JPH0335739A - 有用植物の苗条原基の誘導方法及び該誘導苗条原基からの幼苗の大量増殖方法 - Google Patents
有用植物の苗条原基の誘導方法及び該誘導苗条原基からの幼苗の大量増殖方法Info
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- JPH0335739A JPH0335739A JP1171609A JP17160989A JPH0335739A JP H0335739 A JPH0335739 A JP H0335739A JP 1171609 A JP1171609 A JP 1171609A JP 17160989 A JP17160989 A JP 17160989A JP H0335739 A JPH0335739 A JP H0335739A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
皮呈上坐剋貝公互
本発明は、組織培養法を利用して有用植物の苗条原基を
誘導するとともに、誘導された苗条原基を用いて幼苗を
大量に増殖するための方法に関する。
誘導するとともに、誘導された苗条原基を用いて幼苗を
大量に増殖するための方法に関する。
退mえ丑
m!li培養による種苗生産は、遺伝的にクローンな苗
を大量にかつ迅速に供給できることから、多くの植物に
ついて研究が行われている。この組織培養により種苗を
生産する方法として、古くから不定芽法や不定胚法が研
究されてきたが、これらの方法は、U識培養により大量
に増殖する過程において、培養回数が多くなるにつれて
、遺伝的な変異が多発し、優良な苗を大量に得ることが
できなくなるという問題があった。近年、この問題を解
決するため、バプロバップス等の一年生植物やわさび等
の多年生植物の茎頂生長点を摘出し、これを植物生長ホ
ルモンを含む培地で、光の照射下に回転培養させること
により苗条原基を誘導させる、いわゆる苗条原基法が提
案されている(特開昭59−132822号公報、同5
9−132823号公報及び特開昭61−115417
号公報)。この苗条原基は、高い苗化能力と遺伝的な安
定性を有している。
を大量にかつ迅速に供給できることから、多くの植物に
ついて研究が行われている。この組織培養により種苗を
生産する方法として、古くから不定芽法や不定胚法が研
究されてきたが、これらの方法は、U識培養により大量
に増殖する過程において、培養回数が多くなるにつれて
、遺伝的な変異が多発し、優良な苗を大量に得ることが
できなくなるという問題があった。近年、この問題を解
決するため、バプロバップス等の一年生植物やわさび等
の多年生植物の茎頂生長点を摘出し、これを植物生長ホ
ルモンを含む培地で、光の照射下に回転培養させること
により苗条原基を誘導させる、いわゆる苗条原基法が提
案されている(特開昭59−132822号公報、同5
9−132823号公報及び特開昭61−115417
号公報)。この苗条原基は、高い苗化能力と遺伝的な安
定性を有している。
しかしながら、上記苗条原基法は、当該苗条原基を誘導
する茎頂生長点が、0.2〜1mmと非常に小ざく2、
その摘出、あるいは滅菌に熟練を必要2二する+、に、
植物によっては、茎頂生長もが、1−数個しか得られず
、+(8!養効率が非常に悪いという問題があった。
する茎頂生長点が、0.2〜1mmと非常に小ざく2、
その摘出、あるいは滅菌に熟練を必要2二する+、に、
植物によっては、茎頂生長もが、1−数個しか得られず
、+(8!養効率が非常に悪いという問題があった。
また、必ずしも総ての植物について茎頂生長点から苗条
原基が誘導できるものではなく、現在約50挿の植物に
ついてしか直系原基が誘導されている(、7すぎず、不
定胚のそれが1.130fl以りの植物で誘導されでい
るのに比べて、非常に少なく、苗条原基法の適用植物の
拡大が望まれていた。
原基が誘導できるものではなく、現在約50挿の植物に
ついてしか直系原基が誘導されている(、7すぎず、不
定胚のそれが1.130fl以りの植物で誘導されでい
るのに比べて、非常に少なく、苗条原基法の適用植物の
拡大が望まれていた。
発泗ψ′l鰐迭−1、・−よ−)L工も課翅。
本発明4fは、かかる現状に鑑み、鋭意研究を進めた結
果、驚くべきことに、茎頂生長点以外の不定胚からも苗
条原基を誘導できることを見出した。
果、驚くべきことに、茎頂生長点以外の不定胚からも苗
条原基を誘導できることを見出した。
本発明は、かかる知見に基いてなされたものであっ7、
植物の不定胚から極めて簡便に苗条原基を= itし、
て、その培養効率を向上させるとともに、該誘導苗条原
基を苗化1−で有用な植物の幼苗を効率良く、大鼠に増
殖するための方法を提供することを課題とする。
植物の不定胚から極めて簡便に苗条原基を= itし、
て、その培養効率を向上させるとともに、該誘導苗条原
基を苗化1−で有用な植物の幼苗を効率良く、大鼠に増
殖するための方法を提供することを課題とする。
すなわち、本発明はに7条原基法を適用し得る植物を拡
大させ、遺伝的に安定して各種の有用植物の幼苗を大垣
に供給し、得る方法を提供するものである。
大させ、遺伝的に安定して各種の有用植物の幼苗を大垣
に供給し、得る方法を提供するものである。
甥題全籠迭二鼾A工及乃−」弔□
本発明は、有用植物の不定胚を液体培地中で光の照削下
に回転培養することにより、苗条原基を誘導すること、
及び該誘導された苗条原基4静置L/て苗化することに
より2.幼mを増殖することを特徴とする。
に回転培養することにより、苗条原基を誘導すること、
及び該誘導された苗条原基4静置L/て苗化することに
より2.幼mを増殖することを特徴とする。
本発明は1、不定胚が誘導できる総ての植物に対しで適
用可能であり、特には、オタネニンジン、アメリカニン
ジン、チクセツニンジン、タラノキ、。
用可能であり、特には、オタネニンジン、アメリカニン
ジン、チクセツニンジン、タラノキ、。
イカリソウ、コムギ、オオムギ、サトウキビ、ジュズダ
マ、モロコシ、エンバク、ライムギ、オ千ヤドグラス、
2タケ、ダイズ、アルファルファ、アカツメクリ・、シ
ロツメクリ、う、ノカセイ、メロン、キュウリ、タガラ
シ、ハクサイ、アブ−シナ、ハノーヤサイ、センキ5.
つ、セロリ、タバコ、ナス、ジャガイモ、ペチュニア、
アサガオ、サツマイモ、コーヒー、ババイオ、オニゲシ
、ウィキョウ、ブドウ、ヒヨス、マンダリンオL・ンジ
、オレンジ、キンギッソウ、イチゴ等の植物の不定胚を
用いることが7きる。もちろん、茎頂生長点から既C,
コ苗条原基を誘導する方法が確立できてい41、例えば
、スイカ、エントウ、ソラマメ、ニンジン、アザガメ、
1/夕、天1、サラ々゛す、チシャ、クレビス、シュン
ギク、コスモス、ハブロバッグス、イネ・ 1′ウモV
ノコシ、ダリア、ステビア、aモギギク、ハマギク、ア
ブラギク1、ノヂギク、゛?スバ・ヲガス、テラポウコ
リ、ニンニク、ネ・ンバナ、ワサビ、ユカリ、ポプラ等
にも適用できる。
マ、モロコシ、エンバク、ライムギ、オ千ヤドグラス、
2タケ、ダイズ、アルファルファ、アカツメクリ・、シ
ロツメクリ、う、ノカセイ、メロン、キュウリ、タガラ
シ、ハクサイ、アブ−シナ、ハノーヤサイ、センキ5.
つ、セロリ、タバコ、ナス、ジャガイモ、ペチュニア、
アサガオ、サツマイモ、コーヒー、ババイオ、オニゲシ
、ウィキョウ、ブドウ、ヒヨス、マンダリンオL・ンジ
、オレンジ、キンギッソウ、イチゴ等の植物の不定胚を
用いることが7きる。もちろん、茎頂生長点から既C,
コ苗条原基を誘導する方法が確立できてい41、例えば
、スイカ、エントウ、ソラマメ、ニンジン、アザガメ、
1/夕、天1、サラ々゛す、チシャ、クレビス、シュン
ギク、コスモス、ハブロバッグス、イネ・ 1′ウモV
ノコシ、ダリア、ステビア、aモギギク、ハマギク、ア
ブラギク1、ノヂギク、゛?スバ・ヲガス、テラポウコ
リ、ニンニク、ネ・ンバナ、ワサビ、ユカリ、ポプラ等
にも適用できる。
この不定胚を得る方法は、7植物の外植片からカルスを
縫;導、増殖させた後に不定胚を誘導する方法1、植物
のり1植片からカルス化させず己二、直接に不定胚を誘
導する方法等があるが、ネ゛発明においては、どの方法
7ζよ−、“己読現されl−不定胚でも適用でき、さら
に二次不定胚により増殖された不定胚をも用いることが
できる。
縫;導、増殖させた後に不定胚を誘導する方法1、植物
のり1植片からカルス化させず己二、直接に不定胚を誘
導する方法等があるが、ネ゛発明においては、どの方法
7ζよ−、“己読現されl−不定胚でも適用でき、さら
に二次不定胚により増殖された不定胚をも用いることが
できる。
不定胚は、植物の外植片、例えば、根、茎、葉、花芽、
茎頂生長点、弱、花粉、さらにはメリクロンやフルチプ
列バ/ニー 4等の植物糺識の一部や培養細胞或いはプ
ロトプラスト等を、必要に応じて、−次亜塩素酸ナト・
リウム、塩化ペンザルコニウムヌはエタノール等の殺菌
剤を用いて殺菌し、滅菌水で十分に洗浄した後、適当な
大きさに調製し2、不定胚誘導培地で培養することによ
り得られる。ご。
茎頂生長点、弱、花粉、さらにはメリクロンやフルチプ
列バ/ニー 4等の植物糺識の一部や培養細胞或いはプ
ロトプラスト等を、必要に応じて、−次亜塩素酸ナト・
リウム、塩化ペンザルコニウムヌはエタノール等の殺菌
剤を用いて殺菌し、滅菌水で十分に洗浄した後、適当な
大きさに調製し2、不定胚誘導培地で培養することによ
り得られる。ご。
の不定胚誘導培地は、植物の種類によ−、て適する培地
がそれぞれ異なるが、基本培地としては、通常の植物組
織培養に用いられるムラシゲ・スクグ培地、リンスマイ
ヤ〜=・スク=−グ培地、ホワイI−培地或いはガンボ
ーズB5培地或いはこれらの改変培地等に、所望により
植物生長ホルモンを添加したものが用いられる。尚、こ
の場合の植物生長ホルモンも、植物により1Iylする
種類5、濃度等が異なるので、適宜選定すると良いつこ
の植物生長ホルモンとしては、オーキシン類では、2.
4−ジクロロフェノキシ酢酸、インドール酢酸、インド
ール酪酸或いはナフタレン酢酸等を、またサイトカイニ
ン類としては、ベンジルアミノプリン、カイネチン、ゼ
アチン、イソペンテニルアデニン或いはジフェニルウレ
ア等を、さらにジベルリン類としては、ジ−ニースリー
(GA3)等を例示できる。
がそれぞれ異なるが、基本培地としては、通常の植物組
織培養に用いられるムラシゲ・スクグ培地、リンスマイ
ヤ〜=・スク=−グ培地、ホワイI−培地或いはガンボ
ーズB5培地或いはこれらの改変培地等に、所望により
植物生長ホルモンを添加したものが用いられる。尚、こ
の場合の植物生長ホルモンも、植物により1Iylする
種類5、濃度等が異なるので、適宜選定すると良いつこ
の植物生長ホルモンとしては、オーキシン類では、2.
4−ジクロロフェノキシ酢酸、インドール酢酸、インド
ール酪酸或いはナフタレン酢酸等を、またサイトカイニ
ン類としては、ベンジルアミノプリン、カイネチン、ゼ
アチン、イソペンテニルアデニン或いはジフェニルウレ
ア等を、さらにジベルリン類としては、ジ−ニースリー
(GA3)等を例示できる。
尚、不定胚を得る方法は、種々の植物について、既に多
く報告されている(例えば、「植物細胞培養」原田宏、
駒嶺穆編、p92、理工学社発行、r1985植物組識
培養シンポジウム要旨集j p161、嵯峨ら、等を参
照)ので、これらの方法を用いても良いことはいうまで
もない。
く報告されている(例えば、「植物細胞培養」原田宏、
駒嶺穆編、p92、理工学社発行、r1985植物組識
培養シンポジウム要旨集j p161、嵯峨ら、等を参
照)ので、これらの方法を用いても良いことはいうまで
もない。
上述の方法でKmされた不定胚、特に好ましくは、球状
胚、心臓型胚、魚雷型胚或いは戒熟胚であるが、これら
の不定胚を液体培地で、光の照射下に回転培養すること
により、苗条原基を誘導する。
胚、心臓型胚、魚雷型胚或いは戒熟胚であるが、これら
の不定胚を液体培地で、光の照射下に回転培養すること
により、苗条原基を誘導する。
この場合の培地は、基本培地としては、通常の植物Mi
識培養に用いられるムラシゲ・スクーグ培地、リンスマ
イヤー・スクーグ培地、ホワイト培地、ガンボーグB5
培地或いはこれらの変成培地を用いることができる。ま
た、この液体培地には、必要に応じて植物生長ホルモン
を添加する。この場合の植物生長ホルモンとしては、前
記したオキシン類、サイトカイニン類さらにジベルリン
類等を例示でき、植物の種類により適宜選定すると良い
。この場合の添加量も植物によりそれぞれ異なるため、
−概には決めることができないが、O〜100wg/
j!の範囲で選定すると良い。この植物ホルモンの種類
及び添加量を決めるために、25基盤目法を用いると効
率良く行うことができる。
識培養に用いられるムラシゲ・スクーグ培地、リンスマ
イヤー・スクーグ培地、ホワイト培地、ガンボーグB5
培地或いはこれらの変成培地を用いることができる。ま
た、この液体培地には、必要に応じて植物生長ホルモン
を添加する。この場合の植物生長ホルモンとしては、前
記したオキシン類、サイトカイニン類さらにジベルリン
類等を例示でき、植物の種類により適宜選定すると良い
。この場合の添加量も植物によりそれぞれ異なるため、
−概には決めることができないが、O〜100wg/
j!の範囲で選定すると良い。この植物ホルモンの種類
及び添加量を決めるために、25基盤目法を用いると効
率良く行うことができる。
一方、光の照射は、回転の上部で、5000〜20,0
00ルクス程度、下部で100〜5000ルクスとする
ことが、苗条原基の誘導が促進されて、特に好ましい。
00ルクス程度、下部で100〜5000ルクスとする
ことが、苗条原基の誘導が促進されて、特に好ましい。
また、回転培養は、0.5〜10rp+*の回転数で行
うことが苗条原基の誘導がされやすくて好ましい。
うことが苗条原基の誘導がされやすくて好ましい。
また、培養温度は、5〜30℃の範囲で適宜選定される
。
。
本発明の方法で、不定胚の回転培養を行うと、塊状体の
苗条原基が得られる。この色は植物によって異なるが、
一般には、淡緑色ないしは濃緑色、或いは白色ないし黄
色である。この苗条原基は初期には表面が滑らかで、直
径が約50〜80μ−の***物として生じ、その構成細
胞が一様に小型の多角細胞であって、細胞の***軸が重
層、並層、斜層の多軸通***を行う、この状態の苗条原
基が一次苗条原基である。この−次苗条原基は、培養を
w1続することにより次第に大きくなり、直径100μ
m、細胞数60個程度まで増殖すると、表皮系と皮層系
の二層に分化する。Jl外層の表皮系は一細胞層で、細
胞の***軸は、並層***のみが認められ、内側の皮層系
は多数のやや大きな細胞の集まりで、この細胞内にはよ
く発達した葉緑体や液泡、貯蔵物質顆粒が認められる。
苗条原基が得られる。この色は植物によって異なるが、
一般には、淡緑色ないしは濃緑色、或いは白色ないし黄
色である。この苗条原基は初期には表面が滑らかで、直
径が約50〜80μ−の***物として生じ、その構成細
胞が一様に小型の多角細胞であって、細胞の***軸が重
層、並層、斜層の多軸通***を行う、この状態の苗条原
基が一次苗条原基である。この−次苗条原基は、培養を
w1続することにより次第に大きくなり、直径100μ
m、細胞数60個程度まで増殖すると、表皮系と皮層系
の二層に分化する。Jl外層の表皮系は一細胞層で、細
胞の***軸は、並層***のみが認められ、内側の皮層系
は多数のやや大きな細胞の集まりで、この細胞内にはよ
く発達した葉緑体や液泡、貯蔵物質顆粒が認められる。
この状態が二次苗条原基である。この二次苗条原基を、
さらに培養し続けると直径200μ−の台形状***物に
なり、次いで、この回りに数個の一次苗条原基を新生す
る。このようにして苗条原基は増殖を続ける。この苗条
原基が15+wm程度の大きさまで増殖したら、直径約
3〜5mmに分割し、継代培養を行うことにより苗条原
基を大量に増殖することができる。なお、培養条件を適
当に調整すると、自然に3〜5開の集塊に***させるこ
とができる。この継代培養は、上記初代培養と同様の培
地組成で、回転培養により行ってもよいが、光の照射下
に、通気撹拌型ファーメンタ−、エアリフト型ファーメ
ンタ−、ロラーボトル型ファーメンタ−或いはシーソー
型ファーメンタ−等を用いた強制攪拌させながら行うこ
ともできる。
さらに培養し続けると直径200μ−の台形状***物に
なり、次いで、この回りに数個の一次苗条原基を新生す
る。このようにして苗条原基は増殖を続ける。この苗条
原基が15+wm程度の大きさまで増殖したら、直径約
3〜5mmに分割し、継代培養を行うことにより苗条原
基を大量に増殖することができる。なお、培養条件を適
当に調整すると、自然に3〜5開の集塊に***させるこ
とができる。この継代培養は、上記初代培養と同様の培
地組成で、回転培養により行ってもよいが、光の照射下
に、通気撹拌型ファーメンタ−、エアリフト型ファーメ
ンタ−、ロラーボトル型ファーメンタ−或いはシーソー
型ファーメンタ−等を用いた強制攪拌させながら行うこ
ともできる。
以上のようにして得られた苗条原基は、苗化用の培地に
移植し、静置培養することにより苗化する。この場合の
苗化培地としては、前述の基本培地に、前述した植物生
長ホルモンを適宜添加して、8〜25℃の温度で、10
00〜4000ルクスの光の照射下に行うとよい。
移植し、静置培養することにより苗化する。この場合の
苗化培地としては、前述の基本培地に、前述した植物生
長ホルモンを適宜添加して、8〜25℃の温度で、10
00〜4000ルクスの光の照射下に行うとよい。
以下実施例により、本発明を具体的に説明する。
犬−施例−1上
(不定胚の誘導)
オタネニンジン(Pariax Binseng C,
A、 Mey、)の5年生株の発芽後釣2週間0の芽か
ら花芽を切り取り、花柄及び花がくを取り除いた。これ
をツイーン20(Tmeen 20.商品名)を0.1
容量%添加した3重量%の次亜塩素酸ナトリウム水溶液
で10分間、さらに70容量%のエタノール溶液で30
秒間滅菌した。これを滅菌水で洗浄した後、2.4−ジ
クロロフェノキシ酢酸を5pp(至)添加したムラシゲ
・スクグ寒天培地に植え付け、2511℃の温度で暗黒
下に静置培養した。培養1力月から不定胚形成が始まり
、培養3力列での不定胚形成率は90%であった。
A、 Mey、)の5年生株の発芽後釣2週間0の芽か
ら花芽を切り取り、花柄及び花がくを取り除いた。これ
をツイーン20(Tmeen 20.商品名)を0.1
容量%添加した3重量%の次亜塩素酸ナトリウム水溶液
で10分間、さらに70容量%のエタノール溶液で30
秒間滅菌した。これを滅菌水で洗浄した後、2.4−ジ
クロロフェノキシ酢酸を5pp(至)添加したムラシゲ
・スクグ寒天培地に植え付け、2511℃の温度で暗黒
下に静置培養した。培養1力月から不定胚形成が始まり
、培養3力列での不定胚形成率は90%であった。
この不定胚を、2,4−ジクDOフェノキシ酢酸lpp
m添加したムラシゲ・スクーグ寒天培地に移植し、増殖
させた。
m添加したムラシゲ・スクーグ寒天培地に移植し、増殖
させた。
(苗条原基の誘導)
植物生長ホルモンとしてヘンシルア逅ノブリンippm
を添加したムラシゲ・スクーグ液体培地10−を分注し
た21++v+φX 150mmの試験管に、上記方法
により誘導増殖した不定胚を3−5個入れ、回転培養器
で培養した。培養a廣は18±1℃で、光は回転培養器
上部で9000ルク久、下部で200ルクスの連続照射
とし、回転は2vpmの回転数とした。培養1130か
ら苗条原基の形成が認められ、培養223日での苗条原
基形成率は、40%であった。これを同し条件で、継代
培養し、増殖j〜たゆ(苗化) 誘導増殖された苗条原基集塊の直径約5mmの塊を、植
物生長ホルモンとしてヘンシルアミノプリン0.511
11)Ill及びG A 3、Q、5ppmを添加した
4強度のムラシゲ・スクーグ寒天培地10−を分注した
21mmφ×150m5の試験管に、置床し、培養した
。培養温度は、18±1’cで、光は200ルクスを連
続照射した。培養46日0に100%の苗条原基から発
芽が認められ、培養63日0に直径約5開の酸系原基集
塊の1つから10本以上のシュートが得られた。これら
のシュー トを植物生長ホルモンとしてイントル酪酸t
ppmを添加した1/4強度のムラシゲ・スクグ寒天培
taio−を分注した21間φX150m5+の試験管
に、置床し、培養した。培養温度は、16±1℃で、光
は8000ルクスを16時間照射/目りしか。
を添加したムラシゲ・スクーグ液体培地10−を分注し
た21++v+φX 150mmの試験管に、上記方法
により誘導増殖した不定胚を3−5個入れ、回転培養器
で培養した。培養a廣は18±1℃で、光は回転培養器
上部で9000ルク久、下部で200ルクスの連続照射
とし、回転は2vpmの回転数とした。培養1130か
ら苗条原基の形成が認められ、培養223日での苗条原
基形成率は、40%であった。これを同し条件で、継代
培養し、増殖j〜たゆ(苗化) 誘導増殖された苗条原基集塊の直径約5mmの塊を、植
物生長ホルモンとしてヘンシルアミノプリン0.511
11)Ill及びG A 3、Q、5ppmを添加した
4強度のムラシゲ・スクーグ寒天培地10−を分注した
21mmφ×150m5の試験管に、置床し、培養した
。培養温度は、18±1’cで、光は200ルクスを連
続照射した。培養46日0に100%の苗条原基から発
芽が認められ、培養63日0に直径約5開の酸系原基集
塊の1つから10本以上のシュートが得られた。これら
のシュー トを植物生長ホルモンとしてイントル酪酸t
ppmを添加した1/4強度のムラシゲ・スクグ寒天培
taio−を分注した21間φX150m5+の試験管
に、置床し、培養した。培養温度は、16±1℃で、光
は8000ルクスを16時間照射/目りしか。
培養1力月で発根し、苗化させることができた。
犬繕涯え
(不定胚の誘導)
ニンジン(Daucus carota黒田五寸)の種
子をツイーン20を0.1容量%添加した3電量%の次
亜塩素酸すトリウム水溶液に浸し、5分間アスピレータ
で減圧してから常圧にもどし、20分間滞漬して滅菌し
た。この滅菌した種子を滅菌水で2回洗浄してから植物
生長ホルモンを含まないムラシゲ・スクーグ寒天培地に
植え、25℃で、2000ルクスの光を16時間/日照
射し、培養して、発芽させた。
子をツイーン20を0.1容量%添加した3電量%の次
亜塩素酸すトリウム水溶液に浸し、5分間アスピレータ
で減圧してから常圧にもどし、20分間滞漬して滅菌し
た。この滅菌した種子を滅菌水で2回洗浄してから植物
生長ホルモンを含まないムラシゲ・スクーグ寒天培地に
植え、25℃で、2000ルクスの光を16時間/日照
射し、培養して、発芽させた。
発芽した芽生えが約3cmになったところで、下胚軸を
1cmに調整し、2.4−ジクロロフェノキシ酢酸11
)I)−を添加したムラシゲ・スクーグ寒天培地に置床
し、25℃の晴条件で培養し、カルスを誘導した。
1cmに調整し、2.4−ジクロロフェノキシ酢酸11
)I)−を添加したムラシゲ・スクーグ寒天培地に置床
し、25℃の晴条件で培養し、カルスを誘導した。
このカルスを植物生長ホルモンを含まないムラシゲ・ス
クーグ寒天培地に移JiiL7、不定胚を形成させた。
クーグ寒天培地に移JiiL7、不定胚を形成させた。
(苗条原基の誘導)
植物生長ホルモンとしてベンジルア槃ノブリンlppm
を添加した21關φ×150旧の試験管に、上記方法で
誘導増殖した球状ないし心臓型の不定胚を3〜5個移植
し、回転培養した6培養条件は1.実施例1と同じとし
た。培養30日闘牛ら苗条原基の形成が認められ、同一
条件で継代培養して、増殖させた。
を添加した21關φ×150旧の試験管に、上記方法で
誘導増殖した球状ないし心臓型の不定胚を3〜5個移植
し、回転培養した6培養条件は1.実施例1と同じとし
た。培養30日闘牛ら苗条原基の形成が認められ、同一
条件で継代培養して、増殖させた。
(苗化)
上記で誘導、増殖された苗条原基を、植物生長ホルモン
を含まない4強度のムラシゲ・スクーグ寒天培地10−
を分注した21山φX 150mmの試験管に、置床し
、培養した。この培養条件は、実施例1の(苗化)と同
じとした。培養30日で苗条原基から発芽、発根が認め
られ、苗化率は100%であった。
を含まない4強度のムラシゲ・スクーグ寒天培地10−
を分注した21山φX 150mmの試験管に、置床し
、培養した。この培養条件は、実施例1の(苗化)と同
じとした。培養30日で苗条原基から発芽、発根が認め
られ、苗化率は100%であった。
究」影杉函夏
以上述べたように、本発明は、不定胚から苗条原基を誘
導するようにしたため、茎頂生長点から苗条原基を誘導
することが困難な植物についても、極めて簡便に苗条原
基を誘導して、培養効率を向上させるとともに、苗条原
基法の適用植物を拡大させ、遺伝的に安定して、各種の
有用な植物の幼苗を効率良く、大量に供給できるという
効果を奏する。
導するようにしたため、茎頂生長点から苗条原基を誘導
することが困難な植物についても、極めて簡便に苗条原
基を誘導して、培養効率を向上させるとともに、苗条原
基法の適用植物を拡大させ、遺伝的に安定して、各種の
有用な植物の幼苗を効率良く、大量に供給できるという
効果を奏する。
Claims (2)
- (1)有用植物の不定胚を液体培地で、光の照射下に回
転培養することを特徴とする有用植物の苗条原基の誘導
方法。 - (2)有用植物の不定胚を液体培地で、光の照射下に回
転培養して苗条原基を誘導し、次いでこれを静置培養し
て苗化することを特徴とする幼苗の大量増殖方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP1171609A JPH0335739A (ja) | 1989-07-03 | 1989-07-03 | 有用植物の苗条原基の誘導方法及び該誘導苗条原基からの幼苗の大量増殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP1171609A JPH0335739A (ja) | 1989-07-03 | 1989-07-03 | 有用植物の苗条原基の誘導方法及び該誘導苗条原基からの幼苗の大量増殖方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0335739A true JPH0335739A (ja) | 1991-02-15 |
JPH0585135B2 JPH0585135B2 (ja) | 1993-12-06 |
Family
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-
1989
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JP4697502B2 (ja) * | 2000-08-28 | 2011-06-08 | 株式会社アクアニューテック | 額縁 |
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JPH0585135B2 (ja) | 1993-12-06 |
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