JPH02290822A - 医薬製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、免疫グロブリン・コンジュゲート体に関する
ものであり、さらに詳細には、該コンジュゲート体を含
有する医薬製剤に関するものである。

（従来の技術および発明が解決しようとする課題）ツル
ニチニチソウ（Ｖ　ｉｎｃａ　ｒｏｓｅａ）から得られ
るアルカロイドは、抗腫瘍薬に関する化学において最も
豊富な領域の１つである。最初は、抽出によって植物の
葉から得られたいくつかのアルカロイドが活性であるこ
とが見いだされたにすぎなかった。

ピン力（ｖｉｎｃａ）植物の葉から直接得られたこれら
の活性の抗腫瘍性アルカロイドとしては、ビンブラスチ
ン（ビンカロイコブラスチンまたはＶＬＢ）、ピンクリ
スチン（ロイロクリスチン）、ロイロシン（ピン口イロ
シン）、ロイロシジン（ビンロシジン）、ロイロホルミ
ン（ホルミルロイ口シン）ならびにデオキシーＶＬＢ″
Ａ”および“Ｂ”（４゜−デオキシ−■ＬＢおよび４′
−デオキシ口イロシジン）が挙げられる。他のあまり豊
富ではない抗腫瘍性アルカロイドも見いだされた。天然
のアルカロイドに加えて、ツルニチニチソウ（Ｖ　ｉｎ
ｃａ　ｒｏｓｅａ）から得られたインドールージヒドロ
インドール・アルカロイドの化学的修飾によって、特に
、該分子のＣ−３、Ｃ−４゜およびＣ−４位での化学的
修飾に関して広範な種々の誘導体が生じた。

また、腫瘍関連抗原を規定するモノクローナル抗体が、
これらの免疫グロブリンと種々の腫瘍崩壊剤との共役コ
ンジ二ゲーションを用いる部位指向型療法に関して有効
なビヒクル剤であることがわかった。部位指向型化学療
法に関する、ビンカ・アルカロイドおよびその化学的誘
導体の重要性ならびにそれへの抗体のフンジュゲーショ
ン能力ニよって、ＶＬＢ，ピンクリスチンおよび他の抗
腫瘍剤は免疫グロブリンまたは他のたんぽ《と結合され
た。例えば、英国特許出願第２，　０　９　０，　８　
３７Ａ号には、アミド形成によってビン力部分に共役結
合した免疫グロブリン・フンジュゲート体が開示されて
いる。米国特許第３，３９２，１７３号オヨヒ第３，３
８７，００１号ニハ、ＶＬＢ，ｌ：’７クリスチン、ロ
イロシジンなどのＣ−４エステル類が開示されている。

クロロアセチルエステルは、これらに含まれており、こ
の誘導体はたんぽ《とのフンジュゲートに使用された（
欧州特許出願第１２４．５０２号参照）。ティール等（
Ｔｅａｌｅ　ｅｔには、たんぽ（　（Ｂ　Ｓ　Ａ）のア
ミン基、ホルムアルデヒドおよびビンブラスチンを用い
るマンニッヒ（Ｍａｎｎｉｃｈ）反応によるアルブミン
とビン力・アルカロイドとのコンジュゲーションが開示
されている。ジョンソン等（Ｊｏｈｎｓｏｎ　ｅｔ　ａ
ｔ．，　Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎ．，４４，　３７２　（
１９８１））には、アジドを介して抗−ＣＥＡ免疫グロ
ブリンと結合しているビンデシンの製造が開示されてい
る。他のこのようなビン力・アルカロイドまたはその化
学的誘導体と免疫グロブリンとのコンジュゲーションが
、米国特許第４．８０１，６８８号に詳細に開示されて
いる。

該特許には、Ｃ−３またはＣ−４位に結合したヒドラジ
ド基を含有する抗腫瘍性インドールージヒドロインドー
ル●ビンカ赤アルカロイドと、アルデヒド基を含有する
酸化された糖たんぱくとの反応によって形成された一連
の免疫グロブリン・フンジュゲート体が開示されている
。該特許に記載されているように、これらのコンジニゲ
ート体は非経口的に投与するのが好ましい。しかし、凍
結乾燥した免疫グロブリン・コンジュゲート生成物が製
造工程の間および貯蔵中に凝集する傾向にあるという点
で、非経口用医薬製剤の製造は困難であった。本発明は
、免疫グロブリン・コンジュゲート生成物の凝集に対し
て安定化された非経口用製剤を提供することによって、
この問題点に対処する。

（課題を解決するための手段） 本発明は、酸化された糖たんぱくと、式［１］：Ｉ？３ ［式中、Ｒ１はＨ，ＣＨ．またはＣＨＯである。

Ｒ４とＲ５が単独である場合、Ｒ５はＨであり、Ｒ″と
Ｒ４のうち一方はエチルであり、他方はＨまたはＯＨで
あり； Ｒ４およびＲ５が、それらが結合している炭素原子と一
緒になっている場合、それらはオキシラン環を形成して
おり、この場合、Ｒ３はエチルである。

−Ｏ（Ｃ，−＝７ル＋ル）、ＮＨ，、−　Ｎ　Ｈ　（Ｃ
　，−，７　ルキル）、−ＮＨ−ＣＨ，ＣＨ，一Ｍ，１
−ビロリジニルまたは１−ピベリジニルである（ここで
、ｎは２〜４であり、ＹはＣＱ、−０ＣＨ３またハ−Ｓ
ＣＨ，である）。

Ｒｌは｝−｛、（Ｃ＋−３アルキル）−ＣＯ，クロロ置
換（Ｃ．，アルキル）一Ｃ○またはＲ６であるにこて、
Ｒ６は一Ｃ　Ｏ　Ｘ　Ｃ　Ｏ　Ｎ　Ｈ　Ｎ　Ｈ　＝であ
り、ＸはＣ，、４の直鎖状アルキレン、Ｃｔ−４の分技
鎖状アルキレン、Ｃ２−４アルケニレン、Ｃ．−．アル
キニレン、Ｃ，〜。シクロアルキレン、フェニレン、ヒ
ドロキシ置換Ｃ，−４７ルキレンまたは結合手である）
。

但し、ＲｌがＲ８である場合、Ｒは一ＮＨＮＨｔではあ
り得ず、ＲかーＮＨＮＨ，である場合、Ｒ’はＲ８であ
り得ない。］ で示されるビン力・ヒドラジドとの免疫グロブリン・フ
ンジュゲート体、ならびに凝集安定化量のグリシンおよ
びマンニトールを混合してなる、凝集に対して安定化さ
れた非経口用医薬製剤を提供するものである。また、本
発明は、酸化された糖たんぱくと式［１］で示されるビ
ン力・ヒドラジドとの免疫グロブリン・フンジニゲート
体と、凝集安定化量のグリシンおよびマンニトールとを
１することによって、非経口用製剤における該免疫グロ
プリン・コンジュゲート体の凝集を減じる方法を提供す
るものである。

前述のとおり、本発明の製剤および方法において有用な
免疫グロブリン・コンジュゲート体は、米国特許第４，
８０１，６８８号（発行日二１９８９年１月３１日）に
開示およびクレームされており、本明細書において、こ
れを引用する。コンジュゲート体は、ｌまたはそれ以上
のアルデヒド基を含有する酸化された糖たんぽ《と、ビ
ンカ・ヒドラジドとの反応によって形成される。ヒドラ
ジド基は、Ｃ−３カルボキシヒドラジドまたは炭化水素
鎖を介して結合されたＣ−４ヒドラジド含有エステルの
いずれかであってよい。本発明で使用されるコンジュゲ
ート体の形成において用いられるヒドラジドは、該ヒド
ラジドがＣ−３またはＣ一４のいずれに結合しているか
によって製造方法が異なる。Ｃ−３ヒドラジドは、米国
特許第４，２０３，８９８号の方法によって製造され、
本明細書において、これを引用する。ヒドラジド基がＣ
一４鎖の部分である場合、４−デスアセチル出発物質は
、米国特許第３，３９２，１７３号、Ｊ．　Ｍｅｄ．Ｃ
ｈｅｍ．，　２２，　３９１　（１９７９）、米国特許
ＲＥ　　３０，　　５６０号、米国特許第４，３５７，
３３４号、米国特許第４，２０３，８９８号および米国
特許第４．６６７，０３０号の方法によって製造され、
本明細書において、これら各文献を引用する。

コンジュゲート体は、酸化された糖たんぽ《、好ましく
は免疫グロブリン、さらに好ましくは該クラスの内、［
ｇＧまたは［ｇＭのようなγ−グロプリンであるモノク
ローナル抗体を利用する。炭水化物を含有する免疫グロ
ブリン・フラグメントは、これらのフラグメントが誘導
される親の免疫グロブリンと同様に、これらのコンジュ
ゲート体を形成するために使用することができる。好ま
しい糖たんぱく、免疫グロブリン類は、目的の標的細胞
の抗原と反応するかまたは少なくとも該抗原を認識する
。目的の標的細胞の表面抗原を認識する糖たんぱくが特
に好ましい。例えば、たんぱく分解酵素消化または還元
的アルキル化によって抗体から誘導されたＦ　ａｂ，　
Ｆ　ａｂ’、Ｆ　（ａｂ’　）ｔおよびＩｇＭモノマー
として表される免疫グロブリン・フラグメントを使用す
ることもできる。コンジュゲート体において有用な好ま
しい免疫グロプＩ／ンは、モノクローナル抗体ＫＳＩ／
４である。

酸化された糖たんぱくとビン力・ヒドラジドとのコンジ
ュゲーションは、当技術分野において知られている標準
的な方法によって行われる。一般に、ジメチルホルムア
ミドのような水一混和性溶媒にビン力を溶解した溶液を
、酸化された糖たんぱくの冷却緩衝化水溶液に添加する
。約０〜８℃の温度が好ましく、通常、０．ＩＮ酢酸ナ
トリウム緩衝液を用いる。この反応は、不活性雰囲気下
、暗所で行うのが最良である。この反応は、通常、約１
０〜２４時間で完了し、得られたコンジュゲート体を、
セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）によるクロマトグ
ラフィーのような標準的な方法によって精製することが
できる。特に好ましいコンジュゲート体は、４−デスア
セチル−３−カルボキシヒドラジドーモノクローナル抗
体ＫＳ　１／４である。

このような全てのコンジュゲート体の製造方法は、米国
特許第４，８０１，６８８号（前記）に詳述されている
。

本発明の非経口用製剤は、免疫グロブリン・コンジニゲ
ート体、ならびに凝集安定化量のグリシンおよびマンニ
トールを含有する。“凝集安定化量”とは、凝集に対し
て安定化された製剤を製造するグリシンおよびマンニト
ールの量を意味する。

“凝集に対して安定化された”とは、免疫グロブリン・
フンジュゲート体がグリシンおよびマンニトールの両者
の非存在下で製剤化される場合よりも、該コンジニゲー
ト体が凝集安定化量のグリシンおよびマンニトールを用
いて製剤化される場合のほうが、該フンジュゲート体の
凝集が少ないことを意味する。凝集に対して安定化され
た免疫グロブリン・コンジュゲート体の非経口用製剤は
、好ましくは、該コンジュゲート体、グリシンおよびマ
ンニトールを、各々、重量比１：１：ｌで含有するもの
である。これは好ましい製剤であるが、当業者には、３
つの成分のうちいずれか１つの量が凝集安定化量のグリ
シンおよびマンニトールを含有するこの好ましい重量比
以外である凝集に対して安定化された別の好ましい非経
口用製剤を製造できることは容易に理解されるであろう
。有効量の免疫グロブリン・コンジュゲート体を含有す
る、本明細書に記載の製剤は、例えば、ビンカ薬物部分
に換算して活性成分約０．０１〜１０ｊＩ９を含有する
ものである。

本製剤において使用されるコンジュゲート体は、アルデ
ヒド含有糖たんぱくとビン力・ヒドラジドとを反応させ
て細胞毒性ヒドラゾン・コンジュゲート体を形成するこ
とによって製造される。しかし、当業者には、糖たんぱ
くとインドールージヒドロインドール・アルカロイド（
米国特ａ’＋第４　，　ａ０１，６８８号において式［
■］で示されている）との結合に特定のタイプの化学的
結合を用いることが、本発明の非経口用医薬製剤に無関
係であることは理解されるであろう。すなわち、本発明
によれば、２つの部分の間に用いられる化学的結合とは
無関係に、インドールージヒドロインドール・アルカロ
イドと糖たんぱくとの免疫グロプリン・コンジュゲート
体を含有する製剤を凝集に対して安定化することができ
る。

商業上利用できる好ましい製剤は、再調製用の凍結乾燥
（例えば、冷凍乾燥）した粉末の形態である。該製剤の
再調製は、医薬的に許容されるビヒクル剤の添加によっ
て行われる。このビヒクル剤としては、注射用蒸留水、
注射用静菌性水、注射用無菌水などが挙げられる。実際
の生成物の製造は、例えば、容器選択、滅菌法、充填お
よび密封、ならびに抗微生物剤、緩衝剤、抗酸化剤のよ
うな他の添加剤の混合を含めて、当該技術分野において
慣用的である。また、非経口用生成物製造に関する情報
は、レミントンズ・ファーマシューティカノいサイエン
シズ（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ
ｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，　１７ｔｈ　Ｅｄｉｔｉｏ
ｎ　（１９８５））のような標準的な学術論文から得る
ことができる。本明細書において、該文献を引用する。

以下に実施例を挙げて、本発明を説明するが、該実施例
は本発明を限定するものではない。

実施例１：４−デスアセチルＶＬＢ　　３−カルボキシ
ヒドラジドーモノクローナル抗体ＫＳＩ／４コンジュゲ
ート体の製造 米国特許第４，８０１，６８８号に記載されている方法
を用いて、０．１Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ　５．
　６）（酢酸ナトリウム２９．３９および酢酸２．４４
ｉｅに、充分に滅菌された水を添加して４ｇの緩衝液を
調製した）２０ｘＣに、ヒト腺癌細胞の表面抗原を認識
することができるモノクローナル抗体（ＭｏＡｂ）Ｋ　
Ｓ　１／　４　　２　０　０ｍ９を溶解することによっ
て、溶液を調製した。この溶液を約Ｏ′Ｃで一晩貯蔵し
た（たんぱくの約１０％か溶解しなかった）。単一のバ
ッチ中、迅速に撹拌しながら、メター過ヨウ素酸ナトリ
ウム６８５ＪＩｇを添加した。

混合液を、暗所で、約Ｏ′Ｃで２１分間撹拌し、次いで
、滅菌水中のエチレングリコールの１２５Ｍ溶液１．２
Ｂｙ（ｌを５倍の過剰量（過ヨウ素酸の全量に対して）
添加することによって冷却した。

新しい混合液を、暗所で、Ｏ′Ｃで５分間撹拌し、次い
で、遠心分離して、透明の上清および白色のベレノトを
得た。上清をセファデックスＧ２５（中庸のメッシュ）
ゲルカラムにかけ、生成物を同じ酢酸ナトリウム緩衝液
で溶離した。溶出液を２８０ｎｍのＵＶ光線で観察した
。過ヨウ素酸塩をカラムから洗浄し、廃棄した。各溶出
画分において、酸化された生成物の濃度を２７９ｒ＋Ｉ
＋＋で評価した。

収量は、緩衝ｉ＆３９．９ａ＋Ｉ；ｊにおいて酸化され
たＭｏＡｂｌ７６ｍｇ（収率８８％）であった。

米国特許第４，８０１，６８８号に記載の方法に？って
、ＤＭＦ（５３．７ｍｇ／ＲＱの溶液５．６ＮＩ２）に
４−テスアセチルＶＬＢ　　３−カルポキシヒドラシド
２７４ｘ９を溶解した溶液を調製し、冷却緩衝化ＭｏΔ
ｂ溶液に滴下した。反応容器を窒素ガスでフラッシュし
、次いで密封した。反応混合液を、冷たくかつ暗い所で
、磁気撹拌によって２４時間撹拌した。次いで、反応容
器を開封し、透明な薄黄色の反応混合液を遠心分離した
。上清を、溶離液としても用いるｐＨ７．４リン酸塩緩
衝化食塩水（０．０　１Ｍ　Ｈ３ＰＯ，、０．１　５Ｍ
　ＮａＣ■で予め平衡化したセファデックスＧ２５ゲル
によるクロマ１・グラフィーにかけた。コンジュゲート
体（ＭｏＡｂ上の炭水化物における３−カルポキシヒド
ラジド基とアルデヒド基との間でのヒドラゾン形成によ
って形成された）が最初に溶離され、次いて、未反応の
４−デスアセチルＶＬＢ　　３−カルポキンヒドラジド
が溶離された。得られたコンジュゲート体の収量は１４
６ｘ９（収率８３％）であった。

該コンジュゲート体は、Ｋ　Ｓ　ｌ　／　４　ＭｏＡｂ
　１モル当たり４−デスアセチルーＶＬＢ−３一カルボ
キシヒドラゾンを約７，５モル含有していた。

免疫グロブリン・コンジュゲート体の非経口用製剤にお
ける本発明の凝集安定化効果を説明するため、以下の評
価を行った。

実施例２ 実施例ｌのコンジュゲート体、グリシンおよびマンニト
ールを下記第１表に示す重量比で含有する製剤を調製し
、これを非経口用バイアルに入れ、凍結乾燥した。製剤
を、２５゜Ｃで２カ月間、貯蔵庫中に維持し、サイズ排
除クａマトグラフィーによってコンジュゲート体の可溶
性凝集形成について３０日目および６０日目に検査した
。最初の検定は、凍結乾燥後に行った（第１表において
０日目として記す）。これらの評価の結果を第１表に示
す。

１：Ｏ：１　　　　１４．４　　　１５．６　　　　１
６．２１実施例ｌのコンジュゲート体．グリシン゛マン
ニトールの各重量比。

５金製剤が１０ｚＭ’Ｊン酸塩緩衝液を含有している。

０サイズ排除クロマトグラフィーによって決定された可
溶性凝集形成の割合。

１試験しなかった。

第１表に示されたデータから明らかなように、実施例ｌ
のコンジュゲート体、グリシンおよびマンニトールを重
量比１：ｌ：１で含有する製剤は、グリシンを含まない
製剤よりも３０および６０日目の凝集が少なく、グリシ
ンおよびマンニトールの両者を含まない製剤よりも３０
日目の凝集が少なかった。

製造の間に遭遇する条件の模擬条件下で維持した製剤に
ついて、本発明の凝集安定化効果を示すために、以下の
評価を行った。

実施例３ 実施例１のフンジュゲート体、グリシンおよびマンニト
ールを下記第２表に示す重量比で含有する製剤（表示し
た量のリン酸緩衝液およびＮａＣｉ２も含有する）を調
製し、５゜Ｃで２４時間維持し、次いで凍結乾燥した。

再調製の後、製剤を肉眼で観察し、サイズ排除クロマト
グラフィーによってコンジュゲート体の可溶性凝集形成
について検定した。得られた結果を下記第２表に示す。

：Ｏ：０　　　１０　　　０　　　沈＃　　　１２．９
：Ｏ：０　　　５０　　　０　　　沈Ｒ　　１１．８：
Ｏ：Ｏ　　　ｔｏ　　　３　　　沈ｉｌｌ　　　１０．
９：１：１　　　ｔｏ　　Ｏ　　　透明　　７．８：１
：１　　　５０　　　０　　　透明　　９．２実施例ｌ
のコンジュゲート体：グリシン：マンニトールの重量比
。

製剤中に存在するリン酸緩衝液の濃度（ＩＭ）。

濃度（Ｏ／Ｘの。

サイズ排除クロマトグラフィーによって測定した可溶性
凝集形成の割合（％）。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、酸化された糖たんぱくと、式［ I ］： ▲数式、化学式、表等があります▼［ I ］ ［式中、Ｒ＾２はＨ、ＣＨ＿３またはＣＨＯである。 Ｒ＾４とＲ＾５が単独である場合、Ｒ＾５はＨであり、
   Ｒ＾３とＲ＾４のうち一方はエチルであり、他方はＨま
   たはＯＨであり； Ｒ＾４およびＲ＾５が、それらが結合している炭素原子
   と一緒になっている場合、それらはオキシラン環を形成
   しており、この場合、Ｒ＾３はエチルである。 Ｒは、−ＮＨＮＨ＿２、▲数式、化学式、表等がありま
   す▼、 −Ｏ（Ｃ＿１＿〜＿３アルキル）、ＮＨ＿２、−ＮＨ（
   Ｃ＿１＿〜＿３アルキル）、−ＮＨ−ＣＨ＿２ＣＨ＿２
   −Ｙ、１−ピロリジニルまたは１−ピペリジニルである
   （ここで、ｎは２〜４であり、ＹはＣｌ、−ＯＣＨ＿３
   または−ＳＣＨ＿３である）。 Ｒ＾１はＨ、（Ｃ＿１＿〜＿３アルキル）−ＣＯ、クロ
   ロ置換（Ｃ＿１＿〜＿３アルキル）−ＣＯまたはＲ＾６
   である（ここで、Ｒ＾６は−ＣＯＸＣＯＮＨＮＨ＿２で
   あり、ＸはＣ＿１＿〜＿４の直鎖状アルキレン、Ｃ＿２
   ＿〜＿８の分枝鎖状アルキレン、Ｃ＿２＿〜＿４アルケ
   ニレン、Ｃ＿３＿〜＿４アルキニレン、Ｃ＿３＿〜＿８
   シクロアルキレン、フェニレン、ヒドロキシ置換Ｃ＿１
   ＿〜＿４アルキレンまたは結合手である）。 但し、Ｒ＾１がＲ＾６である場合、Ｒは−ＮＨＮＨ＿２
   ではあり得ず、Ｒが−ＮＨＮＨ＿２である場合、Ｒ＾１
   はＲ＾６であり得ない。］ で示されるビンカ・ヒドラジドとの免疫グロブリン・コ
   ンジュゲート体、ならびに凝集安定化量のグリシンおよ
   びマンニトールを混合してなる、凝集に対して安定化さ
   れた非経口用医薬製剤。 ２、コンジュゲート体が４−デスアセチルＶＬＢ３−カ
   ルボキシヒドラジド−モノクローナル抗体ＫＳ１／４で
   ある請求項１に記載の医薬製剤。 ３、コンジュゲート体、グリシンおよびマンニトールが
   重量比１：１：１で存在する請求項２に記載の医薬製剤
   。 ４、凍結乾燥粉末の形態である請求項１、２または３の
   いずれかに記載の医薬製剤。 ５、さらに医薬的に許容されるビヒクル剤を含有してい
   る請求項１、２、３または４のいずれかに記載の医薬製
   剤。 ６、酸化された糖たんぱくと、式［ I ］： ▲数式、化学式、表等があります▼［ I ］ ［式中、Ｒ＾２はＨ、ＣＨ＿３またはＣＨＯである。 Ｒ＾４とＲ＾５が単独である場合、Ｒ＾５はＨであり、
   Ｒ＾３とＲ＾４のうち一方はエチルであり、他方はＨま
   たはＯＨであり； Ｒ＾４およびＲ＾５が、それらが結合している炭素原子
   と一緒になっている場合、それらはオキシラン環を形成
   しており、この場合、Ｒ＾３はエチルである。 Ｒは、−ＮＨＮＨ＿２、▲数式、化学式、表等がありま
   す▼、 −Ｏ（Ｃ＿１＿〜＿３アルキル）、ＮＨ＿２、−ＮＨ（
   Ｃ＿１＿〜＿３アルキル）、−ＮＨ−ＣＨ＿２ＣＨ＿２
   −Ｙ、１−ピロリジニルまたは１−ピペリジニルである
   （ここで、ｎは２〜４であり、ＹはＣｌ、−ＯＣＨ＿３
   または−ＳＣＨ＿３である）。 Ｒ＾１はＨ、（Ｃ＿１＿〜＿３アルキル）−ＣＯ、クロ
   ロ置換（Ｃ＿１＿〜＿３アルキル）−ＣＯまたはＲ＾６
   である（ここで、Ｒ＾６は−ＣＯＸＣＯＮＨＮＨ＿２で
   あり、ＸはＣ＿１＿〜＿４の直鎖状アルキレン、Ｃ＿２
   ＿〜＿８の分枝鎖状アルキレン、Ｃ＿２＿〜＿４アルケ
   ニレン、Ｃ＿３＿〜＿４アルキニレン、Ｃ＿３＿〜＿６
   シクロアルキレン、フェニレン、ヒドロキシ置換Ｃ＿１
   ＿〜＿４アルキレンまたは結合手である）。 但し、Ｒ＾１がＲ＾６である場合、Ｒは−ＮＨＮＨ＿２
   ではあり得ず、Ｒが−ＮＨＮＨ＿２である場合、Ｒ＾１
   はＲ＾６であり得ない。］ で示されるビンカ・ヒドラジドとの免疫グロブリン・コ
   ンジュゲート体を含有する非経口用医薬製剤の凝集を減
   じる方法であって、該コンジュゲート体と、凝集安定化
   量のグリシンおよびマンニトールとを混合することから
   なる方法。 ７、コンジュゲート体が４−デスアセチルＶＬＢ３−カ
   ルボキシヒドラジド−モノクローナル抗体ＫＳ１／４で
   ある請求項６に記載の方法。 ８、コンジュゲート体、グリシンおよびマンニトールが
   重量比１：１：１で存在する請求項７に記載の方法。 ９、製剤が凍結乾燥粉末の形態である請求項６、７また
   は８のいずれかに記載の方法。 １０、医薬製剤がさらに医薬的に許容されるビヒクル剤
   を含有している請求項６、７、８または９のいずれかに
   記載の方法。 １１、請求項１に記載の免疫コンジュゲート体と、グリ
   シンおよびマンニトールとを混合することからなる非経
   口用医薬製剤の製造方法。