JPH0378107B2 - - Google Patents
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明はロドコツカス属に属する新規な微生物
に関する。 従来、脂肪酸のω−末端のみを選択的に酸化す
ることは工業的には困難とされてきた。例えば、
ラクトン系ムスク(じや香合成香料)の主成分で
あるヘキサデカノライドの製造にはω−ヒドロキ
シパルミチン酸が使用されるが、ムスクが高価で
あるのは、この前駆体たるω−ヒドロキシパルミ
チン酸の製造が困難なことに起因する。即ち、パ
ルミチン酸のω−末端を選択的に酸化してω−ヒ
ドロキシパルミチン酸とすることは、合成化学上
困難である。 一方、微生物にノルマルパラフインを資化させ
てジカルボン酸を製造する際に副産物としてω−
ヒドロキシ高級脂肪酸も得られることが報告され
ている(例えば特公昭48−26238号)このように
ω−ヒドロキシ高級脂肪酸はノルマルパラフイン
のアルカン資化性菌によるジカルボン酸への代謝
中間体であるが、その著量生産は困難とされてい
る。その理由としてはω−ヒドロキシ高級脂肪酸
の生成速度に比べて、そのジカルボン酸への転化
速度の方がずつと大きいためと推測される。 また、ω−ヒドロキシ脂肪酸と同様にラクトン
系ムスクの主成分である大環状ラクトンの有用な
中間体としてはω−ハロカルボン酸がある。ω−
ハロカルボン酸はハロゲンに官能基を導入するこ
とにより種々の誘導体にも導びくこともできる。
このω−ハロカルボン酸に関しては、アルスロバ
クター属、コリネバクテリウム属、ノカルデイア
属に属し、アルキルハライドからω−ハロカルボ
ン酸を生産する能力を有する菌を培養し、ω−ハ
ロカルボン酸を生産する方法が報告されている
(特開昭57−50893号)。 また一方、ジカルボン酸は合成樹脂、高級潤滑
油、可塑剤、香料等の製造原料として有用な物質
であるが、合成法により製造されていたジカルボ
ン酸は炭素数にも限度があり、炭素数12個以上の
ジカルボン酸を製造することは困難であつた。そ
こで近年、微生物を利用した発酵法によるジカル
ボン酸の製造法が注目されてきた。 従来、微生物によるジカルボン酸の製造法とし
てはキヤンデイダ(Candida)属(特公昭50−
19630号等)、ピキア(Pichia)属(特公昭45−
24392号等)等の酵母によるものが多く、細菌に
よるものではコリネバクテリウム
(Corynebacterium)属(特公昭56−17075号等)
しか見出されていなかつた。 そこで、本発明者らは、斯かる現状に鑑みアル
キル(又はアルケニル)ハライドを対応するω−
ハロカルボン酸又は/及びジカルボン酸に変換す
る能力を有する微生物を広く検索した結果、ロド
コツカス(Rhodococcus)属に属する微生物中
に斯かる能力を有するものがあることを見出し、
本発明を完成した。 すなわち、本発明はロドコツカス属に属し、ア
ルキル(又はアルケニル)ハライドを資化してω
−ハロカルボン酸又は/及びジカルボン酸を生産
する能力を有する新規なロドコツカス・エスピ
ー・KSM−B−18(微工研菌寄第7307号)に関す
るものである。 次に、本発明者らが分離、採取した本菌株の菌
学的性質を詳述する。 (a) 形態 桿菌で気中菌糸を作る。大きさは0.5〜0.8×
1.0〜3.0μである。 (b) 各培地における生育状態 (1) シユクロース・硝酸塩寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーの色は柿色
で光沢がある。コロニーの縁は突起状であ
る。 (2) グルコース・アスパラギン寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーの色は黄〜
レモン色で乾いた凹状である。 (3) グリセリン・アスパラギン寒天培地: 生育は貧弱であり、コロニーの色は淡柿色
〜レモン色で、乾いたかび状のコロニーであ
る。 (4) スターチ寒天培地: 生育は貧弱であり、コロニーの色は淡柿色
で乾いたコロニーである。 (5) チロシン寒天培地: 生育は中程度であり、淡柿〜肌色の光沢の
ある凸状のコロニーである。 (6) 栄養寒天培地: 生育は豊富であり、柿〜ピンク色の光沢の
ある凸状のコロニーである。 (7) イースト・麦芽寒天培地: 生育は最も豊富であり、柿色でしわ状の大
きなコロニーとなり、にぶい光沢がある。 (8) オートミール寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーは淡柿色で
にぶい光沢がある。コロニーの周縁ははつき
りしない。 (c) 生理学的性質 (1) 生育範囲: 温度22〜43℃(最適30〜40℃) PH5.5〜9.5(最適6.5〜8.0) (2) ゼラチンの液化(グルコース・ペプトンゼ
ラチン培地):陰性 (3) スターチの加水分解(スターチ寒天培
地):陰性 (4) 脱脂牛乳の凝固、ペプトン化:ともに陰性 (5) メラニン様色素の生成:陰性 (d) 炭素源の同化性 L−アラビノース:− D−キシロース:− D−グルコース:+ D−フラクトース:+ シユクロース:+ イノシトール:− L−ラムノース:− ラフイノース:− D−マンニトール:+ (e) 糖からの酸、ガスの生成 フラクトース:+ (ガスは生成しない) ソルビトール:+ (ガスは生成しない) (f) 細胞壁組成 ジアミノピメリン酸:meso型 糖:アラビノース、ガラクトース (g) 5−フルオロウラシル耐性(5mg/):耐
性なし (h) プロピレングリコール資化性:あり (i) 分離源:土壌 以上の菌学的性質を有する菌についてバージエ
イのマニユアル(Bargey's Manual of
Daterminative Bacteriology)第8版(1975年)
に基づいて検索した結果、本菌株はロドコツカス
(Rhodococcus)属に属する新菌株と認め、ロド
コツカス・エスピー・KSM−B−18
(Rhodococcus sp.KSM−B−18)と命名した。
なお、本菌株は、微工研菌寄第7307号として工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託されている。 分離源の土壌からの本菌株の分離はアルキル
(又はアルケニル)ハライド含有培地を用い常法
で行なつた。 本菌株の培養に使用する培地の組成は、使用す
る菌株が良好に生育し、アルキル(又はアルケニ
ル)ハライドからのω−ハロカルボン酸又は/及
びジカルボン酸の生産を順調に行なわしめるため
に適当な炭素源、窒素源あるいは有機栄養源、無
機塩などからなる。炭素源としては、炭水化物
(例えば、グルコース、フラクトース、シユクロ
ース、ソルビトール等)、有機酸(例えば、クエ
ン酸、コハク酸等)、炭化水素(例えば、n−ド
デカン、n−ヘキサデカン等)、アルキル(又は
アルケニル)ハライドなど資化されるものならば
いずれでも使用できる。また、窒素源あるいは有
機栄養源としては、例えば、硝酸ナトリウム、硝
酸カリウム、硝酸アンモニウム等の硝酸塩類、酵
母エキス、肉エキス、ペプトンが挙げられる。ま
た、無機塩としては各種リン酸塩、硫酸マグネシ
ウムなどが使用できる。さらに微量の重金属塩類
が使用されるが、天然物を含む培地では必ずしも
添加を必要としない。また栄養要求を必要とする
変異株を用いる場合には、その栄養要求を満たす
物質を培地に添加しなければならない。 培養は培地を加熱等により殺菌後、菌を接種
し、28〜35℃で3〜5日振盪又は通気撹拌すれば
良い。PHは6.5〜8程度に調整すると良い結果が
得られる。水に難溶性の炭素源等を使用する場合
には、ポリオキシエチレンソルビタン等の各種界
面活性剤を培地に添加することも可能である。 叙上の如く得られた培養物は、そのまま酵素源
として用いることもできるが、菌体を培養液より
分離する場合は、通常の固液分離手段が用いられ
る。このように分離された生菌体及びその処理物
(凍結乾燥菌体等)も酵素源として用いることが
できる。 アルキル(又はアルケニル)ハライドを反応基
質として本菌株を上記の如く培養するとω−ハロ
カルボン酸及びジカルボン酸が生産される。該基
質は炭素数12〜18のものが特に適当である。 これらの培養液から目的物質であるω−ハロカ
ルボン酸及びジカルボン酸の採取および精製は、
一般の有機化合物の採取および精製の手段に準じ
て行うことができる。たとえば培養液から菌体等
を除去したろ液もしくは培養液そのものを酸性と
し、エチルエーテル、酢酸エチル又はクロロホル
ム−メタノール混液等の有機溶媒で抽出する。こ
の抽出物をカラムクロマトグラフイーあるいは再
結晶などの方法を用いてω−ハロカルボン酸及び
ジカルボン酸を単離することができる。 以下、実施例により本発明を更に詳しく説明す
る。 実施例 1 採取した土壌サンプル約0.5gを滅菌水10mlに
懸濁した充分撹拌後、この土壌懸濁液0.2mlを下
記組成の液体培地()10ml(50ml容試験管に
て)に接種し、30℃にて4日間振盪培養を行な
う。
に関する。 従来、脂肪酸のω−末端のみを選択的に酸化す
ることは工業的には困難とされてきた。例えば、
ラクトン系ムスク(じや香合成香料)の主成分で
あるヘキサデカノライドの製造にはω−ヒドロキ
シパルミチン酸が使用されるが、ムスクが高価で
あるのは、この前駆体たるω−ヒドロキシパルミ
チン酸の製造が困難なことに起因する。即ち、パ
ルミチン酸のω−末端を選択的に酸化してω−ヒ
ドロキシパルミチン酸とすることは、合成化学上
困難である。 一方、微生物にノルマルパラフインを資化させ
てジカルボン酸を製造する際に副産物としてω−
ヒドロキシ高級脂肪酸も得られることが報告され
ている(例えば特公昭48−26238号)このように
ω−ヒドロキシ高級脂肪酸はノルマルパラフイン
のアルカン資化性菌によるジカルボン酸への代謝
中間体であるが、その著量生産は困難とされてい
る。その理由としてはω−ヒドロキシ高級脂肪酸
の生成速度に比べて、そのジカルボン酸への転化
速度の方がずつと大きいためと推測される。 また、ω−ヒドロキシ脂肪酸と同様にラクトン
系ムスクの主成分である大環状ラクトンの有用な
中間体としてはω−ハロカルボン酸がある。ω−
ハロカルボン酸はハロゲンに官能基を導入するこ
とにより種々の誘導体にも導びくこともできる。
このω−ハロカルボン酸に関しては、アルスロバ
クター属、コリネバクテリウム属、ノカルデイア
属に属し、アルキルハライドからω−ハロカルボ
ン酸を生産する能力を有する菌を培養し、ω−ハ
ロカルボン酸を生産する方法が報告されている
(特開昭57−50893号)。 また一方、ジカルボン酸は合成樹脂、高級潤滑
油、可塑剤、香料等の製造原料として有用な物質
であるが、合成法により製造されていたジカルボ
ン酸は炭素数にも限度があり、炭素数12個以上の
ジカルボン酸を製造することは困難であつた。そ
こで近年、微生物を利用した発酵法によるジカル
ボン酸の製造法が注目されてきた。 従来、微生物によるジカルボン酸の製造法とし
てはキヤンデイダ(Candida)属(特公昭50−
19630号等)、ピキア(Pichia)属(特公昭45−
24392号等)等の酵母によるものが多く、細菌に
よるものではコリネバクテリウム
(Corynebacterium)属(特公昭56−17075号等)
しか見出されていなかつた。 そこで、本発明者らは、斯かる現状に鑑みアル
キル(又はアルケニル)ハライドを対応するω−
ハロカルボン酸又は/及びジカルボン酸に変換す
る能力を有する微生物を広く検索した結果、ロド
コツカス(Rhodococcus)属に属する微生物中
に斯かる能力を有するものがあることを見出し、
本発明を完成した。 すなわち、本発明はロドコツカス属に属し、ア
ルキル(又はアルケニル)ハライドを資化してω
−ハロカルボン酸又は/及びジカルボン酸を生産
する能力を有する新規なロドコツカス・エスピ
ー・KSM−B−18(微工研菌寄第7307号)に関す
るものである。 次に、本発明者らが分離、採取した本菌株の菌
学的性質を詳述する。 (a) 形態 桿菌で気中菌糸を作る。大きさは0.5〜0.8×
1.0〜3.0μである。 (b) 各培地における生育状態 (1) シユクロース・硝酸塩寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーの色は柿色
で光沢がある。コロニーの縁は突起状であ
る。 (2) グルコース・アスパラギン寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーの色は黄〜
レモン色で乾いた凹状である。 (3) グリセリン・アスパラギン寒天培地: 生育は貧弱であり、コロニーの色は淡柿色
〜レモン色で、乾いたかび状のコロニーであ
る。 (4) スターチ寒天培地: 生育は貧弱であり、コロニーの色は淡柿色
で乾いたコロニーである。 (5) チロシン寒天培地: 生育は中程度であり、淡柿〜肌色の光沢の
ある凸状のコロニーである。 (6) 栄養寒天培地: 生育は豊富であり、柿〜ピンク色の光沢の
ある凸状のコロニーである。 (7) イースト・麦芽寒天培地: 生育は最も豊富であり、柿色でしわ状の大
きなコロニーとなり、にぶい光沢がある。 (8) オートミール寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーは淡柿色で
にぶい光沢がある。コロニーの周縁ははつき
りしない。 (c) 生理学的性質 (1) 生育範囲: 温度22〜43℃(最適30〜40℃) PH5.5〜9.5(最適6.5〜8.0) (2) ゼラチンの液化(グルコース・ペプトンゼ
ラチン培地):陰性 (3) スターチの加水分解(スターチ寒天培
地):陰性 (4) 脱脂牛乳の凝固、ペプトン化:ともに陰性 (5) メラニン様色素の生成:陰性 (d) 炭素源の同化性 L−アラビノース:− D−キシロース:− D−グルコース:+ D−フラクトース:+ シユクロース:+ イノシトール:− L−ラムノース:− ラフイノース:− D−マンニトール:+ (e) 糖からの酸、ガスの生成 フラクトース:+ (ガスは生成しない) ソルビトール:+ (ガスは生成しない) (f) 細胞壁組成 ジアミノピメリン酸:meso型 糖:アラビノース、ガラクトース (g) 5−フルオロウラシル耐性(5mg/):耐
性なし (h) プロピレングリコール資化性:あり (i) 分離源:土壌 以上の菌学的性質を有する菌についてバージエ
イのマニユアル(Bargey's Manual of
Daterminative Bacteriology)第8版(1975年)
に基づいて検索した結果、本菌株はロドコツカス
(Rhodococcus)属に属する新菌株と認め、ロド
コツカス・エスピー・KSM−B−18
(Rhodococcus sp.KSM−B−18)と命名した。
なお、本菌株は、微工研菌寄第7307号として工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託されている。 分離源の土壌からの本菌株の分離はアルキル
(又はアルケニル)ハライド含有培地を用い常法
で行なつた。 本菌株の培養に使用する培地の組成は、使用す
る菌株が良好に生育し、アルキル(又はアルケニ
ル)ハライドからのω−ハロカルボン酸又は/及
びジカルボン酸の生産を順調に行なわしめるため
に適当な炭素源、窒素源あるいは有機栄養源、無
機塩などからなる。炭素源としては、炭水化物
(例えば、グルコース、フラクトース、シユクロ
ース、ソルビトール等)、有機酸(例えば、クエ
ン酸、コハク酸等)、炭化水素(例えば、n−ド
デカン、n−ヘキサデカン等)、アルキル(又は
アルケニル)ハライドなど資化されるものならば
いずれでも使用できる。また、窒素源あるいは有
機栄養源としては、例えば、硝酸ナトリウム、硝
酸カリウム、硝酸アンモニウム等の硝酸塩類、酵
母エキス、肉エキス、ペプトンが挙げられる。ま
た、無機塩としては各種リン酸塩、硫酸マグネシ
ウムなどが使用できる。さらに微量の重金属塩類
が使用されるが、天然物を含む培地では必ずしも
添加を必要としない。また栄養要求を必要とする
変異株を用いる場合には、その栄養要求を満たす
物質を培地に添加しなければならない。 培養は培地を加熱等により殺菌後、菌を接種
し、28〜35℃で3〜5日振盪又は通気撹拌すれば
良い。PHは6.5〜8程度に調整すると良い結果が
得られる。水に難溶性の炭素源等を使用する場合
には、ポリオキシエチレンソルビタン等の各種界
面活性剤を培地に添加することも可能である。 叙上の如く得られた培養物は、そのまま酵素源
として用いることもできるが、菌体を培養液より
分離する場合は、通常の固液分離手段が用いられ
る。このように分離された生菌体及びその処理物
(凍結乾燥菌体等)も酵素源として用いることが
できる。 アルキル(又はアルケニル)ハライドを反応基
質として本菌株を上記の如く培養するとω−ハロ
カルボン酸及びジカルボン酸が生産される。該基
質は炭素数12〜18のものが特に適当である。 これらの培養液から目的物質であるω−ハロカ
ルボン酸及びジカルボン酸の採取および精製は、
一般の有機化合物の採取および精製の手段に準じ
て行うことができる。たとえば培養液から菌体等
を除去したろ液もしくは培養液そのものを酸性と
し、エチルエーテル、酢酸エチル又はクロロホル
ム−メタノール混液等の有機溶媒で抽出する。こ
の抽出物をカラムクロマトグラフイーあるいは再
結晶などの方法を用いてω−ハロカルボン酸及び
ジカルボン酸を単離することができる。 以下、実施例により本発明を更に詳しく説明す
る。 実施例 1 採取した土壌サンプル約0.5gを滅菌水10mlに
懸濁した充分撹拌後、この土壌懸濁液0.2mlを下
記組成の液体培地()10ml(50ml容試験管に
て)に接種し、30℃にて4日間振盪培養を行な
う。
【表】
【表】
上記培養により増殖を示した培養液は、滅菌水
により適度に希釈した後、肉汁寒天培地(栄研化
学製;普通寒天培地)に移し、30℃にて2日間培
養し、生じた複数のコロニーが相互間に相異しな
いことを肉眼的及び顕微鏡的に確認できるまで、
肉汁寒天培地への移植を繰り返す。 上記コロニーのうち10個のコロニーをそれぞれ
下記組成の斜面寒天培地()に接種し、30℃で
3日間培養し、10本の斜面培地上の菌株が肉眼的
及び顕微鏡的に同一菌株であることを確認し、ま
た、これら10菌株の各培地上の性状及び生理学的
性質が同一であることを確認した。
により適度に希釈した後、肉汁寒天培地(栄研化
学製;普通寒天培地)に移し、30℃にて2日間培
養し、生じた複数のコロニーが相互間に相異しな
いことを肉眼的及び顕微鏡的に確認できるまで、
肉汁寒天培地への移植を繰り返す。 上記コロニーのうち10個のコロニーをそれぞれ
下記組成の斜面寒天培地()に接種し、30℃で
3日間培養し、10本の斜面培地上の菌株が肉眼的
及び顕微鏡的に同一菌株であることを確認し、ま
た、これら10菌株の各培地上の性状及び生理学的
性質が同一であることを確認した。
【表】
上記菌株の培地上の性状及び生理学的性質は前
述した通りである。上記試験の結果、各10本の培
養菌はすべて自然界より純粋に分離された単一菌
株であることが判る。 次いで、上記で純粋培養された斜面培地上の菌
株から一白金耳を、滅菌した10%グリセリン水溶
液(2ml)の入つた凍結保存用バイアルに懸濁
し、−80℃にて凍結保存する。かくして3ケ月凍
結保存後、迅速に解凍し得られる懸濁液の一白金
耳を肉汁寒天培地に蘇生後、前期と同条件下に各
培地上での性状及び生理学的性質を調べた結果、
凍結前とは変化が認められなかつた。 また。上記凍結及び解凍を1ケ月毎に5度繰り
返した菌株について同様に、各培地上での性状及
び生理学的性質を調べた結果、変化は認められな
かつた。 次いで、本菌株を利用してω−ハロカルボン酸
又は/及びジカルボン酸を製造した例を参考例と
して挙げる。 参考例 1 セチルクロライド50g、リン酸二アンモニウム
10g、リン酸一カリウム2g、硫酸マグネシウム
(7水塩)0.2g、硫酸第一鉄(7水塩)0.02g、
硫酸亜鉛(7水塩)0.016g、硫酸マンガン(4
〜6水塩)0.016g、酵母エキス2gを水道水に
溶かして1にし、PHを7.0に調製した。この液
体培地5mlを50ml容振盪試験官に仕込み、120℃
で15分間蒸気滅菌した後、ロドコツカス・エスピ
ー・KSM−B−18(Rhodococcus sp.KSM−B
−18)を一白金耳接種し、30℃で72時間振盪培養
した。 培養終了後、この培養液に9N硫酸1mlを加え
PHを強酸性として、クロロホルム−メタノール
(2:1)混液20mlで抽出した。この抽出液を減
圧下濃縮した後メタノールBF3触媒でメチル化
し、ガスクロマトグラフイーにて生成物のω−ク
ロロパルミチン酸とα、ω−テトラデカンジカル
ボン酸の定量を行なつた。その結果を第1表に示
す。 なお生成物のそれぞれのガス−マス(GC−
MS)データは各標品のそれと一致し、ω−クロ
ロパルミチン酸及びα、ω−テトラデカンジカル
ボン酸であることが確認された。
述した通りである。上記試験の結果、各10本の培
養菌はすべて自然界より純粋に分離された単一菌
株であることが判る。 次いで、上記で純粋培養された斜面培地上の菌
株から一白金耳を、滅菌した10%グリセリン水溶
液(2ml)の入つた凍結保存用バイアルに懸濁
し、−80℃にて凍結保存する。かくして3ケ月凍
結保存後、迅速に解凍し得られる懸濁液の一白金
耳を肉汁寒天培地に蘇生後、前期と同条件下に各
培地上での性状及び生理学的性質を調べた結果、
凍結前とは変化が認められなかつた。 また。上記凍結及び解凍を1ケ月毎に5度繰り
返した菌株について同様に、各培地上での性状及
び生理学的性質を調べた結果、変化は認められな
かつた。 次いで、本菌株を利用してω−ハロカルボン酸
又は/及びジカルボン酸を製造した例を参考例と
して挙げる。 参考例 1 セチルクロライド50g、リン酸二アンモニウム
10g、リン酸一カリウム2g、硫酸マグネシウム
(7水塩)0.2g、硫酸第一鉄(7水塩)0.02g、
硫酸亜鉛(7水塩)0.016g、硫酸マンガン(4
〜6水塩)0.016g、酵母エキス2gを水道水に
溶かして1にし、PHを7.0に調製した。この液
体培地5mlを50ml容振盪試験官に仕込み、120℃
で15分間蒸気滅菌した後、ロドコツカス・エスピ
ー・KSM−B−18(Rhodococcus sp.KSM−B
−18)を一白金耳接種し、30℃で72時間振盪培養
した。 培養終了後、この培養液に9N硫酸1mlを加え
PHを強酸性として、クロロホルム−メタノール
(2:1)混液20mlで抽出した。この抽出液を減
圧下濃縮した後メタノールBF3触媒でメチル化
し、ガスクロマトグラフイーにて生成物のω−ク
ロロパルミチン酸とα、ω−テトラデカンジカル
ボン酸の定量を行なつた。その結果を第1表に示
す。 なお生成物のそれぞれのガス−マス(GC−
MS)データは各標品のそれと一致し、ω−クロ
ロパルミチン酸及びα、ω−テトラデカンジカル
ボン酸であることが確認された。
【表】
参考例 2
セチルクロライド50g、リン酸二アンモニウム
10g、リン酸一カリウム2g、硫酸マグネシウム
(7水塩)0.2g、ポリペプトン1g、酵母エキス
0.5gを水道水1に溶かし、PHを7.0に調製し
た。この液体培地100mlを500ml容振盪フラスコに
仕込み、120℃で15分間蒸気滅菌した後、ロドコ
ツカス・エスピー・KSM−B−18(Rhodococcus
sp.KSM−B−18)を一白金耳接種し、30℃で48
時間振盪培養した。 培養終了後、この培養液に9N硫酸10mlを加え
PHを強酸性として、クロロホルム−メタノール
(2:1)混液200mlで抽出した。この抽出液を源
圧下濃縮した後メタノール−BF3触媒でメチル化
し、ガスクロマトグラフイーにて生成物のω−ク
ロロパルミチン酸とα、ω−テトラデカンジカル
ボン酸の定量を行なつた。その結果を第2表に示
す。 なお生成物のそれぞれのガス−マス(GC−
MS)データは各標品のそれと一致し、ω−クロ
ロパルミチン酸及びα、ω−テトラデカンジカル
ボン酸であることが確認された。
10g、リン酸一カリウム2g、硫酸マグネシウム
(7水塩)0.2g、ポリペプトン1g、酵母エキス
0.5gを水道水1に溶かし、PHを7.0に調製し
た。この液体培地100mlを500ml容振盪フラスコに
仕込み、120℃で15分間蒸気滅菌した後、ロドコ
ツカス・エスピー・KSM−B−18(Rhodococcus
sp.KSM−B−18)を一白金耳接種し、30℃で48
時間振盪培養した。 培養終了後、この培養液に9N硫酸10mlを加え
PHを強酸性として、クロロホルム−メタノール
(2:1)混液200mlで抽出した。この抽出液を源
圧下濃縮した後メタノール−BF3触媒でメチル化
し、ガスクロマトグラフイーにて生成物のω−ク
ロロパルミチン酸とα、ω−テトラデカンジカル
ボン酸の定量を行なつた。その結果を第2表に示
す。 なお生成物のそれぞれのガス−マス(GC−
MS)データは各標品のそれと一致し、ω−クロ
ロパルミチン酸及びα、ω−テトラデカンジカル
ボン酸であることが確認された。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 以下の性質を有する微工研菌寄第7307号とし
て寄託された新規なロドコツカス・エスピー・
KSM−B−18株。 (a) 形態 桿菌で気中菌糸を作る。大きさは0.5〜0.8×
1.0〜3.0μである。 (b) 各培地における生育状態 (1) シユクロース・硝酸塩寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーの色は柿色
で光沢がある。コロニーの縁は突起状であ
る。 (2) グルコース・アスパラギン寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーの色は黄〜
レモン色で乾いた凹状である。 (3) グリセリン・アスパラギン寒天培地: 生育は貧弱であり、コロニーの色は淡柿色
〜レモン色で、乾いたかび状のコロニーであ
る。 (4) スターチ寒天培地: 生育は貧弱であり、コロニーの色は淡柿色
で乾いたコロニーである。 (5) チロシン寒天培地: 生育は中程度であり、淡柿〜肌色の光沢の
ある凸状のコロニーである。 (6) 栄養寒天培地: 生育は豊富であり、柿〜ピンク色の光沢の
ある凸状のコロニーである。 (7) イースト・麦芽寒天培地: 生育は最も豊富であり、柿色でしわ状の大
きなコロニーとなり、にぶい光沢がある。 (8) オートミール寒天培地: 生育は中程度であり、コロニーは淡柿色で
にぶい光沢がある。コロニーの周縁ははつき
りしない。 (c) 生理学的性質 (1) 生育範囲: 温度22〜43℃(最適30〜40℃) PH5.5〜9.5(最適6.5〜8.0) (2) ゼラチンの液化(グルコース・ペプトンゼ
ラチン培地):陰性 (3) スターチの加水分解(スターチ寒天培
地):陰性 (4) 脱脂牛乳の凝固、ペプトン化:ともに陰性 (5) メラニン様色素の生成:陰性 (d) 炭素源の同化性 L−アラビノース:− Dキシロース:− D−グルコース:+ D−フラクトース:+ シユクロース:+ イノシトール:− L−ラムノース:− ラフイノース:− D−マンニトール:+ (e) 糖からの酸、ガスの生成 フラクトース:+ (ガスは生成しない) ソルビトール:+ (ガスは生成しない) (f) 細胞壁組成 ジアミノピメリン酸:meso型 糖:アラビノース、ガラクトース (g) 5−フルオロウラシル耐性(5mg/):耐
性なし (h) プロピレングリコール資化性:あり。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP22068883A JPS60114188A (ja) | 1983-11-25 | 1983-11-25 | 新規微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP22068883A JPS60114188A (ja) | 1983-11-25 | 1983-11-25 | 新規微生物 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS60114188A JPS60114188A (ja) | 1985-06-20 |
JPH0378107B2 true JPH0378107B2 (ja) | 1991-12-12 |
Family
ID=16754919
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP22068883A Granted JPS60114188A (ja) | 1983-11-25 | 1983-11-25 | 新規微生物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS60114188A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20220152446A (ko) * | 2021-05-07 | 2022-11-16 | 인하대학교 산학협력단 | 라돈저감용 나노금속이 담지된 활성탄소의 제조방법 |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5316939A (en) * | 1991-04-02 | 1994-05-31 | Kao Corporation | Microorganism belonging to the genus Rhodococcus, and process for producing sec-cedrenol and cedrenone |
-
1983
- 1983-11-25 JP JP22068883A patent/JPS60114188A/ja active Granted
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20220152446A (ko) * | 2021-05-07 | 2022-11-16 | 인하대학교 산학협력단 | 라돈저감용 나노금속이 담지된 활성탄소의 제조방법 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS60114188A (ja) | 1985-06-20 |
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