JPH04501858A - ステロールの脂肪酸エステルの抗腫瘍剤のための自発的分散性濃縮物及びそれを含む医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ステロール、それらの２月　エステル　びグルコシド；それ゛の言。ｒ　法；こ れ゛のｌｌ、Ａ木む　、＼；　び　の几　のためへのそれ°の ヱー脱 本発明は、ステロール、それらの脂肪酸エステル及びグルコシド；それらの調製 方法；これらの化合物を含む自発的分散助剤及び腫瘍の処理のためへのそれらの 使用に関する。

驚くべきことには、ヒマワリ〔ヘリアンタス　アニュアスＬ、　（Ｈｅｌｉａｎ ｔｈｕｓ　ａｎｎｕｕｓ　Ｌ、））及びある種のカポチャ〔ククルビタ　ベボ　 Ｌ、（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ　ｐｅｐｏ　Ｌ、）及びククルビタマキシマ　ダソチ （Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ　ｍａｘｉｍａ　Ｄｕｃｈ、）　］の種子から抽出された ステロール、及びグルコシド並びに特にこれらのステロールの脂肪酸エステル、 及びこれらの化合物により調製された自発的分散助剤は、著しい抗腫瘍作用を有 することが見出された。

ステロール、それらのグルコシド及び特にそれらの脂肪酸エステルが腫瘍の処理 のために使用され得ることは文献に言及されていない。

光凱曳起１ 本発明で使用されるステロール、それらの脂肪酸エステル及びグルコシドは、た とえば次の工程段階を実施することによって、好ましくはヘリアンタス　アニュ アス　Ｌ、、ククルビタ　ペボ　Ｌ、　（ｖａｒｉｅｔａｓ　５ｔｙｒｉａｃａ ）又はククルビタ　マキシマ　ダッチのあらかじめ発芽された種子から得られる ：洗浄され、そして２〜４日間あらかじめ発芽された種子が、０．１〜３％、好 ましくは０．１〜１％のマンニトール及び０．１〜４％の医薬的に許容できる非 イオン性界面活性剤又は界面活性剤混合物（予備発芽された種々に対して）を含 む蒸留水により処理される。その混合物がのこぎり状のコロイドミル中で均質化 され、そして次に、このようにして得られた均質物が遠心分離される。得られた 三相をそれぞれ分離する。外皮フラグメント及び細胞残骸を含む底部相を廃棄す る。上部の油状相を抽出段階にゆだね、そして次に、分離用クロマトグラフィー により精製し、そして中間の水性相をまず、超遠心分離にゆだね、そして次に、 真空濃縮し、そして濃縮物として凍結乾燥せしめる。（この内容については、例 １〜３を参照のこと）。

好ましくは本発明に使用されるステロールの脂肪酸エステルはまた、一般的に、 それ自体既知の次の方法により半合成的に調製され得るコ ａ）テトラヒドロフラン、ベンゼン、クロロホルム又はジメチルホルムアミド又 は類似する中性溶媒中、触媒量のアルコレートの添加による２５〜７０°Ｃでの Ｎ、Ｎ’−カルボニル−ジイミダゾールと脂肪酸との反応、続く形成されたイミ ダゾリドの下記ステロールによるアルコーリシス：２４β−エチルコレスタ−５ ，２２，２５−トリエン−３β−オール（２５、２７デヒドロポリフエラステロ ール）、２４β〜エチルコレスタ−５、２５（２７）−ジエン−３β−オール（ フレロスチロール）、 ２４Ｚ−エチリデンコレスト−５−エン−３β−オール（イソフコステロール） 、 ２４α−エチルコレスタ−５，２２−ジエン−３β−オール（Δ５−スチグマス テロール）、 ２４α−エチルコレスト−５−エン−３β−オール（Δ５−シトステロール）、 ２４α〜エチルコレスト−７−エン−３β−オール（Δ７−シトステロール）、 ２４α−エチル−５α−コレスタ−８，２２−ジエン−３β−第２４β−エチル −５α−コレスタ−８、２５（２７）−ジエン−３β−オール、 ｂ）中性溶媒における塩化チオニルと脂肪酸との塩化物の形成、続くその形成さ れた脂肪酸塩化物とステロール〔これについては、合成ａ）を参照のこと〕との 反応。

中でも、次の直鎖及び枝分れ、飽和及び不飽和脂肪酸が合成ａ）及びｂ）のため に適切である：バレリアン酸、イソソルビン酸、ソルビン酸、イソソルビン酸、 ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ベヘン 酸、ヘキサコサン酸、オクタコサン酸、ペンタデカン酸、ヘプタデカン酸、ノナ デカン酸、トリコサン酸、ペンタコサン酸、デセニル酸、ウンデセニル酸、ドデ セニル酸、オレイン酸、υノール酸、リルン酸、アラキドン酸、エルカ酸、等。

ステロールのグルコシドは、ステロイド、たとえばシトステロール、スチグマス テロール又はコレステロールが、触媒、たとえば炭酸銀の存在下で、不活性溶媒 、たとえばベンゼン、トルエン、クロロホルム又はテトラヒドロフラン中におい てアセトブロモグルコースと反応せしめられるような態様で、それ自体既知の方 法により調製され得る。

驚くべき事には、本発明の自発的分散性濃縮物は、特に高められた予防性抗腫瘍 作用を有する。水による処理により、それらは卓越した相安定性及び改良された 透過性質を有するマイクロエマルジョンを付与する。

これらの本発明の自発的分散濃縮物は、ステロールの個々の脂肪酸エステル又は これらの成分の組合せ０．００１〜１５重量％、医薬的に許容でき、そしてハイ ドロトロープ性又は補助−乳化剤として作用する溶媒又は溶媒混合物０〜４０重 量％、医薬的に許容できる界面活性剤又はその混合物０．００１〜８５重量％、 ビタミン又はプロビタミン０〜１０重量％、遊離脂肪酸０〜ＩＯ重量％及び場合 によっては通常の賦形剤及び／又は希釈剤を含む。

本発明に使用されるステロールの脂肪酸エステルの化学式％式％： 上記式ｌ−Ｘにおいて、ＲはＣＩ−”Ｃｌ０−アルキル基又はＣ２〜Ｃ１゜−ア ルケニル基を表わし、そしてＲ′は０１〜Ｃ３□−アルキル基又はＣ２〜Ｃ３□ −アルケニル基又はアルカポリエン基（すなわちその対応するアルカジエン、ア ルカトリエン、アルカテトラエン、アルカペンタエン又はアルカヘキサエン）を 表わす。これらのＲ及びＲ′の側鎖は直鎖又は枝分れ鎖であり得る。

Ｒの場合、アルキル基及びアルケニル基は好ましくは、８〜１０個の炭素原子を 有する。そのような化合物の例は、数ある中で、次のものである： Ｒ′の場合、アルキル及びアルケニル／アルカポリエン基（１〜６個の二重結合 を有する）は好ましくは、８〜２２個の炭素原子を有する　Ｒｌの場合、特に好 ましいアルキル及びアルケニル／アルカポリエン基は、１０〜１８個の炭素原子 を有するものである。

本発明に使用される１式１−Ｘのステロールの脂肪酸エステルの例は、数ある中 で次のものを包含する：エルゴスター５．７−ジニンー３−オール−９−へキサ デセノエート（ニスゴスター５．７−ジニニルパルミトレエート） エルゴスタ−８，２２−ジエン−３−オール−１４−メチル−４，９−オクタデ セノエート（１４α−メチルエルゴスタ−８゜２２−ジェニルオレエート） ラフスト−８−エン−３−オール−９−オクタデセノエート（ジヒドロラノスラ ロールーオレエート）エルゴスト−５−エン−３−オール−９，１２，１５−オ クタデカトリエノエート（ジヒドロブラジカステリルーリルネート） エルゴスト−５−エン−３−オール−９，１２−オクタデカジェノエート エルゴスト−５−エン−３−オール−９−オクタデセノエート（ジヒドロブラシ カステリル−オレエート）エルゴスタ−７、２４（２Ｂ）−ジエン−３−オール −４−メチル−９−オクタデセノエート（グラミステリルーオレエート）スチグ マスター８　、２４（２８）−ジエン−３−オール−９，１２−オクタデカジェ ノエート（Δ７−アベナステリルーリルエート） エルゴスタ−７、２４（２Ｂ）−ジエン−３−オール−４−メチスチグマスト− ２４（２Ｂ）エン−３−オール−９，１２−オクタデカジェノエート エルゴスタ−５，２２−ジエン−３−オール−４，２３−ジメチル−９−オクタ デセノエート エルゴスクン−３−オール−４−メチル−９−オクタデセノエート ５α−スチグマスタンー３β−オールーリルネート５α−スチグマスタンー３β −オールーオレエートスチグマスクン−３−オール−９，１２−オクタデカジェ ノエート（５α−スチグマスタンー３β−オールークルエート） ２２−ジヒドロスピナステリルーリルエートエルゴスタ−５，７，２２−）ツエ ン−３−オール−９，１２−オクタ−デカジェノエート（エルゴステロールーリ ルエート） スチグマスター５　、２４（２Ｂ）−ジエン−３−オール−９−オクタデセノエ ート スチグマスター５　、２４（２８）　−３−オール−９，１２−オクタデカジェ ノエート スチグマスター５−エンー３−オール−５、８，１１，１４−エイコサテトラエ ノエート（β−シトステロール−アラキトネート） エルゴスト−５−エン−３−オール−５、８、，１１，１４−エイコサテトラエ ノエート スチグマスター７　、２４（２８）−ジエン−３−オール−４−メチル−９，１ ２−オクタ゛デカジェノエートコレスト−５−エン−３−オール（３β）−９− へキサデセノエート（コレステリル−トランス−９−ヘキサデセノエート） エルゴスト−７−エン−３−オール−９，１２，１５−オクタデカトリエノエー ト エルゴスト−５−エン−３−オール−９，１２，１５−オクタデカトリエノエー ト（カンベステリルーリルネート）ニルゴスクン−３−オール−９，１２−オク タデカジェノエート コレスト−７−エン−３−オール−９，１２−オクタデカジェノエート エルゴスタ−５、２４（２Ｂ）−ジエン−３−オール−９−へキサデセノエート コレスタン−３−オール−９−へキサデセノエートエルゴスタ−５，２２−ジエ ン−３−オールーオクタデセノエート（ブラシカステリル−オレエート）コレス ト−７−エン−３−オール−９−オクタデセノエート（ラソステリルーオレエー ト） ラフスター８．２４−ジエンー３−オール−９−オクタデセノエート（ラノステ ロールーオレエート）スチグマスター５　、２４（２Ｂ）−ジエン−３−オール −９−オクタデセノエート（フコステリル−オレエート）コレスタ−５，２２− ジエン−３−オール−９−オクタデセノエート（デスモステリルーオレエート） エルゴスト−５−エン−３−オール−１２−オクタデカジェノエート（カンベス テリルーリルエート）エルゴスタ−５，２２−ジエン−３−オール−９−オクタ デセノエート エルゴストー２２−エン−３−オール−９−へキサデセノエート コレスター５．２２−ジエン−３−オール−９−へキサデセノエート エルゴスク−５，２２−ジエン−３−オール−９，１２−オクタデカジェノエー ト（ブラジカステリルーリルエート）エルゴスタ−７、２４（２Ｂ）−ジエン− ３−オール−９，１２−オクタデカジェノエート スチグマスター５．２２−ジエン−３−オール−９，１２，１５−オクタデ力ト リエノエート（スチグマステロールーリルネート） スチグマスター５，２２−ジエン−３−オール−９，１２−オクタデカジェノエ ート（スチグマステロールーリルエート）コレスト−５−エン−３−オール−（ ３β’）　−５、８，１１゜１４−エイコサテトラエノエート コレスト−５−エン−３−オール−（３β）　−４、７，１０゜１３　、１６　 、１９−ドコサヘキサエノエートコレスト−５−エン−３−オール−（３β）− ９，１２−オクタデカジェノエート コレスタ−８、（１４）　、　２４−ジエン−３−オール−９−オクタデセノエ ート（チモステリルーオレエート）エルゴスト−５−エン−３−オール−９−オ クタデセノエ−）（、／Ｊンペステリルーオレエート）コレスタ−５、７、９（ １１）−）ジエン−３−オール−９−オクタデセノエート（コレスタ−５、７、 ９（１１）−トリエン−３β−イル−オレエート） エルゴスタ−５，７，２２−）リエンー３−オール−９−へキサデセノエート（ エルゴステロール−９−へキサデセノエート） コレスト−５−エン−３−オール−（３β）−１１−オクタデセノエート（コレ ステロール−１１−オクタデセノエート）コレスト−５−エン−３−オール−（ ３β）−９，１２−オクタデカジェノエート（コレステロール−９，１２−オク タデカジェノエート） コレスト−５−エン−３−オール−（３β）−９−オクタデセノエート（コレス テロールーエライデート）５α−スチグマスター７．２２−ジエン−３β−オー ル−オレエート（α〜スピナステロールーオレエート）コレスト−５−エン−３ −オール−（３β）−９−へキザデセノエート（コレステロールーパルミトレエ ート）コレスタン−３−オール−９，１２，１５−オクタデカトリエノエート（ コレスタノールーリルエート）コレスト−５−エン−３−オール＝（３β）−１ １−オクタデセノエート（コレステロール−１１−オクタデセノエート）コレス タ−５，７−レニン−３−オール−９−オクタデセノエート コレスター５，７−シエンー（３β）−オールーリルエート（コレカルシフェロ ール−クルエート）エルゴスタ−５，７，２２−トリエン−３−・オール−９− オクタデセノエート（エルゴステロール−オレエート）スチグマストー５−エン ー３−オール−９−オクタデセノエート（β−シトステロール−オレエート）ス チグマストー５−エンー３−オール−９，１２−オクタデカジェノエート（β− シトステロールーリルエート）スチグマストー５−エンー３−オール−９，１２ ，１５−オクタデカトリエノエート（β−シトステロールーリルネート）コレス ト−５−エン−３−オール−（３β）−９，１２，１５−オクタデカトリエノエ ート（コレステロールーリルエート） コレスタン−３−オール−９−オクタデセノエート（コレスタノール−オレエー ト） コレスタン−３−オール−９，Ｉ２−オクタデカジェノエート（コレスタノール ーリルエート） コレスト−５−エン−３−オール−（３β）−９−へキザデセノエート（コレス テロール−９−へキサデセノエート）コレスト−５−エン−３−オール−（３β ）　−５、８，１１゜１４−エイコサテトラエノエート（コレステロール−アラ キトネート） コレスト−５−エン−３−オール−（３β）−９，１２−オクタデカジェノエー ト（コレステロールーリルエート）コレスト−５−エン−３−オール−（３β） −９−オクタデセノエート（コレステロール−オレエート）β−シトステロール ーウンデセノエートβ−シトステロールーラウロイレート β−シトステロールーバルミテート スチグマステロールーウンデセノエートスチグマステロールーラウロイレート スチグマステロールーバルミテート。

本発明に使用されるステロールの脂肪酸エステルの次の例コレストー５−エンー ３α−オール−オレエート５−α−ススチクマスタン−３β−オールオレエート ５−α〜スチグマスタンー３β−オールーリルネートコレスタ−５，７−ノニン −３β−オールーリルエートコレ力ルシフェロールーリルネート １０−α−エルゴスタ−５，７，２２−）リエンー３β−オースチグマスト−５ −エン−３−オールードデセノエート（β−シトステロールードデセノエート） エルゴスト−５−エン−３−オールードデセノエート（カンペステリルー・ドデ セノエート）コレスト−７−エン−３−オールードデセノエートスチグマスター ５．２２−ジエン−３−オールードデセノエート （スチグマステロールードデセノエート）γ−シトステロールードデセノエート コレスト−５−エン−３〜オールーウンデセノエートコレスト−５−エン−３− オール−ドデセンエート５−コレステン−３−β〜オールードデセノネート。

本発明に使用される界面活性剤又はその混合物は、アニオン性、カチオン性、両 性又は非イオン性であり得る。理想的には、それらは非イオン性であり、そして ２〜１ＢのＨＬＢ−値（すなわち親水性−親油性バランス）を有し；好ましくは それは一方では２〜６であり、そして他方では１０〜１５の間である。ＨＬＢ値 は、乳化剤の親油性及び親水性性質を説明する。これに関しては、“Ｈｙｄｒｏ ｐｈｉＪｅ−Ｌｉｐｏｐｈｊｌｅ　Ｂａ１ａｎｃｅ：１１ｉｓｔｏｒｙ　ａｎｄ 　ｒｅｃｅｎｔ　ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎＬｓ”、　Ｐａｕｌ　Ｂｅｃｈｅｒ、Ｊ ｏｕｒｎａｌｏｆ　Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ　５ｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈ ｎｏｌｏｇｙ、５（１）、８１−９６ページ（１９８４）を参照のこと。

適切なアニオン性界面活性剤は、いわゆる水溶性石鹸及び水溶性合成化合物の両 者であり得る。

適切な石鹸は、高級脂肪酸（Ｃｌｚ　−Ｃｚ　ｚ　）のアルカリ金属塩、アルカ リ土類金属塩又は場合によっては置換されたアンモニウム塩、たとえばオレイン 酸又はステアリン酸の又は中でもココナツツ油又は牛脂から得られる脂肪酸の天 然混合物の天然Ｎａ又はに塩である。言及され得る他の界面活性剤は、脂肪酸メ チルタウリン塩及び変性された及び変性されていないリン脂質である。

しかしながら、最近使用される界面活性剤は、いわゆる合成界面活性剤、特に脂 肪スルホネート、脂肪スルフェート、スルホン化されたベンズイミダゾール誘導 体又はアルキルアリールスルホネートである。

脂肪スルホネート及び脂肪スルフェートは通常、アルカリ金属塩、アルカリ土類 金属塩又は場合によっては、置換されたアンモニウム塩であり、そして一般的に ８〜２２個の炭素原子を有するアルキル基を有し、アルキル基はまた、アシル基 のアルキル成分を包含する。例は、リグニンスルホン酸、ドデシル硫酸エステル 及び脂肪アルコール／酸化エチレンアダクトの硫酸のＮａ又はカルシウム塩であ る。スルホネート化されたベンズイミダゾール誘導体は好ましくは、２つのスル ホニル基及び約８〜２２個の炭素原子を含む１つの脂肪酸基を含む。アルキルア リールスルホネートは、たとえばドデシルベンゼンスルホン酸、ジブチルナフタ レンスルホン酸又はナフタレンスルホン酸／ホルムアルデヒド縮合生成物のＮａ 　。

Ｃａ又はトリエタノールアミン塩である。他の適切な化合物は、その対応するリ ン酸塩、たとえばｐ−ノニルフェノール／　（４−１４）酸化エチレンアダクト 又は下記式：で表わされるアダクトのリン酸エステルの塩である。非イオン性界 面活性剤は主に、脂肪族又は脂環式アルコール、飽和又は不飽和脂肪酸及び炭化 水素基（脂肪族）に３〜３０個のグリコール基及び８〜２０個の炭素原子及びア ルキル基に６〜１８個の炭素原子を含むアルキルフェノールから選択される。他 の適切な非イオン性界面活性剤は、ポリプロピレングリコール及びアルキルポリ プロピレングリコール（アルキル鎖に１〜１０個の炭素原子を有する）上への水 溶性ポリエチレンオキシアダクトであり、前記アダクトは２０〜２５０個のエチ レングリコールエーテル基及び１０〜１００個のプロピレンエーテル基を含む。

これまで言及された化合物は、プロピレングリコール単位当たり１〜５個のエチ レン単位を含む。

次のものは、非イオン性界面活性剤の例として言及され得る：ノニルフェノール ポリエトキシエタノール、ヒマシ油ポリグリコールエーテル、ポリプロピレン／ 酸化ポリエチレンアダクト、トリブチルフェノキシ−ポリエトキシエタノール、 ポリエチレングリコール及びオクヂルフエノキシーボリエトキシエタノール。さ らに、ポリオキシエチレンソルビタンの脂肪酸エステル、たとえばポリオキシエ チレンソルビタントリオレエートもまた、適切である。

カチオン性界面活性剤は、主に、Ｎ−置換基として８〜２２個の炭素原子を有す る少なくとも１つのアルキル基を含み、そして追加の置換基として低級、任意に はハロゲン化されたアルキル基、ペンシル基又は低級ヒドロキシ−アルキル基を 有する第四アンモニウム塩である。その塩は主に、ハリド、メチルスルフェート 又はエチルスルフェート、たとえばステアリルトリメチルアンモニウムクロリド 又はベンジルジ（２−クロロエチル）−エチルアンモニウムプロミドの形で存在 肪族カルボン酸（Ｃ，、〜Ｃ２□）と脂肪族アルコール（Ｃ３〜Ｃｌ８）のエス テル、たとえばイソプロピルラウレート、ヘキシルラウレート、デシルラウレー ト、イソプロピルミリステート及びラウリルミリステート；６〜１６個のメチル 基により置換され、そして６個までの二重結合を有することができる炭化水素、 その言及され得る例はテルペン、たとえばポリメチルブタン及びポリメチルブテ ンである。

次の化合物もまた使用され得る：脂肪族カルボン酸（Ｃ８〜Ｃ２□）トエチレン グリフール又はプロピレングリコールとのモノエステル、たとえばプロピレング リコールモノラウレート及びプロピレングリコールモノミリステート；脂肪族ア ルコール（Ｃ＋□〜Ｃ２□）と乳酸とのエステル、たとえばミリスチルラクテー ト又は、好ましくはラウリルラクテート；脂肪族カルボン酸（Ｃ６〜Ｃ２□）と グリセロールとのモジエステル又はジエステル、たとえばグリセリルカプリレー ト；少なくとも１つの遊離ヒドロキシル基を有するポリ（２〜７）エチレングリ コールグリセロールエーテルと脂肪族カルボンＭ（Ｃ，〜Ｃｔ　ｚ　）とのエス テル、たとえば脂肪族アルコール（Ｃ、ｔ　”　Ｃｘ□）、たとえばドデカノー ル、テトラドデカノール、オレイルアルコール、２−へキシルデカノール及び２ −オクチルデカノール；脂肪族カルボン酸（Ｃ４〜Ｃ２□）とポリ（２〜１０） グリコールとの、少なくとも１つの遊離ヒドロキシル基を含むエステル；ポリエ チレングリコールと脂肪族アルコール（Ｃ８２〜Ｃ，、）とのモノエーテル、た とえばポリオキシエチレン−（Ｃ，、）オクチルエーテル。

本発明の自発的分散濃縮物のために通切な添加剤は、ビタミン及びプロビタミン （たとえば、ビタミンＡ、レチノイン酸、レチノール、カロチン、トコフェロー ル）及びまた遊離脂肪酸、たとえばバレリアン酸、イソカプロン酸、ソルビン酸 、イソカプロン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、バルミチン酸、ステアリン酸、 アラキン酸、ベヘン酸、ヘキサコサン酸、オクタコサン酸、ペンタデカン酸、デ セニル酸、ウンデシル酸、ドデセニル酸、オレイン酸、リノール酸、リルン酸、 アラキドン酸、エルカ酸、等である。

医薬投与のために必要とされる毎日の投与量は、ｋｇ体重当たり０．００１〜２ ５ｍｇであり、可能なら２〜３回に分けられる。

この目的のためには、ステロールの脂肪酸エステル又はこれらのエステルを有す る自発的分散濃縮物が、従来の医薬製剤中に、従来の賦形剤及び／又は希釈剤及 び安定剤と共に導入され、そしてその投与形は、たとえば被覆された錠剤、錠剤 、カプセル、粉末、顆粒、ペレット、溶液、アンプル、エマルジョン、クリーム 又は座剤である。

本発明の主要物質を形成する活性物質又はその混合物及びこれらの活性物質又は その混合物を含む自発的分散ａ細物は、経口投与され、注射され（静脈内、皮下 又は筋肉内）又は他の手段で投与され得る。それらが経口投与のために固体形と して存在する場合、これは錠剤、顆粒、ペレット、粉末又はカプセル、等の形で 存在することができる。この製剤は、添加剤、たとえば医薬的な賦形剤、たとえ ばサツカリド又はセルロール基材、結合剤、たとえばスターチペースト又はメチ ルセルロール、充填剤又は砕解剤、等、並びに医薬の調製又は医薬製剤に通常使 用される添加剤を含むことができる。本発明の活性物質又はその混合物が液体投 与形で経口投与される場合、それらは、中でも懸濁液、エマルジョン及びシロッ プから選択されるいづれかの形で存在することができ、そしてそれらはまた、使 用の前、溶解され、又は乳化される乾燥製剤の形でも存在することができる。

本発明の活性物質又はその混合物が、水溶液、懸濁液又は油状又は水性エマルジ ョン、好ましくはマイクロエマルジョンの形で、本発明の自発的分散：ａ細物か ら加工される場合、それらはまた、注射によっても投与され得る。しかしながら 、通常、投与のすぐ前で、水性液体媒体、たとえば殺菌水又は生理食塩水又はグ ルコース溶液に抽出物又は濃縮物を溶解し、又は懸濁することによって、注射溶 液を調製することができる。

必要なら、従来使用されて来た溶媒、安定剤、保存剤及び等張溶液の調製のため の添加剤が、注射のための製剤に添加され得る。この方法°で得られた注射用製 剤は、静脈内、筋肉内、皮下又はいづれか他の適切な手段で投与される。

本発明はまた、活性剤又はその混合物又はこれまで記載されて来た自発的分散濃 縮物を含む、腫瘍細胞の増殖を抑制するための医薬製剤にも関する。本発明の医 薬製剤は、温血動物への腸内（たとえば経口又は直腸）又は非経口又は局部投与 のために使用され得るものであり、この製剤は自発的分散濃縮物を単独で又は医 薬的に許容できる賦形剤と一緒に含む。

本発明の濃縮物の投与量は、温血動物の種類、年齢及び個人の状態並びに投与の 方法に依存する。腫瘍細胞の破壊の効果を達成するためには、たとえばｋｇ体重 当たり約０．１〜５０ｒｎｇの範囲の投与量が皮下投与され、そして眩体重当た り０ｏ０５〜５　ｍｇの範囲の投与量が軽い体重の温血動物、たとえばマウス、 ラット及びハムスターに腹腔的投与される。

新規医薬製剤の経口及び腸内形は、１〜９５％、好ましくは１０〜９５％及び特 に２０〜９５％の本発明の自発的分散濃縮物を含む。たとえば、それらは、単位 −型投与与形で、すなわち被覆された錠剤、マイクロペレット、錠剤、座剤又は アンプルとして及び特にカプセルとして存在することができる。

経口形のための適切な医薬的に許容できる賦形剤は、主に充填剤、たとえばｔＪ ！　（たとえばラクトース、スクロース、マンニトール又はソルビトール）、セ ルロース調製物及ヒ／又はリン酸カルシウム（たとえばリン酸三カルシウム又は リン酸水素カルシウム）、追加の結合剤、たとえばスターチペースト、中でも、 コーンスターチ、小麦スターチ、米スターチ又はポテトスターチ、゛ゼラチン、 トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ナトリウ ムカルボキシメチルセルロース及び／又はポリビニルピロリドン及び／又は砕解 剤（所望には）、たとえば上記のスターチ、追加のカルボキシメチルスターチ、 架橋されたポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸又はその塩、たとえばアル ギン酸ナトリウムである。

適切な流れ調整剤の例は、ポリエチレングリコール２００〜６００及び上記のも のである。

人のための好ましい投与形であるゼラチンカプセルは、適切な被膜、濃縮された ｔｉ温溶液場合によっては、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポ リエチレングリコール及び／又は二酸化チタンを含むことができる）、ラッカー 溶液（水性又は有機溶媒を用いて調製されたもの）、又は適切なセルロース鋼製 物、たとえば微小結晶性セルロース（Ａν１ｃｅｌ）、アセチルセルロースフタ レート、ヒドロキシメチルセルロースフタレート又はコポリマー、たとえばＥｎ ｄｒａｇｉｔ・Ｌ３０Ｄの溶液の腸被膜により供給される。

本発明に従っての特に適切な経口投与のための医薬投与形は、可塑剤、たとえば グリセロール又はソルビトールとの二構成ゼラチンカプセルである。ソフト−ゼ ラチン又はハード−ゼラチンカプセルは、充填剤、たとえばラクトース、結合剤 、たとえばスターチ及び／又は滑剤、たとえばタルク又はステアリン酸マグネシ ウム、並びに適切には安定剤及び酸化防止剤、たとえばα−トコフェロールとの 混合物として本発明の自発的分散濃縮物を含むことができる。好ましくは、希釈 剤として、適切な液体、たとえば液体ポリエチレングリコール２００〜６００が 使用され得る（これに安定剤及び酸化防止剤も添加され得る）。

非経口投与のためには、蒸留水が本発明の濃縮物に添加される。次に形成する注 射のための水性マイクロエマルジョンに、増粘物質、たとえばＮａ−カルボキシ メチルセルロース、ソルビトール、マンニトール及び／又はデキストラン並びに 適切には、また安定剤及び酸化防止剤が添加され得る。

非経口投与のための医薬製剤は、好ましくは０６１〜６０％、特に１〜４０％の 本発明の自発的分散濃縮物を含む。

局部使用、特に皮膚癌の予防のために適切である製剤は、本発明の濃縮物０．０ ０１〜７０％含むクリーム、軟膏、ペースト、泡沫、チンキ剤及び溶液である。

クリーム及び５０％以上の水を含む水中油エマルジョンのために使用される油状 基材は主に、脂肪アルコール、たとえばラウリルアルコール、セチルアルコール 又はステアリルアルコール、固体粘稠度への液体の蝋、たとえばイソプロピルミ リステート、羊毛蝋又は田螺及び／又は炭化水素、たとえば石油ゼリー（ペトロ ラタム）又はパラフィン油である。これらの油状基材を乳化するために適切であ る主な物質は、卓越して親水性質を有する医薬的に許容できる界面活性物質、た とえば非イオン性乳化剤、特に８以下のＨＬ　Ｂ値を有するポリアルコール又は 酸化エチレンアダクトの脂肪酸エステル（たとえばポリグリセロール脂肪酸エス テル又はポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル）である、水相に添加される添 加物は、数ある中で、クリームの乾燥を妨げる物質、たとえばポリアルコール、 たとえばグリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール及び／又はポリエ チレングリコール２００〜６００、及びさらに保存剤、臭気付与物質、等である 。

軟膏は、７０％まで、好ましくは２０〜５０％の水又は水性相を含む油中水エマ ルジョンである。

脂質相として適切である物質は主に、炭化水素、たとえば石油ゼリー、パラフィ ン油及び／又は固体パラフィンであり、そしてこれは水結合能力を改良するため に適切なヒドロキシ化合物、たとえば脂肪アルコール又はエステル、たとえば七 チルアルコール又は羊毛蝋アルコールを含む。

多くの場合、８〜１６のＨＬＢ値を有する乳化剤、たとえばソルビタン脂肪酸エ ステル（たとえばソルビタンイソステアロール）も添加される。水相に添加され る添加剤は、数ある中で、保湿剤、たとえばポリアルコール（グリセロール、プ ロピレングリコール、ソルビトール及び／又はポリエチレングリコール２００． ４００．６００）　ｉさらに保存剤、臭気付与物質、等である。

脂肪軟膏は無水性であり、そして主に、基材として炭化水素、たとえばパラフィ ン、石油ゼリー及び／又は液体パラフィン；さらに天然又は部分合成の脂肪、た とえばココナツツ脂肪酸トリグリセリド、グリセロール、たとえば脂肪アルコー ルの脂肪酸部分エステル、水吸収能力を高める乳化剤及び／又は添加剤（これら のすべては軟膏に関連して言及されてペーストは、分泌物を吸収する粉末成分、 たとえば金属酸化物（たとえば酸化チタン又は酸化亜鉛）及びさらに、存在する 湿気又は排出物を結合するタルク及び／又は珪酸アルミ形で存在する本発明の自 発的分散濃縮物の氷中油エマルジョンであり、そしてハロゲン化された炭化水素 （たとえば低級クロロフルオロアルカン、たとえばジクロロジフルオロメタン及 びジクロロテトラフルオロエタン）が噴射剤として添加される。添加され得る他 の物質は、従来の添加剤、たとえば保存剤、等である。

本発明はまた、ヒト及び動物における腫瘍細胞の増殖の阻害のために又は腫瘍症 に対する予防剤としての、活性物質、活性物質の混合物及び本発明の自発的乳化 濃縮物の使用に関し、その投与は、好ましくは、上記医薬製剤に対応する投与形 で行なわれる０食養生食物及び食物添加側としての使用のためには、最適な組成 物が個々の場合ごとに確立されるべきである。

欠」１舛 １、親油性成分及び水性抽出物の獲得 ヘリアンタス　チーユアス　Ｌ、（Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓ　ａｎｎｕｕｓ　Ｌ、 ）の外皮をむかれた種子（ヒマワリの仁）’７５０ｇを、蒸留水により湿潤し、 そして３０°Ｃ及び９０％の相対的湿度で４８時間貯蔵する。現在１．５００ｇ の重量になった膨潤された発芽前種子を、蒸留水１，５００ｄ、マンニトール２ ０ｇ及び１５ｇのＩｎｖａｄｉｎ”　ＪＦＣ８００％（Ｃ３ｂａ−Ｇｅｉｇｙ　 ＡＧ）により処理し、そしてその混合物をＷａｒｉｎｇブレンダー及びＦｒｙｔ ｔｒａ　ＡＧ、Ｒｈｅｉｎｆｅｌｄｅｎからの歯のあるコロイドミルを用いて均 質化する。これらの３ｋｇの均質物を、＋４゛Ｃ及び１０’０００ｒｐｍ＝１８ °ｉｏｏ　ｇで１時間、Ｓａｐｒａｆｕｇｅ　２２ＣＨｅｒ’；ｉｕｓ　ＡＧ、 Ｚｕｒｉｃｈ）を用いて遠心分離する。３種の相が形成される。上部の親油性相 を除き、そして中間の水性相を、より重い脂肪及びワックス並びに細胞破壊物を 含む底部相から分離する。

２、親油性成分の処理及び分析 加工例１からの親油性相２００　ｇを、ｔ−ブチルメチルエーテル４００ｄに溶 解し：その溶液をフィルター紙を通して濾過により濁りを無くす。次に、溶媒を 、５間／Ｈｇの真空（ダイヤフラムポンプ）下で及び３５°Ｃ〜３．５°Ｃの温 度グラジェントで、Ｒｏｔａｖａｐｏｒ（Ｂｉｌ＋ｃｈｉ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒ ｉｕ＋＋＋５−Ｔｅｃｈｎｉｋ　ＡＧ、Ｆｌａｗｉｌ）により濾液から蒸発せし める。残る油状物を、分離用クロマトグラフィーによりさらに精製する。ガスク ロマトグラフィーによる、加工例２に従ってのヘリアン　ス　アニュアス　し。

の精製された油状物の分析は、次の値を付与する：′ｉｉ離脂肪酸　１．０７％ 屈折率（ｎｎ５０°ｃ”）１．４６４９過酸化物価　５．４ 最っとも重要な脂肪酸の％での分析： Ｃ１８：２／微量のＣ２０７３，０ トコフェロール含有率： α−トコフェロール　７７０■／ｋｇ β−トコフェロール　３０■／ｋｇ γ−トコフェロール　１０■／ｋｇ δ−トコフェロール　〈５■／ｋｇ 処理例２に従ってのククルビ　ペポ　Ｌ、（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ屈折率（ｎｎ５ ０°ｃ）１．４６２７ 過酸化物価　５．３ 最っとも重要な脂肪酸の％での分析： Ｃ１８：２　５４．５ 次のものがガスクロマトグラムに検出され得る：飽和脂肪酸： ベヘン酸　ＣｚＪａａＯｚ アラキドン酸　ＣｚｏＨａ。０□ ステアリン酸　Ｃｌ５ＨｓｂＯｔ バルミチン酸　Ｃ＋ＪｈｚＯｚ ミリスチン酸　Ｃ，４１１□１１０２ ラウリン酸　Ｃ＋Ｊｚ＊Ｏｚ カプロン酸　Ｃ６１１＋ｚＯｔ イソカプロン酸　Ｃ６Ｈ＋　ｚＯ□ バレリアン酸　ＣｓＨ＋　ｏｏｚ イソバレリアン酸　ＣｓＨ＋。０□ 酪酸　Ｃａ　ｔｌ　ｓ　０２ プロピオン酸　Ｃ３Ｈ６０２ 酢酸　Ｃ，Ｈ，Ｏ。

不飽和脂肪酸ニ オレイン酸　Ｃｌ８Ｈ：１４０□ リノール酸　ＣｌａＨ：＋ｚＯ□ リルン酸　ＣＩＩＨ３゜０□　。

予備分離／精製は、Ｍｅｒｃｋ　６０ＰＦ　２５４シリカゲルＮ（それぞれ２０ Ｘ２０ｃｍのＲＰ−１８Ｐ２５４予備被覆ＴＬＣプレート、厚さ０．２５Ｍ）に より供給される２０Ｘ１００　ｃｍ　ＴＬＣプレートを用いて次の条件で行なわ れる： 希釈度：　ＴＢＭＥ／ＣｌＩＣｆ　３により１：１移動相：　９０／１０／　Ｌ 　１０．５　＝クロロホルム／メタノール／水／１００酢酸 溶離液：　ＣＨｚＣｊ！　ｚ　／メタノール＝７０／３０Ｒ，値：　０．３０〜 ０．３３ イソプロピルミスチテートによる１０％溶液中、ナノ予備被覆されたＴＬＣプレ ートへの通用 確保された精製段階は、Ｃ−１８ＨＰＬＣカラム、ＴＨＦによる１：１の希釈度 ；グラジェント形成を用いて行なわれる。溶離液：ａ）水＋０．１ＴＦ＾、ｂ） 　ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ。

スペクトル分析は、この親油性成分中に下記式：〔式中、Ｒは０１〜Ｃ１゜−ア ルキル又は０２〜Ｃ９゜−アルケニル基を表わす〕で表わされる遊離ステロール 及び／又はそれらの脂肪酸エステル及び／又はグルコシドの存在を示す。

Ｒ中のアルキル又はアルケニル基は直鎖又は枝分れ鎖であり、そして好ましくは その鎖中に８〜１０個の炭素原子を有する。

数ある中で、そのような基の例は次のものである：これらの中で、最っとも重要 なフィトステロールは、次のものである： ２４β−エチルコレスタ−５，２２，２５−トリエン−３β−オール（２５、２ ７−ゾヒドロポリフエラステロール）２４β−エチルコレスタ−５、２５（２７ ）−ジエン−３β−オール（コレステロール）゛ ２４Ｚ−エチリデンコレスト−５−エン−３β−オール（イソフコステロール） ２４α−エチルコレスタ−５，２２−ジエン−３β−オール（Δ５−スチグマス テロール） ２４α−エチルコレスト−５−エン−３β−オール（Δ５−シトステロール） ２４α−メチルコレスト−５−エン−３β−オール（カンペステロール） ２４β−メチルコレスト−５、２５（２７）−ジエン−３β−オール（コシステ ロール） ２４α−エチル−５α−コレスタ−７，２２−ジエン−３β−オール（スピナス テロール） ２４α−エチル−５α−コレスタ−７−エン−３β−オール（２２−ジヒドロス ピナステロール） ２４α−エチリデンコレスト−７−エン−３β−オール（Δ７−アへナスチロー ル） ２４β−メチル−５α−コレスタ−７、２５（２７）ジエン−３β−オール（２ ５、２７−ジヒドロフンギステロール）２４α−エチル−５α−コレスタ−７， ２２−ジエン−３β−オール（Δ７−スチグマステロール） ２４α−エチルコレスト−７−エン−３β−オール（Δ７−シトステロール） ２４α−エチル−５α−コレスタ−８，２２−ジエン−３３−オール 及び ２４β−エチル−５α−コレスタ−８、２５（２７）−ジエン−３β−オール。

３、　処理例１に従っての中間水性相のための処理側処理例１の中間水性相１６ ！の濾過されるべき材料をまず、０．２−〇Ｐｅ１１ｉｃｏｎフィルターカセッ ト（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ　Ｚｕｒｉｃｈ）Ｎｏ、　ＧＶＬＰＯＯＯＯ５（フィル ター領域０．４７ｒｒｒ）上で限外濾過にゆだねる。濾過速度は３．５バールで ５１／時である。残留する細胞残骸を含むペースト状残留物（０，８ｆ）をすて る。濾液（１５ｎ）を再び、３０’ＯＯＯドルトン〔δ］の排除レベルを有する Ｐｅ１１ｉｃｏｎフイルターカセツト（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ　Ｎｏ、　ＰＴＴＫ ＯＯＯＯ５、フィルター領域０．４７ｒｒｆ）による限外濾過にゆだねる。濾過 速度は２．５バールで、Ｍ！／時である。濾液（０，８５ｆ）を凍結乾燥せしめ る。これは、１２７ｇの重量を有するカン色の粉末物質を付与する。

主要構成成分として、この物質は、約１９’　１００δの分子量を有するタンパ ク’ｊｆ３８．１％を含み、そして約１９”１００δのタンパク質は次のアミノ 酸含有率を有する： Σ　１９’０５９ 凍結乾燥の後、ククルビタ　ペボ　し９種子の抽出の水性相は、８’７３４δの タンパク質１７．５％及び２０’７０２δのタンパク質４１．４％を含む淡カッ 色物質を付与する。

８°７３４δのタンパク質は次のアミノ酸含有率を有する：Σ　Ｂ’７３４ ２０°７０２δのタンパク質のアミノ酸含有率は次の通りである：Σ　２０’７ ０２ ０．２卿のＰｅ１ｌｉｃｏｎフイルター力セント上での限外濾過の後、濾液のい くらかを真空下で濃縮し、そして次に凍結乾燥せし６７　’　０００δ及び３０ ”０００δの他のタンパク質を含むことを示す。

比較態様におい・て、アミノ酸含有率を、処理例１のククルビタ　マクシマの種 子の水性抽出物から得られ、そしてそれぞれ１９’０５１δ及び３０’４５１δ の分子量を有する２種の主要タンパク質について決定した。

４．８の　・ゝ　の　１′の１ ａ）処理例１に従って調製され、そして精製された親油性相１０重量％； 処理例３に従って調製された凍結乾燥抽出物３０重量％；イソプロピルミリステ ート２０重量％；乳化剤混合物Ｄｉｐｈａｓｏｌ”　３８７３　（１０重量％） ；Ｔｎｖａｄｉｎ”　ＪＦＣ８００％（１０重量％）；マンニトール２０重量％ Ｄｉｐｈａｓｏｌ”　３８７３は、・下記一般式の２種の化合物それぞれ５０重 量％から成る乳化剤混合物である： Ｉｎｖａｄｉｎ”　ＪＰＣ８００％（Ｃ４ｂａ−Ｇｅｉｇｙ）は、９〜１０個の オキシエチレン基を有するＬｅｒｔ、−オクチルフェニルポリオキシエチレンエ ーテルである。

ｂ）クロマトグラフィー処理（処理例１及び２）により親油性相から分離され、 そして精製された１又は複数の遊離ステロール及び／又はそれらの脂肪酸エステ ル又はグルコシド１〜５重量％； 遊翻脂肪酸１〜５重世％； イソプロピルミリステート（＝ミリスチン酸のイソプロピルエステル）５〜２０ 重世％； ｒｎｖａｄｉｎ”　ＪＦＣ８００％（３０〜４５重量％）；ＤｉｐｈａｓｏｌＲ ３Ｂ７３　（３０〜４５重量％）５、　処理例：カプセル、錠剤、座剤又はアン プルの形での生物医薬製剤の調製 上記の一ロ虜ａ分ｌ」１濃■宜を、次の基本配合物を用いて造度■２ス上人に加 工する二 〇 コーン油、マイジス　ゲルミニス　２００　４０　１００　４０オレウム（１１ ａｙｄｉｓ　ｇｅｒｍｉｎｉｓ　ｏｌｅｕｍ）ｉ　超純粋なシリカゲル６０　２ ５　５　１２，５　５Ｉｎｖａｄｉｎ’　ＪＦＣ８００％　５　１　２．５　１ 発泡性錠剤の形で使用するための指針 β−カロチン、２００ｐｐｍ、　１　１乳化剤　１０ クエン酸結晶　１０００　１０００ 注：　Ｅｕｒｉｓｏｌ”及びＥｕｒｉｋｉｎＲは、Ｍａｒｉｇｅｎ　Ｓ、Ａ、、 Ｒ３ｅｌ＋ｅｎの登録商標である。

生立ヱ匈ヱヱ皇ヱ 処理例１〜４に従っての活性物質及び自発的乳化性濃縮物の抗Ｎ！！瘍作用を、 次の試験結果により確証する：１、”　すＪｉｍ　Ｌ二を　いてのイン−ビトロ アッセイマイクロタイタープレート及び連続的希釈法を用いての生物学的アッセ イシステムを開発した。ｌＩｎ１当たり１０’個の腫瘍細胞のバッチを培養培地 ＲＰ）ＩＩＩ　１６４０に配置し、そして１０％のウシ胎児血清（ＧＩＢＣＯ） により不活性化し；アッセイの間、いわゆる非集密的細胞単層に細胞を増殖を可 能にするのに十分に低い密度でその細胞を広げる。６〜２４時間後、サンプルを 列当たり１００１１１添加し、これに培地１００１１！を初めのウェルに添加す る。この混合物の半分を取り、次のウェルに移し、そして再び培地１００Ｉｉに より処理する。この結果は、ｎＩＡ幾何学的連続希釈をもたらす。

プラークアッセイにおいては、サンプルを３４５％のｃｏ２下で３〜５日間、３ ７“Ｃでインキュベートする。次に、それらをメタノール７０％、ホルムアルデ ヒド１％及び水２９％の溶液中、０．１％の結晶性バイオレッ）　（Ｆｌｕｋａ 、Ｂｕｃｈｓ）を用いて染色し、そして固定する。そのサンプルを、３００×の 倍率での顕微鏡下で評価する。最大細胞毒性希釈度を決定する。サンプルをまた 、分光計での走査及び吸光度測定により定量評価することができる。

肪見■且璽 ＴＳＡ、：：ｊ、ズミ腺癌（胸の自発的癌）　、Ｐｒｏｆ、Ｇｕｉｄｏ　Ｆｏｒ ｎｉ。

Ｉｎ５Ｌｉｔｕｔｏ　ｄｉ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉａ、ＵｎｉｖｅｒｓｉＬ ｈ　ｄｉ　Ｔｏｒｉｎｏ。

５ｃｕｏｌａ　ｏｌｉ　ＭｅｄｉｃｉｎａＢＮＹ：ヒト黒色腫（Ｂｉｏｔｅｃｈ ｎｏｌｏｇｙ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ、Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ＋Ｂａ５ｔｅ） ２００２　：　ＦＬＯＷ　ヒト系（胎児の肺の線維芽細胞）ＮＭＣ：ヒト神経芽 腫 ２、　不ズミに・　るインービポア・ンセイインービボアソセイを雌のマウスに 対して行なった。２８〜３２ｇの体重の年とったＢａ１ｂ−ｃ株の動物を使用し た（ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒ、旧ｔａｎ）。比較標べことして、自発的腺癌Ｔ ＳＡ、ｉ−なわちＩｎ５ＬｉＬｕｒｏ　ｄｉ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉａ、Ｌ ＩｎｉｖｅｒｓｉＬｈ　ｄｅＨｌｉ　５ｔｕｄｉ　ｄｉＴｏｒｉｎｏ、５ｃｕｏ ｌａ　ｄｉ　ＭｅｄｉｃｉｎａのＰｒｏｆ、Ｇｕｉｄｏ　Ｆｏｒｎｉにより定期 的に供給されるネズミｌｌ！Ｉ！瘍細胞系を使用した。

文士」Ｕ阻１狡 これは、Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｏｒｅ　５ａｎｉｔａｒｉｏ　ＵＳＬ　ｅｄ　Ｏｓ ｐｅｄａｌｅＭａｇｇｉｏｒｅ　Ｓａｎ　Ｇｉｏｖａｎｎｉ　Ｂａｔｔｉｓｔａ 、ＬＥ　ＭＯＬＩＮＥＴＴＥ、ＴｏｒｉｎｏのＰｒｏｆ、Ｇｉｏｒｇｉｏ　Ｒｆ ｖａｒａにより行なわれた。一方ではヘリアンタス　アニュアス及び他方ではク クルビタ　マキシマ／ペポの種子又は種子の仁からの発生前の凍結乾燥ホモジネ ートから調製され、そして唯一の食物として毎日使用されるペレットの投与は、 ひじょうに味が良く、且つ許容できることがわかった。欠乏症状又は見える副作 用は、６０日間にわたって認められなかった。この形でのホモシネ・−Ｆは、非 毒性として分類され得る。

末ｉ間藉 それぞれ５匹の試験動物の一連のグループに、通常の試験食物（Ｎａｈｒ−ｕｎ ｄ　Ｆｕｔｔｅｒｍｉｔｔｅｌ　ＡＧ、ＧｏｓｓａｕからのＮＡＦＡＧ完全食物 番号８５０）を与えた。

対照グループは、ひじょうに容易に摂取され、規則的な皮下増殖を示し、そして 固体腫瘍マスを形成する、ＴＳＡｌｌｌに系の８０〜１００”０００細胞単位の 一回の組径部注射（左の側腹部）を与えられる。その注入の１４日後（平均潜伏 期間）、新しく形成された組織が動悸し；同じ＜２１及び２８日後、及び３５日 後、同様であった。皮膚下の固体の明確な腫瘍マスの長さ及び幅の平均を決定す る（死後、再チェックする）。

生存生物における調製物の活性を試験するために、残存する試験動物は、通常の 試験用食物の他に、０．２ｄの用量の試腫瘍が、対照のように８０〜１００“０ ００　ＴＳＡ単位で組径部に導入される。それは１回で、グループで及びくり返 して取られ、そしてひじように比較できる結果を提供し、従って比較的低い数で 維持される統計学的グループを可能にする。

皮玉止■ 実験設定は、栄養補給の場合と同じである。管を用いる代わりに、試験される調 製物は、１週間当たり３度、０．２　ｍｌの割合で、注射により組径部（右の側 腹部の皮下）に投与される。

箱」四＋値 り、Ｎ、−リンパ節、十及び＋−二腫張Ｈに　される、スーロールの２　エスー ルの′ム璽製迭■処且開 ■）塩化チオニル（Ｍｗ　１１８．７７　：過剰）１．５ｇ及びジメチルホルム アミド１０滴を、トルエン５０ｄ中、トランス−２−ドデセン酸（Ｍｗ　１９Ｂ 、３１）　１　ｇに添加する。４°Ｃで２０時間後、β−シトステロール（Ｍｗ 　４１４゜７２）　１．　ｇをその反応混合物に添加する。その混合物を２２° Ｃで２０時間再び放置し、次に溶媒を真空下で蒸留し、そして油状残留物をシリ カゲルカラム上でクロマトグラフィー処理する；溶離剤：ヘキサン／酢酸エチル ＝９＝１゜最初の両分から、β−シトステロールードデセノエート（ＣＩ２：１ −シトステロール）を、屈折率ｎｏ２０℃＝１．５１１８を有する黄色の油状物 として得る。

次の化合物もまた、類似する方法で調製される：コレステリルードデセノエー） （Ｃ１２：１−コレステロール） コレステリルーリルエート（Ｃ１８：２−コレステロール）コレステリルーリル ネート（Ｃ１８：３−コレステロール）β−シトステロールーリルエート（Ｃ１ ８：２−シトステロール） β−シトステロールーリルネート（Ｃ１８：３−シトステロール） スチグマステロールードデセノエート（Ｃ１２：１−スチグマステロール） スチグマステロールーリルエート（Ｃ１８：２−スチグマステロール） スチグマステロールーリルネート（Ｃ１８：３−スチグマステロール） ２）塩化ウンデセノイル３ｇ及びβ−シトステロール２ｇを、テトラヒドロフラ ン１５０Ｉ！ｄｌ中において８０°Ｃで２時間、還流する。ピリジン又はジメチ ルホルムアミド２Ｉｄ、を添加した後、その反応をさらに１時間、８０°Ｃで還 流する。溶媒を回転蒸発機上で蒸留し、残留物をアセトニトリル中で再結晶化す る。

これは、６８．３°Ｃの融点を有するβ−シトステロールーウンデセノエート（ Ｃ１ｌ：１−シトステロール）を付与する。

次の脂肪酸エステルもまた、類似する方法で調製される：融点、Ｃ ３）クロロホルム２００−中、ドデセニル酸２ｇの溶液に、１．１′−カルボニ ル−ジイミダゾール１．８ｇを添加する。その反応溶液を３０°Ｃに１２時間加 熱し、そしてスチグマステロール４．１２７ｇを添加する。３０゛ｃでさらに１ ２時間後、溶媒を蒸留し、そして残留物を酢酸エチル１５０ａ＋ｆ中に取る。こ の溶液を、１／ＩＯＮの塩酸を用いて１度、及び１／ＩＯＨの水酸化ナトリウム 溶液を用いて１度、振盪することによって抽出する。酢酸エチルを蒸留した後、 その残留物を少々のへキサン７′酢酸エチル（９：１）中に取る。この溶液を、 ヘキサン／酢酸エチル（９：ｌ）を用いてシリカゲルカラム上でクロマトグラフ ィー処理する。ｎｏ２０″Ｃ＝１．４９１３の屈折率を有する純粋なスチグマス テロールードデセノエート（Ｃ１２：１−スチグマステロール）を得る。

次の化合物もまた、類似する方法で調製される：β−シトステロールードデセノ エート （Ｃ１２：１−シトステロール） コレステリルードデセノエート （Ｃ１２：１−コレステロール） β−シトステロールーオレエー　ト （Ｃ１８：１−シトステロール） スチグマステロール−オレエート （Ｃ１８：１−スチグマステロー・ル）さらに、技術付録＝１／６〜４／６に与 えられる測定データを参照のこと。

日に　て　れる　ステロールのグルコシド：スチグマステロール− 整− 蒸留ヘッド、滴下漏斗及び磁気撹拌機を備えた１００ｄの三ツ首フラスコ中に、 ス゛チグマステロール０．５ｇ，炭酸銀０．６ｇ及びベンゼン２０ｄを導入する 。ベンゼン３０ｄ中、アセトブロモグルコース１．３５ｇの溶液を、滴下漏斗に 通用する。

フラスコ中のベンゼン溶液を、ベンゼンがわずかに蒸留するまで油槽中で加熱す る。滴下漏斗からのベンゼン溶液を、今、約４５分間にわたって、撹拌しながら 滴下する。その反応混合物をさらに６０分間撹拌し、沸点よりも少し下に冷却し 、そして濾過し、濾液を真空蒸発する。残留物を熱アルコール２０ｄに溶解し、 水５Ｉｄを添加し、そしてその混合物を０〜５°Ｃで一晩放置する。

沈殿した結晶を濾過し、そして暖かなメタノール２０ｍｌ！中に溶解し、そのｔ 蓄液を、メタノール中、ナトリウムメチレートの５％溶液を用いて室温で約１２ ．５のｐＨに調整し、そしてこのｐｌ＋で３０分間放置する。続いて、その混合 物を、酢酸を用いて約７のｐｌ＋に調整し、そしてその混合物を蒸発乾燥せしめ る。

残留物をクロロホルム／メタノール１：ｌの溶液２０／ｒ１１に取り、シリカゲ ル１ｇを添加し、そしてそのバッチを再び真空蒸留乾燥せしめる。その残留物を クロロホルム／メタノール９９：１の溶液３０ｍｌに懸濁し、水により飽和する 。その懸濁液を同じ溶媒系中、シリカゲル２０ｇのクロマトグラフィーカラムに 懸濁する。そのカラムを、同じ溶媒系及びクロロホルム／メタノール９：１及び ８：１（常に水により飽和される）の１００Ｉｎ１部分により溶離する。生成物 は、クロロホルム／メタノール８二２（水により飽和される）と−緒に現われる 。

その溶液を真空下で蒸発乾燥せしめ、生成物を熱アルコール１０ｄに懸濁し、水 ３−をその懸濁液に添加し、そしてその混合物を０〜５°Ｃで一晩放置する。続 いて、生成物を濾過し、そして真空下で８時間、６０°Ｃの内部温度で乾燥せし める。これは約３０■の結晶性生成物を与える。

溶離剤、クロロホルム／メタノール／水１５　：　５　：　２　（底１７）相） 中のＲｔ値：０．４．融点：　２５５．９〜２５６．７℃。

［；方法で、コレステロール、シトステロール、エストラジオール及び他のステ ロイドを処理し、グルコシドを得ることができる。また、技術付録５／６及び６ ／６に与えられる情報も参照のこと。

ｍして、ｌ〜Ｘのスーロールの８　エステルを４む、Ｈの　・＼　■の　１ ａ）ステロールの脂肪酸エステル（式１−Ｘ）７．５重量％；イソプロピルミリ ステート（＝ミリスチン酸のイソプロピルエステル）７，５重量％； 乳化７ｆＩＪ　？Ｒ合物Ｄｊｐｈａｓｏ１１′３８１３　（Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇ ｙ）　４２．５重量％；Ｉｎｖａｄｉｎ″ＪＦＣ　８００％（Ｃｉｂａ−Ｇｅｉ ｇｙ）　４２．５重量％Ｄｉｐｈａｓｏｌ”　３８７３は、下記一般式の２種の 化合物それぞれ５０重量％から成る乳化剤混合物である： Ｉｎｖａｄｉｎ”　ＪＰＣ８００％（Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ）は−、９〜ｌｏ個 のオキシエチレン基を有するＬｅｒＬ、−オクチルフェニルボリオギシエチレン エーテルである。

ｂ）式■〜Ｘのステロールの１又は複数の脂肪酸エステル７．５〜１５重量％； イソプロピルミリステート、オリーブ油又はヒマワリ油、冷圧され、そして未処 理のコーン油、麦芽油又はベニバナ油０〜４０重量％； Ｄｉｐｈａｓｏｌ１１３８７３　（２２，５〜４２．５重量％）及びＴｎｖａｄ ｉｎＲＪＦＣ８００％　２２．５〜４２．５重量％Ｃ）式１−Ｘのステロールの １又は複数の脂肪酸エステル７．５〜１５重量％； イソプロピルミリステート０〜４０重量％；ｒｎｖａｄｉｎ″ＪＦＣ８００％　 ２２．５〜４２．５重量％；５ｏｐｒｏｐｈｏｒ−Ｆ　ｅ又はＦＬＫ　（Ｒｈ６ ｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ）２２．５〜４２．５重量％ 几　：Ｘ　として、ｒ、’ｌ−Ｘのステロールの８エステル　び　はステロール −グルコシドを１むマイクロベレット、カプセル、１、　１　はアンプルのノで の生血豆ゑ盟剋Ｈ袈 上記−ロ虜がケ公１■支盪１１脛を、次の基本配合物を用いて１月」≦！たムに 加工する： ２５０ｓ＋ｇカプセル　５００■カプセル蒸留水（次いて凍結乾燥される）　（ ２５０■）　（５００■）ラクトース　１６０〜１８４■　３２５〜３７３　ｍ ｇ結晶性セルロース　４０■　７５■ いわゆる“−亡パ゛　マイクロベレット　は　ハ立　の＝　１のための１′−肚 濃縮物　里ｔＷ亙　バッチ当た炬 Ｍｏｒｉｇｅｎｏ１９−濃縮物 Ｍａｒｉｇｅｎｏｌｅ　’ａ縮線動　５６５ｍｇ　５６５ｇマイクマイクロベレ ット ／顆は、流動層又は回転層において行なわれた。

注：　１１ａｒｉｇｅｎｏｌｏはＭａｒｉｇｅｎ　Ｓ、Ａ、、Ｒｉｅｈｅｎの登 録商標である。

注土ｌＩ領乙ヱｊ／− マイクロタイタープレート及び一連の希釈法を用いての生物学的アッセイシステ ムを開発した。１ｄ当たり１０４個の腫瘍細胞のバッチを培養培地ＲＰＭＩ　１ ６４０に配置し、そして１０％のウシ胎児血清（ＧＩＢＣＯ）により不活性化し ；アッセイの間、いわゆる非集密的細胞層に細胞を増殖するのに十分に低い密度 でその細胞を分散する。６〜２４時間後、サンプルを列島たり１００Ｉ添加し、 これに培地１００Ｊ１１を初めのウェルに添加する。この混合物の半分を取り、 次のウェルに移し、そして再び培地１００μ！により処理する。この結果は、ｎ ＋Ａ幾何学的連続希釈をもたらす。

プラークアッセイにおいては、サンプルを３．５％のＣＯ２下で３〜５日間、３ ７°Ｃでインキュベートする。次に、それらをメタノール７０％、ホルムアルデ ヒド１％及び水２９％の溶液中、０、１％の結晶性バイオレット（Ｆｌｕｋａ、 Ｂｕｃｈｓ）を用いて染色し、そして固定する。そのサンプルを、３００×の倍 率での顕微鏡下で評価する。最大細胞毒性希釈度を決定する。サンプルをまた、 分光計での走査及び吸光度測定により定量評価することができる。

粘」ＩＩ１厘 ＴＳＡ：ネズミ腺癌（胸の自発的癌）　、Ｐｒｏｆ、Ｇｕｉｄｏ　Ｆｏｒｎｉ＋ １ｎｓｔｉｔｕＬｏ　ｄｉ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ ’ａ　ｄｅｇｌｉＳｔｕｄｉ　ｄｉ　Ｔｏｒｉｎｏ、５ｃｕｏｌａ　ｄｉ　Ｍｅ ｄｉｃｉｎａＺ　ネズミに・　るインービポア・・セイイン〜ビボアッセイを雌 のマウスに対して行なった。２８〜３２ｇの体重の年とったＢａ１ｂ−ｃ株の動 物を使用した（ＣｈａｒｌｅｓＲｉＶｅｒ＋　Ｍｉ　ｆａｎ）。比較標準として 、自発的腺癌ＴＳＡ、すなわちＩｎ５Ｌｉｔｕｔｏ　ｄｉ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ｏｇｉａ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｂ　ｄｅｇｌｉ　５ｔｕｄｉ　ｄｉＴｏｒｉｎｏ 、５ｃｕｏｌａ　ｄｉ　Ｍｅｄ’１ｃｉｎａのＰｒｏｆ、Ｇｕｉｄｏ　Ｐｏｒｎ ｉにより定期的に供給されるネズミ腫瘍細胞系を使用した。

皇亘扱取文旦 許容能力を決定するために、種々の濃度のマイクロエマルジョン０．２５ｍの毎 日の投与量が、３０日間にわたって管により投与された。ｋｇ体重当たり１０■ まで、その許容能力は良好であった。

ＬＤ、。は籍体重当たり１００■である。

末ｌ獲給 それぞれ５匹の試験動物の一連のグループに、通常の試験食物（ＮＭｈｒ−ａｎ ｄ　Ｆｕｔｔｅｒｍｉｔｔｅｌ　ＡＧ、ＧｏｓｓａｕからのＮＡＦＡＧ完全食物 番号８５０）を与えた。

対照グループは、ひじょうに容易に摂取され、規則的な皮下増殖を示し、そして 固体腫瘍マスを形成する、ＴＳＡＩＩ！ｌ！瘍系の８０〜ｉｏｏ’ｏｏｏ細胞単 位の一回の組径部注射（左の側腹部）を与えられる。その注入の１４日後（平均 潜伏期間）、新しく同様であった。皮膚下の固体の明確な腫瘍マスの長さ及び幅 の平均を決定する（死後、再チェックする）。

生存生物における調製物の活性を試験するために、残存する試験動物は、通常の 試験用食物の他に、０．２ｄの用量の試験調製物を毎日、管により受ける。５〜 ７日の適応期間の後、腫瘍が、対照のように８０〜１００’ＯＯＯＴＳ＾単位で 組径部に導入される。それは１回で、グループで及びくり返して取られ、そして ひじょうに比較できる結果を提供し、従って比較的低い数で維持される統計学的 グループを可能にする。

皮工庄Ｍ 実験設定は、栄養補給の場合と同じである。管を用いる代わりに、試験される調 製物は、１週間当たり３度、０．２　ｍｌの割合で、注射により組径部（右の側 腹部の皮下）に投与される。

粘１堅号ｌ伺 ＋＝腫張 浄書（内容に変更なし） 融点 Ｍｅｔｔｌｅｒ　Ａｐｐａｒａｔｕｓ　ＴＡ　４０００　ＤＳＣ方法（差動走査 熱量法）又はＢｉｃｈｉ　Ａｐｐａｒａｔｕｓ　Ｎａ５３５を用いて測定された 。速度＝２．５スチグマステロール−β−ｄ−グルコシド　２５５．９−２５６ ．７屈折率 Ｚｅｉｓｓ屈折計を用いて測定された。

化合物　データ　ｎａ２０’ｃ 密度走査熱量法 Ｒｆ−値 ＣＨｇＣｆｆ１ｚ中、１％強度溶液、適用されたバンド２Ｃ■／２ｔｔ１．　□ ＬＩＮＵＭＡＴ　ｍ　ＣＡＭＡＧ　１０ｃｓ＋は１　：　Ｉ　ＨｚＳＯ４／Ｍｅ ＯＨにおいて１２０”Ｃテ２分後、ＵＶ　３６６で運転した。

システム　ｌ　Ｍｅｒｃｋプレート、５７１５　石油エーテル／ジエチルエーテ ル　９８：２ システム　２　同上　同上　９７：３ システム　３　同上　シクロヘキサン／エチルアセテート　９７：３ システム　４　Ｍａｃｈｅｒｅｙ　Ｎａｇｅｌ　ＲＰ　１８　石油エーテル／ジ エチルプレート、＾ｒＬ、８１１°０７１　エーテル　９５：５システム　５　 同上　ヘキサン／１．ブチルメチルエーテル／ アセトン　９０：５：５ システム　６　同上　石油エーテＪし／シクロヘキサン／エチル アセテート／水　４８：４８：３： ＋１ＰＬｃ分析 カラム：　２５ｃｍ／　４．６　ｍ、　Ｎｕｃｌｏｏｓｉｌ　５Ｃ１Ｂにより充 填される、３００人 １容離芹１：１００％ＣＬＣＮ　＋０．１　％　丁Ｆ＾、Ｒ，Ｔ。

ｌ〆／分、約２００バール ＵＶ検出器＝２００ｎ＋ｎ スチグマステロール−β−ｄ−グルコシドＲｆ（ｉ 通用：２■／１ｍ−０，２％強度溶液 ＣＨＣｊ！ｚ　：ＭｅＯＨ：水 ７０：３０：５における。

水浴を用いて６０°Ｃに加熱。

システムＩ　Ｒｆ、０．６５ システム２　Ｒｆ、０．５６ システム３　Ｒｆ、０．４９ システム４　Ｒｆ、０．６０ 脱−里上 システム１　：　ＣＨＣｊ！ｓ　：ＭｅＯＨ二１７％ｌ１Ｈｚ４１４１．１８ システム２　：　ＣＨＣ／！、：台ｅＯＨ：水７０’　３０　５ システム３　：　ＣＨＣｌｘ　：ＭｅＯＨ：水：酢酸？５．　２５　５　０．５ システム４：ｎ−ブタノール：　ＣＣｌ　ａ　：ＭｅＯＨ：蟻酸：水ＤＳＣ（密 度走査熱量法） Ｍｅｔｔｌｅｒ　Ａｐｐａｒａｔｕｓ　Ｔ＾４００°、速度２．５℃／分。

スチグマステロ〜ルーβ−ｄ−グルコシド手続補正書（方式） ％式％ １、事件の表示 ＰＣＴ／ＣＨ９０１００１６４ 平成２年特許願第５０９２６６号 ２、発明の名称 ステロール、それらの脂肪酸エステル及びグルコシド；それらの調製方法；これ らの化合物を含む自発的分散助剤；及び腫瘍の処理のためへのそれらの使用 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 名称　マリゲン　ソシエテ　アノニム ４、代理人 住所　〒１０５東京都港区虎ノ門−丁目８番１０号６゜補正の対象 （１）特許法第１８４条の５第１項の規定による書面の「特許出願人の住所」の 欄 （２）明細書の翻訳文 （３）請求の範囲の翻訳文 （４）図面の翻訳文 ７、補正の内容 （１）別紙の通り （２）明細書の翻訳文の浄書（但し、当初の第５４頁〜第６１頁の削除以外、内 容に変更なし）（３）請求の範囲の翻訳文の浄書（内容に変更なし） （４）図面の翻訳文の浄書（内容に変更なし）８６　添附書類の目録 （１）訂正した特許法第１８４条の５ 第１項の規定による書面　１通 （２）明細書及び請求の範囲の翻訳文　各１通（３）図面の翻訳文　１通 国際調査報告 国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．選択された植物、特にコンポシタエ（Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅ）科及びウリ科 〔ククルビタセアエ（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ）〕に属する植物種の種子か ら細胞間活性物質を得るための方法であって、前記種子を２〜４日間予備発芽し 、そして次に０．１〜３％、好ましくは０．１〜１％のマンニトール及び０．１ 〜４％の医薬的に許容できる非イオン性界面活性剤又は界面活性剤混合物（予備 発芽された種子の重量に対して）を含む蒸留水溶液により処理し；このようにし て得られた混合物を歯のあるコロイドミルで均質質化し、続いて遠心分離にかけ ；お互いから得られる３相を分離し；外皮断片及び細胞残骸を含む底部相を捨て ；上相部の親油性相を抽出段階にゆだね、そして次に分離用クロマトグラフィー によりそれを精製し、そしてまず、中間の水性相を限外濾過にゆだね、次にそれ を真空下で濃縮し、そしてそれを濃縮物として凍結乾燥せしめることを含んで成 る方法。 ２．自発的分散性濃縮物であって、抗腫瘍成分として、請求の範囲第１項記載の 調製され、そして精製された親油性相０．００１〜１５重量％及び／又は請求の 範囲第１項記載のヘリアンタスアニュアスＬ．，ククルビタベポＬ．又はククル ビタマキシマダッチの予備発芽された種子からの凍結乾燥抽出物０．００１〜３ ０重量％、及びまた、医薬的に許容できる界面活性剤又は界面活性剤混合物０． ００１〜８５重量％、ハイドロトロープ又は補助乳化剤として作用する医薬的に 許容できる溶媒又は溶媒混合物０．００１〜４０重量％及び適切には、従来の賦 形剤及び／又は希釈剤又は安定剤を含んで成る自発的分散性濃縮物。 ３．抗腫瘍成分として、下記一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）▲数式、化学式、表等があります▼（ ＩＩ）▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩＩ）▲数式、化学式、表等があ ります▼（ＩＶ）▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ）▲数式、化学式、表 等があります▼（ＶＩ）▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩＩ）▲数式、 化学式、表等があります▼（ＶＩＩＩ）▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ Ｘ）▲数式、化学式、表等があります▼（Ｘ）〔式中、ＲはＣ１〜Ｃ１０−アル キル基又はＣ２〜Ｃ１０−アルケニル基を表わし、そしてＲ′はＣ１〜Ｃ３２− アルキル基又はＣ２〜Ｃ３２−アルケニル基又はアルカポリエン基（すなわちそ の対応するアルカジエン、アルカトリエン、アルカテトラエン、アルカペンタエ ン又はアルカヘキサエン）を表わす〕のステロール脂肪酸エステル又はこれらの 成分の組合せ０．００１〜１５重量％、並びに医薬的に許容でき、そしてハイド ロトロープ又は補助乳化剤として作用する溶媒又は溶媒混合物０〜４０重量％、 医薬的に許容できる界面活性剤又は界面活性剤混合物０．００１〜８５重量％、 ビタミン又はプロピタミン０〜１０重量％、遊離酸０〜１０重量％及び適切には 、従来の賦形剤及び／又は希釈剤を含んで成る自発的分散性濃縮物。 ４．抗腫瘍成分として、式Ｉ〜Ｘ〔式中、Ｒは８〜１０個の炭素原子を有するア ルキル又はアルケニル基を表わし、そしてＲ′は８〜２２個の炭素原子を有する アルキル又はアルケニル基もしくはアルカポリエン基を表わす〕のステロール脂 肪酸エステル０．００１〜１５重量％を含んで成る請求の範囲第３項記載の自発 的分散性濃縮物。 ５．抗腫瘍成分とじて、式Ｉ〜Ｘ〔式中、Ｒは８〜１０個の炭素原子を有するア ルキル又はアルケニル基を表わし、そしてＲ′は８〜１８個の炭素原子を有する アルキル又はアルケニル基もしくはアルカポリエン基を表わす〕のステロール脂 肪酸エステル０．００１〜１５重量％を含んで成る請求の範囲第４項記載の自発 的分散性濃縮物。 ６．抗腫瘍成分として、下記のステロール脂肪酸エステル：スチグマステロール ーウソデセノエートスチグマステロールードデセノエート スチグマステロールーオレエート スチグマステロールーリノレエート スチグマステロールーリノレネート β−シトステロールーウンデセノエートβ−シトステロールードデセノエート β−シトステロールーオレエート β−シトステロールーリノレエート β−シトステロールーリノレネート コレステリルーウンデセノエート コレステリルードデセノエート コレステリルーオレエート コレステリルーリノレエート コレステリルーリノレネート の１種又はその混合物０．００１〜１５重量％を含んで成る請求の範囲第５項記 載の自発的分散性濃縮物。 ７．前記医薬的に許容できる界面活性剤又は界面活性剤混合物が、アニオン、カ チオン、両性イオン又は非イオン、好ましくは非イオン性であり、そして一方で は２〜１８、好ましくは２〜６及び他方では１０〜１５の親水性−親油性バラン スを有し、そして前記ハイドロトロープ又は補助乳化剤が脂肪族カルボン酸エス テル、たとえばイソプロピルラウレート、ヘキシルラウレート、デシルラウレー ト、イソプロピルミリステート及び／又はラウリルミリステートである請求の範 囲第２項記載の自発的分散性濃縮物。 ８．前記医薬的に許容できる界面活性剤又は界面活性剤混合物が、アニオン、カ チオン、両性イオン又は非イオン、好ましくは非イオン性であり、そして一方で は２〜１８、好ましくは２〜６及び他方では１０〜１５の親水性−親油性バラン スを有し、そして前記ハイドロトロープ又は補助乳化剤が脂肪族カルボン酸エス テル、たとえばイソプロピルラウレート、ヘキシルラウレート、デシルラウレー ト、イソプロピルミリステート及び／又はラウリルミリステートである請求の範 囲第３項記載の自発的分散性濃縮物。 ９．式Ｉ〜Ｘのステロールの１又は複数の脂肪酸エステル７．５〜１５重量％、 イソプロピルミリステート、オリーブ油、冷圧され、そして処理されていないヒ マワリ油、コーン油、麦芽油又はベニバナ油０〜４０重量％、ＤｉｈｐａｓｏＩ Ｒ３８７３（２２．５〜４２．５重量％）及びＩｎｖａｄｉｎＲＪＦＣ８００％ ２２．５〜４２．４重量％を含んで成る請求の範囲第３項記載の自発的分散性濃 縮物。 １０．式１〜Ｘのステロールの１又は複数の脂肪酸エステル７．５〜１５重量％ 、イソプロピルミリステート０〜４０重量％、ＩｎｖａｄｉｎＲＪＦＣ８００％ ２２．５〜４２．５重量％及びＳｏｐｒｏｐｈｏｒＲＦＬ又はＦＬＫ２２．５〜 ４２．５重量％を含んで成る請求の範囲第３項記載の自発的分散性濃縮物。 １１．ステロールの脂肪酸エステルとして、７．５〜１５重量％のβ−シトステ ロールーウンデセノエート、β−シトステロールーラウロイレート、β−シトス テロールーパルミテート、β−シトステロールーオレエート、β−シトステロー ルーリノレエート、β−シトステロールーリノレネート、スチグマステロールー ウンデセノエート、スチグマステロールーラウロイレート、スチグマステロール ーパルミテート、スチグマステロールーオレエート、スチグマステロールーリノ レエート、スチグマステロールーリノレネート、コレステリルーウンデセノエー ト、コレステリルーラウロイレート、コレステリルーパルミテート、コレステリ ルーオレエート、コレステリルーリノレエート及び／又はコレステリルーリノレ ネートを含む請求の範囲第９項記載の自発的分散性濃縮物。 １２．脂肪酸エステルとして、７．５〜１５重量％のコレステリルードデセノエ ート、β−シトステロールードデセノエート及び／又はスチグマステロールード デセノエートを含む請求の範囲第９項記載の自発的分散性濃縮物。 １３．脂肪酸エステルとして、７．５〜１５重量％のコレステリルードデセノエ ート、β−シトステロールードデセノエート及び／又はスチグマステロールード デセノエートを台む請求の範囲第１０項記載の自発的分散性濃縮物。 １４．請求の範囲第２項記載の自発的分散性濃縮物１〜９５重量％を含み、そし て単位型投与量に処理され、そして従って、マイクロカプセル、顆粒、被覆され た錠剤、錠剤、座剤又はアンプル、特にカプセルの形で存在する治療用システム 調製物。 １５．請求の範囲第３項記載の自発的分散性濃縮物１〜９５重量％を含み、そし て単位型投与量に処理され、そして従って、マイクロカプセル、顆粒、被覆され た錠剤、錠剤、座剤又はアンプル、特にカプセルの形で存在する治療用システム 調製物。 １６．一般式Ｉ〜Ｘ〔式中、ＲはＣ１〜Ｃ１０−アルキル又はＣ２〜Ｃ１０−ア ルケニル基を表わし、そしてＲ′はＣ１〜Ｃ３２−アルキル又はＣ２〜Ｃ３２− アルケニル基又はアルカポリエン基を表わす〕で表わされるステロール脂肪酸エ ステルの、及び腫瘍細胞の増殖を抑制するためにステロール脂肪酸エステルを含 む請求の範囲第２〜１３項記載の自発的分散性濃縮物の使用。 １７．下記一段式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ′は基ＣＨ３−（ＣＨ２）４−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）４−Ｃ００− を表わす〕で表わされるステロール脂肪酸エステル。 １８．請求の範囲第１７項記載のステロール脂肪酸エステルを調製するための方 法であって、次の式：ＣＨ３−（ＣＨ２）４−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）４−Ｃ０ ０−で表わされる脂肪酸とＮ，Ｎ′−カルボニルシミイタゾールとを、２５〜７ ０℃で、テトラヒドロフラン、ベンゼン、クロロホルム又は類似する中性溶媒中 、アルコレートの触媒量の添加を伴って反応せしめ、そして続いて、その得られ た脂肪酸イミダゾールと下記一般式：▲数式、化学式、表等があります▼又は▲ 数式、化学式、表等があります▼ｏｒ▲数式、化学式、表等があります▼又は▲ 数式、化学式、表等があります▼で表わされるステロールとを反応せしめること を含んで成る方法。 １９．シトステロールー及びスチグマステロールーβ−ｄ−グルコシド。 ２０．請求の範囲第１９項記載のシトステロールー及びスチグマステロールーβ −ａ−グルコシドを調製するための方法であって、シトステロール又はスチグマ ステロールとアセトブロモグルコースとを、不活性溶媒中において、炭酸銀の存 在下で反応せしめることを含んで成る方法。