JPH0225423A - ミスマッチｄｓＲＮＡ含有医薬 - Google Patents
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Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、ヒトを含む動物体における腫瘍細胞の増殖を
阻害するため、ヒトを含む動物体中の腫瘍性又は癌性細
胞に存在する欠陥を正すため、及び腫瘍性又は癌性状態
に感受性のある種の個体の素質（この素質が遺伝的（先
天的）原因から生ずるにしろ環境的原因から生ずるにし
ろ）から生ずる免疫系の不全を治療するために、二本鎖
リボース核酸（以後、ｃｌｓＲＮＡと称する）単独での
、又はリンホカインと組合わせての使用に関する。この
発明はさらに、腫瘍性又は癌性状態を治療するための化
学的又は生物学的薬物との組み合わせ使用に関する。
阻害するため、ヒトを含む動物体中の腫瘍性又は癌性細
胞に存在する欠陥を正すため、及び腫瘍性又は癌性状態
に感受性のある種の個体の素質（この素質が遺伝的（先
天的）原因から生ずるにしろ環境的原因から生ずるにし
ろ）から生ずる免疫系の不全を治療するために、二本鎖
リボース核酸（以後、ｃｌｓＲＮＡと称する）単独での
、又はリンホカインと組合わせての使用に関する。この
発明はさらに、腫瘍性又は癌性状態を治療するための化
学的又は生物学的薬物との組み合わせ使用に関する。
１、ＩＦＨの機能及びＩＦＮ誘導剤としての５ＲＮＡ
インターフェロン（以後ＩＦＮと称する）は動物細胞中
でのウィルスの増殖を阻害することができる蛋白質の類
を構成する。これらは細胞に由来し、インビトロ又はイ
ンビボで生産され、そして非常に広範囲の物質により刺
激される（ＲｏｇｅｒＷｉｌｌｉａｍｓ及びεｄｗｉｎ
Ｌａｎ５ｆｏｒｄ編集、Ｔｈｅεｎｃｙｃｌ。
でのウィルスの増殖を阻害することができる蛋白質の類
を構成する。これらは細胞に由来し、インビトロ又はイ
ンビボで生産され、そして非常に広範囲の物質により刺
激される（ＲｏｇｅｒＷｉｌｌｉａｍｓ及びεｄｗｉｎ
Ｌａｎ５ｆｏｒｄ編集、Ｔｈｅεｎｃｙｃｌ。
ｐｅｄｉａ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、 Ｒｅ
１ｎｈｏｌｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ社、１９６７）。
１ｎｈｏｌｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ社、１９６７）。
ＩＦＮは抗増殖効果及び抗ウイルス効果を発揮しくＮａ
ｔｕｒｅ ２６２．３００．１９７８）、接触阻害を回
復しくＪ、Ｃｅ１ｌ Ｂｉｏｌ、 ５６８４６．１９７
３） 、そして半固形寒天中での腫瘍細胞の増殖を阻害
する（Ｎａｔｕｒｅ２３＋、、 ２０．１．９７１）
ことが知られている。
ｔｕｒｅ ２６２．３００．１９７８）、接触阻害を回
復しくＪ、Ｃｅ１ｌ Ｂｉｏｌ、 ５６８４６．１９７
３） 、そして半固形寒天中での腫瘍細胞の増殖を阻害
する（Ｎａｔｕｒｅ２３＋、、 ２０．１．９７１）
ことが知られている。
ｄｓＲＮＡは、α（白血球）型、β（繊維芽細胞）型及
びＴ（免疫）型を含む異る分子形のヒ）ＩＦＮの誘導剤
であることが知られており（Ｊ、 Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅ
ｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ５ｏｃｉｅｔｙ、 ２３．
２９９． １９７８）、ＩＦＮの生産は天然ｄｓＲＮＡ
及び合成ｄｓＲＮＡのいずれによっても刺激され得る。
びＴ（免疫）型を含む異る分子形のヒ）ＩＦＮの誘導剤
であることが知られており（Ｊ、 Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅ
ｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ５ｏｃｉｅｔｙ、 ２３．
２９９． １９７８）、ＩＦＮの生産は天然ｄｓＲＮＡ
及び合成ｄｓＲＮＡのいずれによっても刺激され得る。
厳密にインターフェロン誘導剤としてのポリリボイノシ
ン酸及びポリビボシチジル酸の複合体の形（以後、ｒＩ
ｎ・Ｉ’Ｃｈｚ又はポＩＪＩｃと称する）合成ｄｓＲＮ
Ａの使用が、例えばＬａｍｐｓｏｎ等の米国特許Ｎｏ、
３．６６６、６４６から知られている。ＩＦＮ誘導にお
けるその役割に加えて、ｄｓＲＮＡはまた、ＩＦＮによ
り誘導される２種類の酵素、すなわちプロティンキナー
ゼ及び２’ −５’オリゴアデニレート・シンセターゼ
の活性化物質である（Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、
Ｓｃｉ、、 ７５．５８９３．１９７８）。
ン酸及びポリビボシチジル酸の複合体の形（以後、ｒＩ
ｎ・Ｉ’Ｃｈｚ又はポＩＪＩｃと称する）合成ｄｓＲＮ
Ａの使用が、例えばＬａｍｐｓｏｎ等の米国特許Ｎｏ、
３．６６６、６４６から知られている。ＩＦＮ誘導にお
けるその役割に加えて、ｄｓＲＮＡはまた、ＩＦＮによ
り誘導される２種類の酵素、すなわちプロティンキナー
ゼ及び２’ −５’オリゴアデニレート・シンセターゼ
の活性化物質である（Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、
Ｓｃｉ、、 ７５．５８９３．１９７８）。
しかしながら、インターフェロンの抗増殖効果及び抗腫
瘍効果についての分子的基礎並びにこれらとｄＳＲＮＡ
との関係は知られておらず、そして本発明の前に、イン
ターフェロン誘導物質におけるようなその役割以外にｄ
ＳＲＮＡの抗増殖効果は知られていなかった。
瘍効果についての分子的基礎並びにこれらとｄＳＲＮＡ
との関係は知られておらず、そして本発明の前に、イン
ターフェロン誘導物質におけるようなその役割以外にｄ
ＳＲＮＡの抗増殖効果は知られていなかった。
■、 ｄｓＲＮＡの合成ミスマツチ類似体−層最近に
、ＴＳ’ ｏ及びＣａｒｔｅｒの米国特許Ｎ。
、ＴＳ’ ｏ及びＣａｒｔｅｒの米国特許Ｎ。
４、１３０．６４１及びＮｏ、４．０２４．２２２に開
示されているよう１．：ｒＩｎ−ｒＣｎのミスマツチ類
似体によりＩＦＮが誘導され得ることが発見された。こ
れらの類似体は、ポリリボシチジレート （ｒＣ，）鎖
にそって不対合（ｕｎｐａｉｒｅｄ）塩基（ウラシル又
はグアニン）を導入してｒＩｎ・ｒ Ｃｈを変形するこ
とにより、あるいはポリリボイノシン酸（、Ｉ、、）の
リボシル骨格を変形することにより形成される。ミスマ
ツチ（ｍｉｓｍａｔｃｈ）類似体、特にｒｃｈ鎮におい
て変形されたものは、幾つかの構造的要件が満たされる
限りインターフェロンを誘導する能力を維持する。
示されているよう１．：ｒＩｎ−ｒＣｎのミスマツチ類
似体によりＩＦＮが誘導され得ることが発見された。こ
れらの類似体は、ポリリボシチジレート （ｒＣ，）鎖
にそって不対合（ｕｎｐａｉｒｅｄ）塩基（ウラシル又
はグアニン）を導入してｒＩｎ・ｒ Ｃｈを変形するこ
とにより、あるいはポリリボイノシン酸（、Ｉ、、）の
リボシル骨格を変形することにより形成される。ミスマ
ツチ（ｍｉｓｍａｔｃｈ）類似体、特にｒｃｈ鎮におい
て変形されたものは、幾つかの構造的要件が満たされる
限りインターフェロンを誘導する能力を維持する。
図に示すように、インターフェロンの誘導のために完全
に塩基対合したｃｌｓＲＮＡの長い領域は必要でない。
に塩基対合したｃｌｓＲＮＡの長い領域は必要でない。
事実、インターフェロン合成の開始のための構造的要件
は、完全に塩基対合したｄｓＲＮＡの１／２〜１のへり
カルターン（ｈｅｌｉｃａｌ ｔｕｒｎ）保存である。
は、完全に塩基対合したｄｓＲＮＡの１／２〜１のへり
カルターン（ｈｅｌｉｃａｌ ｔｕｒｎ）保存である。
ミスマンチポリマーがヌクレアーゼに暴露された場合に
加水分解速度が上昇するこ七が知られている（Ｊ、Ｍｏ
１ｅｃ、Ｂｉｏｌ、、 ７０．５６７、 １９７２）が
、これらのｄｓＲＮＡはインターフェロンの誘導に関し
て変形されていないｒＩｎ’ｒｃ、、に近い活性を有す
る。
加水分解速度が上昇するこ七が知られている（Ｊ、Ｍｏ
１ｅｃ、Ｂｉｏｌ、、 ７０．５６７、 １９７２）が
、これらのｄｓＲＮＡはインターフェロンの誘導に関し
て変形されていないｒＩｎ’ｒｃ、、に近い活性を有す
る。
無傷の二重鎖らせん構造の延長された維持が、薬剤毒性
として一般に評価される多くの他の生物学的応答に寄与
するかもしれないことが提案されている。種々の動物系
におけるミスマツチ類似体ｒ Ｌ ・ｒ（Ｃｚ−１４）
ｎ （Ａｍｐｌｉｇｅｎ；米国、 １０８５２Ｍｄ、
。
として一般に評価される多くの他の生物学的応答に寄与
するかもしれないことが提案されている。種々の動物系
におけるミスマツチ類似体ｒ Ｌ ・ｒ（Ｃｚ−１４）
ｎ （Ａｍｐｌｉｇｅｎ；米国、 １０８５２Ｍｄ、
。
ロックビル、 ＩＢＭ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ社の米国登録
商標）の研究により、ｒＩ、 ’ ｒ（Ｃ＋２ ’ Ｕ
）わけｒＬ’ｒＣｈに比べて毒性が低いことが示されて
いる（Ｐｏｌｙ ＩＣｗｉｔｈ ｍｉｓ−ｍａｔｃｈｅ
ｄ ｂａｓｅｓ、 ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｃａ
ｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙ、Ａｕｇｍｅｎｔｉｎｇ Ａｇ
ｅｎｔｓ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ ＴｈｅｒａｐｙＢｏＭ
、 Ｈｅｒｓｈ編、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ、 ニュー
ヨー外１７７１９８１、を参照のこと）。特に、マウス
の、ｒＩｒｔ、（ＣＩ２． Ｕ）ｈの反復投与は、骨髄
素、肝細胞、胸腺細胞及び腎細胞を含む特に敏感な細胞
に対する毒性が極めて低く （Ｊ、 Ｍｏ１ｅｃ、Ｂｉ
ｏｌ、、 ７０．５６７゜１９７２）、他方種々の致死
的なウィルスチャレンジに対する保護において効果が維
持される（ｌｏｌｅｃ。
商標）の研究により、ｒＩ、 ’ ｒ（Ｃ＋２ ’ Ｕ
）わけｒＬ’ｒＣｈに比べて毒性が低いことが示されて
いる（Ｐｏｌｙ ＩＣｗｉｔｈ ｍｉｓ−ｍａｔｃｈｅ
ｄ ｂａｓｅｓ、 ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｃａ
ｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙ、Ａｕｇｍｅｎｔｉｎｇ Ａｇ
ｅｎｔｓ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ ＴｈｅｒａｐｙＢｏＭ
、 Ｈｅｒｓｈ編、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ、 ニュー
ヨー外１７７１９８１、を参照のこと）。特に、マウス
の、ｒＩｒｔ、（ＣＩ２． Ｕ）ｈの反復投与は、骨髄
素、肝細胞、胸腺細胞及び腎細胞を含む特に敏感な細胞
に対する毒性が極めて低く （Ｊ、 Ｍｏ１ｅｃ、Ｂｉ
ｏｌ、、 ７０．５６７゜１９７２）、他方種々の致死
的なウィルスチャレンジに対する保護において効果が維
持される（ｌｏｌｅｃ。
Ｐｈａｒｍ、、 １２．２９９．１９７６）。
さらに、ｒＩ・°・（ＣＩ−１４・Ｕ）・は・ラビット
において、■。・ｒＣｏに比べて低下した発熱性（１０
０分の１に低下）、インビトロでのマウス及びヒトの細
胞についての低い有糸***性（５〜１０分の１に低下）
、並びにラビット及びマウスにおける低下したｄｓＲＮ
Ａ抗体形成（５〜１０分の１に低下）を示す。この低下
した細胞毒性のパックグラウンドに対して、ｙｌｈ・、
（Ｃ，、−、、、Ｕ）ｈはインターフェロンを誘導する
その能力を保存しており、ナチュラルキラー（ＮＫ）細
胞機能を刺激しくＪ、Ｉｍｍｕｎｏ、、１２４．１８５
２．１９８０） 、そして前記の細胞内メデイエータ−
１すなわち２’−５’オリゴ−アデニレート・シンセタ
ーゼ及び特異的蛋白質キナーゼを活性化する。従って、
種々の毒性及び療法効果を測定するための種々の試薬系
（ラビット、マウス及びヒト）において、そして異る投
与量計画において、ミスマツチ類似体ｒＩｎ、（ＣＩ、
−，４，Ｕ）。 （アンプリゲン）は増殖された治療系
数を示す。このミスマツチ誘導物質／活性化物質の製造
及び製剤化はすでに記載されている（Ｊ、Ｍｏ１ｅｃ、
Ｂｉｏｌ、、 ７０．５６７、１９７２）。
において、■。・ｒＣｏに比べて低下した発熱性（１０
０分の１に低下）、インビトロでのマウス及びヒトの細
胞についての低い有糸***性（５〜１０分の１に低下）
、並びにラビット及びマウスにおける低下したｄｓＲＮ
Ａ抗体形成（５〜１０分の１に低下）を示す。この低下
した細胞毒性のパックグラウンドに対して、ｙｌｈ・、
（Ｃ，、−、、、Ｕ）ｈはインターフェロンを誘導する
その能力を保存しており、ナチュラルキラー（ＮＫ）細
胞機能を刺激しくＪ、Ｉｍｍｕｎｏ、、１２４．１８５
２．１９８０） 、そして前記の細胞内メデイエータ−
１すなわち２’−５’オリゴ−アデニレート・シンセタ
ーゼ及び特異的蛋白質キナーゼを活性化する。従って、
種々の毒性及び療法効果を測定するための種々の試薬系
（ラビット、マウス及びヒト）において、そして異る投
与量計画において、ミスマツチ類似体ｒＩｎ、（ＣＩ、
−，４，Ｕ）。 （アンプリゲン）は増殖された治療系
数を示す。このミスマツチ誘導物質／活性化物質の製造
及び製剤化はすでに記載されている（Ｊ、Ｍｏ１ｅｃ、
Ｂｉｏｌ、、 ７０．５６７、１９７２）。
ウィルスの攻撃に対抗するために動物細胞中でインター
フェロンの生産を誘導することのみを目的とする変形さ
れたｊＩＩ’ｌ’ｒｃ１１類似体の使用は、例えば米国
特許Ｎｏ、４．１３０．６４１及びＮｏ、４．０２４．
２２２から知られる。しかしながら、抗増殖剤としての
その使用に関して、ＩＦＮ （及び単独で投与される他
のリンホカイン）療法に対する障害が、これらのリンホ
カインは多くの個体において最低の効果のみを示すこと
に存在する。従って、比較的多量のリンホカインが投与
のために必要とされ、通常のウィルス感染、免疫細胞の
分化、又は抗癌、抗ウィルス及び宿主防御機構に関与す
る自然の免疫監視機構へのヒトの正常な応答の過程で生
じないような不自然に高い体内リンホカインレベルがも
たらされる。この様な高レベルにおいて、体はＩＦＨの
ごときリンホカインを外来物質として取り扱うことがで
き、そして治療された個体はＩＦＮのごとき種々のリン
ホカインに対する抗体を生じさせる能力を有する。これ
らの生じた抗体は一般的に残りの療法的利点を破壊する
。
フェロンの生産を誘導することのみを目的とする変形さ
れたｊＩＩ’ｌ’ｒｃ１１類似体の使用は、例えば米国
特許Ｎｏ、４．１３０．６４１及びＮｏ、４．０２４．
２２２から知られる。しかしながら、抗増殖剤としての
その使用に関して、ＩＦＮ （及び単独で投与される他
のリンホカイン）療法に対する障害が、これらのリンホ
カインは多くの個体において最低の効果のみを示すこと
に存在する。従って、比較的多量のリンホカインが投与
のために必要とされ、通常のウィルス感染、免疫細胞の
分化、又は抗癌、抗ウィルス及び宿主防御機構に関与す
る自然の免疫監視機構へのヒトの正常な応答の過程で生
じないような不自然に高い体内リンホカインレベルがも
たらされる。この様な高レベルにおいて、体はＩＦＨの
ごときリンホカインを外来物質として取り扱うことがで
き、そして治療された個体はＩＦＮのごとき種々のリン
ホカインに対する抗体を生じさせる能力を有する。これ
らの生じた抗体は一般的に残りの療法的利点を破壊する
。
さらに、腫瘍細胞は特に、種々のリンホカイン、例えば
ＩＦＮ、及びインターロイキン群の種々の構成員の療法
効果に対する抵抗性を獲得する。後記のごとく、ＩＦＮ
に対する抵抗性を出現する腫瘍細胞のこの能力は、非ラ
ンダム表現型として獲得され、そしてそれ故にリンホカ
インのみの使用に基き増殖を阻害するために計画された
すべての療法に深刻な欠点を提供する。この発明は、細
胞がリンホカイン耐性を出現しているか否かにかかわら
ず癌性細胞の増加を停止せしめ又は劇的に抑制する新規
な抗増殖物質及び組成物を開示することにより従来技術
の欠陥を救済するものである。
ＩＦＮ、及びインターロイキン群の種々の構成員の療法
効果に対する抵抗性を獲得する。後記のごとく、ＩＦＮ
に対する抵抗性を出現する腫瘍細胞のこの能力は、非ラ
ンダム表現型として獲得され、そしてそれ故にリンホカ
インのみの使用に基き増殖を阻害するために計画された
すべての療法に深刻な欠点を提供する。この発明は、細
胞がリンホカイン耐性を出現しているか否かにかかわら
ず癌性細胞の増加を停止せしめ又は劇的に抑制する新規
な抗増殖物質及び組成物を開示することにより従来技術
の欠陥を救済するものである。
さらに、この発明は、インターフェロンの体内レベルが
従来技術により達成されるレベルよりも２０〜５０の係
数をもって低いがそれにもかかわらず非常に高い療法効
果をもたらすような、インターフェロン含有組成物を提
供する。ｄｓＲＮＡを含有するこの発明の組成物は相剰
的に作用するため、ｄｓＲＮＡの療法的利益は従来技術
により開示されているそれよりも非常に高く、そして確
かに骨マ） ＩＪクスのを域における腫瘍巣の療法的攻
撃を提供する。
従来技術により達成されるレベルよりも２０〜５０の係
数をもって低いがそれにもかかわらず非常に高い療法効
果をもたらすような、インターフェロン含有組成物を提
供する。ｄｓＲＮＡを含有するこの発明の組成物は相剰
的に作用するため、ｄｓＲＮＡの療法的利益は従来技術
により開示されているそれよりも非常に高く、そして確
かに骨マ） ＩＪクスのを域における腫瘍巣の療法的攻
撃を提供する。
この腫瘍を域は、外的に適用されたリンホカインが単式
療法として投与された場合にそれらによる攻撃に対して
非常に抵抗性である。
療法として投与された場合にそれらによる攻撃に対して
非常に抵抗性である。
■、腫瘍細胞に対する免疫監視機構としてのナチュラル
・キラー（ＮＫ）細胞 腫瘍細胞に対する免疫監視機構におけるＮＫ細胞集団の
中心的役割を支持する多くの報告が公表されている。高
ＮＫ細胞活性を有するマウスは低いＮＫ細胞活性を有す
るマウスに比べてＮＫ感受性腫瘍細胞の増殖に対して高
い耐性を有することが示されている（Ｉｍ＋ｎｕｎｏｌ
、Ｒｅｖ、 ４４．１６５．１９７９）。
・キラー（ＮＫ）細胞 腫瘍細胞に対する免疫監視機構におけるＮＫ細胞集団の
中心的役割を支持する多くの報告が公表されている。高
ＮＫ細胞活性を有するマウスは低いＮＫ細胞活性を有す
るマウスに比べてＮＫ感受性腫瘍細胞の増殖に対して高
い耐性を有することが示されている（Ｉｍ＋ｎｕｎｏｌ
、Ｒｅｖ、 ４４．１６５．１９７９）。
選択的ＮＫ細胞欠陥を有するＣ５７ＢＬ／ ６ベージユ
マウスが、正常なＮＫ細胞活性を有する同系（ｓｙｎｇ
ｅｎｅｉｃ）マウスに比べて腫瘍増殖に対してより感受
性であることも報告されている［Ｎａｔｕｒｅ （ロン
ドン） ２８４，６２２． １９８０ ；Ｎａｔｕｒｅ
、 ２８４，６２４． １９８４］。
マウスが、正常なＮＫ細胞活性を有する同系（ｓｙｎｇ
ｅｎｅｉｃ）マウスに比べて腫瘍増殖に対してより感受
性であることも報告されている［Ｎａｔｕｒｅ （ロン
ドン） ２８４，６２２． １９８０ ；Ｎａｔｕｒｅ
、 ２８４，６２４． １９８４］。
チェジアックーヒガシ（Ｃｈｅｄｉａｋ−Ｈｉｇａｓｈ
ｉ）症候群を有するヒトにおいて類似の状態が存在し、
そしてこの病気におけるＮＫ細胞欠陥はこれらの患者に
おけるその後のリンパ腫の出現に病因的に関連するであ
ろうことが示唆されているＣＪ、 ＢＸＩＩ、 Ｍｅｄ
、 。
ｉ）症候群を有するヒトにおいて類似の状態が存在し、
そしてこの病気におけるＮＫ細胞欠陥はこれらの患者に
おけるその後のリンパ腫の出現に病因的に関連するであ
ろうことが示唆されているＣＪ、 ＢＸＩＩ、 Ｍｅｄ
、 。
１５１、１０３９．１９８０；Ｊ、Ｂｘｐ、Ｍｅｄ、、
１５１ １０４９ １９８ＯＮａｔｕｒｅ （ｏンド
ン）、 ２８４．５５３． １９８０ ］ 。慢性リ
ンパ球性白血病（ＣＬＬ）の患者が二次的悪性疾患の高
い発病率を有することが知られている。
１５１ １０４９ １９８ＯＮａｔｕｒｅ （ｏンド
ン）、 ２８４．５５３． １９８０ ］ 。慢性リ
ンパ球性白血病（ＣＬＬ）の患者が二次的悪性疾患の高
い発病率を有することが知られている。
Ｚｉｅｇｌｅｒ及びＺａｒｌｉｎｇ（Ｉｎｔ、Ｊ、Ｃａ
ｎｃｅｒ、 ２７． ３２Ｌ１９８１） は、慢性白
血病患者からの白血病細胞を除去した後のリンパ球にお
けるＮＫ１１（胞活性を評価している。有意に、ＣＬＬ
患者の大部分においてはＮＫ−感受性標的に結合するリ
ンパ球の存在にもかかわらすＮＫ細胞活性が最低である
か又は検出可能なＮＫ細胞活性が低下しない。さらに、
高投与量の免疫抑制剤により治療された腎同種移植片受
容者は悪性疾患が発生するおよそ１００倍高い危険性を
有し、そしてさらに極端に抑制された又は廃止されたＮ
Ｋ細胞活性を有する（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ
、 ２９．２１４．１９８０）。これに対して、抗体−
依存性細胞により介在される細胞毒性（八〇ＣＣ）はこ
れらの受容者における程抑制されない。このことは、免
疫細胞活性の欠陥は特異的なものであり、そして存在す
る場合には、悪性疾患の出現／回復の深い傾向と関連し
ていることを示唆している。
ｎｃｅｒ、 ２７． ３２Ｌ１９８１） は、慢性白
血病患者からの白血病細胞を除去した後のリンパ球にお
けるＮＫ１１（胞活性を評価している。有意に、ＣＬＬ
患者の大部分においてはＮＫ−感受性標的に結合するリ
ンパ球の存在にもかかわらすＮＫ細胞活性が最低である
か又は検出可能なＮＫ細胞活性が低下しない。さらに、
高投与量の免疫抑制剤により治療された腎同種移植片受
容者は悪性疾患が発生するおよそ１００倍高い危険性を
有し、そしてさらに極端に抑制された又は廃止されたＮ
Ｋ細胞活性を有する（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ
、 ２９．２１４．１９８０）。これに対して、抗体−
依存性細胞により介在される細胞毒性（八〇ＣＣ）はこ
れらの受容者における程抑制されない。このことは、免
疫細胞活性の欠陥は特異的なものであり、そして存在す
る場合には、悪性疾患の出現／回復の深い傾向と関連し
ていることを示唆している。
本発明は、腫瘍細胞がＩＦＮ耐性であってさえ、ミスマ
ツチｄｓＲＮＡ と組み合わされた特定のリンホカイン
の使用がその抗増殖作用に関して相剰的な又は増強され
た効果をもたらすという観察を含む多くの発見に基いて
いる。すなわち、リンホカイン単式療法に対してわずか
な応答しか示さない個体におけるミスマツチｄｓＲＮＡ
単独での又はリンホカインと組合わせての使用は、ミス
マツチｄｓＲＮＡ単独の使用を含む療法からの効果を超
えるミスマツチｄｓＲＮＡの増強された抗増殖／免疫調
節効果をもたらす。
ツチｄｓＲＮＡ と組み合わされた特定のリンホカイン
の使用がその抗増殖作用に関して相剰的な又は増強され
た効果をもたらすという観察を含む多くの発見に基いて
いる。すなわち、リンホカイン単式療法に対してわずか
な応答しか示さない個体におけるミスマツチｄｓＲＮＡ
単独での又はリンホカインと組合わせての使用は、ミス
マツチｄｓＲＮＡ単独の使用を含む療法からの効果を超
えるミスマツチｄｓＲＮＡの増強された抗増殖／免疫調
節効果をもたらす。
さらに、多くの個体にとって、リンホカイン療法例えば
ＩＦＮ療法は治療の実行可能な方法を提供する。すなわ
ち、これらの個体はＩＦＨの異常に高い投与レベルを要
求せず、そしてそれ故にリンホカインに対する抗体の出
現の、及び投与されたリンホカインの他の副作用くこれ
らの副作用はリンホカイン投与に直接関連するものであ
る）の経験の非常に小さい危険を有するにすぎない。こ
れらの対象においては、ｃｌｓＲＮ八はリンホカインの
作用を増強し、そしてそれによってＩＦＮ療法を一層効
果的な治療法にする。従って、この明細書に開示する療
法及び組成物はリンホカインのみに基く既存の治療法を
改良し、そしてこれらの理由の１又は複数のために効果
的な治療が受けられない個体へのこれらの治療方法の接
近を提供する。
ＩＦＮ療法は治療の実行可能な方法を提供する。すなわ
ち、これらの個体はＩＦＨの異常に高い投与レベルを要
求せず、そしてそれ故にリンホカインに対する抗体の出
現の、及び投与されたリンホカインの他の副作用くこれ
らの副作用はリンホカイン投与に直接関連するものであ
る）の経験の非常に小さい危険を有するにすぎない。こ
れらの対象においては、ｃｌｓＲＮ八はリンホカインの
作用を増強し、そしてそれによってＩＦＮ療法を一層効
果的な治療法にする。従って、この明細書に開示する療
法及び組成物はリンホカインのみに基く既存の治療法を
改良し、そしてこれらの理由の１又は複数のために効果
的な治療が受けられない個体へのこれらの治療方法の接
近を提供する。
この発明の好ましい態様は、ｄｓＲＮ八がｒＩ、、・ｒ
Ｃｆｉのミスマツチ類似体である場合である。前に述
べたように、これらのミスマツチ類似体は、いずれかの
鎖を不対合塩基（ずなわぢワトソンークリソクの塩基対
を形成しない塩基）、例えばウラシル又はグアニジン、
による中断から生ずる。これらのミスマツチ類似体は、
これらが未変形ｒｌｎ’ｒｃｈの抗増殖効果を維持しな
がら不所望の副作用、例えば発熱、非特異的細胞死〈す
なわち正常な体細胞の死）及び抗原形成を開始する非常
に低下した傾向を示すという事実に基き、好ましい態様
を代表する。
Ｃｆｉのミスマツチ類似体である場合である。前に述
べたように、これらのミスマツチ類似体は、いずれかの
鎖を不対合塩基（ずなわぢワトソンークリソクの塩基対
を形成しない塩基）、例えばウラシル又はグアニジン、
による中断から生ずる。これらのミスマツチ類似体は、
これらが未変形ｒｌｎ’ｒｃｈの抗増殖効果を維持しな
がら不所望の副作用、例えば発熱、非特異的細胞死〈す
なわち正常な体細胞の死）及び抗原形成を開始する非常
に低下した傾向を示すという事実に基き、好ましい態様
を代表する。
さらに、本発明者はまた、特定のミスマツチ類個体ｒＩ
−’ ｒ（Ｃ１＋−１４，Ｕ）、、が、ｒＩｈ’ｒＣｈ
のごとき典型的なｄｓＲＮＡの抗増殖能力に関して前記
した効果をはるかに超える劇的な効果を示すことを発見
した。具体的には、幾つかの場合において、ミスマツチ
ｄｓＲＮＡは腫瘍細胞における欠陥を正すことができ、
それによってそれらの細胞は再プログラムされそして正
常へと転換される。本発明者は実際に患者から癌細胞を
単離し、そしてこの現象を繰り返し観察した。さらに、
本発明者は、リンホカインが前記の治療に対して完全な
障害を実際に提供する状況において、アンプリゲンが癌
細胞正常化剤として効果的に機能することができること
を発見した。ある種の化学物質及び生物学的物質が独立
に癌細胞を正常化する幾らかの能力を有することが知ら
れている。ミスマツチｄｓＲＮＡ、特に、 ■、、・、
（Ｃ，、＋４＋ Ｕ）、、はこのタイプの腫瘍細胞正常
化活性を増幅することができ、他方ある種のリンホカイ
ン、特にリンホカインはしばしば逆の効果を有する。す
なわち、これらはこの正常化過程を低下せしめ又は無き
ものにする。
−’ ｒ（Ｃ１＋−１４，Ｕ）、、が、ｒＩｈ’ｒＣｈ
のごとき典型的なｄｓＲＮＡの抗増殖能力に関して前記
した効果をはるかに超える劇的な効果を示すことを発見
した。具体的には、幾つかの場合において、ミスマツチ
ｄｓＲＮＡは腫瘍細胞における欠陥を正すことができ、
それによってそれらの細胞は再プログラムされそして正
常へと転換される。本発明者は実際に患者から癌細胞を
単離し、そしてこの現象を繰り返し観察した。さらに、
本発明者は、リンホカインが前記の治療に対して完全な
障害を実際に提供する状況において、アンプリゲンが癌
細胞正常化剤として効果的に機能することができること
を発見した。ある種の化学物質及び生物学的物質が独立
に癌細胞を正常化する幾らかの能力を有することが知ら
れている。ミスマツチｄｓＲＮＡ、特に、 ■、、・、
（Ｃ，、＋４＋ Ｕ）、、はこのタイプの腫瘍細胞正常
化活性を増幅することができ、他方ある種のリンホカイ
ン、特にリンホカインはしばしば逆の効果を有する。す
なわち、これらはこの正常化過程を低下せしめ又は無き
ものにする。
さらに、この発明はまた、家族的背景（すなわち遺伝）
により又は免疫系の欠陥により癌を生じさせる素因を有
する個体における免疫不全の修正をも可能にする。この
可能性は非−ＩＦＮ、非リンホカイン効果であり、そし
てミスマツチｄｓＲＮＡが、リンホカインが行わない質
的な態様で癌性細胞に影響を与えることができるという
事実の証拠である。
により又は免疫系の欠陥により癌を生じさせる素因を有
する個体における免疫不全の修正をも可能にする。この
可能性は非−ＩＦＮ、非リンホカイン効果であり、そし
てミスマツチｄｓＲＮＡが、リンホカインが行わない質
的な態様で癌性細胞に影響を与えることができるという
事実の証拠である。
療法的組成物及び方法は癌、腫瘍及び新生物細胞の治療
を提供する。この文脈において“′治療″′とは、癌の
予防、腫瘍の阻止く部分的な又は完全な）、確立された
療法によりすでに治療された患者における腫瘍の再現の
失敗、腫瘍細胞の正常細胞への転換、癌関連免疫不全の
修正、並びにウィルス感染及び種々の自己免疫／炎症状
態に対する保護を与えるのに必要な宿主防御の増強を含
む一般的用語である。重要なことには、この発明は癌又
は腫瘍が臨床的に出現した後のそれらの治療に対しての
みならず、それらが初期状態であるか又は前臨床状態に
ある間のそれらの悪性疾患の予防又は未然防止のために
も適用されることを理解することが極めて重大である。
を提供する。この文脈において“′治療″′とは、癌の
予防、腫瘍の阻止く部分的な又は完全な）、確立された
療法によりすでに治療された患者における腫瘍の再現の
失敗、腫瘍細胞の正常細胞への転換、癌関連免疫不全の
修正、並びにウィルス感染及び種々の自己免疫／炎症状
態に対する保護を与えるのに必要な宿主防御の増強を含
む一般的用語である。重要なことには、この発明は癌又
は腫瘍が臨床的に出現した後のそれらの治療に対しての
みならず、それらが初期状態であるか又は前臨床状態に
ある間のそれらの悪性疾患の予防又は未然防止のために
も適用されることを理解することが極めて重大である。
すなわち、癌性状態は、明瞭に姿を現わしそしてそれに
よって既存の治療法にかけられる前に１０年間もの長期
にわたり前臨床的であり得る。この発明は他方において
、癌が臨床的出現段階に達する前に、例えば癌への高い
素因を示す背景を有する個体において、癌を未然に防止
することを提供する。異る展望から見て、癌はく潜在的
に千年の長きにわたる）生物学的連続の単なる部分であ
り、この連続の初期段階は単に素因に過ぎないであろう
。この発明は明瞭に姿を現わした癌の修正を提供するの
みならず、それがこの連続の初期段階において、おそら
くそれが姿を現わす数十午前に癌の予防を可能にする。
よって既存の治療法にかけられる前に１０年間もの長期
にわたり前臨床的であり得る。この発明は他方において
、癌が臨床的出現段階に達する前に、例えば癌への高い
素因を示す背景を有する個体において、癌を未然に防止
することを提供する。異る展望から見て、癌はく潜在的
に千年の長きにわたる）生物学的連続の単なる部分であ
り、この連続の初期段階は単に素因に過ぎないであろう
。この発明は明瞭に姿を現わした癌の修正を提供するの
みならず、それがこの連続の初期段階において、おそら
くそれが姿を現わす数十午前に癌の予防を可能にする。
従って、ヒトを含む動物における癌の治療のために有用
な療法及び組成物を提供するのがこの発明の１つの目的
であり、ここで“治療′″とは（癌、腫瘍等と関連して
使用される場合）、癌の予防、腫瘍の阻止（部分的な又
は完全な）、既存の療法によりすでに治療された患者に
おける腫瘍の再発の失敗、腫瘍細胞の正常細胞への転換
、又は癌関連免疫不全の修正、並びにウィルス感染及び
種々の自己免疫／炎症状態に対する保護を与えるのに必
要な宿主防御の増強を含む一般的用語である。
な療法及び組成物を提供するのがこの発明の１つの目的
であり、ここで“治療′″とは（癌、腫瘍等と関連して
使用される場合）、癌の予防、腫瘍の阻止（部分的な又
は完全な）、既存の療法によりすでに治療された患者に
おける腫瘍の再発の失敗、腫瘍細胞の正常細胞への転換
、又は癌関連免疫不全の修正、並びにウィルス感染及び
種々の自己免疫／炎症状態に対する保護を与えるのに必
要な宿主防御の増強を含む一般的用語である。
ヒトを含む動物における腫瘍細胞の増殖を阻止するだめ
の改良された療法を提供するのがこの発明の他の目的で
あり、この方法はミスマツチｄｓＲＮＡをその様な療法
的処置を必要とする動物に投与することを含んで成る。
の改良された療法を提供するのがこの発明の他の目的で
あり、この方法はミスマツチｄｓＲＮＡをその様な療法
的処置を必要とする動物に投与することを含んで成る。
この発明の他の目的は、ＩＦＮ−耐性腫瘍細胞の増殖を
阻害するための改良された療法を提供することである。
阻害するための改良された療法を提供することである。
この発明の他の目的は、ヒトを含む動物体中の腫瘍細胞
に対するｃｌｓＲＮＡの抗−増殖効果を増強するための
方法及び組成物を提供することであり、この方法はミス
マツチｄｓＲＮＡをリンホカインと組み合わせて動物に
投与することを含んで成る。
に対するｃｌｓＲＮＡの抗−増殖効果を増強するための
方法及び組成物を提供することであり、この方法はミス
マツチｄｓＲＮＡをリンホカインと組み合わせて動物に
投与することを含んで成る。
この発明の他の目的は、ヒトを含む動物体中のＩＦＮの
みに対して耐性の腫瘍を包含する腫瘍の治療のための方
法及び組成物を提供することであリ、この方法はミスマ
ツチｄｓＲＮＡを単独で又はリンホカインと組合わせて
投与することを含んで成る。
みに対して耐性の腫瘍を包含する腫瘍の治療のための方
法及び組成物を提供することであリ、この方法はミスマ
ツチｄｓＲＮＡを単独で又はリンホカインと組合わせて
投与することを含んで成る。
この発明の他の目的は、ヒトを含む動物体中の癌又は腫
瘍細胞を機能的に正常化するための方法を提供すること
であり、この方法はミスマツチｄｓＲＮＡをその動物に
投与することを含んで成る。
瘍細胞を機能的に正常化するための方法を提供すること
であり、この方法はミスマツチｄｓＲＮＡをその動物に
投与することを含んで成る。
この発明の他の目的は、動物体中の癌又は腫瘍細胞を機
能的に正常化する方法を提供することであり、この方法
はヒトを含む動物にミスマツチｄｓＲＮＡを、腫瘍細胞
を正常化する幾らかの能力を独自に有する他の化学物質
又は生物学的物質と組み合わせて投与することを含んで
成る。
能的に正常化する方法を提供することであり、この方法
はヒトを含む動物にミスマツチｄｓＲＮＡを、腫瘍細胞
を正常化する幾らかの能力を独自に有する他の化学物質
又は生物学的物質と組み合わせて投与することを含んで
成る。
この発明の他の目的は、免疫不全及び慢性ウィルス性不
全を改善又は阻止することができる方法を提供すること
であり、この方法は有効量のミスマツチｄｓＲＮＡを個
体に投与することを含んで成る。
全を改善又は阻止することができる方法を提供すること
であり、この方法は有効量のミスマツチｄｓＲＮＡを個
体に投与することを含んで成る。
例えば患者へのミスマツチｄｓＲＮＡの投与による細胞
の正常化及び悪性細胞表現型の喪失に向けての腫瘍細胞
の変性及び患者の細胞内ｄｓＲＮＡレベルの上昇のだめ
の方法及び療法組成物が記載される。
の正常化及び悪性細胞表現型の喪失に向けての腫瘍細胞
の変性及び患者の細胞内ｄｓＲＮＡレベルの上昇のだめ
の方法及び療法組成物が記載される。
こうして、リンホカインに非応答性の又は応答に至らな
い腫瘍細胞が応答性にされる。ｄｓＲＮＡはリンホカイ
ン投与と同時に継続され得る。無活動の腫瘍細胞をイン
ターフェロンの抗増殖効果に対して応答性にする点にお
いて、特に劇的な応答が達成される。
い腫瘍細胞が応答性にされる。ｄｓＲＮＡはリンホカイ
ン投与と同時に継続され得る。無活動の腫瘍細胞をイン
ターフェロンの抗増殖効果に対して応答性にする点にお
いて、特に劇的な応答が達成される。
前記のごとく、多くの個体がＩＦＮ単独使用に基く癌療
法に満足に応答しない。従って、高投与レベルが必要で
あり、これにはこの様な個体が実際にそれらの天然林生
成物であるＩＦＮへの耐性を生じさせることができると
いう効果を伴う。さらに、他の種類の耐性が非−ランダ
ノ・に獲得された表現型として腫瘍細胞により出現され
得るという事実は、ＩＦＮ単独使用により増殖を阻害す
ることを目指すすべての方法と比較して、この発明の療
法組成物及び方法がもたらす劇的改良を理解する上で常
に重要なものとして考慮されるべき点である。
法に満足に応答しない。従って、高投与レベルが必要で
あり、これにはこの様な個体が実際にそれらの天然林生
成物であるＩＦＮへの耐性を生じさせることができると
いう効果を伴う。さらに、他の種類の耐性が非−ランダ
ノ・に獲得された表現型として腫瘍細胞により出現され
得るという事実は、ＩＦＮ単独使用により増殖を阻害す
ることを目指すすべての方法と比較して、この発明の療
法組成物及び方法がもたらす劇的改良を理解する上で常
に重要なものとして考慮されるべき点である。
ＩＦＮといずれかのｄｓＲＮＡ、すなわち完全に塩基対
合した又はミスマツチｄｓＲＮＡとの゛組み合わせ″投
与は、両薬物を１つの療法混合物として一緒に投与する
態様、及び両薬物を別々にしかし同時に、例えば別々の
静脈を介して同一の個体に投与する態様を包含する。゛
組み合わせ″′投与はさらに、薬物の一方が与えられそ
の短時間の後に他方が与えられるという、これらの薬物
の分離投与をも含む。これらの３つの態様のすべてが本
質的利点を有する。例えば、別々のしかし同時的な投与
は各薬物の独立した調節を可能にし、そしてこれによっ
て個々の患者基準で療法的最適化をもたらす。分離投与
はＩＦＮ単独で細胞に対する効果を確立することを可能
にし、しかしこれは非常に低く、次にこの効果はｄｓＲ
ＮＡの使用によって増幅される。言うまでもなく、ＩＦ
Ｎ及びｄｓＲＮＡの一つの混合物としての調製は、最適
レベルがすでに確立されている場合、この療法組成物へ
の即座の接近を提供する。前記の検討は請求の範囲を包
含するこの明細書に示されるすべての場合に適用され、
ここでは１つの療法剤が他方とパ組み合わせ′て投与さ
れる。
合した又はミスマツチｄｓＲＮＡとの゛組み合わせ″投
与は、両薬物を１つの療法混合物として一緒に投与する
態様、及び両薬物を別々にしかし同時に、例えば別々の
静脈を介して同一の個体に投与する態様を包含する。゛
組み合わせ″′投与はさらに、薬物の一方が与えられそ
の短時間の後に他方が与えられるという、これらの薬物
の分離投与をも含む。これらの３つの態様のすべてが本
質的利点を有する。例えば、別々のしかし同時的な投与
は各薬物の独立した調節を可能にし、そしてこれによっ
て個々の患者基準で療法的最適化をもたらす。分離投与
はＩＦＮ単独で細胞に対する効果を確立することを可能
にし、しかしこれは非常に低く、次にこの効果はｄｓＲ
ＮＡの使用によって増幅される。言うまでもなく、ＩＦ
Ｎ及びｄｓＲＮＡの一つの混合物としての調製は、最適
レベルがすでに確立されている場合、この療法組成物へ
の即座の接近を提供する。前記の検討は請求の範囲を包
含するこの明細書に示されるすべての場合に適用され、
ここでは１つの療法剤が他方とパ組み合わせ′て投与さ
れる。
同様に、この発明の療法剤及び組成物は通常用いられそ
して医学の分野で知られている任意の体径路を介して投
与され得る。静脈内投与が記載されるが、筋肉内投与、
莢膜内（ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ）投与、頭蓋内（ｉｎ
ｔｒａｃｒａｎｉａｌ）投与、及び腹腔内投与を含む他
の経路もこの開示の範囲である。
して医学の分野で知られている任意の体径路を介して投
与され得る。静脈内投与が記載されるが、筋肉内投与、
莢膜内（ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ）投与、頭蓋内（ｉｎ
ｔｒａｃｒａｎｉａｌ）投与、及び腹腔内投与を含む他
の経路もこの開示の範囲である。
リンホカインは、インターフェロン類（α、βＴ）、好
ましくはインターフェロンα、インターロイキン類、特
にインターロイキン（１，２又は３）及び組換インター
ロイキン−２ｂｌＬ−２）、並びに腫瘍壊死因子（ＴＮ
Ｆ）を包含する。さらに、リンホカインへの暴露に対す
る応答において動物中で形成される、リンホカインで活
性化されたキラー細胞（ＬＡＫ）も含まれる。
ましくはインターフェロンα、インターロイキン類、特
にインターロイキン（１，２又は３）及び組換インター
ロイキン−２ｂｌＬ−２）、並びに腫瘍壊死因子（ＴＮ
Ｆ）を包含する。さらに、リンホカインへの暴露に対す
る応答において動物中で形成される、リンホカインで活
性化されたキラー細胞（ＬＡＫ）も含まれる。
リンホカインとしてインターフェロン（α）が使用され
る場合、患者の体液−当り０．０１〜１００．０００Ｉ
ＲＩＩの量が与えられる。前記リンホカインがＩＬ２好
ましくはｒｌＬ−２である場合、投与される量は、患者
の体重ｋｇ当り約１０２１Ｌ−２ユニツト〜その患者に
おける許容されない毒性レベルに近い値（コレは１０６
１Ｌ−２ユニツトと高いであろう）の範囲である。しか
しながら、体重ｋｇ当り約１０３〜約１０’１Ｌ−２ユ
ニツトの範囲が好ましい。
る場合、患者の体液−当り０．０１〜１００．０００Ｉ
ＲＩＩの量が与えられる。前記リンホカインがＩＬ２好
ましくはｒｌＬ−２である場合、投与される量は、患者
の体重ｋｇ当り約１０２１Ｌ−２ユニツト〜その患者に
おける許容されない毒性レベルに近い値（コレは１０６
１Ｌ−２ユニツトと高いであろう）の範囲である。しか
しながら、体重ｋｇ当り約１０３〜約１０’１Ｌ−２ユ
ニツトの範囲が好ましい。
両薬物、すなわちｄｓＲＮＡ及びリンホカインが前記の
様に投与される場合、これらは１つの混合物として、別
々にしかし同時に、又は次々と投与される。
様に投与される場合、これらは１つの混合物として、別
々にしかし同時に、又は次々と投与される。
リンホカイン及びいずれかのｄｓＲＮＡが組み合わせて
投与される場合、ｄｓＲＮＡは、生物体内を循環しそし
て組織を浸している体液、すなわち血清、塩、ビタミン
等の溶液中で１〜ｌ、 ＱＱＱｇ ｄｓＲＮ八／献へレ
ベルをもたらす量で投与することができる。
投与される場合、ｄｓＲＮＡは、生物体内を循環しそし
て組織を浸している体液、すなわち血清、塩、ビタミン
等の溶液中で１〜ｌ、 ＱＱＱｇ ｄｓＲＮ八／献へレ
ベルをもたらす量で投与することができる。
例えば、体重１６０１ｂの個体への１０ｍｇのｄｓＲＮ
Ａを含有する組成物の投与は約１硝／−のｄｓＲＮＡレ
ベルをもたらすであろう。同様に、ｄｓＲＮＡ−ＩＦＮ
の組み合わせを投与する場合に存在するＩＦＮの量は体
液中１〜１０．０００１Ｒ［Ｉ／ｍｌのレベルをもたら
す量である。組み合わせの投与方法は前記の通り、混合
物として、別々にしかし同時に、又は次々と、である。
Ａを含有する組成物の投与は約１硝／−のｄｓＲＮＡレ
ベルをもたらすであろう。同様に、ｄｓＲＮＡ−ＩＦＮ
の組み合わせを投与する場合に存在するＩＦＮの量は体
液中１〜１０．０００１Ｒ［Ｉ／ｍｌのレベルをもたら
す量である。組み合わせの投与方法は前記の通り、混合
物として、別々にしかし同時に、又は次々と、である。
これがいかなる物理的態様をとるにしても投与は機能的
に相乗的だということがここでのポイントである。
に相乗的だということがここでのポイントである。
ミスマツチｄｓＲＮＡ とは、対応する鎮間の水素結合
（塩基の重なり）相対的に無傷であること、すなわち２
９個の連続する塩基残基ごとに平均−未満の塩基対によ
り中断されていることを意味する。
（塩基の重なり）相対的に無傷であること、すなわち２
９個の連続する塩基残基ごとに平均−未満の塩基対によ
り中断されていることを意味する。
゛ミスマツチｄｓＲＮＡ’″とはこの様に理解されるべ
きである。ｄｓＲＮＡは、例えば５個の内１個〜３０個
の内１個の割合でウラシル塩基又はグアニジン塩基を含
有するポリイノシン酸及びポリシチジル酸の複合体であ
ることができる［ｐｏｌｙ Ｉ・ｐｏｌｙ （ｃ４Ｃ２
５×〉Ｕ又はＧ））。あるいは、適切なオリゴヌクレオ
チド（小ヌクレオチド断片）をある条件下で適切な相補
的ポリヌクレオチド又はオリゴヌクレオチドと複合せし
めることができる。
きである。ｄｓＲＮＡは、例えば５個の内１個〜３０個
の内１個の割合でウラシル塩基又はグアニジン塩基を含
有するポリイノシン酸及びポリシチジル酸の複合体であ
ることができる［ｐｏｌｙ Ｉ・ｐｏｌｙ （ｃ４Ｃ２
５×〉Ｕ又はＧ））。あるいは、適切なオリゴヌクレオ
チド（小ヌクレオチド断片）をある条件下で適切な相補
的ポリヌクレオチド又はオリゴヌクレオチドと複合せし
めることができる。
ｄｓＲＮＡはｐＯ１ｙ■・ｐｏｌｙＵ、Ｃであることが
でき、ここでＣ対Ｕの比率は約１３：１であり、そして
ｐｏｌｙ Ｉ及びｐｏｌｙｃ、Ｕの沈降係数はいずれも
９未満で及び相互の２ユニット以内であり、そして両者
は好ましくは約６．５〜７．５である。
でき、ここでＣ対Ｕの比率は約１３：１であり、そして
ｐｏｌｙ Ｉ及びｐｏｌｙｃ、Ｕの沈降係数はいずれも
９未満で及び相互の２ユニット以内であり、そして両者
は好ましくは約６．５〜７．５である。
ｄｓＲＮＡは一数式、 Ｉ 、 −ｒ（Ｃ，、、、、Ｕ
）、、、そして特に、 ｒ、 −ｒ（ｃ＋、 、 Ｕ）
ｈであることができる。
）、、、そして特に、 ｒ、 −ｒ（ｃ＋、 、 Ｕ）
ｈであることができる。
ｄｓＲＮＡの他の適当な例を後記する。
この発明において使用するのに好ましいミスマツチｄｓ
ＲＮＡはｐｏｌｙ（Ｃ，、Ｕ）及びｐｏｌｙ（Ｃ，、。
ＲＮＡはｐｏｌｙ（Ｃ，、Ｕ）及びｐｏｌｙ（Ｃ，、。
Ｇ）から選択されるコポリヌクレオチドを基礎とし、こ
こでｎは４〜２９の整数であり、そして例えば２’−０
−メチルリボシル残基の含有によるポリリボシチジル酸
（ｒＣｈ）の複合体のミスマツチ類似体である。ｒＩｎ
’ｒＣｎのこれらのミスマツチ類似体〔その１つは一数
式ｒエイーｒ（ＣＩ２．Ｕ）。
こでｎは４〜２９の整数であり、そして例えば２’−０
−メチルリボシル残基の含有によるポリリボシチジル酸
（ｒＣｈ）の複合体のミスマツチ類似体である。ｒＩｎ
’ｒＣｎのこれらのミスマツチ類似体〔その１つは一数
式ｒエイーｒ（ＣＩ２．Ｕ）。
を有する〕はｃａ、ｒｔｅｒ及びＴｓ’ ｏの米国特許
Ｎｏ、４．１３０．６４１及びＮｏ、４．０２４．２２
２に記載されている。そこに記載されるｄｓＲＮＡは一
般に、本発明に従って使用するために適当である。
Ｎｏ、４．１３０．６４１及びＮｏ、４．０２４．２２
２に記載されている。そこに記載されるｄｓＲＮＡは一
般に、本発明に従って使用するために適当である。
本発明において使用するためのミスマツチｄｓＲＮＡの
特定の例は次の通りである。
特定の例は次の通りである。
ｐｏｌｙ（Ｉ＞ ・ｐｏｌｙ （Ｃ，、Ｕ）ｐｏｌｙ
（Ｉ） ・ｐｏｌｙ （Ｃ７，Ｕ）ｐＯＩＶ（Ｉ）
・ｐｏｌｙ ＜Ｃｐｓ・Ｕ）ｐｏｌｙ（Ｉ） ・
ｐｏｌｙ （Ｃ２２・Ｕ）ｐｏｌｙ （Ｉ） ・ｐｏ
ｌｙ （Ｃ２０，Ｇ）ｐｏｌｙ（Ｉ） ・ｐｏｌｙ
（Ｃ２９・Ｇ）及びｐｏｌｙ（Ｉ） ・ｐｏｌｙ （
ｃｐ ） ２３ Ｇ ＞ ｐ投与されるミスマツチｄ
ｓＲＮＡの量は、投与直後、注入部位の遠位において全
身血循環中、０．０１ｆｆ ／−〜１００ｋ ／−のｄ
ｓＲＮＡの血中ピーク濃度を達成するために十分な量が
好ましい。
（Ｉ） ・ｐｏｌｙ （Ｃ７，Ｕ）ｐＯＩＶ（Ｉ）
・ｐｏｌｙ ＜Ｃｐｓ・Ｕ）ｐｏｌｙ（Ｉ） ・
ｐｏｌｙ （Ｃ２２・Ｕ）ｐｏｌｙ （Ｉ） ・ｐｏ
ｌｙ （Ｃ２０，Ｇ）ｐｏｌｙ（Ｉ） ・ｐｏｌｙ
（Ｃ２９・Ｇ）及びｐｏｌｙ（Ｉ） ・ｐｏｌｙ （
ｃｐ ） ２３ Ｇ ＞ ｐ投与されるミスマツチｄ
ｓＲＮＡの量は、投与直後、注入部位の遠位において全
身血循環中、０．０１ｆｆ ／−〜１００ｋ ／−のｄ
ｓＲＮＡの血中ピーク濃度を達成するために十分な量が
好ましい。
前記のごとく、この発明の好ましい形態は、腫瘍細胞の
増殖を阻害するために使用されるｄｓＲＮＡがミスマツ
チｄｓＲＮＡ 、例えばｒ Ｉｎ ’ ｒＣｎ（Ｃ＋＋
−＋４＋Ｕ）□である場合である。本発明者等は、完全
に塩基対合したｄｓＲＮＡに比べてミスマツチｄｓＲＮ
Ａがより穏和な薬学的効果を発揮することを見出した。
増殖を阻害するために使用されるｄｓＲＮＡがミスマツ
チｄｓＲＮＡ 、例えばｒ Ｉｎ ’ ｒＣｎ（Ｃ＋＋
−＋４＋Ｕ）□である場合である。本発明者等は、完全
に塩基対合したｄｓＲＮＡに比べてミスマツチｄｓＲＮ
Ａがより穏和な薬学的効果を発揮することを見出した。
ヒト繊維芽細胞ＩＦＮ以外の他のＩＦＮ型、例えばヒト
白血球ＩＦＨの天然誘導体及び組換ＤＮＡ技法を用いて
細菌中で生産されたＩＰＮ（、ＩＦＮ）の活性も試験さ
れた。すべてのケースにおいて、ＩＦＮはｄｓＲＮＡと
同時に注射された場合又はＩＦＮの注射の後にｄＳＲＮ
Ａが注射された場合〔マツチ（ｒＴ、、・ｒＣｈ）又は
ミスマツチｒ Ｉｈ ’ ｒ（Ｃ１１−１４＋Ｕ）。の
いずれであっても〕に比べて、単独で投与された場合に
ヒト腫瘍増殖に対して低い効果を示した。単独で投与さ
れたいずれかのＩＦＨにより達成されるヒト腫瘍細胞増
殖の最も大きな減少は注射されたＩＦＨの広範囲の濃度
（１日当り１０５〜３ Ｘ１０ｅｌＲＵ） にわたって
約３３％であった。これに対して、ｄＳＲＮＡとの組み
合わせにおいて１日当り１０”ＩＲＬＩという少いＩＦ
Ｈにより処理された動物はヒト腫瘍細胞の増殖の６５％
以上の減少を示した。従って、いずれかの単一形のＩＦ
Ｎと組み合せて使用されるｃｌｓＲＮ八は量的に卓越し
た効果を現わす。さらに、ヒトの腫瘍は一般に、最適な
医療効果を生じさせるために個体に合った治療法を要求
する。治療計画を個体に合わせる一層の努は、ＩＦＮと
組み合わせてミスマツチｄＳＲＮＡが使用される場合は
いっでも、１０倍又はそれより高い療法効果をもたらす
と期待される。
白血球ＩＦＨの天然誘導体及び組換ＤＮＡ技法を用いて
細菌中で生産されたＩＰＮ（、ＩＦＮ）の活性も試験さ
れた。すべてのケースにおいて、ＩＦＮはｄｓＲＮＡと
同時に注射された場合又はＩＦＮの注射の後にｄＳＲＮ
Ａが注射された場合〔マツチ（ｒＴ、、・ｒＣｈ）又は
ミスマツチｒ Ｉｈ ’ ｒ（Ｃ１１−１４＋Ｕ）。の
いずれであっても〕に比べて、単独で投与された場合に
ヒト腫瘍増殖に対して低い効果を示した。単独で投与さ
れたいずれかのＩＦＨにより達成されるヒト腫瘍細胞増
殖の最も大きな減少は注射されたＩＦＨの広範囲の濃度
（１日当り１０５〜３ Ｘ１０ｅｌＲＵ） にわたって
約３３％であった。これに対して、ｄＳＲＮＡとの組み
合わせにおいて１日当り１０”ＩＲＬＩという少いＩＦ
Ｈにより処理された動物はヒト腫瘍細胞の増殖の６５％
以上の減少を示した。従って、いずれかの単一形のＩＦ
Ｎと組み合せて使用されるｃｌｓＲＮ八は量的に卓越し
た効果を現わす。さらに、ヒトの腫瘍は一般に、最適な
医療効果を生じさせるために個体に合った治療法を要求
する。治療計画を個体に合わせる一層の努は、ＩＦＮと
組み合わせてミスマツチｄＳＲＮＡが使用される場合は
いっでも、１０倍又はそれより高い療法効果をもたらす
と期待される。
デークーが明瞭に示すところによれば、ｄｓＲＮＡは、
あらゆる形のＩＦＮ、例えば天然形、合成形、及びバイ
ブＩＪ ）形、例えば一部はα−ＩＦＮからそして一部
はβ又はｒ ＩＦＮから由来するバイブリド形、の治療
効果を増幅するであろう。これらの形のすべてが本発明
の範囲に入る。従って、ｄｓＲＮＡの、特にミスマツチ
ｃｌｓＲＮＡの、通常ＩＩ＋、（ＣＩ、 、４．Ｕ）、
、の組合わせは、ＩＦＮ単独の能力をはるかに超える癌
に対する強力な製剤を構成する。さらに、研究されたヒ
ト腫瘍材料は、組織の病変及び破壊を惹起する、ヒト組
織における病原過程及び／又は悪性化過程に肯定的に寄
与する種々のタイプのウィルス遺伝情報を含有すること
が知られる。従って重要なことには、データーが示すと
ころによれば、ｄｓＲＮＡ−ＩＦＮの組み合わせは効果
的な抗癌剤であるばかりでなく、ウィルス成分及び疾患
に対抗して作用する。確かに、本発明の療法組成物は、
ＩＦＮ治療が示唆されているすべての疾患、例えば急性
、亜急性、潜伏性又は慢性段階により発現されるウィル
ス性疾患、さらにヒト異状（ｄｉｓｉｍｍｕｎｅ）免疫
疾患（ウィルス活性がヒトの疾患を開始するために作用
するがヒト自己免疫″疾患が自己永久化する場合のよう
に姿を消す）に対抗して作用するであろう。
あらゆる形のＩＦＮ、例えば天然形、合成形、及びバイ
ブＩＪ ）形、例えば一部はα−ＩＦＮからそして一部
はβ又はｒ ＩＦＮから由来するバイブリド形、の治療
効果を増幅するであろう。これらの形のすべてが本発明
の範囲に入る。従って、ｄｓＲＮＡの、特にミスマツチ
ｃｌｓＲＮＡの、通常ＩＩ＋、（ＣＩ、 、４．Ｕ）、
、の組合わせは、ＩＦＮ単独の能力をはるかに超える癌
に対する強力な製剤を構成する。さらに、研究されたヒ
ト腫瘍材料は、組織の病変及び破壊を惹起する、ヒト組
織における病原過程及び／又は悪性化過程に肯定的に寄
与する種々のタイプのウィルス遺伝情報を含有すること
が知られる。従って重要なことには、データーが示すと
ころによれば、ｄｓＲＮＡ−ＩＦＮの組み合わせは効果
的な抗癌剤であるばかりでなく、ウィルス成分及び疾患
に対抗して作用する。確かに、本発明の療法組成物は、
ＩＦＮ治療が示唆されているすべての疾患、例えば急性
、亜急性、潜伏性又は慢性段階により発現されるウィル
ス性疾患、さらにヒト異状（ｄｉｓｉｍｍｕｎｅ）免疫
疾患（ウィルス活性がヒトの疾患を開始するために作用
するがヒト自己免疫″疾患が自己永久化する場合のよう
に姿を消す）に対抗して作用するであろう。
任意のｄＳＲＮＡ−ＩＦＨ組み合わせ治療の相剰的増強
におけるｄｓＲＮＡの役割はＩＦＮ誘導剤としてではな
いことが強調されるべきである。むしろ、ミスマツチｄ
ｓＲＮＡは、ＩＦＨの作用を補完しそして補足し、これ
によってヒトのウィルス性疾患及び癌の治療においてｄ
ｓＲＮＡ又はｒＦＮ単独によっては達成され得ない柔軟
性及び有効性の程度をもたらす、ユニークに寄与する薬
物である。
におけるｄｓＲＮＡの役割はＩＦＮ誘導剤としてではな
いことが強調されるべきである。むしろ、ミスマツチｄ
ｓＲＮＡは、ＩＦＨの作用を補完しそして補足し、これ
によってヒトのウィルス性疾患及び癌の治療においてｄ
ｓＲＮＡ又はｒＦＮ単独によっては達成され得ない柔軟
性及び有効性の程度をもたらす、ユニークに寄与する薬
物である。
本発明者は、肺癌を有する患者及び癌の高い家族歴を有
する個体を含む研究グループの幾らかの構成員中に低レ
ベルのＮＫ細抱活性を観察した。
する個体を含む研究グループの幾らかの構成員中に低レ
ベルのＮＫ細抱活性を観察した。
これらの観察はあとで詳細に記載する。本発明者は、癌
の高い家族歴を有する患者における低いＮＫ細胞活性が
、種々のタイプのインターフェロン及び／又はミスマツ
チｄｓＲＮＡの添加により正常レベルに再確立され得る
か否かを試験した。現在の報告は、インターフェロンの
天然型（Ｂｒｉｔ、ＪＭａｅｍ、、５０．８５．１９８
２＞及びクローン化型（Ｃａｎ、 Ｒｅ５４２、１３１
２．１９８２＞の両者の間でのＮＫ細胞増加（正常個体
に由来する細胞）の効率の差を示している。本発明者は
、癌を発生させる危険を有する個体におけるＮＫ細抱増
加の正常レベルを再確立する最も顕著な能力を有するこ
とを観察した。
の高い家族歴を有する患者における低いＮＫ細胞活性が
、種々のタイプのインターフェロン及び／又はミスマツ
チｄｓＲＮＡの添加により正常レベルに再確立され得る
か否かを試験した。現在の報告は、インターフェロンの
天然型（Ｂｒｉｔ、ＪＭａｅｍ、、５０．８５．１９８
２＞及びクローン化型（Ｃａｎ、 Ｒｅ５４２、１３１
２．１９８２＞の両者の間でのＮＫ細胞増加（正常個体
に由来する細胞）の効率の差を示している。本発明者は
、癌を発生させる危険を有する個体におけるＮＫ細抱増
加の正常レベルを再確立する最も顕著な能力を有するこ
とを観察した。
この発明を次の例によりさらに説明する。これらの例に
おいて、すべての部及び％は重量による。
おいて、すべての部及び％は重量による。
次の例において使用されるｄｓＲＮＡ （ミスマツチ）
は、 １． □ ｒ（ＣＩ＋−１４，Ｕ）。であり、時
としてｒＩｎｒ（Ｃ１２，Ｕ）、とじて示される。
は、 １． □ ｒ（ＣＩ＋−１４，Ｕ）。であり、時
としてｒＩｎｒ（Ｃ１２，Ｕ）、とじて示される。
Ａ、 ｄｓＲＮＡの増殖調節の新しい機構ミスマツチ
ｄｓＲＮＡにより示される増殖調製の新しい機構はプロ
トタイプリンホカインと共通ではない。この研究は、常
軌を逸したヒト細胞の増殖調節における及びＴＦＮの誘
導以外の機構によるｄｓＲＮＡの広範な有用性を示す。
ｄｓＲＮＡにより示される増殖調製の新しい機構はプロ
トタイプリンホカインと共通ではない。この研究は、常
軌を逸したヒト細胞の増殖調節における及びＴＦＮの誘
導以外の機構によるｄｓＲＮＡの広範な有用性を示す。
具体的には、ザイクリック・アデノシン・モノホスフェ
ート（ｃＡＭＰ）のｄｓＲＮＡ誘導が、インターフェロ
ン−αに対して非感受性であることが知られている細胞
において見出された。これらの研究は、プロトタイプリ
ンホカインとしてインターフェロン−αを使用する単一
投与リンホカイン療法に対する抵抗に直面してミスマツ
チｃｌｓＲＮへの新規な抗増殖調節活性の評価を助ける
ために、Ｈ−７及びＨへ１００４ （プロティンキナー
ゼＣ及びｃＡＭＰキナーゼの既知の代謝阻害剤）を用い
て行われた。
ート（ｃＡＭＰ）のｄｓＲＮＡ誘導が、インターフェロ
ン−αに対して非感受性であることが知られている細胞
において見出された。これらの研究は、プロトタイプリ
ンホカインとしてインターフェロン−αを使用する単一
投与リンホカイン療法に対する抵抗に直面してミスマツ
チｃｌｓＲＮへの新規な抗増殖調節活性の評価を助ける
ために、Ｈ−７及びＨへ１００４ （プロティンキナー
ゼＣ及びｃＡＭＰキナーゼの既知の代謝阻害剤）を用い
て行われた。
ミスマツチｄｓＲＮ＾がＩＦＮ−非感受性細胞でのイン
ターフェロンの生産を誘導することによって機能するの
ではないことを示すため、ヒトグリオーマ（脳腫瘍）細
胞（ＡＩ２３５）を０〜８時間にわたる異る時間、ｃｌ
ｓＲＮ八により処理した。２４時間でｄｓＲＮＡを除去
し、そして新鮮な培地を添加し、次にインターフェロン
のタイター（ＩＲｔｌ／−Ｚ ）を細胞変性効果測定（
Ｆｉｎｔｅｒ、 Ｎ、Ｇ、、 Ｊ、Ｇｅｎ、Ｖｉｒｏｌ
、 ５４１！］−４２７，１９６９）により決定した
。結果を次の表に示す。検出の下限は５１ＲＵ／−であ
った。
ターフェロンの生産を誘導することによって機能するの
ではないことを示すため、ヒトグリオーマ（脳腫瘍）細
胞（ＡＩ２３５）を０〜８時間にわたる異る時間、ｃｌ
ｓＲＮ八により処理した。２４時間でｄｓＲＮＡを除去
し、そして新鮮な培地を添加し、次にインターフェロン
のタイター（ＩＲｔｌ／−Ｚ ）を細胞変性効果測定（
Ｆｉｎｔｅｒ、 Ｎ、Ｇ、、 Ｊ、Ｇｅｎ、Ｖｉｒｏｌ
、 ５４１！］−４２７，１９６９）により決定した
。結果を次の表に示す。検出の下限は５１ＲＵ／−であ
った。
第１表
ｄｓＲＮＡにより処理されたヒト−グリオーマ細胞にお
けるインターフェロンの誘導 ＨＦＦ ＜５ ＜５ ＜５ ＜５ ＜
５ＷＩＳ）ｌ ＜５ ＜５ ＜５ ＜５
＜５この結果から、ｄｓＲＮＡはこれらのＩＦＮ−
非感受性細胞においてインターフェロンを誘導しないも
のと結論された。
けるインターフェロンの誘導 ＨＦＦ ＜５ ＜５ ＜５ ＜５ ＜
５ＷＩＳ）ｌ ＜５ ＜５ ＜５ ＜５
＜５この結果から、ｄｓＲＮＡはこれらのＩＦＮ−
非感受性細胞においてインターフェロンを誘導しないも
のと結論された。
次に、問題の細胞においてｄｓＲＮＡにより惹起される
抗増殖効果においてインターフェロンがなんらかの役割
を演じているか否かを決定するため、同様な細胞を確認
試験にかけた。これは、インターフェロンに対する抗体
（もし存在するとすれば、抗体に結合しそしてｄｓ−Ｒ
ＮＡにより誘導される抗増殖効果を低下せしめるであろ
う）の使用により行われた。インターフェロンくα、β
、ｒ）に対する３種類の異る抗体及び１つのブランク又
は対照を用いた。ｆｌｕｂｂｅｌｌ等、Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ、 ４４ ： ３４５２３２５７ （１９８４）
により記載されているようにして細胞増殖阻害アッセイ
を行った。抗体についての対照増殖に対する％を次の様
にして計算した。
抗増殖効果においてインターフェロンがなんらかの役割
を演じているか否かを決定するため、同様な細胞を確認
試験にかけた。これは、インターフェロンに対する抗体
（もし存在するとすれば、抗体に結合しそしてｄｓ−Ｒ
ＮＡにより誘導される抗増殖効果を低下せしめるであろ
う）の使用により行われた。インターフェロンくα、β
、ｒ）に対する３種類の異る抗体及び１つのブランク又
は対照を用いた。ｆｌｕｂｂｅｌｌ等、Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ、 ４４ ： ３４５２３２５７ （１９８４）
により記載されているようにして細胞増殖阻害アッセイ
を行った。抗体についての対照増殖に対する％を次の様
にして計算した。
示された結果は、２４時間目の対照増殖に対する％であ
る。ＮＤ−行われず、このデーターはｄｓＲＮＡが試験
された細胞中でＩＦＮを誘導しないことを再確言忍する
ものである。
る。ＮＤ−行われず、このデーターはｄｓＲＮＡが試験
された細胞中でＩＦＮを誘導しないことを再確言忍する
ものである。
（ＩＳＲＮ八はヒト−グリオーマ細胞においてｃＡＭＰ
を誘導することが見出された。これはｄｓＲＮＡに直接
帰せられ、そしてこれらの細胞におけるＩＦＨの誘導に
よるものではない。３種類の既知の代謝は阻害物質、す
なわちＨ−７、８Ａ１００４及び百日咳毒素は、次の表
に示されるように、ｄｓＲＮＡの抗腫瘍効果を阻害し、
又はこれに拮抗する。対照増殖に対する低い％を得るこ
とを目的として、前記の第２表の場合のように、細胞増
殖％を再び評価した。
を誘導することが見出された。これはｄｓＲＮＡに直接
帰せられ、そしてこれらの細胞におけるＩＦＨの誘導に
よるものではない。３種類の既知の代謝は阻害物質、す
なわちＨ−７、８Ａ１００４及び百日咳毒素は、次の表
に示されるように、ｄｓＲＮＡの抗腫瘍効果を阻害し、
又はこれに拮抗する。対照増殖に対する低い％を得るこ
とを目的として、前記の第２表の場合のように、細胞増
殖％を再び評価した。
ミスマツチｄｓＲＮＡのみは対照増殖に対する％を低下
せしめるために機能するが、しかしながら代謝阻害物質
の存在は細胞増殖を増加せしめる。
せしめるために機能するが、しかしながら代謝阻害物質
の存在は細胞増殖を増加せしめる。
ヒト−グリオーマ細胞に対するミスマツチｃｌｓＲＮへ
の抗腫瘍効果のＨ−７及びＡＮ１００Ｏ代謝阻害剤によ
る拮抗を下記の第３表に示す。０ （ブランク又は対照
）、２５及び２００硝／顎の濃度におけるｄｓＲＮＡに
ついての対照増殖に対する％として値を示す。
の抗腫瘍効果のＨ−７及びＡＮ１００Ｏ代謝阻害剤によ
る拮抗を下記の第３表に示す。０ （ブランク又は対照
）、２５及び２００硝／顎の濃度におけるｄｓＲＮＡに
ついての対照増殖に対する％として値を示す。
第３表
Ｈ−７（堵）
０ ６６、７±１２．６
４８．２± ５．４５ １０３．３±１３．６
１０８．３±１５．５ ７５．２± ４．５２５
８７．５± ６．７ ８９．７±１１．０ ７
２．８± ７．９１１Ａ１００４ （詔） ５ １１２．７±１６．２ １１３．４± ３
．２ ９４．１±１３．４同様に、後に示すよう、百
日咳毒素によるおなしヒト−グリオーマ細胞の前処理が
ｄｓＲＮＡにより誘導される抗増殖を阻害する。第４表
において、ｄｓＲＮＡの添加の前に百日咳毒素により４
時間前処理された細胞における２４時間目において対照
増殖に対する％が示される。これは、認められた２種類
の代謝阻害物質であるＨ−７及びＨへ１００４が、イン
ターフェロン−αで処理された細胞において増殖阻害に
対して最小の効果を有し、これに対して百日咳毒素は二
面効果、すなわち高使用量における、インターフェロン
−αにより誘導された増殖阻害の不変更、及び低使用量
における抗増殖効果の増強、を有するようである。
４８．２± ５．４５ １０３．３±１３．６
１０８．３±１５．５ ７５．２± ４．５２５
８７．５± ６．７ ８９．７±１１．０ ７
２．８± ７．９１１Ａ１００４ （詔） ５ １１２．７±１６．２ １１３．４± ３
．２ ９４．１±１３．４同様に、後に示すよう、百
日咳毒素によるおなしヒト−グリオーマ細胞の前処理が
ｄｓＲＮＡにより誘導される抗増殖を阻害する。第４表
において、ｄｓＲＮＡの添加の前に百日咳毒素により４
時間前処理された細胞における２４時間目において対照
増殖に対する％が示される。これは、認められた２種類
の代謝阻害物質であるＨ−７及びＨへ１００４が、イン
ターフェロン−αで処理された細胞において増殖阻害に
対して最小の効果を有し、これに対して百日咳毒素は二
面効果、すなわち高使用量における、インターフェロン
−αにより誘導された増殖阻害の不変更、及び低使用量
における抗増殖効果の増強、を有するようである。
第４表
徊／−７９８，７±７．１ １０２．５±７．３
９９．９±６．３１硝／−’ ９４．０±５．２
９３．８±７．１ ９３．２±５．１２５０及び１０
０ＯＩＲＵ／−のＩＦＮ−αに暴露した。
９９．９±６．３１硝／−’ ９４．０±５．２
９３．８±７．１ ９３．２±５．１２５０及び１０
０ＯＩＲＵ／−のＩＦＮ−αに暴露した。
第５表
１分間
５分間
１０分間
３０分間
１時間
２時間
４時間
８時間
＜０．０２
＜０．０２
＜０．０２
〈００２
＜０．０２
く領０２
〈００２
〈００２
＜０．０２
〈００２
＜０．０２
＜０．０２
＜０．０２
〈０．０２
＜０．０２
＜０．０２
〈００２
これに対して、次の表に示すように、ＩＰＮ−αは２４
時間にわたって同じ細胞中で細胞内ｃＡＭＰレベルを上
昇せしめない。この方法においては、ヒト−グリオーマ
細胞（Ａ１２３５）を、実験の始めから２４時間の間の
種々の時間にわたって、０ （対照）、この表において
、値は蛋白質ｎ当りｃＡＭＰのピコモルとして示す。検
出限界は０．０２１］ｍＯβ／鱈蛋白質であった。
時間にわたって同じ細胞中で細胞内ｃＡＭＰレベルを上
昇せしめない。この方法においては、ヒト−グリオーマ
細胞（Ａ１２３５）を、実験の始めから２４時間の間の
種々の時間にわたって、０ （対照）、この表において
、値は蛋白質ｎ当りｃＡＭＰのピコモルとして示す。検
出限界は０．０２１］ｍＯβ／鱈蛋白質であった。
次に、細胞内ｃＡＭＰレベルを、ｄｓＲＮＡの抗増殖量
存置く２５及び２００鱈／−’）の直後、第１Ａ図に示
すように３０分間後、及び第１Ｂ図に示すように２４時
間後に、アデニレート触媒活性を測定することにより、
ｄｓＲＮＡで処理されたヒト−グリオーマ細胞（Ａ１２
３５） において問直的に測定した。この方法において
は、細胞を２５１／−４（グラフ中ぬりつぶした三角）
又は２０に／−’ （グラフ中ぬりつぶした四角）のミ
スマツチｄｓＲＮＡにより処理した。適当な時点（第１
Δ図；０，５〜３０分、そして第１Ｂ図；０，５〜２４
時間）において培地を除去し、そして細胞をドライアイ
ス上で急速に凍結した。細胞音波処理物中のアデニレー
ト・ライクラーゼ活性をＹｏｕｎｇ等、Ｍｏ１ｅｃ、
Ｂｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、 ｌ ：８８４−８８８．１９
８７の方法により測定した。細胞の計数を２４時間目に
行い、抗増殖活性を確認した。
存置く２５及び２００鱈／−’）の直後、第１Ａ図に示
すように３０分間後、及び第１Ｂ図に示すように２４時
間後に、アデニレート触媒活性を測定することにより、
ｄｓＲＮＡで処理されたヒト−グリオーマ細胞（Ａ１２
３５） において問直的に測定した。この方法において
は、細胞を２５１／−４（グラフ中ぬりつぶした三角）
又は２０に／−’ （グラフ中ぬりつぶした四角）のミ
スマツチｄｓＲＮＡにより処理した。適当な時点（第１
Δ図；０，５〜３０分、そして第１Ｂ図；０，５〜２４
時間）において培地を除去し、そして細胞をドライアイ
ス上で急速に凍結した。細胞音波処理物中のアデニレー
ト・ライクラーゼ活性をＹｏｕｎｇ等、Ｍｏ１ｅｃ、
Ｂｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、 ｌ ：８８４−８８８．１９
８７の方法により測定した。細胞の計数を２４時間目に
行い、抗増殖活性を確認した。
ｄｓＲＮＡで処理されたヒト−グリオーマ細胞（Ａ１２
３５＞中でのｃＡＭＰの誘導を、蛋白質硝当りｃＡＭＰ
ピコモルとして直接測定した。結果を３０分間にわたり
第２Ａ図に、そして２４時間にわたり第２Ｂ図に示す。
３５＞中でのｃＡＭＰの誘導を、蛋白質硝当りｃＡＭＰ
ピコモルとして直接測定した。結果を３０分間にわたり
第２Ａ図に、そして２４時間にわたり第２Ｂ図に示す。
この方法においては、へ１２３５細胞を２５賄／−（三
角印〉又は２０に／−’ （ぬりつぶした四角印）のミ
スマツチｄｓＲＮＡにより処理した。
角印〉又は２０に／−’ （ぬりつぶした四角印）のミ
スマツチｄｓＲＮＡにより処理した。
適当な時点において培地を取り出し、そして細胞内ｃＡ
ＭＰを０．ＩＮＨＣＡ中で可溶化した。Ｒｅ１ｓｉｎｅ
等、Ｊ、Ｃｅ１ｌ、Ｂｉｏｌ、 １０２：１６３０−１
６３７．１９８６に記載されているＲＩＡ法によってｃ
へＭＰレベルを決定した。
ＭＰを０．ＩＮＨＣＡ中で可溶化した。Ｒｅ１ｓｉｎｅ
等、Ｊ、Ｃｅ１ｌ、Ｂｉｏｌ、 １０２：１６３０−１
６３７．１９８６に記載されているＲＩＡ法によってｃ
へＭＰレベルを決定した。
対照細胞及び１鱈／−のｄｓＲＮＡで処理された細胞中
のｃＡＭＰレベルは検出レベルより下であった。細胞の
計数を２４時間目に行って抗増殖活性を確認した。
のｃＡＭＰレベルは検出レベルより下であった。細胞の
計数を２４時間目に行って抗増殖活性を確認した。
これら４つのグラフにおいて、ｄｓＲＮＡへのわずか３
０秒間の暴露の後のｃＡＭＰの劇的な増加、及び３０分
間にわたるレベルの持続が注目される。第１Ｂ図及び２
Ｂ図における２４時間にわたる測定が長時間にわたるｄ
ｓＲＮＡの効果を示している。
０秒間の暴露の後のｃＡＭＰの劇的な増加、及び３０分
間にわたるレベルの持続が注目される。第１Ｂ図及び２
Ｂ図における２４時間にわたる測定が長時間にわたるｄ
ｓＲＮＡの効果を示している。
これらの研究により、ｄｓＲＮＡは使用された細胞中で
ＩＦＮを誘導しないからｃＡＭＰレベルの上昇は直接ｄ
ｓＲＮＡに帰せられることがＷｉ Ｊされる。ｄｓＲＮ
Ａの抗増殖量が処理の開始後３０秒以内にアデニレート
・サイクラーゼ活性を誘導する。同様に、細胎内ｃＡＭ
Ｐレベルが抗増殖投与量に依存する態様で３０秒以内に
増加した。百日咳毒素による細胞の前処理、さらに細胞
内ｃＡＭＰの阻害物質及びこれに続（ｄｓＲＮＡ処理が
、ｄｓＲＮＡにより誘導される増殖阻害物質を阻害する
。これに対して、天然ヒ） ＩＦＮ−αの抗増殖量は２
４時間の処理期間を通して細胞内ＣへＭＰレベルを上昇
せしめなかった。さらに、いずれも既知の代謝阻害物質
であるＨ−７及びＨＡｌ、００４はＩＦＮ−αで処理さ
れた細胞中で増殖阻害に対して最小の効果を有しミ他方
百日咳毒素は前記の様な二面的効果を有するよってある
。
ＩＦＮを誘導しないからｃＡＭＰレベルの上昇は直接ｄ
ｓＲＮＡに帰せられることがＷｉ Ｊされる。ｄｓＲＮ
Ａの抗増殖量が処理の開始後３０秒以内にアデニレート
・サイクラーゼ活性を誘導する。同様に、細胎内ｃＡＭ
Ｐレベルが抗増殖投与量に依存する態様で３０秒以内に
増加した。百日咳毒素による細胞の前処理、さらに細胞
内ｃＡＭＰの阻害物質及びこれに続（ｄｓＲＮＡ処理が
、ｄｓＲＮＡにより誘導される増殖阻害物質を阻害する
。これに対して、天然ヒ） ＩＦＮ−αの抗増殖量は２
４時間の処理期間を通して細胞内ＣへＭＰレベルを上昇
せしめなかった。さらに、いずれも既知の代謝阻害物質
であるＨ−７及びＨＡｌ、００４はＩＦＮ−αで処理さ
れた細胞中で増殖阻害に対して最小の効果を有しミ他方
百日咳毒素は前記の様な二面的効果を有するよってある
。
ＩＦＨにより誘導される抗増殖におけるｃＡＭＰ系の研
究（Ｐａｎｎｉｅｒｓ等、Ｊ、Ｃｅ１ｌ Ｓｃｉ、、
４８ ：２５９゜１９８１ ； Ｂａｎｅｒｊｅｅ等、
Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １２９ ：２３０． １９８３Ｂｂ
ｓｗｏｒｔｈ等、Ｊ、Ｃｅ１ｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ、１２
０ ：１４６．１９８４）において、これらの著者はｃ
ＡＭＰが抗増殖状態の程度と関連しないことを見出した
。本発明者の知識（ごよれば、そこに報告されている研
究の前に同じ系におけるｄｓＲＮＡについての研究は依
存しなかった。
究（Ｐａｎｎｉｅｒｓ等、Ｊ、Ｃｅ１ｌ Ｓｃｉ、、
４８ ：２５９゜１９８１ ； Ｂａｎｅｒｊｅｅ等、
Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １２９ ：２３０． １９８３Ｂｂ
ｓｗｏｒｔｈ等、Ｊ、Ｃｅ１ｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ、１２
０ ：１４６．１９８４）において、これらの著者はｃ
ＡＭＰが抗増殖状態の程度と関連しないことを見出した
。本発明者の知識（ごよれば、そこに報告されている研
究の前に同じ系におけるｄｓＲＮＡについての研究は依
存しなかった。
これらの研究は、（ａ） ｄｓＲＮＡ及びリンホカイ
ン（その内ＩＦＮはプロトタイプである）は異る作用機
構を有すること、及び（ｂ ） ｄｓＲＮＡにより誘
導される抗増殖がｃＡＭＰ系と関連している（リンホカ
インはそうではないが）ことを支持している。
ン（その内ＩＦＮはプロトタイプである）は異る作用機
構を有すること、及び（ｂ ） ｄｓＲＮＡにより誘
導される抗増殖がｃＡＭＰ系と関連している（リンホカ
インはそうではないが）ことを支持している。
ｃＡＭＰは本来普遍的であること、すなわち、すべてで
はないにしてもほとんどの細胞が適切な刺激のもとでｃ
ＡＭＰを合成するのに必要な遺伝情報を有する点にふい
て、これらの実験は常軌を逸したヒト細胞の増殖調節に
おけるミスマツチｄｓＲＮＡの広範な基礎を示している
。これらの常軌を逸した細胞は単独で与えられたＩＦＨ
又は他のリンホカインに対して相対的に又は完全に耐性
である。これらの結果はさらに、ミスマツチｃｌｓＲＮ
Ａが２つの逐次的機構によって作用すること、すなわち
、まずｃＡＭＰキナーゼにより介在され、次にプロティ
ンキナーゼＣの調節が起こることを示唆している。
はないにしてもほとんどの細胞が適切な刺激のもとでｃ
ＡＭＰを合成するのに必要な遺伝情報を有する点にふい
て、これらの実験は常軌を逸したヒト細胞の増殖調節に
おけるミスマツチｄｓＲＮＡの広範な基礎を示している
。これらの常軌を逸した細胞は単独で与えられたＩＦＨ
又は他のリンホカインに対して相対的に又は完全に耐性
である。これらの結果はさらに、ミスマツチｃｌｓＲＮ
Ａが２つの逐次的機構によって作用すること、すなわち
、まずｃＡＭＰキナーゼにより介在され、次にプロティ
ンキナーゼＣの調節が起こることを示唆している。
Ｂ、蛋白質合成
ｄｓＲＮＡ ｌこより処理された細胞中での細胞内蛋白
質変化は進行する分化及び悪性細胞表現型の喪失（非−
リンホカイン性）を反映する。ｄｓＲＮ八処理へ４１） 後の細胞の正常化を５ｏｓｌａｕ等、Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｃａｌ ａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅ５ｅａｒ
ｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、 １１９ ：
９４１９４８、 １９８４の方法により研究した。こ
の方法にオイテ、抗増殖量ノミスマッチｄｓＲＮＡ （
２００ＪＩｍ／ ｍｌ）又は天然ヒト ＩＦＮ−α（１
００１ｒｍ／−’ ）により処理されたヒト脳腫瘍細胞
（Ａ１２３５）は７２時間にわたって有意に異る蛋白質
合成パターンを示した。蛋白質合成は処理された異常細
胞が正常化しつつあることを示し、そして治療効果の長
さ又は持続時間を示すから、これは重要なパラメーター
である。
質変化は進行する分化及び悪性細胞表現型の喪失（非−
リンホカイン性）を反映する。ｄｓＲＮ八処理へ４１） 後の細胞の正常化を５ｏｓｌａｕ等、Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｃａｌ ａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅ５ｅａｒ
ｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、 １１９ ：
９４１９４８、 １９８４の方法により研究した。こ
の方法にオイテ、抗増殖量ノミスマッチｄｓＲＮＡ （
２００ＪＩｍ／ ｍｌ）又は天然ヒト ＩＦＮ−α（１
００１ｒｍ／−’ ）により処理されたヒト脳腫瘍細胞
（Ａ１２３５）は７２時間にわたって有意に異る蛋白質
合成パターンを示した。蛋白質合成は処理された異常細
胞が正常化しつつあることを示し、そして治療効果の長
さ又は持続時間を示すから、これは重要なパラメーター
である。
て放射性ラベルされたＡ１２３５細胞からのカウント７
分を測定することにより評価された。これらの細胞は、
未処理細胞（対照、中白棒）、１００Ｊｌｒｔｌ／−の
濃度でＩＦＮ−αのみで処理された細胞（右上から左下
への斜線）、２００Ｊ−／−’にてｄｓＲＮＡにより処
理された細胞（垂直線）、並びに前記の量で＋ＰＮ−α
及び［］ＳＲＮへの両者により一緒に処理された細胞（
左上から右下への斜線）であった。測定は、２４．４８
及び７２時間後に行った。各棒上の単一線は１標準偏差
単位を示す。
分を測定することにより評価された。これらの細胞は、
未処理細胞（対照、中白棒）、１００Ｊｌｒｔｌ／−の
濃度でＩＦＮ−αのみで処理された細胞（右上から左下
への斜線）、２００Ｊ−／−’にてｄｓＲＮＡにより処
理された細胞（垂直線）、並びに前記の量で＋ＰＮ−α
及び［］ＳＲＮへの両者により一緒に処理された細胞（
左上から右下への斜線）であった。測定は、２４．４８
及び７２時間後に行った。各棒上の単一線は１標準偏差
単位を示す。
２４時間目において、いずれの薬物も対照と比較して名
目的な変化を示したが、４８時間目までにｄｓＲＮＡ及
びＩＦＮの両者は蛋白質合成の有意な増加を示し、ｄｓ
ＲＮＡにより刺激される蛋白質合成はＩＦＮにより処理
された細胞のそれよりも有意・に高かった。対照及びＩ
ＦＮで処理された細胞（ここでは、蛋白質合成が対照レ
ベルにまで低下した）に比べてｃｌｓＲＮ八で処理され
た細胞における蛋白質合成の３倍の増加は驚くべきこと
である。
目的な変化を示したが、４８時間目までにｄｓＲＮＡ及
びＩＦＮの両者は蛋白質合成の有意な増加を示し、ｄｓ
ＲＮＡにより刺激される蛋白質合成はＩＦＮにより処理
された細胞のそれよりも有意・に高かった。対照及びＩ
ＦＮで処理された細胞（ここでは、蛋白質合成が対照レ
ベルにまで低下した）に比べてｃｌｓＲＮ八で処理され
た細胞における蛋白質合成の３倍の増加は驚くべきこと
である。
ｄｓＲＮＡにより処理された細胞における蛋白質合成の
連続する増加は、−要分化した又は正常化した細胞表現
型へのｄｓＲＮＡで誘導された細胞の変化の結果として
生産される特定の蛋白質のタイプの有意な変化を反映し
ているようである。
連続する増加は、−要分化した又は正常化した細胞表現
型へのｄｓＲＮＡで誘導された細胞の変化の結果として
生産される特定の蛋白質のタイプの有意な変化を反映し
ているようである。
インターフェロン−βにより処理されたヒト膀胱癌細胞
中での蛋白質リン酸化の研究は、未処理の細胞に比較し
て多数の蛋白質のリン酸化の有意な変化を示した（Ｓｏ
ｓｌａｕ等、Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｂｉｏｐｈｙ。
中での蛋白質リン酸化の研究は、未処理の細胞に比較し
て多数の蛋白質のリン酸化の有意な変化を示した（Ｓｏ
ｓｌａｕ等、Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｂｉｏｐｈｙ。
八ｃｔａ、 Ｖｏｌｌ１９． １９８４． ９４１頁
）。これに対して１．■。・、（Ｃ，、−１４，Ｕ）。
）。これに対して１．■。・、（Ｃ，、−１４，Ｕ）。
を用いる本発明者の現在の研究（ポリアクリルアミドゲ
ル、示されていない）は、インターフェロンで処理され
た細胞と比較した場合、リン酸化パターンの完全に異る
変化を示す。これらのデーターは、腫瘍細胞変性の機構
、より正常な細胞表現型への転換、並びに免疫分化及び
免疫適格性の変化において用いられる経路の基本的相違
の観点から、ｄｓＲＮＡとリンホカインとの間の分子的
差異をさらに強調する。
ル、示されていない）は、インターフェロンで処理され
た細胞と比較した場合、リン酸化パターンの完全に異る
変化を示す。これらのデーターは、腫瘍細胞変性の機構
、より正常な細胞表現型への転換、並びに免疫分化及び
免疫適格性の変化において用いられる経路の基本的相違
の観点から、ｄｓＲＮＡとリンホカインとの間の分子的
差異をさらに強調する。
癌及び免疫学分野の当業者は、この明細書中に種々の態
様で開示されるこの基本発明の実施において、所与の注
目の細胞の悪性化過程に特異的な、又は注目の悪性細胞
の回復に特異的な特定の蛋白質を選択し、そしてここに
開示されるこの発明に照らして、選択された蛋白質又は
蛋白質群中の変化をモニターするであろう。対表に応じ
て変る因子が、この発明の基本的な用途を傷つけること
なく、一定の時間にわたるミスマツチｄｓＲＮＡの正味
必要量に影響を与えるであろう。なお、異状に高いレベ
ルのヌクレアーゼ又はホスホジェステラーゼの存在は、
ここに引用される例及び経験からのそれとは反対に、要
求されるｄｓＲＮＡ療法の濃度を変え、又は臨床医をし
て変えさせるであろう。患者に応じての変更は、臨床医
学の多くの観点から予想されるべきである。
様で開示されるこの基本発明の実施において、所与の注
目の細胞の悪性化過程に特異的な、又は注目の悪性細胞
の回復に特異的な特定の蛋白質を選択し、そしてここに
開示されるこの発明に照らして、選択された蛋白質又は
蛋白質群中の変化をモニターするであろう。対表に応じ
て変る因子が、この発明の基本的な用途を傷つけること
なく、一定の時間にわたるミスマツチｄｓＲＮＡの正味
必要量に影響を与えるであろう。なお、異状に高いレベ
ルのヌクレアーゼ又はホスホジェステラーゼの存在は、
ここに引用される例及び経験からのそれとは反対に、要
求されるｄｓＲＮＡ療法の濃度を変え、又は臨床医をし
て変えさせるであろう。患者に応じての変更は、臨床医
学の多くの観点から予想されるべきである。
蛋白質合成研究は注目の機構をより十分に追跡し、薬物
の作用の開始の動態、薬物の作用の強度を決定すること
を可能にし、そして正常化する細胞の数及び薬物の作用
の持続時間、従って療法効果の持続時間を評価すること
を可能にし、これはいずれもこの分野における本発明者
の広く報告された先行努力により予知されない態様によ
ってである。
の作用の開始の動態、薬物の作用の強度を決定すること
を可能にし、そして正常化する細胞の数及び薬物の作用
の持続時間、従って療法効果の持続時間を評価すること
を可能にし、これはいずれもこの分野における本発明者
の広く報告された先行努力により予知されない態様によ
ってである。
本発明者は、腫瘍細胞中でのインターフェロン抗増殖活
性がまれにのみ、そして主としてＩＦＮ感受性腫瘍細胞
が十分な量のあらかじめ存在する内因性ｄｓＲＮＡを有
する場合に生ずることを決定しく４５） た。
性がまれにのみ、そして主としてＩＦＮ感受性腫瘍細胞
が十分な量のあらかじめ存在する内因性ｄｓＲＮＡを有
する場合に生ずることを決定しく４５） た。
インターフェロンは二本６３ ＲＮ Ａ依存性酵素２′
５′オリゴＡシンセターゼ（細胞増殖阻害に関連し
ている）を誘導することが知られている。
５′オリゴＡシンセターゼ（細胞増殖阻害に関連し
ている）を誘導することが知られている。
本発明者の発見が示すところによれば、二重鎖ＲＮＡは
本質的に酵素の活性化のためにコーファクターとして機
能し、これはこの酵素のインターフェロン誘導とは異る
段階である。歴史的には、これら２つの作用は誤って一
つのグループにされ、いずれかの薬物の単独での又は組
合わせての療法的利点の可能性について劇的な縮小をも
らたした。
本質的に酵素の活性化のためにコーファクターとして機
能し、これはこの酵素のインターフェロン誘導とは異る
段階である。歴史的には、これら２つの作用は誤って一
つのグループにされ、いずれかの薬物の単独での又は組
合わせての療法的利点の可能性について劇的な縮小をも
らたした。
今や本発明者は、ある種の個体、すなわちハーリ−（ｈ
ａｉｒｙ）細胞白血病を有する個体の末梢血単核細胞（
ＰＢＭＣ）中に自然に存在し、但し正常個体のＰＢＭ中
には見出されないことを示す。確かに、ハーリー細胞白
血病患者におけるこれらの存在は、今や、インターフェ
ロン単独投与のこの様なケースにおける既知のインター
フェロンの有効性を初めて説明し、そして医療的に使用
され得るＩＦＮとｄｓＲＮＡとの間に臨界的な追加の二
分性を与える。
ａｉｒｙ）細胞白血病を有する個体の末梢血単核細胞（
ＰＢＭＣ）中に自然に存在し、但し正常個体のＰＢＭ中
には見出されないことを示す。確かに、ハーリー細胞白
血病患者におけるこれらの存在は、今や、インターフェ
ロン単独投与のこの様なケースにおける既知のインター
フェロンの有効性を初めて説明し、そして医療的に使用
され得るＩＦＮとｄｓＲＮＡとの間に臨界的な追加の二
分性を与える。
すなわち、インターフェロンの臨床的有効性はあらかじ
め存在する細胞内天然ｄｓＲＮＡの存在下での酵素の誘
導（２’、５’オリゴＡシンセターゼ）に基き、他方外
来性ｄｓＲＮＡは増殖制御のこの特定の経路におけるあ
らかじめ存在する酵素の活性化によって主として機能す
る。
め存在する細胞内天然ｄｓＲＮＡの存在下での酵素の誘
導（２’、５’オリゴＡシンセターゼ）に基き、他方外
来性ｄｓＲＮＡは増殖制御のこの特定の経路におけるあ
らかじめ存在する酵素の活性化によって主として機能す
る。
本発明の詳細な説を証明するため、本発明者は対照細胞
及び、ＩＦＮ−αＡで処理されたハーリー細胞白血病（
ＨｅＬａ）細胞から核ＲＮΔを単離し、シュークロース
勾配上で分画し、そして精製された高分子量２′，５′
Ａシンセターゼを活性化するそれらの能力について試験
した。未処理ＨｅＬａ細胞ＲＮＡの画分はいずれもシン
セターゼを活性化することができなかった。しかしなが
ら、ＩＦＮにより活性化された細胞の不拘−核酸ＲＮへ
（ＨｎＲＮ八）画分は量依存的にシンセターゼを活性化
した。
及び、ＩＦＮ−αＡで処理されたハーリー細胞白血病（
ＨｅＬａ）細胞から核ＲＮΔを単離し、シュークロース
勾配上で分画し、そして精製された高分子量２′，５′
Ａシンセターゼを活性化するそれらの能力について試験
した。未処理ＨｅＬａ細胞ＲＮＡの画分はいずれもシン
セターゼを活性化することができなかった。しかしなが
ら、ＩＦＮにより活性化された細胞の不拘−核酸ＲＮへ
（ＨｎＲＮ八）画分は量依存的にシンセターゼを活性化
した。
ＨｎＲＮＡＯ熱変性としてはこの活性化を廃止した。
酵素生成物の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＩ、Ｃ
）分析は、生物学的に活性な２′，５′Ａ）ＩＪママ−
びテトラマーが形成されたことを示した。本発明者はさ
らに、ＩＦＮ療法に対して非常に感受性のハーリー細胞
白血病患者から単核細胞核ＲＮＡを分画し、そしてＨｎ
ＲＮＡ画分中に高レベルの２′５’Ａシンセターゼ活性
化ｃｌｓＲＮＡを証明した。
）分析は、生物学的に活性な２′，５′Ａ）ＩＪママ−
びテトラマーが形成されたことを示した。本発明者はさ
らに、ＩＦＮ療法に対して非常に感受性のハーリー細胞
白血病患者から単核細胞核ＲＮＡを分画し、そしてＨｎ
ＲＮＡ画分中に高レベルの２′５’Ａシンセターゼ活性
化ｃｌｓＲＮＡを証明した。
ＨＰＬＣ分析は生物学的に活性な２’ 、５’ Ａ Ｍ
Ｊマ、テトラマー、ペンタマー及びヘキサマー（相対比
的５３：１５：４：１）の形成を示した。正常単独細胞
核ＲＮＡは活性化をもたらさなかった。これらの結果は
、天然核ＲＮＡが存在し、これは腫瘍性の又は他の適切
な細胞中に存在する場合、ＩＦＮによる増殖制御に関与
することができることを示した。確かに、これは″イン
ターフェロン応答″のための従来知られなかった臨界的
必要性である。次に、これにより、これらのｄｓＲＮＡ
の不足がＩＦＮの無効を導くこきができ、しかしながら
この無効は外来性ｄｓＲＮＡにより克服することができ
るという推定が可能となった。これは、この出願におい
て本発明者が記載するように本発明者が臨床的に試験し
そして確認した点である。
Ｊマ、テトラマー、ペンタマー及びヘキサマー（相対比
的５３：１５：４：１）の形成を示した。正常単独細胞
核ＲＮＡは活性化をもたらさなかった。これらの結果は
、天然核ＲＮＡが存在し、これは腫瘍性の又は他の適切
な細胞中に存在する場合、ＩＦＮによる増殖制御に関与
することができることを示した。確かに、これは″イン
ターフェロン応答″のための従来知られなかった臨界的
必要性である。次に、これにより、これらのｄｓＲＮＡ
の不足がＩＦＮの無効を導くこきができ、しかしながら
この無効は外来性ｄｓＲＮＡにより克服することができ
るという推定が可能となった。これは、この出願におい
て本発明者が記載するように本発明者が臨床的に試験し
そして確認した点である。
好結果であるために、ＩＦＮ活性は、抗増殖活性がその
中で望まれる細胞中に存在するまれなｄｓＲＮＡの存在
を必要とする。これは、腫瘍細胞がＩＦＮ療法に受容的
／感受性であるために必要なようである。これらの研究
及び関連する研究から、ｄｓＲＮＡは酵素２’、５’オ
リゴＡシンセターゼを活性化するコファクターであるよ
うである。ＩＦＮに非感受性の腫瘍細胞は、外来性ｄｓ
ＲＮＡと共に適用される場合、ｃｌｓＲＮＡを用いる好
結果の療法に対して感受性となる。ＩＦＮ治療に応答す
る細胞中では、細胞内ｄｓＲＮＡ（１又は複数）は、そ
れらの生物学的性質、触媒的性質及び非毒性、増強され
た免疫機能に基いて、細胞毒性機能及び他のデーター、
例えばｃＡＭＰ及び腫瘍細胞パラメーターと比較して、
この発明のミスマツチｄｓＲＮＡ 、特にｒｒ、、−ｒ
（Ｃｘ １１＋ Ｕ）。に非常に類似した三次元構造を
有すると信じられる。
中で望まれる細胞中に存在するまれなｄｓＲＮＡの存在
を必要とする。これは、腫瘍細胞がＩＦＮ療法に受容的
／感受性であるために必要なようである。これらの研究
及び関連する研究から、ｄｓＲＮＡは酵素２’、５’オ
リゴＡシンセターゼを活性化するコファクターであるよ
うである。ＩＦＮに非感受性の腫瘍細胞は、外来性ｄｓ
ＲＮＡと共に適用される場合、ｃｌｓＲＮＡを用いる好
結果の療法に対して感受性となる。ＩＦＮ治療に応答す
る細胞中では、細胞内ｄｓＲＮＡ（１又は複数）は、そ
れらの生物学的性質、触媒的性質及び非毒性、増強され
た免疫機能に基いて、細胞毒性機能及び他のデーター、
例えばｃＡＭＰ及び腫瘍細胞パラメーターと比較して、
この発明のミスマツチｄｓＲＮＡ 、特にｒｒ、、−ｒ
（Ｃｘ １１＋ Ｕ）。に非常に類似した三次元構造を
有すると信じられる。
一般にリンホカインに、そして特にＩＦＨに非応答性の
細胞は、まず有効量の外来性ｄｓＲＮＡを適用して、イ
ンターフェロンと関連する細胞増殖制御に関与する所望
の細胞内ｄｓＲＮＡのｄｓＲＮ八合成へ誘導し、そして
次に必要であればｃｌｓＲＮＡを供給することを最適に
続けながら療法的ＩＦＮを適用することにより、応答性
にされる。
細胞は、まず有効量の外来性ｄｓＲＮＡを適用して、イ
ンターフェロンと関連する細胞増殖制御に関与する所望
の細胞内ｄｓＲＮＡのｄｓＲＮ八合成へ誘導し、そして
次に必要であればｃｌｓＲＮＡを供給することを最適に
続けながら療法的ＩＦＮを適用することにより、応答性
にされる。
Ｄ、ヒト腎腫瘍外植体応答
ＩＦＮ及びｄｓＲＮＡに対するヒト腎外植体の応答は、
次の研究において説明されるように、長時間の生存及び
効果の程度において根本的に異る。
次の研究において説明されるように、長時間の生存及び
効果の程度において根本的に異る。
本発明者は、インターフェロン及びｄｓＲＮＡに対する
予想外のそして異る応答を示すために、無胸腺マウスに
おいてヒト腫瘍外植体を用いる多くの新しい動物系を用
いた。例えば、ヒト腎細胞癌はインターフェロン−α治
療中に進行する腫瘍増殖を示しそして生存の増加を示さ
なかったが、本発明者はｄｓＲＮＡ治療により腫瘍サイ
ズの有意な減少及び生存の劇的な増加を観察した。確か
に、２〜４年での自然死の後、ｄｓＲＮＡで治療された
マウスの９５％が剖検において組織学的に存在する腫瘍
を有していなかった。これは全く予想外であった。
予想外のそして異る応答を示すために、無胸腺マウスに
おいてヒト腫瘍外植体を用いる多くの新しい動物系を用
いた。例えば、ヒト腎細胞癌はインターフェロン−α治
療中に進行する腫瘍増殖を示しそして生存の増加を示さ
なかったが、本発明者はｄｓＲＮＡ治療により腫瘍サイ
ズの有意な減少及び生存の劇的な増加を観察した。確か
に、２〜４年での自然死の後、ｄｓＲＮＡで治療された
マウスの９５％が剖検において組織学的に存在する腫瘍
を有していなかった。これは全く予想外であった。
なぜなら、癌からのリンホカイン（例えばＩＦＮ）によ
り誘導される軽快は非常に生存期間が短かく、そして数
ケ月後に腫瘍を有しない対象は、存在するとしても極め
てまれだからである。従って、組織学的規準及び生存デ
ーターによる９５％の治癒率の観察は最も驚くべきこと
である。さらに、牌ナチニラルキラー（ＮＫ）細胞活性
はｄｓＲＮＡで処理された動物において増加し、他方イ
ンターフェロンで処理されたマウスにおいてはＮＫ活性
の増加は見られなかった。
り誘導される軽快は非常に生存期間が短かく、そして数
ケ月後に腫瘍を有しない対象は、存在するとしても極め
てまれだからである。従って、組織学的規準及び生存デ
ーターによる９５％の治癒率の観察は最も驚くべきこと
である。さらに、牌ナチニラルキラー（ＮＫ）細胞活性
はｄｓＲＮＡで処理された動物において増加し、他方イ
ンターフェロンで処理されたマウスにおいてはＮＫ活性
の増加は見られなかった。
２つの異る外植体モデルにおいて、インターフェロン−
ＴとｃｌｓＲＮＡとの間に増殖阻害の同様な相違が見ら
れ、そして本発明者はまた、上に述べたごとくヒト膀胱
癌ＲＴ４及びヒト脳腫瘍グリオーマＡｌ２３５において
も顕著な相異を観察した。すべての場合において、ｄｓ
ＲＮＡにより処理された動物で腫瘍増殖の有意な阻害が
見られ、他方インターフェロン−ｒ単独では最小の増殖
阻害が見られた。
ＴとｃｌｓＲＮＡとの間に増殖阻害の同様な相違が見ら
れ、そして本発明者はまた、上に述べたごとくヒト膀胱
癌ＲＴ４及びヒト脳腫瘍グリオーマＡｌ２３５において
も顕著な相異を観察した。すべての場合において、ｄｓ
ＲＮＡにより処理された動物で腫瘍増殖の有意な阻害が
見られ、他方インターフェロン−ｒ単独では最小の増殖
阻害が見られた。
有意な差異はまた、牌ＮＫ活性においても見られ、ｄｓ
ＲＮＡによりＮＫ活性が増加したが、インターフェロン
−γによってＮＫ活性は増加しなかった。
ＲＮＡによりＮＫ活性が増加したが、インターフェロン
−γによってＮＫ活性は増加しなかった。
同様の効果が免疫増強において観察された。脳腫瘍を用
いた結果を第６表に示す。投与量は２０．０００ＩＲＵ
のインターフェロン（１日当り）対週２〜３回の、 ｒ
、−、（Ｃ，、−１４，Ｕ）、 （投量当り２００〜５
００■）であった。血液サンプル（足部静脈から逐次的
に得られたもの）の注意深い研究が示すところによれば
、ｄｓＲＮＡ （この明細書において特にことわらなけ
れば化学クラスのもの）は、歴史的に毒性を示す器官で
あった腎、骨髄及び免疫機能に対する不都合な効果を伴
わないで無制限に投与することができた。
いた結果を第６表に示す。投与量は２０．０００ＩＲＵ
のインターフェロン（１日当り）対週２〜３回の、 ｒ
、−、（Ｃ，、−１４，Ｕ）、 （投量当り２００〜５
００■）であった。血液サンプル（足部静脈から逐次的
に得られたもの）の注意深い研究が示すところによれば
、ｄｓＲＮＡ （この明細書において特にことわらなけ
れば化学クラスのもの）は、歴史的に毒性を示す器官で
あった腎、骨髄及び免疫機能に対する不都合な効果を伴
わないで無制限に投与することができた。
次の第６表に、ＩＦＮ−ｒ及び／又はｄｓＲＮＡにより
処理されたマウスの肺細胞における免疫細胞活性を示す
。この研究においては、エフェクター細胞（ヒト腫瘍外
植体を担持する動物の肺臓から外科的に得られた免疫細
胞）を標的細胞（この場合、ヒト脳腫瘍又は細胞）を示
された比率で混合する。
処理されたマウスの肺細胞における免疫細胞活性を示す
。この研究においては、エフェクター細胞（ヒト腫瘍外
植体を担持する動物の肺臓から外科的に得られた免疫細
胞）を標的細胞（この場合、ヒト脳腫瘍又は細胞）を示
された比率で混合する。
エフェクター細胞は免疫系の免疫細胞であり、そして標
的細胞は注目の特定の癌の細胞である。結果を毒性（細
胞死）の％として示す。処置（ＩＦＮｄｓＲＮ八、又は
両方）の結果としてより高い数値が達成される。対照に
比べて高い毒性％が改善された腫瘍細胞の根絶を示す。
的細胞は注目の特定の癌の細胞である。結果を毒性（細
胞死）の％として示す。処置（ＩＦＮｄｓＲＮ八、又は
両方）の結果としてより高い数値が達成される。対照に
比べて高い毒性％が改善された腫瘍細胞の根絶を示す。
第６表
奇妙なことに、この試験においてはＩＦＮ−ｒが対照（
非処理）の場合に比べて少ない細胞を殺し、他方ｄｓＲ
ＮＡ単独が最良の結果を与え、組合せ処理がこれに近か
った。
非処理）の場合に比べて少ない細胞を殺し、他方ｄｓＲ
ＮＡ単独が最良の結果を与え、組合せ処理がこれに近か
った。
無胸腺マウスに移植されたヒト脳腫瘍に対するｃｌｓＲ
ＮＡ 、特にｊＩＴｌ・、（Ｃ，、−，４，Ｕ）ｌ、、
の効果をＩＰＮ−ｒと比べて第４図に示す。これは、長
さＸ幅をｎｕｎ２で表わした腫瘍の二次元サイズを比較
するグラフである。中空丸を結ぶ線が対照群（治療せず
）であり、中空三角を結ぶ線がＩＰＮ−ｒ単独（ｐ＞０
．５）であり、ぬりつぶした四角を結ぶがｄｓＲＮＡす
なわち、 Ｉ、−ｒ（Ｃ，＝、、、 Ｕ）。（ｐ＞０．
５’０）である。実験の開始後、１０〜３０日目に腫瘍
を測定する。対照よりわずかに効果的なＩＦＮ−γと比
較して、ｄｓＲＮＡは腫瘍サイズを減少させるために効
果的であった。
ＮＡ 、特にｊＩＴｌ・、（Ｃ，、−，４，Ｕ）ｌ、、
の効果をＩＰＮ−ｒと比べて第４図に示す。これは、長
さＸ幅をｎｕｎ２で表わした腫瘍の二次元サイズを比較
するグラフである。中空丸を結ぶ線が対照群（治療せず
）であり、中空三角を結ぶ線がＩＰＮ−ｒ単独（ｐ＞０
．５）であり、ぬりつぶした四角を結ぶがｄｓＲＮＡす
なわち、 Ｉ、−ｒ（Ｃ，＝、、、 Ｕ）。（ｐ＞０．
５’０）である。実験の開始後、１０〜３０日目に腫瘍
を測定する。対照よりわずかに効果的なＩＦＮ−γと比
較して、ｄｓＲＮＡは腫瘍サイズを減少させるために効
果的であった。
Ｅ、 ｄｓＲＮＡに応答するリンホカイン耐性腫瘍の
臨床例 ＩＦＮ療法に感受性又は耐性の腫瘍を評価するため、及
びＩＦＮ及びｄｓＲＮ八組合へ療法が臨床的に相剰的で
あるらしい場合を特定するため、動物モデルとは異る他
の方法を開発した。１つのこの様な技法は、Ｈａｍｂｕ
ｒｇｅｒ及びＳａｌｍｏｎ（Ｐｒｉｍａｒｙ Ｂｉ。
臨床例 ＩＦＮ療法に感受性又は耐性の腫瘍を評価するため、及
びＩＦＮ及びｄｓＲＮ八組合へ療法が臨床的に相剰的で
あるらしい場合を特定するため、動物モデルとは異る他
の方法を開発した。１つのこの様な技法は、Ｈａｍｂｕ
ｒｇｅｒ及びＳａｌｍｏｎ（Ｐｒｉｍａｒｙ Ｂｉ。
ａｒｒａｙ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｔｕｍｏｒ Ｓｔｅｍ
Ｃｅ１ｌｓ、 ５ｃｉｅｎｃｅ １９７：４６１−４
６３．１９７７）により開発されたヒト腫瘍コロニー形
成アッセイ法であり、この方法は活性薬物について９０
〜９５％の信頼度、活性薬物について７５〜８０％の信
頼度において細胞レベルで、高い正確さをもって個々の
患者において、抗腫瘍薬物に対する臨床的応答性又は耐
性を確実に予測することができる。
Ｃｅ１ｌｓ、 ５ｃｉｅｎｃｅ １９７：４６１−４
６３．１９７７）により開発されたヒト腫瘍コロニー形
成アッセイ法であり、この方法は活性薬物について９０
〜９５％の信頼度、活性薬物について７５〜８０％の信
頼度において細胞レベルで、高い正確さをもって個々の
患者において、抗腫瘍薬物に対する臨床的応答性又は耐
性を確実に予測することができる。
コロニー形成アッセイはＨａｍｂｕｒｇｅｒ及びＳａｌ
ｍｏｎの方法に従って次の様にして行われる。新鮮な腫
瘍細胞又は白血病細胞を患者から得、そして単細胞懸濁
液に調製する。文献及び他の投与ガイドラインから計算
された候補療法剤の所定の濃度を寒天もしくはメチルセ
ルロースプレートに、又はブレーティング後の細胞に適
用する。細胞を洗浄し、そして寒天又はメチルセルロー
ス上にプレートし、そしてペトリ皿中で３７℃にてイン
キニベートし、細胞コロニーの増殖を許容する。所定の
期間の細胞増殖の後、コロニーを顕微鏡により視覚的に
検査し、そして各ぺ） ＩＪ皿中のコロニー数を計数す
る。次に、コロニーの生物学的所見及び細胞組成、例え
ば細胞形態、細胞核、自己更新、免疫学的所見、無胸腺
（ヌード）マウスにおける細胞の効果、を非常に詳細に
検討する。モノクローナル抗体及び核酸プローブを用い
て細胞を分析する。コロニー形成アッセイはインビトロ
腫瘍細胞化学感受性試験への確実な接近を示す。
ｍｏｎの方法に従って次の様にして行われる。新鮮な腫
瘍細胞又は白血病細胞を患者から得、そして単細胞懸濁
液に調製する。文献及び他の投与ガイドラインから計算
された候補療法剤の所定の濃度を寒天もしくはメチルセ
ルロースプレートに、又はブレーティング後の細胞に適
用する。細胞を洗浄し、そして寒天又はメチルセルロー
ス上にプレートし、そしてペトリ皿中で３７℃にてイン
キニベートし、細胞コロニーの増殖を許容する。所定の
期間の細胞増殖の後、コロニーを顕微鏡により視覚的に
検査し、そして各ぺ） ＩＪ皿中のコロニー数を計数す
る。次に、コロニーの生物学的所見及び細胞組成、例え
ば細胞形態、細胞核、自己更新、免疫学的所見、無胸腺
（ヌード）マウスにおける細胞の効果、を非常に詳細に
検討する。モノクローナル抗体及び核酸プローブを用い
て細胞を分析する。コロニー形成アッセイはインビトロ
腫瘍細胞化学感受性試験への確実な接近を示す。
本発す者の研究者における幾つかの腫瘍検体についてコ
ロニー形成アッセイを行った。完全な又は部分的な応答
を伴わないでｐｏｌｙ Ｉ・ｐｏｌｙ Ｃを投与された
約１００の個体を報告する種々の癌治療シンポジウム（
Ｃｏｍｐｉｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｓｅ ＨＲｅｓ
ｕｌｔｓｗｉｔｈ Ｓｉｎｇｌｅ Ａｎｔｉｎｅｏ
ｐｌａｓｔｉｃ Ａｇｅｎｔｓ、 Ｕ、Ｓ、Ｄｅｐ
ａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｆｌｕ
ｍａｎ ５ｅｒｖｉｃｅｓ ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔ
ｈ ５ｅｒｖｉｃｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎ５ｔｉ
ｔｕｔｅｓ ｏｆ １ｌｅａｌｔｈＶｏ１４．１９８５
＞ において報告された抗腫瘍活性の予想される不存在
に反して、本発明者は、ポリヌクレオチド療法に対して
歴史的に非感受性の広範囲の種類のヒト固形腫瘍におい
てミスマツチｃｌｓＲＮへを使用して４２％の予想応答
率を観察した。
ロニー形成アッセイを行った。完全な又は部分的な応答
を伴わないでｐｏｌｙ Ｉ・ｐｏｌｙ Ｃを投与された
約１００の個体を報告する種々の癌治療シンポジウム（
Ｃｏｍｐｉｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｓｅ ＨＲｅｓ
ｕｌｔｓｗｉｔｈ Ｓｉｎｇｌｅ Ａｎｔｉｎｅｏ
ｐｌａｓｔｉｃ Ａｇｅｎｔｓ、 Ｕ、Ｓ、Ｄｅｐ
ａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｆｌｕ
ｍａｎ ５ｅｒｖｉｃｅｓ ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔ
ｈ ５ｅｒｖｉｃｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎ５ｔｉ
ｔｕｔｅｓ ｏｆ １ｌｅａｌｔｈＶｏ１４．１９８５
＞ において報告された抗腫瘍活性の予想される不存在
に反して、本発明者は、ポリヌクレオチド療法に対して
歴史的に非感受性の広範囲の種類のヒト固形腫瘍におい
てミスマツチｃｌｓＲＮへを使用して４２％の予想応答
率を観察した。
予備臨床評価の目的で、感受性であるとみなされる腫瘍
は腫瘍細胞クローンの数において６０％より大きな細胞
の減少を示した。
は腫瘍細胞クローンの数において６０％より大きな細胞
の減少を示した。
非常に多くの場合、実験室及び臨床の両者において同時
試験を個体に対して行い、種々の一般的クラスのＩＦＮ
及び／又は種々のタイプのインターロイキンに対するそ
れらの腫瘍の感受性を決定した。具体的には、ｃｌｓＲ
ＮＡ研究に関与する個体が、公表された医学データーに
基いて効果的であると信じられる投与量でのインターフ
ェロン又はインターロイキンによる従来不成功であった
臨床治療を経験していた。すべての場合に、特定のリン
ホカインを用いる方法は、−層の腫瘍増殖の防止におい
て不成功であり、そしてほとんどの場合、免疫細胞のプ
ロフィールは変化せず、又は多くの場合において実際に
、特定のリンホカインのみを注入する前の値に対して減
少（悪化）した。
試験を個体に対して行い、種々の一般的クラスのＩＦＮ
及び／又は種々のタイプのインターロイキンに対するそ
れらの腫瘍の感受性を決定した。具体的には、ｃｌｓＲ
ＮＡ研究に関与する個体が、公表された医学データーに
基いて効果的であると信じられる投与量でのインターフ
ェロン又はインターロイキンによる従来不成功であった
臨床治療を経験していた。すべての場合に、特定のリン
ホカインを用いる方法は、−層の腫瘍増殖の防止におい
て不成功であり、そしてほとんどの場合、免疫細胞のプ
ロフィールは変化せず、又は多くの場合において実際に
、特定のリンホカインのみを注入する前の値に対して減
少（悪化）した。
本発明の臨床実験室は少なくとも次の３つの予想外の結
果を確立した。
果を確立した。
・選択されたミスマツチｄｓＲＮＡはｐｏｌｙ Ｉ ・
ｐｏｌｙＣが働かない場合に働く。
ｐｏｌｙＣが働かない場合に働く。
・選択されたミスマツチｄｓＲＮＡは、ＩＦＮのみでは
有効でない場合に有効である。
有効でない場合に有効である。
・選択されたミスマツチｄｓＲＮＡ及びリンホカインの
両者が使用される場合、相剰作用が生ずる。
両者が使用される場合、相剰作用が生ずる。
種々の組織型のヒト腫瘍のミスマツチ（ＩＳＲＮＡに対
する相対的感受性を研究したく第７表を参照のこと）。
する相対的感受性を研究したく第７表を参照のこと）。
経験によれば、種々の腫瘍特に固形腫瘍の大類別の４２
％より多くが、リンホカイン単独への暴露に対して耐性
であったが、ｄｓＲＮＡの特定の分子配置の抗増殖効果
に対して非常に感受性であった。
％より多くが、リンホカイン単独への暴露に対して耐性
であったが、ｄｓＲＮＡの特定の分子配置の抗増殖効果
に対して非常に感受性であった。
組織型
子宮内膜癌
神経膠腫
肺癌
腎細胞癌
カルシノイド
前立腺癌
卵巣癌
乳癌
黒色腫
直腸−結腸癌
肉腫
食道癌
中皮腫
肺臓癌
胃 癌
骨髄芽細胞腫
合 計（１４６）
この観察は、
少なくとも２つの点で予想外であ
る。すなわち、一般にｄｓＲＮＡの歴史的生物安定性、
及びリンホカインの臨床的有用性の欠如である。
及びリンホカインの臨床的有用性の欠如である。
前記のコロニー形成アッセイにおけるＩＦＮ−α、ＩＦ
Ｎ−β及び任意のミスマツチｄｓＲＮＡの効果を、黒色
腫細胞について第５図においてグラフで示す。
Ｎ−β及び任意のミスマツチｄｓＲＮＡの効果を、黒色
腫細胞について第５図においてグラフで示す。
対照コロニーに対する％が−Ｉｏ’ ｒ（Ｃ１＋ １４
＋ ｕ）。
＋ ｕ）。
の量（ｍｇ／’）及びインターフェロン（ＩＲＩＪ／−
７）に対してプロットされており、１００％コロニ一対
照がベースラインとして示されている。なお、両ＩＦＮ
は、細胞毒性量における場合を除き、ベースライン（非
対照）の上方にある。
７）に対してプロットされており、１００％コロニ一対
照がベースラインとして示されている。なお、両ＩＦＮ
は、細胞毒性量における場合を除き、ベースライン（非
対照）の上方にある。
ヒト腎細胞癌におけるＩＦＮ−α及びｒＩｎｒ（ＣＩ２
．Ｕ）、、の相剰的抗増殖効果を、やはり対照コロニー
に対する％として第６図に示す。各組み合せにおいてｍ
ｌ当り５０遅及び１００硝のｒＩｎ−（ＣＩ２’ Ｕ）
ｎの量を用いた。ＩＦＮ−αの濃度は０〜３０００１Ｒ
ＩＩ／ｄ （Ｉ Ｆ Ｎ（ＤＡＡＣ３療法ｍ度ヨリ十分
高い）の範囲とした。最初の読みの後練に切れ目があり
（ＩＦＮＯについて対照コロニーに対して効果がなく、
５０について約６２％、そして１００のｒＴ、、・ｒ（
Ｃ３２，Ｕ）ｈについて約５０％を示す）、次に１００
１Ｒ［Ｉ／ａ／のＩＦＮ−αの読みが存在する。このデ
ーターが示すように、ＩＦＮ−αのみは臨床的に許容さ
れる投与範囲において効果的でないが、これより高い投
与量においてＩＦＮ−αの効果が見られた。しかしそれ
は、臨床的使用には高過ぎる毒性レベルであった。この
アッセイの結果が示すところによれば、効果的な治療の
ためには、ＩＦＮの量は臨床的に許容されるレベルに低
下されなければならず、そして好ましくは他の抗増殖剤
が補充されるか又はそれにより代替されなければならな
い。
．Ｕ）、、の相剰的抗増殖効果を、やはり対照コロニー
に対する％として第６図に示す。各組み合せにおいてｍ
ｌ当り５０遅及び１００硝のｒＩｎ−（ＣＩ２’ Ｕ）
ｎの量を用いた。ＩＦＮ−αの濃度は０〜３０００１Ｒ
ＩＩ／ｄ （Ｉ Ｆ Ｎ（ＤＡＡＣ３療法ｍ度ヨリ十分
高い）の範囲とした。最初の読みの後練に切れ目があり
（ＩＦＮＯについて対照コロニーに対して効果がなく、
５０について約６２％、そして１００のｒＴ、、・ｒ（
Ｃ３２，Ｕ）ｈについて約５０％を示す）、次に１００
１Ｒ［Ｉ／ａ／のＩＦＮ−αの読みが存在する。このデ
ーターが示すように、ＩＦＮ−αのみは臨床的に許容さ
れる投与範囲において効果的でないが、これより高い投
与量においてＩＦＮ−αの効果が見られた。しかしそれ
は、臨床的使用には高過ぎる毒性レベルであった。この
アッセイの結果が示すところによれば、効果的な治療の
ためには、ＩＦＮの量は臨床的に許容されるレベルに低
下されなければならず、そして好ましくは他の抗増殖剤
が補充されるか又はそれにより代替されなければならな
い。
相剰効果の特定の例は、ＪＰＮ−α＋ｒＬ・、（Ｃ，２
Ｕ）、、組み合せ療法について、６３％の黒色腫、５０
％の乳癌、８０％の卵巣癌及び６５％の胃癌において見
られた。従って、これらの例示から次の事が決定される
。（ａ）ＩＪンホヵイン耐性状態における特定のミスマ
ツチｄｓＲＮＡの適用は臨床的に有用である。（ｂ ）
ｄｓＲＮＡ単独に対して耐性である場合、リンホカ
インとの賢明な組み合わせはく６２） 多くのケースにおいて有意な治療利益をもたらすにちが
いない。
Ｕ）、、組み合せ療法について、６３％の黒色腫、５０
％の乳癌、８０％の卵巣癌及び６５％の胃癌において見
られた。従って、これらの例示から次の事が決定される
。（ａ）ＩＪンホヵイン耐性状態における特定のミスマ
ツチｄｓＲＮＡの適用は臨床的に有用である。（ｂ ）
ｄｓＲＮＡ単独に対して耐性である場合、リンホカ
インとの賢明な組み合わせはく６２） 多くのケースにおいて有意な治療利益をもたらすにちが
いない。
ＩＦＮ及びＩＬ−２に臨床的に応答しない悪性黒色腫を
有する中年の男性。ｄｓＲＮＡ（３００ｍｇ、週２回）
の投与が８０日間の治療の終りにおいてすべての検出可
能な腫瘍の完全な除去（腫瘍塊の体積として計算）をも
たらしたく第７図を参照のこと）。
有する中年の男性。ｄｓＲＮＡ（３００ｍｇ、週２回）
の投与が８０日間の治療の終りにおいてすべての検出可
能な腫瘍の完全な除去（腫瘍塊の体積として計算）をも
たらしたく第７図を参照のこと）。
この好ましい応答は最初の治療から約２．５年間続く。
この維持投与量は週２回５０ｍｇ及び１００ｍｇである
。投与量は、実験室パラメーターに照らしての臨床的応
答を考慮して決定され、例えば２′。
。投与量は、実験室パラメーターに照らしての臨床的応
答を考慮して決定され、例えば２′。
５’Ａシンセターセ酵素の相体レベル及びｄｓＲＮＡに
より誘導される効果における活性生物学的中間体を検出
する能力、例えば前記のｃＡＭＰレベル又は腫瘍に捕捉
された状態を示す特定のクラスの２′５’Ａ分子の存在
、及び増強された免疫細胞プロフィールを考慮して決定
される。これはまた第７図に示され、本発明者は２．５
’ −Ａシンセターゼ、ｃＡＭＰ 、及び生物活性２’
、５’−へオリゴマーのほとんど同時的な増加を決定し
た。このいずれもこの患者がリンパ球療を受けた場合、
又は患者の治療されない゛ワラシュ・アラ） （ｗａｓ
ｈ−ｏｕｔ） ”期間中には存在しない。２’、５’−
アデニレート・シンセターゼ活性（ｐｍｏβＡＴＰ／Ｊ
Ｉｇ蛋白質）が、治療開始の数日前、ミスマツチｄｓＲ
ＮＡ治療の開始の後、及び完全な応答（腫瘍体積が実質
的にＯ）が観察される場合には治療の終止において、腫
瘍塊の体積（黒い三角のデーター点で示される）に対し
てプロットされた黒丸データー点により示される。
より誘導される効果における活性生物学的中間体を検出
する能力、例えば前記のｃＡＭＰレベル又は腫瘍に捕捉
された状態を示す特定のクラスの２′５’Ａ分子の存在
、及び増強された免疫細胞プロフィールを考慮して決定
される。これはまた第７図に示され、本発明者は２．５
’ −Ａシンセターゼ、ｃＡＭＰ 、及び生物活性２’
、５’−へオリゴマーのほとんど同時的な増加を決定し
た。このいずれもこの患者がリンパ球療を受けた場合、
又は患者の治療されない゛ワラシュ・アラ） （ｗａｓ
ｈ−ｏｕｔ） ”期間中には存在しない。２’、５’−
アデニレート・シンセターゼ活性（ｐｍｏβＡＴＰ／Ｊ
Ｉｇ蛋白質）が、治療開始の数日前、ミスマツチｄｓＲ
ＮＡ治療の開始の後、及び完全な応答（腫瘍体積が実質
的にＯ）が観察される場合には治療の終止において、腫
瘍塊の体積（黒い三角のデーター点で示される）に対し
てプロットされた黒丸データー点により示される。
さらに、Ｐ３Ａ、と称するオリゴマーを報告する同一患
者についての第８図及び上記（高速液体クロマトグラフ
ィーにより決定）並びにこれらのオリゴマーがミスマツ
チｄｓＲＮＡの投与の後まで現われないことに注目され
たい。なお、これらのオリゴ′マーの存在と臨床応答と
の関係に注目のこと。種々のオリゴマーが、ミスマツチ
ｄｓＲＮＡにより治療の前２５日並びに治療の開始後１
．２３及び５５日日に測定された。２’、５’ −Ａの
低分子量オリゴマー（ダイマー）は抗増殖性、抗ウイル
ス性及び免疫増強性について特に生物安定（ｂｉｏｉｎ
ｅｒｔ）であることが本発明者の研究室及び他の研究室
において確立される。
者についての第８図及び上記（高速液体クロマトグラフ
ィーにより決定）並びにこれらのオリゴマーがミスマツ
チｄｓＲＮＡの投与の後まで現われないことに注目され
たい。なお、これらのオリゴ′マーの存在と臨床応答と
の関係に注目のこと。種々のオリゴマーが、ミスマツチ
ｄｓＲＮＡにより治療の前２５日並びに治療の開始後１
．２３及び５５日日に測定された。２’、５’ −Ａの
低分子量オリゴマー（ダイマー）は抗増殖性、抗ウイル
ス性及び免疫増強性について特に生物安定（ｂｉｏｉｎ
ｅｒｔ）であることが本発明者の研究室及び他の研究室
において確立される。
第９図に示すように、類似の生化学的現象がリンホカイ
ンで活性化されたキラー（ＬＡＫ）細胞活性の長期間の
上昇、及びその結果としての安定な疾患の及び／又は劇
的な腫瘍の退化を示す。第９図においては、ｃｌｓＲＮ
Ａ（左カラム）による治療の３０ケ月以上後の安定化さ
れた疾患状態（カルシノイド癌）を有する患者での上昇
したＬＡＫ活性（非Ｓ Ｉ Ｃｒ放出％として）が、ｄ
ｓＲＮＡ治療を受けなかった固形癌患者（中央カラム）
及び正常者又は対照（右カラム）と比較して示される。
ンで活性化されたキラー（ＬＡＫ）細胞活性の長期間の
上昇、及びその結果としての安定な疾患の及び／又は劇
的な腫瘍の退化を示す。第９図においては、ｃｌｓＲＮ
Ａ（左カラム）による治療の３０ケ月以上後の安定化さ
れた疾患状態（カルシノイド癌）を有する患者での上昇
したＬＡＫ活性（非Ｓ Ｉ Ｃｒ放出％として）が、ｄ
ｓＲＮＡ治療を受けなかった固形癌患者（中央カラム）
及び正常者又は対照（右カラム）と比較して示される。
このデーターは、例えば最初の腫瘍抑制の後の維持療法
において、リンホカイン耐性に直面した場合にさえ、長
期間にわたって良好な臨床効果を維持するために必要と
される療法剤の相対量をモニターするために使用される
。
において、リンホカイン耐性に直面した場合にさえ、長
期間にわたって良好な臨床効果を維持するために必要と
される療法剤の相対量をモニターするために使用される
。
患者２
骨に拡散した癌がｄｓＲＮＡとＩＦＮとの組み合わせに
よって劇的に縮少するという本発明者の認識は特に有意
義である。例えば、腎細胞癌及び広範な骨転移癌を有す
る患者２はわずか１．５ｍユニットの日用量のＪＰＮ−
α及び週２回投与される３００ｍｇのｄｓＲＮＡを受け
た後、迅速且つ長期間の応答を得た。慢性白血病の場合
、同様の治療方法が高い％の個体において長期間の軽快
を誘導し、他方ＩＦＮ−αのみを受けた患者は有意な臨
床的応答を示さなかった。
よって劇的に縮少するという本発明者の認識は特に有意
義である。例えば、腎細胞癌及び広範な骨転移癌を有す
る患者２はわずか１．５ｍユニットの日用量のＪＰＮ−
α及び週２回投与される３００ｍｇのｄｓＲＮＡを受け
た後、迅速且つ長期間の応答を得た。慢性白血病の場合
、同様の治療方法が高い％の個体において長期間の軽快
を誘導し、他方ＩＦＮ−αのみを受けた患者は有意な臨
床的応答を示さなかった。
患者３
ＩＦＮ耐性腎腫瘍を有する中年男性の患者３は、２’、
５’−Ａオリゴマーのプロフィールの変化と同時的な腫
瘍の縮小の開始、ｃへＭＰ経路混乱の迅速な開始、及び
免疫開始活性の劇的な増加を経験した。これらの有意な
臨床的及び実験室的知見は継続する約３６ケ月の間続き
、そして薬物関連副作用はなかった。
５’−Ａオリゴマーのプロフィールの変化と同時的な腫
瘍の縮小の開始、ｃへＭＰ経路混乱の迅速な開始、及び
免疫開始活性の劇的な増加を経験した。これらの有意な
臨床的及び実験室的知見は継続する約３６ケ月の間続き
、そして薬物関連副作用はなかった。
はとんど致命的なそして無活動のタイプの肺癌を含む多
くのリンホカイン耐性腫瘍において同様の観察及び臨床
的成功が得られた。そのデークーを第１０図に要約する
。細胞溶解ユニットとして測定されたＮＫ細胞活性及び
ＣＴスキャンにより測定された縦隔側の腫瘍サイズ（ｍ
ｍ２）の比較。結果は、４００日近いミスマツチｄｓＲ
ＮＡ療法の前、開始及び終了時点で報告される。患者は
腫瘍サイズの測定に基いて、治療に対する完全な臨床応
答を示した。
くのリンホカイン耐性腫瘍において同様の観察及び臨床
的成功が得られた。そのデークーを第１０図に要約する
。細胞溶解ユニットとして測定されたＮＫ細胞活性及び
ＣＴスキャンにより測定された縦隔側の腫瘍サイズ（ｍ
ｍ２）の比較。結果は、４００日近いミスマツチｄｓＲ
ＮＡ療法の前、開始及び終了時点で報告される。患者は
腫瘍サイズの測定に基いて、治療に対する完全な臨床応
答を示した。
第１Δ図は、３０分間にわたりミスマツチｄｓＲＮＡ（
３種類の濃度）により処理されたヒトグリオーマ細胞に
おけるアデニレート触媒活性を測定することによる、ｃ
ＡＭＰレベルの誘導の間接的測定を報告するグラフであ
る。 第１Ｂ図は、２４時間にわたる類似の結果を報告する第
１Ａ図と類似するグラフである。 第２Ａ図は、３０分間にわたってミスマツチｄｓＲＮＡ
（２種類の濃度）により処理されたヒトグリオーマ細胞
におけるＲＩＡ測定による、ｃＡＭＰレベルの誘導の直
接測定を報告するグラフである。 第２Ｂ図は、２４時間にわたる類似の結果を報告する第
２Ａ図に類似するグラフである。 第３図は、ｄｓＲＮＡで処理された細胞について、進行
する脱分化、悪性細胞表現型の喪失、及び非−リンホカ
イン性について、２４ 、４８及び７２時間にわたるヒ
トグリオーマ細胞（未処理、ｄｓＲＮＡ処理、及びＩＦ
ＮとｄｓＲＮＡの両方による処理）中の蛋白質合成を報
告する棒グラフである。 第４図は、未処理（対照）、ＩＦ、Ｎ処理及びｄｓＲＮ
Ａ処理間の、無胸腺マウスに移植された腫瘍の腫瘍サイ
ズ（長さｘ幅）を測定する３１日間の実験の結果のグラ
フである。 第５図は、ＩＦＮ−ａ、ＩＦＮ−β及びｄｓＲＮＡの増
加する量についての、黒色腫細胞のコロニー形成アッセ
イ（ｃｏｌｏｎｏｇｅｎｉｃ ａｓｓａｙ）の結果のグ
ラフである。 第６図は、ＩＦＮ−α単独、並びに０．１００．３０（
１及び１０００ユニツトのＪＰＮ−４と５０及び］Ｏｋ
／−のｄｓＲＮＡとの２つの組み合わせについての、組
み合せの相剰的抗増殖効果を示す、ヒト腎細胞癌におけ
るコロニー形成アッセイの結果のグラフである。 第７図は、７５日間のｄｓＲＮＡ療法の前及び後におけ
る腫瘍体積及び２’、５’−アデニレート・シンセター
ゼ活性についての、悪性黒色腫患者の応答を報告する。 第８図は、第７図の患者におけるｄｓＲＮＡ療法の開始
の前及び後における種々のオリゴマー、特にＰ３Ａ３の
存在を測定する４つの一連のＨＰＬＣグラフである。 第９図は、ｄｓＲＮＡ療法の３０ケ月以上後の安定化さ
れた癌様腫（ｃａｒｃｉｎｏｉｄ ｃａｎｃｅｒ）にお
ける上昇したＬＡＫ活性を、対照としての正常者及びｄ
ｓＲＮＡ療法を受けていない固形癌患者のＬＡＫ活性と
比較して示しており、そして長期にわたり好ましい臨床
効果を維持するために必要とされるｄｓＲＮＡ維持療法
の量をモニターするために使用される。 第１０図は、ミスマツチｄｓＲＮＡ療法のほとんど４０
０日の前と後におけるＮＫ細胞活性及び縦隔側腫瘍サイ
ズとして、腺癌肺腫瘍患者の応答を特徴する
３種類の濃度）により処理されたヒトグリオーマ細胞に
おけるアデニレート触媒活性を測定することによる、ｃ
ＡＭＰレベルの誘導の間接的測定を報告するグラフであ
る。 第１Ｂ図は、２４時間にわたる類似の結果を報告する第
１Ａ図と類似するグラフである。 第２Ａ図は、３０分間にわたってミスマツチｄｓＲＮＡ
（２種類の濃度）により処理されたヒトグリオーマ細胞
におけるＲＩＡ測定による、ｃＡＭＰレベルの誘導の直
接測定を報告するグラフである。 第２Ｂ図は、２４時間にわたる類似の結果を報告する第
２Ａ図に類似するグラフである。 第３図は、ｄｓＲＮＡで処理された細胞について、進行
する脱分化、悪性細胞表現型の喪失、及び非−リンホカ
イン性について、２４ 、４８及び７２時間にわたるヒ
トグリオーマ細胞（未処理、ｄｓＲＮＡ処理、及びＩＦ
ＮとｄｓＲＮＡの両方による処理）中の蛋白質合成を報
告する棒グラフである。 第４図は、未処理（対照）、ＩＦ、Ｎ処理及びｄｓＲＮ
Ａ処理間の、無胸腺マウスに移植された腫瘍の腫瘍サイ
ズ（長さｘ幅）を測定する３１日間の実験の結果のグラ
フである。 第５図は、ＩＦＮ−ａ、ＩＦＮ−β及びｄｓＲＮＡの増
加する量についての、黒色腫細胞のコロニー形成アッセ
イ（ｃｏｌｏｎｏｇｅｎｉｃ ａｓｓａｙ）の結果のグ
ラフである。 第６図は、ＩＦＮ−α単独、並びに０．１００．３０（
１及び１０００ユニツトのＪＰＮ−４と５０及び］Ｏｋ
／−のｄｓＲＮＡとの２つの組み合わせについての、組
み合せの相剰的抗増殖効果を示す、ヒト腎細胞癌におけ
るコロニー形成アッセイの結果のグラフである。 第７図は、７５日間のｄｓＲＮＡ療法の前及び後におけ
る腫瘍体積及び２’、５’−アデニレート・シンセター
ゼ活性についての、悪性黒色腫患者の応答を報告する。 第８図は、第７図の患者におけるｄｓＲＮＡ療法の開始
の前及び後における種々のオリゴマー、特にＰ３Ａ３の
存在を測定する４つの一連のＨＰＬＣグラフである。 第９図は、ｄｓＲＮＡ療法の３０ケ月以上後の安定化さ
れた癌様腫（ｃａｒｃｉｎｏｉｄ ｃａｎｃｅｒ）にお
ける上昇したＬＡＫ活性を、対照としての正常者及びｄ
ｓＲＮＡ療法を受けていない固形癌患者のＬＡＫ活性と
比較して示しており、そして長期にわたり好ましい臨床
効果を維持するために必要とされるｄｓＲＮＡ維持療法
の量をモニターするために使用される。 第１０図は、ミスマツチｄｓＲＮＡ療法のほとんど４０
０日の前と後におけるＮＫ細胞活性及び縦隔側腫瘍サイ
ズとして、腺癌肺腫瘍患者の応答を特徴する
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、腫瘍細胞増殖を悪性細胞表現型の正常化及び喪失に
向けて変性するための、ミスマッチｄｓＲＮＡを含んで
成る医薬。 ２、前記ｄｓＲＮＡが、抗腫瘍増殖活性により証明され
るリンホカイン変性に対して非応答性であるか又は応答
性に至らないｄｓＲＮＡ欠損細胞をリンホカイン変性に
対して応答性にするものである、請求項１に記載の医薬
。 ３、前記ｄｓＲＮＡが、腫瘍細胞に欠けているｄｓＲＮ
Ａと同一の三次元構造を有する、請求項１又は２に記載
の医薬。 ４、インターフェロンと関連して腫瘍細胞増殖制御に関
与するｄｓＲＮＡの腫瘍細胞塊中での合成を誘導するこ
とができる、非応答性の又は応答性に至らない腫瘍細胞
におけるインターフェロンの抗増殖活性を改善するため
の、２′，５′Ａシンセターゼを活性化するミスマッチ
ｄｓＲＮＡを含んで成る医薬。 ５、前記ｄｓＲＮＡが、オリゴマー複合体、ポリマー複
合体又は両者から構成され、そして好ましくは相補的単
鎖ポリマーＲＮＡとハイブリダイズしてｃｄＲＮＡデュ
プレックスを構成するオリゴヌクレオチドを含んで成る
、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬。 ６、前記ｄｓＲＮＡが結合開裂の領域を含有し、そして
ｒＩｎ・ｒ（Ｃ＿１＿１＿−＿１＿４，Ｕ）＿ｎの療法
的比率の性質を示す、請求項１〜５のいずれか１項に記
載の医薬。７、前記リンホカインがインターロイキン又
はインターフェロンである、請求項２〜６のいずれか１
項に記載の医薬。 ８、前記腫瘍細胞が腎腫瘍細胞、悪性黒色腫細胞、慢性
リンパ球性白血病細胞又は肺腫瘍細胞である、請求項１
〜７のいずれか１項に記載の医薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17198288A JPH0225423A (ja) | 1988-07-12 | 1988-07-12 | ミスマッチｄｓＲＮＡ含有医薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17198288A JPH0225423A (ja) | 1988-07-12 | 1988-07-12 | ミスマッチｄｓＲＮＡ含有医薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0225423A true JPH0225423A (ja) | 1990-01-26 |
Family
ID=15933341
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17198288A Pending JPH0225423A (ja) | 1988-07-12 | 1988-07-12 | ミスマッチｄｓＲＮＡ含有医薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0225423A (ja) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59134735A (ja) * | 1982-09-16 | 1984-08-02 | ウイリアム・アルビン・カ−タ− | 抗腫瘍組成物 |
-
1988
- 1988-07-12 JP JP17198288A patent/JPH0225423A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59134735A (ja) * | 1982-09-16 | 1984-08-02 | ウイリアム・アルビン・カ−タ− | 抗腫瘍組成物 |
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