JPH03282259A - Composition for measuring peroxide active material based on redox reaction and test piece using the composition - Google Patents
Composition for measuring peroxide active material based on redox reaction and test piece using the compositionInfo
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Abstract
Description
本発明は生物学的試料、例えば体液や***物中の過酸化
活性物質を検出するための試薬組成物及びそれを用いた
試験片に関するものである。
更に詳しくは、本発明は試料中に存在するアスコルビン
酸等の還元物質による妨害を回避するためのヨードキシ
ベンゼン誘導体を含有するレドックス反応に基づく過酸
化活性物質測定用組成物及びそれを用いた試験片に関す
るものである。The present invention relates to a reagent composition for detecting peroxidation-active substances in biological samples, such as body fluids and excreta, and a test piece using the same. More specifically, the present invention provides a composition for measuring peroxidation active substances based on a redox reaction containing an iodoxybenzene derivative to avoid interference by reducing substances such as ascorbic acid present in a sample, and a test using the same. It's about pieces.
尿、血液、糞便等の体液や***物中の過酸化活性物質、
特に血液（潜血）の存在を検出することは種々の疾病を
早期に発見するという観点から臨床医学上非常に重要で
ある。
今日、臨床化学の分野では、これら過酸化活性物質のレ
ドックス反応を利用した測定法が重要な位置を占めてお
り、多（の迅速測定法が知られている。
近年では試薬組成物を吸収性担体に担持させる試験片等
の、いわゆるドライケミストリーの分野が簡易・迅速で
あることより汎用されている。
代表的な例として、試料中の潜在性血液、いわゆる増血
の存在を知るために、試料中に含まれるヘモグロビンの
ペルオキシダーゼ様触媒作用を利用してのレドックス反
応に基づき、色原体を酸化呈色せしめる測定法、あるい
は試料中のグルコースのグルコースオキシダーゼ／ペル
オキシダーゼ／レドックス系反応に基づく測定法等が挙
げられる。
これら臨床化学の分野において、しばしば試料となる尿
、血液等はアスコルビン酸あるいは他の還元性物質を含
有しており、特にアスコルビン酸の存在による偽陰性の
発生等、測定結果への影響が問題になっていた。Peroxide active substances in body fluids and excreta such as urine, blood, and feces,
In particular, detecting the presence of blood (occult blood) is very important in clinical medicine from the viewpoint of early detection of various diseases. Today, in the field of clinical chemistry, measurement methods that utilize the redox reaction of these peroxidation-active substances occupy an important position, and rapid measurement methods are known. It is widely used in the field of so-called dry chemistry, where test pieces are supported on carriers because it is simple and quick.A typical example is to detect the presence of latent blood, so-called hyperemia, in a sample. A measurement method in which a chromogen is oxidized and colored based on a redox reaction using the peroxidase-like catalytic action of hemoglobin contained in a sample, or a measurement method based on a glucose oxidase/peroxidase/redox system reaction of glucose in a sample. In the field of clinical chemistry, samples such as urine and blood often contain ascorbic acid or other reducing substances, and the presence of ascorbic acid can cause false negatives, which can affect measurement results. The impact of this was a problem.
【発明が解決しようとする課題］
アスコルビン酸等の還元性物質による悪影響を排除しよ
うとする多くの試みが報告されている。
例えば、***国特許第２，６２５，８３４号には、反応
系にアスコルビン酸オキシダーゼを添加することによっ
てアスコルビン酸を酸化して、影響を回避する手段が記
載されている。
しかしながら、アスコルビン酸オキシダーゼによるアス
コルビン酸の消費には時間がかかり、時間を短縮するに
は多量のアスコルビン酸オキシダーゼが必要となり、不
経済的であるという欠点を有していた。
又、公開特許公報昭５６−６３２６２号には、水銀イオ
ンと配位子との錯体を添加した組成物の使用が開示され
ているが、多量のアスコルビン酸を消費できないことや
、水銀イオンが有害物質である等の欠点を有する。
更に、公開特許公報昭５６−１５１３５８号には、沃素
酸塩を添加した診断剤の使用が開示されている。
しかしながらヨウ素酸塩は、カチオンの種類に拘らず一
定の酸化ポテンシャルを有しており、従って過酸化活性
物質を検出する際に用いられる色原体が、試験前に酸化
されてしまわないよう特別な配慮が必要となる。その最
良の解決策としてはヨウ素酸塩により酸化されにくい色
原体を厳密に選ぶことが挙げられるが、このことは試薬
組成物が著しく制限されることになり、結果的に検出系
の感度が大きく左右されることにつながる。
又、公開特許公報昭５７−１３３５７号には、Ｃｏ （
ｍ ）錯体を含有する組成物が、公開特許公報昭５９−
１９３３５４号には、Ｆｅ３“−ポリカルボキシアルキ
ルアミン誘導体の金属キレートを含む組成物が開示され
ている。しかしながら、両者とも多量のアスコルビン酸
を消費できないという欠点を有していた。
これに対し本発明の試薬組成物においては、ヨ−トキシ
ベンゼン環上の置換基を変化させることにより、望まし
い酸化力を有する化合物を得ることが可能であり、これ
に伴って利用される色原体も自由に選択できる利点を有
する。
従って本発明の過酸化活性物質測定用組成物は多量のア
スコルビン酸の存在下においても、短時間で迅速なアス
コルビン酸の消去を可能にし、しかも経済的に優れてお
り、更に本発明の組成物を使用した試験片は、簡便で安
定した品質並びに長期保存性に優れた作用を奏するもの
である。
これらのヨードキシベンゼン誘導体の内、１部の化合物
は文献に記載されている。
例えば、２−ヨードキシベンゾエイトを用いた薬剤中の
イソニアシトの測定方法［Ｋ、に、ベルマ（Ｖｅｒｍａ
ｌら、アナリティカル ケミストリーｆＡｎａｌｙｔｉ
ｃａｌｃ：ｈｅｍｉｓｔｒｙ） 、 ５４巻、 ２５０
０〜２５５２頁（１９８２年）参照〕が挙げられる。こ
れには硫酸酸性中、ヨウ化カリウムとデンプンの共存下
でアスコルビン酸を２−ヨードキシベンゾエイトにより
酸化させ、ヨウ素・デンプン反応により青呈色させるこ
とによってアスコルビン酸の定量を行うことが記載され
ている。
しかしながら、この反応は特定の条件下に限定されたも
のであり、本発明の測定対象であるレドックス反応に基
づく過酸化活性物質の測定を目的としたものではなく、
まして種々の置換基を有する広範囲の化合物が、本発明
の測定対象に応用可能であることは開示されていない。
【課題を解決するための手段】
本発明の組成物及びそれを用いた試験片は、その組成中
に少なくとも緩衝物質および色原体を含んで成るレドッ
クス反応に基づく過酸化活性物質測定用組成物において
、更に、一般式：（式中、Ｒ，、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およ
びＲ５は同一、または異なり、各々水素原子、ハロゲン
原子、カルボキシ基、スルホン基、ニトロ基、シアノ基
、ヒドロキシ基、ヨードキシ基、ポロン基、アルソン基
、ホスホン基および置換されているか、または未置換の
アルキル基、アミン基、アルコキシ基、アリール基、ア
リールスルホニル基、アリールオキシ基、アリールアゾ
基よりなる群から選択された置換基を表し、且つ隣接し
ている２個の置換基は縮合環を形成していてもよく、そ
の際隣接環は置換基を有していてもよい）で表されるヨ
ードキシベンゼン誘導体を含むことを特徴とする。
本発明の組成物に用いられるヨードキシベンゼン誘導体
がアスコルビン酸を酸化する場合、次の反応式に従うも
のと考えられる。
以下余白
でアスコルビン酸を迅速に消去する。
本発明の化合物は、検知対象物質の種類、反応場の違い
に応じて適宜選択されるが、殊に臨床検査の分野で血液
、尿等を分析材料とする場合には一般に水性媒体中で反
応が行われるため、一般式（１）のヨードキシベンゼン
化合物のうち、カルボキシ基、スルホン基等の水溶性基
が導入された化合物群が特に好ましい。
本発明において好適に使用される化合物を以下に列記す
るが、もちろんこれらに限定されるものではない。
ヨードキシベンゼン
３−ヨードキシベンゼンカルボン酸。
３．５−ヨードキシベンゼンジカルボン酸。
５−ブロモ−３−ヨードキシベンゼンスルホン酸。
３−ヨードキシベンゼンスルホン酸。
２−ニトロ−４−ヨードキシベンゼンカルボン酸。
ｐ−ブロモヨードキシベンゼン。
４−クロロヨードキシベンゼン。
ｐ−ヨードキシニトロベンゼン。
ｍ−ヨードキシトルエン。
３−ヨードキシフェノール。
ｐ−ヨードキシアニリン。
３．４−ジクロロヨードキシベンゼン。
３．４−ジクロロヨードキシベンゼン。
２．４−ジニトロヨードキシベンゼン。
２．４−ジメチルヨードキシベンゼン。
１−ヨードキシナフタレン。
１−ヨードキシ−３−二トロベンゼン。
５−クロロ−８−ヒドロキシ−７−ヨードキシアニリン
。
７−ヨートキシー８−ヒドロキシキノリン−５−スルホ
ン酸。
１．３−ショートキシベンゼン。
１．４−ショートキシベンゼン。
２−ヨードキシベンゼンアルソン酸。
３−ヨードキシベンゼンアルソン酸。
３−ヨードキシベンゼンボロン酸。
４−ヨードキシベンゼンボロン酸。
２−ヨードキシ−５−トリフルオロメチルベンゼンカル
ボン酸。
５−（２−ヒドロキシエトキシ）−２−ヨードキシベン
ゼンカルボン酸。
２−ヨードキシ−５−［２−（２−メトキシエトキシ）
エトキシ］ベンゼンカルボン酸。
４．４゛−ショートキシジフェニルスルホン。
４−ヨード−４°−ヨードキシジフェニルスルホン。
４．４゛−ショートキシスチレン−３３゛ジスルホン酸
。
４．４′−ショートキシジフェニルエーテル。
４．４°−ショートキシアゾベンゼン。
本発明に用いられる化合物の一部は既知であるが、未知
の化合物であっても公知方法（Ａ、バネパネルティー
（Ａ、Ｂａｎｅｒｔｅｅｊ ら、ジャーナル オブ イ
ンディアン ケミカル ソサイティ（Ｊ。
ｏｆ Ｔｈｅ Ｉｎｄｉａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ５ｏ
ｃｉｅｔｙ） ５８巻、 ６０５〜６０７頁（１９８１
年）］により容易に合成され得る。
上記の化合物を、レドックス反応に基づく過酸化活性物
質測定用組成物として用いる場合には、一種類のみでも
、又数種類を併用することも可能である。
更に、本発明の試薬組成物を酵素、緩衝物質および色原
体と共に吸収性担体に含有させ、該担体をプラスチック
等の支持体に貼付せしめ、試験片とした場合、特に簡便
で貯蔵安定性に優れた試験具を得ることができる。もっ
とも多用される吸収性担体は濾紙であるが、不織布、綿
、木片等も使用可能である。又、試薬組成物を所望によ
り適当な接着剤、例＾ばゼラチン、合成樹脂等とともに
上記プラスチックシート等の支持体に塗布、乾燥あるい
は印刷等により固着させることも可能であり、更に種々
の変形が容易に成し得ることは明らかである。[Problems to be Solved by the Invention] Many attempts have been reported to try to eliminate the adverse effects of reducing substances such as ascorbic acid. For example, West German Patent No. 2,625,834 describes a means to oxidize ascorbic acid by adding ascorbic acid oxidase to the reaction system to avoid the effects. However, the consumption of ascorbic acid by ascorbic acid oxidase takes time, and in order to shorten the time, a large amount of ascorbic acid oxidase is required, which has the drawback of being uneconomical. Furthermore, Japanese Patent Publication No. 56-63262 discloses the use of a composition containing a complex of mercury ions and a ligand, but it is difficult to consume a large amount of ascorbic acid, and the mercury ions are harmful. It has disadvantages such as being a substance. Furthermore, Japanese Patent Publication No. 151358/1983 discloses the use of a diagnostic agent to which iodate is added. However, iodate has a constant oxidation potential regardless of the type of cation, and therefore the chromogen used to detect peroxidation-active substances must be specially protected from oxidation before testing. Consideration is required. The best solution is to rigorously select chromogens that are resistant to oxidation by iodate, but this severely limits the reagent composition and, as a result, reduces the sensitivity of the detection system. It leads to being greatly influenced. In addition, Co (
m) A composition containing the complex is disclosed in Japanese Patent Application Publication No. 1986-
No. 193354 discloses a composition containing a metal chelate of a Fe3"-polycarboxyalkylamine derivative. However, both had the drawback of not being able to consume large amounts of ascorbic acid. In contrast, the present invention In the reagent composition, it is possible to obtain a compound with desired oxidizing power by changing the substituent on the io-thoxybenzene ring, and the chromogen to be used can also be freely selected. Therefore, the composition for measuring peroxide active substances of the present invention enables rapid elimination of ascorbic acid in a short period of time even in the presence of a large amount of ascorbic acid, and is economically superior. The test piece using the composition of the present invention is simple, has stable quality, and has excellent long-term storage properties.Among these iodoxybenzene derivatives, some of the compounds have been described in the literature. For example, a method for measuring isoniasite in drugs using 2-iodoxybenzoate [K,
l et al., Analytical Chemistry fAnalyti
calc:hemistry), vol. 54, 250
0-2552 (1982)]. This document describes the method of quantifying ascorbic acid by oxidizing ascorbic acid with 2-iodoxybenzoate in the presence of potassium iodide and starch in acidic sulfuric acid, and producing a blue color through an iodine-starch reaction. ing. However, this reaction is limited to specific conditions and is not intended for the measurement of peroxide active substances based on redox reactions, which is the measurement target of the present invention.
Moreover, it is not disclosed that a wide range of compounds having various substituents can be applied to the measurement target of the present invention. [Means for Solving the Problems] The composition of the present invention and a test piece using the same are compositions for measuring peroxide active substances based on a redox reaction, which contain at least a buffer substance and a chromogen in the composition. Further, the general formula: (wherein R,, R2, R3, R4 and R5 are the same or different, each of which is a hydrogen atom, a halogen atom, a carboxy group, a sulfone group, a nitro group, a cyano group, a hydroxy group, an iodoxy a substituent selected from the group consisting of a poron group, an arsone group, a phosphon group, and a substituted or unsubstituted alkyl group, amine group, alkoxy group, aryl group, arylsulfonyl group, aryloxy group, arylazo group. (representing a group and two adjacent substituents may form a fused ring, in which case the adjacent ring may have a substituent) It is characterized by When the iodoxybenzene derivative used in the composition of the present invention oxidizes ascorbic acid, the following reaction formula is considered to be followed. Quickly erase the ascorbic acid in the margin below. The compound of the present invention is appropriately selected depending on the type of substance to be detected and the difference in reaction field, but it generally reacts in an aqueous medium especially when blood, urine, etc. are used as analysis materials in the field of clinical testing. Therefore, among the iodoxybenzene compounds of the general formula (1), compounds into which a water-soluble group such as a carboxy group or a sulfone group is introduced are particularly preferable. Compounds suitably used in the present invention are listed below, but of course the compounds are not limited thereto. Iodoxybenzene 3-iodoxybenzenecarboxylic acid. 3.5-Iodoxybenzenedicarboxylic acid. 5-Bromo-3-iodoxybenzenesulfonic acid. 3-Iodoxybenzenesulfonic acid. 2-nitro-4-iodoxybenzenecarboxylic acid. p-bromoiodoxybenzene. 4-chloroiodooxybenzene. p-Iodoxynitrobenzene. m-iodoxytoluene. 3-Iodoxyphenol. p-Iodoxyaniline. 3.4-dichloroiodoxybenzene. 3.4-dichloroiodoxybenzene. 2.4-Dinitroiodoxybenzene. 2.4-dimethyliodoxybenzene. 1-Iodoxinaphthalene. 1-Iodoxy-3-nitrobenzene. 5-chloro-8-hydroxy-7-iodoxaniline. 7-iotoxy8-hydroxyquinoline-5-sulfonic acid. 1.3-Shortoxybenzene. 1.4-Shortoxybenzene. 2-Iodoxybenzene arsonic acid. 3-Iodoxybenzene arsonic acid. 3-Iodoxybenzeneboronic acid. 4-Iodoxybenzeneboronic acid. 2-Iodoxy-5-trifluoromethylbenzenecarboxylic acid. 5-(2-hydroxyethoxy)-2-iodoxybenzenecarboxylic acid. 2-Iodoxy-5-[2-(2-methoxyethoxy)
[ethoxy]benzenecarboxylic acid. 4.4'-Short oxydiphenyl sulfone. 4-iodo-4°-iodoxydiphenyl sulfone. 4.4'-short xystyrene-33'disulfonic acid. 4.4'-Short oxydiphenyl ether. 4.4°-Shortoxyazobenzene. Although some of the compounds used in the present invention are known, unknown compounds can also be prepared using known methods (A, spring panel tea).
(A. Banerteej et al., Journal of the Indian Chemical Society (J. of The Indian Chemical Society)
58, pp. 605-607 (1981
year)] can be easily synthesized. When the above-mentioned compounds are used as a composition for measuring a peroxide active substance based on a redox reaction, it is possible to use only one kind or to use several kinds in combination. Furthermore, when the reagent composition of the present invention is contained in an absorbent carrier together with an enzyme, a buffer substance, and a chromogen, and the carrier is attached to a support such as plastic to form a test piece, it is particularly convenient and storage stable. An excellent test device can be obtained. The most commonly used absorbent carrier is filter paper, but nonwoven fabrics, cotton, wood chips, etc. can also be used. It is also possible to apply the reagent composition to a support such as the above-mentioned plastic sheet together with a suitable adhesive, such as gelatin, synthetic resin, etc., as desired, and to fix it by drying or printing. It is clear that this can be easily accomplished.
以下、実施例に基づき、本発明の詳細な説明するが、こ
れにより本発明の範囲が限定されるものではない。
実施例１゜
過酸化活性物質測定用組成物の調整
（尿中ヘモグロビン測定用試験片の製造）３−ヨードキ
シベンゼンカルボン酸１０ｍＭ 、クメンヒドロペルオ
キシド（８５“７１％）１．５ｇ、β−シクロデキスト
リン７．０ｇ、２−アミノベンゾチアソール塩酸塩０．
３ｇ、ジオクチルナトリウムスルホクシネ−１−１，０
ｇ 、 １．０Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ５，５） 、エ
チレンジアミン四酢酸二ナトリウム１０ｍｇ 、エタノ
ール３０ｍ１を精製水に溶解し、全量１００ｍ１とし、
反応液とする。（第１含浸溶液）ｏ −トリジン０．５
ｇをアセトンに溶解し、全量１００ｍ１として第２含浸
溶液を調整する。
クロマトグラフィー用の濾紙（ワットマン社製：３ＭＭ
）に上記第１含浸溶液を含浸させてがら５０℃で６０分
間乾燥し、次いて同じく上記第２含浸溶液で含浸し、５
０℃で２０分間乾燥した後プラスチック板に両面テープ
で貼着し、これを短冊上に裁断して、幅５ｍｍ、長さ８
０ｍｍのプラスチック片からなる基体の片隅に、５Ｘ５
ｍｍの濾紙が貼着されている本発明の１実施例品たるヘ
モグロビン測定用試験片（以下、Ａ試験片とする）を得
た。
実施例２゜
実施例１．で調整した第１含浸溶液中の３−ヨードキシ
ベンゼンカルボン酸の代わりに３．５−ヨードキシベン
ゼンジカルボン酸を用い、他は同一処方にて調整した。
この第１含浸溶液を用る他は実施例１．と同様にして本
発明の１実施例品たるヘモグロビン測定用試験片（以下
、Ｂ試験片とする）を得た。
実施例３゜
実施例１．で調整した第１含浸溶液中の３−ヨードキシ
ベンゼンカルボン酸の代わりに５−ブロモ−３−ヨード
キシベンゼンカルボン酸を用い、他は同一処方にて調整
した。この第１含浸溶液を用る他は実施例１．と同様に
して本発明の１実施例品たるヘモグロビン測定用試験片
（以下、Ｃ試験片とする）を得た。
実施例４゜
実施例１．で調整した第１含浸溶液中の３−ヨードキシ
ベンゼンカルボン酸の代わりに３−ヨードキシベンゼン
スルホン酸を用い、他は同一処方にて調整した。この第
１含浸溶液を用る他は実施例１．と同様にして本発明の
１実施例品たるヘモグロビン測定用試験片（以下、Ｄ試
験片とする）を得た。
実施例５゜
実施例１．で調整した第１含浸溶液中の３−ヨードキシ
ベンゼンカルボン酸の代わりに２−二トロー４−ヨード
キシベンゼンカルボン酸を用い、他は同一処方にて調整
した。この第１含浸溶液を用いる他は実施例１．と同様
にして本発明の１実施例品たるヘモグロビン測定用試験
片（以下、Ｅ試験片とする）を得た。
実施例６゜
実施例１．で調整した第１含浸溶液中の３−ヨードキシ
ベンゼンカルボン酸の代わりに２−ヨードキシベンゼン
アルソン酸ナトリウムを用い、他は同一処方にて調整し
た。この第１含浸溶液を用いる他は実施例１．と同様に
して本発明の１実施例品たるヘモグロビン測定用試験片
（以下、Ｆ試験片とする）を得た。
実施例７゜
実施例１．で調整した第１含浸溶液中の３−ヨードキシ
ベンゼンカルボン酸の代わりに４−ヨードキシベンゼン
ボロン酸ナトリウムを用い、他は同一処方にて調整した
。この第１含浸溶液を用いる他は実施例１．と同様にし
て本発明の１実施例品たるヘモグロビン測定用試験片（
以下、Ｃ試験片とする）を得た。
実施例８゜
実施例１．で調整した第１含浸溶液中の３−ヨードキシ
ベンゼンカルボン酸の代わりに２−ヨードキシ−５−［
２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼンカル
ボン酸を用い、他は同一処方にて調整した。この第１含
浸溶液を用いる他は実施例１．と同様にして本発明の１
実施例品たるヘモグロビン測定用試験片（以下、Ｈ試験
片とする）を得た。
〈性能比較試験〉
実施例１．から実施例８．で作成した試験片Ａ〜Ｈの性
能をヨードキシベンゼン誘導体無添加の他は実施例１．
と同様にして作成した従来の試験片（対照）と比較した
。
ヘモグロビンを０．０６ｍｇ／ｄｉ加えたヒト正常尿に
アスコルビン酸を添加し、 ０．１０ 、２５．５０
ｍｇ／ｄｉとしたものを試料とし、各々を測定し色調表
により判定した結果を第１表に示す。
以下余白Hereinafter, the present invention will be described in detail based on Examples, but the scope of the present invention is not limited thereby. Example 1 Preparation of a composition for measuring peroxide active substances (manufacture of a test piece for measuring urinary hemoglobin) 10 mM of 3-iodoxybenzenecarboxylic acid, 1.5 g of cumene hydroperoxide (85'71%), β-cyclo Dextrin 7.0g, 2-aminobenzothiazole hydrochloride 0.
3g, dioctyl sodium sulfoxine-1-1,0
g, 1.0 M citric acid buffer (pH 5.5), 10 mg of disodium ethylenediaminetetraacetate, and 30 ml of ethanol were dissolved in purified water to make a total volume of 100 ml,
Use as reaction solution. (First impregnating solution) o-tolidine 0.5
A second impregnating solution is prepared by dissolving g in acetone to make a total volume of 100 ml. Filter paper for chromatography (Whatman: 3MM
) was impregnated with the above first impregnating solution and dried at 50°C for 60 minutes, and then impregnated with the above second impregnating solution,
After drying at 0℃ for 20 minutes, it was attached to a plastic plate with double-sided tape, and cut into strips with a width of 5 mm and a length of 8 mm.
At one corner of the base made of 0mm plastic piece, 5X5
A test piece for measuring hemoglobin (hereinafter referred to as test piece A), which is an example of the present invention, to which a filter paper of 1.0 mm in diameter was attached was obtained. Example 2゜Example 1. 3.5-iodooxybenzenedicarboxylic acid was used instead of 3-iodoxybenzenedicarboxylic acid in the first impregnating solution prepared in 1, and the other ingredients were the same. Example 1 except that this first impregnating solution was used. In the same manner as above, a test piece for hemoglobin measurement (hereinafter referred to as test piece B), which is an example product of the present invention, was obtained. Example 3゜Example 1. 5-bromo-3-iodoxybenzenecarboxylic acid was used in place of 3-iodoxybenzenecarboxylic acid in the first impregnating solution prepared in 1, and the other conditions were the same. Example 1 except that this first impregnating solution was used. In the same manner as above, a test piece for hemoglobin measurement (hereinafter referred to as test piece C), which is an example product of the present invention, was obtained. Example 4゜Example 1. 3-iodooxybenzenesulfonic acid was used in place of 3-iodooxybenzenecarboxylic acid in the first impregnating solution prepared in 1, and the other ingredients were the same. Example 1 except that this first impregnating solution was used. In the same manner as above, a test piece for hemoglobin measurement (hereinafter referred to as test piece D), which is an example product of the present invention, was obtained. Example 5゜Example 1. The first impregnating solution prepared in 2-4-iodooxybenzenecarboxylic acid was used instead of 3-iodooxybenzenecarboxylic acid in the first impregnating solution, and the other ingredients were the same. Example 1 except that this first impregnating solution was used. In the same manner as above, a test piece for hemoglobin measurement (hereinafter referred to as test piece E), which is an example product of the present invention, was obtained. Example 6゜Example 1. Sodium 2-iodoxybenzene arsonate was used in place of 3-iodooxybenzenecarboxylic acid in the first impregnating solution prepared in 1, and the other ingredients were the same. Example 1 except that this first impregnating solution was used. A test piece for hemoglobin measurement (hereinafter referred to as F test piece), which is an example product of the present invention, was obtained in the same manner as above. Example 7゜Example 1. Sodium 4-iodoxybenzene boronate was used instead of 3-iodooxybenzenecarboxylic acid in the first impregnating solution prepared in 1, and the other ingredients were the same. Example 1 except that this first impregnating solution was used. In the same manner as above, a test piece for hemoglobin measurement which is an example product of the present invention (
Hereinafter referred to as test piece C) was obtained. Example 8゜Example 1. 2-iodoxy-5-[
2-(2-methoxyethoxy)ethoxy]benzenecarboxylic acid was used, and the rest was prepared using the same recipe. Example 1 except that this first impregnating solution was used. 1 of the present invention in the same manner as
A test piece for hemoglobin measurement (hereinafter referred to as H test piece) as an example product was obtained. <Performance comparison test> Example 1. From Example 8. The performance of test pieces A to H prepared in Example 1 was compared with that of Example 1 except that no iodoxybenzene derivative was added.
It was compared with a conventional test piece (control) prepared in the same manner as above. Ascorbic acid was added to normal human urine to which hemoglobin was added at 0.06 mg/di, and the results were 0.10 and 25.50.
Table 1 shows the results obtained by measuring each sample in mg/di and determining it using a color tone table. Margin below
上述の如く、本発明の過酸化活性物質測定用組成物は、
試料中に存在するアスコルビン酸による妨害を回避する
ためにヨードキシベンゼン誘導体を含有するレドックス
反応に基づく過酸化活性物質測定用組成物及びそれを用
いた試験片に関するものであり、従来の過酸化活性物質
測定用組成物に比べ、多量のアスコルビン酸の存在下に
おいても、短時間で迅速なアスコルビン酸の消去を可能
にし、無害で、しかも経済的に優れており、更にヨード
キシベンゼン環上の置換基を変化させることにより、望
ましい酸化力を有する化合物を得ることが可能であり、
これに伴って利用される色原体も自由に選択できるもの
である。更に本発明の組成物を使用した試験片は、簡便
で安定した品質並びに長期保存性に優れた作用を奏する
ものである。As mentioned above, the composition for measuring peroxide active substances of the present invention includes:
The present invention relates to a composition for measuring a peroxide active substance based on a redox reaction containing an iodoxybenzene derivative in order to avoid interference by ascorbic acid present in a sample, and a test piece using the same, and it is a method for measuring peroxide activity compared to conventional peroxide activity. Compared to compositions for measuring substances, it enables rapid elimination of ascorbic acid in a short time even in the presence of a large amount of ascorbic acid, is harmless, and is economically superior. By changing the group, it is possible to obtain a compound with desired oxidizing power,
Along with this, the chromogen used can also be freely selected. Furthermore, the test piece using the composition of the present invention is simple, has stable quality, and has excellent long-term storage properties.
Claims (1)
応に基づく過酸化活性物質測定用組成物において、更に
、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４およびＲ＿５
は同一、または異なり、各々水素原子、ハロゲン原子、
カルボキシ基、スルホン基、ニトロ基、シアノ基、ヒド
ロキシ基、ヨードキシ基、ボロン基、アルソン基、ホス
ホン基および置換されているか、または未置換のアルキ
ル基、アミノ基、アルコキシ基、アリール基、アリール
スルホニル基、アリールオキシ基、アリールアゾ基より
なる群から選択された置換基を表し、且つ隣接している
２個の置換基は縮合環を形成していてもよく、その際隣
接環は置換基を有していてもよい）で表されるヨードキ
シベンゼン誘導体を含むことを特徴とするレドックス反
応に基づく過酸化活性物質測定用組成物 ２）緩衝物質および色原体を含んで成る、レドックス反
応に基づく過酸化活性物質測定用組成物において、更に
、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４およびＲ＿５
は同一、または異なり、各々水素原子、ハロゲン原子、
カルボキシ基、スルホン基、ニトロ基、シアノ基、ヒド
ロキシ基、ヨードキシ基、ボロン基、アルソン基、ホス
ホン基および置換されているか、または未置換のアルキ
ル基、アミノ基、アルコキシ基、アリール基、アリール
スルホニル基、アリールオキシ基、アリールアゾ基より
なる群から選択された置換基を表し、且つ隣接している
２個の置換基は縮合環を形成していてもよく、その際隣
接環は置換基を有していてもよい）で表されるヨードキ
シベンゼン誘導体を含むことを特徴とするレドックス反
応に基づく過酸化活性物質測定用組成物を含有すること
を特徴とする過酸化活性物質測定用試験片[Claims] 1) A composition for measuring a peroxide active substance based on a redox reaction, which comprises a buffer substance and a chromogen, further comprising a general formula: ▲Mathematical formula, chemical formula, table, etc.▼( I ) (wherein R_1, R_2, R_3, R_4 and R_5
are the same or different, and are hydrogen atoms, halogen atoms,
Carboxy groups, sulfone groups, nitro groups, cyano groups, hydroxy groups, iodoxy groups, boron groups, arsone groups, phosphonic groups and substituted or unsubstituted alkyl groups, amino groups, alkoxy groups, aryl groups, arylsulfonyl groups represents a substituent selected from the group consisting of aryloxy group, aryloxy group, and arylazo group, and two adjacent substituents may form a fused ring, in which case the adjacent ring has a substituent. 2) A composition for measuring a peroxide active substance based on a redox reaction, characterized in that it contains an iodoxybenzene derivative represented by In the composition for measuring peroxide active substances, the general formula: ▲Mathematical formula, chemical formula, table, etc.▼(I) (In the formula, R_1, R_2, R_3, R_4 and R_5
are the same or different, and are hydrogen atoms, halogen atoms,
Carboxy groups, sulfone groups, nitro groups, cyano groups, hydroxy groups, iodoxy groups, boron groups, arsone groups, phosphonic groups and substituted or unsubstituted alkyl groups, amino groups, alkoxy groups, aryl groups, arylsulfonyl groups represents a substituent selected from the group consisting of aryloxy group, aryloxy group, and arylazo group, and two adjacent substituents may form a fused ring, in which case the adjacent ring has a substituent. A test piece for measuring a peroxide active substance, characterized in that it contains a composition for measuring a peroxide active substance based on a redox reaction, which is characterized by containing an iodoxybenzene derivative represented by
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|---|---|---|---|
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| JP7878490 | 1990-03-29 |
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|---|---|
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