JPH03279860A - Inspecting method and inspecting reagent - Google Patents

Inspecting method and inspecting reagent

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JPH03279860A
JPH03279860A JP8195190A JP8195190A JPH03279860A JP H03279860 A JPH03279860 A JP H03279860A JP 8195190 A JP8195190 A JP 8195190A JP 8195190 A JP8195190 A JP 8195190A JP H03279860 A JPH03279860 A JP H03279860A
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antibodies
label
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detected
materials
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JP8195190A
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Japanese (ja)
Inventor
Teruichi Miyakoshi
照一 宮越
Yuriko Ikuta
幾田 由里子
Takaharu Suzuki
鈴木 敬治
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Mitsui Petrochemical Industries Ltd
Original Assignee
Mitsui Petrochemical Industries Ltd
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Abstract

PURPOSE:To detect many kinds of materials to be detected, such as protein, peptide or hapten, with one time of operation by using >=2 kinds of antibodies which react respectively specifically with the specific materials to be detected, such as antigens and haptens. CONSTITUTION:The antibodies 1 which are >=2 kinds of the antibodies 1 which react respectively specifically with the specific materials to be detected, such as antigens and haptens and are labeled with identificable labels are mixed and are used as the inspecting reagent. If the antibodies 1 and specimen liquids become into contact with each other, >=2 kinds of these antibodies 1 bond to the specific materials to be detected in the respecvtive specimen liquids by generating the specific antigen-antibody reaction with these materials. After this mixture is subjected to a B/F sepn., the mixture of the materials to be detected bonded to the antibodies 1 is measured by a prescribed method for detecting the labels, for example, radiation measurement. The labels 2 previously bonded to the respective antibodies 1 can vary in radiation species, max. absorption wavelength or the max. fluorescent wavelength and can be identified, therefore, the respective antigens 3 can be measured with one time of measurement. The inspection of plural items with one time of operation is possible in this way.

Description

【発明の詳細な説明】 [産業上の利用分野] この発明は、抗原抗体反応を利用したタンパク質、ペプ
チド、ハプテンの検査方法及びそれに用いられる検査試
薬に関する。
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Industrial Application Field] The present invention relates to a method for testing proteins, peptides, and haptens using antigen-antibody reactions, and a test reagent used therefor.

[従来の技術] 従来より抗原抗体反応を利用したタンパク質、ハプテン
(不完全抗原)の検出方法として、蛍光イムノアッセイ
、発光イムノアッセイ、ラジオイムノアッセイ等が知ら
れている。例えば蛍光イムノアッセイは図に示すように
予め抗体分子1のFC部(抗原と結合しない部分)にフ
ルオレッセイン、イソチオシアネートなどの蛍光色素2
を結合させておく。この抗体と所定のタンパク質あるい
はハプテンを反応させた後、抗体と結合した抗原3を必
要に応じB/F分離(結合分子と遊離分子の分離)を行
い、結合分子あるいは遊離分子の蛍光測定を行うもので
ある。
[Prior Art] Fluorescence immunoassays, luminescence immunoassays, radioimmunoassays, and the like have been known as methods for detecting proteins and haptens (incomplete antigens) using antigen-antibody reactions. For example, in a fluorescent immunoassay, as shown in the figure, a fluorescent dye 2 such as fluorescein or isothiocyanate is added to the FC region (the part that does not bind to the antigen) of an antibody molecule 1 in advance.
Let's combine them. After reacting this antibody with a predetermined protein or hapten, the antigen 3 bound to the antibody is subjected to B/F separation (separation of bound molecules and free molecules) as necessary, and the fluorescence of the bound molecules or free molecules is measured. It is something.

一方、ラジオイムノアッセイは125■、82P18H
等の放射性同位体でラベルした抗原あるいは抗体を用い
て抗体あるいは抗原の量を測定するもので、血中ホルモ
ン量の定量など極めて微量の物質の定量に用いられる。
On the other hand, radioimmunoassay is 125■, 82P18H
This method measures the amount of antibodies or antigens using antigens or antibodies labeled with radioactive isotopes such as, etc., and is used to quantify extremely small amounts of substances such as the amount of hormones in the blood.

[発明が解決しようとする課題] ところで、このような従来のタンパク質等の検出方法に
おいては、特定の被検物質に対してこれと特異的に反応
する特定の抗体のみを含む試薬が用いられていた。従っ
て多種類のタンパク質、ペプチドあるいはハプテンを含
有する検体中の各被検物質を検出する場合、検査項目数
に対応する数のサンプルを用意する必要があり、サンプ
ルあるいは抗原量が極めて少ない場合には検査が困難で
あった。又、検出操作も各検査項目毎に行なわなければ
ならず、非常に手間がかかった。
[Problems to be Solved by the Invention] Incidentally, in such conventional methods for detecting proteins, etc., a reagent containing only a specific antibody that specifically reacts with a specific test substance is used. Ta. Therefore, when detecting each test substance in a specimen containing many types of proteins, peptides, or haptens, it is necessary to prepare a number of samples corresponding to the number of test items. Inspection was difficult. Furthermore, the detection operation had to be performed for each inspection item, which was very time-consuming.

この発明は上記従来の検出方法の欠点を解消し、−回の
操作で多種類のタンパク質、ペプチドあるいはハプテン
等の被検物質を検出することが可能な検査方法および検
査試薬を提供せんとするものである。
The present invention aims to solve the drawbacks of the conventional detection methods described above, and to provide a test method and test reagent that can detect a wide variety of test substances such as proteins, peptides, or haptens in just one operation. It is.

[課題を解決するための手段] このような目的を達成する本発明の検査方法は、特定の
抗原、ハプテン等の被検物質にそれぞれ特異的に反応す
る2種以上の抗体であって、各々識別可能な標識でラベ
ルされているものを、検体と接触させて検体中に含まれ
る特定の被検物質と結合させて、抗体と結合した特定の
被検物質の各々を標識で識別するものであり、特に標識
は、放射線種の異なる2種以上の放射性同位元素、極大
吸収波長の異なる色素、蛍光極大波長の異なる蛍光色素
、極大発光波長の異なる物質又はこれらの組合せである
[Means for Solving the Problems] The testing method of the present invention that achieves the above object uses two or more types of antibodies, each of which specifically reacts with a test substance such as a specific antigen or hapten. An antibody labeled with an identifiable label is brought into contact with a sample and binds to a specific test substance contained in the sample, and each specific test substance bound to an antibody is identified by the label. In particular, the label is two or more radioisotopes with different radiation species, dyes with different maximum absorption wavelengths, fluorescent dyes with different maximum fluorescence wavelengths, substances with different maximum emission wavelengths, or a combination thereof.

ここで、本発明の検査方法の被検物質としては、ホルモ
ン類、酵素類、腫瘍マーカー類、ウィルス類、血漿タン
パク類、薬剤、その他生理活性物質を挙げることかでき
る。
Here, examples of test substances for the testing method of the present invention include hormones, enzymes, tumor markers, viruses, plasma proteins, drugs, and other physiologically active substances.

ホルモン類としては、例えば甲状腺刺激ホルモン、卵胞
刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、副腎皮質刺激ホルモ
ン、成長ホルモン、乳腺刺激ホルモン、サイロキシン、
トリヨードサイロニン、カルシトニン、コルチゾール、
コルチコステロン、エストラジオール、エストリオール
、プロジェステロン、テストステロン、胎盤性ゴナドト
ロピン、胎盤性ラクトゲン、インスリン、グルカゴン、
セクレチン、ガストリンなとがある。酵素では例えばプ
ロテアーゼ、システインプロテアーゼ力テブンンB、H
,L、乳酸脱水素酵素などかある。腫瘍マーカーでは、
CEA、AFPSPOA (pan−creatic 
oncofetal antigen) 、B F P
 (basicfeto protein) 、P A
 (prostate antigen) 、CA19
−9、CA125、CA15−3、CA30、DtJ−
PAN−2などがある。ウィルスなどは例えばB型肝炎
ウィルス、ロタウィルス、アデノウィルス、サイトメガ
ロウィルス、ヘルペスウィルス、インフルエンザウィル
ス、エンテロウィルス、シンシアルウィルス、ナイセリ
ア、パピローマ、エイズ、マイコプラズマ、トキソプラ
ズマ、クラミジア、大腸菌、赤痢アメーバ、麻疹、おた
ふくかぜ、結核菌などがある。血漿タンパクでは、プレ
アルブミン、アルブミン、α1−フェトプロティン、α
1−ミクログロブリン、α1−酸グリコプロテイン、α
IT−グリコプロティン、α1アンチトリプシン、α2
B−グリコプロティン、ビタミンD−結合タンパク、α
1−リポプロティン、サイロキシン−結合タンパク、Z
n−α2グリコプロテイン、セルロプラスミン、レチノ
ール−結合タンパク、α2H3−グリコプロティン、α
2−グリコプロティン、ハプトグロブリン、フレーβリ
ポプロティン、トランスコバラミン、ヘモベキシン、ス
テロイド−結合−βグロブリン、β2−ミクログロブリ
ン、β2−グリコプロティン、β−リポプロティン、免
疫グロブリン、免疫グロブリンA2免疫グロブリンM1
免疫グロブリンD1免疫グロブリンE1免疫グロブリン
Gなどがある。血液凝固系および線溶系ではプロトロン
ビン、プラスミノダン、フィブリノゲン、第V因子、第
■因子、第■因子、第■因子、第X因子、第X因子、第
X1因子、第X■因子、第X■因子、アンチスロンビン
■、C2−プラスミン阻害因子、フィブリノペプチドA
1フィブリノペプチドBβ、ティシュプラスミノーゲン
活性化因子などがある。
Hormones include, for example, thyroid stimulating hormone, follicle stimulating hormone, luteinizing hormone, adrenocorticotropic hormone, growth hormone, mammary gland stimulating hormone, thyroxine,
triiodothyronine, calcitonin, cortisol,
Corticosterone, estradiol, estriol, progesterone, testosterone, placental gonadotropin, placental lactogen, insulin, glucagon,
These include secretin and gastrin. For enzymes, for example, protease, cysteine protease, B, H
, L, lactate dehydrogenase, etc. For tumor markers,
CEA, AFPSPOA (pan-creatic
oncofetal antigen), BFP
(basicfeto protein), P A
(prostate antigen), CA19
-9, CA125, CA15-3, CA30, DtJ-
Examples include PAN-2. Examples of viruses include hepatitis B virus, rotavirus, adenovirus, cytomegalovirus, herpes virus, influenza virus, enterovirus, synthial virus, Neisseria, papilloma, AIDS, mycoplasma, toxoplasma, chlamydia, Escherichia coli, Entamoeba histolytica, measles, These include mumps and tuberculosis bacteria. Plasma proteins include prealbumin, albumin, α1-fetoprotein, α
1-microglobulin, α1-acid glycoprotein, α
IT-glycoprotein, α1 antitrypsin, α2
B-glycoprotein, vitamin D-binding protein, α
1-lipoprotein, thyroxine-binding protein, Z
n-α2 glycoprotein, ceruloplasmin, retinol-binding protein, α2H3-glycoprotein, α
2-glycoprotein, haptoglobulin, Frey β-lipoprotein, transcobalamin, hemovexin, steroid-bound β-globulin, β2-microglobulin, β2-glycoprotein, β-lipoprotein, immunoglobulin, immunoglobulin A2 immunoglobulin M1
These include immunoglobulin D, immunoglobulin E, and immunoglobulin G. In the blood coagulation system and fibrinolytic system, prothrombin, plasminodan, fibrinogen, factor V, factor ■, factor ■, factor ■, factor X, factor X, factor X1, factor X■, factor X■ , antithrombin ■, C2-plasmin inhibitor, fibrinopeptide A
1 fibrinopeptide Bβ, tissue plasminogen activator, etc.

プロテアーゼ・インヒビターではC2−マクログロブリ
ン、バプトグロビン、セルロブラスミンなどがある。補
体ではC1q因子、C1r因子、C1s因子、C4因子
、C5因子、C6因子、C7因子、C8因子、C9因子
などがある。薬剤では抗てんかん剤例えばエトスクシミ
ド、カルバマゼミン、パルプロ酸、フェニトイン、フエ
ノバルビタール、ブリミドンなどがあり、アミノ酸配糖
体系抗生物質ではアミカシン、カナマイシン、ゲンタマ
イシン、シソマイシン、トラブトマイシン、ネチルマイ
シンなどがあり、循環器側薬ではキニジン、ジギトキシ
ン、ジゴキシン、ジンブラミド、テオフィリン、ブロカ
インアミト、N−アセチルブロカインアミド、リドカイ
ンなどがあり、抗悪性腫瘍薬ではメトトレキサートなど
があり、生理活性物質ではボツリヌス毒素A1ボツリヌ
ス毒素B1ボツリヌス毒素F1コレラ毒素、インターフ
ェロン、サイモボエチン、ブラジキニン、β−エンドル
フィン、Met−エンケファリン、サブスタンスP、2
’、5’−オリゴアデニル酸、e−AMP、ピリドキサ
ミン、1α、25−ジヒドロキシビタミンD3、ジゴキ
シン、ジニトロフェノール−ロイシン、トリニトロトル
エン、プロスタグランジン、プロスタサイクリン、トロ
ンボキサン、ロイコトリエンなどがある。
Protease inhibitors include C2-macroglobulin, baptoglobin, and celluloblasmin. Complement includes C1q factor, C1r factor, C1s factor, C4 factor, C5 factor, C6 factor, C7 factor, C8 factor, and C9 factor. Antiepileptic drugs include ethosuximide, carbamazemine, palproic acid, phenytoin, phenobarbital, and brimidone, and amino acid glycoside antibiotics include amikacin, kanamycin, gentamicin, sisomicin, trabutomycin, and netilmicin. Side drugs include quinidine, digitoxin, digoxin, ginbramide, theophylline, brocainamide, N-acetylbrocainamide, and lidocaine, anti-cancer drugs include methotrexate, and physiologically active substances include botulinum toxin A1, botulinum toxin B1, and botulinum toxin F1. Cholera toxin, interferon, thymoboetin, bradykinin, β-endorphin, Met-enkephalin, substance P, 2
',5'-oligoadenylic acid, e-AMP, pyridoxamine, 1α,25-dihydroxyvitamin D3, digoxin, dinitrophenol-leucine, trinitrotoluene, prostaglandin, prostacyclin, thromboxane, leukotriene, and the like.

そしてこれら複数種の抗体は各々識別可能な標識でラベ
ルされている。標識としては放射性同位元素、蛍光色素
、発光色素等の色素が用いられる。
Each of these multiple types of antibodies is labeled with an identifiable label. As the label, dyes such as radioactive isotopes, fluorescent dyes, and luminescent dyes are used.

例えば放射性同位元素であればI251 、B2p、8
Hなどエネルギービークの異なるものが用いられる。
For example, if it is a radioactive isotope, I251, B2p, 8
Types with different energy peaks such as H are used.

また放射線以外の標識として用いられる色素は以下に挙
げる比色法、蛍光法、発光法等の検知方法で検知される
ものが用いられる。比色法では、基質に1.2−フユニ
レンジアミン或いは3,3゜5.5゛−テトラメチルベ
ンチジンを用いるペルオキシダーゼ法、基質に2−ニト
ロフェニル・β−Dガラクトシドを用いるβ−Dガラク
トシダーゼ法、基質に4−ニトロフェニル・フォスフェ
ートを用いるアルカリフォスファターゼ法などの方法、
蛍光法では蛍光色素としてアリルナフタレンスルホン酸
類(ANS)、フルオレセインインチオシアネ−1−(
FITC)、テトラメチルローダミンイソチオシアネー
ト(TLI)、3−カルボエトキシ−7−ヒドロキシク
マリン(CEH)、ダンシルクロリド(DNS−C!Q
)などを用いる方法や、基質に4−ヒドロキシフェニル
酢酸あるいは3−(4−ヒドロキシフェニル)プロピオ
ン酸を用いるペルオキシダーゼ法、基質に4−メチルウ
ムベリフェリル・β−Dガラクトシドを用いるβ−Dガ
ラクトシダーゼ法、基質に4−メチルウムベリフェリル
・フォスフェートを用いるアルカリフォスファターゼ法
などの方法、生物発光法では、基質にグルコース−6−
リン酸脱水素酵素を用いる脱水素酵素法、基質に2−二
トロフェニル・βDガラクトシドを用いるβ−Dガラク
トシダーゼ法などの方法、化学発光法では、ルミノール
H20,系によるペルオキシダーゼ法などの公知の方法
を用いることができる。これらは吸収波長、蛍光波長、
発光波長のそれぞれ異なるものを組合せて用いる。例え
ばFITC,TI=1及びCEHのIgG結合物の蛍光
波長は、それぞれ495 nm、。
In addition, dyes used as labels other than radiation include those that can be detected by the following detection methods such as colorimetry, fluorescence, and luminescence. In the colorimetric method, the peroxidase method uses 1,2-fuynylenediamine or 3,3゜5.5゛-tetramethylbenzidine as a substrate, and the β-D method uses 2-nitrophenyl β-D galactoside as a substrate. Methods such as galactosidase method, alkaline phosphatase method using 4-nitrophenyl phosphate as a substrate,
In the fluorescence method, allylnaphthalene sulfonic acids (ANS) and fluorescein inthiocyanate-1-(
FITC), tetramethylrhodamine isothiocyanate (TLI), 3-carboethoxy-7-hydroxycoumarin (CEH), dansyl chloride (DNS-C!Q)
), peroxidase method using 4-hydroxyphenylacetic acid or 3-(4-hydroxyphenyl)propionic acid as a substrate, and β-D galactosidase method using 4-methylumbelliferyl β-D galactoside as a substrate. , methods such as the alkaline phosphatase method that uses 4-methylumbelliferyl phosphate as a substrate, and bioluminescence methods that use glucose-6-
Methods such as dehydrogenase method using phosphate dehydrogenase, β-D galactosidase method using 2-nitrophenyl βD galactoside as a substrate, and known methods such as peroxidase method using Luminol H20 system for chemiluminescence method. can be used. These are absorption wavelength, fluorescence wavelength,
A combination of different emission wavelengths is used. For example, the fluorescence wavelength of IgG conjugates of FITC, TI=1, and CEH is 495 nm, respectively.

552r+m、 400nmてあり、これらを組合せて
複数(3種類)の抗体にラベルする。
552r+m and 400 nm, and these are combined to label multiple (3 types) antibodies.

これらの標識化法にはグルタルアルデヒド法、過よう素
酸法、マレイミド法(ヒンジ法)、ピリジル・ジスルフ
ィド法、酸無水物法、カーポジイミド法、ジイミドエス
テル法、過よう素酸酸化法、ミクサシネート法、ジアル
デヒドへの酸化法、オキシム化法などの公知の方法を用
いることができる。
These labeling methods include glutaraldehyde method, periodic acid method, maleimide method (hinge method), pyridyl disulfide method, acid anhydride method, carposiimide method, diimide ester method, periodic acid oxidation method, and mixacinate method. Known methods such as oxidation method, oxidation method to dialdehyde, and oxime method can be used.

本発明の検査試薬は、特定の抗原、ハプテンにそれぞれ
特異的に反応する2種以−にの抗体であって、このよう
に識別可能な標識でラベルされた抗体を含有するもので
あり、これら抗体を混合して検査試薬として用いる。通
常、水、水−アルコール等の適当な溶媒の溶液として用
いる。
The test reagent of the present invention contains two or more antibodies that react specifically with specific antigens and haptens, and which are labeled with such distinguishable labels. Antibodies are mixed together and used as a test reagent. It is usually used as a solution in a suitable solvent such as water or water-alcohol.

本発明の検査方法及び検査試薬は、沈澱法、不溶化固相
法等に適用できる。例えば沈澱法の場合、本発明の検査
試薬を被検液と混合した後、硫酸ナトリウムや硫酸アン
モニウムにより沈澱を生じさせB/F分離を行ない、生
成した沈澱物の放射線測定、吸光分光測定、蛍光分光測
定の測定を行なう。そして、用いられた標識に対応する
波長における放射線の量、あるいは蛍光量を計測し被検
物質を定量する。又、不溶化抗体固相法であれば、標識
でラベルされた複数種の抗体をアガロースゲル、プロテ
ィンA−セファロース等の不溶化担体により固相して、
被検液と接触させた後、洗浄によりB/F分離を行ない
、結合型(B)の放射線スペクトル、蛍光スペクトルを
測定する。以下、沈澱法と同様にして被検物質を定量す
る。
The testing method and testing reagent of the present invention can be applied to precipitation methods, insolubilization solid phase methods, and the like. For example, in the case of the precipitation method, the test reagent of the present invention is mixed with a test solution, then precipitated with sodium sulfate or ammonium sulfate, B/F separation is performed, and the resulting precipitate is subjected to radiation measurement, absorption spectrometry, and fluorescence spectroscopy. Perform measurements. Then, the amount of radiation or fluorescence at the wavelength corresponding to the label used is measured to quantify the amount of the test substance. In addition, in the case of the insolubilized antibody solid-phase method, multiple types of antibodies labeled with a label are solid-phased with an insolubilized carrier such as agarose gel or protein A-Sepharose.
After contacting with the test liquid, B/F separation is performed by washing, and the radiation spectrum and fluorescence spectrum of the bound type (B) are measured. Thereafter, the test substance is quantified in the same manner as the precipitation method.

[作用コ 各々識別可能な標識でラベルされている2種以上の抗体
と被検液とを接触させると、これら2種以上の抗体は各
々被検液中の特定の被検物質と特異的に抗原抗体反応を
生じ結合する。この混合物を公知の方法でB/F分離し
た後、抗体と結合している被検物質の混合物を当該標識
を検出する所定の方法、例えば放射線測定、吸光分光測
定、蛍光分光測定等の方法で測定する。各抗体に予め結
合した標識はそれぞれ、放射線種、最大吸収波長あるい
は蛍光極大波長を異にし識別可能であるので一回の測定
でそれぞれの抗原を測定することができる。
[Action] When two or more antibodies, each labeled with a distinguishable label, are brought into contact with a test solution, each of these two or more antibodies will react specifically with a specific test substance in the test solution. Antigen-antibody reaction occurs and binds. After this mixture is subjected to B/F separation using a known method, the mixture of the test substance bound to the antibody is subjected to a predetermined method for detecting the label, such as radiation measurement, absorption spectrometry, fluorescence spectrometry, etc. Measure. Since the labels pre-bound to each antibody can be identified by having different radiation species, maximum absorption wavelengths, or maximum fluorescence wavelengths, each antigen can be measured in a single measurement.

[発明の効果] 以上の説明からも明らかなように、本発明の検査方法及
び検査試薬によれば、それぞれ異なる標識物質を用いた
複数種の抗体を一つの被検体と反応させればよいので、
−度の操作で複数の検査項目を検査することができる。
[Effects of the Invention] As is clear from the above explanation, according to the test method and test reagent of the present invention, it is only necessary to react multiple types of antibodies using different labeling substances with one analyte. ,
- Multiple inspection items can be inspected with one-time operation.

従って、極めて微量の被検物質であっても効率よく検査
することができる。
Therefore, even an extremely small amount of a test substance can be efficiently tested.

【図面の簡単な説明】[Brief explanation of the drawing]

図は抗原抗体反応を利用した検査方法の一例を示す図で
ある。 1・・・・・・抗体 2・・・・・・標識 3・・・・・・抗原
The figure shows an example of a testing method using an antigen-antibody reaction. 1... Antibody 2... Label 3... Antigen

Claims (1)

【特許請求の範囲】 1、特定の抗原、ハプテン等の被検物質にそれぞれ特異
的に反応する2種以上の抗体であって、各々識別可能な
標識でラベルされているものを、検体と接触させて前記
検体中に含まれる特定の被検物質と結合させて、前記抗
体と結合した前記特定の被検物質の各々を前記標識で識
別することを特徴とする検査方法。 2、前記標識が放射線の異なる2種以上の放射性同位元
素であることを特徴とする請求項1記載の検査方法。 3、前記標識が極大吸収波長の異なる物質、極大蛍光波
長の異なる物質、極大発光波長の異なる物質又はその組
合せであることを特徴とする請求項1記載の検査方法。 4、前記標識が極大吸収波長の異なる物質、極大蛍光波
長の異なる物質、極大発光波長の異なる物質又はその組
合せと放射性同位元素との組合せであることを特徴とす
る請求項1記載の検査方法。 5、特定の抗原、ハプテンにそれぞれ特異的に反応する
2種以上の抗体であって、各々識別可能な標識でラベル
されているものを含有し、前記抗体と結合した特定の被
検物質の各々を前記標識で識別可能とすることを特徴と
する検査試薬。
[Claims] 1. Two or more antibodies that react specifically with a test substance such as a specific antigen or hapten, each labeled with a distinguishable label, are brought into contact with a specimen. A testing method characterized in that each of the specific test substances bound to the antibody is identified by the label by allowing the antibody to bind to a specific test substance contained in the specimen. 2. The inspection method according to claim 1, wherein the label is two or more types of radioisotopes with different radiations. 3. The inspection method according to claim 1, wherein the label is a substance having a different maximum absorption wavelength, a substance having a different maximum fluorescence wavelength, a substance having a different maximum emission wavelength, or a combination thereof. 4. The testing method according to claim 1, wherein the label is a substance having a different maximum absorption wavelength, a substance having a different maximum fluorescence wavelength, a substance having a different maximum emission wavelength, or a combination thereof and a radioactive isotope. 5. Contains two or more antibodies that specifically react with specific antigens and haptens, each labeled with a distinguishable label, and each specific test substance bound to the antibody. A test reagent characterized in that it can be identified by the label.
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