JPH0311007A - 化粧品原料の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は牛の胎盤より化粧品原料を製造する方法に関す
る。更に詳しくは水溶性胎盤抽出液より、その化粧品と
しての有効性を保持しながら、感作性成分を除去する方
法に関する。

〔従来の技術〕

牛の胎盤から得られた水溶性物質の化粧品への利用は古
くから行われている。その成分としては水溶性ビタミン
群：チミン、リボフラビン、ピリドキシン、ジアノコバ
ラミン、ニコチン酸、パントテン酸、バラアミノ安息香
酸、ビオチン、フォリック酸、イノシトールや、アミノ
酸群：アルギニン、シスチン、ロイシン、ヒスチジン、
グルタミン酸、イソロイシン、リジン、メチオニン、フ
ェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、バリン
、セリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、アスパラギ
ンや、ミネラル群：カルシウム、ナトリウム、カリウム
、塩素、珪酸、マグネシウム、銅、コバルト、鉄や、 その他の成分：アルカリホスファターゼ、コレステロー
ル、コレステロールエステル、デオキシリボ核酸などが
含まれていることが知られている。

そして、その効果としては、皮膚の組織呼吸の作用：メ
ラニン形成阻害：皮膚柔軟化作用；小じわ、肌あれの改
善などが報告されている。現在まで、胎盤抽出液の有効
性を上げるために特開昭６２−１１６５１９号公報のよ
うに高分子成分に着目して種々の検討がなされている。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明者が、従来の牛の胎盤から得られた水溶性物質の
アレルギー試験を行った結果、いずれの検体にも、陽性
反応を示し、その中に感作性物質が含まれていることが
分った。

しかし、このアレルギー源となる物質を除去すれば、同
時に胎盤抽出液の有効性も失われることが憂慮された。

本発明の目的は、牛の胎盤抽出物より感作性物質を除去
すると共に細胞賦活、メラニン形成阻害、皮膚柔軟化作
用、小じわ、肌あれの改善の有効性を保持した化粧品原
料の製造方法を提供することである。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者は前記課題を解決するため鋭意研究を行った結
果、水溶性胎盤抽出液の分子量分画により有効性を保持
しつつ、感作性物質を除去できることを見いだし本発明
を完成した。

即ち本発明は健康な牝牛の胎盤より血液等の不純物を洗
浄、除去後、粥状胎盤となし、水溶性成分のみを低温下
で抽出を行い、更に遠心分離及び無菌濾過を行って水溶
性胎盤抽出液を得、該抽出液を限外濾過又はゲル濾過に
かけて、分子量分画を行うが、分子量分画の限界分子量
を９００〜１１００の範囲として、この限界分子二層の
成分を５除去することを特徴とする化粧品原料の製造方
法である。胎盤としては妊娠３〜４箇月の健康な牝牛の
胎盤が好ましい。

動物抽出成分は蛋白分解物を主成分とするので、一定分
子量を超える成分は、感作性を有することが予想された
。しかし一方、ある分子量を超える成分を除去すること
は水溶性胎盤抽出液の有効性の一部を除去する結果とな
ることも考えられる。

本発明者は、水溶性胎盤抽出物の分子量約１０００超の
成分を除去してみた所、感作性をなくすことができ、し
かも細胞賦活、メラニン形成阻害、皮膚柔軟化作用、小
じわ、肌あれの改善の有効性は保持されていることが各
種の実験によって証明された。

次に本発明の製造方法を詳述する。

妊娠３〜４箇月の健康な牝牛の胎盤より血液等の不純物
を洗浄除去する。胎盤は通常凍結した形態で入手するの
で、解凍した後、組織を細砕できる方法例えばミンチの
機械、ミキサー、ホモジスバー等で細砕する。これら総
ての操作は５℃以下程度の低温で実施しなければならな
い。従って細砕に当っても発熱する方法は取れないのと
、この後、組織内の血液等の不純物を除去する工程があ
るので、余りすり潰して有効成分の流出をまねくことも
好ましくない。

血液等の不純物を除去する工程は、圧搾機で行うのが好
ましい。最終工程で、限外濾過の工程があるので厳密に
行う必要はない。

この後、ブタノール水溶液を抽出溶媒として加えるが、
ブタノールの濃度は１５〜５０重量％が好ましい。

加える溶媒の量は、胎盤の湿重量の２〜５倍が適当であ
る。

ブタノール水溶液を加えた後、よく攪拌均質化して、水
溶性成分を低温下で抽出を行う。

そして、固体相等の溶解しない部分を濾過或いは遠心分
離を行って除き、静置してブタノール層を除き、酢酸、
クエン酸等で弱酸性、好ましくはＰＨ４，５〜５．０に
調整し、攪拌するこの操作によって生じた沈澱、浮遊物
等を遠心分離して除く。

更にブタノールを完全に取り除くため、減圧濃縮する。

この濃縮は元の量の３分の１〜１０分の１位になるよう
に実施する。

得られた液に防腐剤とエタノールを加えるが、最後の工
程に凍結乾燥の工程を加えて粉末状にする場合には、こ
の必要はない。

またエタノールは、この化粧品原料を貯蔵しておくとき
、脂肪酸等の影響で沈澱を生じるおそれがあるので添加
す名が、その濃度は２〜１０重量％が適当である。

この液から、感作性成分を除去するために限外濾過又は
ゲル濾過の方法で分子量分画を行う。

この分子量分画は、限界分子量を約１０００として分画
するが、限外濾過等の精度を考慮すると、この限界分子
量が９００〜１１００の間にあればよい。限界分子量が
９００未満であれば、化粧品原料としての有効成分が失
われるおそれがあり、又１１００超であると感作性成分
が残ってくるおそれがあって好ましくない。

この後、メンブランフィルタ−等を用いて、無菌濾過を
行い、本発明の化粧品原料を得る。

最終的に凍結乾燥等の方法を実施して、粉末状にするこ
とも可能である。

これらの諸工程はすべて低温下で、好ましくは５℃以下
の温度で実施する。

〔実施例〕

以下に実施例によって、本発明を更に具体的に説明する
が、本発明は、この実施例によって何等限定されるもの
ではない。

実験に供した試料は防腐剤を除去したのちに用いた。

％は乾燥重量当りである。

試験方法は次の方法によった。

（１）感作性試験（ＭａｘｌｓｌｚａＬｉｏｎ　Ｔｅ５
ｔ　）ハートレー系白色モルモット１５匹を用い、１０
匹は感作処置用、５匹は誘発時の対照とする。

（対照群は検体を皮膚に塗布したとき、感作性以外の反
応（１次刺戟）があるかをみて、感作群と比較するため
の群である。） （感作１）肩甲骨上皮膚を別宅し■アジュバント（免疫
増強剤） ■検体、■検体士アジュバントをそれ ぞれ左右２ケ所０．０５ｍ１ずつ皮内注射する。（１週
間経過） （感作２）同部位に１０％ラウリル硫酸ナトリウム（Ｓ
　Ｌ　Ｓ）を塗布し、さらに２４時間後、検体０．２ｍ
ｌを４８時閉塞貼布した。（２週間経過） （誘　発）腹側部を別宅し、検体０．２ｍｌを閉塞貼布
した。（２４時間経過） （誘発とは感作１．２で抗原抗体反応 で体内に抗体が生成された後、もう− 度抗原を塗布してアレルギー反応が起 るかどうかを見ることをいう。） （判　定）貼付除去後１．２４．４８．７２時間後に判
定する。

（判定基１）　５ｃｏｒｅ　Ｏ：肉眼的に変化なし１：
軽度またはまばらな紅斑 ２：中等度の紅斑 ３二強度の紅斑および浮腫 １０匹の５ｃｏｒｅを合計して、平均値を表示する。

（２）細胞毒性、細胞賦活性試験 カバーガラスの入った６ａｎのシャレーに隋ｌｅＭＥＭ
　（牛胎児血清２０％）培地を５ｍｌずつ分注 ↓ ↓ 判定 ◇細胞毒性・細胞賦活性試験　判定基準（１〕細胞数に
よる判定（異常細胞数も含む）Ｓｃｏｒｅ　−３：　Ｃ
ｏｎｔｒｏｌのほぼ１．５倍（大巾に増加） −２：　Ｃｏｎｔｒｏｌの４／３位 （肉眼でも分かる程度に増加） −１：　Ｃｏｎｔｒｏｌとほぼ同じ （僅かに染色濃度層る） ０　：　Ｃｏｎｔｒｏｌ　と同じ ｌ　：　Ｃ□ｎｔｒｏｌとほぼ同じ （僅かに染色濃度劣る） ２　：　Ｃｏｎｔｒｏｌの２／３位 （肉眼でも分かる程度に減少） ３　：　Ｃｏｎｔｒｏｌのほぼ半分 （大巾に減少） ４　：　Ｃｏｎｔｒｏｌの１／３位 （細胞数はごく僅か） ５：細胞を認めない （全く、または殆ど認めない） 〔２〕細胞形態による判定 ５ｃｏｒｅ　Ｏ：正常像 １：異常細胞が僅かに認められる （正常細胞　８０％以上） ２：異常細胞が認められる （正常細胞　５０％以上） ３：異常細胞が多数認められる （正常細胞　２０〜５０％位） ４：殆ど異常細胞である （正常細胞　１０％位） ５：正常細胞を認めない （Δ：染色性低下細胞） 第３表、第４表において、最初の数字は細胞数による判
定結果を、括弧内の数字は細胞形態による判定結果を示
す。

（３）メラニン生成抑制試験 ＥａｇｌｅＭＥＭ培地に牛胎児血清１０％および試料を
加え、検体とする。

↓ ６ｃ＋ｎシヤーレに検体を入れ、Ｂ−１６細胞１×１０
５ｃｅｌ１１０゜１ｍｌを加える 培養３日目に検体を交換する。

↓ 培養６日目に細胞を剥離しく付着性であるので物理的に
剥離）遠心分離して、白色化度を観察する。

（判定基準）白色度による判定　３ｃｏｒｅ−二白色化
なし ＋：わずかに白色化 ＋＋：明らかな白色化 ＋＋＋：強い白色化 ＋＋はメラニン生成抑制能力があることを表わし、十が
多い程、メラニン生成抑制能力が強いことを示す。

（実施例） 妊娠３〜４箇月の健康な牝牛の新鮮な胎盤１００　ｋｇ
の凍結物を融解後、ミンチ機械にて細砕した。これを圧
搾機で血液等を除き、これに精製水５０リツターとブタ
ノール１００リツターとを加えて、４℃で１０時間攪拌
均質化した。

遠心分離し、沈降した部分を除き、上澄を濾過した。こ
れを静置して、ブタノール層を捨てた。

酢酸でＰＨ４，７に調整し、３時間攪拌したのち静置し
た。

遠心分離し、沈降した部分を除き、上澄を濾過した。

これを２００リツターになるまで減圧濃縮した。

この液を限外濾過して、分子１１１０００超の成分を除
去した。

この分子量１０００以下の成分を後記の化粧品原料の実
施例で得た胎盤抽出液とした。

この限外濾過前の水溶性胎盤抽出液全体を検体１とし、
分子量１００００以上の成分を検体２、分子量１０００
〜１ｏｏｏｏの成分を検体３、分子！１１０００以下の
本発明の成分を検体４と表示する。

以下の試験における検体濃度は固形分の％である。

第４表　細胞賦活性試験結果 ブランク０（３） 次に本発明方法により製造した胎盤抽出液を配合した化
粧品の処方例を示すと共に、該化粧品の有効性の確認試
験の結果を示す。

（処方例−１）エモリエントクリーム１　　　　　　　
（重量％）Ａ　流動パラフィン　　　　　　　　　　　
　　　　　５．０ミリスチン酸オクチルドデシル　　　
　　　　　　３．０ホホバ油　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　２．０ラノリン　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　２６０セタノール　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　５．０ステアリン酸　　　　　　
　　　　　　　　　　　４．０″ルミチン酸　　　　　
　　　　　　　　　　　４．０グリセリンモノステアレ
ート　　　　　　　　　　　３．０ポリオキシエチレン
（２０モル）セチルエーテル　１．０酸化防止剤　　　
　　　　　　　　　　　　　　　０．２Ｂ　精製水　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　５２．１トリエタ
ノールアミン　　　　　　　　　　　　　　１．０１．
３ブチレングリコール　　　　　　　　　　　７．０プ
ロピレングリコール　　　　　　　　　　　　　５．０
防腐剤　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．
　２０　実施例で得た胎盤抽出液　　　　　　　　　　
　　５．ＯＤ香料　　　　　　　　　　０．５ ＡとＢとをそれぞれに計量し、約７０℃に加温し、Ａを
攪拌しつつ、Ｂを徐々に加えて、６０℃になったら、Ｃ
とＤを加えて室温まで冷却する。

（処方例−２）エモリエントクリーム２Ａ　スクワラン
　　　　　　　　　　　　　　　　　２５．０ミリスチ
ン酸イソプロピル　　　　　　　　　　　　５．０オリ
ーブ油　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２．
０カプリルカプロン酸トリグリセライド　　　　　　５
．０セタノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　
４．０ミツロウ　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　５．０グリセリンモノステアレート　　　　　　　　
　　　２．０（自己乳化型） た。Ａを攪拌しつつ、Ｂを徐々に加えて約６０℃になっ
たらＣとＤを加えて室温まで冷却する。

（処方例−３）　乳　　液 Ａ　スクワラン　　　　　　　　　　　　　　　　　　
５．　０オリーブ油　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　１．０２−エチルへキサン酸トリグリセライド
　　　　　５．０セタノール　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　１．０ゲイロウ　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　１．０ミツロウ　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　０．５グリセリンモノステアレート
　　　　　　　　　　　０．　５ソルビタンモノステア
レート　　　　　　　　　　　２．０酸化防止剤 Ｂ　精製水 グリセリン ポリエチレングリコール１０００ 防腐剤 Ｃ実施例で得た胎盤抽出液 り香料 ＡとＢとをそれぞれ計量し、 ０、２ ３９、１ １、０ ７、０ ０、２ ２゜　０ ０、５ 約７０℃に加温し 酸化防止剤 Ｂ　精製水 グリセリン ジプロピレングリコール カルボキシビニルポリマー（１，０％水溶液）防腐剤 Ｃ実施例で得た胎盤抽出液 り香料　　　　　　　　　　０．５ ＡとＢとをそれぞれ計量し、約７０℃に加温した。Ａを
攪拌しつつ、Ｂを徐々に加えて約６０℃になったらＣと
Ｄを加えて室温まで冷却する。

（処方例−４）　パック（２剤タイプ）第１剤　Ａ　デ
カグリセリンモノステアレート　　　１０．０グリセリ
ン　　　　　　　　　　　　１５．ＯＢ　スクワラン　
　　　　　　　　　　　　５０．０カプリルカプロン酸
トリグリセライド　２０．０精製水　　　　　　　　　
　　　　　　　５．ＯＡを加温溶解し、Ｂを攪拌しつつ
ゆっくり加えて冷却する。

第２剤 ポリビニルアルコール グリセリン エタノール 防腐剤 ビタミンＣ誘導体 実施例で得た胎盤抽出液 精製水 １５、０ ５．０ ５、０ ０、２ ０、２ ５．０ ６９．６ 計量した精製水を攪拌しつつポリビニルアルコールを徐
々に加えた。これに残りの原料を攪拌しつつ加えた。

（処方例−５）　ローション Ａ　香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　０．１スクワラン　　　　　　　　　　　　　　　　
　　０．２Ｂ　精製水　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　７２．５グリセリン　　　　　　　　　　　　
　　　　８．０ジプロピレングリコール　　　　　　　
　　　　　　２．０ポリエチレングリコール１０００　
　　　　　　　５．　０カルボキシビニルポリマー（１
，０％水溶液）５，０実施例で得た胎盤抽出液　　　　
　　　　　　　　２．０防腐剤　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　０．２Ａを計量し、約７０℃に加温
、攪拌しつつ冷却する。Ａを攪拌しつつ、Ｂを加える。

（比較例−１） 処方例−１の実施例で得た胎盤抽出液を、Ａ社製の胎盤
抽出液に置き換え、その他は同様にしてエモリエントク
リームを作成した。

（有効性の確認方法） 処方例−１と比較例−１を１０２名の女性（１８〜５４
才）で試験を行った。テスト方法はランダムに５１名ず
つにわけ、１群は処方例−１を、他方は比較例−１を１
ケ月間使用してもらった。

その結果、刺戟があるとした人の人数は処方例−１０名 比較例−１３名 であった。

その他の官能項目をみると、以下のようになった。

〔発明の効果〕 実施例の胎盤抽出液を分子量分画した各成分の試験結果
をみると、細胞賦活性においては、抽出液全体及び他の
分子ｆｆ１１０００超の成分と変わりないが、細胞毒性
においては、抽出液全体及び他の成分よりはるかに微弱
となっている。メラニン生成抑制効果においても、抽出
液全体および他の成分よりも抑制能力が強い。

特に本発明で目的とする感作性の点については、本発明
方法で製造した分子１１１０００以下の成分は、他の成
分が感作性が中であるのに対し、全く感作性が認められ
ない。

°即ち本発明方法によれば、牛の胎盤抽出物より、感作
性物質を除去すると共に、細胞賦活、メラニン形成阻害
、皮膚柔軟化作用、小じわ、肌あれの改善などの有効性
を保持した化粧品原料を得ることができる。

本発明方法で製造した胎盤抽出物を配合した化粧品につ
いて、人をパネルとした官能検査においても、本発明方
法を行わない胎盤抽出物を配合した化粧品に対し、しっ
とり感、肌につやがでる、肌のきめの細かさなどの点で
有意な差が認められた。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、健康な牝牛の胎盤より血液等の不純物を洗浄、除去
   後、粥状胎盤となし、水溶性成分のみを低温下で抽出を
   行い、更に遠心分離及び、無菌濾過を行って水溶性胎盤
   抽出液を得、該抽出液を限外濾過又はゲル濾過にかけて
   、分子量分画を行うが、分子量分画の限界分子量を９０
   ０〜１１００の範囲として、この限界分子量超の成分を
   除去することを特徴とする化粧品原料の製造方法。