JPH01311030A - 脈管形成阻止性コラーゲン代謝調節剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は脈管形成（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）を制御
する一般的な分野、即ち望ましくない脈管形成を阻止も
しくは治療する分野に関するものである。

〔従来の技術〕

多くの病気が脈管形成依存性であり、そこにおいてそれ
らは新しい毛細血管が形成される過程に関係している。

たとえば網膜における血管新生が失明につながるおそれ
のある糖尿病性網膜症、関節における血管新生が関節軟
骨を破壊するおそれのあるリウマチ性関節炎などのよう
に、制御されておらず、また猛烈な毛細血管の成長が、
広汎な組織損傷を引き起こすおそれがある。更に癌の増
殖成長は、血管新生の継続的な導入に依存している。

アドバンシズインキャンサーリサーチ（Ａｄｖａｎｃｅ
ｓ　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）　４３巻
、１７５〜２０３頁〔クラインアンドワインハウス（Ｋ
ｌｅｉｎ　ａｎｄ　Ｗｅｉｎｈｏｕｓｅ）編〕における
テユーマーアンジオゲネーシス（Ｔｕｍｏｒ　ａｎｇｉ
ｏｇｅｎｅｓｉｓ）においてフォークマン（Ｆｏｌｋｍ
ａｎ）は、脈管形成依存性の病気を制御する点で、治療
的に使用され得る脈管形成阻止剤を見出す努力について
、−船釣に考察している。

鶏の胚における毛細管の成長の後退、うさぎ角膜におけ
る癌誘導毛細管成長の停止、マウスにおける成る種の癌
の後退によって測定されているように、特にコーチゾン
（もしくはハイドロコーチゾン）およびヘパリン（もし
くはヘパリン断片）の混合物が血管形成を阻止する〔フ
ォークマン等。

サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）　２２１．７１９（１９
８３））　、この抗脈管形成活性はヘパリンの抗凝固活
性に依存しているわけでなく、またステロイド性のグル
ココルチコイドもしくはミネラルコルチコイド活性に依
存しているのでもない。クラム（Ｃｒｕｍ）およびフォ
ークマンのジャーナルオブセルバイオロジー（Ｊ、Ｃｅ
１ｌ　Ｂｉｏｌ、）　９９．１５８ａ、アブストラクト
＃　５８１（１９８４）およびクラム等、サイエンスて
狙：１３７５（１９８５）によれば同じ効果はいくつか
の天然および合成ステロイドでｗｔ奈され、それらは基
底膜破壊、内皮細胞の形態変化（ｒｏｕｎｄｉｎｇ）、
そして毛細管の縮小を誘導することによって作用してい
るようである〔イングバ−（Ｉｎｇｂｅｒ）等、エンド
クリノロジー（Ｅｎｄｏｃｌｉｎｏｌｏｇｙ）　１１９
．１７６８（１９８６））　。

細胞外の基質代謝の制御された変化は毛細血管の成長に
おける制御点であることを示唆している〔フォークマン
およびイングバー、アナリティ力ルサージェリー（Ａｎ
ａｌ、　Ｓｕｒｇ、）　２０６：３７４（１９８７）　
；イングバー等、インビトロセルディベロプメントオブ
バイオロジー２３：３８７（１９８７））　。

コラーゲンにおいてプロリンの代りにある種のプロリン
同族体を置換させると蛋白質の折りたたみがじゃまされ
、正常でないトリプルへリックスが形成される結果、間
質性コラーゲン類の分泌が損なわれ、細胞間コラーゲン
の分解の促進を引き起こすものである〔ジメネズ（Ｊｉ
ｍｅｎｅｚ）およびセンクロウスキイ（Ｙａｎｋｒｏｗ
ｓｋｉ）、ジャーナルオブバイオロジカルケミストリー
（Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｗ、）２５３：　１４２０
（１９７８）　；およびバーブ（Ｂｅｒｇ）等、プロシ
ーディングスオブザナショナルアカデミーオブサイエン
スユーエスエー（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔ’ｌ。

Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ）　７７：４７４６　（
１９８０））、正しくなく折りたたまれた基底膜コラー
ゲンが分泌されるかもしれないが、それは組織化された
細胞外の基質中に沈着されない〔マトリ（Ｍａｄｒｉ）
およびステン（５ｔｅｎｎ）、アメリカンジャーナルオ
ブパソロジー（Ａｍ、　Ｊ、　Ｐａｔｈｏｌ、　１０６
：１８０（１９８２）；マラゴウダキス（Ｍａｒａｇｏ
ｕｄａｋｉｓ）等、バイオケミカルバイオフィジカルア
クタ（Ｂｉｏｃｈｅ＋＋＋、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ａｃ
ｔａ）５３８：１３９（１９７８）；ワイチャ　（Ｗｉ
ｃｈａ）等、エクスペリメンタルセルラー　リサーチ（
Ｅｘｐ、　Ｃｅ１ｌ　Ｒｅｓ、）１２４：１８１（１９
７９）；ワイチャ等、ディベロプメントオブバイオロジ
ー（Ｄｅｖ、　Ｂｉｏｌ、）８０：２５３（１９８０）
）　。

試験管内では、内皮細胞の遊走はコラーゲン沈着をじゃ
まするために、プロリンを使用することによって抑制さ
れる〔マトリ等、同上〕。プロリン同族体で処理された
細胞は通常、細胞外基質中へのコラーゲンの沈着の阻止
を示すが、非コラーゲン性蛋白質の蓄積については顕著
な影響を及ぼさない〔ウィツト−（Ｕｉｔｔｏ）等、ア
ーキテクチュアルバイオケミストリーアンドバイオフィ
ジクス（Ａｒｃｈ、　Ｂｉｏｃｈｅｎ＋、　Ｂｉｏｐｈ
ｙｓ、）　１７３：１８７（１９７６））　：基底膜コ
ラーゲン沈着を阻害すると、７．１２−ジメチルベンズ
アンスラセンが誘導するラットの乳癌の成長は抑制され
た〔ワイチャ等、キャンサーレターズ（Ｃａｎｃｅｒ　
Ｌｅｔｔｅｒｓ）　１２：９（１９８１））。

プロリン同族体およびα、α′−ジピリジル（ＤＰＹ）
は角膜〔クーロムプル（Ｃｏｕｌｏｍｂｌｅ）およびク
ーロムプル、ディベロプメントオブバイオロジー、旦：
１８３（１９７２））　、軟骨〔アイデロッテ（Ａｙｄ
ｅｌｏｔｔｅ）およびコツホマー（Ｋｏｃｈｎ＋ｅｒ）
、ディベロプメントオブバイオロジー、旦：１９１（１
９７２））、甲状腺〔ハリス（Ｈａｒｒｉｓ）等、サイ
エンス２０８：１７７（１９８０））；唾液腺および肺
〔スプーナ−（Ｓｐｏｏｎｅｒ）およびフォーピオン（
Ｆａｕｂｉｏｎ）、ディベロプメントオブバイオロジー
、　７７：８４（１９８０））　、および乳腺（ワイチ
ャ等、ディベロプメントオブバイオロジー、　８０：２
５３（１９８０）、ベンゾ（Ｖｅｍｂｕ）等、エクスペ
リメンタルセルリサーチ、　１２４：２４７　（１９７
９）；キトウェル（Ｋｉｄｗｅｌｌ）等、プログレスイ
ンキャンサーリサーチアンドセラピー（Ｐｒｏｇｒｅｓ
ｓ　Ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　ａｎｄ　
Ｔｈｅｒａｐｙ）（ブレッシア二（Ｂｒｅｓｃｉａｎｉ
）等１ｉ１）３１巻、１２９頁、レーブンプレス、Ｎ、
Ｙ、、Ｎ、Ｙ、１９８４におけるグロウスアレストオブ
ママリーテユーモアズパイプロリンアナログズ（Ｇｒｏ
ｗｔｈ　Ａｒｒｅｓｔ　ｏｆ　Ｍａｍｍａｒｙ　Ｔｕｍ
ｏｒｓ　ＢｙＰｒｏｌｉｎｅ　Ａｎａｌｏｇｓ））を含
む多くの組織の形態発生をじゃまするのである。

〔本発明が解決すべき課題〕

上記のコラーゲンの代謝を調節する化合物の薬理学的な
用途を見出すことを課題とした。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者等はある種のコラーゲン基質代謝調節剤（Ｃｏ
ｌｌａｇｅｎ　ｍａｔｒｉｘ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓ＋ｗ
　ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ）が他の化合物の脈管形成阻止
活性をより高めることを見出した。

本発明は一般的にいって、有効量のコラーゲン基質調節
剤を脈管形成阻止性化合物と組合せて投与することによ
る唾乳動物における脈管形成を阻止するための方法およ
び組成物に特徴を有するものである。本発明において有
用なコラーゲン基質調節剤は、コラーゲンにおいてプロ
リンと置換されたとき、通常のプロリンハイドロキシル
化を阻止するプロリン同族体を包含する。有用な特定の
プロリン同族体は次のものを包含する。

ａ）Ｌ−アゼチジン−２−カルボン酸（ＬＡＣＡ）。

ｂ）ヒドロキシプロリン（ＣＨＰ）、 ｃ）３．４−デヒドロプロリンおよびｄ）チオプロリン
（ＴＰ）。

他の有用な調節剤としては、α、α′−ジピリジル（Ｄ
ＰＹ）のようなプロリルハイドロキシラーゼの阻害剤、
およびβ−アミノプロピオニトリル（ＢＡＰＮ）のよう
なコラーゲン架橋形成阻害剤を含む。ＥＣＭ（細胞外基
質：　ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ）の代
謝を変化することが知られている全トランス−レチノイ
ン酸もまた脈管形成阻止化合物に相乗効果を与えるもの
である。

上記のコラーゲン代謝調節剤によって効果の高められる
脈管形成阻止化合物としては、脈管形成阻止性ステロイ
ド、ヘパリン、ヘキササッカラードであるかそれより大
であるヘパリンオリゴサツカライド断片、および脈管形
成阻止性を有するヘパリン同族体を含む。

好ましい脈管形成阻止性ステロイドとしてはクラム等、
サイエンス２３０：１３７５（１９８５）およびイング
バー等、エンドクリノロジー月９：　１７６８（１９８
６）に記載されているようなものであり、コーチゾン、
エビコーチゾル、ハイドロコーチゾン、テトラハイドロ
コーチゾン５．１７α−ハイドロキシプロゲステロン、
コルテキソロン、コルテキソロン、デスオキシコルチコ
ステロン、ハイドロコーチゾール、６α−フルオロ−７
，２１−ジハイドロキシ−１６β−メチル−プレグナ−
４，９−（１１）−ジオン−３，２０−ジオン、１１　
α−ハイドロコーチゾン、１１−デスオキシコーチゾー
ルおよび４，９（１ハプレグナジエン−１７α、２１ジ
オール−３，２０ジオンを包含している。他の脈管形成
阻止性ステロイドは後出の第１表に挙げられている。

ヘパリン、すなわちα及びβグリコシド結合からなる高
度に硫酸化されたウロン酸とグルコサミンとの共重合体
は、抗凝固剤として臨床的に半世紀の間、使用されてき
た。ヘパリンの正確な構造まだ明らかにされていないが
、その理由の一部として、それが均質な物質でないとい
うことが挙げられる。ヘパリンは通常５，０００ないし
４０，０００の範囲の分子量を有する多分散物質（ｐｏ
ｌｙｄｉｓρｅｒｓｅ）である。またその連鎖の中にお
いても、硫酸化、Ｎ−アセチル化およびウロン酸残基に
おけるＣ−５エピマー化の度合などに多様な構造的な違
いがある。

結局、市販のヘパリンの正確な組成はその起源および精
製法により変ってくるものである。ヘパリンはヘパリナ
ーゼ（細菌起源の酵素、ランガー（Ｌａｎｇｅｒ）等、
米国特許筒４，３４１，８６９号）による処理によって
分解され、上記酵素はＮ−スルフェート−Ｄ−グルコサ
ミン　６−スルフェートとＬ−イズロンｍ　２−スルフ
ェートとの間のα−グリコシド結合においてその分子を
切断して、ジサッカライド、テトラサツカライド、ヘキ
ササッカラードおよびそれより大なるオリゴサツカライ
ドを含有する数種の断片を形成し、各々は単に末端基が
僅かに修飾された鎖の短くされたヘパリン断片である（
この分解は末端ウロン酸残基における不飽和のΔ−４，
５側に起こる）〔リンハート（Ｌｉｎｈａｒｄｔ）等、
ジャーナルオブバイオロジカルケミストリー（Ｊ、　Ｂ
ｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、）２５７巻、７３１０−１３（１
９８２））。

この発明は、脈管形成阻止効果を有するあらゆる形態の
ヘパリン、および全てのヘパリン断片の上記の脈管形成
阻止性組成物における使用を包含する。−船釣には、フ
ォークマン等、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）　２２１
．７１９−７２５（１９８３）を参照されたい。

我々は特に、ヘキササッカラードであるかそれよりも大
であるヘパリン断片を含むことを意図している。我々は
また次のような合成化合物が目的とする活性を有するこ
とを立証している。

本発明の他の特徴および利点については、以下に詳述す
る記載から明らかであろう。

好ましい組成物として、コラーゲン基質代謝調節剤およ
び脈管形成阻止性化合物（好ましくは脈管形成阻止性ス
テロイドもしくは脈管形成阻止性ヘバリンもしくはへバ
リン様断片、あるいはその両者であるが）が、処置され
る条件および投与経路に応じて生理学的に許容し得る担
体と共に調剤される。このコラーゲン基質代謝調節剤は
その存続期間に応じまた投与経路に応じて、約１００〜
２５０■／体重ｋｇ／日の濃度で投与される。

その強力な脈管形成阻止活性を基にして、上記の組成物
は眼科、皮膚科、小児科、外科および心臓科の分野にお
ける病気の予防および治療に有用である。

即ち、この組成物は糖尿病性網膜症、後水晶体線維増殖
症、角膜移植に伴う血管新生、血管新生性緑内障、眼の
腫瘍およびトラコーマ；乾瘤および化膿性肉腫；小児性
の血管腫、線維性血管腫および血友病者関節（ｈｅｍｏ
ｐｈｉｌｉａｃ　ｊｏｉｎｔｓ）　；および肥大性痘痕
、創傷肉芽および血管癒着、リウマチ性関節炎および業
皮病における血管新生の予防および治療に使用され得る
。

この好ましい組成物は錠剤、顆粒剤、カプセル剤、注射
液１局所用クリームおよび点眼薬の形態で、経口的にも
しくは非経口的に哺乳類（ラット、うさぎ、さる、ヒト
）に投与される。

糖尿病性網膜症を処置するために、例えばその組成物は
経口的にもしくは静脈内に、非毒性の薬剤学的に許容し
得る担体を有する薬剤学的組成物の形態で投与すること
ができる。

一方、この組成物は点眼薬の形態で、即ち患者の状態に
応じて日に約１〜４回の頻度で眼に滴下することができ
る。

経口投与については、この組成物は担体、希釈剤もしく
は賦形剤と共に錠剤もしくはカプセル剤として処方され
る。

点眼剤については、この組成物は蒸留水に溶解されるこ
とができ、この溶液は等張化剤、防腐剤もしくは増粘剤
を含有することができ、ｐＨ５から９の間に調整される
。

この治療組成物は又、徐放性ポリマーのような持続性放
出技術によって投与することができる。

例えば、この組成物はフォークマン等、米国特許第４，
３９１，７９７号、これについては参照用にここで挙げ
るが、の−船釣な技術によって製造されるエチレンビニ
ルアセテート共重合体ペレットに導入することができる
。このペレットは処置される組織に外科的に植えつけら
れることができる。

〔作用〕

コラーゲン基質代謝の調節剤を脈管形成阻止化合物と共
に投与することにより、哺乳類における脈管形成を阻止
でき、その結果脈管形成により進行する病気の治療およ
び予防が有効に行なわれる。

夫施五 細胞外のコラーゲン基質代謝の調節剤が、これまでに述
べてきた鶏胚漿尿膜（ＣＡＭ）を用いた分析系で毛細管
退行を誘導するその能力について試験された〔アラニル
バッハ（＾ｕｅｒｂａｃｈ）等ｒディベロプメントオブ
バイオロジー（［）ｅｖ、　Ｂｉｏｌ、）４１：３９１
（１９７４）；クラム（Ｃｒｕｍ）等、同上；イングバ
ー等（１９８６）、同上〕。この基質代謝調節剤は単独
、もしくは脈管形成阻止性ステロイドおよびヘパリンと
組み合せて投与された。−船釣に、メチルセルロース持
続性薬剤放出ポリマーが、６日令のＣＡＭの露出された
外胚葉表面上への試験物質の投与のために使用された。

外胚葉下血管床内における毛細管退行は培養４８時間（
８日と同等）以内で血管阻止域（＞４ｍ直径）を形成し
た。血管阻止域は双眼顕微鏡を用いて１０×倍率で記録
された（＋、４〜６ｎｎ直径；＋＋、６〜８ｍ直径；　
＋＋＋。

＞　８　ｍ　）。

シス−ヒドロキシプロリン（ＣＨＰ）、Ｌ−アゼチジン
−２−カルボン酸（ＬＡＣＡ）、およびり。

Ｌ−３，４デヒドロプロリン（ＤＨＰ）はカルビオケム
（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）社〔ラジョラ（Ｌａ　Ｊｏｌ
ｌａ）社。

カリフォルニア〕から得られた。チオプロリン（ＴＰ）
はアルドリッチ（Ａｌｄｒｉｃｈ）社〔ミルウォーキ（
Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、ＷＩ）から得られた。α、α′　
−ジピリジル（ＤＰＹ）、β〜ルアミノプロピオニトリ
ルフマレートＢ　Ａ　Ｐ　Ｎ）および全トランス−レチ
ノイン酸はシグマ（Ｓｉｇ＋＊ａ）社（セントルイス（
Ｓｔ、　Ｌｏｕｉｓ、Ｍｏ））から購入された。ヘパリ
ンはへパールインコーポレーション（Ｈｅｐａｒ　Ｉｎ
ｃ、ｅフランクリン（Ｆｒａｎｋｌｉｎ、０Ｈ））から
得られた。

プロリン同族体、ＣＨＰの６日令鶏胚ＣＡＭへの投与に
おいて、８日における血管阻止域を示すＣＡＭのパーセ
ンテージにより測定したところ、投与量に依存する血管
新生の阻止という結果が得られた。一般に、ヘパリンお
よび脈管形成阻止性ステロイドは、これらの研究に用い
られる時には、それぞれ５０βｇおよび７０βｇで適用
された。ＣＨＰは６００μｇおよびそれ以上の投与量で
１００％のＣＡＭにおいて血管阻止域を誘導した。これ
らの阻止域のサイズ（４〜６ｍ直径）および外観は、脈
管形成阻止性ステロイドとヘパリンの組合せで誘導され
たものと同様であった。他のプロリン同族体（ＬＡＣＡ
、ＤＨＰ、およびＴＰ）がＣＡＭ上で試験され、そして
同様の抗脈管形成活性を示すことが見出された。プロリ
ン同族体、ＤＨＰ、はプロリルハイドロキシラーゼ活性
を阻止することによってコラーゲンの沈着を変えること
ができる。

プロリルおよびリシルハイドロキシラーゼ酵素の阻止に
より、コラーゲン沈着を阻止する。ＤＰＹを用いても、
同様に血管阻止域が形成された。

最適以下の投与量での使用の際には、プロリン同族体は
脈管形成阻止性ステロイドおよび／またはヘパリンの抗
脈管形成効果を非常に強めるものであった。先に述べた
ように、脈管形成阻止性ステロイド（例えば６α−フル
オロ−１７，２１−ジヒドロキシ−１６β−メチルプレ
グナ−４，９−（１１）−ジエンー３．２０−ジオン）
とヘパリンとの組合せは、約４０％のＣＡＭにおいて血
管阻止域（４〜６ｍｍ直径）を形成したが、各化合物を
単独で投与したときにはほとんど効果はなかった。

最大値の半分の濃度のＬＡＣＡ（２００μｇ）をステロ
イドもしくはヘパリンと共に共投与すると、抗脈管形成
活性を強める結果となった。ステロイド−ヘパリンの組
合せにＬＡＣＡ（２００μｇ）を添加すると、９０％以
上のＣＡＭにおいて脈管形成阻止域を形成した６阻止領
域はまたステロイド−ヘパリンの組合せのみの場合に観
られるよりも直径が太きく　（＞６ｎｗｎ）　、この領
域の外側の範囲においてさえも毛細管密度が急激に低下
していることが示された。ヘパリンおよびステロイドを
より高濃度のＬＡＣＡもしくはＣＨＰ　（＞２００μｇ
）と組合せると、１００％のＣＡＭにおいて脈管形成阻
止域を誘導した。

これらの薬剤の組合せの抗腫管形成効果は、８日令以内
のＣＡＭにおいて、コラーゲンの蓄積の阻止と直接関連
していることがアミノ酸分析により推定された。この一
連の実験において、コラーゲンの蓄積が最大に阻止され
たのは、ＬＡＣＡ（２００μｇ）、ヘパリン（５０μｇ
）、およびステロイド（７０μｇ）の組合せのときであ
った。

これと同量のＬＡＣＡがまた、それを単独もしくはステ
ロイドとの組合せで投与されたとき、コラーゲンの沈着
を阻止することができた。

Ｌ−プロリンはプロリン同族体の効果を阻害することが
見出され、抗腫管形成効果はプロリン代謝の特定の混乱
に起因することが確認された。

ＢＡＰＮが、ＥＣＭの構造上の完全さの変化が該抗腫管
形成効果に関係しているかどうかを直接試験するために
、ＢＡＰＮがＣＡＭ系で試験された。ＢＡＰＮはアルデ
ヒド形成をさまたげ、またリシルオキシダーゼ酵素を阻
害することによってコラーゲンの架橋形成を阻害するも
のである。非架橋コラーゲンの増加がコラーゲン性の基
質の引張り強度を減少させるものである。ＢＡＰＮは単
独で投与されたとき脈管形成を阻止し、これはプロリン
同族体の多くと同様に強力であった。更に、脈管形成阻
止性ステロイドおよびステロイド−ヘパリンの組合せの
両者の抗腫管形成効果は、それ単独で投与されたときに
は不活性であるような低濃度のＢＡＰＮ（２００μｇ）
によって非常に活性が高められた。

全トランス−レチノイン酸（シグマ社製）がそれ単独で
試験されたとき、１μｇで１００％のＣＡＭにおいて脈
管形成を阻止することが見出された。

しかしながら、この化合物は毒性があり、より高い投与
量では胚が死ぬこととなった。再び、最適量以下の投与
量のレチノイン酸が、プロリン同族体を含む組合せと同
様に脈管形成阻止性ステロイドおよびヘパリンの活性を
強めた。

これらの研究において観られる最も効果のある抗腫管形
成性配合は、（ｉ）脈管形成阻止性ステロイド（７０μ
ｇ）、ヘパリン（５０μｇ）、およびＬＡＣＡ　（４０
０μｇ）もしくは、　（ｉｉ）脈管形成阻止性ステロイ
ド（７０μｇ）、ＬＡＣＡ（４００μｇ）、および全ト
ランス−レチノインａ（１μｇ）のいずれかであった。

後者の組合せはヘパリンを必要としない。これらの抗腫
管形成性組合せを含有するメチルセルロースポリマーを
６日令のＣＡＭに適用すると、２４時間以内に脈管形成
阻止域の形成を始めた。１００％のＣＡＭが、直径１（
！１１を越える範囲を覆うまで広がった脈管形成阻止領
域を示した。脈管形成阻止効果は更に７２時間持続され
た。脈管形成阻止領域が薬剤を再投与せずに長い間培養
液中に保持すると通常は再脈管形成が生じるので、この
阻止は可逆性であった。

本発明者等はコラーゲンの蓄積の阻害が、成長している
鶏胚のＣＡＭにおける毛細管の退行を十分誘導するもの
であることを示した。プロリン同族体、ＣＨＰおよびＬ
ＡＣＡのようなコラーゲン沈着の特異的阻止剤は、単独
で投与されたとき高度に抗腫管形成性であった。最適投
与量以下では、それらは脈管形成阻止性ステロイドの強
力な阻止増強剤であった。更に、検討された全ての薬剤
の組合せの抗腫管形成力は、コラーゲン蓄積を阻止する
それらの能力と直接関係していた。毛細管の退縮がＤＰ
Ｙによって同様に生じるが、このものはプロリルおよび
リシルハイドロキシラーゼを阻害することによってコラ
ーゲン合成を邪魔するものである。

プロリン同族体それ自体は、生体に高濃度で投与された
とき非特異的な効果（例えば、−船釣な蛋白質合成阻害
に次ぐもの）を持つ可能性があるので、好ましい化学療
法剤ではない。同様に、レチノイン酸は、高投与量にお
けるその全身的な毒性の故に制限される。特許請求の範
囲で請求されている組成物における脈管形成阻止性ステ
ロイドの重要性は次のようなものである：１）それらが
たとえ全身的毒性を有していても、それは僅かなもので
ある、２）他の基質調節剤の最適投与量以下（非毒性）
によって効力を高められていること、および３）それら
は明らかに一般的なＥＣＭ調節剤の作用に焦点をしぼる
ことができるので、その効果は成長している毛細管にの
み制限される。

持続する血管形成に依存している病気（例えば固形癌）
の治療においては、毛細管の病的成長を選択的に阻止す
るために、脈管形成阻止性ステロイドは最適投与量以下
の基質調節剤と組合せることができる。脈管形成阻止性
ステロイドをコラーゲン沈着の阻害剤と共に投与するこ
とによって、癌の血管形成に対する阻止効果を増大させ
、またこれに集中させるものである。ヘパリンを有さな
いステロイド−基質調節剤の組合せは局所的にもしくは
参考のために挙げるがフォークマン等の米国特許筒４，
１６４，５６０号に記載されたもののような持続性薬剤
−放出ポリマー系との結合において投与することができ
る。

他の態様は特許請求の範囲内にあるものである。

例えば、いずれのコラーゲン″基質代謝調節剤も、上記
の脈管形成阻止性ステロイドもしくはヘパリン断片もし
くはヘパリン同族体のいずれとも組合せることができる
。

第１表 脈管形成阻止性ステロイド １７α、２１−ジヒドロキシ−４−プレグネン−３，１
１，２０−トリオンおよびその２１−アセテート（もし
くはコーチゾン）、 １１α、１７．２１−トリヒドロキシ−プレグ−４−ネ
ンー３゜２０−ジオン（もしくは１１α−ハイドロコー
チゾン）、１１β、１７α、２１−トリヒドロキシ−プ
レグ−４−ホン−３，２０−ジオン（もしくはハイドロ
コーチゾン）。

１７α、２１−ジヒドロキシプレグナ−４，９（１１）
−ジエン−３，２０−ジオン、 １５α、１７α、２１−トリヒドロキシ−４−プレグネ
ン−３゜２０−ジオン。

１６α、１７α、２１−トリヒドロキシ−６α−メチル
プレグ−４−ネンー３，２０〜ジオンー２１−アセテー
ト−１６，１７サイクリツクのアセトンケタール。

６α−フルオロ−１７α、２１−ジヒドロキシ−１６β
−メチル−プレグナ−４，９（１１）−ジエン−３，２
０−ジオン、６α−フルオロ−１７α、２１−ジヒドロ
キシ−１６β−メチル−プレグナ−４，９（１１）−ジ
エン−３，２０−ジオン−１７，２１−ジアセテート、 ６β、１７α、２１−トリヒドロキシ−プレグ−４−ネ
ンー３゜２０−ジオン、 １７α、２１−ジヒドロキシ−プレグ−４−ホン−３，
２０−ジオンー２１−アセテート、 １７α、２１−ジヒドロキシ−プレグ−４−ホン−３，
２０−ジオン。

９β、１１β−エポキシ−１７α、２１−ジヒドロキシ
−２α−メチルプレグー４−ホン−３，２０−ジオンー
２１−アセテート、 １７α、２１−ジヒドロキシ−１６α−メチルプレグ−
４−ホン−３，２０−ジオン、 ９α、１１β−ジクロロ−１７α、２１−ジヒドロキシ
プレグ−４−ホン−３，２０−ジオンー２１−アセテー
ト。

１７α、２１−ジヒドロキシ−６α、１６α−ジメチル
プレグ−４−ホン−３，２０−ジオンー２１−アセテー
ト、１７α、２１−ジヒドロキシ−１６α−メチルプレ
グナ−４゜９（１１）−ジエン−３，２０−ジオン−２
１−アセテート、１７α、２１−ジヒドロキシ−１６β
−メチルプレグナ−４゜９（１１）−ジエン−３，２０
−ジオン−２１−ベンゾエート、１７α、２１−ジヒド
ロキシ−６β−メチルプレグナ−４，９（１１）−ジエ
ン−３，２０−ジオン−２１−アセテート、６α−フル
オロ−１７α、２１−ジヒドロキシ−Ｉ６β−メチル−
プレグナ−４，９（１１）−ジエン−３，２０−ジオン
−１７−アセテート−２１−ベンゾエート。

１７α、２１−ジヒドロキシ−１６β−メチルプレグナ
−１゜４、９（１１）−トリエン−３，２０−ジオン−
１７−サクジネートソジウムモノハイドレート、 ９α−フルオロ−１１β、１６α、１７α、２１−テト
ラヒドロキシプレグ−４−ホン−３，２０−ジオン−１
６，２１−ジアセテート、 １７α、２１−ジヒドロキシ−１６α−メチルプレグナ
−１゜４、９（１１）−トリエン−３，２０−ジオン−
２１−サクシネートソジウムモノハイドレート、 ６α−フルオロ−１７α、２１−ジヒドロキシ−１６β
−メチル−プレグナ−１，４，９（１１）−トリエン−
３，２０−ジオン−２】−サクシネートソジウム。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）有効量のコラーゲン基質代謝調節剤を脈管形成阻
   止性化合物と共に投与することからなる哺乳類における
   脈管形成を阻止するための方法であって、コラーゲン基
   質調節剤が次のものから構成される群から選ばれるもの
   であるもの： ａ）コラーゲンにおいてプロリンと置換されたときプロ
   リン水酸化を阻害するプロリン同族体、 ｂ）プロリンハイドロキシラーゼの阻害剤、 ｃ）コラーゲン架橋形成の阻害剤、および ｄ）全トランス−レチノイン酸。 （２）コラーゲン基質代謝調節剤が ａ）プロリンハイドロキシラーゼの阻害剤、 ｂ）コラーゲン架橋形成の阻害剤、 および ｃ）全トランス−レチノイン酸からなる群から選ばれる
   ものである請求項１記載の方法。（３）プロリン同族体
   が、 ａ）Ｌ−アゼチジン−２−カルボン酸、 ｂ）シス−ヒドロキシプロリン、 ｃ）３，４−デヒドロプロリンおよび ｄ）チオプロリンからなる群から選ばれるものである、
   請求項１記載の方法。 （４）プロリン同族体が、 ａ）シス−ヒドロキシプロリン、 ｂ）３，４−デヒドロプロリンおよび ｃ）チオプロリンからなる群から選ばれるものである、
   請求項１記載の方法。 （５）プロリンハイドロキシラーゼの阻害剤がα，α′
   −ジピリジルである請求項１記載の方法。 （６）コラーゲン架橋形成の阻害剤がβ−アミノプロピ
   オニトリルである請求項１記載の方法。 （７）コラーゲン基質代謝調節剤が脈管形成阻止性ステ
   ロイドと共に投与される、請求項１、２、３、４、５ま
   たは６記載の方法。 （８）脈管形成阻止性ステロイドが、コーチゾン、エピ
   コーチゾール、ハイドロコーチゾン、テトラハイドロコ
   ーチゾンＳ、１７α−ハイドロキシプロゲステロン、コ
   ルテキソロン、コルチコステロン、デスオキシコルチコ
   ステロン、ハイドロコーチゾール、６α−フルオロ−７
   ，２１−ジハイドロキシ−１６β−メチル−プレグナ−
   ４，９−（１１）−ジオン−３，２０−ジオン、１１α
   −ハイドロコーチゾン、１１−デスオキシコーチゾール
   および４，９（１１）プレグナジエン−１７α，２１ジ
   オール−３，２０ジオンからなる群から選ばれるもので
   ある請求項７記載の方法。 （９）コラーゲン基質代謝調節剤が、ヘパリン、ヘキサ
   サッカラードであるかもしくはそれより大きな脈管形成
   阻止性ヘパリン断片、またはヘパリンもしくはヘパリン
   断片の脈管形成阻止性合成同族体と共に投与される請求
   項１、２、３、４、５または６記載の方法。（１０）コ
   ラーゲン基質代謝調節剤および脈管形成阻止性化合物が
   、これらを含有する徐放性担体として投与されるもので
   ある請求項１記載の方法。 （１１）薬剤学的に許容し得る担体、コラーゲン基質代
   謝調節剤および脈管形成阻止性化合物の混合物を包含す
   る治療組成物であって、コラーゲン基質調節剤が次のも
   のから構成される群から選ばれるものであるもの： ａ）コラーゲンにおいてプロリンと置換されたときプロ
   リン水酸化を阻止するプロリン同族体、 ｂ）プロリンハイドロキシラーゼの阻害剤、 ｃ）コラーゲン架橋形成の阻害剤、および ｄ）全トランス−レチノイン酸。 （１２）プロリン同族体が、 ａ）Ｌ−アゼチジン−２−カルボン酸、 ｂ）シス−ヒドロキシプロリン、 ｃ）３，４−デヒドロプロリンおよび ｄ）チオプロリンからなる群から選ばれるものである、 請求項１１記載の治療組成物。 （１３）プロリンハイドロキシラ−ゼの阻害剤がα，α
   ′−ジピリジルである請求項１１記載の治療組成物。 （１４）コラーゲン架橋形成の阻害剤がβ−アミノプロ
   ピオニトリルである請求項１１記載の治療組成物。 （１５）組成物が脈管形成阻止性ステロイドを含有する
   、請求項１１ないし１４記載のいずれかの治療組成物。 （１６）脈管形成阻止性ステロイドが、コーチゾン、エ
   ピコーチゾール、ハイドロコーチゾン、テトラハイドロ
   コーチゾンＳ、１７α−ハイドロキシプロゲステロン、
   コルテキソロン、コルチコステロン、デスオキシコルチ
   コステロン、ハイドロコーチゾール、６α−フルオロ−
   ７，２１−ジハイドロキシ−１６β−メチル−プレグナ
   −４，９−（１１）−ジオン−３，２０−ジオン、１１
   α−ハイドロコーチゾン、１１−デスオキシコーチゾー
   ルおよび４，９（１ハプレグナジエン−１７α，２１ジ
   オール−３，２０ジオンからなる群から選ばれるもので
   ある請求項１５記載の治療組成物。 （１７）組成物が、ヘパリン、ヘキササッカラードであ
   るかもしくはそれより大きな脈管形成阻止性ヘパリン断
   片、もしくはヘバリンもしくはへバリン断片の脈管形成
   阻止性合成同族体を含有する請求項１１ないし１４記載
   のいずれかの治療組成物。 （１８）請求項１１記載の治療組成物を含有する徐放体
   。