JPH02243636A - ラセミ体混合物からｌ―異性体の単離方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） アミノ酸はヒトの食物および動物試料の双方で重要な添
加物であり、これらの製造および精製は多くの食品産業
に対し絶対に必要となった。多数のアミノ酸は化学的に
、又はブロスから所望アミノ酸の分離および単離を必要
とする醗酵方法を通して製造される。

（従来の技術および発明が解決しようとする課題）多数
のアミノ酸は２つの光学的活性の光学的対常体、し−お
よびＤ−異性体として存在する。化学的加工中製造され
るこれらのラセミ体混合物からこの２つを分離すること
はしばしば多くの適用で選択される。例えばＬ−７エニ
ルアラニンは一般的にはジペプチド甘味料アスバルテー
ム、当業界で公知のアル゛りｙ−Ｌ−アスパルチル−し
−フェニルアラニンメチルエステル（ＡＰＭ）の成分で
ある。ジペプチドはアスパラギン酸およびフェニルアラ
ニンの２つのＬ−異性体から成る場合甘味を有するが、
これらのＤ−Ｌ、Ｌ−Ｄ、Ｄ−Ｄ光学的対掌体は甘味を
有しないことも知られている。さらに、Ｄ−フェニルア
ラニンを含有する任意の光学的対掌体は甘味料としてｌ
１Ｂ（ｆＩがない。

アスバルテームはいくつかの生化学的方法のうち任意の
１方法により合成できるが、これらは−般にカップリン
グ反応を含み、それによってアスパラギン酸はフェニル
アラニン又はそのメチルエステルと結合する。従って、
最終生成物はその光学的対掌体および、未反応フェニル
アラニンおよびアスパラギン酸から分離しなければなら
ない。

非−甘味エステルを加水分解し、フェニルアラニンを回
収することによりＬ−フェニルアラニンを保全すること
は経済的に有利である。しかし、ＡＰＭを製造し、残存
フェニルアラニンを回収するために使用する各種化学処
理工程中い（らかのし−フェニルアラニンはラセミ化す
る。従って、このフェニルアラニンを回収する場合、こ
れはいくらかのＤ−異性体を含有する。Ｄ−異性体はジ
ペプチド甘味料の製造に利用できないので、ラセミ混合
物からできるだけ経済的にＬ−７工ニルアラニン異性体
を分離できることは有用である。

ラセミ体がＬ−異性体をＤ−異性体より多く含む場合、
ラセミ体混合物からアミノ酸の純粋Ｌ−異性体を結晶化
し、単離することは本発明の目的である。特に、し＝お
よびＤ−形の双方から成るラセミ混合物から純粋Ｌ−フ
ェニルアラニンを得ることが本発明の目的である。

Ｌ−およびＤ−異性体の各種分離方法が既知であり、総
称的には分割を意味する。Ｄ、Ｌ−混合物を分割するも
つとも通常的方法は、分割剤として既知の光学的活性化
合物とこれらを併せ、次いで溶液中の化合物（ジアステ
レオマー）の形成Ｕ合物を分別結晶化することを含む。

実際的分割では、ジアステレオマー間に明白な溶解度の
差を有する良好な結晶化挙動を与える分割剤および溶媒
の組み合せを見出すことが必要である。アミノ酸の分割
に適用するこの技術の例はエムミック、アール０．の米
国特許用２．５５６．９０７号およびロジャース、ニー
８．の米国特許用２．６５７゜２３０＠明１ｍ書にある
。これらの特許はり、Ｉ−−リジンを分割する方法を論
じ、光学的に活性のグルタミン酸を分割剤として使用す
る。

さらに最近になって、フェニルアラニンはそのジアステ
レオマーの酵素加水分解により分割された。酵素キモト
リプシンは選択的にＬ−フェニルアラニンエステルを加
水分解する。従ってＬ−フェニルアラニンはり、Ｌ−フ
ェニルアラニンエステルの混合物から回収される。この
方法の例はエムビー、１ム１．のヨーロッパ特許出願第
ＥＰ１７４．８６２号（８／１７／８４）明１書である
。

しかし、上記先行技術方法は、フェニルアラニン誘導体
を形成して所望の異性体を単離するために化学的又はＲ
Ｍ的反応又はこれらのいくつかの組み合せにおいて分割
剤の使用を含む付加的工程を醗酵工程の他に必要とする
。本発明はうセミ休混合物からＬ−異性体を分離し、同
じ工程で、分割剤、当該アミノ酸の誘導体を次に形成づ
°る必凹なしに、そして酵素反応を使用せずに他のアミ
ノ酸塩などから精製することができる。

（Ｅ！Ｒ題を解決するための手段） アミノ酸異性体のり、Ｌ混合物からＬ−異性体の選択的
結晶化方法を記載する。特に、し−フェニルアラニンの
選択的結晶化方法を示す。さらにラセミ体の異性体を結
晶化し、分離することによりＬ−フェニルアラニンの豊
富な母液を製造し、次にこの液からＬ−フェニルアラニ
ンを選択的に結晶化する方法を記載する。純粋Ｌ−フェ
ニルアラニンは真空Ｆに約５．０〜６５℃の温度でラセ
ミ体から結晶化でき、その場合結晶化後溶液に残存する
Ｄ−フェニルアラニンはフェニルアラニン全量の約７．
０％以下である。約５０％Ｄ−および５０％Ｌ−フェニ
ルアラニンから成るラセミ体結晶は上記温度でラセミ体
から結晶化でき、その場合結晶化後溶液中に残存するＤ
−フェニルアラニンはフェニルアラニン全量の約７．０
％以上である。結晶化条件は純粋Ｌ−フェニルアラニン
又は５０％ラセミ体結晶の所望組成を保証するためにゆ
っくりした結晶成長および結晶の熟成を含まねばならな
い。Ｄ−異性体対全フェニルアラニン比が約７．０％以
上である場合、Ｄ−フェニルアラニンによる汚染が７．
０％未満のＬ−フェニルアラニンをさらに沈澱させるに
は、溶液に純粋Ｌ−フェニルアラニンを播種し、次いで
熟成時間を置き、次にゆっくり結晶化させる場合、約５
．０〜５５．０℃で可能である。

本発明はフェニルアラニンのＤ−およびＬ−異性体が２
つの異性体のいずれかが単独で存在するのと同様に半分
のみが溶解するフェニルアラニンのラセミ結晶を形成す
るために組み合せる。過剰のＬ−フェニルアラニンの存
在はり、Ｌ−フェニルアラニン複合体の溶解度を減少す
る。驚くべきことにこの効果に限界がある。この限界は
溶液のある温度範囲又は全体のフェニルアラニンの溶液
濃度下でＤ−フェニルアラニン対全７エニルアラニン（
Ｄ／Ｔ）のほとんど同じ相対比で起こる。

この現象は「限界比」、又は「等飽和点」として引用す
る。この限界で、溶液の物理的状態はＬ−フェニルアラ
ニンおよびり、Ｌ−フェニルアラニン複合体により飽和
していると記載できる。

驚くべきことに、限界比以下の比較的近いＤノエニルア
ラニンレベルで、純粋のＬ−フェニルアラニン結晶は蒸
発による結晶化により沈澱する。

この沈澱はＤ−フェニルアラニンの相対的溶′ａ漠度が
溶液中に全フェニルアラニンの約７．０％（Ｄ／全体≧
７．０％）に達するまで継続する。

純粋Ｌ−フェニルアラニンは、結晶化前１ｃＤ／Ｔは７
．０％より小さく、結晶後Ｄ／Ｔは溶液中に約７．０％
になるように、真空下で約５６０〜６５℃の温度でラセ
ミ体から結晶化できる。

ラセミ体混合物中の−・層高いＤ−フェニルアラニンの
相対的濃度で、すなわちＤ／Ｔ＞７．０％である場合、
ラセミ体り、Ｌ結晶はＤ−フェニルアラニンの相対的温
度が約７．０％に減少するまで蒸発結晶化により沈澱す
る。約５０％Ｄ−および５０％Ｌ−フェニルアラニンか
ら成るラセミ体結晶は、結晶化前にＤ／丁が７．０％以
上で、結晶化後Ｄ／Ｔが溶液中に約７．０％より大きい
か又は等しい場合、約５．０〜１００℃でラセミ体混合
物から結晶化できる。純粋Ｌ−フェニルアラニン結晶又
は５０％ラセミ体結晶の所望組成を保証するために、結
晶化および結晶の熟成はゆっくりした割合で行なうべき
である。

第１図はラセミ体の沈澱による溶液相のＬ−７エ二ルア
ラニンの豊富化を説明する。各種［ｔのフェニルアラニ
ンを水に添加し、水の容量は試料の溶解後１１にした。

溶液は約５０℃に冷却し、次いで濾過した。フェニルア
ラニン試験バッチは１７．３５％Ｄ−フェニルアラニン
（すなわち、Ｄ−異性体高濃度）であった。ｙ軸は溶液
から沈澱したフェニルアラニン％である。ｙ軸は形成溶
液相のフェニルアラニンの比旋光度である。フェニルア
ラニンの形成溶液濃度はすべての場合はほとんど等しく
、約４！Ｍ／Ｊｌであった。これは等飽和点又は溶液の
Ｄ／Ｔの限界比の存在を支持する。何故なら溶液中のフ
ェニルアラニンの比旋光度はフェニルアラニンの沈澱が
多くなる程上昇するが、しかしある点までしか上昇しな
いからである。

第２図では、出発溶液は等飽和点であった。固定相のフ
ェニルアラニンの比旋光度（Ｓ、Ｒ，）は溶液相のもの
と比較できる。低蒸発比では、フェニルアラニンの比旋
光度はいずれの相でも同じである。液体および固体相の
組成は等飽和点における溶液に関しては従って等しいま
まである。ラセミ化がそれ以上の濃度で起こることは予
期できないことであった。さらに、ラセミ化の度合いは
蒸発度に比例する。溶液相のＳ、Ｒ，は蒸発度により変
化しない。この事実は等飽和点又はＤ／Ｔの限界比の存
在を支持する。

Ｄ／Ｔが約７．０％である場合、溶液からフェニルアラ
ニンのそれ以上の沈澱は異性体の相対的溶液濃度を維持
する。従って、Ｌ−フェニルアラニンの過剰の光学的対
掌体を有するラセミ体溶液は、純粋なＬ−フェニルアラ
ニンか、５０％Ｄ−および５０％Ｌ−フＩニルアラニン
から成るラセミ体か、又は２つの結晶組成物の混合物の
いずれかを生成する。

しかし、結晶相の組成は動力学因子により達成できる。

結晶化方法を確立できるラセミ体結晶がほとんどないか
又は全くなく、しかし過剰のＬ−フェニルアラニン結晶
が存在する場合、Ｌ−フェニルアラニンを結晶化させ、
溶液中のＤ−フェニルアラニンの相対的濃度を増加させ
る。純粋Ｌ−フェニルアラニンの存在下の熟成はＬ−フ
ェニルアラニンの結晶化および溶液中のＤ〜フェニルア
ラニンの相対的濃度の上昇に有利である。Ｄ一対全フェ
ニルアラニンの比が約７．０％である場合、Ｌ−フェニ
ルアラニンのそれ以上の沈３ＦＢｔ７．０％より少ない
Ｄ−フェニルアラニンについて約５．０〜５５℃で可能
である。その場合、溶液は純粋Ｌ−７エニルアラニンを
播種し、次いで熟成し、次にゆっくり結晶化させる。

（１）純粋Ｌ−フェニルアラニンの沈澱、（２）５０％
Ｄ−および５０％Ｌ−フェニルアラニンから成るラセミ
体の沈澱および（３）選択的結晶上の方法を組み合せる
ことにより、５０％より少ないラセミ体から過剰のＬ−
７エニルアラニンを分離することができる。分離結果は
一方ではほとんど５０％のラセミ体および他方ではほと
んど純粋のしフェニルアラニンである。従って、Ｄ−フ
ェニルアラニンの少ない任意のレベルでラセミ体を作る
ことができる。

出発物質中のＤ−７１ニルアラニン対結晶生成物中のＤ
−フェニルアラニンおよび対母液中のＤ−フェニルアラ
ニンの関係のモデルは次の方程式に存在する。出発物質
が非常に低いＤ／Ｔを有する場合、この方程式はさらに
沈澱を進行ざぜることによりＤ−フェニルアラニンが許
容しえない程多くなる前にどの位し−フェニルアラニン
を沈澱させうるかを予測するために？！用できる。非常
に高いＤ／−「では、母液のＬ−フェニルアラニンを最
高に豊富化するためにどの位ラセミ体を沈澱させうるか
を予測できる。

％Ｄｔ−％Ｄ、（％Ｐ）−０，０７（％Ｓ）式中、 ％Ｄ、＝出発物質のＤ−フェニルアラニンの相対％、 ％Ｄ、−生成物のＤ−フェニルアラニンの相対％、 ％Ｐ−生成物中の出発物質の％、 ％Ｓ＝溶液に残留する出発物質の％、および０．０７−
等飽和点におけるＤ−フェニルアラニンの相対％の見積
り。

例えば、出発物質が３％のＤ−フェニルアラニンを含有
し、１．５％のＤ−フェニルアラニンが生成物に許容さ
れる場合、生成物として出発物質の約７３％を溶解し、
再沈澱できる。別の態様では、出発物質が３０％のＤ−
フェニルアラニンを有し、ラセミ体は４７％のＤ−７１
ニルアラニンを含有することが予期される場合、し−フ
ェニルアラニン豊富化溶液の回収はうセミ体生成物とし
て出発物質の約５７．５％を溶解し、沈澱きせることに
より７．０％で最高化できる。

本発明の別のＢ様は選択的結晶化によりラセミ体混合物
からＬ−フェニルアラニン豊富化画分の回収である。ラ
セミ体混合物は上記節用２例におけるように創造できる
Ｌ−フェニルアラニン豊富化母液である。この方法はＬ
−フェニルアラニン種子の添加および種子結晶の熟成時
間を含む。この方法は沈澱中のＬ−フェニルアラニンの
豊富化に有利であり、２つの結晶の生長の相対的割合に
影響する。

第３図は上記方法論を商業的方法に如何に組み合せるか
を示す一般図である。出発物質はアスバルテーム（ＡＰ
Ｍ）ｆｆｉ液から回収したり、Ｌ−フェニルアラニンで
ある。Ｄ、Ｌ−フェニルアラニンは溶解タンクに入れ、
任意の再循１１ｆｆ母液と組み合せる。し−フェニルア
ラニンの大部分を溶液に確実に溶解するために、溶液は
約６０〜１００℃、好ましくは９５〜１００℃の上限に
加熱する。次にラセミ体をすべて溶解せずに別な仕方で
約５０％Ｄ−フェニルアラニンラセミ体からＬ−フェニ
ルアラニンを溶解することができる。溶液を冷却し、ラ
セミ体を除去すると、Ｌ−フェニルアラニン豊富化母液
が残る。ラセミ体を除去する温度は熟成中の結晶槽の温
度と略々同じであるべきである。ダルコ炭素を任意には
添加し、溶解タンクの溶液と混合できる。炭素はうセミ
体と一緒に除去でき、御名は当業者に既知のダルコブレ
スのような任意の標準濾過装置により除去できる。母液
の炭素処理は結晶化を妨害し、し−フェニルアラニン生
成物の品質を低下できる不純物を除去する。

溶解タンクに組み入れるフェニルアラニン量は出発物質
および再循環母液双方のＤ−フェニルアラニン濃度を考
慮して計算しなければならない。

これら組み合せた起源のＤ　／　Ｔは次の方程式の％Ｄ
である。、し−フェニルアラニン豊富化母液を製造する
ために除去するラセミ体は方程式のＤＬ−ロスである。

この％は溶解タンクに組み入れねばならない結晶槽中の
所望の溶′ｔｊ、濃度を得るために必要な上記フェニル
アラニン量である。この方程式は母液が７．０％Ｄ−フ
ェニルアラニンを含有するとｍ算される場合およびラセ
ミ体が４７％Ｄフェニルアラニンを含有すると概算され
る場合−Ｆ記方程式から誘導される。

ＤＬ−ロス％−［（％［）　Ｘ　１００）−７００１／
　４０例えば、出発物質が３０％Ｄ−フェニルアラニン
およびラセミ体を有する場合、この物質の５７．５％は
ラセミ体として沈澱する。これは熟成温度が５０℃であ
る場合の上記例の場合であり、この場合所望の溶液濃度
は約４５９／ｌである。

従って溶解タンクに組み入れる濃度は１０６ｇ／ρであ
る。

Ｌ−フェニルアラニン豊富化母液を結晶槽に移す前に結
晶槽及び移送ラインは熟成温度より僅かに高い温度に加
熱すべきである。何故ならうセミ体溶液のいずれかの部
分の突然の冷却は誤った結晶タイプの形成を生じうるか
らである。

母液の結晶槽に移すと、次に溶液から純粋Ｌ−フェニル
アラニンの沈澱を開始させるために純粋Ｌ−フェニルア
ラニンの豊富な用量を播種する。

次いでツイーン界面活性剤を添加し、熟成させる。

熟成温度は約４５．０〜６５．０℃が好ましいが、約２
０．０〜６５．０℃の範囲でよい。熟成はその後溶液か
ら晶出するＬ−フェニルアラニンの純度を改良する。ツ
イーンはいくらかの隙間の水を除去する。結晶は溶液を
ゆっくり冷却することにより形成させる。

こうして形成したＬ−フェニルアラニン結晶は遠心分離
し、約１５．０〜２５，０℃、好ましくは２０．０℃に
冷却した母液から取り出す。結晶はこれらが沈澱する時
に取り出す。この方法で結晶の取り出しに失敗すると手
に余るｍ厚スラリーを形成する。結晶化中母液は遠心分
離機から結晶槽に再循環して結晶の回収を最高にする。

結晶化が完了し、それ以上の結晶を回収できない場合、
母液は次のバッチに対し溶解タンクに再循環する。

方法を反復する前に結晶槽、遠心分＋ｍｔｉおよび処理
ラインを洗滌して残留結晶を除くことが重要である。洗
液は廃棄できる。何らかの残留結晶が存在すると次に選
択的結晶化を妨害することができる。

本発明の他のｒａ様はラセミ体からＬ−フェニルアラニ
ンおよび醗酵１０スから］−一フェニルアラニンを同時
回収することである。し−フェニルアラニンは蒸発結晶
化し、次に再溶解し、炭素により溶解フェニルアラニン
を処理して不純物を除去し、再結晶化することにより回
収する。各結晶化で母液が残り、その全部又は一部は廃
棄する。廃棄母液はＤ−フェニルアラニンのブリードと
して使用できる。必要な最高ブリードは回収中生成し、
回収流に添加されるすべてのＤ−フェニルアラニンが廃
棄液と一緒に残留するようなものである。

廃棄液のＤ−フェニルアラニンがこの流の全体のフェニ
ルアラニンの７．０％より多くない（すなわち、Ｄ／Ｔ
≦７．０％）場合、これは達成できる。いくつかの条件
下では、母液のＤ／Ｔは高くなりうる。

純粋Ｌ−フェニルアラニンはうセミ体として存在するフ
ェニルアラニンをその塩に転換することにより母液から
回収することもできる。これを行なうことにより、５０
％Ｄ−フェニルアラニンラセミ体の溶解度は増大する。

例えばラセミ体の溶解度は次の各条件下で増大する： （１）ＮａＯＨを使用して５０％ラセミ体溶液のｐＨを
上げる場合、 （２）ＮａｌｌＣＯ３を添加し、加熱して５０％ラセミ
体のナトリウム塩を形成する場合、（３）酢酸を使用し
て５０％ラセミ体溶液のＯＨを下げる場合。

ナトリウム塩として、ラセミ体は同一条件下で純粋Ｌ−
フェニルアラニンの２倍溶解する。高８１度の塩はラセ
ミ体の溶解度を明白に増加させることができる。

しかし、選択的結晶化を行なわずに、上記条件下で沈澱
する過剰のＬ−フェニルアラニンは純粋ではなく、通例
結晶化前の溶液のＤ／１−と比較してごく僅かに低いＤ
／Ｔを有する。

選択的結晶化の原理を使用することにより、過剰のＬ−
フェニルアラニンは純粋Ｌ−フェニルアラニンとして沈
澱させることができ、廃棄流のＤ／Ｔは７．０％を超す
ことができる。従って、高濃度の硫酸アンモニウムの存
在で、低り／Ｔラセミ体の蒸発結晶化中、母液の平均Ｄ
／Ｔは塩濃度の増加につれで増加し、純粋Ｌ−フェニル
アラニンを回収できる。しかし、母液のフェニルアラニ
ンの全体の溶解度も減少する。母液のＢＤ／Ｔの不利は
、これらの溶液はＤ／Ｔの増加につれて安定性が低ドす
ることで、従って５０％ラセミ休を突然沈澱させて別な
仕方で純粋Ｌ−フェニルアラニンを汚染できる。従って
、選択的結晶化による場合でさえ、母液のＤ／Ｔは７，
０％を高く超えない（すなわち、Ｄ／゛［６１５，０％
）場合最善である。

数例は本発明の好ましい態様を一層良く実証１るだめに
示す。これらは例示目的のみのもので、特許請求の範囲
に挙げた本発明の精神および範囲を限定するためのもの
ではない。

例１ ３０％のＤ−異性体を含有するラセミ体混合物を８０℃
の温度および約４．５のｐｌ＋で３０ｇ／４１の濃度に
１５１の水に溶解した。このｐＨで、Ｌ−フェニルアラ
ニン異性体の非−水和形が主体を占める。溶液を結晶槽
に供給し、溶液５ｊ毎に真空下で５５℃で、３．７５０
４１の水を蒸発除去した。

次に濃縮液は５０℃に冷却し、濾過してＬ−フェニルア
ラニンの豊富な母液を得た。この方法で製造した３つの
バッチからの母液を併せ、１１の水をこの母液に添加し
た。次に第２然発結晶化は２．７５ｊの水を除去するま
で真空下で８０℃で行なった。蒸発により付加的２．４
Ｊ１の水を除去して１ｇのＬ−フェニルアラニンを結晶
化に対する種子として添加した。この最終濃縮液は濾過
し、溶液から沈澱した結晶を取り出した。

溶液から濾別した結晶の最初のバッチの重ｎは２７３．
８５ｇで、−１３，５の比旋光度を有した。これらは予
期したようにり、Ｌ異性体から成ることが分った。溶液
から沈澱した結晶の第２バツチの重量は４６．１７ｇで
、−３２，３０比旋光度を有することが分った。これは
９９．７％純度のＬ−フェニルアラニンから成ることが
分った。

例２ いくつかのし−フェニルアラニン精製試験を第３図に概
説した回収処理に従って行なった。Ｄ。

Ｌラセミ体は３つの別のＯット試験に対し下記するＤ−
フェニルアラニンの相対的濃度で溶解タンクに加えた。

次に各ロットは本発明に従って４丈イクルにより処理し
た。リストの数字は９である。

出発物質のＤ−フェニルアラニンの相対的濃度はかっこ
で示す。

反人星 ロットＡ ロットＢ ロットＣ 再循還 ダルコブレス 押し出し物 産出滑 ＤＬ−フエ ダルコブレス 押し出し物 ［り循還 純粋Ｌ−フエ 回収画分中 のＤ−７Ｌ％ ナイクル■ ８８７１．０１ （１６，８％） ２５６５．９０ ４４８９、７４ ３２４５．２０ １１６９．６６ サイクル■ ３６１７．２２ ＋２０．１％） ３６１４．９１ ３６１４、８０ ６！１４０．８８（ａ） １１６９．６６ サイクルｍ ３６１７．２２ （２０，１％） ３６１４．９１ ３［ｉ１４．８０ ６６１１５．４５（ｂ） ９４４．１７ サイクル■ ３６１７．２２ （２０，１蔦） ３６１４．９１ ３６１４．８０ ６２９７．４５（ｂ） １５５２．３２ ７５８６．４４　　　　６７１７．８５　　　　７９８
Ｂ、７２９４４．１７　　　　１５５２．３２　　　　
１５４７．２６６５４０．８８　　　　６６４４＋、４
５　　　　６２９７．４５（ａ）　　　　　　　（ｂ）
　　　　　　　（ｃ）１．０８ １．２１ １．１０ ６５９２．４９ １．９１ 注：ａ、ｂおよびＣは再循還フェニルアラニンの９数を
示す。

サイクル：初めのバッチではフェニルアラニンを再循還
しなかった。

実質的に純粋のＬ−フェニルアラニンの回収は本発明方
法により予期できることは上記データから明らかである
。極端に過剰のＬ−フェニルアラニン光学的対掌体を含
有する出発物質では、溶液にＤ−７エニルアラニンを残
し、一方丈質的に純粋のＬ−フェニルアラニンを沈澱さ
せる等飽和爪の原理を適用することができる。出発物質
がしフェニルアラニンを一層低い相対的濃度で含有する
場合、等飽和点を使用して溶液からり、Ｌラセミ体結晶
を沈澱させ、し−フェニルアラニンにより豊富化した母
液を残すことができる。次に所望のＬ−異性体は選択的
結晶化により母液から単離し、精製できる。この方法は
他のアミノ酸の結晶化および精製に、方法に僅かに変更
を加えることにより実用することもできる。

【図面の簡単な説明】

第１図は溶液相のＬ−フェニルアラニンの豊富化を示す
。 第２図はＤ−フェニルアラニン溶液の蒸発結晶化を示す
。 第３図はラセミ体からＬ−フェニルアラニンの回収を示
す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）Ｄ，Ｌラセミ混合物からアミノ酸の実質的に純粋
   なＬ−異性体を単離する方法において、（ａ）ラセミ体
   を溶液状に溶解し、 （ｂ）溶解してい るＤ−異性体の相対濃度が約７．０％になるまで、結晶
   をゆっくり沈澱させるのに充分な時間ラセミ体溶液を蒸
   発し、 （ｃ）この溶液に十分量のＬ−異性体結晶をゆつくり接
   種してさらに結晶の沈澱を生じさせることによりアミノ
   酸のＬ−異性体を選択的に結晶化させ、 （ｄ）Ｌ−異性体結晶を消化するのに十分な温度で混合
   物を加熱し、 （ｅ）この混合物を冷却してＬ−異性体結晶を再沈澱さ
   せ、そして （ｆ）溶液からＬ−異性体結晶を取り出すことを特徴と
   する、上記単離方法。 （２）Ｄ，Ｌラセミ混合物を約６０〜１００℃の温度で
   溶解する、請求項１記載の方法。（３）ラセミ体溶液を
   約４０〜８０℃の温度で真空下ゆつくり蒸発する、請求
   項２記載の方法。 （４）温度は約４５〜５５℃である、請求項３記載の方
   法。 （５）Ｌ−異性体結晶は約２０〜６５℃の温度でゆつく
   り加熱することにより消化させる、請求項４記載の方法
   。 （６）温度は約４５〜６５℃である、請求項５記載の方
   法。 （７）高Ｌ／Ｄ異性体比を有するフェニルアラニンのラ
   セミ混合物から実質的に純粋のＬ−フェニルアラニン画
   分を単離する方法において、 （ａ）ラセミ体を溶液状に溶解し、 （ｂ）溶液中のＤ−フェニルアラニンの相対濃度が７．
   ０％に達するまで実質的に純粋のＬ−フェニルアラニン
   をゆつくり沈澱させるため十分な時間溶液を蒸発し、 （ｃ）Ｌ−異性体結晶をさらに沈澱させるため、この溶
   液に十分量のＬ−フェニルアラニン結晶をゆつくり接種
   することによりＬ−フェニルアラニンを選択的に結晶化
   させ、 （ｄ）Ｌ−異性体結晶をゆつくり消化するのに十分な温
   度で混合物を加熱し、 （ｅ）混合物を冷却して実質的に純粋のＬ−フェニルア
   ラニン結晶を沈澱させ、そして （ｆ）溶液から結晶を取り出すことを特徴とする、上記
   単離方法。 （８）Ｌ／Ｄ異性体比は少なくとも９３：７である、請
   求項７記載の方法。 （９）Ｄ，Ｌラセミ体混合物を約６０〜１００℃の温度
   で溶解する、請求項８記載の方法。 （１０）溶液は再循還母液である、請求項９記載の方法
   。 （１１）溶液を約４０〜８０℃の温度で真空下にゆっく
   り蒸発する、請求項１０記載の方法。 （１２）温度は約４５〜５５℃である、請求項１１記載
   の方法。 （１３）Ｌ−フェニルアラニン結晶は混合物を約２０〜
   ６５℃の温度に加熱してゆっくり消化する、請求項１２
   記載の方法。 （１４）温度は約４５〜６５℃である、請求項１３記載
   の方法。 （１５）実質的に純粋のＬ−フェニルアラニン結晶を再
   沈澱する前に界面活性剤を添加する、請求項１３記載の
   方法。 （１６）低Ｌ／Ｄ異性体比を有するフェニルアラニンの
   ラセミ体混合物から実質的に純粋のＬ−フェニルアラニ
   ン画分を単離する方法において、 （ａ）ラセミ体を溶液に溶解し、 （ｂ）溶液中のＤ−フェニルアラニンの相対濃度が約７
   ．０％に達するまでＤ，Ｌ−フエニルアラニンラセミ体
   結晶を沈澱させるため、十分な時間溶液を蒸発し、 （ｃ）溶液から沈澱を除去し、 （ｄ）沈澱を生じさせるために十分量のＬ−フエニルア
   ラニン結晶を溶液にゆっくり接種することにより溶液に
   残留するＬ−フェニルアラニンを選択的に結晶化させ、 （ｅ）Ｌ−フェニルアラニン結晶をゆっくり消化させる
   のに十分な温度で溶液を加熱し、（ｆ）溶液を冷却して
   実質的に純粋のＬ−フェニルアラニン結晶を再沈澱させ
   、そして （ｇ）溶液から結晶を取り出すことを特徴とする、上記
   単離方法。 （１７）Ｄ，Ｌラセミ体混合物のＤ−フェニルアラニン
   の相対濃度は約８．０〜５０．０％である、請求項１０
   記載の方法。 （１８）Ｄ，Ｌラセミ体混合物を約６０〜１００℃の温
   度で溶液状に溶解する、請求項１７記載の方法。 （１９）溶液を約４０〜６０℃の温度で真空下蒸発する
   、請求項１８記載の方法。 （２０）温度は約４５〜５５℃である、請求項１９記載
   の方法。 （２１）Ｌ−フェニルアラニン結晶は約２０〜６５℃の
   温度に混合物を加熱してゆっくり消化させる、請求項２
   ０記載の方法。 （２２）温度は約４５〜６５℃である、請求項２１記載
   の方法。 （２３）溶液は再循還母液である、請求項１７記載の方
   法。 （２４）再循還母液は前のフェニルアラニンの選択的結
   晶化から回収する、請求項２３記載の方法。 （２５）再循還母液はアスバルテーム合成反応から回収
   する、請求項２３記載の方法。 （２６）さらにラセミ体混合物に金属塩を添加する、請
   求項１７記載の方法。 （２７）金属塩は水酸化ナトリウムである、請求項２６
   記載の方法。 （２８）金属塩は炭酸ナトリウムである、請求項２６記
   載の方法。 （２９）Ｄ，Ｌラセミ体混合物に酢酸を添加する、請求
   項１７記載の方法。 （３０）次の工程： （ａ）ラセミ体を溶液に溶解し、 （ｂ）溶液中のＤ−フェニルアラニンの相対濃度が約７
   ．０％に達するまで第１結晶タイプを沈澱させ、 （ｃ）さらにＬ−異性体結晶の沈澱を生じさせるために
   十分量のＬ−フェニルアラニン結晶を溶液にゆつくり接
   種することによりＬ−フェニルアラニンを選択的に結晶
   させ、 （ｄ）Ｌ−異性体結晶をゆっくり消化するのに十分な温
   度で混合物を加熱し、 （ｅ）混合物を冷却して実質的に純粋のＬ−フェニルア
   ラニン結晶を再沈澱させ、そして（ｆ）溶液から結晶を
   取り出すことを特徴とする、フェニルアラニンのラセミ
   体混合物から実質的に純粋のＬ−フェニルアラニン画分
   を単離する方法。 （３１）ラセミ体は約６０〜１００℃の温度で溶液に溶
   解する、請求項３０記載の方法。（３２）第１結晶タイ
   プは約４０〜６０℃の範囲の温度に溶液を冷却すること
   により沈澱する、請求項３１記載の方法。 （３３）ラセミ体混合物は高Ｌ／Ｄ異性体比から成る、
   請求項３１記載の方法。 （３４）第１結晶タイプは実質的に純粋のＬ−フェニル
   アラニンから成る、請求項３３記載の方法。 （３５）ラセミ体混合物は低Ｌ／Ｄ異性体比から成る、
   請求項３１記載の方法。 （３６）第１結晶タイプはＤ，Ｌフエニルアラニンラセ
   ミ体から成る、請求項３５記載の方法。 （３７）Ｌ−フェニルアラニン結晶は約２０〜６５℃の
   温度に混合物を加熱することによりゆつくり熟成させる
   、請求項３４又は３６記載の方法。 （３８）温度は約４５〜６５℃である、請求項３７記載
   の方法。 （３９）純粋Ｌ−フェニルアラニンは約４０〜６０℃の
   温度範囲に溶液を冷却することにより再沈澱させる、請
   求項３８記載の方法。 （４０）実質的に純粋のＬ−フェニルアラニン結晶の再
   沈澱前に界面活性剤を添加することをさらに含む、請求
   項３９記載の方法。