表１にまとめる。最初にウィルスを添加した各サンプルの 場合、ウィルスサンプルは、Ｂｉｏｎｅｔｉｃｓ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈから入手し た１０．０００倍濃度のＨＴＬＶ−１［によって調製した保存溶液であった。上 記材料を調整感染培地（ＣＩＭ）で！＝ｌＯに希釈して、実際のウィルス力価が ｌθ″・’／ｍｌである保存溶液を形成させた。２種のＡｇ５Ｄ保存溶液、すな わち、５０重量％水性スクロースブレバレージョン中１重量％、および２５重量 ％水性スクロースブレバレージョン中０．　５重量％の保存溶液も調製した。

試験の実施のためには、ウィルス保存液の６０μｍを微小遠沈管に取り、表１に 指示したように、サンプル１〜３および６とした。これを、チューブ３および５ では各Ａｇ５Ｄプレバレージヨン５４０μｍと、チューブｌおよび２ではＣ１Ｍ ５４０μｍと混合した。チューブ４および６にはそれぞれ、各Ａｇ５Ｄプレバレ ージヨンを加えたが、ウィルスは加えなかった。ついで各チューブをポルテック ス混合機によって混合し、室温で１０分間インキュベートした。

ウィルスからＡｇ５Ｄを分離するためには、Ａｇ５Ｄを含有する各チューブをつ いマイクロ遠沈器で１分間遠心分離し、上澄液を集めた。これらの上澄液および チューブ２の全サンプルを５ｅｐｈｄｅｘ　−２５Ｍカラム上に載せた。使用し たカラムは、カラムの頂部に適合したディスクを有し、空隙容量は約１ｍｌであ った。これらのカラムは通常、ナトリウムアジド中に保存し、実験の前日に４ｍ １部の０１Ｍ培地で、滅菌条件下に、１８回連続して洗浄することにより調整し た。

各サンプルは各カラム上に、それが適合ディスクを通過するまで置いた。ついで 、カラムを４１１１１の０１Ｍ培地で溶出した。最初の３ｍｌの溶出液は捨て、 最後の１ｍｌを、リン酸緩衝液中３０％ＰＥＧ６０００溶液０．３５ｍ１を含む 滅菌微小遠沈管に集めた。これらのチューブは０°Ｃに少なくとも３０分間保持 し、ついでマイクロ遠沈管で１分間遠心分離した。ペレットを集め、０．５ｍＩ ＣＩＭ（サンプル２．３および５）、または０．７部のウィルス保存液を６．３ 部のＣＩＭで希釈して調製したＨＴＬＶ−Ｉ［Ｉ含有メジウム中に再懸濁した。

かくして調製された６種のサンプルそれぞれについて、ＣＩＭ中に１０倍希釈し 、Ｈ９細胞への感染能を４回測定した。これは、予めＣＩＭ中、３７℃で１時間 調整したＨ９細胞２．　４　ｘ　１０’　／ｍｌを含有するブレバレージョンを 、各１００μｌのサンプルまたは希釈液に加えることによって行った。この培養 に際しては、日４．７およびｌＯにＣ１Ｍ２５μｍを供給した。日４に、培養液 の肉眼検査で細胞毒性を評価した。

これらの観察の結果を表１に示す。明らかに認められるように、Ａｇ５Ｄは試験 したエイズウィルスの感染性を実質的に低下させ、また何らの細胞毒性も示さな かった。

例２ エイズウィルスのＡＲＶ−２株の感染性に関するＡｇ５Ｄ、クロルヘキシジンお よびナトリウムデオキシコレートの効果を、単独および組合せの両者について、 グローブまたはコンドームまたは他の用具に実際に被覆され得るような低濃度の 薬剤を用いてＨ９細胞にて行なった。これらの濃度は、ウィルスの培養中におい ても実質的に観察可能な細胞毒性を生じる水準より低く、なおかつ殺ウィルスに 有効であった。

１ｍｌあたり３〜５Ｘ１０’の感染性ウィルス粒子を含む保存溶液を、第２表に 示す種々の薬剤と共に１５分間前培養を行なった。次いで、該ウィルス試料を該 薬剤のに４倍希釈しく下記例３参照）、総量１ｍｌの２５０，０００のＨ９細胞 に混合した。２４時間後にアッセイを行ない、ウィルス抗原を発現している培養 物の百分率を測定した。この時間間隔は、感染細胞数が元の試料中に存在する感 染性ウィルスの数を直接に反映するように、１回のウィルス感染のみを許容する ように選択された。

第２表から分かるように、これらの低濃度においては、Ａｇ５Ｄ単独では僅かに 有効であるのみであったが、Ａｇ５Ｄをナトリウムデオキシコレートまたはクロ ルヘキシジンのいずれかとの組合せにおいて用いた場合には、より優れた結果が 得らねた。特に重要なことは、クロルヘキシジン（１０μｇ／ｍｌ）自体は、ウ ィルス感染性を低減しなかったのであるか、Ａｇ５Ｄ　（５μｇ／′ｍｌ）およ びクロルヘキシジン（５μｇ／ｍｌ）の組合せについて観察された感染性の顕著 な低減である。

例３ 本発明の抗ウイルス組成物に使用される種々の薬剤のヒトＴ４−リンパ球（エイ ズウィルスのキャリアであるＨ９細胞およびマクロファージ）に対する毒性は、 薬剤の仔効性に関連するであろう。このことは、これらの細胞を***または膣液 中に存在する場合に殺すことがウィルスの放出を招き、薬剤の効果をより受け易 くすることによる。この点を考慮して、Ｈ９細胞に対するＡｇ５Ｄおよび他の薬 剤の短時間の曝！（１０分間）効果を、Ｈ９細胞靜濁液（ＨＢ　Ｓ　Ｓ中１．　 ６　ｘ　Ｉ　Ｏ＠／ｍｌ）の各薬剤または薬剤の組合せ５０および１００．ｍｌ ／ｎ＋］による処理にて試験を行なった。１０分間培養後、細胞を３０容のＨＢ ＳＳにて２回洗浄し、ＲＰＭＪ　］］０％ＦＣ３−Ｎａピルベートに再懸濁し、 ２４穴ブレートに４ＸＩＱ’細胞／ｍｌにて塗布した。細胞の生存率を２４時間 後に測定し、第３Ａ表中にｍｌあたりの生細胞数および生存百分率（生細胞／生 細胞十死細胞）として報告しである。これから分かるように、試験した各薬剤は 、数種の細胞を殺すか、最も顕著な殺細胞は、ｌＯＯμｍ／ｍ１のＡｇ５Ｄおよ びＡｇ５Ｄとデオキシコール酸ナトリウムとの組合せについて観察された。

マクロファージ殺細胞の有効性も、第３Ｂ表に示すように試験を行なった。実験 において、腹水正常マウスマクロファージをペトリ皿に付着させることにより富 有化させ、細胞濃度を５−１０ＸＩＯ”／ｍｌに調節した。この懸濁物の０．１ ｍ１分別量をマイクロタイタープレートに塗布し、４種の試料の各々を１０μお よび５μ加えた。

対照プレートにはＰＢＳのみを容れた。ＣＯ培養器中での２０分間の培養後、該 細胞をトリプトファン−ブルーダイを用いて生存率について試験した。殺細胞の 割合を第３Ｂ表に示した。

例４ インビボ試験を、ＦＤＡによってエイズ治療用薬剤の試験に使用されている認定 されたレトロウィルスモデルであるＲａｕｓｃｈｅｒ白血病ウィルス（ＲＬＶ） （例えば、Ｎａｔｕｒｅ　３２３，４６７−４６９　（１９８６）；ＲｕｐｅＣ ｈｔ　らのＰｒｏｃ、Ｎａｔ’１．Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ　８２．　７７３ ３−７７３７　（１９８５）参照）を用いて行なった。

ＲＬＶは、Ｂａ１ｂ／ＣＩＣＲマウス中に導入され、ここて膵臓に感染する。該 ウィルス感染性の程度を、感染から２０日後のマウス膵臓の重量増の測定により 定量した。

最初に予備的実験を、膵臓に対する試験薬剤の効果を測定するために行なった。

各々５匹のマウス（６連合の雌マウス）からなる９組は、以下の溶液のひとつに より処理したグローブの抽出物のひとつの尾部静脈への０．２５ｍ１の注射を受 けた： １、スルファジアジン銀（２％） ２、デオキシフール醸すｌ・リウム（２％）３、クロルヘキシジン（２％） ４　スルファジアジン銀（１％）＋ デオキシコール酸すＩ・リウム（１％）５　スルファジアジン銀（１％）＋ クロルヘキシジン（１％） ６　丁７シジン酸（２９ぢ） ７４　フシジン酸（１％）＋ クロルヘキシジン（１％） ８゜食塩水培養グローブ ９、食塩水−グローブなし 各処理物を、ラテックスグローブの指片中にて１，５ｍｌのダルベラ’：Ｊ　（ Ｄｕｌｂｅｃｃｏ）リン酸緩衝塩溶液（ＰＢＳ）を３゛７°Ｃにて１０分間熟成 することにより調製した。熟成後、可能な限り物質をグローブから除去した。次 いて、０．４ｍｌのＰＢＳをグローブ内に導入し、これが動物に導入さ第１た試 料てあった。注射の間に清浄なスティック（ｓｔｉｃｋ）を受けなかった動物は 、研究から除外した。かくして、２つの群は、各々４匹の動物のみを仔し、これ について考察した。

注射から８日後に各動物を切開して、各動物について増大は観察されなかった。

次いで、各々５匹のマウスからなる追加の１１群を、ＲＬＶの感染性に対する同 じ化合物の有効性の試験に使用した。各処理物を、前述のようにしてあらかじめ 薬剤の１種またはＰＢＳ単独を熟成したグローブ片肉にてＲＶＢ３　（ＲＬＶ（ ７）株）を含む滅菌ＰＢＳ　Ｏ，４ｍｌを熟成することにより調製した。３種の 追加の対照、ウィルスを伴わないグローブに容れたＰＢＳ、グローブ内で熟成さ れなかったウィルス試料、および熟成されたＰＢＳも走らせた。この場合、マウ スは注射後２０日で切開され、膵臓重量か第４表に示すように測定された。試験 された各材料は、ウィルス感染性の実質的な低下を示した。

例５ ＡｇＳＤと、クロルヘキシジンおよびデオキシコレートとの組合せか、ある種の ＳＴＤ−原因生物に対して特に有効であることも見出された。第５Ａ表および第 ５Ｂ表に示されるように、スルファジアジ〉銀が、クロルヘキシジンまたはデオ キシコール酸ナトリウムとの紹合せにおいて特にカンジダアルビカンス（Ｃａｎ ｄｉｄａ　ａｌｂｉｅａｎｓ）に対して有効である。同様に、これらの組合せは ゴノカッカス（Ｇｏｎｏｃｏｃｃｕｓ）　（第６表）およびヘルペスウィルス（ 第７Ａ表および第７Ｂ表）の殺滅に有効である。

Ｂ型肝炎（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　）ウィルスによるＤＮＡ合成に対するＡｇ ５Ｄの単独またはクロルヘキシジンもしくはデオキシコール酸ナトリウムとの組 合せの効果を、放射標識チミジンの取込率の測定により研究した。結果として、 Ａｇ５ＤがＢ型肝炎ウィルスのＲＮＡ−依存ＤＮＡポリメラーゼと干渉し、この 干渉がクロルヘキシジンまたはデオキシコール酸ナトリウムのいずれかとの組合 せで使用することにより増強されることが見だされた（図１）。

例７ ＨＩＶ−１に対するクロロへキシジンの効果を４％クロロへキシジングルコネー ト（ＣＨＧ）ハンドスクラブ（ＨＩＢＩＣＬＥＮＳ■）および０．５％ＣＨＧ含 存ハンドリンス（ＨＩＢＩＳＴＡＴ＠）を用いて試験した。

各々の場合においてＨＩＶ−１調製物は、２種類の材料の一方の希釈物に１０分 間さらされ、その後、該ウィルス調製物はＣ３−４４細胞の感染に使用された。

ＨＩＶ−■感染の存在は、ウィルス性ｐ２４抗原発現の検出による間接的イムノ フルオレセンスにより、およびウィルス産生の指標としての培養液中の逆転写酵 素活性により監視した。この実験の結果は、クロロへキシジングルコネートが、 濃度０．０４％、０．０５％およびそれ以上においてＨＩＶ−１感染の阻止に有 効であったか、他方濃度０．０１％およびそれ以下では無効であったことを示し た。従って、閾値の水準のクロロへキシジンが活性を得るために必要であり、ま た例２の結果は、クロロへキシジンのこの閾値以下での使用に帰因するものと考 えられる。

第２表 インキュベート中　最終　感染％ の薬剤（μｇ／ｍｌ）　（薬剤）μｇ／ｎ＋Ｉ　感染　％　Ｖ、対照区クロルヘ キシジン　１０　２．５　３．３５　１０８（ＣＩＡ） デヒドロコール酸ナト　４０　１０．０　３．３５　１０８リウム（ＮａＤＣ） ＡｇＳＤ　１０　２．５　２．９５　９５ＡｇＳＤ＋　１０　２．５＋　２．８ ５　９２ＮａＤＣ４０１０，Ｏ ＡｇＳＤ＋　５＋　１．２５＋　２．４５　７２ＣＨＡ　５　１．２５ 第３Ａ表 ”Ａｇ５Ｄ５０　４ＸＩＯ″　厳しい条件下ノ細胞　３７１００　５ＸＩＯ’　 ｌ／　”　”　０ＣＨＡ　５０　１．５　ＸＩＯ’　−３ＪＯＯＺ５ＸｌＯ’　 ｔｔ　ｎ　ｔｒ　２ＯＮａＤＣ５０１，２Ｘ１０’　７３ １００　２．０ＸｌＯ’　４４ ＡｇＳＤ　５０　１．５　ＸＩＯ’　０＋ＣＨＡ　５０ Ｈ２０３，Ｉ　ＸＩＯ＠８９ 細胞単独　３．ＯＸＩＯ’　８８ 零Ａｇ５Ｄ→不溶、薬剤除去の試みにおいて、細胞を、２００ｇで１５秒遠心し た（加速及び減速時間を含む）−細胞をピペットでとり、次いで２回洗浄した。

第３Ｂ表 薬剤によるマクロファージの死滅率 死滅％ 対照区　３６ ＡｇＳＤ　（１００μｇ）　１００ ＣＨＡ　（１００μｇ）　ｌ　００ ＡｇＳＤ＋ＣＨＡ　（５０μｇ＋５０ｔｔｇ）　８５第４表 スルフ７ジアジン銀　２　１０６　２０デオキシコール酸塩　２　１０９　２３ クロルヘキシジン　２　２３４　１４８スルフアジアジン鍜イー　１＋１　１１ ５　２９デオキシコール酸塩 スルファジアジン銀＋　１＋１　１０３　１７クロルヘキシジン フシシン酸　２　１０７　２１ フシジン酸＋　１＋１　３１９　２３ クロルヘキシジン 対照グローブ＋　８６　０ ＰＢＳ培地 グローブなし−８６０ ＰＢＳ培地のみ 対照グローブ＋ＲＶＢ３　１，６２７　１．５４１グローブなし＋ＲＶＢ３　１ ．２８０　１．１９４第５Ａ表 スル７アジアジン銀及び他の薬剤の 短期接触によるカンジダアルビカン スの死滅率 スルファジアジン銀　１００　１０．０００クロルヘキシジン　１００　３０ デオキシコール酸塩　ｉ、ｏｏｏ　ａ、ｏｏ。

Ａｇ５Ｄ＋クロルヘキシジン　ｓｏ＋ｓｏ　。

Ａｇ５Ｄ＋デオキシコール酸塩　１００＋Ｉｏｏ　２０ノノキシノール（Ｎｏｎ ｏｘｙｎｏｌ）　０．　２％　＞５０．０００対照区　＞５０，０００ カンジダアルビカンス１０５を含むサブロー培地（Ｓａｂｏｒａｕｄ　ｂｒａｔ ｈ）　３　ｍｌを、上記薬剤とともにインキュベートした。小量を５分及び１０ 分で除去し、継代培養した。

第５Ｂ表 カンジダアルビカンスに対する薬剤塗布グローブの抗菌効率 処理したグローブの指を、カップ形状の内側を形成する処理された側に対し、培 養チューブの上部にかけた、次にカンジダアルビカンス　１０”を含むＴＢＳ３ ．００１１をそれぞれの指に投与し、３７°Ｃで水浴攪拌器中においた。試料を １５分、１時間、２時間及び４時間目に除去した。それらを１−１０に希釈し、 ２．０ｍｌ量で血液寒天上に塗布した。

グローブ中の薬剤　培地中のコロニーの数二世　遅　２１１１ｉｆｊ　４１轡 なしく対１＠Ｉ　１，４００　ＺＯＯＯ４，０００６，（Ｋ）０クロルヘキシジ ン　７５０００ スルフアジアジン銀　１，６５０　１，５００　１，５００　２．２００スルフ アジアジン銀＋　０　０　０　０クロルヘキシジン スルファジアジン銀＋　１．５００　４００　０　０デ才キシコーノ４−■ スルファジアジン銀＋　０　０　０　０クロＪし＼キシジン＋ ノノキシノール 第６表 スルファジアジン銀及び他の薬剤 によるゴノコッカス（Ｇｏｎｏｃｏｃｃｕｓ）の死滅Ａｇ５Ｄ　１００　４００ ０　２．ＯｏＯデオキシコール酸塩　１．０００　Ｊ２ＬＯＯ０４０００クロル ヘキシジン　１００　λ０００　１０ノノキシノール　Ｏ，ＩＸ　４０　７０Ａ ｇＳＤ＋　（資）＋５０００ クロルヘキシジン Ａｇ５Ｄ＋　１００　＋１，０００　１０　０デオキシコール酸塩 なしく対馬ΦＱ　＞匁、０００　＞関、α乃薬剤を１０５のゴノコッカスを含む ５ｍｌの培地中にけん濁させ、インキュベートした。小量を３および１０分間隔 で除去し、コロニー数まで継代培養した。

第７Ａ表 ３Ｘ１０６／ｍｌでの１ｍｌのＨ３Ｖを、それぞれ５００μｇ／ｍｌ貯蔵溶液で ある２００μｍの薬剤とともにインキュベートした。Ｒ，Ｔ、において２０分後 、ウィルスをベロ（ｖｅｒｏ）細胞の単層上でタイタし、２時間インキュベート シ、次いでメチルセルロースでおおった。

４８時間後、ウィルスのタイターを読んだ。読み込まれた幾月ものタイター中、 薬物の毒性”はみられなかった。

１ｍｌのウィルスに添加したμｍ　タイター　阻害％２００ＡｇＳＤ　５．２ｘ ｌＯ’　８１（ニジクロ込キシジン　２．７ＸＩＯ”　０１００ＡｇＳＤ＋　１ ．５ｘｌＯ’　９９．５１００クロル＼キシジン ２０ＯＮａＤＣ３，２Ｘ１０°　０ ＪＯＯＮａＤＣ＋１００１００Ａ　１．３ＸＩＯ’　５４！００　ＮａＤＣ＋　 ８ｘｌ　Ｏ’　９３１００クロル＼キシジン ２００塩化ベンザルコニウム　５．２Ｘ１０’　９８２００ＨＩ　Ｏ２，８Ｘｌ Ｏ’　θ 碩培地　３．３ＸｌＯ’　０ 第一列目の薬剤濃度は、４−８μｇ／ｒｎＩであった。

第７Ｂ表 薬剤で処理したグローブによるＨ３Ｖ−］のＤＭＳ　１０９６　ＦＣ３中、Ｈ３ Ｖ−１ｔ−３Ｘ１０’ＰＦＵ／ｍｌに希釈した。ウィルス１ｍｌを、滅菌薬剤で 処理したグローブに置き、室温で１０分間インキュベートし、次いでベロ（Ｖｅ ｒｏ）細胞に対するタイターを測定した。

処　理　タイター（ＰＦＵ／ｍｌ） ウィルス（グローブなし）　２．９Ｘ１０’ウイルス＋対照チユーブ　３．０Ｘ ＩＯ’ウイルス＋チユーブＷ　４．３Ｘ１０’ウイルス＋チユーブＸ　〈１０ ウイルス＋チユーブＹ　〈１０ Ｗ＝スルフアジアジン銀 Ｘ＝スルファジアジン銀十デオキシコール酸塩Ｙ＝スルファジアジン銀十クロル ヘキシジン第１図 時間（分） 補正書の翻訳文提出書　罎許嫡１８４条ノア組組平成３年４月１８日

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. （１）抗ウイルス有効量のビグアニド化合物を含有することを特徴とするエイズ （ＡＩＤＳ）および肝炎を含む性的伝播疾患の伝播を阻止するための局所投与組 成物。
2. （２）ビグアニド化合物がクロルヘキシジンまたはその塩である請求の範囲第１ 項の組成物。
3. （３）ビグアニド化合物と一緒に協同作用的抗ウイルス活性を示す量の銀塩を含 む請求の範囲第１〜２項のいずれか一つの組成物。
4. （４）銀塩が銀スルファジアジン、酢酸銀、安息香酸銀、炭酸銀、塩化銀、ヨウ 素酸銀、ヨウ化銀、乳酸銀、ラウリン酸銀、硝酸銀、酸化銀、パルミチン酸銀お よびタンパク質の銀塩から選択される請求の範囲第３項の組成物。
5. （５）銀塩が銀スルファジアジンである請求の範囲の第４項の組成物。
6. （６）界面活性剤を含有する請求の範囲第１〜５項のいずれか一つの組成物。
7. （７）界面活性剤がナトリウムデオキシコレートである請求の範囲第６項の組成 物。
8. （８）水に分散可能な親水性担体中に分散している請求の範囲第１〜７項のいず れか一つの組成物。
9. （９）半軟質のまたはクリーム様の、水に分散可能なまたは水溶性の水中油形乳 濁液中に分散している請求の範囲第１〜７項のいずれか一つの組成物。
10. （１０）スクロース水溶液中に分散している請求の範囲第１〜７項のいずれか一 つの組成物。
11. （１１）０．１〜１０重量％の銀塩を含む請求の範囲第３〜１０項のいずれか一 つの組成物。
12. （１２）抗ウイルス有効量の銀塩を含有するＢ型肝炎ウイルスの伝播を阻止する 局所投与組成物。
13. （１３）銀塩が銀スルファジアジン、酢酸銀、安息香酸銀、炭酸銀、塩化銀、ヨ ウ素酸銀、ヨウ化銀、乳酸銀、ラウリン酸銀、硝酸銀、酸化銀、パルミチン酸銀 、およびタンパク質の銀塩から選択される請求の範囲第１２項の組成物。
14. （１４）請求の範囲第１〜１３項のいずれか一つの組成物で被覆されていること を特徴とする性器の管の中へ挿入するためのデバイス。
15. （１５）請求の範囲第１〜１３項のいずれか一つの組成物で浸漬されていること を特徴とする性器の管の中へ挿入するためのデバイス。
16. （１６）コンドームである請求の範囲第１４〜１５項のいずれか一つのデバイス 。