JPH03279396A - 紅藻類レクチン及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、紅藻類抽出の新規なレクチン、さらに詳しく
は、特にウサギ赤血球に対して極めて強い活性を示すが
、他の動物赤血球に対しては実質上活性を示さないとい
う糖結合特異性を有するオゴノリ属藻類由来のレクチン
及びその製造方法に関するものである。

従来の技術 レクチンは動植物又は細菌中に見出される免疫学的産物
（免疫により産出される糖結合性抗体など）でない糖結
合性タンパク質であって、動植物細胞を凝集させたり、
多糖類や複合糖質を沈降させるという糖結合特異性を有
している。

近年、医療分野や生化学工業分野などにおいては、レク
チンをその糖結合特異性などの性質を利用して種々の用
途に使用する試みか積極的になされている。例えば、レ
クチンの糖に対する認識能を利用して、特定の糖や糖タ
ンパク質を精製するアフィニティークロマトグラフィー
への応用、糖結合特異性の明確なレクチンを用いる細胞
表面糖鎖の検索法、病気によって変化するヒト血中の糖
タンパク質構造の糖鎖部分をレクチンを用いて酵素レベ
ルで認識する臨床診断法、親子鑑定などに利用される血
液型判定試験への応用、ガン細胞などの特異性マーカー
としてのレクチンの利用法などが研究されている。

このようにレクチンは、医療分野や生化学工業分野など
において、極めて重要な物質であるが、これまで主とし
て陸上動植物由来のレクチンについて、その機能の解明
や応用研究がなされてきた。

例えばタチナタマメから精製されるレクチンのコンカナ
バリンＡやインゲンマメレクチン（ＰＨＡ）は末梢血リ
ンパ球に働いて芽球化を誘起することがしられており、
またカプトムシ由来のレクチンは親子鑑定に用いる血液
型の判定を容易にする、１９２８球を活性化する、イン
ターロイキンの産出を促進するなどの性質を有すること
が知られている。

これに対し、海洋生物由来のレクチンについてはこれま
であまり研究がなされておらず、最近になってようやく
研究されはじめ、藻類由来のレクチンは、陸上植物由来
のものが結合する糖より、一般に複雑な構造をもつ糖に
結合することが分かってきた。しかしながら、この藻類
由来のレクチンの生体内での役割はまだ不十分であり、
また、医療や生化学分野、その他への応用については全
く未開発のままである。そのため、海洋生物由来のレク
チンを探索し、その生体内機能を解明するとともに、そ
の機能を応用する技術の開発が望まれていた。

この藻類由来のレクチンについては、これまでオゴノリ
種（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｖｅｒｒｕｃｏｓａ）から
得られた分子量４１．０００のレクチンが報告されてい
る〔［ビュレチン・オブ・ザ・ジャパニーズ・ソサエテ
ィ・オブ・サイエンティフィック・フィッシャリーズ（
Ｂｕｌｌｅｔｉｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　
５ｏｃｉｅｔｙ　ｏｆ　５ｃｉｅｎ−ｔｉｆｉｃ　Ｆｉ
ｓｈｅｒｉｅｓ）Ｊ、第４７巻、第１０７９ページ（１
９８１））。このレクチンはウマ赤血球に対して最も強
い活性を示すが、ウサギ、モルモット、ヒツジに対して
もウマ赤血球に対する活性の１／２〜１／８の強い活性
を有し、赤血球の種類による差異はあまり認められない
。

発明が解決しようとする課題 ところで、前記したようにレクチンを生化学や医療の各
分野に利用するには、できるだけ限定された対象に対し
て糖結合特異性を示すものが望ましい。本発明は、この
よう１声本もので、特定の動物の赤血球に対してのみ活
性を示し、他の動物の赤血球に対しては活性を示さない
ようなレクチンを提供することを目的としてなされたも
のである。

課題を解決するための手段 本発明者らは、海洋生物由来の新規なレクチンを開発す
べく鋭意研究を重ねた結果、オゴノリ属藻類から得られ
る分子量約５２，０００のレクチンは、従来見出されて
いるオゴノリ属藻類由来の分子量４１．０００のレクチ
ンと異なり、ウサギ赤血球に対しては極めて強い活性を
示すが、他の動物赤血球に対しては実質上活性を示さな
いという糖結合特異性を有することを見出し、この知見
に基づいて本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、紅藻オゴノリ属藻類からの抽出物
質であって、分子量約５２．０００を有し、かつウサギ
赤血球に対して強い活性を示すが他の動物の赤血球に対
しては実質上活性を示さないことを特徴とするレクチン
を提供するものである。

このようなレクチンは、＠艮；、綻紅藻オゴノリ属藻類
からリン酸バッファーで抽出した液を塩析し、得られた
沈殿を水ｒ溶解し、この水溶液を透析処理後、ゲルろ過
し、得られた活性画分から固形分を単離することによっ
て得ることができる。

この際、原料として用いられるオゴノリ属藻類は、紅藻
類に属するもので、寒海にも存在するが特に暖海に多く
、わが国ではほとんど全ての沿岸地帯に分布しており、
寒天の中に混ぜたり、刺身のつまなどに用いられている
。

このレクチンを得るための好適な方法によれば先ず、オ
ゴノリ属藻類にリン酸バッファーを加えてホモジナイズ
したのち、遠心分離処理し、得られた上澄液を塩析して
沈殿を生成させ、次いで透析、ゲルろ過して活性画分を
得、さらにこれに限外ろ過、高速液体クロマトグラフィ
ーなどの処理を順次施して、レクチン固形物として単離
する。

発明の効果 本発明のオゴノリ属藻類由来のレクチンは、新規なもの
であって、ウサギ赤血球に対して極めて強い活性を示す
が、他の動物−生別に対しては実質上、活性を示さない
という糖結合特異性を有し、この特性を利用して医療分
野や生化学工業分野などにおいて、広い用途を有する。

実施例 次に、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、
本発明はこれらの例によってなんら限定されるものでは
ない。

実施例 オゴノリ属藻類（学名Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｓｐ、香
川県木田郡庵治町産）を水洗後、３７°Ｃで乾燥して得
られた乾燥試料１０ｈに、アスコルビン酸５ｍＭとＮａ
Ｃａ１０．１５Ｍとを含有するｐＨ７，０の１０＋１Ｍ
リン酸緩衝液５００ｍＱを加え、ホモジナイズにより抽
出処理したのち、これを遠心分離し、得られた上澄液に
７０重量％飽和溶液となるように硫酸アンモニウムを加
えて塩析を行い、沈殿を生成させた。

次に、この沈殿を蒸留水に溶解したのち、蒸留水に対し
て透析後、ゲルろ過カラムにより分離して活性画分を得
た。次いで、これを限外ろ過で濃縮後、ゲルろ過の高速
液体りｆＪ＝ｚ＊］グラフィ斜こより精製し、レクチン
を得た。

このレクチンの分子量を、ゲルろ過の高速液体クロマト
グラフィーにより求めたところ、５２，０００であった
。

また、糖結合特異性については、種々の動物赤血球５０
μＱに、レクチン試料５０μＱを加え、３７℃で１時間
インキュベートし、室温で２時間放置後、凝集活性を観
察した。その結果を表に示す。

参考例 実施例におけるオゴノリ属藻類の代りに、オゴノリ種（
Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｖｅｒｒｕｃｏｓａ）　（千葉
県小湊産）を用いた以外は、実施例と同様にして精製レ
クチンを得、赤血球凝集活性を求めた。その結果を表に
示す。

なお、遠心分離後の上澄液を塩析して得られた粗抽出物
についても赤血球凝集活性を求め、その結果も併せて表
に示した。

〔注〕数値は赤血球凝集活性を示す最少タンパク質濃度
（μ９／　ｍＱ）である。

この表から分かるように本発明のレクチンはウサギ赤血
球に対して極めて強い活性を有しているが、他の動物赤
血球に対してはあまり強い活性を有していない。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　紅藻オゴノリ属藻類からの抽出物質であって、分子
   量約５２，０００を有し、かつウサギ赤血球に対して強
   い活性を示すが他の動物の赤血球に対しては実質上活性
   を示さないことを特徴とするレクチン。 ２　紅藻オゴノリ属藻類からリン酸バッファーで抽出し
   た液を塩析し、得られた沈殿を水に溶解し、この水溶液
   を透析処理後、ゲルろ過し、得られた活性画分から固形
   分を単離することから成る請求項１記載のレクチンの製
   造方法。