JPH01503540A - ヒトにおける器官移植片拒否反応の予防又は処置を目的とする活性剤又はそれを含有する薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ヒトにおける器官移植片拒否反応の予防又は処置を目的とする活性剤又はそれを 含有する薬剤本発明はヒトにおける器官移植拒否反応の予防又は処置を目的とし た活性剤、のみならずその活性剤を含有する薬剤に関する。

ヒト容管移植の普遍化の増大と共条こ、移植拒否反応の予防及び処置の有効手段 が外科診療及び研究において益々重要になって来ている。

本発明はかかる手段を提供する。本質的にこの薬剤は、インビトロで細胞毒性は ないが、それにも拘らずインターロイキン２によって誘発される細胞増殖を抑制 することができる活性化された１９２３球をこよって運ばれるヒトインターロイ キン２（ＩＬ２）受容体に対するモノクローン抗体からなる。

インターロイキン２はインビトロで１９２３球クローンの成長に必要な成長因子 として認められている（　５ｃｉｅｎｃｅ１９７６　；１９３：　１００７〜１ １（１１のＭＯＲＧＡＮＤ、Ａ、。

ＲＵＳＣＥＴＴＩ　Ｆ、Ｗ、、　ＧＡＬＬＯＲ，の論文５ｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｉ ｎ　ｖｉｔｒ。

ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｔ　１ｙｍｐｈｏｃＹｔｅ　ｆｒｏｍ　ｎｏｒｍａｌ　ｈ ｕｍａｎ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ参照〕。それが高い親和性を示すために特異 的受容体との相互作用によってそれは作用する（Ｊ、Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、１９８１ ゜１５４；１４５５〜６７（２）のＲＯＢＢ　Ｒ，、Ｔ、、　ＭＵＮＣＫ　Ａ、 、　ＳＭＩＴＨＫ、Ａ、の論文τ−ｃｅｌｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒ ｅｃｅｐｔｏｒｓ、Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ　ａｎｄ 　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｒｅｌｅｖａｎｃｅ　参照３０１９２２球膜の表面で のＩＬ受容体（Ｒ−ＩＬ２）発現は抗原活性化による抑制下にあり、ＩＬ２自体 による追加の調節を受ける（Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、１９８６　；１３６：　１６ ９３〜９９ｊ３）、ＪＡＣＱＵＥＳＹ、、　ＬＥ　ＭＡＵＦＦ　Ｂ、、　ＧＯＤ ＡＲＤ　Ａ、、　０ＬＩＶＥ　Ｄ、、　ＭＯＲＥＡＵ　１．Ｆ、。

５ＯＵＬＩＬＬＯＬＩ　Ｊ、Ｐ、の論文、Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｎｔ ｅｒｌｅｕｋｉｎ　２ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｎ　ａ　ｈ ｕｍａｎ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｃｌｏｎｅ　ｓｙｎ ｅｒｇｉｓｍ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎｉｃ　ｓｔｉｍｕｌａ ｔｉｏｎａｎｄ　ＩＬ　２．参照〕。

Ｒ−ＩＬ２はα鎖（５５１Ｃｄ）　（Ｔａｃ抗原）及び最近発表されたβ鎖（７ ５Ｋｄ）からなる複合体として現われ、両鏡は高親和性部位発現を要とする（　 ５ｃｉｅｎｃｅ　１９８６　；　１３４；８５９〜６３（４１，５ＨＡＲＯＮ　 Ｍ、、　ＫＬＡＵＳＮＥＲＲ，Ｐ、、　ＣＵＬＬＥＮ　Ｂ。

Ｒ，、ＣＨＩＺＺＯＮＩＴＥ　Ｒ，、ＬＥＯＮＡＲＤ　Ｗ、Ｊ、の論文、Ｎｏｖ ｅｌＩｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ　−２Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　５ｕｂｎｉｔ　ｄｅｔｅ ｃｔｅｄ　ｂｙ　ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｇｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ａｆｆｉｎｉ ｔｙ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　参照〕。

活性化されたＴ　９ンパ球のインビトロでのＩＬ２誘発増殖を抑制することがで きるげっ歯石のＲ−ＩＬ２特異的モノクローン抗体はまたマウスの心臓同種移植 拒否プロセスを予防又は転換することができることが証明されたことが知られて いる（Ｊ、Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、１９８５　；　１６２：　３５８〜６２（５）、Ｋ ＩＲＫＭＡＮ　Ｒ，Ｌ、、　ＢＡＲＲＥＴ　Ｌ、Ｖ、、　ＧＡＵＬＴＯＮ　Ｇ、 Ｎ、、　ＫＥＬＬＥＹＶ、、　ＹＴＨＩＥＲＡ、、　ＳＴＲ０Ｍ　Ｔ、Ｂ、の論 文Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆａｎ　ａｎｔｉ−ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉ ｎ　２　ｒｅｅｅｐｔｅｒ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｙｐｒｏｌ ｏｎｇｓ　ｃａｒｄｉａｃ　ａｌｌｏｇｒａｆｔ　５ｕｒｖｉｖａｌ　ｉｎ　ｍ １ｃｅ参照〕　；またマウスに皮ふ移植拒否反応を遅らせることも知られている （　Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、１９８６　；　１３６　：　８９８〜９０２　（６１ 、ＧＲＡＮＤＳＴＥＩＮ　Ｒ，Ｄ、、　ＧＯＵＬＳＴＯＮ　Ｃ，、ＧＡＵＬＴＯ Ｎ　Ｇ、Ｎ、の論文、Ｐｒｏｌｏｎｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｕｒｉｎ　５ｋｉｎ 　ａｌｌｏｇｒａｆｔ　５ｕｒｖｉｖａｌ　ｂｙｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｅ　ｍａ ｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉ−ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ　２ｒｅ ｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔｉｂｏｄｙ参照〕、サルにおける腎移植拒否反応を遅らせ ることも知られている（　Ｔｒａｎｓｐｌｔ、Ｐｒｏｅ、　１９８７　；５９４ 〜９　８　（７）、　５ＲＡＰＩＲＯＭ、Ｅ、、ＫＩＲＫＭＡＮ　Ｒ，Ｌ、、Ｒ ＥＥＤ　Ｍ、Ｈ，。

ＰＵＳＫＡＳ　Ｊ、Ｐ、、　ＭＡＺＯＵＪＩＡＮ　Ｇ、、　ＬＥＴＶＩＮ　Ｎ、 Ｌ、、　ＣＡＲＰＥＮＴＥＲＣ。

Ｂ、、　ＭＩＬＦＯＲＤ　Ｅ、Ｌ、、　ＷＡＬＤＭＡＮ　Ｔ、Ａ、、　ＳＴＲ０ Ｍ　Ｔ、Ｂ、、　ＳＣＨＬＯ５ＳＭＡＮＳ、Ｆ、の論文、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ 　ａｎｔｉ−ＩＬ２　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔｉ−ｂｏｄｙ　ｉｎ　ｐｒｉｍ ａｔｅ　ｒｅｎａｌ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ参照〕。同様にヒトをこ おいて、幾つかの抗−Ｒ−ＩＬ２がマウスを用いて〔Ｊ、Ｉｏｒｍｕｎｏｌ、１ ９８１；１２６：１３８３〜９７（８）、ＵＣＩＩＩＩＹＡＭＡ　Ｔ、、　ＢＲ ＯＤＥＲＳ、、　ＷＡＬＤＭＡＮ　Ｔ、Ａ、の論文、Ａ　ｍｏｎｏ−ｃｌｏｎａ ｌ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　（ａｎｔｉ−Ｔａｃ　）　ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｗｉｔｈ 　ａｃｔｉｖａｔｅｄａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ　ｍａｔｕｒｅ　ｈｕ ｍａｎ　Ｔ　ｃｅｌｌｓ参照〕及びラットを用いて（Ｅｕｒ、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏ ｌ　１９８６　；　１６　：　６１１〜２０（９）、０ＬＩＶＥ　Ｄ、、　ＲＡ ＹＭＯＮＤ　Ｊ、、　ＤＵＢＲＥＵＩＬ　Ｐ、、　ＣＩ’ｌＡＲＭＯＴ　Ｄ、。

ＪＡＣＱＵＥＳ　Ｙ、、　ＭＡＷＡＳ　Ｃ，の論文、Ａｎｔｉ　Ｉｎｔｅｒｌｅ ｕｋｉｎ　２　ｒｅｃｅｐｔｏｒｍｏｎｏｃｌｏｎｉｌ　ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｒ ｅｃｅｐｔｏｒ　１ｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅｉｒｃｅｌｌ　ｇｒ ｏｗｔｈ参照〕出発参照行出発た、全てＲ−ＩＬ２の５５Ｋｄ成分を認識してい る。最近の研究ではラット及びマウスの免疫学的範囲はヒトＲ−ＩＬ２での二つ の主エピトープを識別することを示した。これらの一つはＩＬ２との相互作用部 位に緊く結合して機能ブロックを生成する；他はＩＬ２相互作用と無関係であり 、活性化Ｔ　リンパ球のＩＬ２−誘発増殖を抑制できない。

意外にも本発明°者等は、実際に補体の存在下においてさえも細胞毒性がなく、 シかし細胞のインターロイキン２誘発増殖をできる能力を残したこれらの抗体が 、臓器移植受容者によって良好に許容され移植組織の拒否を有効に防ぎ、従って 薬剤中に混入できることを見出した。本発明のフレームワーク内に補体の存在下 細胞毒性効果を抑制するため、化学的に変性した（例えばポリエチレングリコー ルによって）ヒト又は動物起源の抗体、及びマウスモノクローン抗体ｐＩｇＧ１ ．ラットモノクローン抗体鋼ＩｇＧ　２　ａ　ｓ　ヒ）　％ツクローン抗体、ヒ ト及び他の動物起源の一部からなるモノクローンキメラ抗体を特に含有させなけ ればならない。

本発明の他の特徴及び利点は、３３Ｂ３．１（これはラット起源のタイプＩｇＧ 　２　ａのモノクローン抗体（ＭｏＡｂ　）である〕として知ら６、本発明によ る抗体の実施例に基づいた・以下の説明から更に明らかをこなるであろう。

本発明における抗体はハイプリドーマ３３Ｂ３．１細胞を接種したヌードマウス の腹水から得られる。細胞及び精製した抗体は初めにマウスウィルス及びマイコ プラズマを含有しないことが示された。以下に説明する実験及び試験のため、リ ン酸塩緩衝食塩水１ゴについて５■の３３Ｂ３．１を含有する５ゴ瓶に用意した 。使用するときまで瓶は４℃で保存した。実験及び試験の目的は、腎移植拒否反 応の予防のため投与した３３Ｂ３．１の免疫抑制効果を証することＭｏＡｂ３３ 　Ｂ　３．１を１４日間毎日、最初の日（ｏｎ　ｄａｙ　Ｏ）プレドニノン（ｃ ｓ）ｘｍ９／＃（これは１週間で１０■だけ投与量を減少させた）及びアザチオ プリン（ＡＺＡ　）　ｚｗｌ権と共に投与した。

１００ｒｎｌの食塩水で稀釈したＭｏＡｂを毎日静脈内に注射した（１０分にわ たるゆっくりした静脈注射で末梢静脈中に）。

３３Ｂ３．１のコースの終りにシクロスポリンＡ　（ＣＹＡ　）の投与を開始し た（ｉｌｌ’／ｋｆり。ＭｏＡｂでの処置中生検確認拒絶反応の場合７日緊急処 置としてＧＡＴ　（チモグロブリン、フランス国すヨンのＩｎ５ｔｉｔｕｔ　Ｍ ｉｒｉｅｕｘ　）を与えた；３３Ｂ３．１を停止し、毎日２　ｍｙ／に９のＧＡ Ｔでの処置を開始し、続いて１０％未満の循環Ｔ１１”１７２３球の割合を保つ ように調整した。

常用腎生検を９日目（ｏｎ　ｄａｙ　９）に行った。一度ＣＹＡを開始したら、 ＣＳ及びＡＺＡ処置は徐々に減少させ、３週間後に停止した。Ｃ７Ａでの患者に おいて、拒否反応エピソードを、５日間にわたるゆっくりとしたメチルプレドニ ソロンの静脈注射（それぞれ毎日５；５；４；３及び２■／＃）で処置し、続い て経口によって毎日１．５ｍ９／ｋｇのステロイドを注射して徐々に減じて停止 した。

同意を得た２７人の患者を処置した。それらは全て死体−次移植の受容体であり 、全リンパ球の５０％未満と反応する同種抗体を有していることを示した。全患 者に前もって輸血し、家族性移植は排除した。３３Ｂ３．１の毎日投与量は７人 の被検者（Ａ群）で５■、１８人の被検者（Ｂ群）で１０■であった。患者を３ ５〜３４５日間再調査した。

二つの受容体群を次のものと比較した：１９８１年にそれらの移植組織を得、Ｃ ３（２週間毎日２＃　／　ｋｇで、次いで第２月の終りに毎日１５ｍＦ／＃まで 投与量を徐々に減じた３０人の受容体の病歴（ｈｉｓｔｏｒｉｃ　）対照群（０ 群）。

３３Ｂ３．１の代りをこ、ＧＡＴ剤を受けた（上腕動静脈番孔又は中心カテーテ ル）こと以外はＡ群又はＢ群で使用した処置と同じ処置を与えた５５人の受容体 群（Ｄ群）。

０群及びＤ群受容体も超免疫なしに一次死体移植組織を受けた（種々の臨床及び 一般免疫学的特性を下表１に示す兄表Ｉ：異なる受容体群：臨床及び免疫学的特 性３３　Ｂ　３．１　３３　Ｂ　３．１　Ｃｓ−’−，ＡＺＡ　ＧＡＴ５１１９ ／日　１０■／日　十Ｃｓ＋ＡＺＡ＋Ｃｓ＋ＡＺＡ　＋Ｃｓ＋ＡＺＡ　（ｎ＝３ ０　）　（ｎ＝５５　）性配分（Ｍ／Ｆ）　３．５　５　１．５　１．６輸血の 数　５　（２−１２）　５　（２−＞５０　）　５　（２−２２）　６　（２− ２５）全体的反応性８ く２０％ｎ＝８　１４　２７　４５ 丁リンパ球　）２０％ｎ＝１４３１０ 〈２０％ｎ＝７１４　≠≠　３４ Ｂリンパ球　〉２０％ｎ＝２　４　、　舛≠　２１舛　平均及び極値 舛舛　結果入手できず ≠誉舛　全体的活性は全ての場合５０％以下であった３）患者における循環３３ Ｂ３．１力価及び抗３３Ｂ３．１免疫血液レベルは規則的間隔で移植前及び後で 得た二つの血清試料におけるＥＬＩＳＡによって測定した。ＥＬＩＳＡプレート はマークＩ（抗うット軽カッパ鎖マウス抗体）で被覆しへそして血清中における ３３Ｂ３．１の存在はヒツジ起源のラット抗−ｔａｂ’ｗ（β−ガラクトシダー ゼで標識化）で明らかにした。３３Ｂ３．１の血清レベルは、純粋３３Ｂ３．１ の連続稀釈に対してプロットした通常の標準曲線から得た。

抗−３３Ｂ３．１の検出 ＭｏＡｂ処置前及び後に得られた血清試料を、抗−３３Ｂ３．ＩＩｇＧ又はＤ　 ４　ＩｇＭの存在についてＥＬＩＳＡ試験した。プレートを純粋３３Ｂ３．１で 被覆し、受容体の稀釈血清で培養し、ヒツジベルオキシダーゼで標識化したヒト 抗ＩｇＭ又は１８Ｇで発育させた。反応は、二つの測定の平均値が平均対照値に 対する標準偏差の３倍より大であったとき正と考えた。

３３Ｂ３．１は良く許容された。２７人の患者の中５人のみが小さい副作用を発 した、例えば１人の場合に皮疹、２人の場合静脈に局部的疼痛、１人の場合めま い、そして最後のゆっくりとしたＭｏＡｂの静脈注射中に７ナフイラキシ一反応 がみられた。これらの副作用は処置を停止する必要はなかった。最初の４８時間 で通常低度の発熱が見られた。

対比的に高熱はＤ群の患者の５２％で記録され、皮疹及び急性血清病はそれぞれ Ｄ群の患者の１８％及び２５％で記録された。

赤血球及び血小板数はＡ、Ｂ及び０群の患者において変化を示さなかった（減少 しなかった）、これは３３Ｂ３．１がこれらのパラメーターにおいて最小の効果 しか有しないことを示している。多形核細胞数はＭｏＡｂ処置中１．７〜２のフ ァクターで増大を示した。僅かのリンパ球減少が記録された（６日目の極大のと ぎで初期の価と比較して２０％低下）、これは０群で記録されたリンパ球数（フ ィッシャーのｔ試験でＰ（０，０１）の極度の減少と明らかに対照的である。Ｔ ４／ＴＢ比は、３３Ｂ３．１での処置期間全体にわたってム及びＢ群の患者にお いて変化を示さなかった。Ａ群の患者２人及びＢ群の患者４人にウィルス感染の エピソードが見られた（　５　ＣＭＶ及びＩ　ＥＶＢ　）。極度の口腔カンジダ 症がＡ群の１人の患者に記録された。

２）拒否出現率 現在までＡ群及びＢ群の二つの群の２人を除いて全部が機能的腎を有している。

１人の患者は自殺した（３２日目に、腎は組織学的に正常であった）、そして他 は技術的破裂が発生した（深部尿管壊死によって移植除去、組織学的に正常な腎 ）。

Ａ群の患者の中、３人は３３Ｂ３．１のゆっくりとした静脈内注射の間拒否の発 現を示した（下表■参照）。

ＡＲＢ群　Ｃｎ　Ｄ群 ≠　Ｐ（０，００１，０群と比較して 舛≠　技術的失敗の１例を除いた。

全ての場合において、診断は腎生検によって確認した。

全ての場合において拒否のエピソードは緊急処置時可塑性を証明した。Ｂ群の１ ８人の患者の中１人の場合においてのみ拒否エピソードが発現し、緊急処置時可 塑性を証明した。しかしながら９日目に行った常用生検（Ａ群４人及び５群５人 の患者）は拒否の臨床的発現の不存在下に若干のリンパ球浸Ｂｋ示した、これは 多分弱い組織学的拒否を表わす。これらの患者がＧＡＴ緊急処置を受けなかった にも拘らず、それらの腎機能は無傷のままであり、臨床的拒否は見られなかった 。これに対し、最初の２３！！での急性拒否反応が歴史的Ｃ群の患者の６６％で 記録された（Ｂ群と比較したときＸ′試験でＰ＞０．００１）。同じ期間で拒否 反応エピソードがＧＡＴ処置受容体の４％で観察された。これらの結果を一緒に して見ると、毎日１０！＋＋９の投与量での３３　Ｂ　３．１は早期拒否反応に 対して強力な條設を提供することを示している。

更に、３３Ｂ３．１での処置中拒否反応の証拠を示さなかった２人の患者はＭｏ Ａｂのゆっくりとした静脈注射期間後４７日（Ａ群）及び３５日（Ｂ群）で拒否 のエピソードを発現した。

添付図面はゆっくりした静脈注射後２４時間での循環３３Ｂ３．１血液レベルを 示す。Ａ群中で１人の患者（どの段階でも拒否反応の証拠を示さなかった）にお いて、循環３３Ｂ３．１血液レベルは感知できない程僅かであった、その他にお いては（３３Ｂ３．１で処置中拒否反応エピソードを有する人を含む）血液レベ ルは感知できない程の僅かから１．６μＥ／−までの範囲であった。Ｂ群受容体 において、拒否反応の場合を含めて明らかに高い循環血液レベル（１，５〜９μ ｍ１７Ｍ１）が記録された。しかしながら１人の場合において塩基性力価は小さ かった（０．３μｍ１／Ｉｄ＞。

下表■に示すデータは、イソタイプＩｇＭ（２０／２７）及び／又はＩｇＧ（２ １／２７）の抗３３Ｂ３．１抗体を生じた２３人のデータを（２７人の中）示す 。１６人の患者は、拒否反応なしにＭｏＡｂの処置期間中検知しうる抗３３Ｂ３ ．１抗体を示した。ＩｇＭ及びＩｇＧ応答は３３Ｂ３．１治療の終了後約１０日 でその極大に達した。

ＭｏＡｂでの処置巾測定した３３Ｂ３．１血液レベルを示す添付図面の中、Ａ図 及びＢ図は、拒否反応のエピソードの記録のある又はない患者をそれぞれ白丸及 び黒丸でそれぞれＡ群及びＢ群について示す。

上記報告の研究の所見では、ヒ）Ｒ−ＩＬ２でのＩＩ、２結合部位に対して指向 されたラツ）ＭｏＡｂ、ＩｇＧ　２は早期急性移植拒否反応を干渉できることを 示す。Ｍ’ｏＡｂは非常によく許容され、非常に便かなそしておだやかな副作用 が記録された。毎日５ＴＩ９のＭｏＡｂで処置した９人の患者の！ｓ１群の中３ 人は３３Ｂ３．１であるが拒否反応エピソードを示した（ＧＡＴでの緊急処置で 可逆性）。理論的な考察では、この最初の３３Ｂ３．１の毎日の投与量は最良の 効果を生ぜしぬるのには低すぎたことを教示した、従って第二の系統では毎日の 投与量を１０１ｖに増し、これは有効な保護を与えた。事実最初の術後２週間（ ＭｏＡｂ処侃でカバーされた期間）での拒否反応の臨床的に検出しうる発現は第 ２群の１８人の中僅か１人の患者にのみ記録された、これに対して輸血及び一般 的な計画については他の点では同様に受け入れた「歴史的対照例」群（Ｐ（０， ００１）における同じ期間で拒否反応割合は６６％であった。ＨＬＡなじみ（ｃ ｏｎｃｏｒｄａｎｃｅ　）は小さいＡ群においては小さかった、一方Ｂ、Ｃ及び Ｄ群は同様ななじみを示した。「歴史的対照例」群での初期ステロイド投与量は Ａ群及びＢ群で使用しその２倍であった。

試料の小さいことによって課せられた制限で、毎日１０■の３３Ｂ３．１を受容 した患者において記録された拒否反応割合は、３３Ｂ３．１の代りに良く立証さ れそして有効なＧＡＴの形での抗拒否反応処置を受けたＤ群の患者における割合 に本質的に類似していた。ＭｏＡｂを受容した２人の患者におい°て記録された 最初の２週間での拒否反応エピソードは、３３Ｂ３．１で処置した患者において クロー７（Ｒ−ＩＬ２）脱落は生じず、再発拒否反応は稀であったことを示した 。

ひどい感染性エピソードはＡ群又はＢ群の何れにおいても見られなかった。

またＤ群の場合において観察された烈しい白血球形成の証拠は３３Ｂ３．１で処 置された患者をこは示されなかった。

Ｍｏ　Ａ　ｂでの処置中記録されたＴｌｌ　；Ｔ４及びＴ８における減少は、二 つのサブユニットが拒否反応のコースでＲ−ＩＩ、２を放出すること（前記７参 照）及び活性化されたリンパ球が少数の周囲白血球のままであるという事実によ って、小さく比例的であった（τ４／Ｔ８比は殆ど変化を示さなかった）。白血 球数は全てＤ群と比較して明らかに上昇した。

これらの全ての白血球に関する変化は多分交叉有害３３　Ｂ　３．１反応の不存 在とＣＳ効果の組合せを反映している。

３３Ｂ３．１血液レベルの研究では、Ａ群の１人の患者（拒否反応がない場合で さえ）に認知しうる力価は示さず、Ｂ群の全患者に高い力価を示した、これは多 分飽和レベル（Ｒ−ＩＬ２に対するＭｏＡｂ親和性による）を表わし、従ってＢ 群における非常に小さい拒否反応割合を説示することができる。大多数の患者は 抗３３Ｂ３．１抗体を生成した。それにも拘らず、この小さい系列番；おいて、 拒否反応の発現（Ａ群又はＢ群の何れかにおいて）と抗３３Ｂ３．１抗体ＩｇＧ 及び／又はＩｇＭの存在の間に相関は明らかにできなかつ總抗イディオタイプ抗 体の測定での計画は、可溶性Ｒ−ＩＬ２による認知しうる伴われた汚染のため必 ず失敗した。若干の患者において（表■）抗３３Ｂ３．１抗体が、ＯＫＴ　３で 処置した受溶体において記録された場合（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ１９ ８６；４２：５０７〜１０（１２）のＧＯＬＤＳＴＥＩＮ　Ｇ、。

ＦＵＣＥＬＬＯＡ、Ｊ、、　ＮＯＲＭＡＮ　Ｐ、Ｊ、、　５ＨＩＥＬＤ　Ｃ，Ｆ 、、　Ｃ０ＬＶＩＮ　Ｒ，Ｂ、。

Ｃ０５ＩＮＩ　Ｂ、の論文ＯＫＴ　３　ｍｏｎｏｃｌｏｎｃａｌ　ａｎｔｉｂｏ ｄｙ　ｐｌａｓｍａｌｅｖｅｌｓ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅｒａｐｙ　ａｎｄ　ｔ ｈｅ　５ｕｂｓｅｑｕｅｎｔ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ　ｈｏｓｔ　ａｎｔ ｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ＯＫＴ　３、及びＪ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１９８６　； １３７：８３０〜３８（１３）のＣＨＡＴＥＮＯＵＤ　Ｌ−、ＢＡｔｌＤＲＩＨ ＡＹＥＭ、Ｆ、、　Ｃ）ＩＫＯＦＦ　Ｎ、、　ＫＲＥＩＳ　Ｈ，、ＧＯＬＤＳＴ ＥＩＮ　Ｇ、、　ＢＡＣＨＪ、Ｆ。

の論文Ｔｈｅ　ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｉｎ　ｖ ｉｖｏ　ｉｍｍｕｎｅｒｅｐｏｎｓｅ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ｍｏｕｓｅ　 ｍｏｎｏｃｌｏｎｃａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　ＯＫＴ　３参照〕よりも早く移植 後１０日から意外にも観察された。

早期拒否反応エピソードを予防するのに有効であり、良く・許容される活性化Ｔ 　ＩＪンバ球番二ついてのみ存在する成長因子受溶体を標的したＭｏＡｂを用い るこの新規な処置は、ヒトにおける同種応答の変調に関する基本的な興味のある ものである。従ってそれは腎移植ばかりでなく、心臓、肝、弧腸、骨ずいの移植 等全ての種類の移植に適用できる。

抗体はインターロイキン２に対し簡単な競争に上って作用するので、匹敵する特 異性の他のマウス又はヒト抗体Ｇこよって明らかに置換できる。またヒト起源の 一定部分、及びマウス起源の抗体によって運ばれるインターロイキン２受溶体を ブロックする活性部位を結合させるキメラ抗体も同等に好適である。

重要な二゛とは細胞を殺すことなく、受容体が機能的にブロックされなければな らないことである、これは細胞毒性抗体との関係昏こおいて観察された中毒（バ ーン７ウトシンドローム）の発現を避けたためである。

化学基将にポリエチレングリコールのグラフト化によりその細胞毒性のない抗体 を使用できる。リンパ球を殺さずにインターロイキン２の効果をブロックする抗 体の概念を保有するこれらのｙＬ換基の全てが本発明の不可欠部分を表わす。

３３Ｂ３．１ヱユ液レベｊし　ｔｕｇ／ｍｌｌ国際調査報告 −１−一〜−”＝ｋ　ＰＣｒ／ＦＲ８８１００２８？ｍｍｋＰＣＴ／ＦＲ８Ｂ１ ００２８７ 国際調査報告 ＦＲ８８００２８７ 第４頁の続き ■Ｉｎｔ、　ＣＬ　’　識別記号　庁内整理番号移発　明　者　ベイロネ、ビニ ール　フランス、　８７０００改発　明　者　ル　マウフ、ブリジット　フラン ス、　４４２４０ボーデレール　３ 秒発　明　者　ウルマン、マリボンヌ　フランス、　４４４００秒発　明　者　 オリーブ、ダニエル　フランス、１３００９［相］発明者　マワ、クロード　フ ランス、　１３００７か発　明　者　プラーシュ、ミシエル　フランス、　１３ ００１か発明者　ヒルン、ミシエル　フランス、　１３００８ジプチス か発　明　者　ジャック、ヤニツク　フランス、　４４０００Ｄ出　願　人　ア ンスチチュ　ナショナル　ド　フランス、　７５６４５ラ　サン　エ　ド　ラ　 リシ エルシュ　メディカル（イ　エ ン　ニス　エ　エール　エム） リモージュ、アベヌルデイユウ　５３ ラ　シャペル　スール　エルドレ、イムパスルゼ　ル　エミーユ　レゾル　３４ マルセーユ、アベヌ　マセネ　５６ マルセーユ、ル　デ　サンク　サン　８マルセーユ、ル　アドルフ　チェール　 １６マルセーユ、コルニシュ　ケネデイ　３５９　ビラナンテ、ル　ノワール　 ３２　ビス バリ　セデツクス　１３．ル　ド　トルビア　１０１

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．ヒトにおける器官移植拒否反応を予防又は処置するための活性剤であり、リ ンパ球によつて担持されるヒトインターロイキン２受容体に結合できるモノクロ ーン抗体を含有し、インターロイキン２によつて誘発される細胞増殖ヘの抑制効 果と組合された、補体の存在下においてさえ、インビトロ細胞毒性のないことを 特徴とする活性剤。
2. ２．抗体がマウスモノクローン抗体綱ＩｇＧ１である請求の範囲第１項記載の活 性剤。
3. ３．抗体がラツトモノクローン抗体綱ＩｇＧ２ａである請求の範囲第１項記載の 活性剤。
4. ４．ラットモノクローン抗体が抗体３３Ｂ３．１である請求の範囲第３項記載の 活性剤。
5. ５．抗体がヒトモノクローン抗体である請求の範囲第１項記載の活性剤。
6. ６．抗体が、ヒト及び他の動物起源の一部を含有するキメラモノクローン抗体で ある請求の範囲第１項記載の活性剤。
7. ７．抗体が、補体の存在下にその細胞毒性効果を抑制するため化学的に変性した ヒト又は動物起源のモノクローン抗体である請求の範囲第１項記載の活性剤。
8. ８．ヒト又は動物起源の抗体がポリエチレングリコールによつて化学的に変性さ れている請求の範囲第６項記載の活性剤。
9. ９．請求の範囲第１項〜第７項の何れかに記載の少なくとも１種の活性剤を含有 する薬剤。
10. １０．抗体３３Ｂ３．１を含有する請求の範囲第９項記載の薬剤。