JPH0296530A - 改良された抗真菌組成物及び真菌感染の制御方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 カンジダ種クリプトコツカス　ネオフオルマンス（ｎｅ
ｏｆｏｒｍａｎｓ）、ヒストプラスマ力ブスラーツム（
）ｌＬｓｔｏｐｌａｓｍａ　ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）な
どに起因する全身性真菌感染症は、重篤あるいは致命的
であることがしばしばである。治療される患者に有効で
あると同時に無毒である抗真菌剤が引き続き必要とされ
ている。既知の多くの抗真菌剤は病気を取り除くのに有
効であるが毒性又は他の望ましくない副反応のために使
用が制限されている。多くの場合毒性は薬剤の量に関係
し、薬剤が少量使用される場合には無視されるか又は低
減される。従って相乗作用するか又は既知の抗真菌剤に
相乗効果をもたらす第２成分を有する組み合わせが見い
出されて必要とされる薬剤の量が減少し、付随する副反
応が低下又は排除されるとすれば望ましいことである。

アンフォテリシン（ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ　）を他
の抗生物質と投与することによってカンジダアルビカン
ス（ａｌｂｉｃａｎｓ）が抗真菌剤に感作する文献が報
告されている。このように例えばミノサイクリン（ｍｉ
ｎｏｃｙｃｌｉｎｅ）とアンフォテリシンＢは、カンジ
ダ　アルビカンスに対する相乗剤組成物であることが見
い出されている。リーブ等ブライト、ジェー、インフェ
クト、ディス、　　（Ｌｅｃｖ　ａｔ　ａｌ　Ｂｒ１ｔ
、　Ｊ。

Ｉ　ｎｆｅｃｔ、　Ｄｉｓ、）第１３６巻２６３〜２７
０頁（１９７７年）、シかしながら、アンフォテリシン
との併用はアンプォテリシンが人間に対して毒性がある
ため満足するものではない。

本発明は特定のアザステロール化合物を特定の静真菌化
合物と併用して使用する場合にこれらの化合物の活性が
増強されて優れた抗真菌併用剤となり、場合によっては
有用な殺真菌併用剤となる発見によって可能になった真
菌の制御、特に真菌感染症の治療に有用な改良された組
成物及び方法に関する。いくつかのアザステロールはい
くらかの抗真菌特性を示すことができるがこの場合増強
される組成物は相乗組成物とみなすことができる。

本発明によれば２５−アザステロール化合物を抗真菌剤
と併用投与することによって抗真菌剤の抗真菌特性を増
強することができることを発見したのである。従って真
菌の生育を抑制しない濃度に於ける２５−アザステロー
ル化合物を準静真菌量の抗真菌剤と使用する場合に抗真
菌剤に対する真菌微生物の感応性が予期しないことに著
しく増大して相乗抗真菌組成物を生じる。更に特定の静
真菌剤との併用が予期しないことに殺真菌組成物を生じ
ることを発見した。

真菌感染症の原因である真菌に対する併用剤の有効性か
ら考えて本発明は更に準静真菌量の抗真菌化合物及び真
菌の生育を抑制しない量の２５−アザステロール化合物
を包含している組成物の抗真菌的に有効な量で感染した
部位を処置することを特徴する真菌感染症の原因である
真菌と闘う方法及び組成物に関する。本発明は更に準静
真菌量の抗真菌化合物及び真菌の生育を抑制しない量の
２５−アザステロールを包含している組成物の抗真菌的
に有効な量を真菌感染症の治療を必要としている患者に
投与することを特徴とする真菌感染症の治療方法に関す
る。

殺真菌組成物を生じる最も有効で実際予期されないほど
に増強された静真菌剤はラノステロールの生成前の生化
学経路における酵素に作用する静真菌剤である。ＨＭ　
Ｇ　−Ｃｏ　Ａシンターゼ、β−ケトチオラーゼ（β−
ケトアシル−補酵素Ａチオラーゼ）及びＨＭＧ−ＣｏＡ
還元酵素のようなメバロン酸合成に於ける酵素の阻害剤
並びにスクアレンエポキシダーゼを包含するラノステラ
ールへの経路の後の方の段階で作用する酵素を阻害する
ものは新規な殺真菌組成物の生成に特に重要である。こ
れらの酵素は全てラノステロール合成経路の酵素である
ため、これらの酵素に作用する抗真菌剤は一般的な言葉
で言われる場合ラノステロール合成阻害剤と呼ばれる。

ラノステロール合成阻害剤である静真菌剤を増強する２
５−アザステロールの有効性を考えると本発明は更に準
静真菌量のラノステロール合成阻害剤及び真菌の生育を
抑制しない量の２５−アザステロール化合物を包含して
いる真菌感染症の治療方法及び組成物に関する。

真菌感染症は静真菌組成物によって軽減することができ
るが、殺真菌組成物を除いては治癒しない。本発明の極
めて特別な態様は２５−アザステロール化合物及びＨＭ
Ｇ−ＣｏＡシンターゼ阻害剤又はβ−ケトチオラーゼ阻
害剤又はＨＭ　Ｇ　−Ｃｏ　Ａ還元酵素阻害剤又はスク
アレンエポキシダーゼ阻害剤を包含している新規な殺真
菌組成物である。

本発明の改良された抗真菌組成物及び方法に有用な″２
５−アザステロール化合物″は次式（Ｉ） （式中Ｒは水素又は低級アシルであり、ＸはＣＨ，ＯＨ
，又はＯであり、側鎖の８１１．は単結合又は二重結合
を示す、但しＸが０又はＣＨ，である時は単結合である
。） かられかるように３位のヒドロキシル基又はエステル化
ヒドロキシル基、環Ｂの不飽和及びステロイド環系の側
鎖の２５位の窒素が特徴である。

以下に示される場合を除いて、アザステロール化合物は
、すぐに入手し得るか文献に報告される化合物であるか
あるいは通常のエステル化法によって容易に製造される
既知の化合物のエステル誘導体である。以下は本発明で
特に有用な特定の２５−７ザステロールの代表例である
。

（ａ）　　　２５−アザコレステロール、１７β−［［
３−（ジメチルアミノ）プロピル］メチルアミノ］アン
ドロスト−５−エン−３β−オール （ｂ）　　Ｎ、Ｎ−ジメチル−３β−ヒドロキシ−５，
２２（Ｚ）コラジエン−２４−アミン、（３β−２２２
）−２４−（ジメチルアミノ）コラ−５，２２−ジエン
−３−オール上記のものは出願人Ｎ、Ｇ、スタインベル
グの同時係属中の１９８８年３月１８日出願ＵＳＳＮ　
　１６９，６６１に記載される通りｉ−ステロイドカル
ボキシアルデヒドによるウィッチヒ反応後転位及び加水
分解することによって製造することができる。

（ｃ）　　Ｎ、Ｎ−ジメチル−３β−アセトキシ−５，
２２（Ｚ）コラジエン−２４−アミン、（３β−２２２
）−２４−（ジメチルアミノ）コラ−５，２２−ジエン
−３−オールアセテート アセテートの製造もまた出願人Ｎ、Ｇ、スタインベルグ
のＵＳＳＮ　　１６９，６６１の主題である。

（ｄ）　　２５−アザ−２２−オキサコレステロール、
（３，２０）　−２０−［２−（ジメチルアミノ）エト
キシ］プレグンー５−エン−３−オール 好ましい２５−アザステロール化合物は２５−アザコレ
ステロール（化合物Ｉａ）である。

２５−アザステロール化合物によって増強されることが
できる抗真菌化合物は構造上具なるが真菌感染症の原因
となる微生物に対して特に有用である。多くの適した抗
真菌化合物はラノステロールの生化学経路における酵素
の阻害剤であることが知られているものである。しかし
ながらラノステロールの生化学経路における酵素の阻害
剤でなくあるいは抗真菌作用の方法は確立していないが
抗真菌特性を有することが知られているか又は示される
ことができる多くの抗真菌剤もまた増強され、有用な相
乗抗真菌組成物を生成することが見い出された。本発明
の方法及び組成物に於ける抗真菌主成分である異なった
構造のこれらの化合物は前述したことであるが２５−ア
ザステロール化合物のいくつかがいくらかの抗真菌特性
を有することから、種類は非ステロイド系である。２５
−アザステロール化合物によって増強される代表的な化
合物は多くの新規な静真菌剤並びにＵＳＡＮ又は鹿毛に
よってＬ２ＰＦａできる確立された静真菌剤を包含する
。以下の代表的な化合物は増強される抗真菌剤の異なっ
た種類を例示するものであるがこれらに限定するものと
して解釈されるべきではない。

（１）　　　１ｌ−（３−ヒドロキシメチル−４−オキ
ソ−２−オキセタニル）−７−メチル−２，４−ウンデ
カジエン酸（化合物Ａ）この化合物はジェー、ケム、ツ
ク、　（Ｊ　、Ｃｈｅｍ。

Ｓｏｅ、）　（ｃ）　、　１９７１年、３８８８頁に報
告されており、抗真菌特性は１９８６年２月３日に出願
された米国特許出願番号第８２５，４９６号の主題であ
り、ＨＭＧ−ＣｏＡシンターゼ阻害特性は１９８７年３
月４日に出願された米国特許出願番号第２１．８４８号
の主題である。

（２）　　５−（１−ヒドロキシ−２，４，６−へブタ
トリイニル）−２−オキソ−１，３−ジオキソラン−４
−へブタン酸（化合物Ｂ）Ｏ＝Ｃ−Ｏ この化合物は１９８７年５月２６日に出願された米国特
許出願第５３，９２０号に抗真菌特性と共に記載される
通り微生物ＡＴＣＣ５３，６１４，５３，６１５又は５
３，６１６を培養し、次に単離することによって製造す
ることができる。β−ケトチオラーゼ活性は１９８７年
５月２６日に出願された米国特許第５３，９７３号の主
題である。

（３）　　１−メチル−２−ノニル−５−（フェニルメ
チル）−３−ピロリジノール（化合物Ｃ） （４）　　　（Ｅ）−Ｎ−（６，６−シメチルー２−へ
ブテン−４−イニル）−Ｎ−メチル−１−ナフタレンメ
チルアミン、タービナフィン（化合物Ｄ） この化合物は出願人Ｒ，Ｅ、シワルツ等で出願された同
時係属中の米国特許出願番号１７２．１６４　（１９８
８年３月２３日出願）に抗真菌特性と共に記載される通
り微生物ＡＴＣＣ２２９４７を培養し、次に単離するこ
とによって製造することができる。

（５）　　１，２，３，７，８，８ａ−ヘキサヒドロ−
３，７−シメチルー８−［２−（テトラヒドロ−４−ヒ
ドロキシ−６−オキソ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチ
ルコー１−ナフタレニルー２−メチルブタノエート、ロ
バスタチン（化合物Ｅ） −ウンデカジェニル）−β−レゾルシクル酸μｍラクト
ン、−モノルデン（化合物Ｇ）（６）　　１−エチル−
１，４−ジヒドロ−７−メチル−４−オキソ−１，８−
ナフチリジン−３−カルボン酸、ナリジキシ酸（化合物
Ｆ） ＣＨ，ＣＨ。

（８）　　２−（４−チアゾリル）−１Ｈ−ベンズイミ
ダゾール、チアベンダゾール（化合物Ｈ） （７）　　５−クロロ−６−（７，８−エポキシ−１０
−ヒドロキシ−２−オキソ−３，５（９）　　４−［２
−（３，５−ジメチル−２−オキソシクロヘキシル）−
２−ヒドロキシエチル］２，６−ビペリジンジオン、シ
クロへキシミド（化合物Ｊ） ヒドロ−３，６，１０，１２，１２ａ−ペンタヒドロキ
シ−６−メチル−１，１１−ジオキソ−２−ナフタセン
カルボキサミド、テトラサイクリン（化合物Ｌ） （１０）　　４．７−ビス（ジメチルアミノ）−１，４
，４ａ、５，５ａ、６，１１，１２ａ−アクタヒドロ−
３，１０，１２，１２ａ−テトラヒドロキシ−１−ジオ
キソ−２−ナフタセンカルボキサミド、ミノサイクリン
（化合物Ｋ） （１２）　　Ｎ−メチル−Ｎ−（３−フェニル−２−プ
ロペニル）−１−ナフタレン−メタンアミン、ナフチフ
ィン（化合物Ｍ） ＣＨ。

（Ｕ） ４−（ジメチルアミノ）−１，４゜ ４ａ、５，５ａ、６，１１，１２ａ−オクタ（１３）　
　　２−（ｐ−メトキシベンジル）−３゜４−ピロリジ
ンジオール−３−アセテート。

アニソマイシン（化合物Ｎ） 前述の化合物は以後厘毛又はＵＳＡＮ名又は文字指定に
よる“化合物″によって確認することができる。

前で示した通り、注目すべき併用は２５−アザステロー
ル化合物とランステロール合成の生化学経路に於ける酵
素の阻害剤との併用である。これらの併用は殺真菌特性
並びに相乗抗真菌特性を示す。特に２５−アザステロー
ル化合物とメバロン酸合成の阻害剤との併用即ち２５−
アザステロール化合物とＨＭＧ−Ｃｏ　Ａシンターゼ阻
害剤化合物、２５−アザステロール化合物とβ−ケトチ
オラーゼ阻害剤化合物及び２５−アザステロール化合物
とＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤化合物との併用が顕著
である。特に有用な特定併用は２５−アザステロール化
合物としての２５−アザコレステロールとＨＭＧ−Ｃｏ
Ａシンターゼ阻害剤化合物としての１ｌ−（３−（ヒド
ロキシメチル）−４−オキソ−２−オキセタニル）−７
−メチル−２，４−ウンデカジエン酸（化合物Ａ）、β
−ケトチオラーゼ阻害剤化合物としての５−（１−ヒド
ロキシ−２，４，６−ヘプタトリイニル）−２−オキソ
−１，３−ジオキサラン−４−へブタン酸（化合物Ｂ）
及びＨＭ　Ｇ　−Ｃｏ　Ａ還元酵素阻害化合物としての
１．２，３，７，８．８ａ−へキサヒドロ−３，７−シ
メチルー８−［２−（テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−
６−オキソ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］−１−
ナフタレニルー２−ブタノエート（化合物Ｅ、ロバスタ
チン（ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ）　）である。

また２５−アザステロールと（Ｅ）−Ｎ−（６，６−シ
メチルー２−へブテン−４−イニル）−Ｎ−メチル−１
−ナフタレン−メチルアミン（化合物り、タービナフィ
ン（ｔｅｒ−ｂｉｎａｆｉｎｅ）　）及びＮ−メチル−
Ｎ−（３−フェニル−２−プロペニル）−１−ナフタレ
ンメタンアミン塩酸塩（化合物Ｍ、ナフチフィン（ｎａ
ｆｔｉｆｉｎｅ）　）との併用が注目される。特に後者
の２５−アザコレステロールとタービナフィンの併用が
有用である。

本発明の抗真菌及び殺真菌相乗併用剤は、カンジダ種、
例えばＣ，アルビカンス、Ｃ。

バラプシロシス（ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ）、　ｃ、
　　トロピカリス（ｔ・ｏｐｉｃａｌｉｓ）、Ｃ，シュ
ードトロピカリス（ｐｓｅｕｄｏｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ
）、Ｃ，クルセイ（ｋｒｕｓｅｉ）、　Ｃ，ルゴサ（ｒ
ｕｇｏｓａ）、Ｃ，キリエルモンディイ（ｑｕｉｌｌｉ
ｅｒｍｏｎｄｉｉ）、Ｃ，ステラトイデア（ｓｔｅｌｌ
ａｔｏｉｄｅａ）など、アスペルギルス種例えばＡ、フ
ミガタス（ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）などのような真菌微生
物に起因する真菌感染症及びクリプトコツカス　ネオフ
オルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｎｅｏｆｏｒ
ｍａｎｓ）　、　　トルロプシスゲラブラタ（Ｔｏｒｕ
ｌｏｐｓｉｓ　ｇｌａｂｒａｔａ）、リゾプス　リゾポ
ジフォルミス（Ｒｈ　１ｚｏｐｕｓ　ｒｈｉｚｏ−ｐｏ
ｄｉｆｏｒｍｉｓ）　、コクシジオイデス　イミチス（
Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ　１ｍｍ１ｔｉｓ）、スポロ
スリックスジエンキイ（Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ　５ｃｈ
ｅｎｋｉｉ）、ヒストブラスマ　カブスラーツム（Ｈ１
ｓｔｏｐｌａｓ　ｍ　ａｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）及びプ
ラストマイセス　デルマチチジス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃ
ｅｓ　ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ）のような真菌に起因
する他の疾患の治療に有効である。

準静真菌量の抗真菌化合物を２５−アザステロール化合
物と共に使用することを特徴とする抗真菌化合物の抗真
菌有効性を増強する方法はそれがいくらかの静真菌特性
を有していても真菌の生育を抑制しない濃度で使用され
る。それで増強された併用剤は真菌の生育を抑制しない
量の２５−アザステロール化合物と抗真菌化合物を包含
している組成物の抗真菌的に有効な量を真菌の制御が望
まれる部位に投与又は処方することにより真菌生育を制
御するために使用することができる。

他方各々の化合物は連続して投与することができる。こ
の方法は特に２５−アザステロール化合物を抗真菌剤と
共に包含している組成物の抗真菌的に有効な量を患者に
投与することを特徴とする真菌の生育を制御する真菌感
染症及び真菌に起因する疾患にかかっている患者を治療
することに関する。この適用は経口又は非経口投与の場
合であるような感染から離れた部位で又は真菌に感染し
た部位に直接行なうことができる。薬剤は以下に言及さ
れる量の医薬的に使用し得る担体の存在又は不存在下で
好ましくは存在させて投与することができる。以下に言
及されるような薬剤の量を投与することによって薬剤の
全く予期されない増強又は相乗外真菌相互反応が達成さ
れる。

またいくつかの併用剤即ち、アザステロールとランステ
ロール合成阻害剤を用いて通常高濃度に於て殺真菌効果
を達成することができる６本発明は殺菌効果を有する組
み合わせを用いて殺真菌併用剤を真菌に感染した部位に
投与することにより真菌を殺菌することに関する。更に
アザステロール化合物とＨＭＧ−ＣｏＡシンターゼ阻害
剤、アザステロール化合物とβ−ケトチオラーゼ阻害剤
、アザステロール化合物とＨＭ　Ｇ　−Ｃｏ　Ａ還元酵
素阻害剤又はアザステロール化合物とスクアレンエポキ
シダーゼ阻害剤を包含している殺真菌組成物を投与する
ことにより真菌に起因する疾患を根絶するために真菌感
染症にかかった患者を治療することに関する。静真菌組
成物を用いた場合、適用は経口又は非経口投与でのよう
な感染と離れた部位で行なわれるか又は直接感染の部位
で行なわれる。投与は以下に詳述される量の担体の存在
又は不存在下で行なうことができる。これらの操作によ
って全く予期されない真菌の根絶が達成される。

併用剤の有効性は、一般にアザステロール化合物と併用
して使用される静真菌剤に対する個々の細菌又は細菌株
の原感受性に依存する。従ってアザステロール化合物は
静真菌剤により相乗効果を有するが一般に個々の併用剤
の明白なより顕著な効果は変性されない静真菌剤に対す
る細菌の原感受性に依存することができる。ランステロ
ール合成阻害剤であることが既知の静真菌剤の場合には
相乗外真菌併用剤が得られるばかりでなく、殺真菌併用
剤が得られることがこれらの静真菌剤で見い出されてい
る。

２５−アザステロール化合物を同時投与することによる
抗真菌剤の抗真菌特性の増強及び抗真菌相乗効果並びに
多くの場合殺真菌効果の結果は活性の定量に対する試験
管内相互反応研究によって具体的に説明することができ
る。カンジダアルビカンス、（也のカンジダ種及び多く
の他の真菌を包含する真菌感染症の病原体であることが
知られている代表的な真菌微生物に対するこれらの試験
では２５−アザステロール化合物と種々の静真菌うンス
テロール合成阻害化合物に相乗抗真菌特性が示されてい
る。

２５−アザステロール化合物と抗真菌剤の併用の代表的
な抗真菌特性は、以下の実施例で示されるが、これらは
、代表するものと考えられ限定するものとして解釈され
るべきではない。

寒天を２５−アザコレステロールで補足した標準のディ
スク拡散検定を使用し、カンジダ　アルビカンス、ＭＹ
９９２　及びＭＹ１０５５の２菌株を使用して薬剤の抗
真菌特性について２５−アザコレステロールの相乗効果
の範囲を定量するために薬剤を試験した。

数種の抗真菌剤の抗カンジダ活性について２５−アザコ
レステロールの代表的な相乗効果は以下の表で示すこと
ができる。

去迦■〔−ｌ サブローデキストロース寒天にカンジダアルビカンスＭ
Ｙ９９２を　Ｉ　Ｘ　１０’コロニ一形成単位７ｍｍ　
（ｃ　ｆｕ／ｍＱ）まで接種した。エタノール：Ｂｒ１
ｊ　　５８　（１：１゜Ｖ　／　Ｖ　）に溶解したアザ
ステロール、２５−アザコレステロール（化合物Ｉａ）
及び２５−アザ−２２−オキサコレステロール（化合物
Ｉｄ）を１０μｎ／ｌａＱの等偏量で加えた。

検定プレートに注いだ、決められた濃度の薬剤を供給す
るために調製された感受性ディスクをプレート上に置い
た。プレートを３７℃で１７時間温Ｉｂた。この直後に
阻止帯を測定した。細菌の薬剤に対する感受性が増加し
ているアザステロールの作用は表■で知ることができる
。

一人一見− アニソマイシン シクロへキシミド ナリジキシ酸 ニッコマイシン テトラサイクリン ロバスタチン ナフチフィン タービナフィン 去ＩＬ−見 アザステロール化合物の増強特性を定量するために数種
のアザステロール化合物を数種の抗真菌剤と使用してデ
ィスク拡散検定を実施した。

アザステロールをサブローデキストロース寒天で滴定し
、Ｃ，アルビカンスＭＹ９９２を接種した。抗真菌剤を
含む感受性ディスクを５０μｇ／ディスクでプレートに
適用した。

プレートを３７℃で１８時間温Ｉｂた。この直後阻止帯
に対してプレートを読み取った。

アザステロール化合物、２５−アザコレステロール（化
合物Ｉａ）、Ｎ、Ｎ−ジメチル−３β−７セトキシー５
．２２　（Ｚ）−コラジエン−２４−アミン（化合物Ｉ
ｃ）及びＮ。

Ｎ−ジメチル−３β−ヒドロキシ５，２２（Ｚ）−コラ
ジエン−２４−アミン（化合物Ｉｂ）と抗真菌剤シクロ
へキシミド、ナリジキシ酸及びタービナフィンの結果を
表■に示す、（化合物Ｉｃは単独で使用される場合２５
μｇ　／　ｍ　Ｑで生育を抑制した）化合物Ｉａ 化合物Ｉｃ 化合物Ｉｂ ６．２５ １．５６ ０．３９ ６．２５ １．５６ ０．３９ ６．２５ １．５６ ０．３９ 表■ 実施例　■ Ａ０皿來羞米 ナリジキシ酸、ニッコマイシン、ロバスタチン及びター
ビナフィン単独及び２５−アザコレステロールとの併用
の最小阻止濃度（ＭＩＣ）を測定した。

合成培地（ＳＭ、デイフコ酵母窒素ベースを０．５％デ
キストロースで補足した）及び複合培地（ＣＭ、デイフ
コサブローデキストロース寒天）に指数期のカンジダア
ルビカンスＭＹ９９２．　　ｌＸｌ０’ｃｆｕ／ｍＱ　
（１ｍＱ当りのコロニー形成単位）を接種した。

ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）１０μＱ／ｍＱ及び
エタノールーブリジ（Ｂｒｉｊ）５８　　（１：　１．
ｖ／ｖ）１０μ＋２／ｍＱを含む希釈管を調製した。試
験薬剤を４００〜１．５６μｇ／ＩＩＩＱ′ａ定した。

管を３７℃で１７時間温Ｉｂ、読み取り最小阻止濃度を
定量した。ＭＩＣを目に見える増殖を阻止する最小濃度
として使用した。結果を表ＩＶＡに示す。

一粂一一剣一卿 ナリジキシ酸　ＳＭ Ｍ ニッコマイシンＳＭ Ｍ −人一■Δ− 薬剤の最小阻止濃度（ＭＩＣ） μｇ／ｍＱ ２５−アザコレステロールの濃度（μｇ／ｍＱ）０　　
　　１．２５　　　１２．５ 〉４００ 〉４００ ロバスタチン Ｍ Ｍ タービナフィンＳＭ Ｍ Ｂ、殺真菌効果 薬剤単独及び２５−アザコレステロールとの併用の殺真
菌効果は最小阻止濃度を定量するために使用した滴定管
を希釈することによって定量した。

試験試料をミクロ力価デイツシュで１０倍加量によって
希釈した。５μＱアリコートの各希釈液をサブローデキ
ストロース寒天にはりつけ、プレートを３７℃で２４時
間温Ｉｂた。ＭＩＣ管中の生育細胞の存在に注意し。

最小殺真菌濃度（Ｍ　Ｆ　Ｃ）を定量した。結果を表Ｉ
ＶＢに示す。

表■Ｂ ＩＬ−側御 ナリジキシ酸 ニッコマイシン ロバスタチン タービナフィン 薬剤の最小殺真菌濃度（ＭＦＣ） μｇ／ｍＱ ２５−アザコレステロールの濃度（μシーα）０　　　
　　１２．５ ＞４００　　　　　　＞４００ ＞４００　　　　　　＞４００ ＞４００　　　　　　１００ ス膚２−と Ｃ，アルビカンスＭＹ１０５５に対する特定の抗真菌剤
の最小阻止濃度（ＭＩＣ）又は最小殺真菌濃度（ＭＦＣ
）に関する２５−アザコレステロールの相乗効果は以下
の実験で示される。

Ｃ，アルビカンスＭＹ１０５５を０．５％グルコースで
補足したデイフコ酵母窒素ベース中で３７℃に於て一晩
生育した。培養菌を新しい培地に１．　Ｘ　１０’ｃ　
ｆ　ｕ／ｒｍＱまで希釈した。１ｍＱアリコートを４倍
加量によって連続的に希釈した薬剤を含む管に加えた。

２５−アザコレステロールを二塩酸塩として使用した。

接種後管を３０Ｏｒｐｍに於て３７℃で２４時間温Ｉｂ
た。ＭＩＣを目に見える生育を阻止する最低濃度として
定量した。

最小真菌濃度（ＭＦＣ）は−晩薬剤処理した培養菌をミ
クロ力価皿で１０倍加量で希釈することにより定量した
。各希釈液の５μΩをサブローデキストロース寒天には
りつけた。

プレートを３７℃で２４時間温Ｉｂ、生育を観察した。

開始コロニー形成単位の対数２より大きいか又は等しい
ＭＦＣを殺菌のための最低濃度として定量した。

結果を表Ｖに示す。

表Ｖ μｇ／ｍΩ 一栗−−−剋一 ナリジキシ酸 ロバスタチン タービナフィン 化合物Ｃ ニッコマイシン モノルデン ミノサイクリン １．５６ １．５６ ６．２５ 去１劃り一■ 実施例Ｖで記載した方法で実施した操作でカンジダアル
ビカンスＭＹ１０５５に対する２５−アザコレステロー
ルと５−（１−ヒドロキシ−２，４，６−へブタトリイ
ニル）−２−オキソ−１，３−ジオキサラン−４−へブ
タン酸カーボネート塩（化合物Ｂ）及び１ｌ−（３−（
ヒドロキシメチル）−４−オキソ−２−オキセタニル）
−７−メチル−２゜４−ウンデカジエン酸（化合物Ａ）
と併用の最小阻止濃度及び最小殺真菌濃度を定量した。

結果を表■に示す。

表■ 一栗一一一一珂− ＭＩＣＭＦＣ μｇ／ｍΩ　　　μｇ　／ａａ　Ｑ ２５−アザコレステロール（μｇ／１ＩＩＱ）化合物８
　　１．２５　　＜０．３１　５．０　　＜０．３１化
合物Ａ　　　３．１　　（３，１１２，５（３，１去１
■Ｌ−剋 広範囲スペクトルの酵母及び線状真菌に対する併用剤の
活性の増大は寒天希釈検定に於ける２５−アザコレステ
ロールとタービナフィン、モノルデン及び化合物Ｃとの
併用で示すことができる。使用した方法は次の通りであ
る。２５−アザコレステロールを蒸留水に可溶化し、ま
ず１．２８〜Ｏ，０００６３ｍｇ／ｍΩの範囲の濃度を
調製し１次に寒天培地で希釈して１２８〜０．０６３ｍ
ｇ／ｍＱの試験濃度を得た。タービナフィン、モノルデ
ン及び化合物ＣｔｔＩＯ％ジメチルスルホキシドに可溶
化し２５−アザコレステロールでのように化合物Ｃの最
大最終濃度６４μｇ　／　ｍ　ｎを除いて希釈した。

希釈した各薬剤を冷却した溶融酵母窒素ベースとグルコ
ース寒天（薬剤１．０　　ｍＡと寒天９．０ｍｇ）に加
えた。また適当な溶媒と培地対照（薬剤不在）を調製し
た。調製したプレートを使用前に一晩室温で暗所に貯蔵
した。

酵母マルトース（ＹＭ）ブイ３．ンに維持した酵母培養
菌を新しいＹＭ培地に移植し、３７℃で一晩振盪しなが
ら（２５０ｒｐｍ）温置した。温置後、各培養菌を滅菌
食塩水で希釈して最終濃度３　Ｘ　１０’〜３　Ｘ　Ｉ
　Ｏ’コロニー形成単位／ｍＱ　（ｃｆｕ／ｍＱ）を生
成した。アスペルギルス及びペニシリウムの２種の分離
物をジャガイモデキストロース寒天斜面に維持し胞子懸
濁液を滅菌ガラスピーズと激しく振盪することにより生
成した。胞子標本をこれら３つの線状真菌の接種物とし
て使用した。

調製した各プレートにデンレイ　マルチポイント　イノ
キュレータ−（デンレイ、スセックス、英国）を使用し
て２１個の酵母状の線状真菌を接種した。イノキュレー
タ−は寒天表面に約０．ＯＯｌｍＱを供給し３　Ｘ　１
０”〜３　Ｘ　１０”コロニー形成単位が接種される。

プレートを２８℃で４８時間温Ｉｂた。最小阻止濃度（
ＭＩＣ）を生育せずか３ｃｆｕｓ／スポツト以下を示す
薬剤の最低濃度として記録した。

アザステロール化合物による活性の増大は。

微生物の数種に対してすべての併用剤に見られた。モノ
ルデン及びタービナフィンとの併用は試験したほとんど
すべての微生物に対して活性が極めて増大した。

モノルデン、化合物Ｃ及びタービナフィンとの結果は、
表■Ａ、■Ｂ及び■Ｃに示される。２５−アザコレステ
ロール（ＡＣ）は１２８μｇ　／　ｍ　Ｑに維持した。

モノルデン（Ｍ）又はタービナフィン（Ｔ）は１２８〜
０　、０６３　ｉｔ　ｇ　／　ｍ　Ｑで滴定し、化合物
Ｃ（Ｃｐｄｃ）は６４〜０　、０６３　μｇ　／　ｍ　
Ｑで滴定した。更にタービナフィンを用いた試験では２
５−アザコレステロールを３２μｇ／ｍＱ又は８μｇ　
／　ｍ　Ｑに維持し一方タービナフィンを１２８−０．
０６３　ｐ　ｇ／ｍＱで滴定して実施した。併用剤カラ
ムの最小阻止濃度は混合物の静真菌剤を滴定したもので
ある。

タービナフィンと併用では２５−アザコレステロール濃
度を１２８〜８μｇ／ｍＱに低下させることにより活性
増大の著しい減少は見られなかった。

２５−アザコレステロールとナリジキシ酸を使用する同
様の試験は同様の相乗効果を示したが効果は劣っていた
。活性のパターンはＣ，シュードトロピカリス、Ｃ，ク
ルセイ及びペニシリウムイタリクムに対して高い相乗作
用を示すモノルデンと併用のものと同様であった。しか
しながらモノルデンとの併用と異なり、２５−アザコレ
ステロールはカンジダアルビカンスのほとんどの菌株に
対してナリジキシ酸による相乗効果はほとんど示さなか
った。

真　　　菌 ■Ａ クリプトコッ力スネオフオルマンス Ｃｒ、不オフオルマンス カンジダ　アルビカンス Ｃ，アルビカンス Ｃ，アルビカンス Ｃ，アルビカンス Ｃ，アルビカンス Ｃ，バラプシロシス Ｃ，バラプシロシス Ｃ，＋−ロビカリス ｃ、　　ｔ−ロピカリス Ｃ，シュードトロピカリス Ｃ，クルセイ Ｃ，ルゴサ Ｃ，キリエルモンジイ Ｃ，ステラトイデア トルロプシス　ゲラブラタ Ｓａｃ、セレビシアエ アスペルギルス　フミガラス Ａ、フラブス ペニシリウム　イタリクム Ｙ１０５１ Ｙ１１４６ ＹＬＯ５８ Ｙ１０５５ ＹＯ９９２ ＭＹ　　１　０　１　３ Ｙ１０２９ ＹＩＯ０９ ＹＩＯＩＯ ＭＹＬＯＩ　　Ｉ ＭＹＬＯＩ２ Ｙ１０４０ Ｙ１０２０ Ｙ１０２２ ＭＹＬＯＩ９ ＭＹ　　１　０　１　８ Ｙ１０５９ Ｙ１０２７ ＭＦ４　８　３　９ Ｆ０３８３ Ｆ２８１９ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ ＜０．０６　３ ＜０．０６３ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ ＜０．０６３ ０．５ ０．２５ ０．２５ ＜０．０６　３ ＜Ｏ−０６３ ０，１２５ ＜０．０６３ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 〉１２８ 　Ｚ 臥象机來　　種々の静真菌化合物の既知の用量範囲及び
真菌の生育を抑制しない２５−アザステロール化合物の
濃度から相乗抗真菌又は殺真菌組成物は真菌感染症を制
御することを達成し、静真菌又は殺真菌作用は主として
抗真菌剤に依存する。相乗作用はアザステロール化合物
が非ステロイド系抗真菌剤量の約１／４〜１／２量を使
用した場合に又は１／３０量でさえ得ることができる。

殺真菌作用を生しる併用剤としては２５−アザステロー
ル化合物の量を抗真菌相乗作用を生じるのに必要とされ
る以上に増加させることができる。しかしながら、抗真
菌特性が主に非ステロイド系１こ存在し、望ましくない
副反応を低下させなから抗真菌特性の利点を利用するた
めにこの非ステロイド系の量を減少させることがしばし
ば望ましいことからステロイド系薬剤の実際量は主とし
て考慮する必要はなく望ましい有用な相乗作用は小さな
端数の重量でよりむしろ過剰のステロイド系重量の量で
得ることができることは心に留めておくべきである。抗
真菌剤に対するステロイド系増強剤の実際比は非ステロ
イド系外真菌剤に依るばかりでなく、制御される個々の
細菌に依存する６従って実際の比は臨界的ではない。

本発明は、準静真菌量の選択された静真菌剤と真菌の生
育を抑制しないアザステロール化合物の量の使用を企図
している。真菌感染の治療制御に対しては、患者の全身
状態、体重、年令及び薬剤の応答に影響する他の因子並
びに使用される個々の薬剤を考慮しながら非ステロイド
系抗真菌剤を体重１ｋｇ当たり約１　、５−５　、０　
ｍ　ｇ　／　ｋ　ｇ、同様にアザステロール化合物を体
重１ｋｇ当た　リ１．５〜５．０ｍｇを投与することが
できる０人間の患者での使用に適する服用量として表わ
される場合の量は経口又は非経口経路によりＢＩＤで投
与される非ステロイド系抗真菌前約１００〜４００　ｍ
　ｇ及びアザステロール化合物５０〜４００ｍｇの範囲
にある。

顕著な特性はアザステロール化合物及び非ステロイド系
抗真菌剤を通常の医薬配合手法に従って医薬的に使用し
得る担体と共に新規な医薬組成物に処方する場合最も有
効に利用される。

相乗併用剤は注射用として処方することができ、アンプ
ル又は多数回投与容器に単位用量形態で必要があれば防
腐剤を添加して存在させることができる。組成物はまた
油性又は水性賦形剤中の１ｌｆｉ濁液剤、液剤又は乳剤
のような形態を使用することができ、沈殿防止剤、安定
剤及び／又は分散剤を含有することができる。他方有効
成分は非経口又は経口投与前に適当な賦形剤と再構成す
る粉末形態にあることができる。

非経口適用に対しては薬剤は、水中０．８５％塩化ナト
リウム又は５％デキストロースのような通常の非経口液
中でデスオキシコレート又は他の医薬的使用し得る組成
物のような処方助剤と共に処方されるのが好ましい。

化合物はまた錠剤又はカプセル形態並びに経口投与用の
液体形態で調製することができる。経口用量形態の組成
物の調製に於て構成薬剤を液体製剤に対して水、グリコ
ール、油、アルコール等の液体担体、カプセル剤及び錠
剤のような固体製剤に対して、デンプン、糖、カオリン
、エチル　セルロースのような固体担体を包含する通常
の医薬媒質のいずれかと、一般にステアリン酸カルシウ
ムのような滑沢剤と結合剤及び崩壊剤等と共に緊密に混
和される。投与の容易さから錠剤及びカプセル剤が最も
有利な経口用量形態を表わす。

投与の容易さ及び用量の均等性のために単位用量形態の
組成物を処方することが特に有利である。単位用量形態
の組成物は、本発明の態様として構成する。明細書及び
特許請求の範囲で使用される″単位用量形態″なる用語
は物理的に異なる単位を意味し、有効成分の予め決定さ
れた量を含有する各単位は医薬担体と共に望まれる治療
効果を生じるように計算される。かかる単位用量形態の
具体例は、錠剤、カプセル、火剤、散剤包、ウェーファ
、アンプル又は多数回投与容器中の計量単位等である０
本発明の単位用量は、一般に非ステロイド系抗真菌剤１
００〜４００ｍｇ及びアザステロール化合物約５０〜４
００ｍｇを含有し、非ステロイド系抗真菌前約１００〜
２０Ｏｆｆｉｇ及びアザステロール化合物１００〜２０
０ｍｇが好ましい。

以下の実施例は新規な組成物を具体的に説明するもので
あり、限定するものとして解釈されるべきではない。

末五貫−へ 各々にＮ、Ｎ−ジメチル−３β−アセトキシ５．２２　
（３）−コラジエン−２４−アミン（化合物Ｉｃ）１０
０ｍｇ及びロバスタチン２００ｍｇを含有する１００個
の圧縮錠剤を以下の処方により調製する。

化合物Ｉ　ｃ　　　　　　　　　　　　１００ロバスタ
チン　　　　　　　　　　２００デンプン　　　　　　
　　　　　　７５〇二塩基性リン酸カルシウム含水５０
００ステアリン酸カルシウム　　　　　　　２．５微細
粉末成分を十分に混合し、１０％デンプンペーストと共
に顆粒にする。顆粒物を乾燥し、錠剤に圧縮する。

実施例　Ｂ 各々に２５−アザコレステロール１００ｍｇ及びタービ
ナフィン２００ｍｇを含有する１０００個の硬ゼラチン
カプセルを次の処方から調製する。

−」Ｌ− ２５−アザコレステロール　　　　　１５０タービナフ
イン　　　　　　　　　　　２００デンプン　　　　　
　　　　　　　　　２５０ラクトース　　　　　　　　
　　　　７５０タルク　　　　　　　　　　　　　　　
２５０ステアリン酸カルシウム　　　　　　　１０成分
の均一な混合物を混和することによって調製し、２部分
の硬ゼラチンカプセルに充填するために使用する。

実施例　Ｃ 各々にＮ、Ｎ−ジメチル−３β−ヒドロキシ−５，２２
（Ｚ）〜コラジエンー２４−アミン（化合物Ｉｂ）２１
０ｍｇ及びロバスタチン２９０ｍｇを含有する１０００
個の硬ゼラチンカプセルを以下の組成物を混和すること
によって生成し、２部分の硬ゼラチンカプセルに充填す
るために使用する。

−」Ｌ− 化合物Ｉｂ　　　　　　　　　　　　　２１０ロバスタ
チン　　　　　　　　　　　２９０デンプン　　　　　
　　　　　　　　　２５０ラクトース　　　　　　　　
　　　　７５０タルク　　　　　　　　　　　　　　　
２５０ステアリン酸カルシウム　　　　　　　ｌＯ去８
１１４　　Ｄ− 各々に２５−アザ−２２−オキサコレステロール（化合
物Ｉｄ）２１０ｍｇ及び１−メチル−２−ノニル−５−
（フェニルメチル）−３−ピロリジノール（化合物Ｃ）
２９０ｍｇを含有する１０００個のゼラチンカプセルを
同様の方法で調製する。

−」Ｌ− 化合物１ｄ　　　　　　　　　　　　　２１０化合物Ｃ
２９０ デンプン　　　　　　　　　　　　　　２５０ラクトー
ス　　　　　　　　　　　　７５０タルク　　　　　　
　　　　　　　　　２５０ステアリン酸カルシウム　　
　　　　　１０実施例　Ｅ 各々に２５−アザコレステロール２００ｍｇ及び５−（
１−ヒドロキシ−２，４，６−へブタトリイニル）−２
−オキソ−１，３−ジオキサラン−４−へブタン酸炭酸
塩（化合物Ｂ）３００ｍｇを含有する１ｏｏｏ個の圧縮
錠剤を次の処方から実施例Ａで記載したのと同様の方法
で調製する。

−」Ｌ− ２５−アザコレステロール　　　　２００化合物Ｂ　　
　　　　　　３００ デンプン　　　　　　　　　　　　７５〇二塩基性リン
酸カルシウム含水５０００ステアリン酸カルシウム　　
　　　　　２．５ス」１江−！− 各々に２５−アザコレステロール２１０ｍｇ及び１１−
　（３−（ヒドロキシメチル）−４−オキソ−２−オキ
セタニル）−７−メチル−２，４−ウンデカジエン酸（
化合物Ａ）　２９　Ｑ　ｍ　ｇを含有する１０００個の
硬ゼラチンカプセルを以下の処方から実施例Ｂで記載し
たのと同様の方法で調製する。

２５−アザコレステロール 化合物Ａ デンプン ラクトース タルク ステアリン酸カルシウム −」Ｌ−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒは水素又は低級アシルであり、ＸはＣＨ、ＣＨ
   ＿２又はＯであり、側鎖の■は 単結合又は二重結合を示す。但しＸがＯ又はＣＨ＿２で
   ある時は単結合である。） で表わされる２５−アザステロール化合物をラノステロ
   ール合成阻害剤である非ステロイド系抗真菌剤と併用投
   与することを特徴とする抗真菌剤の抗真菌特性を増強す
   る方法。 ２、２５−アザステロール化合物が１７β−［［３−（
   ジメチルアミノ）−プロピル］メチルアミノ］アンドロ
   スト−エン−３β−オール（２５−アザコレステロール
   ）である請求項１記載の方法。 ３、非ステロイド系抗真菌剤が準静真菌量で使用され２
   ５−アザステロール化合物が真菌の生育を抑制しない量
   で使用される請求項１記載の方法。 ４、抗真菌ラノステロール合成阻害剤がメバロン酸合成
   阻害剤である請求項５記載の方法。 ５、メバロン酸合成阻害剤がＨＭＧ−ＣｏＡシンターゼ
   阻害剤である請求項４記載の方法。 ６、ＨＭＧ−ＣｏＡシンターゼ阻害剤が１１−（３−（
   ヒドロキシメチル）−４−オキソ−２−オキセタニル）
   −７−メチル−１，４−ウンデカジエン酸である請求項
   ５記載の方法。 ７、メバロン酸合成阻害剤がβ−ケトチオラーゼ阻害剤
   である請求項４記載の方法。 ８、β−ケトチオラーゼ阻害剤が５−（１−ヒドロキシ
   −２，４，６−ヘプタトリイニル）−２−オキソ−１，
   ３−ジオキソラン−４−ヘプタン酸である請求項７記載
   の方法。 ９、メバロン酸合成阻害剤がＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻
   害剤である請求項４記載の方法。１０、ＨＭＧ−ＣｏＡ
   還元酵素阻害剤が１，２，３，７，８，８ａ−ヘキサヒ
   ドロ−３，７−ジメチル−８−［２−（テトラヒドロ−
   ４−ヒドロキシ−６−オキソ−２Ｈ−ピラン−２−イル
   ）エチル］−１−ナフタレニル−２−メチル−ブタノエ
   ート（ロバスタチン）である請求項９記載の方法。 １１、準静真菌量のラノステロール合成阻害剤である非
   ステロイド系抗真菌化合物及び体重１ｋｇ当たり約１．
   ５〜５．０ｍｇ／ｋｇの２５−アザステロール化合物を
   包含している組成物の抗真菌的に有効な量を患者に投与
   し、２５−アザステロール化合物が体重１ｋｇ当たり約
   １．５〜５．０ｍｇの量で使用されることを特徴とする
   真菌感染症の治療方法。 １２、（１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒは水素又は低級アシルであり、ＸはＣＨ、ＣＨ
   ＿２又はＯであり、側鎖の■は 単結合又は二重結合を示す。但しＸがＯ又はＣＨ＿２で
   ある時は単結合である。） で表わされるアザステロール化合物約５０〜２００ｍｇ
   、 （２）非ステロイド系抗真菌化合物約１００〜４００ｍ
   ｇを医薬的に使用し得る担体と混和して包含している改
   良された抗真菌組成物。 １３、２５−アザステロール化合物が２５−アザコレス
   テロール、（３β，２２Ｚ）−２４（ジメチルアミノ）
   コラ−５，２２−ジエン−３−オール又は２５−アザ−
   ２２−オキサコレステロールである請求項１７記載の組
   成物。