JPH0219325A - 感染症を防除するためのヒト免疫グロブリンおよびインターロイキン―２の組み合わせ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、感染症を防除するために有効な薬物としての
ヒト免疫グロブリンおよびインターロイキン−２の組み
合わせの使用に関する。

（従来の技術並びに発明が解決しようとする課題）イン
ターロイキン−２は、モーガン（Ｍｏｒｇａｎ）らによ
り、レクチン活性化ヒト抹消単核細胞の培養物からの残
留物中において、１９７８年において初めて発見され、
そしてそれは活性化Ｔ−リンバ球の培養を可能とするの
で、初めて「Ｔ細胞増殖因子（ＴＣＧＰ）　Ｊと呼ばれ
た（Ｍｏｒｇａｎ、Ｄ、Ａ、。

Ｒｕ５ｃｅｔｔｉ、Ｐ、Ｗ、、およびＧａ１ｌｏ、Ｒ，
Ｇ、、正常ヒト骨髄からの１９２３球の生体外増殖にお
ける選択（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　Ｉｎ　ｖｌｔｒｏ　ｇ
ｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｔｌｙｓｐｈｏｃｙｔｅｓｔｒｏｔ
ｓ　　ｎｏｒｍａｌ　　ｈｕｍａｎ　　ｂｏｎｅ　　ｍ
ａｒｒｏｗ、　　５ｃｉｅｎｃｅ１９３　　（１９７Ｂ
）　、１００７　）。

「インターロイキン−２」という名称は、エルマチンゲ
ン（Ｅｒ−ａｔｌｎｇｃｎ）における第２回国際研修会
（Ｓｅｃｏｎｄ　ＩｎｔｅｒｎａＬｌｏｎａｌ　Ｗｏｒ
ｋｓｈｏｐ　）において造り出された（Ａａｒｄｅｎ、
Ｌ、＾１．抗原非特異的Ｔ細胞の増殖およびヘルパー因
子についての改訂した命名法（Ｒｅｖｌｓｅｄ　ｎｏＩ
Ｉｅｎｃ＋ａｔｕｒｅ　ｆ’ｏｒａｎｔｉｇｅｎ−ｎｏ
ｎｓｐｅｃｌｒｌｃ　Ｔ−ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｌｒｅｒ
ａｔｌｏｎａｎｄ　ｈｅｌｐｅｒ　ｆａｃｔｏｒｓ）　
、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、１２３　（１９７９）　。

２９２８）。

ヒトインターロイキン−２は末梢血液のリンパ球から得
られ、そしてそのグリコジル化の程度に依存して、１４
．５００〜１７．０００の分子量の高度に疎水性の糖タ
ンパク質である。インターロイキン−２遺伝子は染色体
Ｇ上に位置する。タニグチらは、インターロイキン−２
は１３３アミノ酸および３システイン残基の単一のポリ
ペプチド鎖から成り、それらの２つは生物学的活性に必
須であるジサルファイド架橋を構成することを立証した
Ｃ　Ｔａｎｌｇｕｃｈｌ　、Ｔ、　、Ｍａｔｔｎｉ、１
．　、Ｐｕｊｉｔａ。

Ｔ、Ｔａｋａｏｋａ、Ｃ，、Ｋａｓｈｌｎ＋ａ、Ｎ、、
Ｙｏｓ旧ｍｏｔｏ、Ｒ，、およびＩｌａｍｕｒｏ、　Ｊ
、、　ヒトインターロイキン−２についてのクローニン
グしたｅＤＮＡの構造および発現（Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　０１’　ａ　ｃｌｏ
ｎｅｄ　ｃＤＮＡｒｏｒ　ｈｕｎ＋ａｎ　Ｉｎｔｅｒｌ
ｅｕｋｉｎ−２）、Ｎａｔｕｒｅ　３２　　（１９８３
）、３０５　）。

インターロイキン−２は、それが生物学的作用を有する
ことができる前に、その受容体に結合しなくてはならな
い。ペプチドのホルモンは内面化されており、そして、
最終的に細胞の分割を起こすシグナルはまだ未知の機構
によって伝達される。

インターロイキン−２の生物学的作用は多様である。前
述のＴ細胞増殖因子の性質に加えて、それは増殖と独立
の作用を有する。例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細
胞の細胞障害活性の増加、 リンフ才力イン活性化キラー（ＬＡＫ）細胞の細胞障害
活性の誘発、 細胞障害性１９２６球へのリンパ球の分化、および インターフェロンγおよび他のサイト力インの合成活性
化である（Ｐｉｎｋ、Ｒ，およびＤａｎｃｙｇｌｃｒ。

Ｉｌ、、インターロイキン−２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｌ
ｎ−２）、ＤＭＶ　１１２　　（１９８７）　、１８８
−１９３３゜これらの生物学的活性は、生体外および生
体内の両者において立証され、インターロイキン−２が
Ｔ細胞依存性免疫性において中心部分を演じ、そして細
胞の免疫応答を増強することを示す。したがって、それ
はかなでも体液の免疫系になんらかの作用を有すること
を期待出来ない。

免疫グロブリン調整物は、患者の体液免疫系が感染の危
険を減少するために十分な抗体をもたないとき、主に使
用される。したがって、免疫グロブリンは次の指示に従
って使用される。

即ち、 感染因子に対する抗体が部分的にあるいは完全に存在し
ない、感染感受性患者における予防のため、 体液免疫系における遺伝または後天性欠損のため、抗体
を産生ずることができないか、あるいは、例えば、外部
の事象のために、それらを失った患者における置換のた
め、および手術、事故または免疫抑制の治療を実施した
か、あるいは、例えば、セブシスのような手術後の合併
症を有する患者において処置して、抗体の消費の増大に
対処するために使用される。

感染症の防除における免疫グロブリンの免疫生物学的有
効性を改良する方法を発見する試みが、絶えず続けられ
て来ている。

免疫グロブリンを、例えば、抗体および／または他の製
薬学的に活性な物質と組み合わせることは記載されてい
る。

バクテリアの抗原の免疫グロブリン指令凝集反応は、抗
原−食作用性および飲作用性免疫細胞による、これらの
異質タンパク質の結合、認識、発現及び排除に導く。

本発明の目的は、より免疫生物学的に有効な薬物を提供
することである。

（課題を解決するための手段、発明の作用及び効果）こ
の目的は、本発明に従い、感染症を防除するために免疫
学的に有効な薬物として、ヒト免疫グロブリンと自然イ
ンターロイキン−２および／′または組み換え体インタ
ーロイキン−２の形態のヒトインターロイキン−２との
組み合わせの使用によって実現される。

驚くべきことには、免疫グロブリンをインターロイキン
−２と組み合わせると、種々の濃度のインターロイキン
−２（ｌ１独の投与が体液免疫系に効果をもたないが、
前者の効果を増強することが発見された。驚くべきこと
には、これが示すように、インターロイキン−２は細胞
免疫仲介因子の能力でＢ細胞仲介体液防御に陽性の効果
を有する。

本発明による薬物は、微生物の感染ばかりでなく、かつ
またウィルスの感染を防除するために適当である。

それらは治療および予防の双方に使用することができる
。

自然インターロイキン−２または組み換え体インターロ
イキン−２のいずれをも使用することができる。

予防は少なくとも特定の最小量のインターロイキン−２
を必要とする。マウスの試験は、１００単位／動物より
少ない投与量が効果をもたないことを立証した。マウス
の体重が２０〜３０ｇであると仮定すると、はぼ３〜５
　ｘ　１０７　Ｕ／ｋｇの最小投与量を推定することが
できる。

上限は確立されていないが、１．５　ｘ１０７単位／マ
ウスより多い量では本質的な増強は起こらないことが発
見された。したがって、インターロイキンの好ましい投
与量の範囲は、１０３〜１０７Ｕ／ｋｇである。

これに関して使用する「単位」は、ＢＲＭＰの参考文献
（Ｄｕｉｏｎｄｅ、Ｄ、Ｃ，およびＰａｐｅｒｍａｓｔ
ｃｒ、Ｂ、Ｗ、。

ヒトインターロイキン−２の標準試薬の利用可能性（＾
ｖａｌｌａｂ１１ｉｔｙ　ｏｆ’　ａ　ｒｅｆｅｒｅｎ
ｃｅ　ｒｅａｇｅｎｔｏｆ’　ｈｕｍａｎ　１ｎｔｅｒ
ｌｅｕｋｉｎ−２）ルｙｍｐｈｏｋｌｎ　Ｒｅ５ｅａｒ
ｃｈ３　（１９８４）　、２２７）との比較から計算し
た。

免疫グロブリンはいずれのヒト免疫グロブリンであるこ
ともできるが、ＩｇＧ　ＳＩｇＡおよびＩｇＭの混合物
は好ましい。

免疫グロブリンの投与量に特別の制限は存在しない、　
０．０１５　ｍｇ／動物（ＯＪｍｌの５％の溶液）を実
験的理由でマウスとともに使用し、そして適当な投与量
はほぼ０．２５〜１５ｍｇ／にｇの範囲である。

前述の投与量の範囲のインターロイキン−２を、任意の
方法で、前述の投与量の範囲の免疫グロブリンと組み合
わせることができる。１０５Ｕ／ｋｇのインターロイキ
ン−２および０．７５ｍｇ／ｋｇの免疫グロブリンの組
み合わせは、ことに有効であることがわかった。

本発明による薬物は、混合した状態で、あるいは分離し
た相で、インターロイキン−２および免疫グロブリンを
含有することができる。２つの相をまた任意の順序で連
続的に投与することも、また同時に投与することもでき
る。調整物は液状として、または凍結乾燥物として存在
することができ、そして凍結乾燥物はまず溶解しなくて
はならないか、あるいは基剤に付けるか、またはカプセ
ルで取り囲む。

（実施例） 本発明を次の実施例を参照して説明する。

実施例１ 免疫グロブリンおよびインターロイキン−２の有効性を
、マウスについての感染防止実験において試験した。最
適濃度より低い免疫グロブリンを使用して、相乗性を立
証した。ＮＭ旧−３ＰＦマウスに、３Ｘｌθ′のネズミ
チフス菌（Ｓａｌｓｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉｓｕｒｌ
ｕ−）生体の各々を腹腔内に感染させた。この試験は３
０匹のマウスから成る４群を包含した。

免疫グロブリンはヒトＩｇＧ　、　ＩｇＭおよびＩｇＡ
の混合物の５％の溶液であった。

インターロイキンは自然ヒトインターロイキン−２であ
った。

群Ａは免疫グロブリン（０，３ｍｌ／動物の５％の溶液
）およびインターロイキン−２（１５，０００Ｕ／動物
）で処置した。

群Ｂは免疫グロブリン単独（０，３ｍｌ／動物の５％の
溶液）で処置した。

群Ｃはインターロイキン−２単独（１５，００００／動
物）で処置した。

群りは対称群であり、そしてその構成員は処置を受けな
かった。

群Ａ−Ｃにおける動物に、感染２時間後に、調製物を腹
腔内に投与した。有効性の基準は、特定の調製物で処置
しかつ感染後８日間生存する動物の数であった。第１図
に結果を示す。

一方において群Ｂおよび群Ｃおよび他方において群Ａの
間の観測された差は、Ｘ２テスト（参照、Ｅ、Ｗｅｂｅ
ｒ　Ｇｒｕｎｄｒｌｓｓ　ｄｅｒ　ｂｌｏｌｏｇｌｓｃ
ｈｅｎＳｔａｔｉｓｔｉｋ　　第７版、Ｇｕｓｔａｖ　
ＰｉｓｃｈｅｒＶｅｒｌａｇ、、ｐｐ、５００−５１５
　）において著しかった。

インターロイキン−２それ自体はほんのわずかの予防効
果を示すが、それと免疫グロブリンとの組み合わせは驚
くほどの増強を生ずる。免疫グロブリン単独は感染から
動物の３２％のみ、およびインターロイキン−２単独は
動物の２７％のみを保護し、両者の組み合わせは６３％
を救った。

実施例２ この試験は実施例１に記載するものと同一であるが、イ
ンターロイキン−２の投与量は高かった。インターロイ
キン−２に関して発見された予防作用は投与量依存性で
あり、１００　Ｕ／動物以下では作用は観ｎ１されない
が、１５．００００／動物より高い投与量においてそれ
以上の増加が観察されない。

表　　１ ネズミチフス菌（Ｓａｌｉｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｌｍ
ｕｒｌｕｍ）の感染のモデルにおける免疫グロブリンと
自然インターロイキン−２との組み合わせ：インターロ
イキンー２の（相乗）効果の投与量依存性インターロイ
キン−２ 合計の投与量 単位／動物 ｔｏｏｏ。

免疫グロブリン との組み合わせの 予防作用 最大作用の％ 各群は１５匹のＮＭＲ＋マウスからなり、各々に４．５
　ＸＩＯ３の生体で腹腔内感染し、そして同時に免疫グ
ロブリン（０，３ｍｌの５％シバの溶液）と前述の合計
量のインターロイキン−２／動物の組み合わせを同時に
腹腔内投与した。

実施例３ 試験は実施例１におけるように実施したが、インターロ
イキン−２は感染の前後に投与した。

インターロイキン−２は感染前の５時間までに投与し、
その予防作用は有意であった（ｐ≦０．０５、参照、下
表２）。その予防作用は、感染後２〜６時間に投与した
とき、また、有意であった。

表　　２ ネズミチフス菌（Ｓａｌｎ＋ｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉ
ｍｕｒｌｕｍ）の感染のモデルにおける免疫グロブリン
と自然インターロイキン−２との組み合わせ：感染に関
して異なる時間に投与したインターロイキン−各群は１
５匹のＮＭＲＩマウスがらなり、各々に４．５ＸｌＯ’
の生体で腹腔内感染し、そして接種の前、同時または後
に、記載する時間に、■、５ＸｌＯ’Ｕの自然インター
ロイキン−２（Ｏ，３ｍｌの５％ｗ／ｖの溶液）を腹腔
内投与した。

【図面の簡単な説明】

第１図は、免疫グロブリン及びインターロイキン−２の
有効性の試験結果を示す特性線図である。 処　　置 ＩＬ−２、 ＩＬ−２、 ＩＬ−２、 対照、 群 感染５時間前 感染３時間前 感染直後 未処置 ロー ｎ日後の生存％ 特　許　出　願　人　　ビオテスト　ファルマゲゼルシ
ャフト　ミツト ベシュジンクター ハフラング 外３名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、感染症を防除するために免疫学的に有効な薬物とし
   て、ヒト免疫グロブリンと自然インターロイキン−２お
   よび／または組み換え体インターロイキン−２の形態の
   ヒトインターロイキン−２との組み合わせの使用。 ２、薬物は単位として包装されており、そして２つの空
   間的に分離された組成物から成り、その一方の相はヒト
   免疫グロブリンを含有し、そして他方の相は自然インタ
   ーロイキン−２および／または組み換え体の形態のヒト
   インターロイキン−２を含有し、そして２つの相は同時
   にまたは任意の順序で連続的に投与できることを特徴と
   する上記第１項記載の使用。 ３、免疫グロブリンはＩｇＧであることを特徴とする上
   記第１または２項記載の使用。 ４、免疫グロブリンはＩｇＧ、ＩｇＡおよび／またはＩ
   ｇＭから構成されていることを特徴とする上記第１また
   は２項記載の使用。 ５、混合物の比は０．２５〜１５ｍｇの免疫グロブリン
   対１０＾２〜１０＾７Ｕのインターロイキン−２の範囲
   であることを特徴とする上記第１〜４項のいずれかに記
   載の使用。６、混合物の比は０．７５ｍｇの免疫グロブ
   リン対１０＾６Ｕのインターロイキン−２であることを
   特徴とする上記第５項記載の使用。