JPH01501895A - アッセイ及びその装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアッセイ及び該アッセイを実施可能な装置に係る。

本発明は、特異的結合を利用するアッセイ、例えば分析物が所謂「サンドイッチ 」反応への関与により分析されるイムノアッセイに特に適用可能である。サンド イッチ反応において、分析物は分析物に特異的に結合する２種の試薬の間にブリ ッジを形成する。典型的にはこのような試薬の一方は粒状キャリア物質又は表面 、例えばベグに固定され、第２の試薬は液体媒体（例えば分析すべき分析物を含 有する媒体）に易溶性又は易分散性である。第２の試薬は、サンドイッチ結合反 応がどの程度まで行われたかを決定するための手段を提供する。このようなシス テムとしては多くのものが知られており、広範なアッセイテストで使用されてい る。非常に典型的な例では、第２の試薬は特異的結合段階に続く化学反応に関与 し得る酵素のような化学的マーカーに結合され、化学反応は色変化又は色形成の ような観察可能な結果をもたらす。

従来方法では、サンドイッチ反応は固定試薬とサンプルとの接触に引き続いて行 なわれ、試薬に分析物をピックアップさせるに適当なインキュベーション時間の 後、固相をサンプルから除去し、第２の試薬と接触させ、サンドイッチ反応が完 了し得る。

より簡単な方法では、特異的結合試薬の両方をサンプルと共に存在させ、サンド イッチ反応を１回のインキュベーションで生じさせる。こうして従来方法の１段 術は避けられている。しばしば同時マーキングと呼称されるこの簡単な方法はほ とんどの状況で良好に機能するが、分析すべきサンプルが高濃度の分析物を含有 している場合には不確実であることが判明している。従って、「フック効果（ｈ ｏｏｋｅｆｆｅｅｔ）Ｊとして知られる現象が生じる。高濃度の分析物は両方の 特異的結合試薬を飽和し、２Ｎの特異的結合試薬の間に必要なブリッジは必ずし も形成されない、特異的結合反応が生じる程度が決定されると、固相に結合され た特異的結合試薬に単一の分析物分子を介して結合しているのは標識化特異的結 合試薬の一部に過ぎないので、疑似的に低い結果が観察される０分析物がＢｃＧ である妊娠テストは、「フック効果」が重大な問題であり得るアッセイの例であ る。

従って、信頼性がサンプル中の分析物の濃度に依存するような同時マーキングサ ンドイッチアッセイが必要である。

本発明は、同時マーキングアッセイシステムを提供するものであり、面相キャリ アに固定された第１の特異的結合試薬は、結合試薬に特異的な分析物を含有する 疑いのある液持し液体サンプルに溶解又は分散され、かつ同様に分析物に特異的 であり、従ってｒサンドイッチ」反応で第１の結合試薬と協働する第２の結合試 薬と同時にインキュベートされ、インキュベーションの前では第λの特異的結合 試薬はいる表面）に堆積された固体材料の層に含まれ、該材料は液体サンプルに 易溶性又は易分散性である。固相が液体サシプルと接触し、固体材料層が溶解又 は分散すると、包含されていた標識化試薬は液体サンプル中に放出され、固定さ れた試薬は同時に液体サンプル中に露呈される。２種の試薬が密接に近接してい るので、分析物が高濃度の場合でも該試薬が「サンドイッチ」反応でサンプル中 の分析物分子と協働する機会は大きい、スクロースのような易水溶性の糖が理想 的な材料である。

実際に、（近傍表面に配置されていることから明らかなように）可溶性又は分散 性層が感作表面に堆積されていないなら、標識化試薬の放出が遅れる一方で、固 定化試薬がサンプル中の高い分析物濃度に直接露呈されるので、「フック効果」 の問題を悪化させる傾向がある。

−Ｂ様によると、本発明は特異的結合アッセイで使用され且つ表面に固定された 分析物の特異的結合試薬を支持するペグのような固相装置を提供するものであり 、同一の分析物の標識化特異的結合試薬は装置の感作表面に堆積された可溶性又 は分散性固体材料の層に含まれている。この装置は好ましくは、補助コンポーネ ントに支持された補助固体表面から所定のスペースを設けて除去可能に配置され た感作固体表面を含むテストコンポーネントを含む特異的結合アッセイで使用さ れる液体サンプリング装置の一部であり、テストサンプルを形成するための液体 に接触又は浸漬すると、サンプルの液体は感作固体表面に接触し、補助固体表面 は、装置が液体に接触又は浸漬しないように取り出した後にサンプル液体を感作 固体表面と接触させておくように機能し、感作表面上には、感作表面との特異的 結合ｒサンドイッチ」反応に関与し得る標識化試薬を含有する可溶性又は分散性 材料の層が堆積されている。

サンプリング装置は好ましくは、補助コンポーネントをテストコンポーネントか ら取り出すための手段、及び標識化試薬が装置の感作表面に結合している場合に 該標識化試薬を検出するための手段と共にアッセイキットの一部を含んでいる。

好ましくは、サンプリング装置は感作ベグを組み込んだ操作部材を含んでおり、 該ペグには標識化試薬を含む可溶性又は分散性の層が堆積されており、該感作表 面は補助表面を形成する除去可能なシュラウド内に配置されており、シュラウド はシュラウドをベグから容易に取り出しできるようにテスト装置の第２のコンポ ーネントと相互締結が可能であり、該第２のコンポーネントは更に、シュラウド の除去後にベグが挿入され得るウェルを含んでおり、該ウェルは標識を頂現する １種以上の試薬を含んでいる。

結合試薬は好ましくはイムノグロブリン（抗体）である。

好ましくは、このような抗体は分析物上の異なるエピトープに高い特異的親和性 を有している。好ましくは、抗体は当業者に標準的な固相、特異的結合試薬、標 識及び標ｍ顕現システムを使用して実施され得る。

本発明の別の好適な態様によると、試験すべき所定量の分析物を含有し得る液体 サンプルを使用してテスト又はアッセイを実施するための装置は、感作表面との 特異的結合サンドイッチ反応に関与する試薬を含む材料の水溶性又は水分散性層 が堆積された感作固体表面を含んでおり、感作固体表面を含むテストコンポーネ ントは補助体に支持された補助固体表面から所定の距離を隔てて除去可能に配置 されており、テストサンプルを提供するための液体に接触又は浸漬するとサンプ ルの液体は感作固体表面と接触し、補助固体表面は装置が液体にそれ以上接触又 は浸漬しないようにされた後にサンプル液体（態様によっては一定不変で恐らく 標準化された量のサンプル液体）を感作固体表面と接触させておくように機能す る。態様によっては、補助固体表面は感作表面から密接した距離に配置され得、 例えば毛管作用又は他の表面張力効果により、感作固体表面上にサンプル液体が 流れ易くなるように配置され得る。別のｎ１１１では、補助固体表面はテストコ ンポーネント又はハンドルに除去可能に装着されたカップのようなサンプル液体 ホルダーの形態であり得る。使用中、テストコンポーネントは後で補助固体表面 との連合から解除され、例えば洗浄及び別の試薬に露呈させることにより更に処 理され得る。

以下の説明は、特異的結合アッセイにより液体サンプル、例えば尿サンプルの化 学的又は臨床試験を実施するための本発明の好適な装置の例を示すものであり、 該装置は、アッセイに関連する特異的結合対の固定化コンポーネント（２ｂ）を 支持しており且つサンドイッチアッセイの第２の特異的結合コンポーネントを含 む材料の層が堆積された感作固体表面（２ａ）を有するテストコンポーネント（ ２）、及び操作部材（１）を備えており、該装置の改良は感作表面（２ａ）を支 持するテストコンポーネント（２）から所定の距離を隔てて除去可能に配置され た補助固体表面（５）を支持する除去可能に配置された補助コンポーネント（４ ）を含んでおり、感作表面と除去可能な補助コンポーネント（４）との間にはサ ンプル液体の容器として機能するためのスペース（４ａ）が形成されており、従 って、装置がサンプル液体ソースに接触するか又はテストサンプルを提供するた めの液体に浸漬すると、サンプルの液体はスペース（４ａ）に侵入して感作表面 （２ａ）と接触し、補助表面（５）は装置がサンプル液体ソースにそれ以上接触 又は浸漬しないようにされた後にもサンプル液体を感作表面（２ａ）と接触させ ておくように機能し、テストコンポーネント（２）は除去可能な補助コンポーネ ント（４）の除去後に感作表面（２ａ）が洗浄液及び／又は試薬のような別の処 理液体に露呈され且つこれと接触するように形成されている０以上の記載中の数 字は非限定的な説明の目的に過ぎず、添付図面に示すような以下に記載する装置 の特定の態様に関する。

本発明の好適な装置の特定の態様を非限定的に例示する。

（ａ）感作固体表面を支持するテストコンポーネントはハンドル又は他のホルダ ーに装着されたスリップ、プレート、ビード、ペグ又は管のような中空体の一部 であり得る。

（ｂ）補助固体表面は感作固体表面に実質的に相補的な形状であり、感作表面に 近接するか僅かな距離を隔てた位置に除去可能に固定され得、例えばシュラウド 、メツシュ、カバー又はプラグの表面であり得る。

（ｃ）補助体は例えばハンドルもしくはホルダー、又は感作固体表面を支持する テストコンポーネント上の除去可能なスナップ式フィットメント又は摩擦滑動式 フィットメントであり得る。必要に応じてハンドル又はホルダーは、必要時に補 助体を取り外すために使用者が操作可能な排出装置を備え得る。

本発明の装置の−！！！様によると、補助体はサンプル液体をテストコンポーネ ントの感作表面と接触させておくために、スポンジのような吸収性液体保持材料 体から構成され得る。

感作固体表面を支持するテストコンポーネントが補助固体表面を支持する補助体 に装着されると、該コンポーネント及び補助体は感作表面と補助表面との間のス ペースにサンプル液体を侵入させるための通路が形成されるように協働する０通 路は、ハンドルの内側、補助表面を支持する補助体の内側、又はテストコンポー ネントの内側、又はこれらの３者のいずれか２者が相互に接触するような位置に 適宜形成され得る。このような通路の位置は、装置の残りの部分に選択された個 々の形状に従って適宜選択され得る。

好ましくは、サンプル液体が侵入する表面から空気を逃がすための別の通路も設 けられるが、この必要性は装置の全体的な形状及び液体侵入通路に依存する。

（ｄ）テストコンポーネントは、スナップ式又は摩擦滑動式フィットメントを外 すことにより補助体の補助固体表面への装着から解除され得る。これは、補助体 が（８作固体表面を支持するテストコンポーネントとの除去可能な連結手段の他 に）補助体をテストコンポーネントとの近接装着位置から引き離すために容易に 操作及び使用され得るテストキットベース又は他のコンポーネントへの装着手段 を有している場合に、最適に実施され得る。

場合によっては、ハンドルへのプラグ式フィットメントとして感作固体表面を支 持するテストコンポーネントを提供することが適当であり且つ望ましく、テスト コンポーネントはハンドルから脱離できてもできなくてもよい、この場合、製造 条件にハンドル部材を含まずに、均一性を確保するようにテストコンポーネント を大量生産することができる。あるいは、テストコンポーネントはハンドルと一 体的な部分であってもよい。

操作部材にプラグ装着された感作コンポーネントの周囲に配置され得る本発明の 一態様によると、補助表面はサンプル液体をテストコンポーネントの感作表面の 周囲に支持するためのカップとして機能するサンプルホルダーの補助表面であり 得る。

サンプルホルダーは感作コンポーネント及び／又はハンドルに押し付は装着する ための構造（例えばベーン）を有し得る。ホルダーはスタンド又は別の容器又は 操作部材に確実に配置できる。その場合、装置を使用するために必要な段階は、 （ａ）感作表面と接触するに十分にホルダーにサンプル液体を充填し、（ｂ）該 当する特定のテストの要求に十分長い時間接触させ、（ｃ）ホルダーをスタンド 又は別の容器又は操作部材に係合させ（あるいはサンプル液体ホルダー及びその 内容物を排出又は排除し）、（ｄ）従来使用されている装置の他の部分を含まな いハンドル及びテストコンポーネントを得、（ｅ）該当するテストに必要な別の 手順をテストコンポーネントに課することから成る。

多くの場合、テスト装置が使用者に供給され・るパッケージング又はケーシング の一部として、例えばこのようなケーシングの蓋又は底の部分としてスタンド又 は他の容器又は操作部材（又は補助固体表面を支持するコンポーネントからテス トコンポーネントを分離するための別の手段）を組み込むと便利である。

最も一般的には、本発明の装置のテストコンポーネントの感作表面は、抗体又は 抗原又は他の特異的結合反応成分を既知の方法で表面に固定することにより感作 される。このような固定方法は現在周知であり、文献で普及されているので、そ れ自体は本発明の内容としない、−好適方法としては、公知方法により抗体をポ リスチレン表面に吸着させる方法がある。別の適当な方法は文献中に記載されて おり、特にヨーロッパ特許明細書第００１４５３０号に記載されているようなグ ルタルアルデヒド法や、米国特許第３８１７８３７号（コラム３ｌ−３４）　、 並びに英国特許第１３１６９９０号及び１４８５１２２−３号に記載されている ような方法がある。

グルタルアルデヒド結合方法の適当な例は従来文献中に記載されており、例えば Ｓ　Ａｖｒａｍｅａｓ、　（１９６９）　Ｉｍｍｕａｏｃｂｅｓ」４３頁以下、 ＾Ｖｏｌｌｅｒ、　Ｄ　Ｆ　Ｂｉｄ＠ｅｌｌ及び＾Ｂａｒｔｌｅｔｔ著″Ｔｈｅ 　Ｅｎｚｙｍｅ　Ｌｉｎｋｅｄ　Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ　Ａｓ５ａｙ　（ ＥＬＩＳ＾）”（１９７９）（Ｄｙｎａｔｅｃｈ　Ｅｕｒｏｐｅ、　Ｇｕｅｒｎ ｓｅｙ、　ｌ５ＢＮ　０．９０６０３６．０１．１刊）に記載されている。

現時点で本発明の装置の最も重要な用途は女子（特に女子であるが排他的ではな く、一般にヒト）の尿サンプルの分析による妊娠試験であると考えられるので、 テストコンポーネント表面に装着される対応する適当な材料はヒトコリオゴナド トロピン（）ＩｃＧ）の抗体である。関連する診断上の主な試験の目的に適当な 結合パートナ−である他の抗体は、例えば抗黄体形成ホルモン（抗ＬＨ）及び抗 プロラクチンであるる 感作表面に堆積される乾燥層は好ましくは糖グレーズ、又はゼラチンをベースと するＬｌｌ！又はポリビニルアルコールのような他の膜形成物質である。可溶性 澱粉及びデキストランのような材料も使用できる。アッセイは一般に水性媒体中 で実施され、従って、材料は最適には水に可溶性又は分散性であるべきである０ 層の適用は、例えば固相を溶液に浸漬させることにより例えば予備感作した固相 表面を標識化試薬を含有するグレーズ形成材料の水溶液と接触させた後、過剰の 溶液を除去し、固相上に残っている液体膜を乾燥することにより容易に実施され 得る。このような乾燥は、反応性試薬が損傷しないように緩慢な条件下でデシケ ータ中で風乾するか又は凍結乾燥により実施すべきである。

溶液は、感作表面上に固体材料の有効層を形成するに十分な濃度のグレーズ形成 材料を含有しているべきである。

この濃度は選択された特定のグレーズ形成材料に依存して変化し、簡単な実験に より確認されるべきである。純粋に例示としてスクロースの場合に理想的な濃度 は少なくとも約１重量％、より一般には少なくとも約５重量％である。スクロー スの濃度は約２０重量％を越える必要はない、ゼラチンではこれよりもずっと低 い濃度が適当であり、理想的な濃度は一般に０．１〜１重量％の範囲である。免 疫分野では固体表面に配置されたグレーズ中に試薬を提供する方法が現状では一 般的であり、本発明の新規性は組成よりもまずその位置にある。必要に応じて固 体材料の層は乾燥段階を挟む一連の塗布を通して作成され得る。アッセイ中に固 体材料層を液体サンプルに溶解又は分散させる速度は、比較的厚いか又は薄い層 を選択し、及び／又は試薬含有材料層のグを塗布することにより調節され得る。

どの態様でも、層はアッセイの効率を促進するという意味で最大限の濃度の標識 化特異的結合試薬を含有していることが望ましい、これは自明のことであり、当 業者には周知のことであるが、選択された標識化試薬の有効濃度は簡単な実験に より決定される必要がある。

以下、本発明の好適態様を単なる例示として説明する。

え１１Ｌ 添付図面の第１．２＾、２Ｂ及び２０図は本発明を適用可能な装置の一興体例の 概略部分断面図、主断面の＾−＾及びＢ−ＢＩＮにおける補助断面図、並びに装 置の感作部分の拡大横断面図（２Ｃ）である。

第３０は第１．２＾、２Ｂ及び２０図の装置で使用されるベースユニットの概略 部分横断面図である。

概略部分断面図は、プラスチック材料のハンドル１を含む免疫試験を実施するた めの装置を示している。ハンドル１の下端部の凹部には既知の方法で高親和性抗 ＢＣＣ抗体で感作されたポリスチレンズはナイロンペグ２が挿入され、該抗体を 約ＺＨｇ／ｗｌの濃度の感作条件（例えば既知の吸着又はグルタルアルデヒド方 法に適当な条件）下で感作処理液体中でプラスチック表面と反応させる。感作表 面２ａを有するベグ２の部分はこの実施例の適当な具体例では５１程度の長さで ある。イムノソルベントの調製方法はそれ自体周知であるので、当業者が本発明 を実施できるようにこれを詳しく説明する必要はない。

ベグ２の感作部分はマーカーとしにアルカリホスファターゼ酵素と複合した高親 和性抗ＢＣＣ抗体を含有するスクロースの薄層２ｂ（第２Ｃ図のみに示す）で被 覆される。

ハンドル１は更に、ベグ２の感作部分に向かってサンプル液体を移動させるため に多数の長手方向渭３を有している。

ハンドル１の端部及びペグ２上の摩擦滑動フィットメントとして穿孔プラスチッ クシュラウド４が設けられ、その内側表面５はベグ２の感作表面の全体形状と実 質的に相補的な形状である。シュラウド４は更に、この実施例ではシュラウド４ 内の中心スペースにサンプル流体を移動させるべく渭３に相補的な渭３ａを有し ている。しかしながら、ベグ２の感作部分に存在し得る溝等を表面５にも設ける 必要はない。

シュラウド４内の表面５とベグ２の表面２ａとの間のスペース４ａは、それらの 間に５０μ！程度の液体（例えば１００．ｌまで）を保持できるように構成され 得る。このような構成を使用すると、装置の使用時に表面張力／毛管現象により 自動的に取り出され且つ調節される規定又は標準量の液体は前記量に容易に調整 することができる。

シュラウド４は、該シュラウドをホルダーベース８に確実に配置し且つ固定させ るフランジ６も支持している。シュラウド４は更に、ハンドル１、ベグ２及びシ ュラウド４のアセンブリがサンプル液体に露呈されたときに空気を逃がすための 下部孔７を有しており、サンプル液体は溝３及び３ａを通って侵入し、ベグ２及 び表面５と接触する。ホルダーベース８はベース８の残りの部分と共に渭を形成 するフランジ構造９を有しており、この溝を介してシュラウドのフランジ６によ る滑り装着としてシュラウド４と連動し且つこれを保持する。ベース８は更に、 テストを実施するために別の試薬１２を収容するために除去可能なシール１１を 備える試薬ウェル１０を有している。

使用中、ハンドル１、ベグ２及びシュラウド４から成るアセンブリは液体のソー スに露呈され、これと接触してサンプルを形成する。これは血清又は尿のサンプ ルであり得、例えばアセンブリの下端部は被検者の尿流中に保持され得、感作表 面２ａ及び補助コンポーネント４の間のスペース４ａに侵入するサンプルを収其 する。

サンプル収気後、アセンブリはソースから取り出され、フランジ６によりフラン ジ９に挿入されてホルダーベース８に保持され、特定の該当試薬に適合するよう に選択された特定時間インキュベートされ、こうしてサンプル液体はスクロース 層２ｂを溶解し、標識化抗体を放出し、表面２＆により支持されている特異的結 合剤と反応する。その後、使用者はハンドル１及びベグ２をホルダーから引き出 し、シュラウド４を残したままテストコンポーネント２を補助コンポーネント４ から分離する０次に使用者は特定のテストの性質に従って指示されたように水又 は他の洗浄流体でベグ２を洗浄し、ベグを所定時間（例えば５〜３０分程度であ り得る）試薬ウェル１０に浸漬することができる０本実施例では、）ＩＣＧのテ ストに適用する場合、ウェル１０は所定の含有量（例えば１ａｇ／ｘｌ）のブロ モクロロインドリル−ホスフェート（既知の適当な条件下で青色生成物を形成す るためにアルカリホスファターゼと反応性の基質）を有する液体を備え得る。

最初のサンプル中のＨＣＧの含有量に従って、ウェル１１中の液体はインキュベ ーション後に青色を顕色するか又はしない、これは必要に応じて顕色を色相の変 化、例えば黄色から緑に変えるために（場合によって不活性な）背景色（例えば 黄色）の存在下で色比較チャートにより視覚化され得る。

上記の試薬はいずれもそれ自体周知のものである。

寒」ｌ阻」工 次に本発明の有効性を立証する実験について説明する。

実験は本質的に実施例１で説明したベグ式アッセイを使用ＰＢＳ＾中の１０ｕｙ ＃ｆの抗βヒトコリオゴナドトロピン（ＨＣＣ：）モノクローナル抗体に室温で ２時間浸漬させることによりベグを感作した。感作したベグを試薬溶液から取り 出し、必要な時間ＰＢＳＡ中においた。

１塗」１口【 試薬溶液は、ＰＢＳＡ中の４ａｇ１ｍＡの抗αＨＣＧモノクローナル抗体１００ ，１、市販の１０ｉｙ／ｚｆのＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒアルカリホスファターゼ酵 素１００，１、蒸留水中の１５％のモノマーグルタルアルデヒド（Ｐｏ　１ｙｓ ｃ　１ｅａｃｅ）５ｐ１がら調製した。

これらの成分を室温で３分間混合し、０．０５Ｍ　Ｔｒｉｓ　ｐＨ８，２緩衝液 中の５％オボアルブミン６ｚｆ＋１ｍＭ塩化マグネシウム＋０．１ｍＭ塩化亜鉛 を加えることにより反応を停止した。複合体を使用前に４℃で一晩保存した。

べ　のクー１イン １０％（Ｗ／Ｖ）スクロースを複合体のサンプルに加え、溶解させた。

ベグをＰＢＳＡ保存溶液から取り出し、過剰の緩衝液を除去した後、感作ベグチ ップを覆う深さに複合体溶液に浸漬させ、５分間放置した。ベグを取り出し、イ ンキュベータで３７℃で一晩乾燥させた後、室温で乾燥状態で保存した。

二重１Ｌ ＰＢＳ＾７２％ウシ血清アルブミン中にＯ〜Ｚｏｏ、０００ｍ１Ｕ／ｚ１の濃度 のＨＣＧを含有する標準化１１ｃＧサンプルを使用してこれらのベグを試験した 。

従来のウェットアッセイをシミュレートするための一連の対照として、１８０μ ｌのＨＣＣサンプルに５ｕ１のアルカリホスファターゼ複合体溶液を加えること により同一範囲のＩＩｃＧ溶液を使用して、スクロース層をもたない感作ペグを 試験した。

各アッセイでペグをサンプルに１５分間浸漬させ、水道水で洗浄し、ＢＣＩＰ中 で１５分間顕現させた。標準実験室反射測定装置を使用して、感作表面に得られ た青色着色の相対強度を調べた。典型的な結果を以下に示す。

１００　５．１０ １．０００　１１．３８ １０．０００　１４．５２ １００．０００　１３．０３ ２００．０００　１２．６７ Ｂ、　のウェットアッセイの １００　０．５０ １．０００　１０．７７ １０．０００　９．５４ １００．０００　３．５５ ２００．０００　２．６９ 以上の結果から明らかなように、本発明のアッセイでは高濃度（ＨＣにが１００ ，０００ｏＩＵ／ｉｆ以上）でも陽性の試験結果の指標である青色が強く維持さ れていた。

ウェットアッセイ対照の場合、このような高濃度では「フック効果」により誤解 を導く可能性のある低い色強度が生じ、実際に低いＨＣＧ濃度しか存在していな いかのように誤って解釈されかねない。

国際調査報告 国際調査報告 Ｃ己８ε０００３６

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．固相キャリア表面に固定された第１の特異的結合試薬と、液体サンプルに溶 解又は分散され且つアッセイの結果を決定することが可能な標識を支持する第２ の特異的結合試薬とで同時に液体サンプルがインキュベートされる、液体サンプ ル中の分析物の特異的結合アッセイであって、インキュベーションの前に、第２ の特異的結合試薬は、第１の特異的結合試薬が固定された固体キャリア表面に堆 積された固体材料層に含まれており、該固体材料が液体サンプルに易溶性又は易 分散性であることを特徴とするアッセイ。
2. ２．分析物の特異的結合試薬が表面に固定された固相装置であって、同一の分析 物の標識化特異的結合試薬が第１の特異的結合試薬が固定されている表面に堆積 された固体材料層に含まれており、該固体材料が分析物を含む疑いのある液体に 易溶注文は易分散性であることを特徴とする装置。
3. ３．分析物の特異的結合試薬が固定される固体表面を含んでおり且つ補助コンポ ーネント上には補助固体表面から所定のスペースを設けて除去可能に配置された 第１のコンポーネントを含んでおり、テストサンプルを提供するための液体に接 触又は浸漬するとサンプルの液体が第１の表面に接触し、装置が液体にそれ以上 接触又は浸漬しないように取り出された後には補助表面がサンプル液体を第１の 表面と接触させておくように機能する液体サンプリング装置であって、同一分析 物の標識化特異的結合試薬を含有する固体材料の層が第１の表面上に堆積されて おり、該固体材料がサンプル液体に易溶性又は易分散性であることを特徴とする 装置。
4. ４．第１のコンポーネントから補助コンポーネントを取り出すための手段、及び 固定化試薬との「サンドイッチ」反応で結合した標識化試薬が存在する場合に該 試薬を検出するための手段と共に、請求項３に記載の液体サンプリング装置を備 えるアッセイキット。
5. ５．サンプリング装置が、特異的結合試薬が固定され且つ標識化特異的結合試薬 を含む固体材料層がその上に堆積された表面を有するペグを含む操作部材を含ん でおり、ペグが補助表面を提供する除去可能なシュラウド内に配置されており、 シュラウドがペグからシュラウドを除去し易くするためにテストキットの第２の コンポーネントと相互締結が可能であり、該第２のコンポーネントは更に、シュ ラウドの除去後にペグが挿入され得且つ標識を顕現するための１種以上の試薬を 収容するウェルを含んでいることを特徴とする請求項４に記載のアッセイキット 。
6. ６．固体材料が水溶性文は水分散性であることを特徴とする請求項１から５のい ずれか一項に記載のアッセイ、固相装置、液体サンプリング装置又はアッセイキ ット。
7. ７．固体材料が糖、ゼラチン、膜形成ポリマー、澱粉及びデキストランから成る 群から選択されることを特徴とする請求項６に記載のアッセイ、固相装置、液体 サンプリング装置又はアッセイキット。
8. ８．固体材料がスクロースであることを特徴とする請求項７に記載のアッセイ、 固相装置、液体サンプリング装置又けアッセイキット。
9. ９．特異的結合試薬がイムノグロブリンであることを特徴とする請求項６、７及 び８のいずれか一項に記載のアッセイ、固相装置、液体サンプリング装置又はア ッセイキット。
10. １０．両方のイムノグロブリンが特異的である分析物がヒトコリオゴナドトロピ ン又は黄体形成ホルモンであることを特徴とする請求項９に記載のアッセイ、固 相装置、液体サンプリング装置又はアッセイキット。