JPH03290188A - 酵素もしくは微生物固定化用担体の製造方法 - Google Patents
酵素もしくは微生物固定化用担体の製造方法Info
- Publication number
- JPH03290188A JPH03290188A JP9154090A JP9154090A JPH03290188A JP H03290188 A JPH03290188 A JP H03290188A JP 9154090 A JP9154090 A JP 9154090A JP 9154090 A JP9154090 A JP 9154090A JP H03290188 A JPH03290188 A JP H03290188A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- carrier
- sample
- aqueous solution
- wet
- chitosan
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 19
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 19
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 7
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims abstract description 30
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 19
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims abstract description 13
- GYZLOYUZLJXAJU-UHFFFAOYSA-N diglycidyl ether Chemical compound C1OC1COCC1CO1 GYZLOYUZLJXAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 claims abstract description 13
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 10
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000001112 coagulating effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 36
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 abstract description 13
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 abstract description 13
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 13
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 20
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- UWFRVQVNYNPBEF-UHFFFAOYSA-N 1-(2,4-dimethylphenyl)propan-1-one Chemical compound CCC(=O)C1=CC=C(C)C=C1C UWFRVQVNYNPBEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- -1 methanol or ethanol Chemical compound 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- UPMLOUAZCHDJJD-UHFFFAOYSA-N 4,4'-Diphenylmethane Diisocyanate Chemical compound C1=CC(N=C=O)=CC=C1CC1=CC=C(N=C=O)C=C1 UPMLOUAZCHDJJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical group CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 2
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 2
- JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-N dichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)Cl JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000532 dioxanyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010981 drying operation Methods 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 2
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000004381 surface treatment Methods 0.000 description 2
- SHKUUQIDMUMQQK-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(oxiran-2-ylmethoxy)butoxymethyl]oxirane Chemical compound C1OC1COCCCCOCC1CO1 SHKUUQIDMUMQQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTYYGFLRBWMFRY-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(oxiran-2-ylmethoxy)hexoxymethyl]oxirane Chemical compound C1OC1COCCCCCCOCC1CO1 WTYYGFLRBWMFRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAGSWDIQBBZLLL-UHFFFAOYSA-N 2-chloroethyl(diethyl)azanium;chloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CCCl RAGSWDIQBBZLLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical group CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLHHRLWOUZZQLW-UHFFFAOYSA-N Acrylonitrile Chemical compound C=CC#N NLHHRLWOUZZQLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004438 BET method Methods 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 239000005057 Hexamethylene diisocyanate Substances 0.000 description 1
- 241000425362 Hydrium Species 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N Triethylene glycol diglycidyl ether Chemical compound C1OC1COCCOCCOCCOCC1CO1 UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001350 alkyl halides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 229940045720 antineoplastic alkylating drug epoxides Drugs 0.000 description 1
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- SFZULDYEOVSIKM-UHFFFAOYSA-N chembl321317 Chemical group C1=CC(C(=N)NO)=CC=C1C1=CC=C(C=2C=CC(=CC=2)C(=N)NO)O1 SFZULDYEOVSIKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 238000005056 compaction Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 229960005215 dichloroacetic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005237 etoglucid Drugs 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- RRAMGCGOFNQTLD-UHFFFAOYSA-N hexamethylene diisocyanate Chemical compound O=C=NCCCCCCN=C=O RRAMGCGOFNQTLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011167 hydrochloric acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N iminodiacetic acid Chemical group OC(=O)CNCC(O)=O NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
め要約のデータは記録されません。
Description
該担体に高い圧縮強度を付与さゼた、酵素もしくは微生
物を固定化するのに優れた性能を具備した担体の製造方
法に関するものである。
定化用担体、クロマトグラフィ・−用担体として好適で
あるが、反面、物理的強度が低く、又、含水率が高いの
で脱水乾燥前後の担体の容積変化が極めて大きいもので
あった。本発明者等は、特公昭63−54286号、特
開昭63−28453号及び特開昭63−205144
号で開示した如く、キ1−サンの多孔質成形物を酵素の
固定化用担体として使用するために各種の架橋剤で官能
基を導入することを研究してきたが、水溶液中で酵素を
固定化し、そのまま水溶液中で酵素反応を行う際には極
めて優れた性能を発揮するが、有機溶剤中で酵素反応を
行う場合には酵素固定化用担体の脱水乾燥操作が必須で
あり、脱水乾燥を行う場合には担体の収縮が著しく、酵
素の発現活性は極めて低いものであった。又、特願平1
−45781!で出願した微生物の固定化用担体は、酵
母や糸状菌の如き比較的大きな微生物を固定化させるの
に好適な細孔を多孔質キ[・サン成形物が具備している
が、担体の空隙率が高く流動層型リアクターでは優れた
性能を発揮するが、カラム充填の固定層型リアクターで
は圧線強度の点で未だ不充分であった。
酵素の平衡関係を生成物側に移動させることで、反応液
中の水分は厳格に制御されなければならない。一方、酵
素は有機溶剤に不溶であるので、担体に酵素を固定化す
るためには酵素水溶液中に担体を加えて酵素を担体に吸
着固定化した後、脱水乾燥をする操作が必要である。従
って、固定化された酵素の充分なる発現活性を得るため
に、脱水乾燥時の坦体の収縮を出来るだけ小さくする必
要がある。しかし、上述したキトサン系固定化用担体は
、多孔質で酵素や基質の拡散が良好であるうえ親水性を
′具備しているので、吸着された酵素の変性が少なく発
現活性が高いという特徴をもっているが、担体が脱水乾
燥されたとき壊れたり、また著しく収縮をする欠点があ
った。又、微生物固定化用担体として用いたときには、
無機質担体に比較して弾力性があるうえに比重が小さい
ことから流動性に富み、種々の攪拌操作に耐える優れた
性能があるが、微生物が担体内部に入り込める大きさの
細孔径を具備させることで担体内部の空隙率が高くなり
、特に流動層型リアクターでは通液時に生ずる担体の圧
密化が著しいものであった。
くし、又、高い圧縮強度を有する如く改善することを目
的とするものである。
液中で凝固析出させ多孔質キトサン成形物を得、次いで
脂肪族ポリアルコールのグリシジルエーテルを反応させ
、更に官能基を導入する固定化用担体の製造方法におい
て、脂肪族ポリアルコールのグリシジルエーテルを水酸
化カリウムを含むジオキサン中で反応させることを特徴
とする酵素゛もしくは微生物固定化用担体の製造方法で
ある。
000〜230,000の低分子量キトサンが用・いら
れ、該低分子量キトサンを酢酸、ジクロル酢酸。
性水溶液とする。キトサン酸性水溶液中のキー・サンの
濃度は2〜20%(重量)の範囲で自由に選択できる。
性高分子物質であるポリビニルアルコール、ポリエチレ
ングリコール等を単独又は組合せ添加してもかまわない
。該キー・サン酸性水溶液からキー・サンを再生して多
孔質キー・サン成形物を得るためには、例えば孔径0,
1〜0.25mmφのノズルより圧力下で塩基性水溶液
中に該キトサン酸性水溶液を一定量づつ落下させ凝固再
生させることにより、多孔質キトサン成形物の粒状体が
得られる。塩基性凝固液中に加える塩基性物質としては
、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム
、炭酸カリウム、アンモニア。
性溶液とするには、水、又はメタノール、エタノール等
の極性を有するアルコール類又は水とアルコール類の混
合物に上述の塩基性物質を加えて使用する。得られた水
を含有する多孔質キトサン成形物は、成形物の表面に更
に大きな直径の細気孔を具現さすためには、必要に応じ
特願平1−45781号で開示した方法による表面処理
を行ってもよい。即ち、得られた多孔質キトサン成形物
を必要に応じメタノール、エタノール、イソプロピルア
ルコール等のアルコール類やアクリロニトリル等の極性
溶媒を用いて水を置換して酸水溶液で表面処理をする。
等の有機酸、又は塩酸。
物に水が含まれていれば酸の水溶液を、極性溶媒が含ま
れていれば該極性溶媒と酸の混合液を用いることが好ま
しい。酸のlli度としては0.5〜5.0%(重量〉
のものが用いられ、処理時間は10秒〜5分間の短時間
行われ、酸処理後は酸を充分水洗する。
い圧縮強度を持たせるために多孔質キトサン成形物の水
をジオキサンで置換し、水酸化力リウム水溶液を入れ、
脂肪族ポリアルコールのグリシジルエーテルを加え、多
孔質キトサン成形物と等容積のジオキサン中で反応させ
る。この際の水酸化カリウムは、濃度が0,01〜3規
定のものをジオキサンに対し1/100〜1/10の容
量加える。
エーテルとしては、エチレングリコールジグリシジルエ
ーテル、トリエチレングリコールジグリシジルエーテル
、トリメチレンジグリシジルエーテル、テトラメチレン
グリコールジグリシジルエーテル、ヘキサメチレングリ
コールジグリシジルエーテルなどが挙げられる。多孔質
キ]・サン成形物と脂肪族ポリアルコールのグリシジル
エーテルとの反応は、20〜90℃好ましくは25〜8
0℃の範囲で0.5〜48時間ゆるやかな攪拌下で行わ
れる。
テルを、水酸化カリウムを含むジオキサン中で反応させ
ることを特徴とするが、水酸化カリウムは他のアルカリ
性物質に比べてジオキサンとの溶解性が優れており、ま
た、水酸化カリウムはキトサンC−6位の水酸基との反
応性が良く、脂肪族ポリアルコールのグリシジルエーテ
ルとの架橋反応が促進されるという効果がある。
まで洗浄する。この様にして得られた多孔質キトサン底
形物に、更に酵素もしくは微生物を固定化するのに適す
る種々の活性基を含む官能基を導入する。その官能基の
種類としては第1級。
交換基;スルホン酸基、カルボン酸基等の陽イオン交換
基:イミノジ酢酸基、アミドオキシム基、チオール基、
ジチオカルバミン基等のキレート配位基;及び芳香族や
脂肪族アルキル等の疎水性基が挙げられる。これらをキ
トサンの残存アミン基もしくは水酸基に反応させるため
に用いられる試薬としては、上述の官能基を含むハロゲ
ン化アルキル、エポキシド、イソシアネート、m無水物
、アルデヒド、ケトン、及びカルボン酸、スルホン酸の
酸ハロゲン化物等が挙げられる。
明は実施例記載の範囲に限定されるものではない。尚ミ
圧縮弾性率、比表面積、細孔径。
J製)を用いて直径6.0mtnφ、深さiorRmの
サンプルアダプターに試料を詰め、直径5.5.mφの
棒を2cm/minの速度で4rRn押し込んだときの
圧縮弾性率を測定した。
ルの真空度下で凍結粒゛燥後、比表面積測定装置を用い
てBET法で測定した。
の真空度下で凍結乾燥後、走査型電子顕微鏡で測定した
。
タ中で自然乾燥後の容積で示した。
サン350gを3.5%酢酸水溶液4,650gに溶解
した。該溶液を、8%水酸化ナトリウム、20%エタノ
ール、72%水よりなる混合溶液中に孔径0.25mm
φノズルから一定量づつ落下させ凝固再生させた後、中
性になるまで充分水洗して、平均粒径約1.2mmφ、
圧縮弾性率1. lx 106dyn/c#1.比表面
積70TIt、、/g、細孔径0.2μの多孔質キトサ
ン粒状体5文(湿潤)(試料へ)を得た。
これに含まれている水をジオキサンで充分置換した後、
900dのジオキサンに0.5N−水酸化カリウム10
0−を加えた溶液を加え攪拌した。
gを加え、70℃で3時間反応させた。反応終了1、
充分水洗し圧縮弾性率7. Ox 106dyn/ci
。
−(湿潤)の担体く試料B〉を得た。
び■の方法により官能基の導入を行った。
ウム水溶液を100−加え、室温で1時間攪拌した。液
を除去した後、ジオキサン100meと塩酸2−クロル
トリエチルアミン12.9gとトリエチルアミン7.6
gを加え、80℃で3時間ゆるやかに攪拌しながら反応
させ、終了後純水で充分水洗し、容@ 101d (湿
潤)の担体(試料1)を得た。
ルホルムアミドで充分置換後、ヘキサメチレンジイソシ
アナート8gを加え、室温で2時間反応させ、終了後ジ
メチルホルムアミドで未反応のへキサメチレンジイソシ
アナートを除去し、イオン交換水で充分水洗し、容積9
9d(湿潤〉の担体(試料2)を得た。
1 − チルホルムアミドで充分置換後、4,4′ −ジフェニ
ルメタンジイソシアナート8gを加え、室温で1時間反
応させた。反応終了後ジメチルホルムアミドで未反応の
4,4′ −ジフェニルメタンジイソシアナートを除去
し、イオン交換水充分水洗し、容量98d(湿fl!I
)の担体(試料3)を得た。
積、細孔径、脱水乾燥後の乾燥担体容積を測定し、その
結果を第1表に示した。
に含まれる水をジオキサンで充分置換後、1/lのジオ
キサンを加え、水酸化カリウムを全く添加することなし
に、エチレングリコールジグリシジルエーテル33.0
gを加え、70℃で3時間反応させた。反応終了後充分
水洗し圧縮弾性率2.8×106dyn/cn、比表面
積80TIt、7g、細孔径0.2μの容積690d
(湿潤)の担体(試nC)を得た。得られた試料Cにつ
いて夫々 1ooy <湿潤)を3本2 採取し夫々について実施例1に記述した1、II及び■
の官能基の導入処理を行い、夫々容積101−(湿潤)
(試料4)、容積95d (湿潤)(試料5)、容積9
5d(湿潤)(試料 6)を得た。得られた試料4.
5. 6について圧縮弾性率、比表面積。
1表に示した。
のグリシジルエーテルを反応さす際に、水酸化カリウム
を使用しなかった試料4. 5. 6については圧縮弾
性率、乾燥担体容積(乾燥時の担体の収縮を防止する)
が本願発明の方法によって得られたものよりも劣ってい
ることが明らかである。
I・サン700gと、ポリエチレングリコール(分子量
29.000 和光lK!薬工業■製)100gを、
総量が10℃になる如く3%酢酸水溶液に溶解した。該
溶液を、2.5%アンモニア、20%エタノール、 7
7.5%水からなる混合溶液中に孔径0.25.mφノ
ズルから一定量づつ落下させ凝固再生させた後、中性に
なるまで充分水洗して平均粒径約1.2ffilφの多
孔質キトサン粒状体10℃〈湿潤容積〉を得た。得られ
た多孔質キトサン粒状体5℃(温潤)を採取し、これに
含まれている水を吸引濾過で除去後、0.5%酢酸水溶
液5℃中に25℃で30秒間浸漬処理した5 後、直ちに中性になるまで水洗を行い、圧縮弾性率0.
Qx 106dyn/cm 、比表面積20.5Td
、/ g、 lII孔径20μの多孔質キトサン粒状体
3,900d (湿潤容積)(試料D)を得た。得られ
た多孔質キトサン粒状体1℃(湿潤)を採取し、これに
含まれている水をジオキサンで充分置換した後、90(
ldのジオキサンに0.5N−水酸化カリウム100−
を加えた溶液を加え、攪拌した。更にエチレングリコー
ルジグリシジルエーテル289を加え、70°Cで3時
間反応させた。反応終了後、充分水洗し圧縮弾性率1.
5x 106dVn/cII、比表面積26TIL/g
、細孔径16μの担体600m (湿潤容積)(試料E
)を得た。
本採取し実施例1に記述した■、■及び■の方法により
官能基の導入を行い、■の処理で容積100d(湿潤)
の担体(試料7)、■の処理で容積99−(湿潤)の担
体(試料8〉及び■の処理で容積98d (湿潤)担体
(試料9〉を得た。試料7゜8.9の夫々について圧縮
弾性率、比表面積、細孔径、脱水乾燥後の乾燥担体容積
を測定し、その 16− 結果を第2表に示した。
に含まれる水をジオキサンで充分置換後、1℃のジオキ
サンを加え、水酸化カリウムを全く添加することなしに
、エチレングリコールジグリシジルエーテル28gを加
え、70℃で3時間反応させた。反応終了後充分水洗し
、圧縮弾性率3,2×106dyn/cd、比表面積3
0rd、/9.細孔径19μの容積810d <湿潤)
の担体(試料F)を得た。
採取し、夫々について実施例1に記述した■。
(湿潤)(試料10)、容積99−(湿潤)〈試料1
1)、容積96d(湿潤)(試料12〉を得た。
その結果を第2表に示した。
より大きいにも拘らず実施例2の本発明の方法による担
体は高い圧縮弾性率を有し、乾燥担体容積においても優
れていることが明らかである。
体は、カラム充填時の充填圧や担体の乾燥操作に対し高
い安定性を具備しており、非水系での酵素反応用固定化
担体として極めて優れた性能を発揮する。又、酵母や糸
状菌等の微生物を固定化するのに適した大きな細孔径を
具備させても圧縮に対する高い強度があり、固定化微生
物の流動層型リアクターとしての反復繰り返し使用や長
期連続使用、更には充填型リアクターへの利用にも極め
て優れた固定化用担体である。
する者 事件との関係 住 所 氏 名
Claims (1)
- 1、低分子量キトサンの酸性水溶液を塩基性水溶液中で
凝固析出させ多孔質キトサン成形物を得、次いで脂肪族
ポリアルコールのグリシジルエーテルを反応させ、更に
官能基を導入する固定化用担体の製造方法において、脂
肪族ポリアルコールのグリシジルエーテルを水酸化カリ
ウムを含むジオキサン中で反応させることを特徴とする
酵素もしくは微生物固定化用担体の製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9154090A JPH03290188A (ja) | 1990-04-06 | 1990-04-06 | 酵素もしくは微生物固定化用担体の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9154090A JPH03290188A (ja) | 1990-04-06 | 1990-04-06 | 酵素もしくは微生物固定化用担体の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH03290188A true JPH03290188A (ja) | 1991-12-19 |
JPH0529432B2 JPH0529432B2 (ja) | 1993-04-30 |
Family
ID=14029305
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP9154090A Granted JPH03290188A (ja) | 1990-04-06 | 1990-04-06 | 酵素もしくは微生物固定化用担体の製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH03290188A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0654687A (ja) * | 1992-08-05 | 1994-03-01 | Fuji Spinning Co Ltd | 微生物固定化用担体の製造方法 |
US5508185A (en) * | 1993-09-27 | 1996-04-16 | Fuji Spinning Co., Ltd. | Lipase immobilized on a chitosan carrier |
-
1990
- 1990-04-06 JP JP9154090A patent/JPH03290188A/ja active Granted
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0654687A (ja) * | 1992-08-05 | 1994-03-01 | Fuji Spinning Co Ltd | 微生物固定化用担体の製造方法 |
US5508185A (en) * | 1993-09-27 | 1996-04-16 | Fuji Spinning Co., Ltd. | Lipase immobilized on a chitosan carrier |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH0529432B2 (ja) | 1993-04-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US8496123B2 (en) | Process for cross-linking cellulose ester membranes | |
JP4996791B2 (ja) | エンドトキシン吸着体、及びそれを用いたエンドトキシンの除去方法 | |
US9434627B2 (en) | Method for selectively binding and separating phosphate anions | |
CN102653596B (zh) | 硝酸纤维素膜表面交联壳聚糖改性材料的制备方法 | |
US10155217B2 (en) | Endotoxin adsorbent | |
JPH03290188A (ja) | 酵素もしくは微生物固定化用担体の製造方法 | |
JPS6354286B2 (ja) | ||
JPH0657761B2 (ja) | 多孔質キトサン成形物の製造法 | |
JPH09165404A (ja) | 表面n−チオカルバモイル化キトサン成形体およびその製造方法 | |
CN111154010A (zh) | 一种医用阳离子聚合物生物高分子材料及制备方法与应用 | |
JPH0248044A (ja) | 陰イオン交換能を有するキトサン成形物の製造法 | |
JPH11152330A (ja) | ポリリジン、及びポリリジンの製造方法、及びポリリジン組成物、及びエンドトキシンを除去する医薬品の生産方法 | |
WO1988004183A1 (en) | Antithrombotic medical materials and process for their production | |
JPH07108367B2 (ja) | 除加湿法 | |
RU2787348C1 (ru) | Способ получения пористого композиционного материала | |
JPS6328453A (ja) | 陰イオン交換能を有するキトサン成形物の製造方法 | |
JP2613153B2 (ja) | 微生物固定化用担体の製造方法 | |
JP2613154B2 (ja) | 微生物固定化用担体の製造法 | |
KR0139649B1 (ko) | 인산화 가교 키토산 킬레이트 수지의 제조방법 | |
JPH01130726A (ja) | ゲル状の物質 | |
KR20010025931A (ko) | 키토산 다공성비드 제조방법 | |
JPH0411888A (ja) | 酢酸菌固定化用担体及びその製造法 | |
JPS5817203B2 (ja) | パ−ルジヨウシンスイセイポリマ−ノ セイゾウホウ | |
JP4247523B2 (ja) | キトサン誘導体を含有する組成物、その製法、前記組成物から形成されたフィルムおよび前記フィルムを用いた止血剤 | |
JPH0667479B2 (ja) | 陰イオン交換能を有するキトサン成形物の製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090430 Year of fee payment: 16 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090430 Year of fee payment: 16 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100430 Year of fee payment: 17 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |